JP2022075651A - Liquid formulation for ophthalmology - Google Patents

Abstract

To reduce the cytotoxicity of cooling agents, and/or to enhance the refreshing feeling of refreshing agents.SOLUTION: In an ophthalmic formulation containing menthol, which is a refreshing agent, it has been found that the addition of brimonidine reduces the cytotoxicity of menthol, which is a refreshing agent, and enhances the refreshing feeling of menthol. Further, it has been shown that in an ophthalmic formulation containing brimonidine and a refreshing agent selected from the group consisting of bergamot oil, geraniol, and borneol, the cytotoxicity caused by the refreshing agent can be similarly reduced by adding brimonidine. Based on the above results, an ophthalmic formulation containing a refreshing agent and brimonidine is provided.SELECTED DRAWING: Figure 2

Description

Translated fromJapanese

本発明は、低濃度のブリモニジン及び清涼化剤を含有する眼科用液体製剤に関する。 The present invention relates to an ophthalmic liquid preparation containing a low concentration of brimonidine and a refreshing agent.

ブリモニジン及びその塩は、α－２アドレナリン受容体アゴニストとして知られている。ヒトの眼は、多くのα－２アドレナリン受容体（以下、α－２受容体と略す場合がある）を有しており、α－２受容体のアゴニストは、眼房水産生抑制と共にぶどう膜強膜流出路を介した眼房水の流出を促進することによって、眼圧を低下させる作用を有する。この作用に基づき、α－２受容体アゴニストは、従来、緑内障や高眼圧症の治療に使用されている。また、α－２受容体のアゴニストは、α－２受容体集中細動脈、特に終末細動脈の内腔サイズの低減を引き起こす作用を有する。この作用により、血管収縮が生じ、目の赤みを低減し、そして白みを増加させ、眼の審美的外観を改善することができる（特許文献１：特許第５６７１４５９号公報；特許文献２：特許第５７３８８９０号公報）。 Brimonidine and its salts are known as α-2 adrenergic receptor agonists. The human eye has many α-2 adrenergic receptors (hereinafter, may be abbreviated as α-2 receptors), and α-2 receptor agonists are used to suppress aqueous humor production and the uveal tract. It has the effect of lowering intraocular pressure by promoting the outflow of aqueous humor through the scleral outflow tract. Based on this effect, α-2 receptor agonists have conventionally been used for the treatment of glaucoma and ocular hypertension. In addition, α-2 receptor agonists have the effect of causing a reduction in the lumen size of α-2 receptor concentrated arterioles, especially terminal arterioles. By this action, vasoconstriction can occur, the redness of the eye can be reduced, the whiteness can be increased, and the aesthetic appearance of the eye can be improved (Patent Document 1: Japanese Patent No. 5671459; Patent Document 2: Patent Document 2: Patent Document 2: Patent Document 2: Patent Document 2: Patent Document 2: Patent Document 2: Patent Document 2: No. 5738890).

眼科用液体製剤には目の不快な症状・疲れ目の緩和を目的として清涼感や爽快感を付与するため清涼化剤を配合することがある。清涼化剤の一例としてメントールが挙げられる。 Liquid preparations for ophthalmology may contain a refreshing agent for the purpose of relieving unpleasant symptoms and tired eyes of the eyes and for giving a refreshing feeling and a refreshing feeling. Menthol is an example of a refreshing agent.

一方、メントールは、清涼感を発揮する成分として、化粧料、医薬部外品、及び医薬品に広く配合されている。なかでも、口腔洗浄剤又は点眼剤には、メントールが配合される場合が多い。メントールは、眼科用製剤に配合されることで、すっきりとした指し心地を付与することができる。メントールによる清涼感は、主に冷感受容体を活性化することにより引き起こされると考えられている。経皮投与での傷害性は低いと考えられており、粘膜に使用されることのない化粧料については最大配合量７％と定められている。一方、点眼剤については通常０．０００５％～０．０５％の範囲で使用される。 On the other hand, menthol is widely blended in cosmetics, quasi-drugs, and pharmaceuticals as an ingredient that exerts a refreshing sensation. In particular, menthol is often added to oral cleansers or eye drops. Menthol can be added to an ophthalmic preparation to provide a refreshing feel. The refreshing sensation of menthol is thought to be caused primarily by activating cold receptors. It is considered that the damage caused by transdermal administration is low, and the maximum amount of cosmetics that are not used on mucous membranes is set to 7%. On the other hand, eye drops are usually used in the range of 0.0005% to 0.05%.

特許第５６７１４５９号公報Japanese Patent No. 5671459特許第５７３８８９０号公報Japanese Patent No. 5738890

メントール等の清涼化剤はすっきりとした指し心地を付与することができるため、多くの眼科用液体製剤に配合されている。一方で、化学物質の多くは細胞傷害性を有するものが多い。本発明者らが行った培養角膜上皮細胞に対してメントール等の清涼化剤を含む試験点眼液を添加した試験において、メントール等の清涼化剤が細胞傷害性を示すことがあることが判った。そこで、メントール等の清涼化剤を含有する眼科用液体製剤において、メントール等の清涼化剤の細胞傷害性を低減可能な成分を一緒に配合することが求められる。 A refreshing agent such as menthol can be used in many ophthalmic liquid preparations because it can give a refreshing feeling to the touch. On the other hand, many chemical substances are cytotoxic. In a test conducted by the present inventors to add a test eye drop containing a refreshing agent such as menthol to cultured corneal epithelial cells, it was found that the refreshing agent such as menthol may exhibit cytotoxicity. .. Therefore, in an ophthalmic liquid preparation containing a refreshing agent such as menthol, it is required to combine a component capable of reducing the cytotoxicity of the refreshing agent such as menthol.

そこで、本発明者らが、メントール等の清涼化剤の細胞傷害性を低減する成分について探索したところ、ブリモニジン及び／又はその塩が、メントール等の清涼化剤による細胞傷害性を低減することができることを見出した。さらに、本発明者らは、ブリモニジン及び／又はその塩はメントール等の清涼化剤含有眼科用液体製剤において、メントール等の清涼化剤による清涼感を増強することができることも見出した。メントール等の清涼化剤の清涼感を増強することができれば、同量でより高い清涼化効果を発揮でき、またメントール等の清涼化剤の配合量を低減することも可能になる。 Therefore, when the present inventors searched for a component that reduces the cytotoxicity of a refreshing agent such as menthol, brimonidine and / or a salt thereof could reduce the cytotoxicity of the refreshing agent such as menthol. I found out what I could do. Furthermore, the present inventors have also found that brimonidine and / or a salt thereof can enhance the refreshing sensation of a refreshing agent such as menthol in an ophthalmic liquid preparation containing a refreshing agent such as menthol. If the refreshing sensation of a refreshing agent such as menthol can be enhanced, a higher refreshing effect can be exhibited with the same amount, and the amount of the refreshing agent such as menthol can be reduced.

本発明の一実施形態として、下記に示す眼科用液体製剤を提供する。
［１] ０．０１ｗ／ｖ％～０．０５ｗ／ｖ％のブリモニジン及び／又はその塩と、清涼化剤とを含有する眼科用液体製剤。
［２］ 前記清涼化剤が、メントール、ベルガモット油、ゲラニオール及びボルネオールからなる群から選ばれる、項目１に記載の眼科用液体製剤。
［３］ 前記メントールが、ｌ－メントールである、項目２に記載の眼科用液体製剤。
［４］ 前記メントールが、０．００１％～０．０５％で配合される、項目２又は３に記載の眼科用液体製剤。
［５］ 前記清涼化剤が、以下の：
０．００００２％～０．０２％のベルガモット油；
０．０００１％～０．１％のゲラニオール；及び
０．０００１％～５％のボルネオール
から選ばれる、項目１又は２に記載の眼科用液体製剤。As an embodiment of the present invention, the following liquid preparation for ophthalmology is provided.
[1] An ophthalmic liquid preparation containing 0.01 w / v% to 0.05 w / v% brimonidine and / or a salt thereof, and a refreshing agent.
[2] The liquid preparation for ophthalmology according toitem 1, wherein the refreshing agent is selected from the group consisting of menthol, bergamot oil, geraniol and borneol.
[3] The liquid preparation for ophthalmology according toitem 2, wherein the menthol is l-menthol.
[4] The liquid preparation for ophthalmology according toitem 2 or 3, wherein the menthol is blended in an amount of 0.001% to 0.05%.
[5] The refreshing agent is as follows:
0.00002% to 0.02% bergamot oil;
The ophthalmic liquid preparation according toitem 1 or 2, selected from 0.0001% to 0.1% geraniol; and 0.0001% to 5% borneol.

また、本発明の一実施形態として、下記に示す清涼感増強剤を提供する。
［６］ ０．０１ｗ／ｖ％～０．０５ｗ／ｖ％のブリモニジン及び／又はその塩を含む、清涼化剤を含有する眼科用液体製剤についての清涼感増強剤。Further, as an embodiment of the present invention, the refreshing sensation enhancer shown below is provided.
[6] A refreshing sensation enhancer for an ophthalmic liquid preparation containing a refreshing agent, which comprises 0.01 w / v% to 0.05 w / v% brimonidine and / or a salt thereof.

また、本発明の一実施形態として、下記に示す清涼感増強方法を提供する。
［７］清涼化剤を含有する眼科用液体製剤に、０．０１～０．０５ｗ／ｖ％のブリモニジン及び／又はその塩を配合することを特徴とする、点眼投与における清涼化剤の清涼感増強方法。Further, as an embodiment of the present invention, a method for enhancing a refreshing sensation shown below is provided.
[7] A refreshing sensation of the refreshing agent in eye drop administration, which comprises blending 0.01 to 0.05 w / v% brimonidine and / or a salt thereof with an ophthalmic liquid preparation containing a refreshing agent. Augmentation method.

また、本発明の一実施形態として、下記に示す細胞傷害性低減剤を提供する。
［８］ ０．０１ｗ／ｖ％～０．０５ｗ／ｖ％のブリモニジン及び／又はその塩を含む、清涼化剤を含有する眼科用液体製剤についての細胞傷害性低減剤。Further, as an embodiment of the present invention, the following cytotoxicity reducing agents are provided.
[8] A cytotoxicity-reducing agent for an ophthalmic liquid preparation containing a refreshing agent, which comprises 0.01 w / v% to 0.05 w / v% brimonidine and / or a salt thereof.

本発明によれば、メントール等の清涼化剤を含む眼科用液体製剤に対し、ブリモニジン及び／又はその塩を配合することで、細胞傷害性を低減する効果及び／又はメントール等の清涼化剤の清涼感を増強する効果を発揮する。 According to the present invention, by blending brimonidine and / or a salt thereof with an ophthalmic liquid preparation containing a refreshing agent such as menthol, the effect of reducing cytotoxicity and / or the cooling agent such as menthol It has the effect of enhancing the refreshing sensation.

図１は、ｌ－メントール及び／又はブリモニジン酒石酸塩を含む試験点眼液（比較例１：両成分非含有、比較例２：ブリモニジン酒石酸塩のみ含有、比較例３：ｌ－メントールのみ含有、実施例１：両成分含有）中でヒト角膜上皮細胞をインキュベート後において、細胞生存数に対応する吸光度の変化を示すグラフである。FIG. 1 shows a test ophthalmic solution containing l-menthol and / or brimonidine tartrate (Comparative Example 1: not containing both components, Comparative Example 2: containing only brimonidine tartrate, Comparative Example 3: containing only l-menthol, Examples. 1: It is a graph which shows the change of the absorbance corresponding to the number of surviving cells after incubating human corneal epithelial cells in (containing both components).図２は、ｌ－メントール（実施例２：０．００２％、実施例３：０．０１％、実施例４：０．０２％、実施例５：０．０２５％、実施例６：０．０３％）を含有する試験点眼液中でインキュベート後のヒト角膜上皮細胞の細胞死について、ブリモニジン酒石酸塩（０．０２５％）による抑制率を示すグラフである。FIG. 2 shows l-menthol (Example 2: 0.002%, Example 3: 0.01%, Example 4: 0.02%, Example 5: 0.025%, Example 6: 0. It is a graph which shows the suppression rate by brimonidine tartrate (0.025%) about the cell death of the human corneal epithelial cell after incubating in the test ophthalmic solution containing 03%).図３は、ｌ－メントールを含む試験点眼液中でヒト角膜上皮細胞をインキュベート後において、充血除去成分としてブリモニジン酒石酸塩（実施例６）、テトラヒドロゾリン塩酸塩（比較例７）、又はナファゾリン塩酸塩（比較例８）を試験点眼液に含有させることによる、細胞生存数に対応する吸光度の変化を示すグラフである。比較例６’は、充血除去成分非含有の試験点眼液を表す。FIG. 3 shows brimonidine tartrate (Example 6), tetrahydrozoline hydrochloride (Comparative Example 7), or naphazoline hydrochloride (Example 6) as a decongestation component after incubating human corneal epithelial cells in a test ophthalmic solution containing l-menthol. It is a graph which shows the change of the absorbance corresponding to the cell survival number by containing Comparative Example 8) in the test ophthalmic solution. Comparative Example 6'represents a test eye drop containing no decongestant component.図４は、清涼感評価試験における、ｌ－メントールを含有する試験点眼液（Ｂ－０５：比較例９）の清涼感の評価と、ｌ－メントールとブリモニジン酒石酸塩とを含有する試験点眼液（Ｂ－０６：実施例７）の清涼感の評価との比較を示すグラフである。FIG. 4 shows the evaluation of the refreshing sensation of the test ophthalmic solution containing l-menthol (B-05: Comparative Example 9) in the refreshing sensation evaluation test, and the test ophthalmic solution containing l-menthol and brimonidine tartrate (B-05: Comparative Example 9). B-06: It is a graph which shows the comparison with the evaluation of the refreshing feeling of Example 7).図５（１）は、ブリモニジン酒石酸塩と、清涼化剤として、ベルガモット油（実施例８）とを配合した試験点眼液について、ヒト角膜上皮細胞を用いた細胞傷害性試験により得られた吸光度を示す。比較例１０は基剤のみを含む試験点眼液、比較例１１は基剤とブリモニジン酒石酸塩のみを含む試験点眼液、比較例１２は基剤とベルガモット油のみを含む試験点眼液において、同じ試験を用いて得られた吸光度を示す。図５（２）は、ブリモニジン酒石酸塩と、清涼化剤として、ゲラニオール（実施例９）、及びボルネオール（実施例１０）とを配合した試験点眼液について、ヒト角膜上皮細胞を用いた細胞傷害性試験により得られた吸光度を示す。比較例１０は基剤のみを含む試験点眼液、比較例１１は基剤とブリモニジン酒石酸塩のみを含む試験点眼液、比較例１３は基剤とゲラニオールのみを含む試験点眼液、比較例１４は基剤とボルネオールのみを含む試験点眼液において、同じ試験を用いて得られた吸光度を示す。FIG. 5 (1) shows the absorbance obtained by a cytotoxicity test using human corneal epithelial cells with respect to the test eye drops containing brimonidine tartrate and bergamot oil (Example 8) as a refreshing agent. show. Comparative Example 10 is a test ophthalmic solution containing only a base, Comparative Example 11 is a test ophthalmic solution containing only a base and brimonidine tartrate, and Comparative Example 12 is a test ophthalmic solution containing only a base and bergamot oil. The absorbance obtained by using is shown. FIG. 5 (2) shows cytotoxicity using human corneal epithelial cells for a test ophthalmic solution containing brimonidine tartrate and geraniol (Example 9) and borneol (Example 10) as refreshing agents. The absorbance obtained by the test is shown. Comparative Example 10 is a test ophthalmic solution containing only a base, Comparative Example 11 is a test ophthalmic solution containing only a base and brimonidine tartrate, Comparative Example 13 is a test ophthalmic solution containing only a base and geraniol, and Comparative Example 14 is a base. The absorbance obtained by using the same test in the test eye drops containing only the agent and borneol is shown.図６は、ブリモニジン酒石酸塩と、清涼化剤として、ベルガモット油（実施例８）、ゲラニオール（実施例９）、ボルネオール（実施例１０）とを配合した試験点眼液について、ヒト角膜上皮細胞を用いた細胞傷害性試験により得られたブリモニジン酒石酸塩による細胞死滅抑制率を示す。FIG. 6 shows human corneal epithelial cells for a test ophthalmic solution containing brimonidine tartrate and bergamot oil (Example 8), geraniol (Example 9), and borneol (Example 10) as a refreshing agent. The cell killing inhibition rate by brimonidine tartrate obtained by the cytotoxicity test was shown.

本明細書において使用される用語は、特に言及しない限り、当該分野で通常用いられる意味で用いられることが理解される。従って、他に定義されない限り、本明細書中で使用されるすべての専門用語及び科学技術用語は、本発明の属する分野の当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。本明細書で特定される数値範囲は、その下限値及び上限値を含むものとする。 It is understood that the terms used herein are used in the meaning commonly used in the art unless otherwise noted. Accordingly, unless otherwise defined, all technical and scientific terms used herein have the same meaning as commonly understood by one of ordinary skill in the art to which this invention belongs. The numerical range specified herein shall include its lower and upper limits.

（定義）
本明細書において、「ブリモニジン」は、ＩＵＰＡＣ名：５－ブロモ－Ｎ－（４，５－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾール－２－イル）キノキサリン－６‐アミン（５－Ｂｒｏｍｏ－Ｎ－（４，５－ｄｉｈｙｄｒｏ－１Ｈ－ｉｍｉｄａｚｏｌ－２－ｙｌ）ｑｕｉｎｏｘａｌｉｎ－６－ａｍｉｎｅ）の化合物を指す。また、本明細書において、ブリモニジン及び／又はその塩の濃度は、特に明記しない限り、ブリモニジン酒石酸塩に換算された濃度である。(Definition)
As used herein, "brimonidine" is referred to as IUPAC name: 5-bromo-N- (4,5-dihydro-1H-imidazol-2-yl) quinoxaline-6-amine (5-Bromo-N- (4,5)). -Dihydro-1H-imidazole-2-yl) quinoxaline-6-amine) refers to a compound. Further, in the present specification, the concentration of brimonidine and / or a salt thereof is the concentration converted to brimonidine tartrate unless otherwise specified.

本明細書において、「低濃度のブリモニジン」とは、０．０５ｗ／ｖ％以下の濃度のブリモニジンを指す。 As used herein, the term "low concentration brimonidine" refers to brimonidine having a concentration of 0.05 w / v% or less.

本明細書において、「眼科用液体製剤」とは、水を基剤とする水性液体製剤であり、眼科用製剤、特に点眼に用いられる製剤を指す。 As used herein, the term "ophthalmic liquid preparation" refers to an aqueous liquid preparation based on water, and refers to an ophthalmic preparation, particularly a preparation used for instillation.

メントールとは、ＩＵＰＡＣ名：２－イソプロピル－５－メチルシクロヘキサノールの化合物を指し、複数の立体異性体を含む。ハッカやペパーミントに含まれる天然のメントールとして、一般的にはｄｌ－メントール又はｌ－メントールを指すことが多い。メントールはハッカ臭を有するとともに、冷感受容体を刺激し、清涼感（冷感ともいう）を引き起こす。 Menthol refers to a compound of IUPAC name: 2-isopropyl-5-methylcyclohexanol and contains a plurality of stereoisomers. As a natural menthol contained in peppermint and peppermint, it generally refers to dl-menthol or l-menthol. Menthol has a mentha odor and stimulates a cooling sensation receptor, causing a refreshing sensation (also called a cooling sensation).

本明細書において、「細胞傷害性」は、培養細胞、特に培養上皮細胞、より具体的には培養角膜上皮細胞に対する傷害性として計測される。具体的に、細胞傷害性は、試験点眼液を培養細胞に添加し、一定期間培養後の生細胞数及び／又は死細胞数に基づいて決定される。こうして決定された試験点眼液の細胞傷害性は、生体の細胞や眼組織、特に上皮細胞、より具体的に角膜上皮細胞でも同様に発揮されうる。 As used herein, "cytotoxicity" is measured as injurious to cultured cells, particularly cultured epithelial cells, more specifically cultured corneal epithelial cells. Specifically, cytotoxicity is determined based on the number of live cells and / or the number of dead cells after adding the test ophthalmic solution to the cultured cells and culturing for a certain period of time. The cytotoxicity of the test ophthalmic solution thus determined can be similarly exerted in living cells and ocular tissues, particularly epithelial cells, more specifically corneal epithelial cells.

本明細書において、「細胞傷害性低減」とは、清涼化剤配合の眼科用液体製剤による細胞傷害性を低減することをいう。具体的に、清涼化剤配合の眼科用液体製剤にブリモニジン及び／又はその塩を配合することで、清涼化剤の細胞傷害性を低減することができる。 As used herein, the term "reduction of cytotoxicity" means reducing the cytotoxicity of an ophthalmic liquid preparation containing a refreshing agent. Specifically, by adding brimonidine and / or a salt thereof to an ophthalmic liquid preparation containing a refreshing agent, the cytotoxicity of the refreshing agent can be reduced.

本明細書において、「細胞傷害性低減剤」とは、清涼化剤配合の眼科用液体製剤を眼に点眼した際の細胞傷害性による影響を抑制し、細胞が本来持つ機能を維持し続けるために配合される剤のことをいう。具体的には、清涼化剤配合の眼科用液体製剤に、細胞傷害性低減剤としてブリモニジン及び／又はその塩を配合することで、清涼化剤配合の眼科用液体製剤の細胞傷害性を低減することができる。ブリモニジン及び／又はその塩は、他の用途を目的として配合されてもよい。 As used herein, the term "cytotoxicity reducing agent" means to suppress the effects of cytotoxicity when an ophthalmic liquid preparation containing a refreshing agent is instilled into the eye, and to maintain the original function of the cells. It refers to the agent to be blended in. Specifically, by adding brimonidine and / or a salt thereof as a cytotoxicity reducing agent to an ophthalmic liquid preparation containing a refreshing agent, the cytotoxicity of the ophthalmic liquid preparation containing a refreshing agent is reduced. be able to. Brimonidine and / or salts thereof may be formulated for other uses.

本明細書において、「清涼感」とは、清涼化剤に起因する冷感のことをいう。特に清涼化剤が眼科用液体製剤に配合されると、眼科用液体製剤を眼に点眼した際に、すっきりとした指し心地を与えることができる。清涼感は、官能試験により評価することができ、主に清涼感の強さと清涼感の持続性の観点で評価される。 As used herein, the term "cooling sensation" refers to a cooling sensation caused by a cooling agent. In particular, when the refreshing agent is blended in the liquid preparation for ophthalmology, it is possible to give a refreshing feeling when the liquid preparation for ophthalmology is instilled into the eye. The refreshing sensation can be evaluated by a sensory test, and is mainly evaluated from the viewpoint of the strength of the refreshing sensation and the sustainability of the refreshing sensation.

本明細書において、「清涼感増強」とは、眼科用液体製剤を眼に点眼した際の清涼感の強さ及び持続性のうちのいずれか、又は両方を増強することをいう。したがって、清涼感増強剤は、清涼感の強さの増強剤又は清涼感持続性増強剤ともいうことができる。 As used herein, the term "enhanced refreshing sensation" means enhancing one or both of the strength and persistence of the refreshing sensation when an ophthalmic liquid preparation is instilled into the eye. Therefore, the refreshing sensation enhancer can also be referred to as a refreshing sensation intensity enhancing agent or a refreshing sensation persistence enhancing agent.

本明細書において、「清涼感増強剤」とは、眼科用液体製剤を眼に点眼した際の清涼感の強さ及び持続性のうちのいずれか、又は両方を増強することを目的として配合される添加剤のことをいう。具体的に、清涼化剤配合の眼科用液体製剤に、清涼感増強剤としてブリモニジン及び／又はその塩を配合することで、眼科用液体製剤の清涼感を増強することができる。ブリモニジン及び／又はその塩は、他の用途を目的として配合されてもよい。 As used herein, the term "cooling sensation enhancer" is formulated for the purpose of enhancing either or both of the strength and persistence of the refreshing sensation when an ophthalmic liquid preparation is instilled into the eye. It is an additive. Specifically, by adding brimonidine and / or a salt thereof as a refreshing sensation enhancer to the ophthalmic liquid preparation containing a refreshing agent, the refreshing sensation of the ophthalmic liquid preparation can be enhanced. Brimonidine and / or salts thereof may be formulated for other uses.

（好ましい実施形態の説明）
以下に本発明の好ましい実施形態を説明する。以下に提供される実施形態は、本発明のよりよい理解のために提供されるものであり、本発明の範囲は以下の記載に限定されるべきでないことが理解される。従って、当業者は、本明細書中の記載を参酌して、本発明の範囲内で適宜改変を行うことができることは明らかである。また、以下の実施形態は単独でも使用されあるいはそれらを組み合わせて使用することができることが理解される。(Explanation of Preferred Embodiment)
Hereinafter, preferred embodiments of the present invention will be described. It is understood that the embodiments provided below are provided for a better understanding of the invention and the scope of the invention should not be limited to the following description. Therefore, it is clear that a person skilled in the art can appropriately make modifications within the scope of the present invention in consideration of the description in the present specification. It is also understood that the following embodiments may be used alone or in combination.

本発明の眼科用液体製剤は、清涼化剤及びブリモニジン及び／又はその塩を含有する。 The liquid preparation for ophthalmology of the present invention contains a refreshing agent and brimonidine and / or a salt thereof.

ブリモニジンの塩としては、医薬として許容される塩であれば任意の塩が挙げられる。ブリモニジンの医薬として許容される塩として、塩酸塩、硫酸塩、リン酸塩、酢酸塩、クエン酸塩、シュウ酸塩、マロン酸塩、サリチル酸塩、リンゴ酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、アスコルビン酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、酒石酸塩および当業者に周知の他の無機カルボン酸塩が挙げられ、好ましくは酒石酸塩である。 Examples of the salt of brimonidine include any salt as long as it is pharmaceutically acceptable. Pharmaceutically acceptable salts of brimonidine include hydrochloride, sulfate, phosphate, acetate, citrate, oxalate, malonate, salicylate, malate, fumarate, succinate, Examples thereof include ascorbate, maleate, methanesulfonate, tartrate and other inorganic carboxylates well known to those skilled in the art, preferably tartrate.

本発明において、低濃度のブリモニジンとは、０．０５ｗ／ｖ％以下の濃度のブリモニジンを指す。一例として、濃度の上限は、副作用を予防する観点から０．０４ｗ／ｖ％、又は０．０３ｗ／ｖ％であってもよい。濃度の下限は、ブリモニジンが含有される限り限定されないが、０．０１ｗ／ｖ％が用いられてもよく、一例として本剤の効果を鑑み、０．０１５ｗ／ｖ％、又は０．０２ｗ／ｖ％が用いられてもよい。 In the present invention, the low concentration brimonidine refers to brimonidine having a concentration of 0.05 w / v% or less. As an example, the upper limit of the concentration may be 0.04 w / v% or 0.03 w / v% from the viewpoint of preventing side effects. The lower limit of the concentration is not limited as long as brimonidine is contained, but 0.01 w / v% may be used. As an example, in view of the effect of this drug, 0.015 w / v% or 0.02 w / v. % May be used.

本発明において、清涼化剤は、眼科用液体製剤に清涼感を付与する目的で配合される。 In the present invention, the refreshing agent is added for the purpose of imparting a refreshing sensation to the liquid preparation for ophthalmology.

本発明において、眼科用液体製剤に用いることができる清涼化剤としては、テルペノイド、クローブ香料、ペパーミント香料、ユーカリ香料、レモン香料、ローレル香料、ラベンダー香料、タラゴン香料、カルダモン香料、シダー香料、グレープフルーツ香料、オレンジ香料、ショウガ香料、ベルガモット香料、コリアンダー香料、シナモン香料、ジャスミン香料、ローズマリー香料、ローズ香料、パイン香料、カルダモン香料、ベンゾイン香料、ゼラニウム香料、カモミール香料、マージョラム香料、スペアミント香料、フェンネル香料、バニラフレーバー、ハッカ油、ハッカ水及びベルガモット油等を挙げることができる。テルペノイドとしては、例えば、メントール、メントン、カンフル、ボルネオール、ゲラニオール、シネオール、リモネン、オイゲノール、シトラール、ピネン、リナロール、フェンチルアルコール、ヨノン、サフラナール、テルピネン等のモノテルペンを挙げることができる。その中でも特に、ヒト角膜細胞に対する細胞傷害性の低さの観点から、特にメントール、ベルガモット油、ゲラニオール、及びボルネオールを用いるのが好ましい。さらに、特にメントールを用いるのが好ましい。これらの清涼化剤は１種単独で、又は２種以上を適宜組み合わせて、使用することができる。 In the present invention, as the refreshing agent that can be used in the liquid preparation for ophthalmology, terpenoid, clove fragrance, peppermint fragrance, eucalyptus fragrance, lemon fragrance, laurel fragrance, lavender fragrance, taragon fragrance, cardamon fragrance, cedar fragrance, grapefruit fragrance. , Orange fragrance, ginger fragrance, bergamot fragrance, coriander fragrance, cinnamon fragrance, jasmine fragrance, rosemary fragrance, rose fragrance, pine fragrance, cardamon fragrance, benzoin fragrance, geranium fragrance, chamomile fragrance, marjoram fragrance, spare mint fragrance, fennel fragrance, Examples include vanilla flavor, peppermint oil, peppermint water and bergamot oil. Examples of terpenoids include monoterpenes such as menthol, menthol, camphor, borneol, geraniol, cineole, limonene, eugenol, citral, pinene, linalool, fentyl alcohol, yonon, safranal, and terpinene. Among them, menthol, bergamot oil, geraniol, and borneol are particularly preferable from the viewpoint of low cytotoxicity to human corneal cells. Further, it is particularly preferable to use menthol. These refreshing agents can be used alone or in combination of two or more.

メントールとしては、清涼感を発揮できる任意の立体異性体であってもよい。メントールは、（＋）－メントール、（＋）－イソメントール、（＋）－ネオメントール、（＋）－ネオイソメントール、（－）－メントール、（－）－イソメントール、（－）－ネオメントール、（－）－ネオイソメントールが挙げられる。ハッカやペパーミントから得られる観点から、（－）－メントールが好ましい。（－）－メントールは、ｌ－メントールとも呼ばれる。メントールは、天然エキス又は天然油として配合されていてもよく、例えばハッカエキス、ハッカ油、ミントエキス、ミント油等が配合された眼科用液体製剤も、メントールを含む眼科用液体製剤に該当する。 The menthol may be any stereoisomer capable of exhibiting a refreshing sensation. Menthol is (+)-menthol, (+)-isomenthol, (+)-neomenthol, (+)-neoisomenthol, (-)-menthol, (-)-isomenthol, (-)-neomenthol. , (-)-Neoisomenthol. From the viewpoint obtained from mint and peppermint, (-)-menthol is preferable. (-)-Menthol is also called l-menthol. Menthol may be blended as a natural extract or a natural oil, and for example, an ophthalmic liquid preparation containing mint extract, mint oil, mint extract, mint oil and the like also falls under the category of ophthalmic liquid preparation containing menthol.

本発明において清涼化剤の濃度は、眼科用液体製剤に使用する観点から、清涼化剤の種類に応じて適宜決定することができる。清涼化剤としてメントールを使用する場合、例えば０．００１％～０．１％の濃度で配合されうる。清涼感を高める観点から、メントールは０．００２％以上で配合されることが好ましく、０．０１％以上で配合されることがさらに好ましい。適切な使用感を得る観点から、０．０５％以下で配合されることが好ましく、０．０３％以下で配合されることがさらに好ましい。 In the present invention, the concentration of the refreshing agent can be appropriately determined depending on the type of the refreshing agent from the viewpoint of using it in an ophthalmic liquid preparation. When menthol is used as a refreshing agent, it can be formulated at a concentration of, for example, 0.001% to 0.1%. From the viewpoint of enhancing the refreshing sensation, menthol is preferably blended in an amount of 0.002% or more, and more preferably 0.01% or more. From the viewpoint of obtaining an appropriate feeling of use, it is preferably blended in an amount of 0.05% or less, and more preferably blended in an amount of 0.03% or less.

清涼化剤としてハッカ油を用いる場合、例えば０．０００２％～０．１％の濃度で配合されうる。清涼感を高める観点から、ハッカ油は０．００１％以上で配合されることが好ましく、０．０１％以上で配合されることがさらに好ましい。適切な使用感を得る観点から、０．０５％以下で配合されることが好ましく、０．０２％以下で配合されることがさらに好ましい。 When mentha oil is used as a refreshing agent, it can be blended at a concentration of, for example, 0.0002% to 0.1%. From the viewpoint of enhancing the refreshing sensation, the mentha oil is preferably blended in an amount of 0.001% or more, and more preferably 0.01% or more. From the viewpoint of obtaining an appropriate feeling of use, it is preferably blended in an amount of 0.05% or less, and more preferably blended in an amount of 0.02% or less.

清涼化剤としてユーカリ油を用いる場合、例えば０．００００５％～０．０５％の濃度で配合されうる。清涼感を高める観点から、ユーカリ油は０．０００５％以上で配合されることが好ましく、０．００１％以上で配合されることがさらに好ましい。適切な使用感を得る観点から、０．０１％以下で配合されることが好ましく、０．００５％以下で配合されることがさらに好ましい。 When eucalyptus oil is used as a refreshing agent, it can be blended at a concentration of, for example, 0.00005% to 0.05%. From the viewpoint of enhancing the refreshing sensation, the eucalyptus oil is preferably blended at 0.0005% or more, and more preferably 0.001% or more. From the viewpoint of obtaining an appropriate feeling of use, it is preferably blended in an amount of 0.01% or less, and more preferably blended in an amount of 0.005% or less.

清涼化剤としてベルガモット油を用いる場合、例えば０．００００２％～０．０２％の濃度で配合されうる。清涼感を高める観点から、ベルガモット油は０．０００２％以上で配合されることが好ましく、０．０００５％以上で配合されることがさらに好ましい。適切な使用感を得る観点から、０．００５％以下で配合されることが好ましく、０．００２％以下で配合されることがさらに好ましい。 When bergamot oil is used as a refreshing agent, it can be blended at a concentration of, for example, 0.00002% to 0.02%. From the viewpoint of enhancing the refreshing sensation, the bergamot oil is preferably blended in an amount of 0.0002% or more, and more preferably 0.0005% or more. From the viewpoint of obtaining an appropriate feeling of use, it is preferably blended in an amount of 0.005% or less, and more preferably blended in an amount of 0.002% or less.

清涼化剤としてゲラニオールを用いる場合、例えば０．０００１％～０．１％の濃度で配合されうる。清涼感を高める観点から、ゲラニオールは０．０００５％以上で配合されることが好ましく、０．００１％以上で配合されることがさらに好ましい。適切な使用感を得る観点から、０．０３％以下で配合されることが好ましく、０．０１％以下で配合されることがさらに好ましい。 When geraniol is used as a refreshing agent, it can be blended at a concentration of, for example, 0.0001% to 0.1%. From the viewpoint of enhancing the refreshing sensation, geraniol is preferably blended in an amount of 0.0005% or more, more preferably 0.001% or more. From the viewpoint of obtaining an appropriate feeling of use, it is preferably blended in an amount of 0.03% or less, and more preferably blended in an amount of 0.01% or less.

清涼化剤としてカンフルを用いる場合、例えば０．０００１％～０．１％の濃度で配合されうる。清涼感を高める観点から、カンフルは０．０００５％以上で配合されることが好ましく、０．００１％以上で配合されることがさらに好ましい。適切な使用感を得る観点から、０．０３％以下で配合されることが好ましく、０．０１％以下で配合されることがさらに好ましい。 When camphor is used as a refreshing agent, it can be blended at a concentration of, for example, 0.0001% to 0.1%. From the viewpoint of enhancing the refreshing sensation, camphor is preferably blended in an amount of 0.0005% or more, more preferably 0.001% or more. From the viewpoint of obtaining an appropriate feeling of use, it is preferably blended in an amount of 0.03% or less, and more preferably blended in an amount of 0.01% or less.

清涼化剤としてボルネオールを用いる場合、例えば０．０００１％～５％の濃度で配合されうる。清涼感を高める観点から、ボルネオールは０．０００５％以上で配合されることが好ましく、０．００５％以上で配合されることがさらに好ましい。適切な使用感を得る観点から、０．５％以下で配合されることが好ましく、０．０２％以下で配合されることがさらに好ましい。 When borneol is used as a refreshing agent, it can be blended at a concentration of, for example, 0.0001% to 5%. From the viewpoint of enhancing the refreshing sensation, borneol is preferably blended in an amount of 0.0005% or more, more preferably 0.005% or more. From the viewpoint of obtaining an appropriate feeling of use, it is preferably blended in an amount of 0.5% or less, and more preferably blended in an amount of 0.02% or less.

本発明において眼科用液体製剤は、水を基剤とする水性液体製剤であるが、点眼薬に使用しうる任意の液体基剤をさらに含んでいてもよい。本発明の眼科用液体製剤は、点眼薬として許容されるｐＨ、浸透圧を有するように調製される。眼科用液体製剤のｐＨは、ｐＨ調整剤を使用して５．０～９．０に調整することができ、一例として５．５～８．５である。一例として６．０～８．０にも調整することもできる。眼科用液体製剤の浸透圧比の一例として、好ましくは０．５～２．５、より好ましくは０．７～１．５になるように眼科用液体製剤に添加する成分量を調節される。 In the present invention, the liquid preparation for ophthalmology is an aqueous liquid preparation based on water, but may further contain any liquid base that can be used for eye drops. The liquid preparation for ophthalmology of the present invention is prepared to have a pH and an osmotic pressure acceptable for eye drops. The pH of the liquid preparation for ophthalmology can be adjusted to 5.0 to 9.0 by using a pH adjuster, and is 5.5 to 8.5 as an example. As an example, it can be adjusted to 6.0 to 8.0. As an example of the osmotic pressure ratio of the liquid preparation for ophthalmology, the amount of the component added to the liquid preparation for ophthalmology is adjusted so as to be preferably 0.5 to 2.5, more preferably 0.7 to 1.5.

本発明の眼科用液体製剤は、好ましくは点眼剤、より好ましくは一般用点眼剤であり、清涼感を与える観点からメントール、ベルガモット油、ゲラニオール、及びボルネオールからなる群から選ばれる清涼化剤が配合される。本発明の眼科用液体製剤にはブリモニジン及び／又はその塩がさらに配合される。低濃度のブリモニジン及び／又はその塩は目の充血を緩和するかまたは抑制する薬効を有する。目の充血を緩和するかまたは抑制するとは、白目部分の白みを増加させることを言い、目のホワイトニングともいうことができる。目の充血を緩和するかまたは抑制する観点から、本発明の眼科用液体製剤は、低濃度のブリモニジン及び／又はその塩を含むことが好ましい。 The liquid preparation for ophthalmology of the present invention is preferably an eye drop, more preferably a general eye drop, and contains a refreshing agent selected from the group consisting of menthol, bergamot oil, geraniol, and borneol from the viewpoint of giving a refreshing sensation. Will be done. Brimonidine and / or a salt thereof is further added to the liquid preparation for ophthalmology of the present invention. Low concentrations of brimonidine and / or salts thereof have a medicinal effect of alleviating or suppressing red eye. Relieving or suppressing red eye refers to increasing the whiteness of the white part of the eye, and can also be referred to as eye whitening. From the viewpoint of alleviating or suppressing red eye, the ophthalmic liquid preparation of the present invention preferably contains a low concentration of brimonidine and / or a salt thereof.

白目の表面は、強膜上を覆う結膜から構成されており、結膜はさらに瞼の内側を覆っている。結膜表面は、結膜上皮細胞から主に構成される。結膜の上皮層には血管、繊維組織、リンパ管が含まれる。結膜は白目と黒目の境界で角膜と接しており、角膜と結膜は外界にさらされる目の最外層を構成する。結膜は外界にさらされていることから、細菌やウイルスなどに侵されやすく、炎症が生じやすい。また炎症が起こっていない場合であっても、寝不足や目の酷使により、目に酸素や栄養を供給するために血流量が増えて充血する。本発明においてブリモニジン及び／又はその塩は、結膜内の毛細血管に到達し、毛細血管の血流量を低減することで、充血緩和、目の赤みの低減又は白化という作用を発揮する。 The surface of the white of the eye is composed of a conjunctiva that covers the sclera, which further covers the inside of the eyelid. The conjunctival surface is mainly composed of conjunctival epithelial cells. The epithelial layer of the conjunctiva contains blood vessels, fibrous tissue, and lymphatic vessels. The conjunctiva is in contact with the cornea at the boundary between the white and black eyes, and the cornea and conjunctiva form the outermost layer of the eye exposed to the outside world. Since the conjunctiva is exposed to the outside world, it is easily attacked by bacteria and viruses, and inflammation is likely to occur. Even when inflammation does not occur, lack of sleep and overuse of the eyes increase blood flow to supply oxygen and nutrients to the eyes, resulting in redness. In the present invention, brimonidine and / or a salt thereof reach the capillaries in the conjunctiva and reduce the blood flow in the capillaries, thereby exerting the effects of alleviating redness, reducing redness of the eyes, or whitening the eyes.

本発明の眼科用液体製剤は、点眼薬に使用しうる任意の成分を、本発明の効果を損なわない範囲で含有することができる。本発明の眼科用液体製剤に含まれる清涼化剤及びブリモニジン酒石酸塩とは別に、任意の有効成分及び添加物などの任意的成分を含んでもよい。このような任意的成分としては、充血除去剤、ピント調節機能改善剤、消炎・収れん剤、抗ヒスタミン剤、ビタミン類、保水・栄養成分、サルファ剤、防腐剤、ｐＨ調整剤、等張化剤、増粘剤、抗酸化剤、溶解補助剤、安定化剤、界面活性剤などが挙げられるが、これらに限定されることを意図するものではない。これらの有効成分及び添加剤は、それぞれ各カテゴリーの中から１種類のみを用いてもよいし、複数の種類を組み合わせて使用することができる。以下に、任意的成分を説明するが、列挙された作用以外の作用を目的として使用されてもよい。 The liquid preparation for ophthalmology of the present invention can contain any component that can be used for eye drops as long as the effect of the present invention is not impaired. In addition to the refreshing agent and brimonidine tartrate contained in the liquid preparation for ophthalmology of the present invention, any active ingredient and any ingredient such as an additive may be contained. Such optional ingredients include decongestants, focus control function improvers, anti-inflammatory / astringent agents, antihistamines, vitamins, water-retaining / nutritional ingredients, sulfa agents, preservatives, pH regulators, isotonic agents, and thickening agents. Agents, antioxidants, solubilizers, stabilizers, surfactants and the like are included, but are not intended to be limited thereto. Only one kind of these active ingredients and additives may be used from each category, or a plurality of kinds may be used in combination. Although optional components are described below, they may be used for the purpose of actions other than those listed.

ビタミン類とは、生物の生存又は生育に微量に必要な栄養素のうち、その生物の体内で十分な量を合成できない炭水化物・タンパク質・脂質以外の有機化合物の総称である。ビタミン類としては、水溶性ビタミン類と、脂溶性ビタミン類に大別される。水溶性ビタミン類としては、ビタミンＢ類及びビタミンＣ（アスコルビン酸）が挙げられる。脂溶性ビタミンとしては、ビタミンＡ類、ビタミンＤ類、ビタミンＥ類、ビタミンＫ類が挙げられる。一般用医薬品製造（輸入）承認基準では、点眼薬に配合されるビタミン類が規定されており、この観点から、特にビタミンＡ類、ビタミンＢ類、ビタミンＥ類が好ましい。 Vitamins are a general term for organic compounds other than carbohydrates, proteins, and lipids that cannot synthesize a sufficient amount of nutrients necessary for the survival or growth of an organism in the body of the organism. Vitamins are roughly classified into water-soluble vitamins and fat-soluble vitamins. Examples of water-soluble vitamins include vitamin Bs and vitamin C (ascorbic acid). Examples of fat-soluble vitamins include vitamin A, vitamin D, vitamin E, and vitamin K. The over-the-counter drug manufacturing (import) approval standard stipulates vitamins to be blended in eye drops, and from this viewpoint, vitamin A, vitamin B, and vitamin E are particularly preferable.

ビタミンＡ類としては、レチノール、及びその関連物質が使用されうる。レチノール関連物質として、レチナール、レチノイン酸、パルミチン酸レチノールやその他のレチノイド、例えばイソトレチノイン、アリトレチノイン、アシトレチン、エトレチナート、アダパレン、タザロテン、ベキサロテン等も挙げられる。点眼薬として配合する観点からパルミチン酸レチノール、酢酸レチノールが好ましい。ビタミンＡ類は上皮細胞に作用し増殖を誘導することから、角膜や結膜保護等を目的として点眼薬に配合されうる。夜盲症、結膜乾燥症、角膜乾燥症、角膜軟化症等の眼科系疾患の治療のためにも点眼薬に配合されうる。 As vitamin A, retinol and related substances may be used. Retinol-related substances include retinal, retinoic acid, retinol palmitate and other retinoids such as isotretinoin, alitretinoin, acitretin, etretinate, adapalene, tazarotene, bexarotene and the like. Retinyl palmitate and retinyl acetate are preferable from the viewpoint of blending as eye drops. Since vitamin A acts on epithelial cells and induces proliferation, it can be added to eye drops for the purpose of protecting the cornea and conjunctiva. It can also be added to eye drops for the treatment of ophthalmic diseases such as night blindness, dry conjunctival disease, dry corneal disease, and keratomalacia.

ビタミンＢ類としては、ビタミンＢ１（チアミン等）、ビタミンＢ２、ビタミンＢ３（ナイアシン等）、ビタミンＢ５、ビタミンＢ６、ビタミンＢ７（ビオチン等）、ビタミンＢ９（葉酸等）、ビタミンＢ１２が使用されうる。ビタミン類には、誘導体であるプロビタミンや医薬として許容される塩を包含する。ビタミンＢ類の中でも、特に点眼薬に配合される観点から、ビタミンＢ２、Ｂ５、Ｂ６、Ｂ１２が好ましい。 As the B vitamins, vitamin B1 (thiamin and the like), vitamin B2, vitamin B3 (niacin and the like), vitamin B5, vitamin B6, vitamin B7 (biotin and the like), vitamin B9 (folic acid and the like) and vitamin B12 can be used. Vitamins include derivative provitamins and pharmaceutically acceptable salts. Among the B vitamins, vitamins B2, B5, B6 and B12 are particularly preferable from the viewpoint of being blended in eye drops.

ビタミンＢ２としてはリボフラビン、リン酸リボフラビン、酪酸リボフラビン、酢酸リボフラビン、フラビンアデニンジヌクレオチド、フラビンモノヌクレオチド、又は薬学的に許容されるそれらの塩等が使用されうる。塩としては、ナトリウム塩、カリウム塩等が挙げられる。点眼薬として配合される観点からフラビンアデニンジヌクレイオチドナトリウムが好ましい。ビタミンＢ２は、酸化還元に直接関与し、点眼薬として使用されると角膜・結膜細胞の酵素呼吸代謝を促進し、角膜・結膜の保護作用を有する。またビタミンＢ２は、ビタミンＢ２欠乏または代謝障害が関与すると推定される角膜炎に対して治療のために点眼薬に配合されうる。 As vitamin B2, riboflavin, riboflavin phosphate, riboflavin butyrate, riboflavin acetate, flavin adenine dinucleotide, flavin mononucleotide, pharmaceutically acceptable salts thereof and the like can be used. Examples of the salt include sodium salts and potassium salts. Flavin adenine din-wook clay otido sodium is preferable from the viewpoint of being formulated as an eye drop. Vitamin B2 is directly involved in oxidative reduction, and when used as an eye drop, promotes enzymatic respiratory metabolism of corneal and conjunctival cells, and has a protective effect on the cornea and conjunctiva. Vitamin B2 can also be added to eye drops for the treatment of keratitis presumed to be associated with vitamin B2 deficiency or metabolic disorders.

ビタミンＢ５としてはパンテノール、パントテン酸又はそれらの誘導体又はそれらの塩が使用されうる。一例として、パンテノール、パントテン酸の他に、誘導体又はそれらの塩として、パンテチン、パンテテイン、パントテニールアルコール、パントテニールエチルエーテル、パンテテインパントテニールアルコール、パントテン酸カルシウム、パントテン酸ナトリウム等が挙げられる。点眼薬として使用される観点から、ビタミンＢ５としてはパンテノール、パントテン酸カルシウム、パントテン酸ナトリウムが好ましい。 As vitamin B5, panthenol, pantothenic acid or derivatives thereof or salts thereof can be used. As an example, in addition to panthenol and pantothenic acid, as derivatives or salts thereof, pantetheine, pantetheine, pantotheneal alcohol, pantotheneyl ethyl ether, pantetheine pantothenic acid alcohol, calcium pantothenate, sodium pantothenate and the like can be mentioned. From the viewpoint of being used as eye drops, panthenol, calcium pantothenate, and sodium pantothenate are preferable as vitamin B5.

ビタミンＢ６としては、ピリドキサール、ピリドキサミン、ピリドキシン又はそれらの医薬として許容される塩が使用されうる。点眼薬として使用される観点から、ピリドキシン塩酸塩が好ましい。ビタミンＢ６は、生体内でアミノ酸脱炭酸酵素及びアミノ基転移酵素の補酵素として、タンパク質の代謝に関わっており、眼精疲労の抑制のために点眼薬に配合されうる。 As vitamin B6, pyridoxal, pyridoxamine, pyridoxine or pharmaceutically acceptable salts thereof can be used. From the viewpoint of being used as eye drops, pyridoxine hydrochloride is preferable. Vitamin B6 is involved in protein metabolism as a coenzyme of amino acid decarboxylase and amino group transfer enzyme in vivo, and can be added to eye drops to suppress eye fatigue.

ビタミンＢ１２はコリン環にコバルトが配位した構造を有する化合物であり、具体的には、シアノコバラミン、メコバラミン（メチルコバラミン）、ヒドロキソコバラミン、アデノシルコバラミン、塩酸ヒドロキソコバラミン、酢酸ヒドロキソコバラミン等が挙げられる。ビタミンＢ１２は疲れ目や眼精疲労の改善等の薬理作用のために点眼薬に配合されうる。 Vitamin B12 is a compound having a structure in which cobalt is coordinated to the choline ring, and specific examples thereof include cyanocobalamin, mecobalamin (methylcobalamin), hydroxocobalamin, adenosylcobalamin, hydroxocobalamin hydrochloride, and hydroxocobalamin acetate. Vitamin B12 can be added to eye drops for pharmacological actions such as improvement of tired eyes and eyestrain.

ビタミンＥ類としては、トコフェロール、トコトリエノール、トコフェルソラン、又はそれらの誘導体が使用されうる。トコフェロール、トコトリエノールは、α－、β－、γ－、δ－のいずれであってもよく、また、ｄ体、ｄｌ体のいずれであってもよい。点眼薬として使用される観点から、一例として酢酸ｄ－α－トコフェロールが挙げられる。 As vitamin Es, tocopherols, tocotrienols, tocofersolan, or derivatives thereof can be used. The tocopherol and tocotrienol may be any of α-, β-, γ-, and δ-, and may be any of d-form and dl-form. From the viewpoint of being used as eye drops, d-α-tocopherol acetate is an example.

ビタミンＣとしては、アスコルビン酸又はその塩が挙げられる。ビタミンＤ類としては、ビタミンＤ２（エルゴステロール、エルゴカルシフェロール）、Ｄ３（７－デヒドロコレステロール）、プレビタミンＤ３（コレカルシフェロール、２５－ヒドロキシコレカルシフェロール、カルシトリオール（１，２５－ジヒドロキシコレカルシフェロール）、カルシトロン酸）、ビタミンＤ４（ジヒドロエルゴカルシフェロール）、ビタミンＤ５（ジヒドロタキステロール・カルシポトリオール・タカルシトール・パリカルシトール）等が挙げられる。ビタミンＫ類としては、フィロキノン（Ｋ１）、メナキノン（Ｋ２）、メナジオン（Ｋ３）が挙げられる。 Vitamin C includes ascorbic acid or a salt thereof. Vitamin Ds include vitamin D2 (ergosterol, ergocarciferol), D3 (7-dehydrocholesterol), previtamin D3 (cholecalciferol, 25-hydroxycholecalciferol, calcitriol (1,25-dihydroxycholecalci)). Ferrol), calcitronic acid), vitamin D4 (dihydroergocalciferol), vitamin D5 (dihydrotaxterol, calcipotriol, tacalcitol, paricalcitol) and the like. Examples of vitamin Ks include phylloquinone (K1), menaquinone (K2), and menadione (K3).

充血除去剤としては、エピネフリン、エフェドリン、テトラヒドロゾリン、ナファゾリン、フェニレフリン、メチルエフェドリン、又はそれらの塩が使用されうる。 As the decongestant, epinephrine, ephedrine, tetrahydrozoline, naphazoline, phenylephrine, methylephedrine, or salts thereof may be used.

ピント調節機能改善剤としては、メチル硫酸ネオスチグミンが使用されうる。 As the focus adjusting function improving agent, neostigmine methylsulfate can be used.

消炎・収れん剤としては、ε－アミノカプロン酸、アラントイン、ベルベリン又はその塩、アズレンスルホン酸又はその塩、グリチルリチン酸又はその塩、硫酸亜鉛、乳酸亜鉛、塩化リゾチームが使用されうる。 As the anti-inflammatory / astringent agent, ε-aminocaproic acid, allantin, velverine or a salt thereof, azulene sulfonic acid or a salt thereof, glycyrrhizinic acid or a salt thereof, zinc sulfate, zinc lactate, and lysoteam chloride can be used.

抗ヒスタミン剤としては、塩酸ジフェンヒドラミン、マレイン酸クロルフェニラミンが使用されうる。 As the antihistamine, diphenhydramine hydrochloride and chlorpheniramine maleate can be used.

保水・栄養成分としては、アミノ酸類又はその塩、コンドロイチン硫酸エステルナトリウムが使用されうる。本発明においてアミノ酸類は、安定性の向上及び結膜組織移行性の向上を目的として眼科用液体製剤に配合されるが、保水・栄養成分として同一又は異なるアミノ酸類を配合することもできる。アミノ酸類又はその塩としては、アミノ酸類とは、アミノ酸以外に、アミノ酸のカルボキシル基の代わりに硫酸基を有する物質、例えばタウリンにも関する。アミノ酸としては、一例として、グリシン、アラニン、メチオニン、バリン、トレオニン、グルタミン、グルタミン酸、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、フェニルアラニン、トリプトファン、アルギニン、プロリン、チロシン、セリンが挙げられる。アミノ酸としては、好ましくはアスパラギン酸、メチオニン、グリシンが挙げられる。グリシンを除くアミノ酸は、Ｌ体のアミノ酸であってもよいし、Ｄ体のアミノ酸であってもよいし、ＤＬ体のアミノ酸であってもよい。 As the water retention / nutrition component, amino acids or salts thereof and sodium chondroitin sulfate can be used. In the present invention, amino acids are blended in an ophthalmic liquid preparation for the purpose of improving stability and conjunctival tissue transferability, but the same or different amino acids may be blended as water retention / nutritional components. As amino acids or salts thereof, amino acids are not only amino acids but also substances having a sulfate group instead of the carboxyl group of the amino acid, for example, taurine. Examples of amino acids include glycine, alanine, methionine, valine, threonine, glutamine, glutamic acid, asparagine, aspartic acid, cysteine, histidine, isoleucine, leucine, lysine, phenylalanine, tryptophan, arginine, proline, tyrosine and serine. .. Amino acids preferably include aspartic acid, methionine and glycine. The amino acids other than glycine may be L-form amino acids, D-form amino acids, or DL-form amino acids.

サルファ剤としては、スルファメトキサゾール、スルファメトキサゾールナトリウム、スルフイソキサゾール、スルフイソミジンナトリウムが使用されうる。 As the sulfa agent, sulfamethoxazole, sulfamethoxazole sodium, sulfisoxazole, and sulfisomidin sodium can be used.

防腐剤としては、パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸エチル、パラオキシ安息香酸プロピル、パラオキシ安息香酸ブチル、硫酸オキシキノリン、ベンザルコニウム塩化物、クロロブタノール、亜塩素酸ナトリウム、ベンゾドデシニウム臭化物、クロルヘキシジングルコン酸塩、ソルビン酸塩、デヒドロ酢酸ナトリウム、安息香酸塩、ベンジルアルコール、アルキルポリアミノエチルグリシン塩酸塩、ポリヘキサエチレンビグアニド、ホウ酸、ホウ砂などが使用されうる。 Preservatives include methyl paraoxybenzoate, ethyl paraoxybenzoate, propyl paraoxybenzoate, butyl paraoxybenzoate, oxyquinoline sulfate, benzalconium chloride, chlorobutanol, sodium chlorite, benzododecinium bromide, chlorhexidine. Gluconate, sorbate, sodium dehydroacetate, benzoate, benzyl alcohol, alkylpolyaminoethylglycine hydrochloride, polyhexaethylenebiguanide, boric acid, boarite and the like can be used.

ｐＨ調整剤としては、クエン酸緩衝剤、酢酸緩衝剤、炭酸緩衝剤、ホウ酸緩衝剤、リン酸緩衝剤などの緩衝剤とともに、例えば、塩酸、酢酸、ホウ酸、炭酸、硫酸、リン酸、クエン酸、酒石酸などの酸や、水酸化ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸ナトリウム、トリエタノールアミン、モノエタノールアミンなどの塩基が使用されうる。 Examples of the pH adjusting agent include a citrate buffer, an acetate buffer, a carbon dioxide buffer, a borate buffer, a phosphate buffer, and other buffers, as well as hydrochloric acid, acetic acid, boric acid, carbonic acid, sulfuric acid, and phosphoric acid. Acids such as citric acid and tartrate, and bases such as sodium hydroxide, sodium hydrogencarbonate, sodium carbonate, triethanolamine and monoethanolamine can be used.

等張化剤としては、糖類や塩類が挙げられ、塩類としては、亜硫酸水素ナトリウム、亜硫酸ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、塩化ナトリウム、塩化マグネシウム、酢酸カリウム、酢酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、硫酸マグネシウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸二水素カリウムなどが用いられうる。糖類としては、任意の単糖類又は多糖類を使用することができ、一例としてグルコース、シクロデキストリン、キシリトール、ソルビトール、マンニトール等を使用することができる。 Examples of the tonicity agent include sugars and salts, and examples of salts include sodium hydrogen sulfite, sodium sulfite, potassium chloride, calcium chloride, sodium chloride, magnesium chloride, potassium acetate, sodium acetate, sodium hydrogen carbonate, sodium carbonate, and the like. Sodium thiosulfate, magnesium sulfate, disodium hydrogen phosphate, sodium dihydrogen phosphate, potassium dihydrogen phosphate and the like can be used. As the saccharide, any monosaccharide or polysaccharide can be used, and as an example, glucose, cyclodextrin, xylitol, sorbitol, mannitol and the like can be used.

増粘剤としては、コンドロイチン硫酸ナトリウム、ポリビニルアルコール、カルボキシビニルポリマー、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、アルギン酸、ヒアルロン酸、ポリビニルピロリドンなど又はそれらの塩が使用されうる。 As the thickener, sodium chondroitin sulfate, polyvinyl alcohol, carboxyvinyl polymer, hydroxyethyl cellulose, hydroxypropylmethyl cellulose, methyl cellulose, alginic acid, hyaluronic acid, polyvinylpyrrolidone and the like or salts thereof may be used.

溶解補助剤としては、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、チロキサポール、プルロニック等の非イオン性界面活性剤；グリセリン、マクロゴール等の多価アルコール等が使用されうる。 As the solubilizing agent, nonionic surfactants such as polyoxyethylene sorbitan monooleate, polyoxyethylene hydrogenated castor oil, tyroxapol and pluronic; polyhydric alcohols such as glycerin and macrogol can be used.

安定化剤としては、例えば、ポリビニルピロリドン、亜硫酸塩、モノエタノールアミン、グリセリン、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、シクロデキストリン、デキストラン、アスコルビン酸、エデト酸塩、タウリン、トコフェロール等が使用されうる。 As the stabilizer, for example, polyvinylpyrrolidone, sulfite, monoethanolamine, glycerin, propylene glycol, polyethylene glycol, cyclodextrin, dextran, ascorbic acid, edetate, taurine, tocopherol and the like can be used.

界面活性剤としては、例えば、チロキサポール、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンブロックコポリマー、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、オクトキシノール等の非イオン性界面活性剤；アルキルジアミノエチルグリシン、ラウリルジメチルアミノ酢酸ベタイン等の両性界面活性剤；アルキル硫酸塩、Ｎ－アシルタウリン塩、ポリオキシエチレンアルキルエーテルリン酸塩、ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸塩等の陰イオン界面活性剤；アルキルピリジニウム塩、アルキルアミン塩等の陽イオン界面活性剤等が使用されうる。 Examples of the surfactant include nonionic surfactants such as tyroxapol, polyoxyethylene hydrogenated castor oil, polyoxyethylene polyoxypropylene block copolymer, polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester, and octoxinol; alkyldiaminoethylglycine, Amphoteric surfactants such as lauryldimethylaminoacetate betaine; anionic surfactants such as alkyl sulfates, N-acyltaurine salts, polyoxyethylene alkyl ether phosphates, polyoxyethylene alkyl ether sulfates; alkylpyridinium salts, Cationic surfactants such as alkylamine salts can be used.

本明細書において言及される全ての文献はその全体が引用により本明細書に取り込まれる。 All references referred to herein are incorporated herein by reference in their entirety.

以下に説明する本発明の実施例は例示のみを目的とし、本発明の技術的範囲を限定するものではない。本発明の技術的範囲は特許請求の範囲の記載によってのみ限定される。本発明の趣旨を逸脱しないことを条件として、本発明の変更、例えば、本発明の構成要件の追加、削除及び置換を行うことができる。 The embodiments of the present invention described below are for purposes of illustration only and do not limit the technical scope of the present invention. The technical scope of the invention is limited only by the description of the claims. Modifications of the present invention, for example, addition, deletion and replacement of the constituent elements of the present invention may be made on condition that the gist of the present invention is not deviated.

［試験例１］細胞傷害性試験
１．試験点眼液の調製
精製水にｌ－メントール（鈴木薄荷社製）を添加して攪拌し、溶解を確認したのち、ホウ酸（ＢＯＲＡＸ社製）及びブリモニジン酒石酸塩（ＨＡＮＧＺＨＯＵ ＤＥＬＩ ＣＨＥＭＩＣＡＬ社製）を加えた。次いで、ｐＨ調整剤（１ｍｏｌ／Ｌ 塩酸又は０．１Ｎ ＮａＯＨ）によりｐＨを調製して塩化ナトリウム（富田製薬社製）を添加し、精製水で１００ｍｌにメスアップすることで、表１の比較例１～３及び実施例１の試験点眼液を得た。処方に応じてｌ－メントール、ブリモニジン酒石酸塩は適宜添加された。なお、表中の数値は、ｐＨを除きｗ／ｖ％である。[Test Example 1]Cytotoxicity test 1. Preparation of test ophthalmic solution Add l-menthol (manufactured by Suzuki Usagi Co., Ltd.) to purified water, stir, and confirm the dissolution, then add boric acid (manufactured by BORAX) and brimonidine tartrate (manufactured by HANGZHOU DELI CHEMICAL). rice field. Next, the pH was adjusted with a pH adjuster (1 mol / L hydrochloric acid or 0.1 N NaOH), sodium chloride (manufactured by Tomita Pharmaceutical Co., Ltd.) was added, and the pH was increased to 100 ml with purified water. The test ophthalmic solutions of Nos. 1 to 3 and Example 1 were obtained. Depending on the prescription, l-menthol and brimonidine tartrate were added as appropriate. The numerical values in the table are w / v% excluding pH.

２．細胞傷害性試験
９６ウェルプレート（Ｆａｌｃｏｎ）に、１．５×１０⁴個の不死化ヒト角膜上皮細胞（ＨＣＥ－ｔ）を増殖用細胞培養培地（血清、上皮成長因子、抗生物質、及びインスリンを添加したＤＭＥＭ／Ｆ１２）１００μＬと共に播種し、３７℃５％ＣＯ₂インキュベーターで１６時間以上培養して定着させた。
顕微鏡でウェル内に十分な細胞が存在しウェルに定着していることを確認し、ウェル内の増殖用細胞培養培地を吸引した。各ウェルをＤＰＢＳ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製）１００μＬずつで洗浄した。各ウェルに調製された試験点眼液１００μＬを添加した。３７℃５％ＣＯ₂のインキュベーター内で約３０分インキュベートした。インキュベート後、各ウェルの試験溶液を吸引し、ＤＰＢＳ１００μＬで洗浄後、ＤＭＥＭ／Ｆ１２（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製）９０％、Ｃｅｌｌ ｃｏｕｎｔｉｎｇ ｋｉｔ－８（同仁化学研究所社製）１０％の割合の溶液を１００μＬ添加し、３７℃５％ＣＯ₂のインキュベーターで約１時間以上インキュベートした。インキュベート後、マイクロプレートリーダーで４５０ｎｍの吸光度を測定した。細胞を含まないウェルでの試験をローコントロールとし、試験溶液の代わりに増殖用細胞培養培地を用いた試験をハイコントロールとした。結果を図１に示す。メントールを添加することで、細胞生存率が低下する一方、メントールとブリモニジンとを併用することで、細胞生存率の低下が抑制された。2. 2. Cell Injury Test In 96-well plate (Falcon), 1.5 × 10⁴ immortalized human corneal epithelial cells (HCE-t) were placed in a cell culture medium for proliferation (serum, epithelial growth factor, antibiotics, and insulin). The cells were seeded with 100 μL of the added DMEM / F12) and cultured in a 37 ° C. 5% CO₂ incubator for 16 hours or more to establish them.
It was confirmed by a microscope that sufficient cells were present in the wells and settled in the wells, and the cell culture medium for growth in the wells was aspirated. Each well was washed with 100 μL of DPBS (Thermo Fisher Scientific). 100 μL of the prepared test ophthalmic solution was added to each well. Incubated in an incubator at 37 ° C. 5% CO₂ for about 30 minutes. After incubation, the test solution in each well is aspirated, washed with 100 μL of DPBS, and then a solution having a ratio of DMEM / F12 (manufactured by Thermo Fisher Scientific) 90% and Cell counting kit-8 (manufactured by Dojin Chemical Research Institute) 10%. 100 μL was added and incubated in a 37 ° C. 5% CO₂ incubator for about 1 hour or longer. After incubation, the absorbance at 450 nm was measured with a microplate reader. The test in wells containing no cells was set as low control, and the test using a cell culture medium for growth instead of the test solution was set as high control. The results are shown in FIG. The addition of menthol reduced the cell viability, while the combined use of menthol and brimonidine suppressed the decrease in cell viability.

［試験例２］メントール濃度を変化させた場合のブリモニジンによる細胞傷害性の低減効果
１．試験点眼液の調製
精製水にｌ－メントール（鈴木薄荷社製）及びポリソルベート８０（日油社製）を添加して攪拌し、溶解を確認したのち、ホウ酸（ＢＯＲＡＸ社製）及びブリモニジン酒石酸塩（ＨＡＮＧＺＨＯＵ ＤＥＬＩ ＣＨＥＭＩＣＡＬ社製）を加えた。次いで、ｐＨ調整剤（１ｍｏｌ／Ｌ 塩酸又は０．１Ｎ ＮａＯＨ）によりｐＨを調製して塩化ナトリウム（富田製薬社製）を添加し、精製水で１００ｍｌにメスアップすることで、比較例２’～６’及び実施例２～６の試験点眼液を得た。処方に応じてｌ－メントール、ブリモニジン酒石酸塩は適宜添加された。なお、表中の数値は、ｐＨを除きｗ／ｖ％である。[Test Example 2] Effect of reducing cytotoxicity by brimonidine when the menthol concentration is changed 1. Preparation of test ophthalmic solution Add l-menthol (manufactured by Suzuki Usagi Co., Ltd.) and polysorbate 80 (manufactured by Nichiyu Co., Ltd.) to purified water, stir, and confirm the dissolution, then boric acid (manufactured by BORAX) and brimonidine tartrate. (Manufactured by HANGZHOU DELI CHEMICAL) was added. Next, the pH was adjusted with a pH adjuster (1 mol / L hydrochloric acid or 0.1 N NaOH), sodium chloride (manufactured by Tomita Pharmaceutical Co., Ltd.) was added, and the pH was increased to 100 ml with purified water. The test ophthalmic solutions of 6'and Examples 2 to 6 were obtained. Depending on the prescription, l-menthol and brimonidine tartrate were added as appropriate. The numerical values in the table are w / v% excluding pH.

２．細胞傷害性試験
９６ウェルプレート（販売元Ｆａｌｃｏｎ）に、１．５×１０⁴個の不死化ヒト角膜上皮細胞（ＨＣＥ－ｔ）を増殖用細胞培養培地（血清、上皮成長因子、抗生物質、及びインスリンを添加したＤＭＥＭ／Ｆ１２）１００μＬと共に播種し、３７℃５％ＣＯ₂インキュベーターで１６時間以上培養して定着させた。
顕微鏡でウェル内に十分な細胞が存在しウェルに定着していることを確認し、ウェル内の増殖細胞培養培地を吸引した。各ウェルをＤＰＢＳ１００μＬずつで洗浄した。各ウェルに調製された試験点眼液１００μＬを添加した。３７℃５％ＣＯ₂のインキュベーターで約３０分インキュベートした。インキュベート後、各ウェルの試験溶液を吸引し、ＤＰＢＳ１００μＬで洗浄後、ＤＭＥＭ／Ｆ１２ ９０％、Ｃｅｌｌ ｃｏｕｎｔｉｎｇ ｋｉｔ－８ １０％の割合の溶液を１００μＬ添加し、３７℃５％ＣＯ₂のインキュベーターで約１時間以上インキュベートした。インキュベート後、マイクロプレートリーダーで４５０ｎｍの吸光度を測定した。細胞を含まないウェルでの試験をローコントロールとし、試験溶液の代わりに増殖細胞培養培地を用いた試験をハイコントロールとした。各試験点眼液の吸光度（ＡＢＳ）とローコントロール及びハイコントロールの吸光度（ＡＢＳ）から、下記の式に基づき細胞死滅抑制率（％）を求め、図２に示した。０．０２５ｗ／ｖ％ブリモニジンによるメントールの細胞傷害性抑制効果は、メントール濃度が０．００２ｗ／ｖ％～０．０３ｗ／ｖ％の範囲で見られ、なかでも０．０１ｗ／ｖ％時に最も効果が大きかった。

2. 2. Cell damage test In 96-well plates (distributor Falcon), 1.5 x 10⁴ immortalized human corneal epithelial cells (HCE-t) were placed in a cell culture medium for proliferation (serum, epithelial growth factor, antibiotics, and The cells were seeded with 100 μL of DMEM / F12) supplemented with insulin, and cultured and established in a 37 ° C. 5% CO₂ incubator for 16 hours or longer.
It was confirmed by a microscope that sufficient cells were present in the wells and settled in the wells, and the growth cell culture medium in the wells was aspirated. Each well was washed with 100 μL DPBS. 100 μL of the prepared test ophthalmic solution was added to each well. Incubated in an incubator at 37 ° C. and 5% CO₂ for about 30 minutes. After incubation, the test solution in each well is aspirated, washed with 100 μL of DPBS, 100 μL of a solution having a ratio of DMEM / F12 90% and Cell counting kit-8 10% is added, and about 1 in an incubator at 37 ° C. and 5% CO₂ . Incubated for more than an hour. After incubation, the absorbance at 450 nm was measured with a microplate reader. The test in the well containing no cells was set as low control, and the test using the growth cell culture medium instead of the test solution was set as high control. From the absorbance (ABS) of each test ophthalmic solution and the absorbance (ABS) of low control and high control, the cell death suppression rate (%) was obtained based on the following formula and is shown in FIG. The cytotoxic inhibitory effect of 0.025 w / v% brimonidine on menthol was observed in the range of 0.002 w / v% to 0.03 w / v% menthol concentration, and was most effective when the menthol concentration was 0.01 w / v%. Was big.

［試験例３］充血除去成分についての細胞傷害性低減効果
１．試験点眼液の調製
精製水にｌ－メントール（鈴木薄荷社製）及びポリソルベート８０（販売元日油社製）を添加して攪拌し、溶解を確認したのち、ホウ酸（ＢＯＲＡＸ社製）及び、充血除去成分としてブリモニジン酒石酸塩（ＨＡＮＧＺＨＯＵ ＤＥＬＩ ＣＨＥＭＩＣＡＬ社製）、テトラヒドロゾリン塩酸塩（販売元東京化成工業社製）、又はナファゾリン塩酸塩（販売元東京化成工業社製）を加えた。次いでｐＨ調整剤（１ｍｏｌ／Ｌ 塩酸又は０．１Ｎ ＮａＯＨ）によりｐＨを調製して塩化ナトリウム（富田製薬社製）を添加し、精製水で１００ｍｌにメスアップすることで、表３の比較例６’、比較例７～８、及び実施例６の試験点眼液を得た。処方に応じて、ブリモニジン酒石酸塩、テトラヒドロゾリン塩酸塩、又はナファゾリン塩酸塩は適宜添加された。なお、表中の数値は、ｐＨを除きｗ／ｖ％である。

[Test Example 3] Cytotoxicity reducing effect ofdecongestant component 1. Preparation of test ophthalmic solution Add l-menthol (manufactured by Suzuki Usagi Co., Ltd.) and polysorbate 80 (manufactured by Nichiyu Co., Ltd.) to purified water, stir, and confirm the dissolution, then boric acid (manufactured by BORAX) and Brimonidine tartrate (manufactured by HANGZHOU DELI CHEMICAL), tetrahydrozoline hydrochloride (manufactured by Tokyo Kasei Kogyo Co., Ltd.), or naphazoline hydrochloride (manufactured by Tokyo Kasei Kogyo Co., Ltd.) was added as a decongestant component. Next, the pH was adjusted with a pH adjuster (1 mol / L hydrochloric acid or 0.1 N NaOH), sodium chloride (manufactured by Tomita Pharmaceutical Co., Ltd.) was added, and the pH was increased to 100 ml with purified water. ', Test ophthalmic solutions of Comparative Examples 7 to 8 and Example 6 were obtained. Depending on the formulation, brimonidine tartrate, tetrahydrozoline hydrochloride, or naphazoline hydrochloride was added as appropriate. The numerical values in the table are w / v% excluding pH.

２．細胞傷害性試験
９６ウェルプレート（販売元Ｆａｌｃｏｎ）に、１．５×１０⁴個の不死化ヒト角膜上皮細胞（ＨＣＥ－ｔ）を増殖用細胞培養培地（血清、上皮成長因子、抗生物質、及びインスリンを添加したＤＭＥＭ／Ｆ１２）１００μＬと共に播種し、３７℃５％ＣＯ₂インキュベーターで１６時間以上培養して定着させた。
顕微鏡でウェル内に十分な細胞が存在しウェルに定着していることを確認し、ウェル内の細胞培養培地を吸引した。各ウェルをＤＰＢＳ１００μＬずつで洗浄した。各ウェルに調製された試験点眼液１００μＬを添加した。３７℃５％ＣＯ₂のインキュベーターで約６０分インキュベートした。インキュベート後、各ウェルの試験溶液を吸引し、ＤＰＢＳ１００μＬで洗浄後、ＤＭＥＭ／Ｆ１２ ９０％、Ｃｅｌｌ ｃｏｕｎｔｉｎｇ ｋｉｔ－８ １０％の割合の溶液を１００μＬ添加し、３７℃５％ＣＯ₂のインキュベーターで約１時間以上インキュベートした。インキュベート後、マイクロプレートリーダーで４５０ｎｍの吸光度を測定した。細胞を含まないウェルでの試験をローコントロールとし、試験溶液の代わりに細胞培養培地を用いた試験をハイコントロールとした。結果を図３に示す。ブリモニジン酒石酸塩と同じ充血除去作用があるテトラヒドロゾリン及びナファゾリンではｌ－メントールの細胞傷害性が低減されず、ｌ－メントールの細胞傷害性を低減する効果は、充血除去成分のなかでもブリモニジン酒石酸塩に特徴的な効果であることがわかった。2. 2. Cell damage test In 96-well plates (distributor Falcon), 1.5 x 10⁴ immortalized human corneal epithelial cells (HCE-t) were placed in a cell culture medium for proliferation (serum, epithelial growth factor, antibiotics, and The cells were seeded with 100 μL of DMEM / F12) supplemented with insulin, and cultured and established in a 37 ° C. 5% CO₂ incubator for 16 hours or longer.
It was confirmed by a microscope that sufficient cells were present in the wells and settled in the wells, and the cell culture medium in the wells was aspirated. Each well was washed with 100 μL DPBS. 100 μL of the prepared test ophthalmic solution was added to each well. Incubated in an incubator at 37 ° C. and 5% CO₂ for about 60 minutes. After incubation, the test solution in each well is aspirated, washed with 100 μL of DPBS, 100 μL of a solution having a ratio of DMEM / F12 90% and Cell counting kit-8 10% is added, and about 1 in an incubator at 37 ° C. and 5% CO₂ . Incubated for more than an hour. After incubation, the absorbance at 450 nm was measured with a microplate reader. The test in the well containing no cells was set as low control, and the test using cell culture medium instead of the test solution was set as high control. The results are shown in FIG. Tetrahydrozoline and naphazoline, which have the same decongestant effect as brimonidine tartrate, do not reduce the cytotoxicity of l-menthol, and the effect of reducing the cytotoxicity of l-menthol is characteristic of brimonidine tartrate among the decongestant components. It turned out to be a positive effect.

［試験例４］官能評価試験
１．試験点眼液の調製
精製水にｌ－メントール（鈴木薄荷社製）を添加して攪拌し、溶解を確認したのち、ホウ酸（ＢＯＲＡＸ社製）、塩化ナトリウム（富田製薬社製）、ベンザルコニウム塩化物（岡見化学工業社製）及びブリモニジン酒石酸塩（ＨＡＮＧＺＨＯＵ ＤＥＬＩ ＣＨＥＭＩＣＡＬ社製）を加え、ｐＨ調整剤（１ｍｏｌ／Ｌ 塩酸又は０．１Ｎ ＮａＯＨ）によりｐＨを調製し、精製水で１００ｍｌにメスアップすることで、表４の実施例７（Ｂ－０６とラベル）及び比較例９（Ｂ－０５とラベル）の試験点眼液を調製した。調製された試験点眼液を０．２２μｍのフィルターに通してろ過し、滅菌済みの点眼容器に充てんして試験に供した。なお、調製後及び使用感試験実施期間中にｌ－メントール及びブリモニジン酒石酸塩の含量分析を行い、所定量含有されていることを確認した。

[Test Example 4]Sensory evaluation test 1. Preparation of test ophthalmic solution Add l-menthol (manufactured by Suzuki Usagi Co., Ltd.) to purified water, stir, and confirm the dissolution, then boric acid (manufactured by BORAX), sodium chloride (manufactured by Tomita Pharmaceutical Co., Ltd.), benzalconium. Chloride (manufactured by Okami Chemical Industry Co., Ltd.) and brimonidine tartrate (manufactured by HANGZHOU DELI CHEMICAL) are added, the pH is adjusted with a pH adjuster (1 mol / L hydrochloric acid or 0.1N NaOH), and the pH is adjusted to 100 ml with purified water. By doing so, the test ophthalmic solutions of Example 7 (labeled as B-06) and Comparative Example 9 (labeled as B-05) in Table 4 were prepared. The prepared test ophthalmic solution was filtered through a 0.22 μm filter, filled in a sterilized eye drop container, and subjected to the test. The contents of l-menthol and brimonidine tartrate were analyzed after preparation and during the usability test, and it was confirmed that they were contained in a predetermined amount.

事前に眼に疾患がなく、臨床試験の倫理審査委員会（外部機関）で承認された同意説明文書に対して同意を得た被験者４名（被験者Ｎｏ．１～４）が点眼試験に参加した。被験者は、各検体を点眼したのち、表５の基準に基づき、それぞれの検体についてアンケートに回答した。実施した試験方法の詳細を下記に示した。
１）コンタクトレンズ装用者は点眼する１０分以上前にあらかじめコンタクトレンズを外した。
２）被験者は容器にＢ－０５及びＢ－０６とラベリングされた試験点眼液を受け取った。
３）左眼にＢ－０５を１回１滴点眼し、アンケートの表５ １）「清涼感評価基準」の項に回答した。
４）右眼にＢ－０６を１回１滴点眼し、３）と同様に、アンケートの表５ １）「清涼感評価基準」の項に回答した。
５）Ｂ－０５及びＢ－０６の「清涼感の強さ」及び「清涼感の持続」を比較する目的で、アンケートの表５ ２）「Ｂ－０５及びＢ－０６の清涼感比較」及び３）「Ｂ－０５及びＢ－０６の「清涼感の持続の比較」の項に回答した。
６）このアンケートを提出するまで、点眼液の処方は被験者に開示しなかった。

Four subjects (subjects Nos. 1 to 4) who had no eye disease in advance and obtained consent for the consent explanation document approved by the clinical trial ethics review committee (external organization) participated in the eye drop test. .. After instilling each sample, the subjects answered the questionnaire for each sample based on the criteria in Table 5. The details of the test method carried out are shown below.
1) Contact lens wearers removed contact lenses in advance at least 10 minutes before instillation.
2) The subject received the test ophthalmic solution labeled B-05 and B-06 in the container.
3) One drop of B-05 was instilled into the left eye at a time, and the questionnaire was answered in Table 5 1) "Criteria for evaluating refreshing sensation".
4) One drop of B-06 was instilled into the right eye at a time, and in the same manner as in 3), the questionnaire table 5 1) "Refreshing feeling evaluation criteria" was answered.
5) For the purpose of comparing the "strength of refreshing feeling" and "sustaining of refreshing feeling" of B-05 and B-06, Table 5 2) "Comparison of refreshing feeling of B-05 and B-06" and 3) Answered the section "Comparison of persistence of refreshing feeling" of B-05 and B-06.
6) The prescription of eye drops was not disclosed to the subjects until this questionnaire was submitted.

２．官能試験の結果
２製剤の使用感評価（被験者の平均スコア）結果を表６に示し、平均点の比較を図４に示した。また、使用感の比較結果については表７に示した。

2. 2. Results of sensory test Table 6 shows the results of usability evaluation (average score of subjects) of the two formulations, and FIG. 4 shows a comparison of the average scores. The comparison results of usability are shown in Table 7.

Ｂ－０６（実施例７）はＢ－０５（比較例９）に比べて、清涼感の平均評価点数が高く、使用感の比較において清涼感を強く感じ、且つその清涼感が持続することが確認できた。
以上のことから、ｌ－メントール含有眼科用剤に０．０２５％ブリモニジニン酒石酸塩を配合することによって清涼感を増幅し、また、その清涼感を持続させることができることがわかった。Compared with B-05 (Comparative Example 9), B-06 (Example 7) has a higher average evaluation score of refreshing feeling, and in comparison of usability, the refreshing feeling is strongly felt and the refreshing feeling is maintained. It could be confirmed.
From the above, it was found that the refreshing sensation can be amplified and maintained by adding 0.025% brimonidinin tartrate to the l-menthol-containing ophthalmic preparation.

［試験例５］清涼化剤による細胞毒性試験
１．試験点眼液の調製
精製水に清涼化剤（ベルガモット油（富士フイルム和光純薬）、ゲラニオール（富士フイルム和光純薬）、ボルネオール（富士フイルム和光純薬））及び及びポリソルベート８０（日油社製）を添加して攪拌し、溶解を確認したのち、ホウ酸（小堺製薬社製）及びブリモニジン酒石酸塩（ＨＡＮＧＺＨＯＵ ＤＥＬＩ ＣＨＥＭＩＣＡＬ社製）を加えた。次いで、ｐＨ調整剤（１ｍｏｌ／Ｌ 塩酸又は０．１Ｎ ＮａＯＨ）によりｐＨを６．５に調整して塩化ナトリウム（富田製薬社製）を添加し、精製水で１００ｍｌにメスアップすることで、表８の実施例８～１０及び比較例１０～１４の試験点眼液を得た。なお、表中の数値は、ｗ／ｖ％である。

[Test Example 5] Cytotoxicity test using acooling agent 1. Preparation of test ophthalmic solution In purified water, a refreshing agent (Bergamot oil (Fujifilm Wako Pure Chemical Industries, Ltd.), Geraniol (Fujifilm Wako Pure Chemical Industries, Ltd.), Borneol (Fujifilm Wako Pure Chemical Industries, Ltd.)) and Polysorbate 80 (manufactured by Nichiyu Co., Ltd.) Was added and stirred to confirm dissolution, and then boric acid (manufactured by Kosakai Pharmaceutical Co., Ltd.) and brimonidine tartrate (manufactured by HANGZHOU DELI CHEMICAL) were added. Next, the pH was adjusted to 6.5 with a pH adjuster (1 mol / L hydrochloric acid or 0.1 N NaOH), sodium chloride (manufactured by Tomita Pharmaceutical Co., Ltd.) was added, and the pH was adjusted to 100 ml with purified water. Test ophthalmic solutions of Examples 8 to 10 and Comparative Examples 10 to 14 of No. 8 were obtained. The numerical values in the table are w / v%.

２．細胞傷害性試験
９６ウェルプレート（Ｆａｌｃｏｎ）に、１．５×１０⁴個の不死化ヒト角膜上皮細胞（ＨＣＥ－ｔ）を増殖用細胞培養培地（血清、上皮成長因子、抗生物質、及びインスリンを添加したＤＭＥＭ／Ｆ１２（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製））１００μＬと共に播種し、３７℃５％ＣＯ₂インキュベーターで１６時間以上培養して定着させた。
顕微鏡でウェル内に十分な細胞が存在しウェルに定着していることを確認し、ウェル内の増殖用細胞培養培地を吸引した。各ウェルをＤＰＢＳ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製）１００μＬずつで洗浄した。各ウェルに調製された試験点眼液１００μＬを添加した。３７℃５％ＣＯ₂のインキュベーター内で約６０分インキュベートした。インキュベート後、各ウェルの試験溶液を吸引し、ＤＰＢＳ１００μＬで洗浄後、ＤＭＥＭ／Ｆ１２（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製）９０％、Ｃｅｌｌ ｃｏｕｎｔｉｎｇ ｋｉｔ－８（同仁化学研究所社製）１０％の割合の溶液を１００μＬ添加し、３７℃５％ＣＯ₂のインキュベーターで約１時間以上インキュベートした。インキュベート後、マイクロプレートリーダーで４５０ｎｍの吸光度を測定した（図５）。細胞を含まないウェルでの試験をローコントロールとし、試験溶液の代わりに増殖用細胞培養培地を用いた試験をハイコントロールとした。
下記の数式に基づいて、細胞死滅抑制率（％）を計算した：

細胞死滅抑制率（％）についての結果を図６に示す。2. 2. Cell Injury Test In 96-well plate (Falcon), 1.5 × 10⁴ immortalized human corneal epithelial cells (HCE-t) were placed in a cell culture medium for proliferation (serum, epithelial growth factor, antibiotics, and insulin). The cells were sown together with 100 μL of the added DMEM / F12 (manufactured by Thermo Epithelium Scientific), and cultured and established in a 37 ° C. 5% CO₂ incubator for 16 hours or more.
It was confirmed by a microscope that sufficient cells were present in the wells and settled in the wells, and the cell culture medium for growth in the wells was aspirated. Each well was washed with 100 μL of DPBS (Thermo Fisher Scientific). 100 μL of the prepared test ophthalmic solution was added to each well. Incubated in an incubator at 37 ° C. 5% CO₂ for about 60 minutes. After incubation, the test solution in each well is aspirated, washed with 100 μL of DPBS, and then a solution having a ratio of DMEM / F12 (manufactured by Thermo Fisher Scientific) 90% and Cell counting kit-8 (manufactured by Dojin Chemical Research Institute) 10%. 100 μL was added and incubated in a 37 ° C. 5% CO₂ incubator for about 1 hour or longer. After incubation, the absorbance at 450 nm was measured with a microplate reader (Fig. 5). The test in wells containing no cells was set as low control, and the test using a cell culture medium for growth instead of the test solution was set as high control.
The cell death suppression rate (%) was calculated based on the following formula:

The results for the cell death suppression rate (%) are shown in FIG.

試験例５の細胞傷害性試験により、清涼化剤であるベルガモット油、ボルネオール、及びゲラニオールが細胞傷害性を有しており、ブリモニジン酒石酸塩を併用することでその細胞傷害性が軽減することが示された。 The cytotoxicity test of Test Example 5 showed that the refreshing agents bergamot oil, borneol, and geraniol have cytotoxicity, and that the combined use of brimonidine tartrate reduces the cytotoxicity. Was done.

製剤例
本発明のブリモニジン及び／又はその塩と、清涼化剤とを含有する医薬は、例えば、次のような処方によって製造することができる。製剤例を挙げて本発明の薬剤をさらに具体的に説明するが、本発明はこれらの製剤例にのみ限定されるものではない。Pharmaceutical example The pharmaceutical product containing brimonidine and / or a salt thereof of the present invention and a refreshing agent can be produced, for example, by the following formulation. The agent of the present invention will be described in more detail with reference to pharmaceutical examples, but the present invention is not limited to these pharmaceutical examples.

１．目薬
１００ｍＬ中
（１）ブリモニジン酒石酸塩 ０．０２５ｇ
（２）ハッカ油 ０．０１６ｇ
（３）塩化ナトリウム ０．８ｇ
（４）ホウ酸 ０．２ｇ
（５）ポリソルベート８０ ０．１５ｇ
（６）ｐＨ調整剤 適量
（７）滅菌精製水 適量
（１）～（６）を、（７）滅菌精製水に溶解して、ｐＨを６．５に調整し、点眼液を調製する。1. 1. In 100 mL of eye drops (1) Brimonidine tartrate 0.025 g
(2) Mentha oil 0.016g
(3) Sodium chloride 0.8 g
(4) Boric acid 0.2g
(5) Polysorbate 80 0.15 g
(6) pH adjuster Appropriate amount (7) Sterilized purified water Dissolve appropriate amounts (1) to (6) in (7) Sterilized purified water to adjust the pH to 6.5, and prepare an ophthalmic solution.

２．目薬
１００ｍＬ中
（１）ブリモニジン酒石酸塩 ０．０２５ｇ
（２）ユーカリ油 ０．００５ｇ
（３）塩化ナトリウム ０．８ｇ
（４）ホウ酸 ０．２ｇ
（５）ポリソルベート８０ ０．１５ｇ
（６）ｐＨ調整剤 適量
（７）滅菌精製水 適量
（１）～（６）を、（７）滅菌精製水に溶解して、ｐＨを６．５に調整し、点眼液を調製する。2. 2. In 100 mL of eye drops (1) Brimonidine tartrate 0.025 g
(2) Eucalyptus oil 0.005g
(3) Sodium chloride 0.8 g
(4) Boric acid 0.2g
(5) Polysorbate 80 0.15 g
(6) pH adjuster Appropriate amount (7) Sterilized purified water Dissolve appropriate amounts (1) to (6) in (7) Sterilized purified water to adjust the pH to 6.5, and prepare an ophthalmic solution.

３．目薬
１００ｍＬ中
（１）ブリモニジン酒石酸塩 ０．０２５ｇ
（２）カンフル ０．０１ｇ
（３）塩化ナトリウム ０．８ｇ
（４）ホウ酸 ０．２ｇ
（５）ポリソルベート８０ ０．１５ｇ
（６）ｐＨ調整剤 適量
（７）滅菌精製水 適量
（１）～（６）を、（７）滅菌精製水に溶解して、ｐＨを６．５に調整し、点眼液を調製する。3. 3. In 100 mL of eye drops (1) Brimonidine tartrate 0.025 g
(2) Camphor 0.01g
(3) Sodium chloride 0.8 g
(4) Boric acid 0.2g
(5) Polysorbate 80 0.15 g
(6) pH adjuster Appropriate amount (7) Sterilized purified water Dissolve appropriate amounts (1) to (6) in (7) Sterilized purified water to adjust the pH to 6.5, and prepare an ophthalmic solution.

Claims (8)

Translated fromJapanese

０．０１ｗ／ｖ％～０．０５ｗ／ｖ％のブリモニジン及び／又はその塩と、清涼化剤とを含有する眼科用液体製剤。 An ophthalmic liquid preparation containing 0.01 w / v% to 0.05 w / v% brimonidine and / or a salt thereof, and a refreshing agent. 前記清涼化剤が、メントール、ベルガモット油、ゲラニオール及びボルネオールからなる群から選ばれる、請求項１に記載の眼科用液体製剤。 The ophthalmic liquid preparation according to claim 1, wherein the refreshing agent is selected from the group consisting of menthol, bergamot oil, geraniol and borneol. 前記メントールが、ｌ－メントールである、請求項２に記載の眼科用液体製剤。 The liquid preparation for ophthalmology according to claim 2, wherein the menthol is l-menthol. 前記メントールが、０．００１％～０．０５％で配合される、請求項２又は３に記載の眼科用液体製剤。 The liquid preparation for ophthalmology according to claim 2 or 3, wherein the menthol is blended in an amount of 0.001% to 0.05%. 前記清涼化剤が、以下の：
０．００００２％～０．０２％のベルガモット油；
０．０００１％～０．１％のゲラニオール；及び
０．０００１％～５％のボルネオール
から選ばれる、請求項１又は２に記載の眼科用液体製剤。The refreshing agent is as follows:
0.00002% to 0.02% bergamot oil;
The ophthalmic liquid preparation according to claim 1 or 2, which is selected from 0.0001% to 0.1% geraniol; and 0.0001% to 5% borneol. ０．０１ｗ／ｖ％～０．０５ｗ／ｖ％のブリモニジン及び／又はその塩を含む、清涼化剤を含有する眼科用液体製剤についての清涼感増強剤。 A refreshing sensation enhancer for an ophthalmic liquid preparation containing a refreshing agent, which comprises 0.01 w / v% to 0.05 w / v% brimonidine and / or a salt thereof. 前記清涼化剤が、メントール、ベルガモット油、ゲラニオール、及びボルネオールからなる群から選ばれる、請求項６に記載の清涼感増強剤。 The refreshing sensation enhancer according to claim 6, wherein the refreshing agent is selected from the group consisting of menthol, bergamot oil, geraniol, and borneol. ０．０１ｗ／ｖ％～０．０５ｗ／ｖ％のブリモニジン及び／又はその塩を含む、清涼化剤を含有する眼科用液体製剤についての細胞傷害性低減剤。 A cytotoxic reducing agent for an ophthalmic liquid preparation containing a refreshing agent, which comprises 0.01 w / v% to 0.05 w / v% brimonidine and / or a salt thereof.

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