Milano fick vid sju års ålder en roll i musikalenAnnie påBroadway. Under åtta år, 1984–1992, spelade honSamantha Micelli i serienVem är chefen? somTony Danzas dotter. Serien var hennes stora TV-debut. Samtidigt fick hon en liten roll i filmenCommando somArnold Schwarzeneggers dotter 1985. För att hon skulle få behålla rollen iVem är chefen?, fick familjen flytta tillHollywood.
Efter detta medverkade Milano i TV-filmenCasualties of Love: The Long Island Lolita Story (1993), baserad på verklighet omAmy Fisher ochJoey Buttafuoco. Milano började 1996 spela iTo Brave Alaska, en TV-film om ett par som kämpade hårt för sina liv i Alaska. 1997 fick hon rollen som Jennifer Mancini iAaron SpellingsMelrose Place.
1998 utvaldes hon för att spela en roll som den yngsta av de tre häxorna iFörhäxad (senare mellansystern).
Alyssa Milano har även medverkat i TV-serienMy Name Is Earl. 2013 spelade hon Savi iMistresses, som i Sverige visas på TV 3.
Milano är aktiv djurrättsförespråkare via organisationenPETA.[1]
Den 15 oktober 2017 skickade Milano den tweet som blev startskottet för den världsomspännandemetoo rörelsen, som en reaktion på att Hollywoodproducenten Harvey Weinstein anklagats för våldtäkt.[2]
Milano släppte fem album i Japan, med titlar som "Alyssa", "Look In My Heart" (båda 1989), "Best In The World" (1990), "Locked In a Dream" (1991) och "Do You See Me?" (1992). Nästan alla har sålt platina i Japan. Hon gör också TV-reklam för bland annat 1-800-Collection och Candies parfym.
Hon var förlovad medEnsamma hemma-stjärnanScott Wolf 1993, men paret brötförlovningen 1994 och gick skilda vägar. Den 1 januari 1999 gifte hon sig med Cinjun Augustus Tate, som är sångare i rockgruppen "Remy Zero". De skilde sig dock i början av 2000. I augusti 2009 gifte sig Milano med David Bugliari. Paret har två barn.
I augusti 2020 meddelade hon att hon hade smittats avCovid-19.[3]