JP5458255B2 - シスプラチン配位化合物の液体組成物 - Google Patents

Description

本発明は、安定なシスプラチン配位化合物の液体組成物に関する。

シスプラチン（ｃｉｓ−Ｄｉａｍｍｉｎｅｄｉｃｈｌｏｒｏｐｌａｔｉｎｕｍ（ＩＩ）：シス−ジアンミンジクロロプラチナ）は臨床において非常に有効な抗がん剤であるが、腎毒性などの副作用が非常に強いことが知られている。そのため、シスプラチンを投与する前、投与中及び投与後に大量の輸液が必要になる。
このような問題点を解決するため、ポリエチレングリコールとポリグルタミン酸からなるブロック共重合体にシスプラチンを配位結合させた配位化合物が発明されている。

ＷＯ０２／２６２４１号公報

本発明は、ポリエチレングリコールとポリグルタミン酸からなるブロック共重合体にシスプラチンを配位結合させた配位化合物を含む液体組成物を安定化させることを目的とする。

本発明者らは、ポリエチレングリコールとポリグルタミン酸からなるブロック共重合体にシスプラチンを配位結合させた錯体の安定化を図るべく鋭意努力をした結果、ある特定の範囲のｐＨにおいて上記錯体を安定化できることを見出し、本発明を完成させた。

即ち本発明は、以下の態様を含む。
（１）式Ｉ又は式ＩＩ

（上記式ＩおよびＩＩにおいて、Ｒ_１は、独立して、水素原子又は、官能基又は置換基により置換されていてもよいアルキル基を示し、Ａは、独立して、ＮＨ、ＣＯ、Ｒ_５（ＣＨ_２）_ｐＲ_６または直接結合を示し、ここでＲ_５はＯ、ＯＣＯ、ＯＣＯＮＨ、ＮＨＣＯ、ＮＨＣＯＯ、ＮＨＣＯＮＨ、ＣＯＮＨまたはＣＯＯであり、Ｒ_６はＮＨまたはＣＯであり、そしてｐは１〜６の整数であり；Ｒ_２は、独立して、水素原子、アルカリ金属またはアルキル基またはアラルキル基を示し、Ｒ_３は、独立して、水素原子、水酸基または疎水性残基を示し、ｎは１１０〜３４０の整数を示し、ｍは２０〜８０の整数を示す）
で表されるブロック共重合体とシスプラチンとの配位化合物を含有する液体組成物であって、当該液体組成物のｐＨが３．０〜７．０であることを特徴とする液体組成物；
（２）液体組成物のｐＨが４．０〜６．０であることを特徴とする（１）に記載の液体組成物；
（３）前記液体組成物が更に糖又は糖アルコールを含んでいることを特徴とする（１）または（２）に記載の液体組成物；
（４）糖又は糖アルコールが、Ｄ−マンニトールである（３）に記載の液体組成物。
（５）液体組成物中のＤ−マンニトール濃度が５％（Ｗ／Ｖ）である（４）に記載の液体組成物。

本発明にいうブロック共重合体とシスプラチンとの配位化合物とは、分子内の２つの塩素イオンの１つまたは両方が式Ｉ又はＩＩに表されるブロック共重合体のカルボキシルアニオンにより交換された化合物を意味する。本発明の配位化合物としては、シスプラチンのＰｔと該共重合体のカルボキシルアニオンの当量比（Ｐｔ／ＣＯＯ⁻）が０．３以上であることが好ましい。
また、本発明の配位化合物は、水性媒体中で高分子ミセルを形成することができる。

本発明の式Ｉ又はＩＩで表されるブロック共重合体において、Ｒ_２にいう、疎水性基としては、Ｃ_８−１６アルキルカルボニルおよびＣ_８−１６アルキル、フェニルアセチルおよびベンジル、ジフェニルアセチルおよびベンズヒドリル、ピレンスルホニルおよびピレニル、アダマンチル、コレステリル基等を挙げることができるが、これらに限定されない。これらの基は、酸クロライド法や、その他活性エステル化法によって導入できる。かような疎水性基は、場合によって、水性媒体中での本発明に従う配位化合物の自己会合能、即ち、高分子ミセル化能を高めるのに役立ちうる。

Ｒ_１にいう、保護されていてもよい官能基としては、ヒドロキシル基、アセタール、ケタール、アルデヒド、糖残基、マレイミド基、カルボキシル基、アミノ基、チオール基、活性エステル等が挙げられる。Ｒ_１が保護されていてもよい官能基が置換した低級アルキル基を表す場合の親水性セグメントは、例えば、ＷＯ９６／３３２３３、ＷＯ９６／３２４３４、ＷＯ９７／０６２０２に記載の方法に従うことができる。

また、本発明の式Ｉ又はＩＩで表されるブロック共重合体においてｎ及びｍは平均値であることはいうまでも無く、特に以下のブロック共重合体が好ましい。

式中、ｎは１１０〜３４０の整数を示すが、特に２００〜３４０の整数が好ましく、ｍは２０〜８０の整数を示すが、３０〜５０の整数が特に好ましい。

式Ｉ、Ｉ−ａ又はＩＩに示されるブロック共重合体を合成する方法は所望のブロック共重合体が得られる限り特に限定されないが、例えば、Ｉ−ａを合成する場合、ＭｅＯ −ＰＥＧ ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＨＮ_２を開始剤として所望のｍのユニット数になるように脱水の有機溶媒中で、Ｎ−カルボキシ−γ−ベンジル−Ｌ−グルタメートを加えて反応させ、合成されたブロック共重合体のポリグルタミン酸の側鎖のベンジル基をアルカリ加水分解することによって得ることができる。

本発明の液体組成物とは、前記配位化合物、特に高分子ミセルを含有した液体を意味し、製剤、製剤の原液、凍結乾燥を行う前の液体を包含する。

本発明の類縁物質とは、水性媒体中で高分子ミセルを形成したブロック共重合体とシスプラチンとの配位化合物をゲル浸透クロマトグラフィ（ＧＰＣ）により測定した際に高分子ミセル以外のピークとして表され、ブロック共重合体が分解したもの及び／または高分子ミセルが崩壊して出現したピークを意味し、その量は、ＧＰＣのチャートにおける、全面積中に占める高分子ミセル以外の面積の百分率として表すことができる。

本発明の液体組成物のｐＨは、４０℃で高分子ミセルを保存した際の類縁物質の発生量が、７％以下、好ましくは５％以下、より好ましくは、３％以下となるｐＨであり、そのｐＨは、３．０〜７．０が好ましく、より好ましくは４．０〜６．０である。

液体組成物は、上記のｐＨの範囲内であれば特に限定されないが、注射剤のｐＨ調節に用いることのできる添加剤、例えば、塩酸、水酸化ナトリウム、クエン酸、クエン酸ナトリウム、酢酸、酒石酸、水酸化カリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸ナトリウム、乳酸、トリエタノールアミン、リン酸、リン酸水素二ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム等を、配位化合物、特に高分子ミセルを含有している液体中に撹拌しながら徐々に加えることによって調整してよい。ここで、高分子ミセルを含有している液体とは、ブロック共重合体とシスプラチンの配位結合が外れない限り、薄い緩衝液を用いても良いが、特に水であることが好ましい。

以下、実施例によって本発明を具体的に説明するが、これらは本発明の範囲を限定するものではない。

実施例１
高分子ミセルの調製
シスプラチン７０ｇを注射用水に溶解させた溶液と、特許文献１に記載の方法で合成した共重合体、メトキシポリエチレングリコール−ポリグルタミン酸共重合体、ＰＥＧ−ｐ（Ｇｌｕ）（ＰＥＧの平均分子量：１２，０００、グルタミン酸平均残基数：４０、グルタミン酸側鎖はカルボン酸）１０５ｇを注射用水に溶解した溶液とを混合し、注射用水を加えて５０Ｌとした。この溶液を３７℃で３日間反応させた。得られた溶液を、限外ろ過（分画分子量：１００，０００）を繰り返すことにより精製、濃縮し、Ｄ−マンニトールと注射用水を加え、高分子ミセル溶液を得た（シスプラチンとして２．５ｍｇ／ｍＬ相当、５％ Ｄ−マンニトールを含有）。

実施例２
高分子ミセルの安定性試験
調製した高分子ミセル溶液２０ｍＬ（シスプラチンとして２．５ｍｇ／ｍＬ相当、５％ Ｄ−マンニトールを含有）に、０．０１ｍｏｌ／Ｌ塩酸又は０．０１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム溶液、及び注射用水を徐々に添加してｐＨを３．０、４．０、５．０、６．０、７．０又は９．０に調整し、総量を２５ｍＬとした。各ｐＨの溶液を褐色バイアルに６ｍＬずつ分注し、密栓して５℃で保存した。２日後、下記の条件で類縁物質の量の測定を行い、残ったバイアルを４０℃に移し、更に２０日間保存した。保存後、同様に下記の条件で類縁物質量の測定を行った。

（条件）
装置：Ｗａｔｅｒｓ ＧＰＣ ｓｙｓｔｅｍ
カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｕｌｔｒａｈｙｄｒｏｇｅｌ ５００，１０μｍ，７．８φ×３００ｍｍ
カラム温度：約４０℃の恒温
検出器：ＵＶ検出器（検出波長２８０ｎｍ）
移動相：リン酸二水素ナトリウム（無水）２．８７ｇ、リン酸水素二ナトリウム・十二水和物０．２４ｇ及び塩化ナトリウム２．９２ｇを水に溶解し、１Ｌとした溶液
流速：約０．６ｍＬ／分

５℃で２日間保存した後の類縁物質の量の測定結果を表１に、４０℃で２０日間保存した後の類縁物質の量の測定結果を表２にそれぞれ示す。

以上の結果から、４０℃で２０日間という過酷な条件下においても、ｐＨ３．０〜７．０の間、特にｐＨ４．０〜６．０の間において、高分子ミセルを形成したブロック共重合体とシスプラチンとの配位化合物を含有する液体組成物は極めて安定であることが分かった。

Claims (4)

1. 式I又は式II
   

   

   （上記式ＩおよびＩＩにおいて、Ｒ₁は、独立して、水素原子又は、官能基又は置換基により置換されていてもよいアルキル基を示し、Ａは、独立して、ＮＨ、ＣＯ、Ｒ₅（ＣＨ₂）_pＲ₆または直接結合を示し、ここでＲ₅はＯ、ＯＣＯ、ＯＣＯＮＨ、ＮＨＣＯ、ＮＨＣＯＯ、ＮＨＣＯＮＨ、ＣＯＮＨまたはＣＯＯであり、Ｒ₆はＮＨまたはＣＯであり、そしてｐは１〜６の整数であり；Ｒ₂は、独立して、水素原子またはアルカリ金属を示し、Ｒ₃は、独立して、水素原子、水酸基または疎水性残基を示し、ｎは110〜340の整数を示し、ｍは20〜80の整数を示す）
   で表されるブロック共重合体とシスプラチンとの配位化合物を含有する液体組成物であって、当該液体組成物のpHが4.0〜6.0であることを特徴とする液体組成物。
2. 前記液体組成物が更に糖又は糖アルコールを含んでいることを特徴とする請求項１に記載の液体組成物。
3. 糖又は糖アルコールが、Ｄ−マンニトールである請求項２に記載の液体組成物。
4. 液体組成物中のＤ−マンニトール濃度が５％（W/V）である請求項３に記載の液体組成物。