Movatterモバイル変換

[0]ホーム
URL:

Пређи на садржај
Википедија
Претрага

Ciljanje gena

С Википедије, слободне енциклопедије
Himerni miš sa modifikovanim genom boje krzna i njegovi potomci

Ciljanje gena jegenetička tehnika koja se koristihomolognu rekombinaciju za promenuendogenoggena. Ovaj metod se može koristiti za brisanje gena, uklanjanjeeksona, dodavanje gena, i uvođenje mesta mutacija. Ciljanje gene može da bude trajno ili uslovno. Uslovi mogu da budu specifično vreme tokomrazvoja / života organizma ili ograničenje na specifičnatkiva. Ciljanje gena zahteva kreiranje specifičnihvektora za svaki željeni gen. Metod se može koristiti za svaki gen, nezavisno od transkripcione aktivnosti ili veličine gena.

Metodi

[уреди |уреди извор]
Divlji-tipPhyscomitrella inokaut mahovine. Devijacijefenotipa su indukovane promenama gena.[1]

Metodi ciljanja gena su razvijeni za nekolikomodel organizama i mogu da variraju u zavisnosti od korišćenevrste. Generalno se ciljna konstrukcija formira odDNK generisane ubakterijama. Ona tipično sadrži deo ciljnog gena,reporter gen, i (dominantni) selektivni marker.

Da bi se menjali genimiša, ova konstrukcija se zatim umetne uembrionske matične ćelije u kulturi. Nakon selekcije ćelija sa korektnim umetanjem, one se mogu koristiti unutar tkiva miša putem embrionske injekcije. Konačno,himerni miševi gde su modifikovane ćelije formirale reproduktivne organe se biraju procesomuzgoja. Nakon tog koraka celokupno telo miša je bazirano na izabranim embrionskim matičnim ćelijama.

Kodmahovine, ova konstrukcija se inkubira zajedno sa sveže izolovanimprotoplastima ipolietilen glikolom. Mahovine suhaploidni organizmi,[2] te se regeneracija filamentata mahovine (protonema) može direktno testirati za prisustvo genskih promena, bilo tretmanomantibioticima ili primenomPCR-a. Pošto su mahovine jedinstvene međubiljkama, ova procedura zareverznu genetiku je jednako efikasna kao i kodkvasaca.[3] Upotrebom prilagođenih procedura, ciljanje gene je uspešno primenjeno i kod goveda, ovci, svinja, i mnogih gljiva.

Frekvencija ciljanja gena se može znatno poboljšati upotrebom dizajniranihendonukleaza kao što sunukleaza cinkovog prsta,[4] dizajniranihhoming endonukleaza,[5] i nukleaza baziranih na dizajniranimTAL efektorima.[6] Ovaj metod je primenjen na brojne vrste među kojima suDrosophila melanogaster,[4]duvan,[7][8]kukuruz,[9]ljudske ćelije,[10]miševi,[11] ipacovi.[11]

Reference

[уреди |уреди извор]
  1. ^Egener, T.; Granado, J.; Guitton, M. C.; Hohe, A.; Holtorf, H.; Lucht, J. M.; Rensing, S. A.; Schlink, K.; et al. (2002).„High frequency of phenotypic deviations in Physcomitrella patens plants transformed with a gene-disruption library.”.BMC Plant Biology.2: 6.PMC 117800 Слободан приступ.PMID 12123528.doi:10.1186/1471-2229-2-6. 
  2. ^Ralf Reski (1998): Development, genetics and molecular biology of mosses. Botanica Acta 111, 1-15.
  3. ^Ralf Reski (1998): Physcomitrella and Arabidopsis: the David and Goliath of reverse genetics. Trends Plant in Science 3, 209-210.[1]Архивирано 2012-09-10 на сајтуArchive.today
  4. ^абBibikova, M.; Beumer, K.; Trautman, J.; Carroll, D. (2003). „Enhancing Gene Targeting with Designed Zinc Finger Nucleases”.Science.300 (5620): 764.PMID 12730594.doi:10.1126/science.1079512. 
  5. ^Grizot, S.; Smith, J.; Daboussi, F.; Prieto, J.; Redondo, P.; Merino, N.; Villate, M.; Thomas, S.; et al. (2009).„Efficient targeting of a SCID gene by an engineered single-chain homing endonuclease”.Nucleic Acids Research.37 (16): 5405.PMC 2760784 Слободан приступ.PMID 19584299.doi:10.1093/nar/gkp548. 
  6. ^Miller, J. C.; Tan, S.; Qiao, G.; Barlow, K. A.; Wang, J.; Xia, D. F.; Meng, X.; Paschon, D. E.; et al. (2010). „A TALE nuclease architecture for efficient genome editing”.Nature Biotechnology.29 (2): 143.PMID 21179091.doi:10.1038/nbt.1755. CS1 одржавање: Експлицитна употреба et al. (веза)CS1 одржавање: Вишеструка имена: списак аутора (веза)
  7. ^Cai, C. Q.; Doyon, Y.; Ainley, W. M.; Miller, J. C.; Dekelver, R. C.; Moehle, E. A.; Rock, J. M.; Lee, Y. L.; et al. (2008). „Targeted transgene integration in plant cells using designed zinc finger nucleases”.Plant Molecular Biology.69 (6): 699—709.PMID 19112554.doi:10.1007/s11103-008-9449-7. ISBN 1110300894497. CS1 одржавање: Експлицитна употреба et al. (веза)CS1 одржавање: Вишеструка имена: списак аутора (веза)
  8. ^Townsend, J. A.; Wright, D. A.; Winfrey, R. J.; Fu, F.; Maeder, M. L.; Joung, J. K.; Voytas, D. F. (2009).„High-frequency modification of plant genes using engineered zinc-finger nucleases”.Nature.459 (7245): 442—445.Bibcode:2009Natur.459..442T.PMC 2743854 Слободан приступ.PMID 19404258.doi:10.1038/nature07845. 
  9. ^Shukla, V. K.; Doyon, Y.; Miller, J. C.; Dekelver, R. C.; Moehle, E. A.; Worden, S. E.; Mitchell, J. C.; Arnold, N. L.; et al. (2009). „Precise genome modification in the crop species Zea mays using zinc-finger nucleases”.Nature.459 (7245): 437—41.Bibcode:2009Natur.459..437S.PMID 19404259.doi:10.1038/nature07992. CS1 одржавање: Експлицитна употреба et al. (веза)CS1 одржавање: Вишеструка имена: списак аутора (веза)
  10. ^Urnov, F. D.; Miller, J. C.; Lee, Y. L.; Beausejour, C. M.; Rock, J. M.; Augustus, S.; Jamieson, A. C.; Porteus, M. H.; et al. (2005). „Highly efficient endogenous human gene correction using designed zinc-finger nucleases”.Nature.435 (7042): 646—651.Bibcode:2005Natur.435..646U.PMID 15806097.doi:10.1038/nature03556. CS1 одржавање: Експлицитна употреба et al. (веза)CS1 одржавање: Вишеструка имена: списак аутора (веза)
  11. ^абCui, X.; Ji, D.; Fisher, D. A.; Wu, Y.; Briner, D. M.; Weinstein, E. J. (2010). „Targeted integration in rat and mouse embryos with zinc-finger nucleases”.Nature Biotechnology.29 (1): 64.PMID 21151125.doi:10.1038/nbt.1731. 

Spoljašnje veze

[уреди |уреди извор]
Нормативна контролаУреди на Википодацима
Преузето из „https://sr.wikipedia.org/w/index.php?title=Ciljanje_gena&oldid=27884500”
Категорије:
Сакривене категорије:
[8]ページ先頭
©2009-2025 Movatter.jp