RU2413511C2 - Proteinkinase c inhibitors used for treating autoimmune diseases and graft rejection - Google Patents

Abstract

FIELD: medicine, pharmaceutics.

SUBSTANCE: invention refers to medicine and pharmacology, and concerns application of 3-(1-methyl-1H-indole-3-yl)-4-[1-{(1-pyridine-2-ylmethyl)piperidine-4-yl}-1H-indole-3-yl]pyrrole-2,5-dione or 3-(1-methyl-1H-indole-3-yl)-4-[1-( piperidine-4-yl)-1H-indole-3-yl]pyrrole-2,5-dione.

EFFECT: offered is a pharmaceutical composition for high-efficient treatment and prevention of organ or tissue graft rejection.

4 cl, 1 ex

Description

Translated fromRussian

Настоящее изобретение относится к новым применениям ингибиторов протеинкиназы С.The present invention relates to new uses of protein kinase C inhibitors.

В частности, изобретение относится к новым применениям ингибиторов протеинкиназы С формулы I, II, III и IV и их фармацевтически приемлемых солей, гидратов или сольватов.In particular, the invention relates to new uses of protein kinase C inhibitors of the formula I, II, III and IV and their pharmaceutically acceptable salts, hydrates or solvates thereof.

Ниже представлены ингибиторы протеинкиназы С формулы I:The following are protein kinase C inhibitors of formula I:

в которойwherein

R₁ и R'₁ каждый независимо друг от друга обозначает водород, алкил, галоалкил, алкенил, арилалкил, алкоксиалкил, гидроксиалкил, аминоалкил, моноалкиламиноалкил, диалкиламиноалкил, ациламиноалкил, ацилоксиалкил, цианалкил, амидиноалкил, карбоксиалкил, алкоксикарбонилалкил, аминокарбонилалкил или группу формулы (а), (b) или (с):R₁ and R ′_{1 are} each independently hydrogen, alkyl, haloalkyl, alkenyl, arylalkyl, alkoxyalkyl, hydroxyalkyl, aminoalkyl, monoalkylaminoalkyl, dialkylaminoalkyl, acylaminoalkyl, acyloxyalkyl, cyanoalkyl, amidinoalkyl, carboxyalkylalkyl, alkyl ), (b) or (c):

в которой Het обозначает гетероциклильную группу; W обозначает NH, S или связь; Т обозначает NH или S; V обозначает О, S, NH или NCN; А обозначает алкилтиогруппу, аминогруппу, моноалкиламиногруппу или диалкиламиногруппу; Аr обозначает арил;in which Het represents a heterocyclyl group; W is NH, S or a bond; T is NH or S; V is O, S, NH or NCN; A represents an alkylthio group, an amino group, a monoalkylamino group or a dialkylamino group; Ar is aryl;

R₂ и R'₂ каждый независимо друг от друга обозначает водород, алкил, алкоксиалкил, гидроксиалкил, C₁-С₃алкилтиогруппу, S(O)С₁-С₃алкил, СF₃;R₂ and R ′₂ each independently of one another are hydrogen, alkyl, alkoxyalkyl, hydroxyalkyl, C₁ -C₃ alkylthio, S (O) C₁ -C₃ alkyl, CF₃ ;

или R₁ и R₂ образуют вместе -(СН₂)_r-Х-СН₂-, где r обозначает 1, 2 или 3 и Х обозначает CHR₈ или NR₈, где R₈ обозначает (CH₂)_sR₉, где R₉ обозначает водород, гидроксигруппу, алкоксигруппу, аминогруппу, моноалкиламиногруппу, диалкиламиногруппу, триалкиламиногруппу, азидогруппу, ациламиногруппу, алкоксикарбонил, цианогруппу, амидиногруппу или аминокарбонил и s обозначает 0, 1,2 или 3;or R₁ and R₂ together form - (CH₂ )_r —X — CH₂ -, where r is 1, 2 or 3 and X is CHR₈ or NR₈ , where R₈ is (CH₂ )_s R₉ , where R₉ is hydrogen, hydroxy, alkoxy, amino, monoalkylamino, dialkylamino, trialkylamino, azido, acylamino, alkoxycarbonyl, cyano, amidino or aminocarbonyl and s is 0, 1,2 or 3;

R₃ обозначает водород или СН₃СО;R₃ is hydrogen or CH₃ CO;

R₄, R'₄, R₅, R'₅, R₆, R'₆, R₇ и R'₇ каждый независимо друг от друга обозначает водород, галоген, алкил, гидроксигруппу, алкоксигруппу, -COO(C₁-С₃алкил), СF₃, нитрогруппу, аминогруппу, ацетиламиногруппу, моноалкиламиногруппу, диалкиламиногруппу, алкилтиогруппу, C₁-С₃алкилтиогруппу или S(O)С₁-С₃алкил; иR₄ , R '₄ , R₅ , R'₅ , R₆ , R '₆ , R₇ and R'_{7 are} each independently hydrogen, halogen, alkyl, hydroxy, alkoxy, -COO (C₁ -C₃ alkyl), CF₃ , nitro group, amino group, acetylamino group, monoalkylamino group, dialkylamino group, alkylthio group, C₁ -C₃ alkylthio group or S (O) C₁ -C₃ alkyl; and

n обозначает 1, 2, 3, 4, 5 или 6.n is 1, 2, 3, 4, 5, or 6.

Ниже представлены ингибиторы протеинкиназы С формулы II:The following are protein kinase C inhibitors of formula II:

в которойwherein

R₁ обозначает группу формулы (d), (е) или (f):R₁ denotes a group of formula (d), (e) or (f):

в которой р и q каждый независимо друг от друга обозначает 1, 2, 3 или 4;in which p and q are each independently of one another 1, 2, 3 or 4;

s обозначает 0, 1, 2 или 3;s is 0, 1, 2 or 3;

t обозначает 1 или 2;t is 1 or 2;

u обозначает 0 или 1; иu is 0 or 1; and

R₁₂ обозначает водород, алкил, галоалкил, циклоалкил, ацетил, арил, -СН(арил)₂, аминогруппу, мономоноалкиламиногруппу, диалкиламиногруппу, гуанидиногруппу, -С(=N(алкоксикарбонил))NН(алкоксикарбонил), амидиногруппу, гидроксигруппу, карбоксигруппу, алкоксикарбонил или гетероциклил;R₁₂ is hydrogen, alkyl, haloalkyl, cycloalkyl, acetyl, aryl, —CH (aryl)₂ , an amino group, a monomonoalkylamino group, a dialkylamino group, a guanidino group, —C (= N (alkoxycarbonyl)) NH (alkoxycarbonyl), amidino group, hydroxy alkoxycarbonyl or heterocyclyl;

R'₁ обозначает водород, С₁-С₄алкил, аминоалкил, моноалкиламиноалкил или диалкиламиноалкил,R ′₁ is hydrogen, C₁ -C₄ alkyl, aminoalkyl, monoalkylaminoalkyl or dialkylaminoalkyl,

R₂ и R'₂ каждый независимо друг от друга обозначает водород, алкил, алкоксиалкил, гидроксиалкил, C₁-С₃алкилтиогруппу, S(O)С₁-С₃алкил, СF₃;R₂ and R ′₂ each independently of one another are hydrogen, alkyl, alkoxyalkyl, hydroxyalkyl, C₁ -C₃ alkylthio, S (O) C₁ -C₃ alkyl, CF₃ ;

R₃ обозначает водород или СН₃СО-; иR₃ is hydrogen or CH₃ CO—; and

R₄, R'₄, R₅, R'₅, R₆, R'₆, R₇ и R'₇ каждый независимо друг от друга обозначает водород, галоген, алкил, гидроксигруппу, алкоксигруппу, -COO(C₁-С₃алкил), СF₃, нитрогруппу, аминогруппу, ацетиламиногруппу, моноалкиламиногруппу, диалкиламиногруппу, алкилтиогруппу, C₁-С₃алкилтиогруппу или S(O)C₁-С₃алкил.R₄ , R '₄ , R₅ , R'₅ , R₆ , R '₆ , R₇ and R'_{7 are} each independently hydrogen, halogen, alkyl, hydroxy, alkoxy, -COO (C₁ -C₃ alkyl), CF₃ , nitro group, amino group, acetylamino group, monoalkylamino group, dialkylamino group, alkylthio group, C₁ -C₃ alkylthio group or S (O) C₁ -C₃ alkyl.

Ниже представлены ингибиторы протеинкиназы С формулы III:The following are protein kinase C inhibitors of formula III:

в которойwherein

R'₁ обозначает водород, С₁-С₄алкил, аминоалкил, моноалкиламиноалкил или диалкиламиноалкил;R ′₁ is hydrogen, C₁ -C₄ alkyl, aminoalkyl, monoalkylaminoalkyl or dialkylaminoalkyl;

R'₂ обозначает водород, алкил, алкоксиалкил, гидроксиалкил, C₁-С₃алкилтиогруппу, S(O)C₁-С₃алкил, СF₃;R ′₂ is hydrogen, alkyl, alkoxyalkyl, hydroxyalkyl, C₁ -C₃ alkylthio, S (O) C₁ -C₃ alkyl, CF₃ ;

R₃ обозначает водород или СН₃СО-;R₃ is hydrogen or CH₃ CO—;

R₄, R'₄, R₅, R'₅, R₆, R'₆, R₇ и R'₇ каждый независимо друг от друга обозначает водород, галоген, алкил, гидроксигруппу, алкоксигруппу, -COO(C₁-С₃алкил), СF₃, нитрогруппу, аминогруппу, ацетиламиногруппу, моноалкиламиногруппу, диалкиламиногруппу, алкилтиогруппу, C₁-С₃алкилтиогруппу или S(O)C₁-С₃алкил;R₄ , R '₄ , R₅ , R'₅ , R₆ , R '₆ , R₇ and R'_{7 are} each independently hydrogen, halogen, alkyl, hydroxy, alkoxy, -COO (C₁ -C₃ alkyl), CF₃ , nitro group, amino group, acetylamino group, monoalkylamino group, dialkylamino group, alkylthio group, C₁ -C₃ alkylthio group or S (O) C₁ -C₃ alkyl;

Х обозначает CR₈R₉, где R₈ обозначает (CH₂)_sR₁₀, где R₉ обозначает (CH₂)_sR₁₁, R₁₀ и R₁₁ каждый независимо друг от друга обозначает гидроксигруппу, алкоксигруппу, карбоксигруппу, ацилоксигруппу, аминогруппу, моноалкиламиногруппу, диалкиламиногруппу, триалкиламиногруппу, азидогруппу, ациламиногруппу, алкоксикарбонил, цианогруппу, амидиногруппу или аминокарбонил, и s обозначает 0, 1, 2 или 3; иX is CR₈ R₉ , where R₈ is (CH₂ )_s R₁₀ , where R₉ is (CH₂ )_s R₁₁ , R₁₀ and R_{11 are} each independently a hydroxy group, an alkoxy group, a carboxy group, an acyloxy group, an amino group, a monoalkylamino group, a dialkylamino group, a trialkylamino group, an azido group, an acylamino group, an alkoxycarbonyl, a cyano group, an amidino group or an aminocarbonyl, and s is 0, 1, 2 or 3; and

r обозначает 1, 2 или 3.r is 1, 2 or 3.

Ниже представлены ингибиторы протеинкиназы С формулы IV:The following are protein kinase C inhibitors of formula IV:

в которойwherein

R₁ обозначает алкилгликозный остаток или группу формулы (g) или (h):R₁ is an alkyl glycosyl residue or a group of formula (g) or (h):

в которой n обозначает 1, 2, 3, 4, 5 или 6;in which n is 1, 2, 3, 4, 5, or 6;

R'₁ обозначает водород, C₁-С₄алкил, циклопропилметил, аминоалкил, моноалкиламиноалкил или диалкиламиноалкил;R ′₁ is hydrogen, C₁ -C₄ alkyl, cyclopropylmethyl, aminoalkyl, monoalkylaminoalkyl or dialkylaminoalkyl;

R₂ и R'₂ каждый независимо друг от друга обозначает водород, алкил, алкоксиалкил, гидроксиалкил, C₁-С₃алкилтиогруппу, S(O)C₁-С₃алкил, СF₃;R₂ and R ′₂ each independently of one another are hydrogen, alkyl, alkoxyalkyl, hydroxyalkyl, C₁ -C₃ alkylthio, S (O) C₁ -C₃ alkyl, CF₃ ;

R₃ обозначает водород или СН₃СО-; иR₃ is hydrogen or CH₃ CO—; and

R₄, R'₄, R₅, R'₅, R₆, R'₆, R₇ и R'₇ каждый независимо друг от друга обозначает водород, галоген, алкил, гидроксигруппу, алкоксигруппу, -COO(C₁-С₃алкил), СF₃, нитрогруппу, аминогруппу, ацетиламиногруппу, моноалкиламиногруппу, диалкиламиногруппу, алкилтиогруппу, C₁-С₃алкилтиогруппу или S(O)C₁-С₃алкил.R₄ , R '₄ , R₅ , R'₅ , R₆ , R '₆ , R₇ and R'_{7 are} each independently hydrogen, halogen, alkyl, hydroxy, alkoxy, -COO (C₁ -C₃ alkyl), CF₃ , nitro group, amino group, acetylamino group, monoalkylamino group, dialkylamino group, alkylthio group, C₁ -C₃ alkylthio group or S (O) C₁ -C₃ alkyl.

Алкил, индивидуально или в комбинациях, может представлять собой алкильную группу с прямой или разветвленной цепью, содержащую от 1 до 7, предпочтительно от 1 до 4 атомов углерода, такую как метил, этил, пропил, изопропил, бутил, втор-бутил, трет-бутил и пентил. «C₁-С₃алкил» обозначает алкил, который несет от одного до трех атомов углерода. Алкенил может представлять собой несущий от 2 до 7 атомов углерода углеводород с прямой или разветвленной цепью, который содержит одну или несколько двойных связей, предпочтительно одну или две двойные связи. Примерами алкенила являются этинилен, пропенилен, 1,3-бутадиенил и 1,3,5-гексатриенил.Alkyl, individually or in combination, may be a straight or branched chain alkyl group containing from 1 to 7, preferably from 1 to 4 carbon atoms, such as methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, sec-butyl, tert- butyl and pentyl. “C₁ -C₃ alkyl” means an alkyl that carries from one to three carbon atoms. Alkenyl may be a straight or branched chain hydrocarbon bearing from 2 to 7 carbon atoms, which contains one or more double bonds, preferably one or two double bonds. Examples of alkenyl are ethynylene, propenylene, 1,3-butadienyl and 1,3,5-hexatrienyl.

Циклоалкил, индивидуально или в комбинациях, может представлять собой несущий от 3 до 7 атомов углерода циклоалкил, например циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил и циклогептил.Cycloalkyl, individually or in combination, may be 3 to 7 carbon atoms cycloalkyl, for example cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl and cycloheptyl.

Алкоксигруппа, индивидуально или в комбинациях, может представлять собой алкил, ковалентно связанный с помощью связи -О-. Примерами алкоксигрупп являются метоксигруппа, этоксигруппа, пропоксигруппа, изопропоксигруппа, бутоксигруппа и трет-бутоксигруппа. Алкоксиалкил может представлять собой, например, СН₃(СН₂)-О-(СН₂)_m, такой, например, как трет-бутоксикарбонил или ВОС.The alkoxy group, individually or in combination, may be alkyl covalently linked through an —O— bond. Examples of alkoxy groups are methoxy group, ethoxy group, propoxy group, isopropoxy group, butoxy group and tert-butoxy group. Alkoxyalkyl may be, for example, CH₃ (CH₂ ) -O- (CH₂ )_m , such as, for example, tert-butoxycarbonyl or BOC.

Галоалкил может представлять собой алкил, несущий один или несколько, предпочтительно 1-3 атома галогена, например СН₂Сl, СF₃, СН₂СF₃, СН₂(СF₂)₂СF₃ и т.п.Haloalkyl may be alkyl bearing one or more, preferably 1-3, halogen atoms, for example CH₂ Cl, CF₃ , CH₂ CF₃ , CH₂ (CF₂ )₂ CF₃ and the like.

Ацильный радикал ациламиногруппы или ациламиноалкилгруппы получают из алкановой кислоты, содержащей максимум 7, предпочтительно максимум 4 атома углерода, например ацетил, пропионил или бутирил, или из ароматической карбоновой кислоты, например бензоил. Ацилоксигруппа представляет собой группу, такую как ацил, связанный с помощью связи -О-, например ацетилоксигруппу, СН₃С(=O)O-. Ациламиногруппа представляет собой, например, СН₃(С=O)NН-(ацетиламиногруппу). Аналогично ациламиноалкил обозначает СН₃(С=O)NН(СН₂)_m-.The acyl radical of an acylamino group or acylaminoalkyl group is derived from an alkanoic acid containing at most 7, preferably at most 4 carbon atoms, for example acetyl, propionyl or butyryl, or from aromatic carboxylic acid, for example benzoyl. An acyloxy group is a group, such as an acyl linked via an —O— bond, for example an acetyloxy group, CH₃ C (= O) O—. The acylamino group is, for example, CH₃ (C = O) NH- (acetylamino group). Similarly, acylaminoalkyl denotes CH₃ (C = O) NH (CH₂ )_m -.

Арил, индивидуально или в комбинациях, может представлять собой незамещенную фенильную группу или фенильную группу, несущую один или несколько, предпочтительно от 1 до 3 заместителей, независимо друг от друга выбранных из группы, включающей галоген, алкил, гидроксигруппу, бензилоксигруппу, алкоксигруппу, галоалкил, нитрогруппу, аминогруппу, ациламиногруппу, моноалкиламиногруппу, диалкиламиногруппу, алкилтиогруппу, алкилсульфинил, алкилсульфонил и цианогруппу. Арилалкил предпочтительно обозначает бензил.Aryl, individually or in combination, may be an unsubstituted phenyl group or a phenyl group bearing one or more, preferably from 1 to 3 substituents, independently selected from the group consisting of halogen, alkyl, hydroxy group, benzyloxy group, alkoxy group, haloalkyl, nitro group, amino group, acylamino group, monoalkylamino group, dialkylamino group, alkylthio group, alkylsulfinyl, alkylsulfonyl and cyano groups. Arylalkyl is preferably benzyl.

Галоген может представлять собой фтор, хлор, бром или йод.Halogen may be fluoro, chloro, bromo or iodo.

Гетероциклическая группа, обозначенная как «Het» или «гетероциклил», может представлять собой стабильную, насыщенную, частично ненасыщенную или ароматическую 5- или 6-членную гетероциклическую группу. Гетероциклическое кольцо состоит из атомов углерода и 1-3 гетероатомов, независимо друг от друга выбранных из группы, включающей азот, кислород и серу. Гетероциклическая группа может быть замещена 1-3 заместителями, независимо друг от друга выбранными из группы, включающей галоген, алкил, гидроксигруппу, алкоксигруппу, галоалкил, нитрогруппу, аминогруппу, ациламиногруппу, моноалкиламиногруппу, диалкиламиногруппу, алкилтиогруппу, алкилсульфинил и алкилсульфонил, или, когда гетероциклильная группа представляет собой ароматическую азотсодержащую гетероциклическую группу, атом азота может нести оксидную группу. Примерами таких гетероциклильных групп являются имидазолил, имидазолинил, тиазолинил, пиридил, индолил, фурил и пиримидинил.A heterocyclic group designated as “Het” or “heterocyclyl” may be a stable, saturated, partially unsaturated or aromatic 5- or 6-membered heterocyclic group. The heterocyclic ring consists of carbon atoms and 1-3 heteroatoms independently selected from the group consisting of nitrogen, oxygen and sulfur. The heterocyclic group may be substituted by 1 to 3 substituents independently selected from the group consisting of halogen, alkyl, hydroxy group, alkoxy group, haloalkyl, nitro group, amino group, acylamino group, monoalkylamino group, dialkylamino group, alkylthio group, alkyl sulfonyl group, and alkyl sulfonyl group represents an aromatic nitrogen-containing heterocyclic group, a nitrogen atom can carry an oxide group. Examples of such heterocyclyl groups are imidazolyl, imidazolinyl, thiazolinyl, pyridyl, indolyl, furyl and pyrimidinyl.

«Алкилгликозный остаток» может представлять собой гликозный радикал, связанный в положении С-1 с индолилом через С₂-С₄алкил. Гликозы, входящие в алкилгликозный остаток, могут представлять собой встречающиеся или не встречающиеся в естественных условиях несущие 5 или 6 атомов углерода сахара, предпочтительно выбранные из группы, включающей аллозил, алтрозил, глюкозил, маннозил, гулозил, идозил, галактозил, талозил, арабинозил, ксилозил, ликсозил, рамнозил, рибозил, дезоксифуранозил, дезоксипиранозил и дезоксирибозил. Гликоза может быть замещена азидогруппой, O-ацетилирована, O-метилирована, замещена аминогруппой, моно- и диалкиламиногруппой или замещена ациламиногруппой. Например, алкилгликозный остаток включаетAn “alkyl glycosyl residue” may be a glycosyl radical attached at the C-1 position to an indolyl via C₂ -C₄ alkyl. The glycoses included in the alkyl glycosyl residue may be either 5 or 6 sugar carbon atoms, either naturally occurring or not naturally occurring, preferably selected from the group consisting of allosyl, altrosyl, glucosyl, mannosyl, gulosyl, idosyl, galactosyl, talosyl, arabinosyl, xylosyl , lyxosyl, rhamnosyl, ribosyl, deoxyfuranosyl, deoxypyranosyl and deoxyribosyl. Glycose may be substituted by an azido group, O-acetylated, O-methylated, substituted by an amino group, a mono- and dialkylamino group, or substituted by an acylamino group. For example, an alkyl glycosyl residue includes

Соединения формул I-IV могут находиться в свободной форме или в форме соли, например кислотно-аддитивной соли, например соли органической или неорганической кислоты, например могут представлять собой гидрохлорид, фосфат, ацетат, мезилат, цитрат или тартрат. Согласно изобретению соединения формул I-IV в свободной форме или в форме соли можно применять в форме гидрата или сольвата, в аморфной или кристаллической форме.The compounds of formulas I-IV may be in free or salt form, for example an acid addition salt, for example a salt of an organic or inorganic acid, for example, hydrochloride, phosphate, acetate, mesylate, citrate or tartrate. According to the invention, the compounds of formulas I-IV in free or salt form can be used in the form of a hydrate or solvate, in amorphous or crystalline form.

Особенно предпочтительными ингибиторами протеинкиназы С являются соединения формул Ia, Ib, IIа и IIIа или их соли.Particularly preferred protein kinase C inhibitors are compounds of formulas Ia, Ib, IIa and IIIa or their salts.

Ниже представлены соединения формулы Iа:The following are compounds of formula Ia:

в которойwherein

R₁ обозначает водород, аминоалкил, моноалкиламиноалкил или диалкиламиноалкил;R₁ is hydrogen, aminoalkyl, monoalkylaminoalkyl or dialkylaminoalkyl;

R'₁ обозначает водород, C₁-С₄алкил, аминоалкил, моноалкиламиноалкил или диалкиламиноалкил; иR ′₁ is hydrogen, C₁ -C₄ alkyl, aminoalkyl, monoalkylaminoalkyl or dialkylaminoalkyl; and

R₂ обозначает водород или метил.R₂ is hydrogen or methyl.

Ниже представлены соединения формулы Ib:The following are compounds of formula Ib:

в которойwherein

R'₁ обозначает водород или C₁-С₄алкил;R ′₁ is hydrogen or C₁ -C₄ alkyl;

Х обозначает CR₈R₉ или NR₈, где R₈ обозначает (CH₂)_sR₁₀, где R₉обозначает (CH₂)_sR₁₁, R₁₀ и R₁₁ каждый независимо друг от друга обозначает водород, гидроксигруппу, аминогруппу, моноалкиламиногруппу или диалкиламиногруппу, и s обозначает 1; иX is CR₈ R₉ or NR₈ , where R₈ is (CH₂ )_s R₁₀ , where R₉ is (CH₂ )_s R₁₁ , R₁₀ and R_{11 are} each independently hydrogen, hydroxy, amino a monoalkylamino group or a dialkylamino group, and s is 1; and

r обозначает 1 или 2.r is 1 or 2.

Ниже представлены соединения формулы IIа:The following are compounds of formula IIa:

в которойwherein

R₁ обозначаетR₁ is

где либо s' обозначает 0 и R'₁₂ обозначает водород или C₁-С₄алкил; либо s' обозначает 1 и R'₁₂ обозначает пиридил, предпочтительно 2-пиридил, иwhere either s 'is 0 and R'₁₂ is hydrogen or C₁ -C₄ alkyl; or s ′ is 1 and R ′₁₂ is pyridyl, preferably 2-pyridyl, and

R'₁ обозначает водород, C₁-С₄алкил.R ′₁ is hydrogen, C₁ -C₄ alkyl.

Ниже представлены соединения формулы IIIа:The following are compounds of formula IIIa:

в которойwherein

R'₁ обозначает водород, алкил, аминоалкил, моноалкиламиноалкил или диалкиламиноалкил;R ′₁ is hydrogen, alkyl, aminoalkyl, monoalkylaminoalkyl or dialkylaminoalkyl;

Х обозначает CR₈R₉ или NR₈, где R₈ обозначает (CH₂)_sR₁₀, где R₉обозначает (CH₂)_sR₁₁, R₁₀ и R₁₁ каждый независимо друг от друга обозначает гидроксигруппу, карбоксигруппу, алкоксикарбонил, аминогруппу, моноалкиламиногруппу или диалкиламиногруппу, и s обозначает 0 или 1; и r обозначает 1 или 2.X is CR₈ R₉ or NR₈ , where R₈ is (CH₂ )_s R₁₀ , where R₉ is (CH₂ )_s R₁₁ , R₁₀ and R_{11 are} each independently hydroxy, carboxy, alkoxycarbonyl , an amino group, a monoalkylamino group or a dialkylamino group, and s is 0 or 1; and r is 1 or 2.

Еще более предпочтительными соединениями являются 3-(1-метил-1Н-индол-3-ил)-4-[1-{(1-пиридин-2-илметил)пиперидин-4-ил}-1H-индол-3-ил]пиррол-2,5-дион, обозначенный также LY 317615 (обозначено далее как соединение А) и 3-(1-метил-1Н-индол-3-ил)-4-[1-(пиперидин-4-ил)-1Н-индол-3-ил]пиррол-2,5-дион (обозначено далее как соединение Б), в свободной форме или в форме соли, например гидрохлорида.Even more preferred compounds are 3- (1-methyl-1H-indol-3-yl) -4- [1 - {(1-pyridin-2-ylmethyl) piperidin-4-yl} -1H-indol-3-yl ] pyrrole-2,5-dione, also designated LY 317615 (hereinafter referred to as compound A) and 3- (1-methyl-1H-indol-3-yl) -4- [1- (piperidin-4-yl) - 1H-indol-3-yl] pyrrole-2,5-dione (hereinafter referred to as compound B), in free or salt form, for example, hydrochloride.

Соединения формулы I, II, III и IV можно синтезировать с помощью известных в данной области методов, например, описанных в US 5545636.Compounds of formula I, II, III, and IV can be synthesized using methods known in the art, for example, those described in US 5,545,636.

Было установлено, что ингибиторы протеинкиназы С формулы I, II, III или IV и их фармацевтически приемлемые соли, гидраты или сольваты благодаря их обнаруженной активности, например способности ингибировать изоферменты протеинкиназы С, такие как протеинкиназа С β-1 и β-2, которые описаны, например, в US 5545636, можно применять для лечения состояний, связанных с сахарным диабетом и его осложнениями, а также других болезней, связанных с повышением уровней изоферментов β-1 и β-2, например ишемии, воспаления, заболеваний центральной нервной системы, сердечно-сосудистого заболевания, дерматологической болезни, болезни Альцгеймера и рака.It has been found that protein kinase C inhibitors of formula I, II, III or IV and their pharmaceutically acceptable salts, hydrates or solvates due to their detected activity, for example, the ability to inhibit protein kinase C isoenzymes, such as protein kinase C β-1 and β-2, which are described , for example, in US 5545636, can be used to treat conditions associated with diabetes mellitus and its complications, as well as other diseases associated with increased levels of β-1 and β-2 isoenzymes, such as ischemia, inflammation, diseases of the central nervous system, heart but vascular disease, dermatological disease, Alzheimer's disease and cancer.

При создании изобретения было установлено, что ингибиторы протеинкиназы С формулы I, II, III или IV, например формулы Ia, Ib, IIа и IIIа, и их фармацевтически приемлемые соли, гидраты или сольваты можно применять для лечения и предупреждения отторжения трансплантата органа, ткани или клетки, например для лечения реципиентов плотных органов или тканей, например трансплантатов сердца, легкого, комбинированного трансплантата сердца-легкого, печени, почки, поджелудочной железы, кожи или роговицы, или клеток, например стволовых клеток или инсулинпродуцирующих клеток, например панкреатических островковых клеток. Они могут также быть показаны для предупреждения реакции «трансплантат против хозяина», например, после трансплантации костного мозга.When the invention was created, it was found that protein kinase C inhibitors of formula I, II, III or IV, for example, formulas Ia, Ib, IIa and IIIa, and their pharmaceutically acceptable salts, hydrates or solvates can be used to treat and prevent organ, tissue or cells, for example, for treating recipients of dense organs or tissues, for example, heart, lung, heart, lung, kidney, pancreas, skin, or cornea grafts, or cells, for example, stem cells or insulin producers ruyuschih cells, e.g. pancreatic islet cells. They may also be indicated to prevent a graft versus host reaction, for example, after bone marrow transplantation.

Конкретными вариантами осуществления настоящего изобретения являются:Specific embodiments of the present invention are:

1.1. Способ лечения отторжения трансплантата органа, ткани или клетки, например отторжения трансплантата сердца, легкого, комбинированного трансплантата сердца-легкого, печени, почки, поджелудочной железы, кожи или роговицы, и для предупреждения реакции «трансплантат против хозяина» у индивидуума, который нуждается в этом, заключающийся в том, что индивидууму вводят в терапевтически эффективном количестве ингибитор протеинкиназы С формулы I, II, III или IV, например формулы Ia, Ib, IIа и IIIа, предпочтительно соединение А или Б или его фармацевтически приемлемую соль, гидрат или сольват.1.1. A method for treating organ, tissue or cell transplant rejection, for example, transplantation of a heart, lung, transplant of a heart, lung, liver, kidney, pancreas, skin or cornea transplant, and for preventing a transplant versus host transplant reaction in an individual in need thereof consisting in the fact that a protein kinase inhibitor C of the formula I, II, III or IV, for example of the formula Ia, Ib, IIa and IIIa, preferably a compound A or B or its pharmaceutically, is administered to the individual in a therapeutically effective amount acceptable salt, hydrate or solvate.

Кроме того, при создании изобретения было установлено, что ингибиторы протеинкиназы формулы I, II, III или IV, например формулы Iа, Ib, IIа и IIIa, и их фармацевтически приемлемые соли или сольваты можно применять для лечения и предупреждения аутоиммунных заболеваний, таких, например, как саркоидоз, фиброз легкого, идиопатическая интерстициальная пневмония, обструктивное заболевание дыхательных путей, включая такие состояния, как астма, наследственная астма, приобретенная астма, обусловленная пылью астма, прежде всего хроническая или трудноизлечимая астма (например, астма замедленного типа и гиперчувствительность дыхательных путей), бронхит, включая бронхиальную астму, юношескую астму, аллергический ревматоидный артрит, системная красная волчанка, синдром нефротической волчанки, тиреоидит Хасимото, рассеянный склероз, тяжелая псевдопаралитическая хромота, увеит, нефротический синдром, зависящий от стероидов, и устойчивый к стероидам нефроз, пустулезный акродерматит, аллергический энцефаломиелит, гломерулонефрит, псориаз, псориатический артрит, атопическая экзема (атопический дерматит), контактный дерматит и другие экзематозные дерматиты, себорейная экзема, красный плоский лишай, пузырчатка, буллезный пемфигоид, врожденный буллезный эпидермолиз, крапивница, ангионевротический отек, васкулиты, эритемы, кожные эозинофилии, угри, гнездная алопеция, эозинофильный фасцит, атеросклероз, конъюнктивит, кератоконъюнктивит, кератит, весенний конъюнктивит, увеит, связанный с болезнью Бехчета, герпетический кератит, коническая роговица, дистрофия роговицы эпителиальная, помутнение роговицы белого цвета, окулярная пузырчатка, разъедающая язва роговицы, склерит, серьезное внутриокулярное воспаление, воспаление слизистой оболочки или кровеносных сосудов, такие как опосредуемые лейкотриеном В4 заболевания, язвы желудка, сосудистое повреждение, вызванное ишемическими болезнями и тромбозом, ишемическое заболевание кишечника, воспалительное заболевание кишечника (например, болезнь Крона и неспецифический язвенный колит), некротизирующий энтероколит, болезни почек, включая интерстициальный нефрит, синдром Гудпасчера, гемолитический уремический синдром и диабетическая нефропатия, нервные заболевания, выбранные из группы, включающей дерматомиозит, болезнь Гийена-Барре, болезнь Меньера и радикулопатию, болезни, связанные с нарушением коллагена, включая склеродермию, гранулематоз Вегенера и синдром Шегрена, хронические аутоиммунные болезни печени, включая аутоиммунный гепатит, первичный билиарный цирроз и склерозирующий холангит, частичная резекция печени, острый некроз печени (например, некроз, вызванный токсинами, вирусным гепатитом, шоком или гипоксией), вирусный гепатит типа В, гепатит «не-А, не-В» и цирроз, быстро развивающийся гепатит, пустулезный псориаз, болезнь Бехчета, активный хронический гепатит, синдром Эванса, поллиноз, идиопатический гипопаратиреоз, болезнь Аддисона, аутоиммунный атрофический гастрит, волчаночный гепатит, тубулоинтерстициальный нефрит, мембранозный нефрит, боковой амиотрофический склероз или ревматическая атака, прежде всего воспалительные заболевания кишечника (ВЗК), такие как болезнь Крона и неспецифический язвенный колит; боковой амиотрофический склероз (АМК); рассеянный склероз; ревматоидный артрит или гепатит С.In addition, when the invention was created, it was found that protein kinase inhibitors of formula I, II, III or IV, for example, formulas Ia, Ib, IIa and IIIa, and their pharmaceutically acceptable salts or solvates can be used to treat and prevent autoimmune diseases, such as such as sarcoidosis, pulmonary fibrosis, idiopathic interstitial pneumonia, obstructive airway disease, including conditions such as asthma, hereditary asthma, acquired asthma, dust-related asthma, especially chronic or difficult to cure May asthma (e.g., delayed-type asthma and hypersensitivity of the respiratory tract), bronchitis, including bronchial asthma, juvenile asthma, allergic rheumatoid arthritis, systemic lupus erythematosus, nephrotic lupus erythematosus syndrome, Hashimoto thyroiditis, multiple sclerosis, severe pseudoparalytic nephrotic lameness, uveitis steroid-dependent and steroid-resistant nephrosis, pustular acrodermatitis, allergic encephalomyelitis, glomerulonephritis, psoriasis, psoriatic arthritis, atopic eczema (atopic th dermatitis), contact dermatitis and other eczematous dermatitis, seborrheic eczema, lichen planus, pemphigus, bullous pemphigoid, congenital bullous epidermolysis, urticaria, angioneurotic edema, vasculitis, erythema, cutaneous eosinophilia, atrophyotia, nemorrhagia, nemorrhoidis, nemorrhoidis, nemorrhoidis, nemorrhoidis, nemorrhoidis, nemorrhosis, nemorrhoidis, nemorrhoidis, nasal echinosciosis, erytherosis, nemorrhoidis, nodosa, nodosa, nodosa, naprilosis, nemorrhoidis, nodosa, nodosa, nodosa, nodosa, naprilosis, nemorrhoidis, acne, erythematosus, acne , keratoconjunctivitis, keratitis, spring conjunctivitis, uveitis associated with Behcet’s disease, herpetic keratitis, conical cornea, epithelial corneal dystrophy, white corneal opacity, ocular pu A stigma that corrodes a corneal ulcer, scleritis, severe intraocular inflammation, inflammation of the mucous membrane or blood vessels, such as leukotriene-mediated B4 diseases, stomach ulcers, vascular damage caused by ischemic diseases and thrombosis, ischemic bowel disease, inflammatory disease, e.g. bowel disease and ulcerative colitis), necrotizing enterocolitis, kidney disease, including interstitial nephritis, Goodpasture syndrome, hemolytic uremic syndrome m and diabetic nephropathy, nervous diseases selected from the group including dermatomyositis, Guillain-Barré disease, Meniere's disease and radiculopathy, diseases associated with collagen disorders, including scleroderma, Wegener's granulomatosis and Sjogren's syndrome, chronic autoimmune liver diseases, including autoimmune hepatitis, hepatitis primary biliary cirrhosis and sclerosing cholangitis, partial liver resection, acute liver necrosis (e.g., necrosis caused by toxins, viral hepatitis, shock or hypoxia), type B viral hepatitis, he non-A, non-B, and cirrhosis, rapidly developing hepatitis, pustular psoriasis, Behcet’s disease, active chronic hepatitis, Evans syndrome, hay fever, idiopathic hypoparathyroidism, Addison’s disease, autoimmune atrophic gastritis, lupus hepatitis, tubulo-nephritis, nephritis amyotrophic lateral sclerosis or rheumatic attack, especially inflammatory bowel disease (IBD), such as Crohn's disease and ulcerative colitis; amyotrophic lateral sclerosis (AMK); multiple sclerosis; rheumatoid arthritis or hepatitis C.

Таким образом, в настоящем изобретении предложен:Thus, the present invention provides:

1.2. Способ лечения или предупреждения аутоиммунных заболеваний, например, указанных выше, у индивидуума, который нуждается в этом, заключающийся в том, что вводят указанному индивидууму ингибитор протеинкиназы С формулы I, II, III или IV, например формулы Ia, Ib, IIа и IIIa, или его фармацевтически приемлемую соль, гидрат или сольват в терапевтически эффективном количестве.1.2. A method of treating or preventing autoimmune diseases, for example, as described above, in an individual who needs it, comprising administering to said individual a protein kinase C inhibitor of formula I, II, III or IV, for example of formula Ia, Ib, IIa and IIIa, or a pharmaceutically acceptable salt, hydrate or solvate thereof in a therapeutically effective amount.

В контексте настоящего описания понятия «обработка» или «лечение» оба относятся к профилактическому или превентивному лечению, а также к терапевтическому или изменяющему состояние болезни лечению, включая лечение пациентов, которые имеют риск нахождения в контакте с болезнью или для которых ожидается, что они могут иметь контакт с заболеванием, а также пациентов, которые уже больны или у которых поставлен диагноз, что они страдают заболеванием или медицинским состоянием.In the context of the present description, the terms “treatment” or “treatment” both refer to prophylactic or preventive treatment, as well as therapeutic or disease-modifying treatment, including the treatment of patients who are at risk of being in contact with the disease or who are expected to be able to have contact with the disease, as well as patients who are already sick or who have been diagnosed with a disease or medical condition.

Конкретными вариантами осуществления настоящего изобретения являются также:Specific embodiments of the present invention are also:

2. Ингибитор протеинкиназы С формулы I, II, III или IV, предпочтительно соединение А или Б, или его фармацевтически приемлемая соль, гидрат или сольват, предназначенный для применения в качестве иммунодепрессанта или иммуномодулятора, например, в указанных выше способах.2. A protein kinase C inhibitor of formula I, II, III or IV, preferably Compound A or B, or a pharmaceutically acceptable salt, hydrate or solvate thereof, for use as an immunosuppressant or immunomodulator, for example, in the above methods.

3. Ингибитор протеинкиназы С формулы I, II, III или IV, предпочтительно соединение А или Б, или его фармацевтически приемлемая соль, гидрат или сольват, предназначенный для приготовления фармацевтической композиции, которую применяют в качестве иммунодепрессанта или иммуномодулятора, например, в указанных выше способах.3. A protein kinase C inhibitor of formula I, II, III or IV, preferably compound A or B, or a pharmaceutically acceptable salt, hydrate or solvate thereof, for the manufacture of a pharmaceutical composition that is used as an immunosuppressant or immunomodulator, for example, in the above methods .

4. Фармацевтическая композиция, предназначенная для применения в качестве иммунодепрессанта или иммуномодулятора, например, в указанных выше способах, которая содержит ингибитор протеинкиназы С формулы I, II, III или IV, предпочтительно соединение А или Б, или его фармацевтически приемлемую соль, гидрат или сольват в сочетании с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми разбавителями или носителями.4. A pharmaceutical composition intended for use as an immunosuppressant or immunomodulator, for example, in the above methods, which contains a protein kinase inhibitor C of the formula I, II, III or IV, preferably compound A or B, or a pharmaceutically acceptable salt, hydrate or solvate thereof in combination with one or more pharmaceutically acceptable diluents or carriers.

Возможность применения соединений, предлагаемых в изобретении, для лечения и/или предупреждения указанных выше заболеваний и состояний можно продемонстрировать с помощью стандартных опытов на животных или клинических испытаний, которые описаны ниже.The possibility of using the compounds of the invention for the treatment and / or prevention of the above diseases and conditions can be demonstrated using standard animal experiments or clinical trials, which are described below.

In vitro: MLR (реакция лимфоцитов в смешанной культуре)In vitro: MLR (mixed cell lymphocyte response)

Для демонстрации иммуносупрессорного действия соединений, которые предназначены для применения в способе, предлагаемом в изобретении, использовали мышиную модель MLR, например, описанную у Т.Мео в «Immunological Methods», под ред. L. Lefkovits и В. Peris, Academic Press, NY, 1979, с.227-239. Селезеночные клетки (0,5×10⁶) из мышей линии Balb/c (самки, возрастом 8-10 недель) совместно инкубируют в течение 5 дней с 0,5×10⁶ облученных (2000 рад) или обработанных митомицином С селезеночных клеток мышей линии СВА (самки, возрастом 8-10 недель). Облученные аллогенные клетки индуцируют пролиферативный ответ в селезеночных клетках линии Balb/c, который можно оценивать по включению в ДНК меченого предшественника. Поскольку клетки-стимуляторы облучены (или обработаны митомицином С), они не отвечают на клетки линии Balb/c пролиферативным ответом, но сохраняют свою антигенность. Антипролиферативное действие соединений на клетки линии Balb/c оценивают с использованием различных разведений и рассчитывают концентрацию, приводящую к 50%-ному ингибированию клеточной пролиферации (IC₅₀). Установлено, что значение IC₅₀для соединения Б составляет 195нМ.To demonstrate the immunosuppressive effect of the compounds that are intended for use in the method of the invention, a murine MLR model was used, for example, described by T. Meo in “Immunological Methods”, ed. L. Lefkovits and B. Peris, Academic Press, NY, 1979, pp. 227-239. Spleen cells (0.5 × 10⁶ ) from Balb / c mice (females, 8-10 weeks old) were incubated together for 5 days with 0.5 × 10⁶ irradiated (2000 rad) or mitomycin C treated splenic cells of mice line CBA (females, 8-10 weeks old). Irradiated allogeneic cells induce a proliferative response in the spleen cells of the Balb / c line, which can be assessed by the inclusion of a labeled precursor in the DNA. Since stimulant cells are irradiated (or treated with mitomycin C), they do not respond to Balb / c cells with a proliferative response, but retain their antigenicity. The antiproliferative effect of the compounds on Balb / c cells was evaluated using various dilutions and the concentration resulting in 50% inhibition of cell proliferation was calculated (IC₅₀ ). The IC₅₀ value for compound B was found to be 195 nm.

In vitro: Анализ протеинкиназы С (ПКС)In vitro: Analysis of protein kinase C (PCS)

Активность соединений, предлагаемых в изобретении, в отношении ПКС оценивают с помощью следующего метода. Анализ осуществляют в белых 384-луночных титрационных микропланшетах с прозрачным дном, которые не имеют связывающей поверхности. Реакционная смесь (25 мкл) содержит 1,5 мкМ тридекапептидный субстрат-акцептор, который имитирует последовательность псевдосубстрата ПКСα с заменой Аlа → Ser, 10 мкМ³³Р-АТФ, 10 мМ Mg(NO₃)₂, 0,2 мМ CaCl₂, белок ПКС, концентрация которого варьируется от 25 до 400 нг/мл (в зависимости от применяемого изотипа), липидные пузырьки (содержащие 30 мол.% фосфатидилсерина, 5 мол.% DAG и 65 мол.% фосфатидилхолина) в конечной концентрации липида 0,5 мМ, в 20 мМ трис-НСl-буфере, рН 7,4+0,1% БСА. Инкубацию осуществляют в течение 60 мин при комнатной температуре. Реакцию прекращают, добавляя 50 мкл стоп-смеси (100 мМ ЭДТК, 200 мкМ АТФ, 0,1% Triton Х-100, 0,375 мг/лунку покрытых стрептавидином SPA-гранул в забуференном фосфатом физиологическом растворе, в присутствии Са, Mg или без них (w/o)). После инкубации в течение 10 мин при комнатной температуре суспензию перемешивают в течение 10 мин при 300×g. Включенную радиоактивность оценивают с помощью счетчика типа Trilux в течение 1 мин. Значения IC₅₀ определяют с помощью общепринятого метода путем инкубации ингибитора, полученная серийным разведением концентрация которого составляет от 1 до 1000 мкМ. Значения IC₅₀ рассчитывают из графика, полученного путем аппроксимации кривой с помощью программы XL fit^®.The activity of the compounds proposed in the invention, in relation to the PCD is evaluated using the following method. The analysis is carried out in white 384-well microtiter plates with a transparent bottom, which do not have a binding surface. The reaction mixture (25 μl) contains 1.5 μM acceptor-acceptor substrate that mimics the sequence of pseudosubstrate PKSα with Ala → Ser, 10 μM³³ P-ATP, 10 mM Mg (NO₃ )₂ , 0.2 mM CaCl₂ , PKC protein, the concentration of which varies from 25 to 400 ng / ml (depending on the isotype used), lipid vesicles (containing 30 mol.% phosphatidylserine, 5 mol.% DAG and 65 mol.% phosphatidylcholine) in a final lipid concentration of 0.5 mM, in 20 mM Tris-HCl buffer, pH 7.4 + 0.1% BSA. Incubation is carried out for 60 minutes at room temperature. The reaction is stopped by adding 50 μl of the stop mixture (100 mM EDTA, 200 μM ATP, 0.1% Triton X-100, 0.375 mg / well streptavidin-coated SPA granules in phosphate buffered saline, in the presence or absence of Ca, Mg (w / o)). After incubation for 10 min at room temperature, the suspension is stirred for 10 min at 300 × g. The incorporated radioactivity was evaluated using a Trilux type counter for 1 minute. IC₅₀ values are determined by a conventional method by incubation of an inhibitor, the concentration of which is obtained by serial dilution from 1 to 1000 μM. IC₅₀ values are calculated from a graph obtained by fitting a curve using the XL fit^® program.

В этом анализе установлено, что ингибирующее действие в отношении ПКС соединений, предлагаемых в изобретении, например соединения формулы IIа, характеризуется значением IC₅₀≤1 мкМ, предпочтительно ≤10 нМ. Например, ингибирующее действие соединения Б в отношении ПКСα характеризуется значением IC₅₀ 3,0 нМ, ПКСβ - значением IC₅₀ 2,0 нМ, ПКСδ - значением IC₅₀ 2,0 нМ и ПКСε - значением IC₅₀ 2,0 нМ.In this analysis, it was found that the inhibitory effect against PKC of the compounds of the invention, for example the compounds of formula IIa, is characterized by an IC₅₀ value of ≤1 μM, preferably ≤10 nM. For example, the inhibitory effect of compound B against PKSα characterized IC₅₀ value of 3.0 nM, PKSβ - IC₅₀ value of 2.0 nM, PKSδ - IC₅₀ value of 2.0 nM and PKSε - IC₅₀ value of 2.0 nM.

In vivo: Трансплантация сердца кроликамIn vivo: Heart Transplantation for Rabbits

Комбинация применяемых линий: самцы линии Lewis (RT¹ - гаплотип) и линии DA (RT¹ - гаплотип). Животных анестезируют ингаляцией изофлуораном. После гепаринизации крысы-донора через брюшную нижнюю полую вену с одновременным обескровливанием через аорту открывают грудную клетку и сердце быстро охлаждают. На аорту накладывают лигатуру и рассекают дистально от первого ответвления, а плечеголовной ствол рассекают на уровне первой бифуркации. На левую легочную артерию накладывают лигатуру и рассекают, а правую сторону рассекают, но левую оставляют открытой. Все остальные сосуды не рассекают, накладывают на них лигатуру и отделяют и донорское сердце переносят в охлажденный на льду физиологический раствор.The combination of lines used: males of the Lewis line (RT¹ - haplotype) and line DA (RT¹ - haplotype). Animals are anesthetized with isofluorane inhalation. After heparinization of the donor rat through the ventral inferior vena cava with simultaneous bleeding through the aorta, the chest is opened and the heart is quickly cooled. A ligature is applied to the aorta and dissected distally from the first branch, and the brachiocephalic trunk is dissected at the level of the first bifurcation. A ligature is placed on the left pulmonary artery and dissected, and the right side is dissected, but the left side is left open. All other vessels are not dissected, ligated on them and separated and the donor heart is transferred to physiological saline cooled on ice.

Реципиента подготавливают путем рассечения и пережатия брюшной аорты в области под почкой и полой вены. Трансплантат имплантируют с помощью анастомоза «конец в бок», используя однонитчатый шовный материал 10/0, между плечеголовным стволом донора и аортой реципиента и правой легочной артерией донора и полой веной реципиента. Зажимы удаляют, трансплантат располагают ретроабдоминально, содержимое брюшной полости промывают теплым физиологическим раствором и животное зашивают и дают восстановиться под согревающей лампой. Срок жизнеспособности трансплантата оценивают путем ежедневного прошупывания пульсирующего сердца донора через брюшную стенку. Считается, что отторжение является полным, когда сердце перестает биться. У животных, которым вводили орально соединение формулы I, II, III или IV или его фармацевтически приемлемую соль или сольват в суточной дозе от 10 до 30 мг/кг дважды в день (bid), обнаружено удлинение срока жизнеспособности трансплантата. На этой модели удлинение срока жизнеспособности трансплантата на 14, 25, 26 дней обнаружено при использовании соединения А при его введении в дозе 30 мг/кг bid.The recipient is prepared by dissection and clamping of the abdominal aorta in the area under the kidney and vena cava. The graft is implanted using an end-to-side anastomosis using a 10/0 single-stitch suture between the donor’s brachiocephalic stem and the recipient’s aorta and the donor’s right pulmonary artery and the recipient vena cava. The clamps are removed, the graft is placed retroabdominally, the contents of the abdominal cavity are washed with warm saline and the animal is sutured and allowed to recover under a warming lamp. The graft viability is assessed by daily patching of the pulsating heart of the donor through the abdominal wall. It is believed that rejection is complete when the heart stops beating. In animals that were orally administered a compound of formula I, II, III or IV or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof in a daily dose of 10 to 30 mg / kg twice daily (bid), an extension of the transplant viability was found. In this model, an extension of the graft viability by 14, 25, 26 days was found when using compound A when it was administered at a dose of 30 mg / kg bid.

In vivo: Модель реакции «трансплантат против хозяина»In vivo: transplant versus host reaction model

Селезеночные клетки (2×10⁷) из крыс линии Wistar/F инъецируют подкожно в подушечку правой задней лапы гибридных крыс линии (Wistar/F × Fischer 344) поколения F₁. Подушечку левой лапы не обрабатывают. Животных обрабатывают тестируемыми соединениями в течение 4 последовательных дней (0-3). Подколенные лимфатические узлы удаляют в день 7 и определяют разницу в массе двух соответствующих лимфатических узлов. Результаты выражают в виде ингибирования увеличения лимфатического узла (в процентах), сравнивая изменение массы лимфатического узла в экспериментальных группах и изменение массы соответствующих лимфатических узлов в группах животных, которые не обрабатывали тестируемым соединением. В этом анализе установлено, что соединение А при его введении в дозе 30 мг/кг bid ингибирует увеличение узла на 60-80%, предпочтительно 70-80%.Spleen cells (2 × 10⁷ ) from Wistar / F rats are injected subcutaneously into the pad of the right hind paw of hybrid rats of the Wistar / F × Fischer 344 generation F₁ . The pad of the left paw is not treated. Animals are treated with test compounds for 4 consecutive days (0-3). The popliteal lymph nodes are removed on day 7 and the difference in mass of the two corresponding lymph nodes is determined. The results are expressed as inhibition of lymph node enlargement (in percent), comparing the change in the mass of the lymph node in the experimental groups and the change in the mass of the corresponding lymph nodes in the groups of animals that were not treated with the test compound. In this analysis, it was found that compound A, when administered at a dose of 30 mg / kg bid, inhibits node enlargement by 60-80%, preferably 70-80%.

In vivo: Лечение рассеянного склероза: модель, полученная с использованием мышей линии SJL/J, хронического прогрессирующего экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита (ЕАЕ)In vivo: Treatment of Multiple Sclerosis: a model obtained using SJL / J mice, a chronic progressive experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE)

Иммунизация: в день 0 самок мышей линии SJL/J иммунизируют (подкожная инъекция в бок) с помощью 200 мкл инокулята, содержащего 500 мкг бычьего базального белка миелина (МВР), эмульгированного в полном адъюванте Фрейнда (CFA). В день 9 мышей подвергают второй бустер-инъекции МВР и дополнительно внутривенно вводят адъювант, содержащий 200 нг токсина В. ertussis. Конечную инъекцию токсином коклюша осуществляют в день 11.Immunization: on day 0, female SJL / J mice were immunized (subcutaneous injection in the flank) with 200 μl of an inoculum containing 500 μg of bovine myelin basal protein (MBP) emulsified in Freund's complete adjuvant (CFA). On day 9, mice were subjected to a second MBP booster injection and an adjuvant containing 200 ng of B. ertussis toxin was additionally administered intravenously. The final injection of pertussis toxin is carried out on day 11.

У большинства иммунизированных МВР мышей серьезный приступ ЕАЕ проявляется к дню 21. За ним следует фаза восстановления, которая начинается примерно в день 25, во время которой у мышей отсутствуют симптомы в течение примерно 20 дней. Затем через 45-47 дней примерно у 50% животных начинается прогрессирующая фаза заболевания. Поэтому терапевтическое лечение тестируемыми соединениями начинают в день 21, когда наличие болезни полностью доказано, и продолжают до дня 70, если не указано иное. Рекомбинантный мышиный интерферон бета (INFβ, фирма Calbiochem/Biosciences) растворяют в физиологическом растворе и вводят путем внутрибрюшинной инъекции 3× в неделю. Соединения, предлагаемые в изобретении, например соединение А, вводят р.о. 5× в неделю путем кормления через желудочный зонд. Мышей в контрольной обработанной наполнителем группе иммунизируют МВР и обрабатывают водой.In most mice immunized with MBP, a serious EAE attack occurs by day 21. This is followed by a recovery phase that starts at about day 25, during which the mice have no symptoms for about 20 days. Then after 45-47 days, approximately 50% of the animals begin a progressive phase of the disease. Therefore, therapeutic treatment with the test compounds begins on day 21, when the presence of the disease is fully proven, and continues until day 70, unless otherwise indicated. Recombinant murine interferon beta (INFβ, Calbiochem / Biosciences) was dissolved in physiological saline and administered by intraperitoneal injection 3 × per week. Compounds of the invention, for example Compound A, are administered p.o. 5 × per week by feeding through a gastric tube. Mice in the vehicle-treated control group were immunized with MBP and treated with water.

Каждая экспериментальная группа состоит из мышей, у которых ежедневно оценивают клинические симптомы ЕАЕ. Фиксируют также коэффициент заболеваемости и день возникновения ЕАЕ. Клиническое проявление ЕАЕ оценивают с помощью балльной шкалы от 0 до 3. Все случаи связанной с болезнью гибели, произошедшей после начала лекарственной терапии, фиксируют, придавая им максимальный балл 3.Each experimental group consists of mice in which the clinical symptoms of EAE are evaluated daily. The incidence rate and day of occurrence of EAE are also recorded. The clinical manifestation of EAE is assessed using a scale from 0 to 3. All cases of illness-related death that occurred after the start of drug therapy were recorded, giving them a maximum score of 3.

Суточные дозы, необходимые для воплощения на практике способа, предлагаемого в настоящем изобретении, должны зависеть, например, от применяемого соединения, хозяина, пути введения и серьезности состояния, подлежащего лечению. Предпочтительная суточная доза составляет от примерно 1 до примерно 1000 мг действующего вещества в виде однократной дозы или разделенных доз.The daily doses required to put into practice the method of the present invention should depend, for example, on the compound used, the host, the route of administration and the severity of the condition to be treated. A preferred daily dose is from about 1 to about 1000 mg of active ingredient in a single dose or in divided doses.

Соединения формулы I, II, III или IV, например формулы Ia, Ib, IIа или IIIa, можно вводить в свободной форме или в форме фармацевтически приемлемой соли, например указанной выше соли. Такие соли можно получать общепринятым методом, и они обладают таким же уровнем активности, что соединения в свободной форме.Compounds of the formula I, II, III or IV, for example, the formulas Ia, Ib, IIa or IIIa, can be administered in free form or in the form of a pharmaceutically acceptable salt, for example the above salt. Such salts can be obtained by the conventional method, and they have the same level of activity as the free-form compounds.

Соединения формулы I, II, III или IV, например формулы Iа, Ib, IIа или IIIa, предпочтительно соединение А или соединение Б, или их фармацевтически приемлемые соли или сольваты можно вводить в виде единственного действующего вещества или в сочетании с другими лекарственными средствами с целью иммуномодуляции, например для лечения или предупреждения острого или хронического отторжения алло- или ксенотрансплантата или аутоиммунного заболевания. Например, их можно применять в сочетании с ингибитором кальцинеурина, например с циклоспорином A, ISA Tx247, FK506, АВТ-281, ASM 981; ингибитором mTOR, например рапамицином, 40-O-(2-гидроксиэтил)рапамицином, CCI779, АВТ578 или рапалогом, например АР23573, АР23464, АР23675, АР23841, ТАРА-93, биолимусом 7 или биолимусом 9 и т.д.; кортикостероидами; циклофосфамидом; азатиопреном; метотрексатом; агонистом рецептора S1P, например FTY 720 или его аналогом; лефлуномидом или его аналогами; мизорибином; микофенольной кислотой или ее солью; например натриевой солью, микофенолятом мофетила; 15-дезоксиспергулином или его аналогами; иммуносупрессорными моноклональными антителами, например моноклональными антителами к рецепторам лейкоцитов, например ГКГ CD2, CD3, CD4, CD 11a/CD18, CD7, CD25, CD27, В7, CD40, CD45, CD58, CD 137, ICOS, CD150 (SLAM), OХ40, 4-1BB, или их лигандами, например CD 154; или другими иммуномодуляторами, например рекомбинантными связывающими молекулами, которые несут по меньшей мере часть внеклеточного домена CTLA4 или его мутанта, например по меньшей мере внеклеточный фрагмент CTLA4 или его мутанта, связанный с не относящейся к CTLA4 белковой последовательностью, например CTLA4Ig (например, депонированный под номером АТСС 68629) или его мутант, например LEA29Y, или с другими ингибиторами молекул адгезии, например с МАт или низкомолекулярными ингибиторами, включая антагонисты LFA-1, антагонисты селектина и антагонисты VLA-4.Compounds of formula I, II, III or IV, for example, formulas Ia, Ib, IIa or IIIa, preferably compound A or compound B, or their pharmaceutically acceptable salts or solvates, may be administered as a single active ingredient or in combination with other drugs for the purpose immunomodulations, for example, for treating or preventing acute or chronic rejection of an allo or xenograft or autoimmune disease. For example, they can be used in combination with a calcineurin inhibitor, for example, cyclosporin A, ISA Tx247, FK506, ABT-281, ASM 981; mTOR inhibitor, for example rapamycin, 40-O- (2-hydroxyethyl) rapamycin, CCI779, АВТ578 or rapalogu, for example AP23573, AP23464, AP23675, AP23841, TAPA-93, biolimus 7 or biolimus 9, etc .; corticosteroids; cyclophosphamide; azathioprene; methotrexate; an S1P receptor agonist, for example FTY 720 or an analogue thereof; leflunomide or its analogues; misoribine; mycophenolic acid or its salt; for example, sodium salt, mycophenolate mofetil; 15-deoxyspergulin or its analogues; immunosuppressive monoclonal antibodies, for example, monoclonal antibodies to leukocyte receptors, for example, MHCs CD2, CD3, CD4, CD 11a / CD18, CD7, CD25, CD27, B7, CD40, CD45, CD58, CD 137, ICOS, CD150 (SLAM), OX40, 4-1BB, or their ligands, for example CD 154; or other immunomodulators, for example, recombinant binding molecules that carry at least a portion of the extracellular domain of CTLA4 or its mutant, for example at least an extracellular fragment of CTLA4 or its mutant, linked to a non-CTLA4 protein sequence, for example CTLA4Ig (e.g., deposited under number ATCC 68629) or a mutant thereof, for example LEA29Y, or with other adhesion molecule inhibitors, for example, with Mabs or low molecular weight inhibitors, including LFA-1 antagonists, selectin antagonists and VLA-4 antagonists.

Согласно вышеизложенному следующими объектами настоящего изобретения являются:According to the foregoing, the following objects of the present invention are:

5. Указанный выше способ, заключающийся в том, что совместно вводят, например одновременно или последовательно, в терапевтически эффективном количестве ингибитор протеинкиназы С формулы I, II, III или IV, например формулы Ia, Ib, IIа или IIIа, например соединение А или соединение Б, или их фармацевтически приемлемую соль, гидрат или сольват и вторую лекарственную субстанцию, которая представляет собой иммунодепрессант или иммуномодулятор, например указанную выше субстанцию.5. The above method, which consists in administering, for example, simultaneously or sequentially, in a therapeutically effective amount, a protein kinase inhibitor C of the formula I, II, III or IV, for example of the formula Ia, Ib, IIa or IIIa, for example, compound A or compound B, or a pharmaceutically acceptable salt, hydrate or solvate thereof, and a second drug substance, which is an immunosuppressant or immunomodulator, for example, the aforementioned substance.

6. Терапевтическая комбинация, например набор, содержащий а) ингибитор протеинкиназы С формулы I, II, III или IV, например формулы Iа, Ib, IIа или IIIа, например соединение А или соединение Б, или его фармацевтически приемлемую соль, гидрат или сольват и б) по меньшей мере один второй агент, выбранный из лекарственного средства, обладающего иммуносуппрессорным или иммуномодулирующим действием. Компонент а) и компонент б) можно применять одновременно или последовательно. Набор может включать инструкцию по его применению.6. A therapeutic combination, for example, a kit comprising a) a protein kinase C inhibitor of formula I, II, III or IV, for example, formula Ia, Ib, IIa or IIIa, for example compound A or compound B, or a pharmaceutically acceptable salt, hydrate or solvate thereof, and b) at least one second agent selected from a drug having an immunosuppressive or immunomodulatory effect. Component a) and component b) can be used simultaneously or sequentially. The kit may include instructions for its use.

Когда ингибитор протеинкиназы С формулы I, II, III или IV, например формулы Iа, Ib, IIа или IIIа, или его фармацевтически приемлемую соль или сольват вводят в сочетании с другим лекарственным средством, обладающим иммуносуппрессорным или иммуномодулирующим действием, например, для предупреждения или лечения острого или хронического отторжения трансплантата или указанного выше аутоиммунного заболевания, дозы применяемого совместно иммуносуппрессанта или иммуномодулятора, естественно, должны зависеть от типа применяемого для совместного введения лекарственно средства, например от того, представляет оно собой стероид или циклоспорин, специфичности применяемого лекарственного средства, состояния, подлежащего лечению, или т.д.When a protein kinase C inhibitor of formula I, II, III or IV, for example, formula Ia, Ib, IIa or IIIa, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, is administered in combination with another drug having an immunosuppressive or immunomodulatory effect, for example, to prevent or treat acute or chronic transplant rejection or the above autoimmune disease, the dose of the immunosuppressant or immunomodulator used together, of course, should depend on the type used for co-administration Ia drug, for example on whether it is a steroid or a cyclosporin, specificity drug employed, the condition being treated, etc. or

Соединение А и соединение Б являются предпочтительными, прежде всего для применения с целью лечения или предупреждения отторжения трансплантата и предупреждения реакции «трансплантат против хозяина».Compound A and compound B are preferred, especially for use to treat or prevent transplant rejection and to prevent the graft versus host reaction.

Claims (4)

Translated fromRussian

1. Применение соединения, выбранного из 3-(1-метил-1Н-индол-3-ил)-4-[1-{(1-пиридин-2-илметил)пиперидин-4-ил}-1Н-индол-3-ил]пиррол-2,5-диона или 3-(1-метил-1Н-индол-3-ил)-4-[1-(пиперидин-4-ил)-1Н-индол-3-ил]пиррол-2,5-диона или их фармацевтически приемлемой соли, гидрата или сольвата для приготовления фармацевтической композиции, предназначенной для лечения и предупреждения отторжения трансплантата органа или ткани и для предупреждения реакции «трансплантат против хозяина».1. Use of a compound selected from 3- (1-methyl-1H-indol-3-yl) -4- [1 - {(1-pyridin-2-ylmethyl) piperidin-4-yl} -1H-indol-3 -yl] pyrrol-2,5-dione or 3- (1-methyl-1H-indol-3-yl) -4- [1- (piperidin-4-yl) -1H-indol-3-yl] pyrrole- 2,5-dione or a pharmaceutically acceptable salt, hydrate or solvate thereof for the preparation of a pharmaceutical composition for the treatment and prevention of organ or tissue transplant rejection and for preventing the graft versus host reaction.2. Применение соединения, выбранного из 3-(1-метил-1Н-индол-3-ил)-4-[1-{(1-пиридин-2-илметил)пиперидин-4-ил}-1Н-индол-3-ил]пиррол-2,5-диона или 3-(1-метил-1Н-индол-3-ил)-4-[1-(пиперидин-4-ил)-1Н-индол-3-ил]пиррол-2,5-диона или их фармацевтически приемлемой соли, гидрата или сольвата для лечения и предупреждения отторжения трансплантата органа или ткани и для предупреждения реакции «трансплантат против хозяина».2. Use of a compound selected from 3- (1-methyl-1H-indol-3-yl) -4- [1 - {(1-pyridin-2-ylmethyl) piperidin-4-yl} -1H-indol-3 -yl] pyrrol-2,5-dione or 3- (1-methyl-1H-indol-3-yl) -4- [1- (piperidin-4-yl) -1H-indol-3-yl] pyrrole- 2,5-dione or a pharmaceutically acceptable salt, hydrate or solvate thereof for the treatment and prevention of organ or tissue graft rejection and for preventing the graft versus host reaction.3. Фармацевтическая композиция, которая содержит (а) соединение, выбранное из 3-(1-метил-1Н-индол-3-ил)-4-[1-{(1-пиридин-2-илметил)пиперидин-4-ил}-1Н-индол-3-ил]пиррол-2,5-диона или 3-(1-метил-1Н-индол-3-ил)-4-[1-(пиперидин-4-ил)-1Н-индол-3-ил]пиррол-2,5-диона или их фармацевтически приемлемой соли, гидрата или сольвата и (б) по меньшей мере один второй агент, представляющий собой лекарственное средство, обладающее иммуносупрессорным или иммуномодулирующим действием.3. A pharmaceutical composition that contains (a) a compound selected from 3- (1-methyl-1H-indol-3-yl) -4- [1 - {(1-pyridin-2-ylmethyl) piperidin-4-yl } -1H-indol-3-yl] pyrrol-2,5-dione or 3- (1-methyl-1H-indol-3-yl) -4- [1- (piperidin-4-yl) -1H-indole -3-yl] pyrrole-2,5-dione or a pharmaceutically acceptable salt, hydrate or solvate thereof, and (b) at least one second agent, which is a drug having an immunosuppressive or immunomodulating effect.4. Способ лечения, или предупреждения отторжения трансплантата органа или ткани или аутоиммунного заболевания, или для предупреждения реакции «трансплантат против хозяина» у индивидуума, который нуждается в этом, заключающийся в том, что индивидууму вводят в терапевтически эффективном количестве соединение, выбранное из 3-(1-метил-1Н-индол-3-ил)-4-[1-{(1-пиридин-2-илметил)пиперидин-4-ил}-1Н-индол-3-ил]пиррол-2,5-диона или 3-(1-метил-1Н-индол-3-ил)-4-[1-(пиперидин-4-ил)-1Н-индол-3-ил]пиррол-2,5-диона, или их фармацевтически приемлемой соли, гидрата или сольвата.4. A method of treating or preventing organ or tissue transplant rejection or an autoimmune disease, or to prevent a graft versus host reaction in an individual who needs it, comprising administering to the individual a therapeutically effective amount of a compound selected from 3- (1-methyl-1H-indol-3-yl) -4- [1 - {(1-pyridin-2-ylmethyl) piperidin-4-yl} -1H-indol-3-yl] pyrrole-2,5- dione or 3- (1-methyl-1H-indol-3-yl) -4- [1- (piperidin-4-yl) -1H-indol-3-yl] pyrrole-2,5-dione, or their pharmaceutically acceptable salt, hydrate or solvate.