【発明の詳細な説明】〔産業上の利用分野〕本発明は体液中に含有されるに到った物質を検知し、か
つその含有量を表示する分析素子に関し、更に具体的に
は血液、尿或は唾液等の体液中に含有されるアルコール
の分析素子に関する。[Detailed Description of the Invention] [Field of Industrial Application] The present invention relates to an analytical element that detects substances contained in body fluids and displays the content thereof, and more specifically relates to an analytical element that detects substances contained in body fluids and displays the content thereof. This invention relates to an element for analyzing alcohol contained in body fluids such as urine or saliva.
臨床化学分析に供する試料としては、各種体液を用いる
ことが圧倒的に多い。中でも血液、特に血清は、通常恒
常性が維持されていること、全身の代謝動態、あるいは
各種臓器情報を得やすいこと、採取に比較的侵襲が少な
いことなど数多くの利点から一般的な試料として用いら
れている。尿も比較的よく用いられる検体であり簡易な
検査手法でリアルタイムの情報が得られるため基本的な
診察法の一つと高く評価され、スクリーニング検査に繁
用されている。Various body fluids are overwhelmingly used as samples for clinical chemical analysis. Among them, blood, especially serum, is commonly used as a sample because of its many advantages, such as normally maintaining homeostasis, making it easy to obtain information on whole-body metabolic dynamics and various organs, and being relatively less invasive to collect. It is being Urine is also a relatively commonly used specimen and is highly regarded as one of the basic diagnostic methods because real-time information can be obtained with a simple testing method and is frequently used for screening tests.
また唾液の分泌生理については比較的よく観察されてい
るが、臨床医学領域では最近まで全く無視されていた分
析試料であって、臨床化学検査の領域では僅かに深索濃
度の血液−唾液相関に関する研究があるのみである （
奥田清、唾液、講談社、１９７２）。しかし唾液は患者
にもっとも負担をかけず随時に採取しうる試料であり、
特殊な場合を除けば量的にも十分得られ、特別な前処理
を必要とせず、臨床化学用試料として数多くの長所を持
っていて今後研究の発展に伴い利用の機会も多くなるこ
とと考えられる。In addition, although the physiology of saliva secretion has been relatively well observed, it is an analysis sample that has been completely ignored until recently in the field of clinical medicine, and in the field of clinical chemistry, there is only a little research on the blood-saliva correlation of deep salivary concentration. There is only research (
Kiyoshi Okuda, Saliva, Kodansha, 1972). However, saliva is a sample that can be collected at any time with the least burden on the patient.
Except for special cases, it can be obtained in sufficient quantity, does not require special pretreatment, and has many advantages as a sample for clinical chemistry, and we believe that there will be more opportunities for its use in the future as research develops. It will be done.
更に、血漿中濃度と唾液中濃度とがよく相関するものが
あり、尿素、エタノール、ステロイドホルモン、ある種
の薬剤などが報告されている。Furthermore, there are some substances for which the plasma concentration and saliva concentration are well correlated, such as urea, ethanol, steroid hormones, and certain drugs.
唾液の比重は１．００３〜１．００８、ｐｏは６．２〜
７．６で分泌が増加するとアルカリに傾き血液のｐＨに
近づく傾向がみられる。粘度は与えた刺激の性質により
異なり、その由来、唾液腺のムチン含量に左右される。Specific gravity of saliva is 1.003-1.008, po is 6.2-
When secretion increases at 7.6, there is a tendency for the pH to become alkaline and approach the pH of blood. The viscosity depends on the nature of the stimulus applied, its origin, and the mucin content of the salivary glands.
通常得られる安静時混合唾液でその粘度は水の約１．９
倍と言われ、唾液を試料とするときにはピペット操作に
十分留意する必要があり、分析誤差の介入する操作段階
である。Normally obtained mixed saliva at rest has a viscosity of about 1.9 of that of water.
When using saliva as a sample, it is necessary to be very careful with pipetting operations, and this is an operational step where analytical errors can occur.
前記エタノールの血流中濃度の簡単、迅速でかつ正確で
再現性ある測定法は医療或は社会生活の安全秩序を保つ
上で重要である。A simple, rapid, accurate, and reproducible method for measuring the concentration of ethanol in the bloodstream is important for maintaining safety and order in medical and social life.
エタノールの測定については既に多くの方法があり各種
の機器分析、一般化学分析或は特異性反応を利用する簡
便な酵素分析法がある。更に酵素分析法にはアルコール
ヒドロゲナーゼまたはアルコールオキシダーゼを用いる
方法があるが反応の単純性からはアルコールオキシダー
ゼ（ＡＯＤと標記する）を用いる方法が好ましい。反応
は下記の通りである。There are already many methods for measuring ethanol, including various instrumental analyses, general chemical analyses, and simple enzymatic analysis methods that utilize specific reactions. Further, enzyme analysis methods include methods using alcohol hydrogenase or alcohol oxidase, but a method using alcohol oxidase (referred to as AOD) is preferred from the viewpoint of simplicity of reaction. The reaction is as follows.
生成したＨ２Ｏ２がチエツクされる。The generated H2O2 is checked.
体液中のエタノールの測定法、測定試験具については特
開昭６０−２６２５９８号に紹介されている。該方法に
は濾紙のような支持体マトリックスに試薬を含浸させた
ものが用いられる。これらは定性または半定量的であり
、更に自動酸化に由来する擬陽性をもたらし、体液中の
アルコール濃度を正確に測定することが困難である。A method for measuring ethanol in body fluids and a measuring test device are introduced in JP-A-60-262598. The method uses a support matrix, such as filter paper, impregnated with reagents. These are qualitative or semi-quantitative, and further result in false positives due to autoxidation, making it difficult to accurately measure alcohol concentration in body fluids.
本発明の目的は、定量性に優れ、保存性の良好なアルコ
ール（エタノール）分析素子を提供することにある。An object of the present invention is to provide an alcohol (ethanol) analysis element with excellent quantitative performance and good storage stability.
前記本発明の目的は、支持体上に少なくとも試薬層、展
開層を順次積層し体液の含有物質の検索の用に供する分
析素子において、前記試薬層にアルコールオキシダーゼ
、過酸化水素検出組成物並びに多価アルコール及び／又
は非還元糖を含有することを特徴とするアルコール分析
素子によって達成される。The object of the present invention is to provide an analytical element for detecting substances contained in body fluids, in which at least a reagent layer and a developing layer are sequentially laminated on a support, and the reagent layer contains alcohol oxidase, a hydrogen peroxide detection composition, and a multilayer. This is achieved using an alcohol analysis element characterized by containing a hydric alcohol and/or a non-reducing sugar.
尚本発明のアルコール分析素子はエタノールを対象にす
るものである。The alcohol analysis element of the present invention is intended for use with ethanol.
本発明において、アルコールオキシダーゼの活性によっ
て生成した過酸化水素は本発明に係る過酸化水素検出組
成物によって定量的に表示される。In the present invention, hydrogen peroxide generated by the activity of alcohol oxidase is quantitatively displayed by the hydrogen peroxide detection composition according to the present invention.
また、本発明における定量的表示は、発色反応により比
色定量することが有利であり、エタノールを基質として
、アルコールオキシダーゼにより生成する過酸化水素を
ペルオキシダーゼを触媒として検出可能な色素を形成さ
せて検出する方法としてもよい。In addition, the quantitative display in the present invention is advantageously carried out by colorimetric determination using a color reaction, and is detected by using ethanol as a substrate and hydrogen peroxide produced by alcohol oxidase to form a detectable dye using peroxidase as a catalyst. It is also possible to do this.
発色反応試薬としては、トリンダー試薬の変法として知
られる４−アミノアンチピリン又はその塩、１．７−シ
ヒドロキシナフタレン：３−Ｎ−スルホプロピルアニリ
ン誘導体、例えばＮ−エチル−Ｎ−スルホプロピルアニ
リン、Ｎ−エチル−Ｎ−スルホプロピル−３゜５−ジメ
チロキシアニリンスルホン酸及びその塩、Ｎ−スルホプ
ロピルアニリン、Ｎ−エチル−Ｎ−スルホプロピル−３
，５−ジメチルアニリン、Ｎ−エチル−Ｎ−スルホプロ
ピル−ｍ−トルイジン；Ｎ−２−ヒドロキシ−３−スル
ホプロピルアニリン誘導体、例えばＮ−エチルート（２
−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−信−アニシジン
、Ｎ−エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロ
ピル）アニリン、Ｎ−エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−
３〜スルホプロピル）−３，５−ジメチロキシアニゾン
スルホン酸及びその塩、Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−ス
ルホプロピル）−３，５−ジメチロキシアニリン、Ｎ−
エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）
−３，５−ジメチルアニリン、Ｎ−エチル−Ｎ−（２−
ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−ｍ−トルイジン等
との組合せ等が挙げられる。As the coloring reaction reagent, 4-aminoantipyrine or its salt known as a modification of Trinder's reagent, 1,7-hydroxynaphthalene:3-N-sulfopropylaniline derivatives, such as N-ethyl-N-sulfopropylaniline, N-ethyl-N-sulfopropyl-3゜5-dimethyloxyaniline sulfonic acid and its salts, N-sulfopropylaniline, N-ethyl-N-sulfopropyl-3
,5-dimethylaniline, N-ethyl-N-sulfopropyl-m-toluidine; N-2-hydroxy-3-sulfopropylaniline derivatives, such as N-ethylroot (2
-hydroxy-3-sulfopropyl)-anisidine, N-ethyl-N-(2-hydroxy-3-sulfopropyl)aniline, N-ethyl-N-(2-hydroxy-
3-sulfopropyl)-3,5-dimethyloxyanizone sulfonic acid and its salts, N-(2-hydroxy-3-sulfopropyl)-3,5-dimethyloxyaniline, N-
Ethyl-N-(2-hydroxy-3-sulfopropyl)
-3,5-dimethylaniline, N-ethyl-N-(2-
Examples include combinations with hydroxy-3-sulfopropyl)-m-toluidine and the like.
更に化学発光する化合物、例えばルミノール（５−アミ
ノ−２，３−ジヒドロ−１，４−７タラジンジオン）、
イソルミノール（６−アミノ−２，３−ジヒドロ−１，
４７タラジンジオン）、ＡＢＥＩ−Ｈ（Ｎ−（４−アミ
ノブチル）−Ｎ−エチルイソルミノールヘミサクシンア
ミド、 ＡＨＥＩ（Ｎ−（６−アミノヘキシル）−Ｎ−
エチルイソルミノール）ＡＢＥＩ（Ｎ−（４−アミノブ
チル）−Ｎ−エチルイソルミノール）等があげられる。Additionally, chemiluminescent compounds such as luminol (5-amino-2,3-dihydro-1,4-7 talazinedione),
Isoluminol (6-amino-2,3-dihydro-1,
47 talazinedione), ABEI-H (N-(4-aminobutyl)-N-ethylisoluminol hemisuccinamide, AHEI (N-(6-aminohexyl)-N-
ABEI (N-(4-aminobutyl)-N-ethylisoluminol) and the like.
更に特開昭５７−９４６５３号、同５７−９４６５４号
、同５７−９４６５５号、同５７−９４６５６号に記載
された芳香族第一級アミン化合物とカップリング反応に
よって発色する拡散性フェノール化合物、耐拡散性ナフ
トール化合物或はピラゾロン化合物その他の発色試薬が
用いられる。Furthermore, diffusible phenol compounds that develop color by coupling reaction with aromatic primary amine compounds and resistant Diffusible naphthol compounds or pyrazolone compounds or other coloring reagents are used.
更に特異的結合反応、酵素反応、発色反応等に適したｐ
Ｈするために緩衝剤を含有さらせることが好ましい。具
体的には体液試料適用時にｐＨ−６〜８．５の範囲に緩
衝しうるに、十分な置台有する事が好ましい。用いるこ
とができる緩衝剤としては日本化学会編「化学便覧基礎
編」（東京、丸善（株）１９６６）ｐ１３１２−１３２
０、Ｎ 、 Ｅ 、 Ｇｏｏｄ等；バイオケミストリ（
Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）、 ｖｏ１２５．ｐ４６７
（１９６６）、金材。In addition, p is suitable for specific binding reactions, enzyme reactions, color reactions, etc.
It is preferable to contain a buffer for H. Specifically, it is preferable to have a sufficient stand to buffer the pH within the range of -6 to 8.5 when applying a body fluid sample. Buffers that can be used include "Chemical Handbook Basic Edition" edited by the Chemical Society of Japan (Tokyo, Maruzen Co., Ltd. 1966) p1312-132.
0, N, E, Good, etc.; Biochemistry (
Biochemistry), vol 125. p467
(1966), Kinzai.
斎藤；化学の領域、ｖｏ４３０（２）、ｐ７９（１９７
６）、Ｗ、Ｊ７７−ギユソン（Ｆｅｒｇｕｓｏｎ）等、
Ａｎａｌ、Ｂｉｏｃｈｅｍ、、ｖｏ１２１Ｑ４゜ｐ３０
０（１９８０）等の文献に記載されているものをあげる
ことができる。具体的な例としては、くえん酸塩、硼酸
塩、燐酸塩、炭酸塩、トリス、バルビッール、グリシン
、グツド緩衝剤等があげられる。Saito; Chemistry Area, vo430(2), p79(197
6), W, J77-Ferguson et al.
Anal, Biochem,, vo121Q4゜p30
0 (1980) and the like. Specific examples include citrate, borate, phosphate, carbonate, Tris, barbyl, glycine, Gud buffer, and the like.
これらの緩衝剤は必要に応じて試薬層以外の層に含有さ
せてもよい。These buffers may be contained in layers other than the reagent layer, if necessary.
更に本発明では試薬の保存性、定量再現性の向上のため
保恒剤として多価アルコール、非還元糖の少なくとも１
つが試薬層に含有させられる。これら保恒剤の添加量は
試薬層重量に対し０．５〜３０ｖｔ％、好ましくはｌ”
１５ｗｔ％である。Furthermore, in the present invention, at least one of a polyhydric alcohol and a non-reducing sugar is used as a preservative to improve the storage stability and quantitative reproducibility of the reagent.
is contained in the reagent layer. The amount of these preservatives added is 0.5 to 30vt% based on the weight of the reagent layer, preferably 1"
It is 15wt%.
多価アルコールとしては糖アルコール、非還元糖として
は還元基が消尽された多糖類が好ましい。The polyhydric alcohol is preferably a sugar alcohol, and the non-reducing sugar is preferably a polysaccharide in which reducing groups have been exhausted.
次にそれらの具体例を挙げる。Next, some specific examples will be given.
（糖アルコール）エリトリトール、トレイトール、アラビニトール、リビ
トール、キシリトール、ソルビトール、ガラクチトール
、マンニトール、アリトール、ポレミトール、ブレセイ
トール、ｍｙｏ−イノシトール、ｃｈｉｒｏ−イ ノ
シトール、５ｃｙｌｌｏ−イ ノシトール、 クエルシ
トール、ビブニトール、シクロヘキサンテトロール、フ
ンズリトール（多糖類）トレハロース、蔗糖、イソトレハロース、ラフィノース
、ゲンチアノース、メソチトース、ブランチオース、ス
タキオース、ベルバスコース、リフノース、α−デキス
トリン、β−デキストリン、γ−デキストリンこれら発色反応試薬保恒剤、緩衝剤は、水あるいは有機
溶媒に溶解し後述の試薬層に含有させることができる。(Sugar alcohol) Erythritol, threitol, arabinitol, ribitol, xylitol, sorbitol, galactitol, mannitol, allitol, polemitol, breseitol, myo-inositol, chiro-ino
Sitol, 5cyllo-inositol, quercitol, bibnitol, cyclohexanetetrol, hunzuritol (polysaccharides) trehalose, sucrose, isotrehalose, raffinose, gentianose, mesotitose, branchose, stachyose, verbascose, rifnose, α-dextrin, β- Dextrin, γ-dextrin These coloring reaction reagent preservatives and buffers can be dissolved in water or an organic solvent and included in the reagent layer described below.
また必要に応じて発色反応試薬および形成された色素の
安定化に特開昭５８−８７４６１号に記載されているよ
うなカルボキシル基を有するポリマを含有させてもよい
。Further, if necessary, a polymer having a carboxyl group as described in JP-A-58-87461 may be included to stabilize the coloring reaction reagent and the formed dye.
前記発色もしくは発光試薬による発色、発光（信号）は
、吸光度法（比色法）、蛍光法または、発光法で検出す
ることができ、測定法としては信号の経時的変化を測定
するレート測定法または一定時間後の信号を測定するエ
ンドポイント測定法で測定することができる。好ましく
は吸光度法であり、吸光度法（比色法）では、紫外光、
可視光、近赤外光を利用することができ、例えば体液試
料として血清および血漿を用いる場合には、血清および
血漿による吸光の影響を小さくするために緑色光、赤色
光または、近赤外光を利用するのが好ましい。The color development or luminescence (signal) caused by the color development or luminescence reagent can be detected by an absorbance method (colorimetric method), a fluorescence method, or a luminescence method, and the measurement method is a rate measurement method that measures changes in the signal over time. Alternatively, it can be measured using an endpoint measurement method that measures the signal after a certain period of time. Preferred is the absorbance method, and in the absorbance method (colorimetric method), ultraviolet light,
Visible light and near-infrared light can be used. For example, when using serum and plasma as body fluid samples, green light, red light, or near-infrared light can be used to reduce the influence of light absorption by serum and plasma. It is preferable to use
本発明に係るエタノールに作用し過酸化水素を発生スる
アルコールオキシダーゼの量は広範に選ぶことが可能で
あるが、１００＝ １，０００．０００Ｕ／ｍ３、好ま
しくは１ 、０００〜１００．０００Ｕ／ｍ’の範囲で
用いることができる。The amount of alcohol oxidase that acts on ethanol and generates hydrogen peroxide according to the present invention can be selected from a wide range, but 100 = 1,000.000 U/m3, preferably 1,000 to 100.000 U/m3. It can be used within the range of m'.
本発明に係る発色、発光試薬の含有量は広範に選ぶこと
が可能であるが、０．１−１００ミリモル／ｍ２、好ま
しくは０．５〜５０ミリモルフｍ”の範囲である。The content of the coloring and luminescent reagent according to the present invention can be selected from a wide range, but is in the range of 0.1-100 mmol/m2, preferably 0.5-50 mmol/m''.
本発明の分析素子において、アルコールオキシダーゼの
作用により生成した過酸化水素は、本発明に係る発色、
発光試薬を酸化し、色素もしくは色光を生起するが、こ
の反応は極めて高感度で再現性よく安定である。In the analytical element of the present invention, hydrogen peroxide produced by the action of alcohol oxidase is used to produce the color according to the present invention.
A luminescent reagent is oxidized to produce a dye or colored light, and this reaction is extremely sensitive, reproducible, and stable.
従って、本発明の分析素子は、血清中等の微量のアルコ
ールに対して鋭敏に反応し、微量の定量に特に有用であ
る。Therefore, the analytical element of the present invention reacts sensitively to trace amounts of alcohol in serum and the like, and is particularly useful for quantifying trace amounts.
本発明の分析素子を用いて、体液中のアルコールを定量
するにあたっては、分析素子を検体である体液試料中に
浸漬するか、体液試料を分析素子上に滴下し、或は採取
片に吸取ってこれを分析素子に移し、反射スペクトロフ
ォトメトリ等により初速変法又は反応終点法に従って測
定することができる。このようにして得られた測定値は
、予め作成しておいた検量線または基準発色コードに当
てはめることでアルコールの量を決定することができる
。When quantifying alcohol in a body fluid using the analytical element of the present invention, the analytical element is immersed in a body fluid sample, or the body fluid sample is dropped onto the analytical element, or it is absorbed into a collection piece. This can be transferred to an analytical element and measured by reflection spectrophotometry or the like according to a modified initial velocity method or a reaction end point method. The amount of alcohol can be determined by applying the measured value thus obtained to a calibration curve or standard color code prepared in advance.
本発明の分析素子として、好ましくは、液体不透性、光
透過性の支持体上に少なくとも１つの゛試薬層及び多孔
性展開層を有する一体を多層分析素子（特公昭５３−２
１６７７号、特開昭５５−１６４３５９号、同５５−９
０８５９号、同５７−１９７４６６号、同５７−１０１
７６０号、同５７−１０１７６１号、同５８−９０１６
７号等）が挙げられる。The analytical element of the present invention is preferably an integrated multilayer analytical element (Japanese Patent Publication No. 53-2
No. 1677, JP-A-55-164359, JP-A No. 55-9
No. 0859, No. 57-197466, No. 57-101
No. 760, No. 57-101761, No. 58-9016
No. 7 etc.).
上記試薬層は水溶性ポリマ又は親水性かつ有機溶媒可溶
性のポリマをバインダとして支持体上に塗布することに
よって層として設けることができる。水溶性ポリマバイ
ンダとしてはゼラチン、フタル化ゼラチン等のゼラチン
誘導体、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチ
ルセルロースナトリウム塩等の水溶性セルロース誘導体
、ポリビニルアルコール、ポリ （Ｎ−ビニルピロリド
ン）、ポリアクリルアミド、ポリメタクリルアミド、ア
クリルアミドとアクリル酸エステルの共重合体、ポリ
（モノ又はジアルキル置換）アクリルアミド、ポリ （
モノ又はジアルキル置換）メタクリルアミド及びこれら
の水溶性共重合体等が挙げられ、好ましくはゼラチン、
ポリアクリルアミド及びアクリルアミドとアクリル酸エ
ステルの共重合体が用いられる。親水性かつ有機溶媒可
溶性ポリマバインダとしては、ポリ （Ｎ−ビニルピロ
リドン）、ポリ （Ｎ−ビニルイミダゾール）、ポリ
（Ｎ−ビニルトリアゾール）及びこれらの誘導体又はそ
れらの共重合体、エチルセルロース、メチルセルロース
等のセルロース誘導体等が挙げられる。The reagent layer can be provided as a layer by applying a water-soluble polymer or a hydrophilic and organic solvent-soluble polymer as a binder onto the support. Examples of water-soluble polymer binders include gelatin, gelatin derivatives such as phthalated gelatin, water-soluble cellulose derivatives such as hydroxyethylcellulose and carboxymethylcellulose sodium salt, polyvinyl alcohol, poly(N-vinylpyrrolidone), polyacrylamide, polymethacrylamide, and acrylamide. Acrylic acid ester copolymer, poly
(mono- or dialkyl-substituted) acrylamide, poly(
(mono- or dialkyl-substituted) methacrylamide and water-soluble copolymers thereof, preferably gelatin,
Polyacrylamide and copolymers of acrylamide and acrylic esters are used. Examples of hydrophilic and organic solvent-soluble polymer binders include poly(N-vinylpyrrolidone), poly(N-vinylimidazole), and poly(N-vinylpyrrolidone).
(N-vinyltriazole), derivatives thereof or copolymers thereof, cellulose derivatives such as ethyl cellulose and methyl cellulose, and the like.
また、試薬層に含ませる試薬類が２種以上にわたる場合
、この試薬類を同一試薬層内に一緒に混合して含有させ
ても、また、２種以上の試薬類を２つ又はそれ以上の別
々の試薬層に別々に或は組合せて含有させてもよい。こ
れらは分析反応自体の作用機構、反応安定化、再現性向
上効果によって決定されることであり、好ましくない影
響を及ぼさない限りにおいて、その構成は任意である。In addition, when two or more types of reagents are included in a reagent layer, even if these reagents are mixed together in the same reagent layer, two or more types of reagents may be mixed together in the same reagent layer. They may be contained separately or in combination in separate reagent layers. These are determined by the mechanism of action of the analytical reaction itself, reaction stabilization, and reproducibility improvement effects, and their configurations are arbitrary as long as they do not have undesirable effects.
上記試薬層の膜厚は所望に応じて任意に選択することが
可能であるが、好ましくは１〜２００μ−１更に好まし
くは５〜１００μｍである。The thickness of the reagent layer can be arbitrarily selected as desired, but is preferably 1 to 200 μm, more preferably 5 to 100 μm.
前記多孔性展開層は、（１）一定容量の体液試料を単位
面積当り試薬層に均一に配布する機能を有するものであ
る。その上、更に、特公昭５３−２１６７７号に記載さ
れた性能、すなわち（２）体液試料中の反応を阻害する
物質又は要因を除去する機能及び／又は（３）分光光度
分析を行うときに支持体を経て透過する測定光を反射す
るバックグランド作用を行う機能を有するものであれば
好ましい。The porous spreading layer has the function of (1) uniformly distributing a certain volume of body fluid sample to the reagent layer per unit area; Furthermore, the performance described in Japanese Patent Publication No. 53-21677, namely (2) the ability to remove substances or factors that inhibit reactions in body fluid samples, and/or (3) support when performing spectrophotometric analysis. It is preferable that it has the function of performing a background effect of reflecting measurement light transmitted through the body.
従って、本発明に係る多孔性展開層は、上記（１）の機
能のみを有する層、（１）に加えて（２）及び／又は（
３）の機能を併せて有する層のいずれかとすることがで
き、あるいは（１）を包含する複数の機能を適宜分離し
、各機能ごとに別の層を使用することも可能である。更
に（１）、（２）及び（３）の機能のうち、２つの機能
を有する層と、残りの１つの機能を有する層を組合せて
使用することもできる。例えば、前述の特公昭５３−２
１６７７号に記載された二酸化チタン及び二酢酸セルロ
ースから成るプラッシュポリマと呼称される非繊維多孔
質媒体の展開層、特開昭５５−１６４３５６号に記載さ
れた親水化処理した織布の展開層、特開昭５７−９４６
５８号、同５７−１２８４７号、同５７−１９７４６６
号及び同５８−７０１６１号等に記載された繊維構造展
開層、特開昭５８−９０１６７号に記載された粒子結合
体構造展開層が挙げられる。特に、上記繊維構造展開層
及び粒子結合体構造展開層は、血球部分も速やかに移送
することが可能な素材として特に有用である。Therefore, the porous spreading layer according to the present invention is a layer having only the function (1) above, a layer having only the function (1), and (2) and/or (
It is possible to use one of the layers having the function (3) in combination, or it is also possible to separate a plurality of functions including (1) as appropriate and use a separate layer for each function. Furthermore, it is also possible to use a combination of a layer having two of the functions (1), (2), and (3) and a layer having the remaining one function. For example, the above-mentioned special public service No. 53-2
A spread layer of a non-fibrous porous medium called plush polymer consisting of titanium dioxide and cellulose diacetate described in No. 1677, a spread layer of a hydrophilized woven fabric described in JP-A-55-164356, Japanese Patent Publication No. 57-946
No. 58, No. 57-12847, No. 57-197466
Examples include the fiber structure spreading layer described in Japanese Patent Application Laid-Open No. 58-90167, and the particle bond structure spreading layer described in JP-A-58-90167. In particular, the fiber structure spreading layer and particle combination structure spreading layer are particularly useful as materials capable of rapidly transporting blood cell portions.
本発明の分析素子における展開層の膜厚は、その空隙率
によって決定されるべきであるが、好ましくは約１００
〜６００μ嘗、更に好ましくは約１５０〜４００μｍで
ある。また、空隙率は好ましくは約２０〜８５％である
。The film thickness of the spreading layer in the analytical element of the present invention should be determined by its porosity, but is preferably about 100 ml.
~600 μm, more preferably about 150-400 μm. Further, the porosity is preferably about 20 to 85%.
上記多孔性展開層には、前述の試薬層の場合と同様、体
液試料中のエタノールと直接的又は間接的に関与する試
薬を含有することができる。As in the case of the above-mentioned reagent layer, the porous development layer can contain a reagent that directly or indirectly interacts with ethanol in the body fluid sample.
また他の付加的な添加剤として、例えば保恒剤、界面活
性剤等、種々の添加剤も所望に応じて添加することもで
きる。Furthermore, various other additives such as preservatives and surfactants may also be added as desired.
特に界面活”性剤は、体液試料を本発明の分析素子に適
用した際の浸透速度の調節等有効に用いることができる
。In particular, surfactants can be effectively used to adjust the permeation rate when a body fluid sample is applied to the analytical element of the present invention.
使用可能な界面活性剤としては、イオン性（アニオン性
又はカチオン性）、非イオン性を問わず使用することが
可能であるが、非イオン性界面活性剤が有効である。非
イオン性界面活性剤の例としては、例えば２．５−ジ−
ｔ−ブチルフェノキシポリエチレングリコール、ｐ−オ
クチルフェノキシポリエチレングリコール、ｐ−イソノ
ニルフェノキシポリエチレングリコール等のアルキル置
換フェノールのポリアルキレングリコール誘導体、高級
脂肪酸のポリアルキレングリコールエステルなどが挙げ
られる。これらの界面活性剤は体液試料の試薬層への浸
透速度を調節し、同時に好ましからざる 「クロマトグ
ラフィ現象」の発生を抑制する効果を有する。As usable surfactants, both ionic (anionic or cationic) and nonionic surfactants can be used, but nonionic surfactants are effective. Examples of nonionic surfactants include 2,5-di-
Examples include polyalkylene glycol derivatives of alkyl-substituted phenols such as t-butylphenoxypolyethylene glycol, p-octylphenoxypolyethylene glycol, and p-isononylphenoxypolyethylene glycol, and polyalkylene glycol esters of higher fatty acids. These surfactants have the effect of regulating the rate of penetration of the body fluid sample into the reagent layer, and at the same time suppressing the occurrence of undesirable "chromatographic phenomena."
上記界面活性剤の量は広範に選ぶことが可能であるが、
塗布液の重量に対して０．００５〜２５ｗｔ％、好まし
くは０．０５〜１５ｖｔ％用いることができる。The amount of the surfactant mentioned above can be chosen within a wide range;
It can be used in an amount of 0.005 to 25 wt%, preferably 0.05 to 15 wt%, based on the weight of the coating liquid.
上記の液体不透性の光透過性支持体（以下、本発明に係
る支持体と略す）は、液体不透性で、かつ光透過性であ
ればその種類を問わないが、例えば酢酸セルロース、ポ
リエチレンテレフタレート、ポリカーボネート又はポリ
スチレンのような種々の重合体材料のみならず、ガラス
のごとき無機材料も用いることが可能である。本発明に
係る支持体の厚さは任意であるが、好ましくは５〜２５
０ＩＩｍである。また、本発明に係る支持体の観測側の
一側面は、その目的に応じて任意に加工することが可能
である。更に試薬層を積層する側の支持体面に、場合に
よっては光透過性の下塗り層を使用して試薬と支持体と
の接着性を改良することができる。The above-mentioned liquid-impermeable, light-transparent support (hereinafter referred to as the support according to the present invention) can be of any type as long as it is liquid-impermeable and light-transparent, but examples include cellulose acetate, Various polymeric materials such as polyethylene terephthalate, polycarbonate or polystyrene can be used, as well as inorganic materials such as glass. The thickness of the support according to the present invention is arbitrary, but preferably 5 to 25
0IIm. Further, one side surface of the observation side of the support according to the present invention can be arbitrarily processed depending on the purpose. Furthermore, it is possible to improve the adhesion between the reagent and the support by using a light-transmitting undercoat layer on the side of the support on which the reagent layer is laminated, depending on the case.
上記の一体型多層分析素子は必要に応じて、例えば米国
特許３，９９２，１５８号記載の反射層、下塗り層、米
国特許４，０４２，３３５号記載の放射線プロ・７キン
グ層、米国特許４，０６６．４０３号記載のバリヤ層、
米国特許４，１６６．０９３号記載のマイグレーション
阻止層、特開昭５５−９０８５９号記載のスカベンジャ
層、及び米国特許４，１１０，０７９号記載の破壊性ボ
ッド状部材等を任意に組合せて本発明の目的に合せた任
意の構成とすることができる。The above-mentioned integrated multilayer analytical element may include, if necessary, for example, a reflective layer described in U.S. Pat. No. 3,992,158, an undercoat layer, a radiation blocking layer described in U.S. Pat. , 066.403,
The present invention can be carried out by arbitrarily combining the migration prevention layer described in U.S. Pat. It can have any configuration depending on the purpose.
これら分析素子の種々の層は、本発明に係る支持体上に
所望の構成に従い、従来写真工業において用いられてい
るスライドホッパ塗布法、押出し塗布法、浸漬塗布法等
を適宜選択して用い、順次積層することで任意の厚みの
層を塗設することができる。The various layers of these analytical elements are formed on the support according to the present invention by appropriately selecting the slide hopper coating method, extrusion coating method, dip coating method, etc. conventionally used in the photographic industry according to the desired configuration. By sequentially laminating layers, layers of arbitrary thickness can be applied.
本発明の発色、発光試薬類を、試薬層塗布液に添加する
方法は、上記試薬類の化学構造等に応じて、適宜選択す
ることができる。例えば、水、緩衝剤水溶液、有機溶媒
等に溶解して添加する方法、固体分散法、ラテックス分
散法、水中油滴型乳化分散法等種々の方法を用いること
ができる。The method of adding the coloring and luminescent reagents of the present invention to the reagent layer coating solution can be appropriately selected depending on the chemical structure of the reagents. For example, various methods can be used, such as a method of dissolving and adding in water, an aqueous buffer solution, an organic solvent, etc., a solid dispersion method, a latex dispersion method, an oil-in-water emulsion dispersion method, and the like.
次に本発明の分析素子及びその使用についてその態様例
を用いて説明する。Next, the analytical element of the present invention and its use will be explained using an example of its embodiment.
第１図において、ｌは臨床化学用分析装置本体、２は分
析素子である。分析素子２は第２図に示すように測光用
透孔２１ａを有するマウントベース２１と、体液滴下用
透孔２２ａを有するマウントカバー２２との間に一定の
試薬を含浸した試薬層に展開層を積層した検氷フィルム
２３を介装してなり、該マウントカバー２２の表面には
試薬データを判別するだめの基準発色コード２４が５ビ
ツトで判別できるように記録（表示）されている。該分
析素子２は前記本体ｌの前面１ａに設けた素子挿入口１
１より挿入することにより本体ｌ内に設置した１対の素
子搬入用のローラによって挟持され、インキュベーショ
ン手段の中に搬入される。インキュベーション手段は分
析素子２を設定温度に保持すると共に、液体を滴下した
分析素子２を設定時間後に測光部に移送するようにした
ものである。In FIG. 1, 1 is the main body of the clinical chemistry analyzer, and 2 is the analytical element. As shown in FIG. 2, the analytical element 2 has a reagent layer impregnated with a certain reagent and a developing layer between a mount base 21 having a photometric through hole 21a and a mount cover 22 having a body fluid dripping hole 22a. A laminated ice detecting film 23 is interposed, and a standard coloring code 24 for determining reagent data is recorded (displayed) on the surface of the mount cover 22 so that it can be determined in 5 bits. The analytical element 2 has an element insertion opening 1 provided on the front surface 1a of the main body 1.
By inserting the device from 1, it is held between a pair of rollers for carrying the device installed in the main body 1, and is carried into the incubation means. The incubation means maintains the analytical element 2 at a set temperature and transfers the analytical element 2 onto which the liquid has been dropped to the photometry section after a set time.
次に簡便に唾液を採取し特別な分析機器を必要としない
分析素子の態様例を第３図に示す。Next, FIG. 3 shows an embodiment of an analytical element that allows saliva to be collected easily and does not require any special analytical equipment.
上記例は透明な支持体上に試薬層を設け、その上に各種
体液成分の夫々に不活性で唾液を均一に延展しうる通液
性の展開層を設けた形態である。In the above example, a reagent layer is provided on a transparent support, and a liquid-permeable spreading layer is provided on top of the reagent layer, which is inert to each of the various body fluid components and can uniformly spread saliva.
唾液採取部材（採取部材と略称）は唾液の所定量の採取
が可能で且つ採取された唾液を含蓄し更に少なくとも試
薬層、展開層からなる検氷部材に容易に必要唾液量を放
出供与できる柔軟な多孔質の素材が選ばれる。The saliva collection member (abbreviated as collection member) is flexible enough to collect a predetermined amount of saliva, contain the collected saliva, and easily release and supply the required amount of saliva to the ice detection member consisting of at least a reagent layer and a developing layer. A porous material is selected.
前記検氷部材と採取部材は連結されており、検氷部材の
展開層に採取部材が接面するようにそれらのホールダ間
を可撓性または折曲げ自在とした連結部材で連結し前記
両部材面を離接自在としている。The ice detecting member and the collecting member are connected, and the holders are connected by a flexible or bendable connecting member so that the collecting member is in contact with the expanded layer of the ice detecting member. The surfaces can be freely moved in and out.
更に分析素子の性能補完成は保全、測定操作の利便のた
め各種の補助部材、補助構成層を付帯させることができ
る。例えば分析素子未使用時のカバー、検氷及び採取部
材圧接維持のためのホック、両部材を保持するマウント
等を備えることが好ましい。Furthermore, various auxiliary members and auxiliary constituent layers can be added to enhance the performance of the analytical element for maintenance and convenience of measurement operations. For example, it is preferable to include a cover for when the analysis element is not in use, a hook for maintaining pressure on the ice detection and sampling member, a mount for holding both members, and the like.
第３図に於て、１は検氷部材であって、支持体ｌｌ上に
試薬を含有する試薬層１２、更にその上に展開層１３を
積層した構成をもち、唾液受容口４１．観測窓４２を有
するマウント４に挟着されている。In FIG. 3, reference numeral 1 denotes an ice detection member, which has a structure in which a reagent layer 12 containing a reagent is laminated on a support 11, and a spreading layer 13 is further laminated thereon. It is clamped to a mount 4 having an observation window 42.
２は採取部材であって、検氷部材Ｉと採取部材２を連結
する連結部材３に接着層２３によって接着されており、
唾液受容口４１を蔽って展開層１３に対面している。Reference numeral 2 denotes a sampling member, which is bonded to a connecting member 3 that connects the ice detecting member I and the sampling member 2 with an adhesive layer 23;
It covers the saliva receiving port 41 and faces the expansion layer 13.
連結部材３は展開層１３に対して開閉自在にその一端が
マウント４に固定され、他端に設けたホック３１によっ
てマウント４に嵌着されている。尚該連結部材は分析素
子未使用時閉じて検氷部材ｌ及び採取部材２のカバーと
なり、開いて唾液を採取する時の“孤み”となり、再び
閉じてホック３１を嵌着すれば採取部材２と展開層１３
の間の圧接を維持することができる。The connecting member 3 is fixed to the mount 4 at one end so as to be openable and closable with respect to the developing layer 13, and is fitted onto the mount 4 by a hook 31 provided at the other end. The connecting member closes when the analysis element is not in use and serves as a cover for the ice detecting member 1 and the collecting member 2, opens as a cover for collecting saliva, and closes again to fit the hook 31 to cover the collecting member 2. 2 and deployment layer 13
It is possible to maintain pressure contact between the two.
又、用いる体液試料の量は、体液試料が十分含浸される
量以上であれば任意であるが、ｌ ｃｍ２当たり好まし
くは約５０μＱ〜約５μａであり、更に好ましくは約２
０μα〜約５μＱである。通常約１０μａの体液試料を
適用することが好ましい。The amount of body fluid sample to be used is arbitrary as long as it is sufficient to be impregnated with the body fluid sample, but it is preferably about 50 μQ to about 5 μA per 1 cm2, and more preferably about 2 μA.
It is 0 μα to about 5 μQ. It is usually preferred to apply a body fluid sample of about 10 μa.
以下、実施例を挙げて本発明を更に具体的に説明する。Hereinafter, the present invention will be explained in more detail with reference to Examples.
実施例−１オセインゼラチン １０．５ｇ蒸留
水 ５２．３ｇトリスヒ
ドロキンメチルアミノメタン ２．５ｇ１．７−シヒ
ドロキシナ７タレン ０．４ｇジメドン
０．１４ｇト リ ト
ン Ｘ−１００１，５ｇ４−アミノアンチピリン塩酸塩 ０．６１ｇサ
ッカロース １．５ｇペルオ
キシダーゼ １０００００アルコー
ルオキシダーゼ １００ＯＵ１．２−ビ
ス（ビニルスルホニル）メタン ０．０３５ｇを溶解
した溶液を３０％水酸化カリウムを加えｐＨを７．５に
調整した後重量を１５０．０ｇに蒸留水で調整する。Example-1 Ossein gelatin 10.5 g Distilled water 52.3 g Trishydroquine methylaminomethane 2.5 g 1.7-Sihydroxyna 7-talene 0.4 g Dimedone
0.14g trito
N After adjusting the weight to 7.5, the weight was adjusted to 150.0 g with distilled water.
この塗布液を３００μｍのギャップを有するドクタブレ
ードを用いて１８０μｍの透明な下塗り済みポリエチレ
ンテレフタレート支持体上に塗布を行ない乾燥し、試薬
層とした。This coating solution was coated onto a 180 μm transparent undercoated polyethylene terephthalate support using a doctor blade having a gap of 300 μm and dried to form a reagent layer.
更にこの上層にＮ−ビニルピロリドン−酢酸ビニル共重
合体（共重合比４：１）の５％テトラヒドロフラン溶液
を１２５μｍのギャップを有するドクタブレードを用い
塗布乾燥し、接着層とした。次いでト リ ト ７
Ｘ−１００７，３ｇキシレン ２
２４ｇスチレン−グリシジルメタアクリレート１８．３
ｇ濾紙原材料粉末Ｄ ７２．８ｇを混合分
散した分散液を６２５μｍのギャップを有するドクタブ
レードを用い塗布乾燥し展開層とした。Furthermore, a 5% tetrahydrofuran solution of N-vinylpyrrolidone-vinyl acetate copolymer (copolymerization ratio 4:1) was applied to this upper layer using a doctor blade having a gap of 125 μm and dried to form an adhesive layer. Then Tori To 7
X-1007, 3g xylene 2
24g styrene-glycidyl methacrylate 18.3
A dispersion obtained by mixing and dispersing 72.8 g of filter paper raw material powder D was applied and dried using a doctor blade having a gap of 625 μm to form a spread layer.
このようにして作成したフィルムを１．５ｃｍＸ １．
５ＣＩ１１に所載し、プラスチック・マウントに封入し
て本発明のアルコール分析素子（１）とした。The film thus created was 1.5cm x 1.
5CI11 and sealed in a plastic mount to form the alcohol analysis element (1) of the present invention.
更に上記試薬層からサッカロースを除いた比較アルコー
ル分析素子（１）を作成した。Furthermore, a comparative alcohol analysis element (1) was prepared by removing saccharose from the reagent layer.
ヒト血清にエチルアルコールを添加し、２５，５０゜１
００．１５０，２００．３００ｍｇ／ｄ４とした検体を
用意し、臨床化学用分析装置ドライラボ８０Ｍ■ （コ
ニカ株式会社（製））を用いて測定を行った。Add ethyl alcohol to human serum and heat at 25,50°1
Samples with concentrations of 00.150, 200.300 mg/d4 were prepared, and measurements were performed using a clinical chemistry analyzer DryLab 80M (manufactured by Konica Corporation).
測定は、検体ｌＯμＱを本発明のアルコール分析素子（
１）の展開層上に点着後、７分間３７°Ｃでインキュベ
ーションされた後に５４６ｍｍのフィルタを用いて反射
濃度（Ｄｒ）を測定する。In the measurement, the sample lOμQ was measured using the alcohol analysis element of the present invention (
After spotting on the developing layer of 1) and incubating at 37°C for 7 minutes, the reflection density (Dr) is measured using a 546 mm filter.
結果は表−１に示す。The results are shown in Table-1.
以上の結果から明らかなように、本発明のアルコール分
析素子（１）は血清中のアルコール濃度に対して有意な
応答を示している事が明らかになった。それに比較して
、比較アルコール分析素子のアルコール濃度に対する応
答は十分なものとは言えない事が明らかである。As is clear from the above results, it has been revealed that the alcohol analysis element (1) of the present invention shows a significant response to the alcohol concentration in serum. In comparison, it is clear that the response of the comparative alcohol analysis element to alcohol concentration is not sufficient.
実施例−２実施例＝１で用いた本発明のアルコール分析素子（１）
及び比較アルコール分析素子（１）を用い、唾液中のア
ルコールに対する応答を見た。Example-2 Alcohol analysis element (1) of the present invention used in Example=1
The response to alcohol in saliva was also observed using Comparative Alcohol Analysis Element (1).
あらかじめ、常法を用いてアルコール濃度が２５゜５０
、１００ 、１５０ 、２００ｍｇ／ｄ２である事を
確認した唾液を用意し各検体を遠心分離機にかけ上溝を
分取した後に実施例−１と同様に臨床化学用分析装置ド
ライラボ８０Ｍ’ （コニカ株式会社（製））を用い
同様に評価を行った。In advance, use the usual method to adjust the alcohol concentration to 25°50.
, 100, 150, and 200 mg/d2 were prepared, each sample was centrifuged, the upper groove was separated, and the clinical chemistry analyzer DryLab 80M' (Konica Corporation) was prepared in the same manner as in Example-1. (manufactured by)) was used for the same evaluation.
結果を下記衣−２に示す。The results are shown in Figure 2 below.
上記結果から明らかなように、本発明のアルコール分析
素子（１）は比較アルコール分析素子（１）に比較して
明らかに感度が高い事が判る。As is clear from the above results, the alcohol analysis element (1) of the present invention clearly has higher sensitivity than the comparative alcohol analysis element (1).
実施例−３実施例−１で作成した本発明のアルコール分析素子（１
）及び比較アルコール分析素子（１）をアルミラミネー
ト紙を用いて防湿包装を行った後４０℃の恒温装置に４
日、７日、１５日、３０日間入れた。この素子に対して
５０ｍｇ／ｄＬ １５０ｍｇ／ｄ４のアルコール濃度の
血清を実施例−１と同様の方法で滴下し、実施例−１の
反射濃度を１００としてその結果を表−３に示した。Example-3 Alcohol analysis element (1) of the present invention prepared in Example-1
) and comparative alcohol analysis element (1) were packaged in moisture-proof packaging using aluminum laminated paper, and then placed in a constant temperature device at 40°C for 4 hours.
I put it in for days, 7th, 15th, and 30th. Serum with an alcohol concentration of 50 mg/dL and 150 mg/d4 was dropped onto this element in the same manner as in Example-1, and the results are shown in Table-3, setting the reflection density of Example-1 as 100.
以上の結果の如く本発明の分析素子（１）は、良好な保
存性を示している事が明らかである。As shown in the above results, it is clear that the analytical element (1) of the present invention exhibits good storage stability.
実施例−４膜厚１８０μｍの下塗り済み、ポリエチレンテレフタレ
ート支持体上に下記組成の試薬層をギャップ２５０μｍ
で塗布を行った。Example-4 A reagent layer with the following composition was deposited on an undercoated polyethylene terephthalate support with a film thickness of 180 μm and a gap of 250 μm.
The coating was done with
（試薬層）オセインゼラチン ＩＯ，５ｇ蒸留
水 ５２．３ｇトリスヒ
ドロキシメチルアミノメタン ２．５ｇイソルミノー
ル ０．４部ト リ ト ン
” Ｘ−１００（Ｒｏｈｍ ＆ Ｈａｓｓ Ｃ
ｏ、） １．５ｇグリセロール
１．５ｇペルオキシダーゼ
１００ＯＯＵアルコールオキシダーゼ
１５００Ｕ１．２−ビス（ビニルスルホニル）メ
タン ０．０３５ｇ上記溶液を３７℃に保温しつつ３
Ｎ ＨＣｌ２を用いてｐＨ−８，５に調整した後、塗布
液として用いた。(Reagent layer) Ossein gelatin IO, 5g Distilled water 52.3g Trishydroxymethylaminomethane 2.5g Isoluminol 0.4 parts Triton
”X-100 (Rohm & Hass C
o,) 1.5g glycerol
1.5g peroxidase
100OOU alcohol oxidase
1500U1.2-Bis(vinylsulfonyl)methane 0.035g While keeping the above solution at 37℃,
After adjusting the pH to -8.5 using N HCl2, it was used as a coating solution.
更に実施例−１と同様に接着層、展開層を順次積層して
本発明のアルコール分析素子（２）とした。Furthermore, in the same manner as in Example 1, an adhesive layer and a spreading layer were sequentially laminated to obtain an alcohol analysis element (2) of the present invention.
更に上記試薬層からグリセロールを除いたモノを比較ア
ルコール分析素子（２）とした。Furthermore, a comparative alcohol analysis element (2) was prepared by removing glycerol from the reagent layer.
以上の如く作製した本発明のアルコール分析素子（２）
及び比較アルコール分析素子（２）を実施例−１及び実
施例−３の如くマウントに装潰し包装し１部を５°Ｃ他
を４０°Ｃの恒温装置に保存し１５日後に取り出した。Alcohol analysis element (2) of the present invention produced as described above
and comparative alcohol analysis element (2) were packaged in mounts as in Example-1 and Example-3, and one portion was stored in a thermostat at 5°C and the other at 40°C, and taken out after 15 days.
５°Ｃに保存した上記素子を同様に２５．５０．１００
゜１５０、２００ｍｇ／ｄＩ２のアルコール濃度の血清
を展開層上に１０ｐＱ点着し、３７°Ｃ恒温装置付の発
光測定装置に装着し、点着後２分から５分の間の発光量
のカウントを行った。２５＋ｏｇ／ｌのレベルを１００
として他の濃度を換算し表−４に示した。The above element stored at 5°C was similarly heated to 25.50.100
10 pQ of serum with an alcohol concentration of 150 and 200 mg/dI2 was spotted on the developing layer, attached to a luminescence measuring device equipped with a 37 °C thermostat, and the amount of luminescence was counted for 2 to 5 minutes after spotting. went. 25+og/l level 100
Other concentrations were calculated and shown in Table 4.
更にこの検量線を用い１５日間５°Ｃ及び４０℃で保存
のものを、５０ｍｇ／ｄＱ及び１５０＋ａｇ／ｄ（２ア
ルコ一ル濃度の血清でｎ＝１ｏ回の繰返し測定を行った
。結果′・〜）表に明かなように本発明のアルコール分析素子（２）は
比較の素子（２）より高感度で同時に再現性、保存安定
性がよい。Furthermore, using this calibration curve, samples stored at 5°C and 40°C for 15 days were subjected to repeated measurements n = 10 times with serum at 50 mg/dQ and 150 + ag/d (2 alcohol concentrations.Results' ~) As is clear from the table, the alcohol analysis element (2) of the present invention has higher sensitivity and better reproducibility and storage stability than the comparative element (2).
第１図は本発明に係る臨床化学用分析装置である。第２
図は本発明の分析素子の１態様例の分解説明図、第３図
は唾液を用いる簡易測定用分析素子の断面図である。第２図に於て；２１・・・マウントベース、２２・・・マウントカバー
、２３・・・検氷フィルム、第３図に於て；１・・・検氷部材、 ２・・・唾液採取部材、
３・・・連結部材、 ４・・・マウント、１
１・・・支持体、 １２・・・試薬層、１３
・・・展開層。FIG. 1 shows a clinical chemistry analyzer according to the present invention. Second
The figure is an exploded explanatory view of one embodiment of the analytical element of the present invention, and FIG. 3 is a sectional view of the analytical element for simple measurement using saliva. In Fig. 2; 21...Mount base, 22...Mount cover, 23...Ice detection film, In Fig. 3; 1...Ice detection member, 2...Saliva collection Element,
3... Connecting member, 4... Mount, 1
1... Support, 12... Reagent layer, 13
...Development layer.
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|---|---|---|---|
| JP11800088AJPH01289495A (en) | 1988-05-13 | 1988-05-13 | Alcohol analyzing element |
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP11800088AJPH01289495A (en) | 1988-05-13 | 1988-05-13 | Alcohol analyzing element |
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH01289495Atrue JPH01289495A (en) | 1989-11-21 |
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP11800088APendingJPH01289495A (en) | 1988-05-13 | 1988-05-13 | Alcohol analyzing element |
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