

Изобретение относится к птицеводству, а именно к способу количественного учета проникновения марганца через скорлупу в яйца при предынкубационной вакуумной обработке растворами сукцината марганца.The invention relates to poultry, and in particular to a method for quantifying the penetration of manganese through the shell into eggs during pre-incubation vacuum treatment with manganese succinate solutions.
Известен способ глубинной обработки яиц перед инкубированием для предотвращения трансовариальной передачи микоплазмоза птиц (Воробьев С.А., Умняшкин В.Г., Сухарев Ю.Н., 1981; Бессарабов Б.Ф., Сушкова Н.К., 1990; Андреев Е.М., Желаннова М.Е., Тегина Е.Е. и др., 1992). Данный метод, взятый нами в качестве прототипа, заключается в том, что лекарственное вещество проникает через поры яичной скорлупы в инкубационные яйца по методу прямого перепада давления. Однако этот способ имеет ряд недостатков: не проводится количественный учет проникшего вещества в инкубационные яйца, распределение препарата в белке и желтке яиц, а также нетехнологичность обработки яиц.There is a method of deep processing of eggs before incubation to prevent transovarian transmission of mycoplasmosis of birds (Vorobyov S.A., Umnyashkin V.G., Sukharev Yu.N., 1981; Bessarabov B.F., Sushkova N.K., 1990; Andreev E .M., Zhelannova M.E., Tegina E.E. et al., 1992). This method, taken as a prototype, consists in the fact that the drug penetrates through the pores of the eggshell into the hatching eggs by the direct differential pressure method. However, this method has several disadvantages: there is no quantitative accounting of the penetrated substance in the hatching eggs, the distribution of the drug in the protein and yolk of the eggs, as well as the low-tech processing of the eggs.
Задачей настоящего изобретения является определение структуры и физико-химических свойств сукцината марганца (Succ-Mn) тетрагидрата, а также количественного учета проникновения его при однократной предынкубационой обработке яиц различными по концентрации растворами.The objective of the present invention is to determine the structure and physico-chemical properties of manganese succinate (Succ-Mn) tetrahydrate, as well as quantifying its penetration during a single pre-incubation treatment of eggs with different concentration solutions.
Технический результат заключается в том, что при проникновении через скорлупу Succ-Mn тетрагидрата изменяется соотношение микроэлементов в желтке и белке яйца, увеличивается масса марганца в желтке, повышается активность фермента аспартатаминотрансферазы (АсАТ), а активность щелочной фосфатазы снижается в гомогенате 19-сут эмбрионов и активируются различные процессы эмбриогенеза.The technical result consists in the fact that when penetrating through the shell of Succ-Mn tetrahydrate, the ratio of trace elements in the yolk and egg protein changes, the mass of manganese in the yolk increases, the activity of the aspartate aminotransferase (AsAT) enzyme increases, and the activity of alkaline phosphatase decreases in the homogenate of 19-day embryos and various embryogenesis processes are activated.
Технический результат достигается тем что способ количественного определения проникновения сукцината марганца тетрагидрата через скорлупу в инкубационное яйцо кур характеризуется тем, что инкубационные яйца контрольной и опытных партий подвергают обработке раствором Succ-Mn методом вакуумного подсоса, после обработки яйца инкубируют в инкубаторе в течение 24 часов, после чего отбирают от каждой партии яйца для дальнейших исследований, при этом из яиц берут пробы белка и желтка, которые помещают в термостат при температуре +60°С и высушивают до постоянной массы, а полученный таким образом биоматериал методом атомно-абсорбционной спектрометрии исследуют на содержание микроэлементов марганца, меди, цинка, железа, а также на содержание натрия пламенно-фотометрическим методом, на 19 сутки от каждой партии отбирают несколько яиц с развивающимися эмбрионами, при этом эмбрионы с желточным мешком, а затем и без него взвешивают, после чего каждый эмбрион без желточного мешка подвергают гомогенизации, расчет количества микромолей Succ-Mn, прошедшего через скорлупу определяют по формуле: где:The technical result is achieved by the fact that the method for quantitative determination of the penetration of manganese succinate tetrahydrate through the shell into the hatching egg of chickens is characterized in that the hatching eggs of the control and experimental lots are subjected to succ-Mn solution by vacuum suction, after processing the eggs are incubated in the incubator for 24 hours, after which is taken from each batch of eggs for further research, while samples of protein and yolk are taken from the eggs, which are placed in a thermostat at a temperature of + 60 ° C and dried they are removed to constant weight, and the biomaterial thus obtained is examined by atomic absorption spectrometry for the content of trace elements manganese, copper, zinc, iron, as well as for the sodium content by the flame photometric method, several eggs with developing embryos are selected from each batch on day 19, the embryos with the yolk sac and then without it are weighed, after which each embryo without the yolk sac is homogenized, the calculation of the number of micromoles of Succ-Mn passed through the shell is determined by the shape e: Where:
Х - количество Succ-Mn, тетрагидрата, проникшего в яйцо, мкмоль;X is the amount of Succ-Mn, tetrahydrate, penetrated into the egg, mmol;
288,94 - молекулярная масса Succ-Mn (C8H10O8Mn), моль;288.94 — molecular weight of Succ-Mn (C8 H10 O8 Mn), mol;
T - концентрация марганца в опытной пробе, мкмоль/яйцо;T is the concentration of manganese in the experimental sample, μmol / egg;
K - концентрация марганца в контрольной пробе, мкмоль/яйцо;K is the concentration of manganese in the control sample, µmol / egg;
54,94 - атомная масса марганца.54.94 - the atomic mass of manganese.
Биоматериалом исследований служат: желток, белок и скорлупа яиц, а также 19-сут эмбрионы, полученные из яиц, которые подверглись предынкубационной обработке различными по концентрации растворами Succ-Mn тетрагидрата методом вакуумного подсоса. После обработки яйца инкубируют при стандартных условиях в течение суток. По истечению 24 ч от каждой партии отбирают необходимое количество яиц для дальнейших исследований. Из яиц берут пробы белка и желтка, которые помещают в термостат при температуре +60ºС и высушивают до постоянной массы. На 19 сут инкубации от каждой партии отбирают несколько яиц с развившимися эмбрионами. Эмбрионы вместе с желточным мешком, а затем без него взвешивают. После этого каждый эмбрион без желточного мешка подвергается гомогенезированию.The research biomaterials are: yolk, protein, and egg shells, as well as 19-day embryos obtained from eggs that underwent pre-incubation treatment with various concentrations of Succ-Mn tetrahydrate solutions by vacuum suction. After processing, the eggs are incubated under standard conditions for a day. After 24 hours, the required number of eggs is taken from each batch for further research. Samples of protein and yolk are taken from the eggs, which are placed in a thermostat at a temperature of + 60 ° C and dried to constant weight. On the 19th day of incubation, several eggs with developed embryos are selected from each batch. Embryos with the yolk sac and then without it are weighed. After that, each embryo without a yolk sac is homogenized.
Пример 1. Рентгенодифракционным исследованием монокристалла размером 0,45×0,30×0,25 мм устанавливают структуру сукцината марганца тетрагидрата на дифрактометре CAD 4 Enraf-Nonius при 293 К. Структура расшифрована прямым методом и уточнена в анизотронном приближении. Установлено, что монокристалл сукцината марганца тетрагидрата кристаллизируется в рацемической (центросимметрической) пространственной группе. Структура олигомерная: {Mn2+·4H2O·2(-ООС-СН2-СН2-СОО-)}n, катион тетрагидрат Mn2+·4H2O координирует с двумя дианионами янтарной кислоты, образуя олигомерные цепочки (фиг.1, 2). Основные физико-химические показатели сукцината марганца тетрагидрата представлены в таблице 1.Example 1. An X-ray diffraction study of a single crystal with a size of 0.45 × 0.30 × 0.25 mm establishes the structure of manganese succinate tetrahydrate on a CAD 4 Enraf-Nonius diffractometer at 293 K. The structure was solved by the direct method and refined in the anisotron approximation. It was found that a single crystal of manganese succinate tetrahydrate crystallizes in the racemic (centrosymmetric) space group. The structure is oligomeric: {Mn2+ · 4H2 O · 2 (- OOS-CH2 -CH2 -COO-)}n , the cation tetrahydrate Mn2+ · 4H2 O coordinates with two succinic acid dianions, forming oligomeric chains (FIG. .12). The main physical and chemical parameters of manganese succinate tetrahydrate are presented in table 1.
Пример 2. Инкубационные яйца кур кросса СК-4 «Русь», полученные от контрольной и четырех опытных партий, подвергались обработке растворами Succ-Mn с различной концентрацией методом вакуумного подсоса. После обработки яйца инкубировали в инкубаторе при стандартных условиях в течение суток. По истечении 24 ч от каждой партии отбирали необходимое количество яиц для дальнейших исследований. Из яиц берут пробы белка и желтка, которые помещают в термостат при температуре +60°С и высушивают до постоянной массы. Полученный таким образом биоматериал методом атомно-абсорбционной спектрофотометрии (прибор AAA1N) исследуют на содержание микроэлементов: марганца, меди, цинка, железа по ГОСТу РФ 51637-2000, а также на содержание натрия по ГОСТу 30503-97 пламенно-фотометрическим методом на приборе ПАЖ-2.Example 2. The incubation eggs of hens cross-country SK-4 "Rus", obtained from the control and four experimental lots, were treated with Succ-Mn solutions with different concentrations by vacuum suction. After processing, the eggs were incubated in an incubator under standard conditions for a day. After 24 hours, the required number of eggs was taken from each batch for further research. Samples of protein and yolk are taken from the eggs, which are placed in a thermostat at a temperature of + 60 ° C and dried to constant weight. Thus obtained biomaterial by atomic absorption spectrophotometry (device AAA1N) is examined for the content of trace elements: manganese, copper, zinc, iron in accordance with GOST RF 51637-2000, as well as for the sodium content in accordance with GOST 30503-97 by flame photometric method on the PAJ- device 2.
На 19 сут инкубации от каждой партии отбирали несколько яиц с развившимися эмбрионами. Эмбрионы вместе с желточным мешком, а затем без него взвешивали. После этого каждый эмбрион без желточного мешка подвергался гомогенизированию. Микро- и макроэлементный состав желтка яиц после предынкубационой обработки представлен в таблице 2.On the 19th day of incubation, several eggs with developed embryos were selected from each batch. The embryos, together with the yolk sac, and then without it, were weighed. After that, each embryo without a yolk sac was homogenized. The micro and macroelement composition of the egg yolk after pre-incubation treatment is presented in table 2.
Пример 3. Способ по примеру 2. Микро- и макроэлементный состав белка яиц после предынкубационой обработки представлен в таблице 3. Как видно из таблицы 3, не во всех случаях отмечаются достоверные различия по содержанию Mn в белке яиц опытных групп по сравнению с контрольной. В белке яиц 1 опытной группы отмечается достоверно низкое (Р<0,05) содержание цинка по сравнению с контролем на 0,1007 мкмоль. Количество других микроэлементов в белке яиц 1 опытной группы, также занижено по сравнению с другими группами, но содержание натрия выше.Example 3. The method according to example 2. The micro and macroelement composition of egg protein after pre-incubation treatment is presented in table 3. As can be seen from table 3, not all cases show significant differences in the Mn content in the protein of eggs of the experimental groups compared to the control. In the egg protein of the experimental group 1, a significantly low (P <0.05) zinc content was noted compared with the control at 0.1007 μmol. The number of other trace elements in the protein of eggs of the 1st experimental group is also underestimated in comparison with other groups, but the sodium content is higher.
Пример 4. Способ по примеру 2. Суммарное количество микро- и макроэлементов в белке и желтке после предынкубационой обработки яиц представлено в таблице 4. Из данных таблицы 4 видно, что количество марганца во 2, 3 и 4 опытных группах достоверно (p<0,05) превышает на 0,0955, 0,1456 и 0,1319 мкмоль, соответственно, количество данного микроэлемента в контрольной группе. Также следует отметить достоверное (p<0,05) снижение количества цинка в 1 группе на 0,368 мкмоль, по сравнению с контролем. Количество других микро- и макроэлементов в желтке и белке опытных яиц существенно не изменяется по сравнению с показателями с контрольной.Example 4. The method according to example 2. The total number of micro and macro elements in protein and yolk after pre-incubation treatment of eggs is presented in table 4. From the data in table 4 it is seen that the amount of manganese in the 2, 3 and 4 experimental groups is significant (p <0, 05) exceeds by 0.0955, 0.1456 and 0.1319 μmol, respectively, the amount of this trace element in the control group. It should also be noted a significant (p <0.05) decrease in the amount of zinc in group 1 by 0.368 μmol, compared with the control. The number of other micro and macro elements in the yolk and protein of the experimental eggs does not significantly change compared with the control.
Пример 5. Способ по примеру 2. Масса тела и значения биохимических показателей 19-сут эмбрионов представлены в таблице 5. Как видно из таблицы 5, масса тела эмбрионов той группы, в которой яйца были обработаны дистиллированной водой, самая низкая по сравнению с другими группами. Масса тела эмбрионов опытной группы, где в предынкубационной обработке использовали 0,01% раствор Succ-Mn, оказалась самой высокой. Активность фермента АлАТ в гомогенате эмбриона этой опытной группы была значительно ниже, а активность АсАТ самой высокой по сравнению с другими группами. В гомогенате эмбрионов, взятых из яиц обработанных растворами Succ-Mn, уровень активности щелочной фофтазазы достоверно (p<0,05) ниже по сравнению с контрольной и другими группами. У эмбрионов 6 группы в гомогенате отмечается достоверно низкое содержание D-глюкозы и мочевой кислоты по сравнению с контрольной группой.Example 5. The method according to example 2. Body weight and biochemical values of 19-day embryos are presented in table 5. As can be seen from table 5, the body weight of the embryos in the group in which the eggs were treated with distilled water is the lowest compared to other groups . The body weight of the embryos of the experimental group, where a 0.01% solution of Succ-Mn was used in the pre-incubation treatment, was the highest. The activity of the enzyme AlAT in the homogenate of the embryo of this experimental group was significantly lower, and the activity of AsAT was highest compared to other groups. In the homogenate of embryos taken from eggs treated with Succ-Mn solutions, the level of alkaline phophtase activity is significantly (p <0.05) lower compared to the control and other groups. In group 6 embryos, the homogenate showed a significantly low content of D-glucose and uric acid in comparison with the control group.
Экспериментально доказано, что при предынкубационной обработке яиц растворами Succ-Mn тетрагидрата происходит проникновение через скорлупу в основном в желток яйца не только марганца, но и частиц органического лиганда - сукцината в составе Succ-Mn. Об этом свидетельствуют результаты количественного определения содержания марганца в желтке и белке опытных партий яиц, обработанных растворами Succ-Mn, а также исследования активности щелочной фосфатазы и других биохимических процессов в развивающихся эмбрионах, характерных отдельно только для сукцината и марганца.It was experimentally proved that during pre-incubation treatment of eggs with Succ-Mn tetrahydrate solutions, not only manganese, but also particles of the organic ligand, succinate, as part of Succ-Mn, penetrate through the shell mainly into the yolk. This is evidenced by the results of a quantitative determination of the manganese content in the yolk and protein of experimental batches of eggs treated with Succ-Mn solutions, as well as studies of the activity of alkaline phosphatase and other biochemical processes in developing embryos that are characteristic only for succinate and manganese separately.
ЛитератураLiterature
1. Андреев Е.М., Желаннова М.Е., Тегина Е.Е, и др. Способ обработки яиц перед инкубированием. А.С. 1780667 СССР, МКИ А01К 41/00. - №-4917342/15; Заявл. 19.12.90; Опубл. 15.12.92, Бюл. №46.1. Andreev E.M., Zhelannova M.E., Tegina E.E., et al. Method for processing eggs before incubation. A.S. 1780667 USSR, MKI A01K 41/00. - No. 4917342/15; Claim 12/19/90; Publ. 12/15/92, Bull. No. 46.
2. Бессарабов Б.Ф., Сушкова Н.К. Влияние глубинного обеззараживания инкубационных яиц на естественную резистентность птицы. // Резервы повышения жизнеспособности и продуктивности птицы. - М., 1990. - С.62-64.2. Bessarabov B.F., Sushkova N.K. The effect of deep disinfection of hatching eggs on the natural resistance of birds. // Reserves for increasing the viability and productivity of poultry. - M., 1990. - P.62-64.
3. Воробьев С.А., Умняшкин В.Г., Сухарев Ю.Н. Глубинная обработка инкубационных яиц. - Проспект ВДНХ СССР, 1981. - с.4.3. Vorobyov S. A., Umnyashkin V. G., Sukharev Yu.N. Deep processing of hatching eggs. - Prospect of the Exhibition of Economic Achievements of the USSR, 1981. - p.4.
4. Тен А.Э. Рост и физиолого-биохимические показатели бройлеров под влиянием предынкубационой вакуумной обработки яиц растворами соединений марганца. Дисс. канд. биол. наук / Ульяновская гос. с.-х. академия. Ульяновск, 2000. - 111 с.4. Ten A.E. Growth and physiological and biochemical parameters of broilers under the influence of pre-incubation vacuum treatment of eggs with solutions of manganese compounds. Diss. Cand. biol. sciences / Ulyanovsk state. S.-kh. academy. Ulyanovsk, 2000 .-- 111 s.
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title | 
|---|---|---|---|
| RU2008140854/12ARU2382551C1 (en) | 2008-10-15 | 2008-10-15 | Method of quantitative determination of penetration of manganese succinate tetrahydrate into incubative chicken eggs | 
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title | 
|---|---|---|---|
| RU2008140854/12ARU2382551C1 (en) | 2008-10-15 | 2008-10-15 | Method of quantitative determination of penetration of manganese succinate tetrahydrate into incubative chicken eggs | 
| Publication Number | Publication Date | 
|---|---|
| RU2382551C1true RU2382551C1 (en) | 2010-02-27 | 
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date | 
|---|---|---|---|
| RU2008140854/12ARU2382551C1 (en) | 2008-10-15 | 2008-10-15 | Method of quantitative determination of penetration of manganese succinate tetrahydrate into incubative chicken eggs | 
| Country | Link | 
|---|---|
| RU (1) | RU2382551C1 (en) | 
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title | 
|---|---|---|---|---|
| RU2786044C1 (en)* | 2021-12-08 | 2022-12-16 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА имени К.И. Скрябина" (ФГБОУ ВО МГАВМиБ - МВА имени К.И. Скрябина) | Express method for determining the amount of solutions of biologically active substances penetrating into the incubation egg of birds during treatment of eggs by spray method | 
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title | 
|---|---|---|---|---|
| RU2264708C2 (en)* | 2001-04-17 | 2005-11-27 | Эмбрекс, Инк. | Egg treatment method (versions) | 
| RU2311023C1 (en)* | 2006-04-18 | 2007-11-27 | ФГОУ ВПО "Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина" | Method for increasing of egg hatching capacity and resistance of young farm birds | 
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title | 
|---|---|---|---|---|
| RU2264708C2 (en)* | 2001-04-17 | 2005-11-27 | Эмбрекс, Инк. | Egg treatment method (versions) | 
| RU2311023C1 (en)* | 2006-04-18 | 2007-11-27 | ФГОУ ВПО "Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина" | Method for increasing of egg hatching capacity and resistance of young farm birds | 
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title | 
|---|---|---|---|---|
| RU2786044C1 (en)* | 2021-12-08 | 2022-12-16 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА имени К.И. Скрябина" (ФГБОУ ВО МГАВМиБ - МВА имени К.И. Скрябина) | Express method for determining the amount of solutions of biologically active substances penetrating into the incubation egg of birds during treatment of eggs by spray method | 
| Publication | Publication Date | Title | 
|---|---|---|
| KR102174868B1 (en) | Gender, viability and/or developmental stage determination of avian embryos in ovo | |
| JP4381139B2 (en) | How to treat avian eggs | |
| Vernadakis et al. | Comparative studies of neurotransmitter substances in the maturing and aging central nervous system of the chicken | |
| Sreedevi et al. | Influence of rearing water temperature on induced gonadal development and spawning behaviour of tropical green mussel, Perna viridis | |
| Yameen et al. | Effects of different light durations during incubation on hatching, subsequent growth, welfare, and meat quality traits among three broiler strains | |
| Bai et al. | Effects of bitter melon saponin on the glucose and lipid metabolism in HepG2 cell and C. elegans | |
| Ruuskanen et al. | Long-lasting effects of yolk androgens on phenotype in the pied flycatcher (Ficedula hypoleuca) | |
| Simonetti et al. | Zebrafish (Danio rerio): the future of animal model in biomedical research. | |
| Wall | A study of color and color-variation in Aphis gossypii Glover. | |
| CN109085331B (en) | A kind of detection method of 2,4-dinitrotoluene toxicity | |
| RU2382551C1 (en) | Method of quantitative determination of penetration of manganese succinate tetrahydrate into incubative chicken eggs | |
| CN105393991B (en) | A kind of detection method of toxicity of ammonia nitrogen to Brachionus calyciflorus | |
| CN101788545A (en) | Pesticide biological activity determination method | |
| Aluigi et al. | Dose-dependent effects of chlorpyriphos, an organophosphate pesticide, on metamorphosis of the sea urchin, Paracentrotus lividus | |
| RU2636477C1 (en) | Method of selecting quail eggs for hatching | |
| Sogan et al. | Myco-chemicals and teratogenic activity of wild mushroom Trichaleurina celebica from Mt. Palali, Quezon, Nueva Vizcaya, Luzon Island, Philippines | |
| dos Santos Melo et al. | Acute toxicity of trypsin inhibitor from tamarind seeds in embryo and adult zebrafish (Danio rerio) | |
| Kpossou et al. | In ovo feeding of Citrus aurantiifolia seed extract on hatchability, chick quality, physiological response, intestinal morphology and posthatch growth performance of cobb 500 broiler chickens | |
| RU2706563C1 (en) | Method for optimizing homeostasis in chick embryos and young growths | |
| CN113620935A (en) | Pyrone compound and preparation method and application thereof | |
| RU2776012C1 (en) | Method for increasing the viability and fertility of the drosophila fruit fly (drosophila melanogaster) | |
| Luker et al. | Laboratory exercises in Zoology | |
| RU2540435C1 (en) | Method of prediction of meat productivity of broiler chickens | |
| RU2298921C1 (en) | Method for stimulating sturgeon breeding | |
| RU2784790C1 (en) | Method for assessing the readiness of embryos for hatching | 
| Date | Code | Title | Description | 
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees | Effective date:20101016 |