Movatterモバイル変換


[0]ホーム

URL:


Prijeđi na sadržaj
Wikipedija
Pretraga

Klenov fragment

Izvor: Wikipedija
Funkcionalni domeni u Klenovom fragmentu (levo) i DNK polimerazi I (PDB).

Klenov fragment je velikiproteinski fragment koji se formira kada seDNK polimeraza I izE. colienzimatski preseče posredstvomproteazesubtilisina. Prvobitno je opisan 1970.[1] On zadržava 5'-3'polimeraznu aktivnosti i 3’ → 5’egzonukleaznu aktivnost za odvajanje prekodirajućih nukleotida i korekturu, ali gubi svoju 5' → 3' eksonukleaznu aktivnost.

Drugi manji fragment formiran kad se DNK polimeraza I izE. coli preseče subtilisinom zadržava 5'-3' eksonukleaznu aktivnost, ali nema druga dva dejstva koje manifestuje Klenov fragment (i.e. 5'-> 3' polimerazna aktivnost i 3'->5' eksonukleazna aktivnost).

Istraživanja

[uredi |uredi kod]

5' → 3' egzonukleazno dejstvo DNK polimeraze I izE. coli nije podesno za mnoge oblike primene, te stoga Klenov fragment, koji ne ispoljava tu aktivnost, može da bude veoma koristan u istraživanjima. Klenov fragment je ekstremno koristan u istraživačkim procesima kao što su:

  • Sinteza dvolančane DNK iz jednolačanog obrasca
  • Popunjavanje pobučenog 3' kraja DNK fragmenata da bi se dobili tupi 5' krajevi
  • Uklanjanje isturenih 3' prepusta
  • Pripremaradioaktivnih DNK segmenata

Klenov fragment je isto tako bio originalni enzim koji se koristio za znatnu amplifikaciju segmenata DNK u procesupolimerazne lančane reakcije (PCR),[2] pre nego što je bio zamenjen termostablnim enzimima kao što jeTaq polimeraza.[3]

Reference

[uredi |uredi kod]
  1. Klenow H and Henningsen I (1970). „Selective Elimination of the Exonuclease Activity of the Deoxyribonucleic Acid Polymerase from Escherichia coli B by Limited Proteolysis”. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 65 (1): 168–175. DOI:10.1073/pnas.65.1.168. PMC 286206. PMID 4905667. 
  2. Saiki RK et al. (1985). „Enzymatic Amplification of β-globin Genomic Sequences and Restriction Site Analysis for Diagnosis of Sickle Cell Anemia”. Science 230: 1350–54. DOI:10.1126/science.2999980. PMID 2999980. 
  3. Saiki et al. (1988). „Primer-directed enzymatic amplification of DNA with a thermostable DNA polymerase”. Science 239: 487–91. DOI:10.1126/science.2448875. PMID 2448875. 

Vanjske veze

[uredi |uredi kod]
Separacija
i inicijacija
Prokariotska
(inicijacija)
Eukariotska
(priprema u
G1 fazi
)
Oba
Replikacija
Prokariotska
(elongacija)
Eukariotska
(sinteza u
S fazi
)
Oba
Terminacija
Izvor:https://sh.wikipedia.org/w/index.php?title=Klenov_fragment&oldid=41464403
Kategorija:
Sakrivena kategorija:

[8]ページ先頭

©2009-2025 Movatter.jp