Šafářová w dotychczasowej karierze wygrała siedem turniejów gry pojedynczej i piętnaście gry podwójnej z cykluWTA. Stała się znaną tenisistką po tym, jak w 2007 roku dwukrotnie wyeliminowała FrancuzkęAmélie Mauresmo z turniejówwielkoszlemowych, między innymi wMelbourne, odbierając Mauresmo możliwość obrony tytułu. Kilkanaście dni po tym zwycięstwie pokonałaJustine Henin w półfinale halowej imprezy wParyżu i została jedną z czterech tenisistek, które ograły Belgijkę w tym sezonie.
Šafářová rozpoczęła treningi tenisowe już w wieku trzech lat. Pod okiem Jaroslava Bulanta osiągała sukcesy w rozgrywkach juniorskich. 14 października 2002 roku była ósmą juniorką świata w rankingu gry pojedynczej. W tym samym roku otrzymała status profesjonalny. W turniejach kobiecych mniejszej rangi (ITF) triumfowała pięciokrotnie. Po raz pierwszy miało to miejsce w 2004 roku wBergamo, a po raz ostatni w 2005 wProstějovie.
W tym samym sezonie po raz pierwszy starała się prawo udziału w turnieju głównym z cyklu WTA, ale zarówno naUS Open, jak i wFiladelfii próby te nie powiodły się. Przełomowy w jej karierze był sezon 2005. Już w styczniu na podstawie miejsca rankingowego wystąpiła w imprezie wAuckland, pokonując w pierwszym spotkaniuJaponkęYukę Yoshidę. Wkrótce brała udział w eliminacjach dowielkoszlemowegoAustralian Open 2005, odpadła jednak już na początku, przegrywając zNatalie Grandin. W lutym po raz pierwszy udało się jej przebrnąć kwalifikacje turniejowe; stało się to wDosze. Trzy miesiące później nazwisko Šafářovej było już znane w całym tenisowym świecie. Czeszka zaskoczyła wszystkich, triumfując w turnieju WTA wportugalskimEstoril po uprzednim przebyciu eliminacji. Na listę jej pokonanych trafiłyUkrainkaKateryna Bondarenko,HiszpankaVirginia Ruano Pascual,HolenderkaMichaëlla Krajicek,ArgentynkaGisela Dulko i w finale rozstawiona z numerem czwartymChinkaLi Na. Rankingowa pozycja Šafářovej nie wzrosła jednak zbytnio, do wielkoszlemowegoFrench Open musiała się kwalifikować. Wygrała spotkania eliminacyjne, jednak w pierwszej rundzie uległa swojej rodaczce,Nicole Vaidišovej.
W czerwcu Šafářová wygrała kolejny turniej ITF w Prostějevie, po czym rozpoczęła sezon na kortach trawiastych. Młoda Czeszka sprawiła kolejną sensację, dochodząc w’s-Hertogenbosch do finału, w którym nie sprostałaKlárze Koukalovej. Odniosła jednak cenną wygraną nadRosjankąDinarą Safiną. DowielkoszlemowegoWimbledonu przystępowała jako sześćdziesiąta zawodniczka świata, ale już w meczu otwarcia trafiła naFrancuzkęMary Pierce. Šafářová spadła nieco w klasyfikacjach światowych, ale to nie przeszkodziło jej zwyciężyć w niewielkich zawodach WTA wForest Hills, w finale ogrywającHinduskęSanię Mirzę. Sezon zakończyła na drugiej rundzie wHasselt, odnotowując w sumie siedemnaście porażek.
Na przełomie roku 2005 i 2006 wystąpiła wPucharze Hopmana razem ze swoim narzeczonym,Tomášem Berdychem. Czescy reprezentanci nie wyszli jednak z rozgrywek grupowych.
Przebojem otworzyła sezon 2006, wygrywając waustralijskimGold Coast. W ćwierćfinale zwyciężyła najwyżej rozstawionąSzwajcarkęPatty Schnyder, a w finaleWłoszkęFlavię Pennettę. Po serii pierwszych i drugich rund dobry wynik odniosła dopiero wAmelia Island, kończąc swój udział na półfinale. Przy okazji dopisała do swojej listy zwycięstwo nad Vaidišovą. W dalszej części roku była w gronie czterech najlepszych zawodniczek turnieju jedynie wPalermo. W listopadzie sklasyfikowana na czterdziestym pierwszym miejscu w rankingu.
Po słabym występie wHobarcie na początku roku 2007 osiągnęła życiowy wynik – ćwierćfinał wielkoszlemowegoAustralian Open. Przegrała z Vaidišovą, ale w trzeciej rundzie wygrała zFrancuzkąAmélie Mauresmo, która broniła wMelbourne tytułu sprzed roku. Trzy tygodnie później doszła do finału wParyżu, odnosząc serię imponujących wygranych. W gronie pokonanych przez Šafářovą znalazły się: Nicole Vaidišová,Swietłana Kuzniecowa i w półfinale liderka światowej klasyfikacji WTA, rozpoczynająca sezon z opóźnieniem właśnie w Paryżu,BelgijkaJustine Henin. Po dramatycznym spotkaniu w drugiej rundzieIndian Wells Czeszka wygrała zPolkąAgnieszką Radwańską. W sezonie kortów ziemnym była w półfinale wEstoril oraz trzeciej rundzie wBerlinie (pokonałaAnnę Czakwetadze). PodczasRoland Garros sprawiła sensację, po raz kolejny eliminując Amélie Mauresmo w turnieju wielkoszlemowym. Jak na ironię, także w trzeciej rundzie. Mauresmo może mówić o prawdziwej wielkoszlemowej klątwie Šafářovej. Tymczasem po występie w Paryżu Czeszka przestała osiągać dobre rezultaty, wkrótce zaczęły męczyć ją różnorodne kontuzje. Przedwcześnie zakończyła sezon turniejem wniemieckimStuttgarcie na początku października, ulegając w pierwszej rundzieDanieli Hantuchovej.
Powróciła pod koniec grudnia 2007 w rozgrywkachPucharu Hopmana, partnerując narzeczonemu,Tomášowi Berdychowi. Swój występ zakończyli na fazie grupowej. Następnie dotarła do 2 rundy turnieju WTA wSydney, gdzie poddała mecz Belgijce Justine Henin. WAustralian Open przegrała w 1 rundzie zCataliną Castaño 1:6, 4:6.
We wrześniu triumfowała w turniejuBell Challenge 2013 wQuébecu pokonując w finaleMarinę Erakovic wynikiem 6:4, 6:3. Było to jej pierwsze zwycięstwo singlowe w turnieju WTA od pięciu lat.
Lucie Šafářová przez wiele lat była partnerką życiową, a potem także narzeczonączeskiegotenisisty,Tomáša Berdycha, z którym wspólnie reprezentowała kraj w rozgrywkach oPuchar Hopmana. Rozstali się jesienią 2011 roku. Jej rodzice noszą imiona Jana i Milan. Ma starszą siostrę Veronikę, również tenisistkę, jednak bez większych sukcesów. Mieszka w rodzinnymBrnie. Lucie posługuje się trzema językami: czeskim, niemieckim i angielskim.