KR900006231B1 - Method for preparing 9-hydroxyelliptic glycoside - Google Patents

Abstract

Translated fromKorean

내용 없음.No content.

Description

Translated fromKorean

[발명의 명칭][Name of invention]

9-히드록시엘립티신 배당체의 제조방법Method for preparing 9-hydroxyelliptic glycoside

[발명의 상세한 설명]Detailed description of the invention

본 발명은 다음의 일반식(I)을 갖는 9-히드록시엘립티신 배당체의 제조방법에 관한 것이다.The present invention relates to a method for preparing 9-hydroxyelticin glycoside having the following general formula (I).

상기 식중, A는 알도스 잔기 또는 데옥시알도스 잔기를 나타내고

로 표시된 결합은 엘립티신의 2-위치의 질소원자와 당의 1-위치의 탄소원자 사이의 배당체 결합을 나타낸다. 상기 본 발명의 제조방법에 의해서 제조된 배당체는 강력한 항 암 활성 또는 특히 악성 종양에 대한 항 종양 활성이 우수하므로 항암제 또는 항 종양제로 사용될 수 있다.Wherein A represents an aldose residue or a deoxy aldose residue

A bond denotes a glycoside bond between the 2-position nitrogen atom of ellipsine and the 1-position carbon atom of the sugar. Glycosides prepared by the production method of the present invention may be used as an anticancer agent or an antitumor agent because of its excellent anticancer activity or particularly antitumor activity against malignant tumors.

엘립티신, 즉 5,11-디메틸-6H-피리도[4,3-b]카르바졸(즉 다음의 일반식(A)에서 R=H인 것), 9-메톡시엘립티신(즉 다음의 일반식(A)에서 R=OCH₃), 및 9-히드록시엘립티신(다음의 일반식(A)에서 R=OH)과 같은 피리도카르바졸 알칼로이드들은 예컨대 아스피도스퍼미나(Aspidospermina) 및 오크로시아(Ochrosia)잎에 함유된 알칼로이드로 잘 알려져 있다.Ellipsin, i.e., 5,11-dimethyl-6H-pyrido [4,3-b] carbazole (that is, R = H in the following general formula (A)), 9-methoxyellipticin (i.e. Pyridocarbazole alkaloids such as R = OCH₃ in formula (A), and 9-hydroxyellipticin (R = OH in formula (A) below) are for example Aspidospermina and It is well known as the alkaloid contained in the leaves of Ochrosia.

최근, J, 루이스(J.Roues)외 공동연구인 「암 공보지(파리),

437-441(1981)]은 다음의 일반식(B)를 갖는 2-N-메틸-9-히드록시엘립티시늄 초산염이 유방암에 대해 매우 표과적이라고 보고하였다.Recently, J, Louis et al.

437-441 (1981) reported that 2-N-methyl-9-hydroxyelliptinium acetate having the following general formula (B) is very conservative for breast cancer.

또한, R.W.구드리(Guthrie)의 공동연구인[약품화학지

, 755-760(1975)]은 엘립티신 및 9-메톡시엘립티신이 실험에 이용된 동물의 종양, 쥐의 임파성 백혈병 L-1210 및 육종 180(고체)에 대해 효과적이라고 보고 하였고, 심사된 일본특허 공고번호 제58-35196호와 영국특허 명세서 제1436080호에서는 쥐의 임파성 백혈병 L-1210에 대한 9-히드록시엘립티신의 활성이 9-에톡시엘립티신의 활성보다 100-1000배 이상 더 높다고 보고하였다.He is also a co-researcher of RW Guthrie.

, 755-760 (1975) reported that ellipsine and 9-methoxy ellipsine were effective against tumors of animals used in experiments, lymphatic leukemia L-1210 and sarcoma 180 (solid) in rats. In Patent Publication No. 58-35196 and British Patent No. 1436080, the activity of 9-hydroxyellipticin against lymphatic leukemia L-1210 in rats is 100-1000 times higher than that of 9-ethoxyelliptinine. Reported.

전술한 바와같이, 피리도카르바졸의 골격을 가진 화합물은 항암 또는 항종양 활성을 가지기 때문에 유용한 화합물이다. 이 화합물들의 합성에 대한 연구가 예를들면, L. K. 돌턴외 공동연구인 [Aust. J. Chem.,

2715-2727(1967)], A.H.잭슨외 공동연구인(J.Chem. Soc. Perkin I,1698-1704,(1977)],J.Y.랠러맨드(Lallemand)외 공동연구인 [Tetrahedron Letters, 15호, 1261-1264(1978)] 및 유럽특허 명세서 제9445호에서 보고되어 있다.As mentioned above, compounds having a backbone of pyridocarbazole are useful compounds because they have anticancer or antitumor activity. Studies on the synthesis of these compounds are described, for example, in LK Dalton et al. [Aust. J. Chem.,

2715-2727 (1967), AH Jackson et al. (J. Chem. Soc. Perkin I, 1698-1704, (1977)], JY Larmand et al. [Tetrahedron Letters, No. 15, 1261-1264 (1978) and European Patent Specification 9445.

더우기, 미국특허 제443429호에는 피리도카르바졸 골격내로 어떤 치환체가 도입된 화합물이 쥐의 임파성백혈병 L-1210에 대해 활성을 갖는다고 기재되어 있다.Furthermore, US Pat. No. 4,444,293 describes that compounds in which a substituent is introduced into the pyridocarbazole skeleton have activity against rat lymphocytic leukemia L-1210.

그러나,엘립티신, 9-메톤시엘립티신 및 9-히드록시엘립티신은 항종양제로서 임상적으로 사용되어오지는 않았다. 이는 다른 이유들, 즉 이 화합물들의 수용성이 매우 낮다는 사실에 기인된다.However, ellipsine, 9-methonecylipidin, and 9-hydroxyellipticin have not been used clinically as antitumor agents. This is due to other reasons, the fact that the water solubility of these compounds is very low.

비록 미심사 일본특허 공고번호 제58-222087호는 이 골격의 10-위치로 아미노산, 올리고펩티드, 뉴클레오티드, 또는 뉴클레오시드를 도입하기 위해 2-알킬-9-히드록시엘립티시늄염을 산화시킬것을 제안하고있으나, 이 화합물들은 쥐의 임파성 백혈병 L-1210에 대해 바람직한 수명-연장 효과를 제공하지 않는다.Although unexamined Japanese Patent Publication No. 58-222087 discloses the oxidation of 2-alkyl-9-hydroxyelliptinium salts to introduce amino acids, oligopeptides, nucleotides, or nucleosides into the 10-position of this backbone. However, these compounds do not provide the desired life-extension effect against lymphatic leukemia L-1210 in rats.

전술한 문제점들을 해결하기 위해 본 발명자들은 미심사 일본특허 공개번호 제61-37799호 또는 EP-A-0173462호에서 나타난 바와같은 상기 일반식(I)을 갖는 엘립티신 유도체의 2-질소 위치에 배당체 결합을 통해 결합된 여러가지 당류를 가진 화합물들을 합성하였다.In order to solve the above-mentioned problems, the present inventors have identified glycosides at the 2-nitrogen position of the ellipsin derivative having the general formula (I) as shown in Unexamined Japanese Patent Publication No. 61-37799 or EP-A-0173462. Compounds having various sugars bound through the binding were synthesized.

따라서, 본 발명의 목적은 종래 기술을 개선시키고, 현저한 항암 또는 항종양 활성을 갖는 9-히드록시엘립티신 배당체의 제조방법을 제공하는데 있다.Accordingly, it is an object of the present invention to improve the prior art and to provide a process for the preparation of 9-hydroxyellipticin glycosides with significant anticancer or antitumor activity.

본 발명의 기타의 목적 및 장점은 다음의 설명으로부터 분명해 질 것이다.Other objects and advantages of the present invention will become apparent from the following description.

본 발명에 따라, 진한 브롬산 용액과 함께 가열하면서 다음의 일반식(II)를 갖는 엘립티신 배당체의 유도체를 산가수분해시키는 단계로 되는 상기 일반식(I)을 갖는 9-히드록시엘립티신 배당케의 제조방법이 제공된다.According to the present invention, the acid hydrolysis of a derivative of the ellipsine glycoside having the following formula (II) while heating with a concentrated bromic acid solution is 9-hydroxy ellipsine having the above formula (I) A method for producing a dividend is provided.

여기서 R¹은 탄소원자수가 1-3개인 알킬기이거나 벤질기이고, B는 당의 수산기의 수소왼자 대신 치환된 C₂-C₉아실기를 갖는 아실화된 알도스 잔기, 당의 수산기의 수소원자 대신 치환된 벤질기를 갖는 벤질화된알도스 잔기, 당의 수산기의 수소원자 대신 치환된 C₂-C₉아실기를 갖는 아실화된 데옥시 알도스 잔기, 또는 당의 수산기의 수소원자 대신 치환된 벤질기를 갖는 벤질화된 데옥시알도스 잔기를 나타낸다.Wherein R¹ is an alkyl group having 1-3 carbon atoms or a benzyl group, B is an acylated aldose residue having a substituted C₂ -C₉ acyl group in place of the hydrogen left of the hydroxyl group of the sugar, a substituted hydrogen atom of the hydroxyl group of the sugar Benzylated aldose residues having benzyl groups, acylated deoxy aldose residues having C₂ -C₉ acyl groups substituted in place of the hydrogen atoms of the hydroxyl groups of the sugars, or benzylated groups having benzyl groups substituted in place of the hydrogen atoms of the hydroxyl groups of the sugars Deoxyaldos residues.

본 발명자들은 자연발생적인 골격으로부터 유도된 약리활성을 갖는 여러가지 유용한 유도체를 개발하는 연구과정에서 엘립티신의 항암 또는 항종양 활성에 주목하였으며, 엘립티신 골격이 물에 잘 용해하지 않는 성질을 개선시키고자 하였다.The present inventors have focused on the anticancer or antitumor activity of ellipsine in the process of developing various useful derivatives having pharmacological activity derived from naturally occurring skeletons, and aimed to improve the properties of ellipsine skeletons that do not dissolve well in water. It was.

이러한 목적을 달성하기 위하여 당의 도입이 시도되었는데 당이 엘립티신 유도체에 도입되면 다음의 일반식(IV)를 갖는 당 유도체가 B -Br(IV)In order to achieve this purpose, the introduction of sugars has been attempted. When sugars are introduced into ellipsine derivatives, sugar derivatives having the general formula (IV) are B-Br (IV).

(상기 식중, B는 당의 수산기의 수소원자 대신 치환된 C₂-C₉아실기를 갖는 아실화된 알도스 잔기, 당의 수산기의 수소 원자 대신 치환된 벤질기를 갖는 벤질화된 알도스 잔기, 당의 수산기의 수소원자 대신 치환된 C₂-C₉아실기를 갖는 아실화된 데옥시알도스 잔기, 또는 당의 수산기의 수소원자 대신 치환된 벤질기를 갖는 벤질화된 데옥시알도스 잔기를 나타내며, B와 Br사이의 결합은 1-위치의 탄소와 브롬 탄소의 결합을 나타낸다), 약 염기성 금속 화합물이나 토리알킬아민과 같은 산 포획제의 존재하에서 다음의 일반식(Ⅲ)을 갖는 엘립티신 유도체와 반응한다는 사실을 알게 되었다.Wherein B is an acylated aldose residue having a C₂ -C₉ acyl group substituted in place of the hydrogen atom of the sugar hydroxyl group, a benzylated aldose residue having a benzyl group substituted in place of the hydrogen atom of the hydroxyl group of the sugar, a hydroxyl group of the sugar Acylated deoxy aldose residue having a C₂ -C₉ acyl group substituted in place of a hydrogen atom, or a benzylated deoxy aldose residue having a benzyl group substituted in place of a hydrogen atom of a hydroxyl group of the sugar, and between B and Br The bond represents the bond of carbon and bromine carbon in the 1-position), and in the presence of an acid trapping agent, such as a weakly basic metal compound or torialkylamine, to react with an ellipsin derivative having the general formula (III) It became.

상기 식중, R¹은 탄소원자수가 1-3개인 알킬기 또는 벤질기를 나타낸다.In the above formula, R¹ represents an alkyl group or benzyl group having 1-3 carbon atoms.

화합물(II)의 9-위에 있는 보호기 R¹은 예컨대 트리메틸 실릴 요오드화물에 의해 제거될 수 있다. 더우기, 트리메틸 실릴 요오드화물을 사용하면, 당의 벤질기도 제거할 수 있다.The protecting group R¹ on 9-position of compound (II) can be removed, for example, by trimethyl silyl iodide. Moreover, benzyl groups of sugars can be removed by using trimethyl silyl iodide.

이 시약의 반응성이 그다지 강력하지는 않지만, 주의깊게 다루어야 한다. 한편, 비록 당의 아실기는 통상의 수용성 암모니아와 반응시킴으로써 쉽게 제거될 수 있지만,9-위치의 알킬기나 벤질보호기는 수용성 암모니아에 의해 제거될 수 없다. 따라서, 상술한 문제점에 대한 기술적인 해결책과 반응이 종결된 다음 목적하는 본 발명의 화합물을 광학적으로 활성인 순수화합물로서 용이하게 얻을 수 있는 방법을 개발하는 것이 절실히 요청되고 있다.The reactivity of this reagent is not very strong, but must be handled with care. On the other hand, although the acyl group of the sugar can be easily removed by reacting with ordinary water-soluble ammonia, the alkyl group or benzyl protecting group in the 9-position cannot be removed by the water-soluble ammonia. Therefore, there is an urgent need to develop a technical solution to the above problems and a method for easily obtaining the desired compound of the present invention as an optically active pure compound after the reaction is completed.

종래 기술의 문제점들은 본 발명에 따라 상기 엘립티신 배당체의 유도체(II)를 진한 브롬산 용액과 함께 가열하여 산 가수분해 시킴으로써 해결될 수 있다The problems of the prior art can be solved by heating the derivative (II) of the ellipsine glycoside with a concentrated bromic acid solution in accordance with the present invention to acid hydrolysis.

예를들어 L.J 헤인즈외 공동연구인 [J. Chem. Soc. 3727-3732(1957)]의 연구에서 나타난 바와같이 피리딘 골격의 질소원자를 할로겐화된 당으로 4급화시키기 위한 여러가지 제안이 있다. 그러나, 이 제조방법들이 더 구체적으로 연구될지라도 광학 활성이 있는 니코틴 아미드 뉴클레오티드를 만족스럽게 생산해낼 수 없다. 따라서, 광학 활성이 있는 화합물을 효과적으로 제조하기 위한 중요한 연구가 행해져 왔으며, 그 결과, 탄산 카드뮴, 탄산 칼슘 또는 탄산 구리와 같은 약 염기성 금속 화합물을 반응계에 첨가시킴으로써 목적하는 화합물이 성공적으로 제조될 수 있다는 사실이 발견되었다.For example, L.J Haines et al. [J. Chem. Soc. 3727-3732 (1957), there are several proposals for quaternization of the nitrogen atom of the pyridine backbone with halogenated sugars. However, even if these preparation methods are studied more specifically, they cannot produce satisfactory optically active nicotine amide nucleotides. Therefore, important studies have been conducted to effectively prepare optically active compounds, and as a result, the desired compounds can be successfully prepared by adding weakly basic metal compounds such as cadmium carbonate, calcium carbonate or copper carbonate to the reaction system. The fact was discovered.

그러나, 이 방법은 약 염기성 금속 화합물을 반응계에 첨가시키는 것이 요구되므로 반응중 생성된 목적화합물을 효과적으로 분리 및 정제하기 위해서는 추가적인 공정을 필요로 한다.However, this method requires the addition of a weakly basic metal compound to the reaction system, which requires an additional step to effectively separate and purify the target compound produced during the reaction.

따라서 본 반명자들은 분리 및 정제 단계를 필요로 하지 않고 상술한 목적을 달성할 수 있는 산 모획제를 발견하기 위한 시도를 하였으며 그리하여 트리알킬아민 화합물을 사용하면 최상의 결과를 얻을 수 있음을 발견하였다. 그다음 엘립티신 배당체의 유도체(II)의 9-위치에 있는 수산기의 보호기 및 당의 보호기를 제거하는데 적합한 시약을 개발하려는 연구가 행해진 결과 브롬산이 최상의 결과를 제공한다는 사실을 발견하게 되었다.Therefore, the present inventors have attempted to find an acid scavenger capable of achieving the above-mentioned objectives without the need for separation and purification steps, and thus found that the best results can be obtained using trialkylamine compounds. Subsequently, studies were conducted to develop a reagent suitable for removing the protecting group of the hydroxyl group and the protecting group of the sugar at the 9-position of the derivative (II) of the ellipsine glycoside and found that bromic acid provided the best result.

본 발명에 이용될 수 있는 브롬산 용액은 30중량%이상, 일반적으로는 47중량% 이상인 것이 바람직하다. 더우기, 이 브롬산은 수용액의 형태일 필요는 없고 예컨대 초산용액형태로 사용될 수 있다.The bromic acid solution that can be used in the present invention is preferably at least 30% by weight, generally at least 47% by weight. Moreover, this bromic acid need not be in the form of an aqueous solution and can be used, for example, in the form of acetic acid solution.

본 발명에 따라 이 반응은 예를들면 일반식(II)을 갖는 엘립티신 배당체의 유도체 1몰에 농도가 30중량-47중량%인 브롬산 용액 5-20리터를 첨가시킨 다음, 반응온도, 예를들면 70℃-130℃로 특히 환류온도 하에서 10-150분 동안 가열시킴으로써 수행될 수 있다.According to the invention, this reaction is carried out by adding 5-20 liters of a bromic acid solution having a concentration of 30% by weight to 47% by weight to 1 mole of a derivative of ellipsin glycoside having the formula For example, by heating to 70-130 ° C., especially under reflux temperature, for 10-150 minutes.

반응이 종결된 후, 이 반응 혼합뭍을 냉각시키고, 물로 희석시킨 다음 다시 냉각시켜 결정을 석출시킨다. 이렇게 얻은 결정을 수집하고 예컨대 수성 알코올에서 재결정시켜 광학적으로 활성인 일반식(I)의 목적하는 화합물 9-히드록시엘립티신 배당체를 높은 수율로 얻는다.After the reaction is completed, the reaction mixture is cooled, diluted with water and cooled again to precipitate crystals. The crystals thus obtained are collected and recrystallized, for example, in aqueous alcohol to give the desired yield of the desired compound 9-hydroxyellipsin glycoside of general formula (I) in high yield.

본 발명의 실시예를 들어 더욱 구체적으로 설명하면 다음과 같으며 이들 실시예로서 본 발명을 제한하는것은 아니다.The present invention will be described in more detail with reference to the following examples, which are not intended to limit the present invention.

[실시예 1]Example 1

2-α-L-아라비노피라노실-9-히드록시엘립티시늄 브롬화물의 합성Synthesis of 2-α-L-arabinopyranosyl-9-hydroxyellipthysinium bromide

47% 브롬산 수용액 650ml에 2-(2,3,4-트리 -O-아세틸-α,-L-아라비노피라노실) -9-메톡시엘립티시늄 브롬화물 40g(0.065몰)을 용해시키고 이 용액을 환류하에서 30분동안 가열했다.40 g (0.065 mol) of 2- (2,3,4-tri-O-acetyl-α, -L-arabinopyranosyl) -9-methoxy ellipthysinium bromide was dissolved in 650 ml of an aqueous 47% bromic acid solution. This solution was heated at reflux for 30 minutes.

이렇게 얻은 반응혼합물을 얼음으로 냉각시키고 여기에 물 650ml를 첨가시킨 다음 얼음이 담긴 용기속에서 3시간 동안 냉각시켰다. 이 과정에 의해 생성된 침전물을 4000rpm에서 10분 동안 원심분리로 분리시킨다음 소량의 냉수로 세척하였다. 이렇게 얻은 침전물을 온수 500ml에 용해시키고 에틸알코올 1000ml을 첨가시켜 재결정시켰다. 재결정시킨 후 석출된 결정을 수집하여 에틸 알코올로 3회 세척한 후 건조시켜 목적하는 화합물 26.54g을 86%의 수율로 얻었다. 덧붙여, 재결정의 모액을 농축 및 냉각함으로써 목적하는 화합물 1.23g(수율 4%)을 추가로 얻었다.The reaction mixture thus obtained was cooled with ice, 650 ml of water was added thereto, and then cooled in an ice container for 3 hours. The precipitate produced by this procedure was separated by centrifugation at 4000 rpm for 10 minutes and then washed with a small amount of cold water. The precipitate thus obtained was dissolved in 500 ml of warm water and recrystallized by adding 1000 ml of ethyl alcohol. After recrystallization, the precipitated crystals were collected, washed three times with ethyl alcohol and dried to obtain 26.54 g of the desired compound in a yield of 86%. In addition, 1.23 g (yield 4%) of the desired compound was further obtained by concentrating and cooling the mother liquor of the recrystallization.

이렇게 얻은 화합뭍의 광학적 순도는 다음의 조건하에서 HPLC에 의해 측정되었다.The optical purity of the compound so obtained was determined by HPLC under the following conditions.

컬럼 : 쉼 -팩(shim-pack)CLC-ODS 15cm×6mm

Column: shim-pack CLC-ODS 15cm × 6mm

이동상 : 아세토니트릴 : 0.02MMobile phase: acetonitrile: 0.02M

NaH₂PO₄·H₃PO₄완충액 =1 : 5_{NaH 2 PO 4 · H 3 PO} 4 buffer solution = 1: 5

유속 : 1.0ml/분 또는Flow rate: 1.0 ml / min or

이동상 : 아세토니트릴 : 0.02MMobile phase: acetonitrile: 0.02M

NaH₂PO₄·H₃PO₄완충액=1 : 4_{NaH 2 PO 4 · H 3 PO} 4 buffer solution = 1: 4

유속 : l.5ml/분Flow rate: l.5ml / min

이렇게 얻은 화합물의 이화학적 성질은 다음과 같다.The physicochemical properties of the compound thus obtained are as follows.

융점 : >250℃(분해)Melting Point:> 250 ℃ (Decomposition)

: -230℃(C=0.20, H₂O)

: -230 ° C (C = 0.20, H₂ O)

적외선 스펙트럼 : 3250, 1640, 1600, 1400, 1420, 1220, l200(KBr,cm^-1) : 1150, 1090, 1060, 810Infrared spectrum: 3250, 1640, 1600, 1400, 1420, 1220, l200 (KBr, cm^-1 ): 1150, 1090, 1060, 810

자외선 스펙트럼 : 227(ε14000), 249(ε23000), 267UV spectrum: 227 (ε14000), 249 (ε23000), 267

(ε25000), 282(ε22000), (ε52000)

(ε25000), 282 (ε22000), (ε52000)

질량 스펙트럼 : 395[C₂₂H₂₃N₂O₅]⁺Mass spectrum: 395 [C₂₂ H₂₃ N₂ O₅ ]⁺

: 2.85(3H,s) 3.65(1H,m) 3.90(3H,m)

2.85 (3H, s) 3.65 (1H, m) 3.90 (3H, m)

(DMSO-d6, δppm) 4.08(1H,d) 5.12(1H,d) 5.24(1H,d) 5.61(1H,d) 5.74(1H,d,J=8.5Hz,1-H) 7.18(1H,dd,J=2,9Hz) 7.55(1H,d,J=9Hz) 7.86(1H,d,J=2Hz) 8.51(2H,AB^q) 9,45(1H,brs) 10.03(1H,s) 12.08(1H,brs)(DMSO-d6, δ ppm) 4.08 (1H, d) 5.12 (1H, d) 5.24 (1H, d) 5.61 (1H, d) 5.74 (1H, d, J = 8.5 Hz, 1-H) 7.18 (1H, dd, J = 2,9 Hz) 7.55 (1H, d, J = 9 Hz) 7.86 (1H, d, J = 2 Hz) 8.51 (2H, AB^q ) 9,45 (1H, brs) 10.03 (1H, s) 12.08 (1H, brs)

* 내부 기준으로 사용된 CD₂HSOCD₃의 양자의 화학적 이동(δ2.50)* Chemical shift (δ2.50) of both CD₂ HSOCD₃ used as an internal reference

원소분석 : C₂₂H₂₃N₂O₅Br·2H₂OElemental analysis: C₂₂ H₂₃ N₂ O₅ Br · 2H₂ O

이론치 : C ; 5167, H ; 532, N ; 5.48Theoretic value: C; 5167, H; 532, N; 5.48

실측치 : C ; 51.57, H ; 5.31, N ; 5.40Found: C; 51.57, H; 5.31, N; 5.40

[실시예 1]Example 1

2,3,4-트리 -O-아세틸 -β-L- 아라비노피라노실 브롬화물의 합성Synthesis of 2,3,4-tri-O-acetyl-β-L-arabinopyranosyl bromide

피리딘 250ml에 L-아라비노스 50g(0.33몰)을 현탁시키고, 무수초산 200ml(217g,2.13몰)을 첨가시킨뒤 이 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하면서 정치시켰다. 이 반응 혼합물에 얼음 냉각하에서 에틸 알코올 50ml를 첨가시키고 용매를 진공에서 증류시켰다. 용매와 시약의 과잉량은 에틸알코올 및 물로 공비증류시켜제거시켰다.50 g (0.33 mol) of L-arabinose was suspended in 250 ml of pyridine, 200 ml (217 g, 2.13 mol) of acetic anhydride were added, and the mixture was allowed to stand at room temperature overnight with stirring. 50 ml of ethyl alcohol was added to the reaction mixture under ice cooling, and the solvent was distilled off in vacuo. Excess solvent and reagents were removed by azeotropic distillation with ethyl alcohol and water.

위에서 얻은 잔사를 얼음 냉각하에서 초산 100ml에 용해시키고 초산내의 30% 브롬산 용액 100ml를 첨가시킨 다음, 3시간 동안 교반시켰다. 이렇게 얻은 반응 혼합물을 염화메틸렌 800ml로 희석시키고 물로 세척하였다. 수층은 염화메틸렌 200m1로 재추출시켰다, 혼합 유기층을 냉수, 이탄산나트륨 포화 수용액, 냉수를 사용하여 이 순서대로 세척하고 나서 황산 마그네슘으로 건조시켰다. 농축시킨 다음, 잔사를 에테르로 결정화시키고 차가운 에테르로 세척하였다. 이렇게 하여, 목적하는 화합물 59.6g을 53%의 수율로 얻었다.The residue obtained above was dissolved in 100 ml of acetic acid under ice cooling, 100 ml of 30% bromic acid solution in acetic acid was added, and then stirred for 3 hours. The reaction mixture thus obtained was diluted with 800 ml of methylene chloride and washed with water. The aqueous layer was reextracted with 200 m1 of methylene chloride. The mixed organic layer was washed in this order using cold water, saturated aqueous sodium bicarbonate solution and cold water, and then dried over magnesium sulfate. After concentration, the residue was crystallized with ether and washed with cold ether. Thus, 59.6 g of the desired compound was obtained in a yield of 53%.

[실시예 2]Example 2

2-(2,3,4-트리-O-아세틸-α-L-아라비노피라노실)-9-메톡시엘립티시늄 브롬화물의합성Synthesis of 2- (2,3,4-tri-O-acetyl-α-L-arabinopyranosyl) -9-methoxyellipthysinium bromide

(AC = 아세틸기)(AC = acetyl group)

9-메톡시엘립티신 8.28g(0.03몰), 2,3,4-트리-O-아세틸-L-아라비노피라노실 브롬화물 20.35g(0.06몰), 및 트리에틸아민 4.2ml(0.03몰)을 아세토니트릴 300ml에 현탁시키고 5분간 환류시키면서 가열하였다.8.28 g (0.03 mol) of 9-methoxy ellipsine, 20.35 g (0.06 mol) of 2,3,4-tri-O-acetyl-L-arabinopyranosyl bromide, and 4.2 ml (0.03 mol) of triethylamine Was suspended in 300 ml of acetonitrile and heated at reflux for 5 minutes.

그다음, 반응 혼합물을 빙수에서 급속히 냉각시키고 이렇게 얻은 콜로이드상 침전물을 수집했다, 이 침전물을 클로로포름과 에테르를 1 : 4의 비율로 혼합한 것으로 3회 세척하고, 이렇게 얻은 침전물(α : β=100 : 1,1)을 아세토니릴 880ml로 재결정시켜서 목적하는 화합물 7.56g(수율 41%)을 얻었다. 재결정의 모액을 추가로 농축시키고 아세토니트릴로 부터 재결정시켜 목적하는 화합물 3.53g(수율 19%)을 얻었다.Then, the reaction mixture was rapidly cooled in ice water and the colloidal precipitate thus obtained was collected. The precipitate was washed three times with a mixture of chloroform and ether in a ratio of 1: 4, and the precipitate thus obtained (α: β = 100: 1,1) was recrystallized from 880 ml of acetonitrile to obtain 7.56 g (yield 41%) of the title compound. The mother liquor of the recrystallization was further concentrated and recrystallized from acetonitrile to obtain 3.53 g of the desired compound (yield 19%).

α-생성물과 β-생성물의 비율은 다음의 조건하에서 HPLC에 의한 면적율을 근거로 하여 측정되었다. 컬럼 : 노바-팩 C-18, 15cm×3.9mm

The ratio of α-product and β-product was measured based on the area ratio by HPLC under the following conditions. Column: Nova-Pack C-18, 15 cm x 3.9 mm

이동상 : 0.1M초산 암모늄·초산 완충액(pH=3) : 메탄올=2 : 1Mobile phase: 0.1 M ammonium acetate, acetate buffer (pH = 3): methanol = 2: 1

유속 : 1.5ml/분Flow rate: 1.5ml / min

검색 : 318nm(자외선 검색기)Search: 318nm (ultraviolet detector)

이렇게 얻은 화합물의 이화학적 성질은 다음과 같다.The physicochemical properties of the compound thus obtained are as follows.

결정형태 : 무정형 결정Crystal Form: Amorphous Crystal

: -46℃(C=0.16,H₂O)

: -46 ° C (C = 0.16, H₂ O)

적외선 스펙트럼 : 1750,1640,1590,1480,1420,1370,1300Infrared Spectrum: 1750,1640,1590,1480,1420,1370,1300

(KBr,cm^-l) : 1240,1220,1120,1090,1060,1030,960,930,810(KBr, cm^-l ): 1240,1220,1120,1090,1060,1030,960,930,810

자외선 스펙트럼 : 228(ε15000),249(ε24000),256UV spectrum: 228 (ε15000), 249 (ε24000), 256

(ε24000), 268(ε24000), 282(ε21000),325(ε52000)

(ε24000), 268 (ε24000), 282 (ε21000), 325 (ε52000)

질량 스펙트럼 535[C₂₉H₃₁N₂O₈]⁺Mass spectrum 535 [C₂₉ H₃₁ N₂ O₈ ]⁺

(CDCl₃,δppm)^*1.68(3H,s) 1.98(3H,s) 2.03(3H,s) 2.32(3H,s) 2.46(3H,s) 3.94(3H,s) 4.41(1H,dd,J=13Hz,1.8Hz) 4.65(1H,d,J=13Hz) 5.50(2H,m) 5.61(1H,brs) 7.06(1H,brs) 7.20(1H,d,J=9Hz,1'-H) 7.32(1H,dd,J=2Hz,7Hz) 7.61(1H,d,J=7Hz) 8.12(1H,d,J=9Hz) 8.17(1H,d,J=9Hz) 10.18(1H,s) 11.94(1H,brs)

(CDCl₃ , δ ppm)^* 1.68 (3H, s) 1.98 (3H, s) 2.03 (3H, s) 2.32 (3H, s) 2.46 (3H, s) 3.94 (3H, s) 4.41 (1H, dd, J = 13 Hz, 1.8 Hz) 4.65 (1H, d, J = 13 Hz) 5.50 (2H, m) 5.61 (1H, brs) 7.06 (1H, brs) 7.20 (1H, d, J = 9 Hz, 1'-H) 7.32 (1H, dd, J = 2Hz, 7Hz) 7.61 (1H, d, J = 7Hz) 8.12 (1H, d, J = 9Hz) 8.17 (1H, d, J = 9Hz) 10.18 (1H, s) 11.94 (1H , brs)

* 내부 기준으로 이용된 TMS* TMS used as internal standard

[평가 실시예]Evaluation Example

9-히드록시엘립티신 배당체의 항암 또는 항종양 활성은 다음과 같이 쥐의 실험용 종양 L-1210을 이용하여 평가하였다.The anticancer or antitumor activity of 9-hydroxyellipticin glycosides was evaluated using experimental tumor L-1210 in rats as follows.

(1) 사용된 동물(1) used animals

생후 6주된 BDF₁암새앙쥐, 평균체중 17-18g, 1군에 6마리로 사용.BDF₁ female rat, 6 weeks old, average body weight 17-18g, 6 animals per group.

(2) 사용된 종양의 종류 :(2) Type of tumor used:

L 1210(쥐의 임파성 백혈병 세포)를 10⁵세포/쥐로 복강내 주사(ip)하였다.L 1210 (lymphocytic leukemia cells in mice) was intraperitoneally injected (ip) at 10⁵ cells / mouse.

(3) 샘플 투여방법 :(3) Sample administration method:

L 1210을 쥐에 복강내 주사하고, L 1210을 주사한 뒤 24시간후 부터, 5일동안 1일 1회로 샘플을 연속적으로 투여하였다.L 1210 was injected intraperitoneally into rats, and samples were continuously administered once daily for 5 days from 24 hours after L 1210 injection.

(4) 평가방법 :(4) Evaluation method:

샘플의 효능은 대조준과 비교했을 때 샘플이 투여된 군의 평균 생존일수의 증가된 수명(ILS%)으로 측정하였다.The efficacy of the sample was measured as the increased lifespan (ILS%) of the mean survival days of the group to which the sample was administered compared to the control.

이 결과는 표 1에 나타내었다. 표 1에 나타난 결과로부터, 본 발명의 엘립티신 유도체가 쥐의 임파성 백혈병 L 1210에 대해 우수하거나 현저한 항암 또는 항종양 효과를 갖는다는 것을 분명히 알 수 있다. 80일 생존수란 쥐의 임파성 백혈병 L 1210을 쥐에게 투여한 뒤 80일 동안 살아 있는 쥐의 수를 의미한다.The results are shown in Table 1. From the results shown in Table 1, it can be clearly seen that the ellipsine derivatives of the present invention have excellent or significant anti-cancer or anti-tumor effects on rat lymphoid leukemia L 1210. The 80-day survival number refers to the number of mice that survived for 80 days after the rat lymphoid leukemia L 1210 was administered to the mice.

따라서 본 발명의 엘립티신 유도체는 항종앙체로 효과적이라고 믿어진다.Thus, it is believed that the ellipsine derivatives of the present invention are effective as anti-antibodies.

[표 1]TABLE 1

Claims (12)

Translated fromKorean

다음의 일반식(II)를 갖는 엘립티신 배당체의 유도체를 진한 브롬산 용액과 함께 가열시켜 산 가수분해 시키는 단계로 되는 것을 특징으로 하는 다음의 일반식(I)을 갖는 9-히드록시엘립티신 배당체의 제조방법.9-hydroxyellipsin having the following general formula (I), wherein the derivative of the ellipsine glycoside having the following general formula (II) is heated with an concentrated bromic acid solution for acid hydrolysis. Method for preparing glycosides.

상기식에서, A는 알도스 잔기 또는 데옥시 알도스 잔기를 나타내며

로 표시된 결합은 엘립티신의 2-위치의 질소 원자와 1-위치의 탄소원자 사이의 배당체 결합을 나타내며,Wherein A represents an aldose residue or a deoxy aldose residue

A bond denotes a glycoside bond between a 2-position nitrogen atom and an 1-position carbon atom of ellipsine,

상기 식에서, R¹은 탄소원자수 1-3개인 알킬기 또는 벤질기를 나타내며 B는 당의 수산기의 수소원자 대신 치환된 C₂-C₉아실기를 갖는 아실화된 알도스 잔기, 당의 수산기의 수소원자 대신 치환된 벤질기를 갖는 벤질화된 알도스 잔기, 당의 수산기의 수소원자 대신 치환된 C₂-C₉아실기를 갖는 아실화된 데옥시알도스 잔기, 또는 당의 수산기의 수소원자 대신 치환된 벤질기를 갖는 벤질화된 데옥시알도스 잔기를 나타낸다.Wherein R¹ represents an alkyl group or a benzyl group having¹ to 3 carbon atoms and B represents an acylated aldose residue having a substituted C₂ -C₉ acyl group in place of the hydrogen atom of the hydroxyl group of the sugar, substituted for the hydrogen atom of the hydroxyl group of the sugar Benzylated aldose residues having benzyl groups, acylated deoxyaldos residues having C₂ -C₉ acyl groups substituted in place of the hydrogen atoms of the hydroxyl groups of the sugars, or benzylated groups having benzyl groups substituted in place of the hydrogen atoms of the hydroxyl groups of the sugars Deoxyaldos residues.제1항에 있어서, 상기 알도스 잔기가 알도테트로스 잔기임을 특징으로 하는 방법.The method of claim 1, wherein the aldose residue is an aldoterose residue.제1항에 있어서, 상기 알도스 잔기가 알도펜토스 잔기임을 특징으로 하는 방법.The method of claim 1 wherein said aldose residue is an aldopentose residue.제1항에 있어서, 상기 알도스 잔기가 알도헥소스 잔기임을 특징으로 하는 방법.The method of claim 1 wherein said aldose residue is an aldohexose residue.제1항에 있어서, 상기 데옥시알도스 잔기가 2-데옥시알도펜토스 잔기임을 특징으로 하는 방법.The method of claim 1, wherein said deoxyaldose residue is a 2-deoxyaldopentose residue.제1항에 있어서, 상기 데옥시알도스 잔기가 2-데옥시알도헥소스 잔기임을 특징으로 하는 방법.The method of claim 1, wherein said deoxyaldos residue is a 2-deoxyaldohexose residue.제1항에 있어서, 상기 데옥시알도스 잔기가 5-데옥시알도펜토스 잔기임을 특징으로하는 방법.The method of claim 1, wherein said deoxyaldose residue is a 5-deoxyaldopentose residue.제1항에 있어서, 상기 데옥시알도스 잔기가 6-데옥시알도헥소스 잔기임을 특징으로 하는 방법.The method of claim 1 wherein said deoxyaldos residue is a 6-deoxyaldoxohex moiety.제1항에 있어서, 상기 화합물(I) 및 (II)가 광학적으로 활성인 화합물임을 특징으로 하는 방법.The method of claim 1, wherein said compounds (I) and (II) are optically active compounds.제1항에 있어서, 상기 브롬산 수용액이 엘립티신 배당체의 유도체 1몰에 대해 5-20리더로 사용됨을 특징으로 하는 방법.The method of claim 1, wherein the aqueous bromic acid solution is used in a 5-20 leader per mole of derivatives of the ellipsine glycosides.제1항에 있어서, 반응온도가 70℃-130℃임을 특징으로 하는 방법.The method of claim 1, wherein the reaction temperature is 70 ℃-130 ℃.제1항에 있어서, 반응시간이 10-150분임을 특징으로 하는 방법.The method of claim 1 wherein the reaction time is 10-150 minutes.