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EcoRI

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EcoRI
EcoRI
Estrutura cristalográfica daendonuclease EcoRI
Indicadores
PfamPF02963
InterProIPR004221
SCOP1na6

EcoRI (pronunciado "eco érre um") é umaenzima isolada a partir decepas deEscherichia coli e faz parte dosistema de restrição-modificação.

Embiologia molecular é utilizada como umaenzima de restrição. Ela cria extremidades coesivas com saliências na extremidade 5' de moléculas de DNA. A sequência deácido nucleico em que ocorrem os cortes é GAATTC, que tem como sequência complementar CTTAAG.[1][2]

A enzima de restriçãoEcoRI reconhece o sítio indicado e o corte padrão é destacado com a linha verde.

Esta enzima é utilizada em uma grande variedade de técnicas de genética molecular, incluindo aclonagem, triagem de DNA e supressão de segmentos de DNAin vitro. As enzimas de restrição como a EcoRI, que geram extremidades coesivas de DNA são muitas vezes utilizadas para cortar o DNA antes da reação deligação. EcoRI pode exibir corte não-específico, dependendo das condições presentes na reação. Estas condições incluem baixa concentração de sal, concentração de glicerol elevada, quantidade excessiva de enzima presente na reação, pH elevado e contaminação por certos solventes orgânicos.[3]

Referências

  1. Pingoud, A., Jeltsch, A. (2001).«Structure and function of type II restriction endonucleases».Nucl. Acids Res.29 (18): 3705–3727.PMC 55916Acessível livremente.PMID 11557805.doi:10.1093/nar/29.18.3705  !CS1 manut: Nomes múltiplos: lista de autores (link)
  2. Kurpiewski, M. R., Engler, L. E., Wozniak, L. A., Kobylanska, A., Koziolkiewicz, M., Stec, W. J, Jen-Jacobson, L (2004). «Mechanisms of coupling between DNA recognition and catalysis in EcoRI endonucleases».Structure.12: 1775–1788.PMID 15458627.doi:10.1016/j.str.2004.07.016  !CS1 manut: Nomes múltiplos: lista de autores (link)
  3. «Cópia arquivada». Consultado em 8 de outubro de 2012. Arquivado dooriginal em 15 de outubro de 2012 
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