SU714170A1 - Method of photometering objects located in optically active medium including contrast impurities - Google Patents

Description

Translated fromRussian

- I- I

Способ относитс  к одновремсиному опре делению оптических свойств объекта и коЛнчествз koHTpacTHbix включений в оптически, активной среде над ним и может быть применен в биологии, медицине,  дерной физике.The method relates to the simultaneous determination of the optical properties of an object and koHTpacTHbix of inclusions in an optical, active medium above it and can be applied in biology, medicine, and nuclear physics.

Известен способ определени  числа контрастных включений в активной среде, например зерен в эмульсии, заключающийс  в визуаль- ном подсчете этих зерен, их растворешш, oKjpaшиваний объекта, например клетки, и определении оптической плотности объекта с помощью фотометра 11.A known method for determining the number of contrasting inclusions in an active medium, for example, grains in an emulsion, consists in visually counting these grains, their solution, removing the object, for example a cell, and determining the optical density of the object using a photometer 11.

Однако этот способ имеет низкую точность и характеризуетс  трудоемкостью проводтмых операций.However, this method has low accuracy and is characterized by the laboriousness of conducting operations.

Наиболее близким по технической сущжзсти к предложенному  вл етс  известный способ фотометрировани  объектов, наход щихс  в оптически активной среде, содержащей контрастные включени , заключающийс  в том, 9ТО указанную смесь освещают параллельным пучком света и сканируют полученное просветное Изображение с помощью зонДа и фотоприемника , св занного с системой регистрации. В этомThe closest in technical terms to the proposed is a well-known method of photometric measurement of objects in an optically active medium containing contrast inclusions, consisting in 9TO this mixture is illuminated with a parallel light beam and the resulting translucent image is scanned using a probe and a photodetector associated with registration system. In that

способе последовательно определ етс , оптическа  плотность объекта совместно с расположенными та, toiM контрастными включени ми путем фото ктрнровани  в двух длинах 1валн, оптическа  плотность контрастных включений фотометрированием в третьей длине волны, где сам объект прозрачен, и размер объекта, который оцениваетс  по размеру зонда-диафртгмы , в которую о1бьект вписываетс . Затем по полученным данным вычисл етс  оптическал плотность самого объекта при предположении равномерности распределени  вещества объекта под контрастными включени ми и вне их. (2.the method sequentially determines the optical density of the object together with the contrast toiM located by means of photo-matching in two lengths 1 bahl, the optical density of contrasting inclusions by photometric measurement at the third wavelength where the object itself is transparent, and the size of the object which is estimated by the probe size a diaphragm into which the object fits. Then, according to the data obtained, the optical density of the object itself is calculated under the assumption that the distribution of the substance of the object under the contrast and outside contrast is assumed. (2.

Однако характерными дл  этого способа  вл ютс  длительность производимых операций, а также больша  ошибка в определении разме{U объекта сложной формы.However, typical for this method are the duration of the operations performed, as well as a large error in determining the size {U of an object of complex shape.

Цель изобретени  - упрощение процесса измерений, а также повышение точности определени  чнс а контрастных включений и оптической плотности объектов, например, клеток, находащихс  в оптически активной среде.The purpose of the invention is to simplify the measurement process, as well as to improve the accuracy of determining the frequency of contrast inclusions and the optical density of objects, for example, cells that are in an optically active medium.

Это достигаетс  Тем, что используетс  одно толковый истоЧ1тк излучени , а сканирование ведетс  одновременно двум  кондентрическими р ондами разного размера, затем сканограммы совмещаютс  таким образом, чтобы их перссечеш1е происходило на пиках, соответствующих контрастным включени м, наход щимс  в объекте или в среде над . Полученный разное кый сигнал одновременно используетс  дл  Подсчета контраст1шх включений и Ш1й исключени  сигналов от контрастных включений лрн определени  оптической плотности объекта. Предложенный cnocofil точнее известных, . т как нС требует (шределени  площади объекта к ускор ет врем  измерений, поскольку все Ьперации производ тс  за один цикл сканировани . На чертеже представлено соймещенне скавограмм дл  получени  Tpe6ye.ibtx параметров Сканограмма 1 от зкйща Mtutoroi размера itmMCbiBaet объект и включени  в нем, а скано грамма 2 от зонда большего размера описывае только сам объект. Крива  3 прпстшзл ет собой сигнал дл  Подсчета коцгрйсшых включений и исключени  участков oSiekta, зан тых контрастными включени ми, при определении оптнадской плдпгости.. Обработка резу иат ведетс  следующим Ы}разом Сканограмма 2 пй1днима етс  выше сканограм мы 1 так, что пересечение обеих CKiaiHorpaMM происходит на ПИКАХ, соответствующих контpacTHbiM включени м в объекте. Количество контрастных включений подсчитьгааётс  счегтком по числу пересечений, а фотометрнровзнме самого объект произвбдвтс  в tex местах ска нограммы 1, гйе нет пиков от контрастных включений. На фиг. I эти места отмечены точками . При фотометрнрова1Ю{И вь1числ етс  л6гарифм отношений амплитуды падающего Ф,,   прошедшего Ф световъ потоков. Пример реализации изобретени . Препарат с объектам и кош| астнымн вклю чени ми в нем, например, радиоавтограф регенерирующей печени мьшш, окрашенной по Фел гену, устанавливаетс  на предметнс столике оттического микроскопа, бканироваине объекта осуществл етс  пёремешешгем предметного столика микроскопа. П юизводатсЯ 1Фухз6ндовое сканирование объекта. Изображение объекта с контрастнымо включени ми s (км проектируетс  в. плоскость кольцевого зеркала. Последнее раздел ет световой потсж Яа два: один проходит через небольщое отверстие в центре, отраздаетс  от зеркальной поверхности. Фотоэлектронные умно штели, регист|Я1руют оба светдвъге потока. Две сканограммь поступакгт ira длскриЯЯлатор , причем сканограмму от большого зонда поднимаетс  выше сканограммы от малого зонда так, что пересечение обеих сканограмм происходило на пиках соответствующих контрастным включени м в объекте. Выделение с помощью дискриминатора импульсы, соответствующие контрастным включени м, подсчитывают счётчиком ЕСА-3. Дл  определени  оптической плотности объекта используетс  интегрирующий вольтметр Ф 5007, на вход которого поступает скавограмма от малдго зонда, а выделенные с помощью дискриминатора импульсы , соответствующие контрастным включени м закрывают вход вольтметра на врем , равное длительности этих импульсов. Оптическа  плотность определ етс  как отношение полУченногр значени  на интегрирующем вольтметре к количеству отсчетдв амплитуды, полученное с поМощью второгд счетчика ЕСА-3. Формула Изобретени  Способ фотометрйровани ,объектов, наход щихс  в оптически активной среде, содержз- щей контрастные включени , заключающийс  в том, Что указанную смесь освещают параллельным пучком света и.сканируют полученное просветдое изображение с помощью зонда и фотоприемника, св занного с системой регистращш , о т л и ч а ю щ и и с   тем, что, с целью повь1щени  точности определени  числа контрастных включений и оптической плотности объекта, а также упрощени  процесса измерений, используют одноволновьтй источник излучеш1Я, а сканирование ведут одновременно двум  кониентрическнмн зондами разного размера , затем сканограммь совмещают таким образом, чтобы их пер(гсечениё происходило на пиках, соответствующих контрастньтм включени м , наход щимс  в объекте или в среде над ним, полученный разностный сигнал одновременно испольэ5тот дл  подсчета контрастнь1х включений и исключени  сигналов от контрастных включений при определении оптической плотности объекта. Источники информации, .прин тые во внимание при экспертизе i. Авторское . аидетельство СССР № 257067, кл. G 02 В 2.1/00, 1968. 2. Папа н Г. В. и др. Одновременное определение вещества и интенсивности метки на окращеншх автографах .Цитологи , 15, 9, с. 1184-1190, 1973 (прототип).This is achieved by using one sensible source of radiation, and scanning is carried out simultaneously by two different sizes of different centers, then the scans are combined so that they are perceptible at the peaks corresponding to the contrasting inclusions in the object or in the medium above. The received different signal is simultaneously used to calculate the contrast of inclusions and the Fifth exclusion of signals from contrast inclusions of the determination of the optical density of an object. The proposed cnocofil more precisely known,. t as nS requires (delineating the area of the object to speeds up the measurement time, since all the operations are performed in one scan cycle. The drawing shows the displaced scaprograms to get Tpe6ye.ibtx parameters Scanogram 1 from the Mtutoroi size itmMCbiBaet object and include it, Gram 2 from the larger probe describes only the object itself. Curve 3 provides a signal for the Counting of inclusions and the exclusion of oSiekta areas occupied by contrasting inclusions when determining the Optnadskaya platform. Processing a Result goes next time} Scan 2 is scanned above scan 1 so that the intersection of both CKiaiHorpaMM occurs on PICAH, corresponding to the counter-inclusions in the object. There are no peaks from contrasting inclusions. In Fig. I, these places are marked with dots. When the photometer is 1 O {the number of ratios of the amplitude of the incident F is transmitted, the transmitted light passes. An example implementation of the invention. The drug with objects and Kosh | In particular, a radioautograph of the regenerating liver of a Fel-stained gene is installed on an object table of an optical microscope, and the object is scanned by a larger microscope stage. PREVIEW 1Fuchs6ndov object scan. An image of an object with contrasting inclusions s (km is projected onto the plane of an annular mirror. The latter separates the light beam Two: one passes through a small hole in the center and is reflected from the mirror surface. Photoelectronic smartphones registering both light fluxes. Two scans. Ira for a screener, with the scan from the large probe rising above the scan from the small probe so that the intersection of both scans occurred at the peaks of the corresponding contrasting inclusions in the object. using a discriminator, the pulses corresponding to contrast inclusions are counted with an ENA-3 counter. To determine the optical density of an object, an integrating voltmeter F 5007 is used, the input of which receives a scavogram from a small probe, and the pulses allocated with a discriminator corresponding to contrast inclusions close the input a voltmeter for a time equal to the duration of these pulses. The optical density is defined as the ratio of the partial value of the integrating voltmeter to the number of counts amplitudes obtained with the aid of the second ECA-3 counter. Formula of the Invention The method of photometry of objects in an optically active medium containing contrast inclusions is that the mixture is illuminated with a parallel beam of light and the resulting image is scanned using a probe and a photodetector connected with a register system, so that, in order to improve the accuracy of determining the number of contrast inclusions and the optical density of the object, as well as to simplify the measurement process, a single-source radiation source is used, and Simulation is carried out simultaneously with two conentricheskim probes of different sizes, then the scangrams are combined in such a way that they are transmitted (the clipping occurs on the peaks corresponding to the contrast inclusions in the object or in the medium above it, the resulting difference signal is simultaneously used to calculate the contrast inclusions and exclusion signals from contrasting inclusions when determining the optical density of an object Sources of information taken into account during the examination i. Copyright. USSR Certificate No. 257067, class G 02 B 2.1 / 00, 1968. 2. Papa n GV, et al. Simultaneous determination of the substance and intensity of a label on short autographs. Tsitologi, 15, 9, p. 1184-1190, 1973 (prototype).

Claims (2)

Translated fromRussian

Формула изобретенияClaimСпособ фотометрировании,объектов, находящихся в оптически активной среде, содержа- щей контрастные включения, заключающийся в том, Что указанную смесь освещают параллельным пучком света й. сканируют полученное просветное изображение с помощью зонда и фотоприемника, связанного с системой регистрации, от л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности определения чис, ла контрастных включений и оптической плотности объекта, а также упрощения процесса измерений, используют одноволновый источник излучения, а сканирование ведут одновременно двумя концентрическими зондами разного размера, затем сканограммы совмещают таким образом, чтобы их пересечение происходило на пиках, соответствующих контрастным включениям, находящимся в объекте или в среде над ним, полученный разностный сигнал одновременно используют Для подсчета контрастных включений и исключения сигналов от контрастных включений при определении оптической плотности объекта.The method of photometric measurement of objects located in an optically active medium containing contrasting inclusions, namely, that said mixture is illuminated with a parallel light beam d. scan the obtained luminal image using a probe and a photodetector associated with the registration system, with the aim that, in order to improve the accuracy of determining the number, number of contrast inclusions and optical density of the object, as well as simplifying the measurement process , use a single-wave radiation source, and the scanning is carried out simultaneously by two concentric probes of different sizes, then the scans are combined so that their intersection occurs at the peaks corresponding to the contrast inclusions, finding schimsya a facility or medium over it, while the resulting difference signal is used to calculate the contrast inclusions and exclusions signals from contrast inclusions in determining the optical density of the object.Источники информаций, принятые во внимание при экспертизе ‘ 1. Авторское . зидетельство СССР № 257067, кл. G 02 В 21/00. 1968. <Sources of information taken into account in the examination ‘1. Copyright. USSR certificate No. 257067, cl. G 02 B 21/00. 1968. <2. Папаян Г. В. и др. Одновременное определение вещества и интенсивности метки на окрашенных автографах .Цитология, 15, 9, с. 1184 -1190, 1973 (прототип).2. Papayan G.V. et al. Simultaneous determination of substance and label intensity on stained autographs. Tsitologiya, 15, 9, p. 1184-1190, 1973 (prototype)./' V/ 'V