Изобретение относится к области биотехнологии и ветеринарной микробиологии и касается новой вакцины для профилактики и лечения инфекционных заболеваний конечностей мелкого рогатого скота. The invention relates to the field of biotechnology and veterinary microbiology and relates to a new vaccine for the prevention and treatment of infectious diseases of the limbs of small cattle.
Инфекционные заболевания конечностей овец занимают одно из ведущих мест в инфекционной патологии у этого вида животных. Среди таких заболеваний наибольшее значение имеют копытная гниль и некробактериоз. Часто эти заболевания протекают одновременно, т.к. при заболеваниях конечностей пораженный орган постоянно контактирует с почвой и другими предметами окружающей среды, что приводит к его обильному обсеменению различной бактериальной флорой. К тому же одной из характерных особенностей анаэробных инфекций является одновременное, ассоциированное воздействие на организм двух, трех и более видов анаэробов и аэробов. Infectious diseases of the limbs of sheep occupy one of the leading places in infectious diseases in this animal species. Among such diseases, hoof rot and necrobacteriosis are of the greatest importance. Often, these diseases occur simultaneously, because in diseases of the extremities, the affected organ is constantly in contact with soil and other environmental objects, which leads to its abundant contamination with various bacterial flora. In addition, one of the characteristic features of anaerobic infections is the simultaneous, associated effect on the body of two, three or more types of anaerobes and aerobes.
Известны вакцины для профилактики и лечения инфекционных заболеваний конечностей овец, в частности копытной гнили, содержащие антиген из Bacteroides nodosus (инактивированные клетки или протеаза) и адъювант [1, 2]
Однако известные моновалентные вакцины не позволяют надежно профилактировать заболевания конечностей овец, вызываемых ассоциацией анаэробных микроорганизмов и гнойно-раневой микрофлоры.Known vaccines for the prevention and treatment of infectious diseases of the limbs of sheep, in particular hoof rot, containing the antigen from Bacteroides nodosus (inactivated cells or protease) and adjuvant [1, 2]
However, the known monovalent vaccines do not allow reliable prophylaxis of sheep limb diseases caused by the association of anaerobic microorganisms and purulent-wound microflora.
Известна также ассоциированная вакцина "Pietivac" против инфекционных заболеваний конечностей овец, содержащая антигены из инактивированных формалином культур B. nodosus, F. necrophorum, Cl. perfringens, Staph. aureus и адъювант [3]
Недостатком ближайшего аналога является недостаточно высокая эффективность вакцины вследствие неполноценности антигенного состава входящих в нее компонентов.Also known is the associated vaccine "Pietivac" against infectious diseases of sheep limbs containing antigens from formalin-inactivated cultures of B. nodosus, F. necrophorum, Cl. perfringens, staph. aureus and adjuvant [3]
The disadvantage of the closest analogue is the insufficiently high efficiency of the vaccine due to the inferiority of the antigenic composition of its components.
Задачей изобретения является получение препарата, обладающего высокой иммуногенной активностью и широким спектром протективного действия, тем самым обеспечивающего защиту овец от инфекционных заболеваний конечностей, вызываемых различными ассоциациями возбудителей. The objective of the invention is to obtain a drug with high immunogenic activity and a wide spectrum of protective action, thereby protecting sheep from infectious diseases of the extremities caused by various associations of pathogens.
Технический результат изобретения заключается в повышении иммуногенной активности и расширении иммуногенного спектра ассоциированной вакцины "Овикон", способной обеспечить длительный и надежный иммунитет против инфекционных заболеваний конечностей у овец. The technical result of the invention is to increase the immunogenic activity and the expansion of the immunogenic spectrum of the associated Ovicon vaccine, capable of providing long-term and reliable immunity against infectious diseases of the limbs in sheep.
Сущность изобретения заключается в следующем: ассоциированная вакцина "Овикон" в качестве антигенов содержит синергитическую ассоциацию возбудителей инфекционных заболеваний конечностей, инактивированных формалином, а именно следующих штаммов: Bacteroides nodosus ВИЭВ N ПП-82/90, Fusobacterium necrophorum ВИЭВ N ПП-82/90, Fusobacterium necrophorum ВГНКИ N "Кр-I"- ДЕП и/или Fusobacterium necrophorum ВГНКИ N "Тула"- ДЕП, Actinomyces (Corynebacterium pyogenes ВГНКИ N 4/2334- ДЕП, Staphylococcus aureus ВГНКИ N 7315-ДЕП, Clostridium perfringens типа А ВГНКИ N 28-ДЕП. Вакцина также содержит анатоксин из штамма Clostridium perfringens типа А ВГНКИ N 128-ДЕП, адъювант и солевой раствор, например физиологический раствор. The essence of the invention is as follows: the associated vaccine "Ovikon" as antigens contains a synergistic association of infectious pathogens of extremities inactivated with formalin, namely the following strains: Bacteroides nodosus VIEV N PP-82/90, Fusobacterium necrophorum VIEV N PP-82/90, Fusobacterium necrophorum VGNKI N “Cr-I” - DEPT and / or Fusobacterium necrophorum VGNKI N “Tula” - DEPT, Actinomyces (Corynebacterium pyogenes VGNKI N 4/2334-DEPT, Staphylococcus aureus VGNKI Nring-perf Nrgens Nring-Confens 7315-Perfect 28-DEP. The vaccine also contains the toxoid from the strain Clostridium perfringens type A of VGNKI N 128-DEP, adju Ant and saline, for example physiological saline.
Из адъювантов вакцина "Овикон" содержит гидроокись алюминия, однако можно использовать и другие известные адъюванты, например на основе минерального масла и ланолина. Of the adjuvants, the Ovicon vaccine contains aluminum hydroxide, but other known adjuvants, for example, based on mineral oil and lanolin, can be used.
Все антигены входят в состав вакцины в эффективном количестве. All antigens are included in the vaccine in an effective amount.
В частности, вакцина "Овикон" имеет следующий состав (об.):
инактивированный формалином антиген из штамма B.nodosus ВИЭВ N ПП-82/90 с титром 3•109 5•109 кл/мл -15-20,
инактивированный формалином антиген из штамма F.necrophorum ВГНКИ N "Нева"-ДЕП и/или ВГНКИ N "Кр-1"-ДЕП с титром 3•109-5•109 кл/мл 15-20,
инактивированный формалином антиген из штамма Staph. aureus ВГНКИ N 7315-ДЕП с титром 1,5•109-2,5•109 кл/мл 15-20,
инактивированный формалином антиген из штамма Actinom.(Corynebac.) pyogenes ВГНКИ N 4/2334-ДЕП с титром 1,5•109-2,5•109 кл/мл 15-20,
инактивированный формалином антиген из штамма Cl.perfringens типа А ВГНКИ N 28-ДЕП с титром 0,5•109-1,5•109 кл/мл 10-15,
анатоксин из штамма Cl.perfringens типа А ВГНКИ N 28-ДЕП с активностью 4•104 6•104 DZm/мл 10-20
гель гидроокиси алюминия 12-16,
физиологический раствор остальное.In particular, the Ovicon vaccine has the following composition (vol.):
formalin inactivated antigen from B.nodosus strain VIEV N PP-82/90 with a titer of 3 • 109 5 • 109 cells / ml -15-20,
formalin inactivated antigen from the strain F.necrophorum VGNKI N "Neva" -DEPT and / or VGNKI N "Kr-1" -DEPT with a titer of 3 • 109 -5 • 109 cells / ml 15-20,
formalin inactivated antigen from Staph strain. aureus VGNKI N 7315-DEPT with a titer of 1.5 • 109 -2.5 • 109 cells / ml 15-20,
formalin inactivated antigen from strain Actinom. (Corynebac.) pyogenes VGNKI N 4/2334-DEPT with a titer of 1.5 • 109 -2.5 • 109 cells / ml 15-20,
formalin inactivated antigen from the strain Cl.perfringens type A VGNKI N 28-DEPT with a titer of 0.5 • 109 -1.5 • 109 cells / ml 10-15,
toxoid from strain Cl.perfringens type A VGNKI N 28-DEPT with activity 4 • 104 6 • 104 DZm / ml 10-20
gel of aluminum hydroxide 12-16,
saline rest.
Производственный штамм Fusobacterium necrophorum "Тула" получен из больной конечности крупного рогатого скота и депонирован в коллекции Всероссийского государственного научно-исследовательского института контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов и имеет регистрационный номер "Тула"-ДЕП. The production strain Fusobacterium necrophorum "Tula" was obtained from a diseased limb of cattle and deposited in the collection of the All-Russian State Research Institute for Control, Standardization and Certification of Veterinary Medicines and has a registration number of "Tula" -DEP.
Штамм F.necrophorum ВГНКИ имеет следующие свойства. Strain F.necrophorum VGNKI has the following properties.
Морфологические свойства. Грамотрицательные зернисто окрашенные палочки или кокковидные формы. Спор и капсул не образует. Культурально-биохимические свойства. Строгий анаэроб. На среде Китта-Тароцци через 24-48 ч растет с помутнением и газообразованием. Morphological properties. Gram-negative granular stained sticks or coccoid forms. Spore and capsules do not form. Cultural and biochemical properties. Strict anaerobic. On the Kitta-Tarozzi medium, after 24-48 hours it grows with turbidity and gas formation.
Штамм ферментирует сахарозу, рафинозу, лактозу и слабо глюкозу. Другие сахара и аминокислоты не ферментирует. The strain ferments sucrose, raffinose, lactose and weakly glucose. Other sugars and amino acids do not ferment.
Вирулентные свойства. Патогенен для кроликов погибают через 13-16 дней после заражения в основание ушной раковины. Virulent properties. Pathogenic for rabbits die 13-16 days after infection at the base of the auricle.
Производственный штамм Fusobacterium necrophorum "Кр-1" выделен из больной конечности крупного рогатого скота. Production strain Fusobacterium necrophorum "Kr-1" isolated from a diseased limb of cattle.
Штамм F. necrophorum "Кр-1" депонирован в коллекции микроорганизмов Всероссийского государственного научно-исследовательского института контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов и имеет регистрационный номер "Кр-1"-ДЕП. The strain F. necrophorum "Kr-1" is deposited in the collection of microorganisms of the All-Russian State Research Institute for Control, Standardization and Certification of Veterinary Medicines and has the registration number "Kr-1" -DEP.
Штамм Fusobacterium necrophorum ВГНКИ N "Кр-1"-ДЕП характеризуется следующими свойствами:
Морфологические свойства. Тонкие грамотрицательные палочки или нити. Микроб неподвижен, спор и капсул не образует.The strain Fusobacterium necrophorum VGNKI N "Kr-1" -DEP is characterized by the following properties:
Morphological properties. Thin gram-negative sticks or threads. The microbe is motionless, does not form spores and capsules.
Культурально-биохимические свойства. Строгий анаэроб. На среде Китта-Тароцци растет при температуре 37oC, где через 24-48 ч появляется равномерное помутнение с возможным газообразованием и хлопьевидный осадок на кусочках печени. На аэробных средах не растет. Образует индол и сероводород. Не разжижает желатин. Ферментирует слабо глюкозу. Другие сахара и аминокислоты не ферментирует.Cultural and biochemical properties. Strict anaerobic. On a Kitta-Tarozzi medium, it grows at a temperature of 37o C, where after 24-48 hours a uniform turbidity appears with possible gas formation and a flocculent precipitate on pieces of liver. On aerobic media does not grow. Forms indole and hydrogen sulfide. Does not thin the gelatin. Ferment weakly glucose. Other sugars and amino acids do not ferment.
Вирулентные свойства. Патогенен для кроликов погибают через 12-14 дней после заражения суточной культурой штамма в основание ушной раковины. На внутренних органах павших животных выделяется чистая культура штамма. Virulent properties. Pathogenic for rabbits die 12-14 days after infection with the daily culture of the strain at the base of the auricle. On the internal organs of dead animals stands out pure strain culture.
Антигенная активность. Титр антител у кроликов, двукратно иммунизированных инактивированным штаммом, в реакции агглютинации(PA) не менее 1 400 (в среднем 1 800). Antigenic activity. The antibody titer in rabbits twice immunized with an inactivated strain in an agglutination reaction (PA) is at least 1,400 (average 1,800).
Производственный штамм Bacteroides nodosus ПП-82/90 депонирован в коллекции Всероссийского научно-исследовательского института экспериментальной ветеринарии им. Я.Р.Коваленко и характеризуется следующим свойствами:
Морфологические свойства. Грамотрицательные, прямые или слегка изогнутые палочки, располагающиеся одиночно или попарно, длиной 5-10 мкм и шириной 0,4-0,6 мкм, со слегка утолщенными концами у большинства клеток, спор и капсул не образует.The production strain of Bacteroides nodosus PP-82/90 is deposited in the collection of the All-Russian Scientific Research Institute of Experimental Veterinary Medicine named after Ya.R. Kovalenko and is characterized by the following properties:
Morphological properties. Gram-negative, straight or slightly curved rods, located singly or in pairs, 5-10 microns long and 0.4-0.6 microns wide, with slightly thickened ends in most cells, do not form spores and capsules.
Культуральные свойства. На бульоне и агаре Хоттингера рост отсутствует. При выращивании на мясо-пептонном печеночном бульоне (МППБ) под вазелиновым маслом без агара рост также отсутствует. На МППБ с 0,1% агара под вазелиновым маслом признаки роста появляются через 48-72 ч в виде небольших вертикальных штрихов или тяжей в средней части столбика среды без газообразования. На плотной среде на 3-4 сут культивирования образуются мелкие (1-2 мм в диаметре) плоские, бесцветные, шероховатые колонии, без зоны гемолиза. Cultural properties. On the Hottinger broth and agar there is no growth. When grown on meat-peptone liver broth (MPPB) under liquid paraffin without agar, growth is also absent. On MPPB with 0.1% agar under paraffin oil, signs of growth appear after 48-72 hours in the form of small vertical strokes or cords in the middle of the medium column without gas formation. On a solid medium, small (1-2 mm in diameter) flat, colorless, rough colonies without a hemolysis zone form on 3-4 days of cultivation.
Ферментативные свойства. Штамм не ферментирует углеводы и многоатомные спирты с образованием кислоты и газа, не образует индола (индикаторная бумажка без изменений), слабо образует сероводород (край бумажки слегка чернеет), разжижает полностью 20%-ный мясо-пептонный желатин на 3-5 сут, а также свертывает на 2-4 сут и пептонизирует молоко на 8-10 сут. Enzymatic properties. The strain does not ferment carbohydrates and polyhydric alcohols with the formation of acid and gas, does not form indole (indicator paper unchanged), weakly forms hydrogen sulfide (the edge of the paper slightly blackens), liquefies completely 20% meat-peptone gelatin for 3-5 days, and also coagulates for 2-4 days and peptones milk for 8-10 days.
Вирулентные свойства. Штамм не вызывает заболевания и гибели лабораторных животных (белых мышей, морских свинок, кроликов). При заражении овец в межкопытную щель развивается характерная для данного заболевания клиническая картина. Virulent properties. The strain does not cause disease and death of laboratory animals (white mice, guinea pigs, rabbits). When sheep are infected in the inter-experimental gap, a clinical picture characteristic of the disease develops.
Серологические свойства. Штамм дает в непрямой реакции флуоресценции (РИФ) специфическое свечение, оцениваемое на три или четыре креста. Serological properties. The strain gives in the indirect fluorescence reaction (RIF) a specific glow estimated at three or four crosses.
Антигенная активность. Титр антител у кроликов, двукратно иммунизированных инактивированным штаммом, составляет в среднем 1 800 (но не менее 1 400) в РА. Antigenic activity. The antibody titer in rabbits twice immunized with an inactivated strain averages 1,800 (but not less than 1,400) in RA.
Производственный штамм Actinomyces (Corynebacterium) pyogenes N 4/2334 выделен из абортированного плода крупного рогатого скота и депонирован в коллекции микроорганизмов Всероссийского государственного научно-исследовательского инструмента контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов. Штамму присвоен регистрационный номер Actinomyces (Corybebacterium) pyоgenes ВГНКИ N 4/2334 ДЕП. The production strain of Actinomyces (Corynebacterium) pyogenes N 4/2334 was isolated from an aborted cattle fetus and deposited in the microorganism collection of the All-Russian State Research Instrument for the Control, Standardization and Certification of Veterinary Medicines. The strain assigned a registration number Actinomyces (Corybebacterium) pyogenes VGNKI N 4/2334 DEPT.
Штамм Actinomyces (Corynebacterium) pyogenes ВГНКИ N 4/2334 ДЕП характеризуется следующими свойствами:
Морфологические свойства. Мелкие грамположительные палочки или кокковидные бактерии, располагаются одиночно, попарно, кучками или большими скоплениями, неподвижны. Спор и капсул не образуют, характерным признаком является наличие V-образных форм.The strain Actinomyces (Corynebacterium) pyogenes VGNKI N 4/2334 DEPT is characterized by the following properties:
Morphological properties. Small gram-positive bacilli or coccoid bacteria are located singly, in pairs, in heaps or large clusters, motionless. Spore and capsules do not form, a characteristic feature is the presence of V-shaped.
Культурально-ферментативные свойства. Является аэробом, факультативным анаэробом. На мясо-пептонном бульоне (МПБ) с добавлением 10%-ной сыворотки через 24 ч дает равномерное помутнение, через 48 ч на дне образуется крошковатый белый осадок. На мясо-пептонном агаре (МПА) через 24 48 ч образует прозрачные росинчатые колонии. На кровяном агаре через 48 ч формируются росинчатые гладкие блестящие колонии с зоной β-гемолиза. Cultural and enzymatic properties. It is an aerobic, optional anaerobic. On meat-peptone broth (BCH) with the addition of 10% serum after 24 hours it gives a uniform turbidity, after 48 hours a tiny white precipitate forms at the bottom. On meat-peptone agar (MPA) after 24 to 48 hours it forms transparent dewy colonies. After 48 hours, dewy smooth shiny colonies with a β-hemolysis zone are formed on blood agar.
Штамм ферментирует глюкозу, мальтозу, лактозу. The strain ferments glucose, maltose, lactose.
Вирулентные свойства. Патогенен для белых мышей подкожное введение суточной культуры вызывает их гибель на 5 6-й день. Virulent properties. Pathogenic for white mice, subcutaneous administration of a daily culture causes their death on the 5th 6th day.
Производственный штамм Staphylococcus aureus N 7315 выделен от больной некробактериозом коровы. Штамм депонирован в коллекции микроорганизмов Всероссийского государственного научно-исследовательского института контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов и имеет регистрационный номер 7315 ДЕП. The production strain of Staphylococcus aureus N 7315 was isolated from a patient with cow necrobacillosis. The strain is deposited in the collection of microorganisms of the All-Russian State Research Institute of Control, Standardization and Certification of Veterinary Medicines and has a registration number 7315 DEPT.
Штамм Staphylococcus aureus ВГНКИ N 7315 ДЕП характеризуется следующими свойствами:
Морфологические свойства. Крупные грамположительные кокки, спор и капсул не образуют, располагаются одиночно или в виде виноградных гроздьев, неподвижны.The strain of Staphylococcus aureus VGNKI N 7315 DEPT is characterized by the following properties:
Morphological properties. Large gram-positive cocci, spores and capsules do not form, are located singly or in the form of grapes, motionless.
Культурально-ферментативные свойства. Является аэробом, факультативным анаэробом. При температуре 37oC на МПБ образуется равномерное помутнение с последующим образованием белого аморфного осадка. На МПА растет в виде мелких белых, с золотистым оттенком выпуклых колоний с ровными краями. На кровяном агаре образуются круглые, слегка выпуклые желто-золотистые колонии с ровными краями. Вокруг колоний образуются зоны b-гемолиза.Cultural and enzymatic properties. It is an aerobic, optional anaerobic. At a temperature of 37o C on the BCH formed a uniform turbidity with the subsequent formation of a white amorphous precipitate. On the MPA, it grows in the form of small white, with a golden hue convex colonies with smooth edges. On the blood agar, round, slightly convex yellow-golden colonies with smooth edges form. Around the colonies, b-hemolysis zones are formed.
Штамм пептонизирует и свертывает молоко. Двадцатичасовая культура коагулирует кроличью плазму. Ферментирует маннит, глюкозу, мальтозу, сахарозу. The strain peptones and coagulates milk. Twenty-hour culture coagulates rabbit plasma. Ferments mannitol, glucose, maltose, sucrose.
Вирулентные свойства. Патогенен для белых мышей при подкожном заражении одно-полуторасуточная культура вызывает их гибель на 3 5-й день. Virulent properties. Pathogenic for white mice with subcutaneous infection, one and a half day culture causes their death on the 3rd 5th day.
Производственный штамм Clostridium perfringes типа А N 28 демонтирован в коллекции микроорганизмов Всероссийского государственного научно-исследовательского института контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов и имеет регистрационный номер 28 ДЕП. The production strain of Clostridium perfringes type A N 28 was dismantled in the collection of microorganisms of the All-Russian State Research Institute for Control, Standardization and Certification of Veterinary Medicines and has a registration number 28 DEPT.
Штамм Clostridium perfringens типа А ВГНКИ N 28 ДЕП имеет следующие свойства:
Морфологические свойства. Крупные грамположительные палочки с обрубленными или слегка закругленными концами, расположенные в форме полисада или попарно, неподвижны, образуют споры.The strain Clostridium perfringens type A VGNKI N 28 DEPT has the following properties:
Morphological properties. Large gram-positive sticks with chopped off or slightly rounded ends, located in the form of a polysad or in pairs, are motionless, form spores.
Культурально-ферментативные свойства. Строгий анаэроб. Хорошо растет на среде Китта-Тароцци с бурным газообразованием. Через 6 8 ч рост завершается, прекращается выделение газов. Cultural and enzymatic properties. Strict anaerobic. It grows well in the Kitta-Tarozzi environment with violent gas formation. After 6-8 hours, growth is complete, gas evolution ceases.
На поверхности кровяного агара в анаэробных условиях через 12 18 ч образуются крупные колонии сероватого цвета, окруженные одной или двумя светлыми зонами гемолиза, которые при выдерживании на воздухе приобретают зеленоватый оттенок, что является характерным для этого вида микроорганизмов. On the surface of blood agar under anaerobic conditions, after 12 to 18 h, large grayish colonies form, surrounded by one or two bright hemolysis zones, which, when exposed to air, acquire a greenish tint, which is characteristic of this type of microorganism.
Штамм ферментирует глюкозу, лактозу, галактозу, левулозу, сахарозу, мальтозу. The strain ferments glucose, lactose, galactose, levulose, sucrose, maltose.
Вирулентные свойства. Патогенен при подкожном заражении для всех видов лабораторных и сельскохозяйственных животных. Virulent properties. Pathogenic with subcutaneous infection for all types of laboratory and farm animals.
Пример 1. Основой изготовления ассоциированной вакцины "Овикон" служат штаммы B. nodosus ВИЭВ N ПП-82/90, F. necrophorum ВГНКИ N "Нева" ДЕП и N "Кр-1" ДЕП, Staph. aureus ВГНКИ N 7315 ДЕП, Actinomyces (Corynebacterium) pyogenes ВГНКИ N 4/2334 ДЕП, Cl. perfringens типа А ВГНКИ N 28 ДЕП, взятые в эффективном количестве. Example 1. The basis for the manufacture of the associated vaccine "Ovicon" are strains of B. nodosus VIEV N PP-82/90, F. necrophorum VGNKI N "Neva" DEPT and N "Kr-1" DEPT, Staph. aureus VGNKI N 7315 DEPT, Actinomyces (Corynebacterium) pyogenes VGNKI N 4/2334 DEPT, Cl. perfringens type A VGNKI N 28 DEPT taken in an effective amount.
Штаммы отобраны по широте иммуногенного спектра и обеспечивают высокий профилактический и терапевтический эффект. The strains were selected according to the breadth of the immunogenic spectrum and provide a high prophylactic and therapeutic effect.
Для изготовления вакцины производственные штаммы выращивают раздельно на средах, обычно используемых для культивирования соответствующего вида микроорганизмов. For the manufacture of a vaccine, production strains are grown separately on media commonly used to cultivate the appropriate type of microorganism.
Выращенные культуры проверяют на чистоту роста, после чего инактивируют формалином. The grown cultures are checked for growth purity, after which they are inactivated with formalin.
Инактивированные культуры концентрируют, например, центрифугированием. Полученные осадки антигенов раздельно ресуспендируют формалинизированным солевым раствором, например физиологическим, и готовят суспензии клеток каждого штамма раздельно. Inactivated cultures are concentrated, for example, by centrifugation. The resulting precipitates of antigens are separately resuspended in formalinized saline, for example physiological, and cell suspensions of each strain are prepared separately.
Центрифугат штамма Cl.perfringens типа А ВГНКИ N 28 ДЕП фильтруют через стерилизующие пластины. The centrifugate of the strain Cl.perfringens type A VGNKI N 28 DEPT is filtered through sterilizing plates.
Антигены и фильтрат контролируют на стерильность и чистоту. Antigens and filtrate are monitored for sterility and purity.
Фильтрат Cl. perfringens проверяют на полноту инактивации. Полученные антигены инактивированные клетки и анатоксин соединяют в эффективном количестве, перемешивают и к смеси добавляют известный адъювант, например гидроокись алюминия. Filtrate Cl. perfringens check for completeness of inactivation. The resulting antigens inactivated cells and the toxoid are combined in an effective amount, mixed and a known adjuvant, for example aluminum hydroxide, is added to the mixture.
Готовый препарат перемешивают для проведения сорбции, контролируют на стерильность, доводят pH до величины 6,9 7,2 и расфасовывают. The finished product is mixed for sorption, controlled for sterility, adjusted to pH 6.9 7.2 and packaged.
Пример 2. Ассоциированную вакцину "Овикон" готовят аналогично примеру 1. Example 2. The associated vaccine "Ovicon" is prepared analogously to example 1.
Выращенные культуры проверяют на чистоту роста микроскопией, после чего в культуры B. nodosus ВИЭВ N ПП-82/90, F. necrophorum ВГНКИ N "Нева" ДЕП и/или N "Кр-1" ДЕП и Cl.perfringens ВГНКИ N 28 ДЕП дробно добавляют формалин до его конечной концентрации в культуре 0,5% Культуры стафилококка и коринебактерий инактивируют 0,5% формалинизированным физраствором при их смыве. The grown cultures are checked for growth purity by microscopy, after which B. B. nodosus VIEV N PP-82/90, F. necrophorum VGNKI N Neva DEPT and / or N “Kr-1” DEPT and Cl.perfringens VGNKI N 28 DEPT formalin is fractionally added to its final concentration in a culture of 0.5%. Staphylococcus and Corynebacter cultures inactivate a 0.5% formalinized saline solution when they are washed off.
Формалинизированные культуры выдерживают для инактивации. Далее инактивированные культуры концентрируют центрифугированием. Центрифугат клостридиозной культуры собирают в стерильные емкости. Полученные осадки антигенов раздельно ресуспендируют 0,5%-ным формалинизированным физиологическим раствором, доводят до нужной концентрации и контролируют на стерильность посевами на МПБ, МПА, МППБ и микроскопией. Formalized cultures are maintained for inactivation. Next, inactivated cultures are concentrated by centrifugation. A clostridial culture centrifuge is collected in sterile containers. The precipitated antigens are separately resuspended in 0.5% formalin saline, adjusted to the desired concentration and monitored for sterility by culture on MPB, MPA, MPPB and microscopy.
Анатоксин проверяют на полноту инактивации и определяют активность на белых мышах. Anatoxin is checked for completeness of inactivation and activity is determined on white mice.
Концентрированные антигены из инактивированных штаммов вносят в емкости, содержащие анатоксин Cl. perfringens. Concentrated antigens from inactivated strains are introduced into containers containing Cl toxoid. perfringens.
Смесь антигенов тщательно перемешивают и добавляют гидроокись алюминия. Полученная в результате вакцина имеет следующий состав (об.):
инактивированный формалином антиген из штамма B. nodosus ВИЭВ N ПП-82/90 с титром 4•109 кл/мл 15,
"Кр-1" ДЕП и/или ВГНКИ N "Нева" ДЕП с титром 4•109 кл/мл - 15,
инактивированный формалином антиген из штамма F. necrophorum ВГНКИ N "Кр-1"-ДЕП с титром 4•109 кл/мл 15,
инактивированный формалином антиген из штамма Staph.aureus ВГНКИ N 7315
ДЕП с титром 2•109 кл/мл 15,
инактивированный формалином антиген из штамма Act(Cor.)pyogenes ВГНКИ N 4/2334 ДЕП с титром 2•109 кл/мл 15,
инактивированный формалином антиген из штамма Cl. perfringens типа А ВГНКИ N 28 ДЕП с титром 1•109 кл/мл 10,
анатоксин из штамма Cl. perfringens типа А ВГНКИ N 28 ДЕП с активностью 4•104D Zm/мл 10,
гель гидроокиси алюминия 12,
физиологический раствор 8.The antigen mixture is thoroughly mixed and aluminum hydroxide is added. The resulting vaccine has the following composition (vol.):
formalin inactivated antigen from B. nodosus strain VIEV N PP-82/90 with a titer of 4 • 109 cells / ml 15,
"Kr-1" DEPT and / or VGNKI N "Neva" DEPT with a titer of 4 • 109 cells / ml - 15,
formalin inactivated antigen from strain F. necrophorum VGNKI N "Kr-1" -DEPT with a titer of 4 • 109 cells / ml 15,
formalin inactivated antigen from strain Staph.aureus VGNKI N 7315
DEPT with a titer of 2 • 109 cells / ml 15,
formalin inactivated antigen from strain Act (Cor.) pyogenes VGNKI N 4/2334 DEPT with a titer of 2 • 109 cells / ml 15,
formalin inactivated antigen from strain Cl. perfringens type A VGNKI N 28 DEPT with a titer of 1 • 109 cells / ml 10,
toxoid from strain Cl. perfringens type A VGNKI N 28 DEPT with activity 4 • 104 D Zm / ml 10,
gel of aluminum hydroxide 12,
saline solution 8.
Пример 3. Ассоциированную вакцину "Овикон" вводят животным с профилактической или лечебной целью подкожно, в области верхней трети шеи, в дозе 5 см3, двухкратно с интервалом 28 30 дней.Example 3. The associated vaccine "Ovicon" is administered to animals for prophylactic or therapeutic purposes subcutaneously, in the upper third of the neck, at a dose of 5 cm3 , twice with an interval of 28 to 30 days.
Иммунитет у животных создается к 15 20-му дню после проведения второй вакцинации и сохраняется 6 мес. Immunity in animals is created by the 15th 20th day after the second vaccination and lasts 6 months.
Вакцинацию начинают за 1 мес до предполагаемой сезонной вспышки заболевания. Vaccination begins 1 month before the expected seasonal outbreak.
В последующем при необходимости проводят однократные ревакцинации через 6 мес в дозе 5 см3.Subsequently, if necessary, conduct single revaccinations after 6 months at a dose of 5 cm3 .
Вакцинации подлежат животные с 6-месячного возраста. Суягных овец прививают не позднее одного месяца до начала окота. Vaccinations are subject to animals from 6 months of age. Sugar sheep are vaccinated no later than one month before lambing.
Ограничений по убою и использованию молока животных, привитых ассоциированной вакциной "Овикон" против инфекционных заболеваний конечностей овец, нет. There are no restrictions on the slaughter and use of animal milk vaccinated with the Ovicon associated vaccine against infectious diseases of sheep limbs.
Производственные испытания вакцины показали ее высокий профилактический и терапевтический эффект. Production trials of the vaccine showed its high prophylactic and therapeutic effect.
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU96119161ARU2098128C1 (en) | 1996-09-26 | 1996-09-26 | Mixed vaccine for control over sheep limb illness |
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU96119161ARU2098128C1 (en) | 1996-09-26 | 1996-09-26 | Mixed vaccine for control over sheep limb illness |
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2098128C1true RU2098128C1 (en) | 1997-12-10 |
| RU96119161A RU96119161A (en) | 1998-09-20 |
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU96119161ARU2098128C1 (en) | 1996-09-26 | 1996-09-26 | Mixed vaccine for control over sheep limb illness |
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2098128C1 (en) |
| Title |
|---|
| 1. GB, патент, 2054376, кл. A 61 K 39/02, 1981. 2. GB, патент, 2168609, кл. A 61 K 39/02, 1986. 3. Richard Cl. "Bull.Soc.Veter.Pratigue France", 1977, t. 6, п. 5, р. 307 - 309.* |
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US3532790A (en) | Somatic antigen vaccines from lysed inactivated bacteria and process for producing them | |
| RU2429012C1 (en) | Method of manufacturing associated vaccine against colibacteriosis, streptococcosis and enterococcal infection of calves and piglets | |
| US4472378A (en) | Live vaccine for the prevention of salmonellosis in water fowl, a process for making and applying the same | |
| RU2169193C2 (en) | Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa 5142 used for preparing vaccine against fur wild animals pseudomonosis | |
| US5225194A (en) | Aqueous diafiltration process for preparing acellular vaccines, against selected bacterial diseases | |
| RU2098128C1 (en) | Mixed vaccine for control over sheep limb illness | |
| RU2098127C1 (en) | Mixed vaccine for control over cattle necrobacteriosis | |
| RU2263143C2 (en) | Strain of bacterium streptococcus pyogenes 289 used for preparing vaccine against streptococcosis in fur animal | |
| RU2650628C1 (en) | Method of obtaining vaccine associated with colibacillosis, streptococcosis and enterococcal infection of calves and piglets | |
| RU2316345C1 (en) | Method for manufacturing associated vaccione against colibacteriosis, salmonellosis, streptococcosis and enterococcal infection in nutrias | |
| RU2043770C1 (en) | Method of preparing vaccine against necrobacteriosis in animals | |
| RU2521651C1 (en) | STRAINS OF BACTERIA Moraxella bovoculi "SH-CH6 N-DEP" USED TO MANUFACTURE DIAGNOSTIC PREPARATIONS AND VACCINES AGAINST INFECTIOUS KERATOCONJUNCTIVITIS OF CATTLE | |
| RU2109519C1 (en) | Method of preparing vaccine for necrobacteriosis control in animals | |
| RU2406532C1 (en) | Method of producing associated vaccine against streptococcosis and staphylococcosis of cattle | |
| RU2799603C1 (en) | Sa-21 strain of bacteria of streptococcus genus of streptococcus agalactiae species for the manufacture of biological products for the specific prevention of mastitis in cows | |
| RU2268933C1 (en) | STRAIN Haemophilus parasuis SK-1 AS PATHOGEN OF SWINE HEMOPHILEOUS POLYSEROSITIS FOR PREPARING DIAGNOSTIC AND VACCINE PREPARATIONS | |
| RU2145353C1 (en) | Strain of bacterium moraxella bovis "g97-vnivi" used for preparing diagnostica and vaccines against infectious keratoconjunctivitis in cattle | |
| RU2269570C2 (en) | Haemophilus parasuis strain as porcine haemophylic polyserositis agent for production of diagnostic and vaccine preparations | |
| RU2261109C1 (en) | Strain of bacterium streptococcus agalactiae 71 for preparing vaccine against streptococcosis in fur animal | |
| RU2099082C1 (en) | Vaccine for control over streptococcosis in nutria | |
| RU2169192C2 (en) | Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa ло3 used for preparing vaccine against fur wild animals pseudomonosis | |
| RU2043407C1 (en) | Strain of bacterium listeria monocytogenes used for listerious diagnostica preparing | |
| RU2080379C1 (en) | Strain of bacterium listeria monocytogenes vgnki-52 used for listerellosis vaccine preparing | |
| RU2147317C1 (en) | Strain of bacterium pseudomonas aeruginosa 4992, used for preparing vaccine against pseudomonosis in fur wild animals | |
| RU2043408C1 (en) | Strain of bacterium listeria monocytogenes used for listerious diagnostica preparing |
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees | Effective date:20150927 |