【０００１】[0001]
【発明の属する技術分野】本発明は、細胞保護剤などと
して有用な薬用人蔘若しくはそのエキス又は薬用人蔘成
分若しくはそれらの代謝産物に関する。より詳細には、
薬用人蔘もしくはそのエキス又は薬用人蔘成分もしくは
それらの代謝産物又はそれらの塩を含有してなる、アポ
トーシス又はアポトーシス様細胞死抑止用医薬組成物、
又は細胞死抑制遺伝子産物Ｂｃｌ−ｘＬ蛋白の発現を促
進させるための医薬組成物に関する。また、本発明は、
ジンセノサイドＲｂ１もしくはその代謝産物又はそれら
の塩を含有してなる細胞保護のための医薬組成物に関す
る。より詳細には、本発明は、ジンセノサイドＲｂ１も
しくはその代謝産物又はそれらの塩を含有してなる脳浮
腫、脳神経組織の浮腫、もしくは脊髄組織の浮腫を予
防、治療、処置するための医薬組成物、ジンセノサイド
Ｒｂ１もしくはその代謝産物又はそれらの塩を含有して
なる脊髄損傷に伴う褥創を予防、治療、処置するための
医薬組成物、ジンセノサイドＲｂ１もしくはその代謝産
物又はそれらの塩を含有してなる神経組織の細胞死抑止
遺伝子Ｂｃｌ−ｘＬ発現を促進させるための医薬組成
物、ジンセノサイドＲｂ１もしくはその代謝産物又はそ
れらの塩を含有してなるオリゴデンドロサイトの細胞死
抑制遺伝子産物Ｂｃｌ−ｘＬの発現を促進させるための
医薬組成物、ジンセノサイドＲｂ１もしくはその代謝産
物又はそれらの塩を含有してなるオリゴデンドロサイト
の保護剤、ジンセノサイドＲｂ１もしくはその代謝産物
又はそれらの塩を含有してなる心筋細胞の細胞死抑制遺
伝子産物Ｂｃｌ−ｘＬの発現を促進するための医薬組成
物、ジンセノサイドＲｂ１もしくはその代謝産物又はそ
れらの塩を含有してなる心筋細胞のアポトーシス又はア
ポトーシス様細胞死を抑止するための医薬組成物、に関
する。さらに、本発明は、薬用人蔘もしくはそのエキス
又は薬用人蔘成分もしくはそれらの代謝産物又はそれら
の塩を含有してなる静脈内投与用製剤、より詳細には、
低濃度、低用量の静脈内持続投与用製剤に関する。ま
た、本発明は、前記疾患や病変の予防、処置又は治療の
ための有効成分、又は脳細胞保護剤若しくは神経細胞保
護剤を探索するためのリード化合物としての薬用人蔘成
分又はその代謝産物の使用に関する。また、本発明は、
ジンセノサイドＲｂ１をリード化合物として作成できる
新規化学的誘導体、すなわち細胞保護剤として有用なジ
ヒドロジンセノサイドＲｂ１にも関する。さらに、ジヒ
ドロジンセノサイドＲｂ１もしくはその代謝産物又はそ
れらの塩を含有してなる、脳梗塞もしくは脳卒中の予
防、治療、処置のための医薬組成物もしくは神経細胞の
壊死（ネクローシス）、アポトーシス又はアポトーシス
様神経細胞死を抑止するための医薬組成物に関する。ま
た、ジヒドロジンセノサイドＲｂ１もしくはその代謝産
物又はそれらの塩を含有してなる静脈内投与用製剤であ
る医薬組成物、すなわち低濃度、低用量の静脈内持続投
与用製剤もしくは単回静脈内注入製剤である医薬組成物
に関する。TECHNICAL FIELD The present invention relates to a ginseng or an extract thereof, a ginseng component or a metabolite thereof useful as a cytoprotective agent or the like. More specifically,
A pharmaceutical composition for inhibiting apoptosis or apoptosis-like cell death, comprising a ginseng or an extract thereof, a ginseng component or a metabolite or a salt thereof,
Or a pharmaceutical composition for promoting the expression of a cell death-suppressing gene product Bcl-xL protein. Also, the present invention
The present invention relates to a pharmaceutical composition for cell protection comprising ginsenoside Rb1, a metabolite thereof, or a salt thereof. More specifically, the present invention relates to a pharmaceutical composition for preventing, treating and treating brain edema, cerebral nerve tissue edema or spinal cord tissue edema comprising ginsenoside Rb1 or a metabolite thereof or a salt thereof. the pressure sore accompanying spinal cord injury comprising ginsenoside Rb1, metabolites thereof or salts thereof prevention, treatment, pharmaceutical compositions for treating, containing ginsenoside Rb1, metabolites thereof or salts thereof cell death suppressing gene of the nervous tissue of Te Bcl-xL expression pharmaceutical composition for promoting cell death suppressing gene product of ginsenoside Rb1 or oligodendrocytes comprising the metabolites thereof or salts Bcl- the pharmaceutical compositions for promoting the expression of xL, ginsenoside Rb1, metabolites thereof or salts thereof containing A protective agent for oligodendrocytes comprising ginsenoside Rb1 or pharmaceutical composition to promote expression of a cell death-suppressing gene product Bcl-xL of its metabolites or myocardial cells comprising the salts thereof, the pharmaceutical composition for inhibiting ginsenoside Rb1 or apoptosis or apoptosis-like cell death of its metabolites or myocardial cells comprising the salts thereof, relates. Furthermore, the present invention provides a ginseng or ginseng or extract thereof or a ginseng component or a metabolite or a salt thereof for intravenous administration, more specifically,
The present invention relates to a low-concentration, low-dose preparation for continuous intravenous administration. Further, the present invention provides an active ingredient for preventing, treating or treating the above-mentioned disease or lesion, or a ginseng ingredient or a metabolite thereof as a lead compound for searching for a brain cell protective agent or a neuronal cell protective agent. About use. Also, the present invention
New chemical derivative that can create ginsenoside Rb1 as a lead compound, i.e. also relates to useful dihydro ginsenosides side Rb1 as cytoprotective agents. Furthermore, a pharmaceutical composition for preventing, treating, or treating cerebral infarction or stroke or a nerve cell necrosis (necrosis), apoptosis or an apoptotic-like nerve, comprising dihydroginsenoside Rb1 or a metabolite thereof or a salt thereof. The present invention relates to a pharmaceutical composition for inhibiting cell death. In addition, a pharmaceutical composition which is a preparation for intravenous administration comprising dihydroginsenoside Rb1 or a metabolite thereof or a salt thereof, that is, a low-concentration, low-dose preparation for intravenous continuous administration or a single intravenous injection preparation Or a pharmaceutical composition that is:
【０００２】[0002]
【従来の技術】脳卒中や神経変性疾患等の難治性神経疾
患においては、共通して脳細胞又は神経細胞が死に至
り、その結果非可逆的な高次神経機能障害がもたらされ
る。ひとたび、このような機能障害が生じると、その改
善・治療・処置は困難を極め患者のＱＯＬ（ｑｕａｌｉ
ｔｙ ｏｆ ｌｉｆｅ、生活の質）が長年にわたって著
しく損なわれる。従って、脳細胞又は神経細胞が死に至
る前に、これらの細胞を有効に保護する優れた経口投与
製剤が是非必要になるわけであるが、目下の所そのよう
な医薬組成物は発明されていない。さて、薬用人蔘の中
でもコウジン末（紅蔘末）は漢方処方において頻繁に使
用され、循環改善作用や自律神経−内分泌系の賦活作用
など、多彩な薬効を有する生薬の１つとして位置付けら
れている。慢性期脳血管障害患者に対しても、コウジン
末を経口投与することにより、患肢の冷感・しびれ感が
改善し、深部皮膚温が上昇することが報告されている。
この効果は主として、コウジン末の循環改善作用に起因
するものと考えられている（山口武典、脳血管障害後遺
症に対する薬用人蔘の効果、薬用人蔘’９５、ｐｐ６−
１８、熊谷 朗編、共立出版）。しかしながら、コウジ
ン末を慢性期脳血管障害患者（慢性期脳卒中患者）に経
口投与しても、脳卒中病巣そのものが改善するという報
告はみられない。また、コウジン末が急性期脳血管障害
（急性期脳卒中）の予防・治療・処置のために一般臨床
の場で使用されているという事実も見当たらない。さら
にコウジン末が、神経細胞死を伴うその他の神経変性疾
患、頭部外傷、脊髄損傷等に臨床の現場で使用されうる
という実験医学的根拠もまったく存在しない。2. Description of the Related Art Intractable neurological diseases such as stroke and neurodegenerative diseases commonly lead to death of brain cells or nerve cells, resulting in irreversible higher-order nervous dysfunction. Once such a dysfunction occurs, its improvement, treatment and treatment are extremely difficult, and the patient's QOL (quali
ty of life) is severely impaired over the years. Therefore, before brain cells or nerve cells die, an excellent oral dosage form that effectively protects these cells is indispensable, but at present such a pharmaceutical composition has not been invented. . Among ginseng, ginseng powder (red ginseng powder) is frequently used in Chinese herbal prescriptions, and is regarded as one of various crude drugs having various medicinal effects such as a circulation improving effect and an autonomic nervous-endocrine system activating effect. I have. It has been reported that oral administration of kojin powder also improves cold and numbness of affected limbs and increases deep skin temperature in patients with chronic cerebrovascular disease.
This effect is considered to be mainly due to the circulation improving effect of ginseng powder (Takenori Yamaguchi, Effects of Ginseng on Sequelae of Cerebrovascular Disease, Ginseng '95, pp6-
18, edited by Akira Kumagai, Kyoritsu Publishing). However, there has been no report that even if kojin powder is orally administered to patients with chronic cerebrovascular disease (chronic stroke patients), the stroke lesion itself is improved. Moreover, there is no fact that kojin powder is used in general clinical settings for the prevention, treatment, and treatment of acute cerebrovascular disease (acute stroke). Furthermore, there is no experimental medical evidence that kojin powder can be used in clinical settings for other neurodegenerative diseases involving neuronal cell death, head trauma, spinal cord injury and the like.
【０００３】本発明者の一人（阪中）は、スナネズミに
５分間の一過性前脳虚血を負荷する前に、コウジン末を
０．９ｇ／ｋｇ／日または１．５ｇ／ｋｇ／日の用量で
１日単回７日間経口投与しておくと、脳虚血後の学習行
動障害が有意に改善され海馬ＣＡ１領域の神経細胞死も
有意に予防されることを証明した（Ｗｅｎ ｅｔ ａ
ｌ．，Ａｃｔａ Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌ．９１，１５
−２２，１９９６）。ちなみに、一過性前脳虚血を負荷
されたスナネズミは、ヒトの一過性脳虚血発作のモデル
と考えられている。しかし、５分間の一過性前脳虚血後
に１週間コウジン末を同様の用量で経口投与しても、ス
ナネズミ海馬ＣＡ１領域の神経細胞死は抑止されなかっ
たので、コウジン末の経口投与による神経細胞保護効果
は、それほど強力ではなく、コウジン末を一過性脳虚血
発作よりもはるかに重篤な脳梗塞患者すなわち脳血管が
永久に閉塞した脳梗塞患者に応用するには無理があると
考えられていた。しかも、コウジン末の経口投与がどの
ようなメカニズムで海馬ＣＡ１領域の遅発性神経細胞死
を抑止するのかも明らかにされていない。もし、この作
用メカニズムが解明されればコウジン末の新たな効果・
効能が発明されるものと期待される。[0003] One of the present inventors (Sakanaka) reported that ginseng powder was 0.9 g / kg / day or 1.5 g / kg / day before gerbils were subjected to 5 minutes of transient forebrain ischemia. Oral administration once daily for 7 days at a dose of 1 mg / day significantly improved learning behavioral impairment after cerebral ischemia and significantly prevented neuronal cell death in the hippocampal CA1 region (Wen et a.
l. , Acta Neuropathol. 91,15
-22, 1996). By the way, gerbils loaded with transient forebrain ischemia are considered as models of human transient ischemic attack. However, oral administration of ginseng powder at the same dose for 1 week after transient forebrain ischemia for 5 minutes did not prevent neuronal cell death in the gerbil hippocampus CA1 region. The cytoprotective effect is not so powerful, and it is impossible to apply kojin powder to patients with cerebral infarction far more severe than transient ischemic attack Was thought. Moreover, it has not been clarified by what mechanism oral administration of kojin powder inhibits delayed neuronal cell death in the hippocampal CA1 region. If this mechanism of action is elucidated,
The effect is expected to be invented.
【０００４】さて、元来脳卒中（脳血管障害）の治療法
は、脳梗塞・脳塞栓・脳出血・一過性脳虚血発作・クモ
膜下出血で異なっており、厳密には脳のＣＴ検査を実施
しなければ有効な対策が立てられないのが現状である。
たとえば血栓溶解剤などは脳梗塞・脳塞栓のみ使用さ
れ、脳出血には禁忌とされている。しかし、脳卒中は可
及的すみやかに病巣部位の神経細胞を保護する処置がと
られなければ、以後永久に高次機能障害をもたらすかあ
るいは生命予後に影響を与える重篤な疾患であるので、
一刻も早く治療を開始すべき疾患である。極論を言え
ば、脳のＣＴ検査を実施している時間すら、脳卒中患者
にとって回復する可能性を少なくする要因になるのであ
る。まさに急性期脳卒中の治療は、脳卒中病変のみなら
ず発症後の時間との戦いと言っても過言ではない。ただ
残念ながら、目下の所、脳卒中の病型（脳梗塞・脳出血
・脳塞栓・クモ膜下出血・一過性脳虚血発作）の如何を
問わず、脳卒中を発症したと思われる患者に速やかに投
与し、著効を示す薬物がほとんど存在しないのが実情で
ある。The treatment of stroke (cerebrovascular disorder) differs from cerebral infarction, cerebral embolism, cerebral hemorrhage, transient ischemic attack, and subarachnoid hemorrhage. At present, no effective countermeasures can be taken unless these measures are implemented.
For example, thrombolytic agents are used only for cerebral infarction and cerebral embolism, and are contraindicated in cerebral hemorrhage. However, a stroke is a serious disease that permanently causes higher-order dysfunction or affects the prognosis of life unless action is taken to protect nerve cells at the focus site as soon as possible.
It is a disease that should be treated as soon as possible. Ultimately, even the time during which a CT scan of the brain is being performed is a factor in reducing the likelihood of a stroke patient recovering. It is no exaggeration to say that the treatment of acute stroke is not only about stroke lesions but also about the time after onset. However, unfortunately, at the present time, regardless of the type of stroke (cerebral infarction, cerebral hemorrhage, cerebral embolism, subarachnoid hemorrhage, transient ischemic attack), promptly In fact, there is almost no drug that shows significant effects.
【０００５】一方、ジンセノサイドＲｂ１は、下記構造
式（Ｉ）On the other hand, ginsenoside Rb1 is the following structural formula (I)
【０００６】[0006]
【化２】★３１Embedded image ★ 31
【０００７】で示される化合物であり、ジンセノサイド
Ｒｂ１は柴田ら（ＳｈｉｂａｔａＳ．，ｅｔ ａｌ．，
Ｅｃｏｎｏｍｉｃ ａｎｄ ｍｅｄｉｃｉａｌ ｐｌａ
ｎｔ ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｗｏｒｌｄ Ｓｃｉｅｎｔｉ
ｆｉｃ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ｐｐ２１７−２８
４，１９８５）などにより公知の物質である。ジンセノ
サイドＲｂ１は、向神経作用としてその腹腔内投与によ
りこれまで静穏作用のみが報告されてきたが（Ｙｏｓｈ
ｉｍｕｒａ Ｈ．ｅｔ ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒ
ｍａｃｏｌ．，１４６，２９１−２９７，１９８８）、
その作用機序についてはまったく解明されていない。ま
た、中枢神経系においては、ジンセノサイドＲｂ１とジ
ンセノサイドＲｇ１の混合物あるいは１０−６Ｍから１
０−７Ｍという極めて高濃度のジンセノサイドＲｇ１又
はジンセノサイドＲｂ１がアセチルコリン含有神経細胞
からのアセチルコリン遊離を活性化し、アルツハイマー
病に効能を示す可能性があることが報告されているが
（米国特許：ＵＳ、Ａ，５，１３７，８７８：Ｃｏｍｐ
ｏｓｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｔｒ
ｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｓｅｎｉｌｅ ｄｅｍｅｎｔｉ
ａ）、アセチルコリン細胞の機能障害がアルツハイマー
病の主要所見であるとは言い難いので、この仮説には解
決すべき問題が山積みしている。また、前記の米国特許
文献は、ジンセノサイドＲｂ１がアセチルコリン含有神
経細胞の生存を延長するか否か、すなわちアセチルコリ
ン細胞を保護するか否かという課題には言及していな
い。[0007] is a compound represented by, ginsenoside Rb1 Shibata et al (ShibataS., Et al.,
Economic and medical pla
nt research, World Scienti
fic, Philadelphia, pp217-28
4, 1985). Ginsenoside Rb1 is only quiet action ever been reported by the intraperitoneal administration as neurotrophic effects (Yosh
imura H .; et al. , Eur. J. Phar
macol. 146, 291-297, 1988),
The mechanism of action has not been elucidated at all. In the central nervous system, a mixture of ginsenoside Rb1 and ginsenoside Rg1 or from10 -6 M 1
0-7 ginsenoside Rg1 or ginsenoside Rb1 very high concentration of thatM activates the acetylcholine release from acetylcholine-containing nerve cells, that can exhibit efficacy in Alzheimer's disease has been reported (U.S. Pat: US, A, 5,137,878: Comp
position and method for tr
element of senile dementi
a) Since dysfunction of acetylcholine cells cannot be said to be the main finding of Alzheimer's disease, this hypothesis has many problems to be solved. Further, the U.S. patent documents, whether ginsenoside Rb1 to prolong the survival of acetylcholine-containing neurons, i.e. the issue of whether to protect acetylcholine cells does not mention.
【０００８】しかも、ジンセノサイドＲｂ１単独の神経
細胞保護作用については、本発明者らがジンセノサイド
Ｒｂ１の研究を手掛けるまではほとんど解明されていな
かった。本発明者らはこれまで ジンセノサイドＲｂ１
がアセチルコリン含有神経細胞以外にも保護効果を発揮
するかどうかを、スナネズミの一過性前脳虚血モデルを
用いて調べてきた。この脳虚血モデル動物では、脳温を
３７℃に維持した状態で３分間から５分間、総頸動脈血
流を遮断すると、血流遮断時間に応じて虚血後一週間以
内に海馬ＣＡ１錐体神経細胞（アセチルコリン非含有）
が変性脱落し（これを遅発性神経細胞死という）、同動
物の学習行動機能も低下することが証明されている（Ｗ
ｅｎ Ｔ．−Ｃ．ｅｔ ａｌ．，Ａｃｔａ Ｎｅｕｒｏ
ｐａｔｈｏｌ．，９１，１５−２２，１９９６）。すな
わち、スナネズミの一過性前脳虚血モデルはヒトの一過
性脳虚血発作の病態を反映すると言える。[0008] In addition, for the nerve cell protective effect of ginsenoside Rb1 alone, the present invention it has not been poorly understood until the maker of study of ginsenoside Rb1. The present inventors have reported that ginsenoside Rb1
It has been investigated whether gerbils exert protective effects on neurons other than acetylcholine-containing neurons using a gerbil transient forebrain ischemia model. In this cerebral ischemia model animal, when the common carotid artery blood flow was blocked for 3 to 5 minutes while maintaining the brain temperature at 37 ° C., the hippocampal CA1 cone was within one week after ischemia depending on the blood flow blocking time. Somatic nerve cells (without acetylcholine)
Has been shown to degenerate and shed (this is called delayed neuronal death), and the learning behavior function of the animal is also reduced (W
en T. -C. et al. , Acta Neuro
pathol. , 91, 15-22, 1996). That is, it can be said that the gerbil transient forebrain ischemia model reflects the pathological state of human transient cerebral ischemia attack.
【０００９】本発明者の一人（阪中）は、スナネズミの
腹腔内にあらかじめジンセノサイドＲｂ１（１０ｍｇ／
ｋｇまたは２０ｍｇ／ｋｇ）を１日単回１週間注入して
おくと、５分間の総頚動脈血流遮断による遅発性神経細
胞死と学習行動障害が有意に軽減されることを証明した
（Ｗｅｎ Ｔ．−Ｃ．ｅｔ ａｌ．，Ａｃｔａ Ｎｅｕ
ｒｏｐａｔｈｏｌ．，９１，１５−２２，１９９６）。
しかしながら、５分間あるいは３分間の総頚動脈血流遮
断直後に、ジンセノサイドＲｂ１を腹腔内に注入しても
効果はみられなかった（Ｗｅｎ Ｔ．−Ｃ．ｅｔ ａ
ｌ．，ＡｃｔａＮｅｕｒｏｐａｔｈｏｌ．，９１，１５
−２２，１９９６；Ｌｉｍ Ｊ．−Ｈ．ｅｔ ａｌ．，
Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，Ｒｅｓ．，２８，１９１−２０
０，１９９７）、従って、この時点で末梢（腹腔内）投
与されたジンセノサイドＲｂ１の脳内移行率及び移行速
度は非常に低いことが予想されたため、ジンセノサイド
Ｒｂ１は海馬ＣＡ１錐体神経細胞の保護という観点から
は、臨床応用の可能性は皆無と考えられた。[0009] One of the present inventors (Sakanaka) had previously prepared ginsenoside Rb1 (10 mg /
(kg or 20 mg / kg) once a day for one week, it has been proved that delayed neuronal death and learning disability due to blockage of common carotid artery blood flow for 5 minutes are significantly reduced (Wen). T.-C. et al., Acta Neu
ropolol. , 91, 15-22, 1996).
However, immediately after the common carotid artery hemostasis of 5 minutes or 3 minutes, it is injected ginsenoside Rb1 intraperitoneally effect was observed (Wen T.-C.et a
l. , ActaNeuropathol. , 91,15
-22, 1996; -H. et al. ,
Neurosci. , Res. , 28,191-20
0,1997), therefore, peripheral (intraperitoneal at this time) for intracerebral transition rate and migration rate of ginsenoside Rb1, which is administered which is expected to be very low, ginsenoside Rb1 is the hippocampal CA1 pyramidal neurons From the viewpoint of protection, there was no possibility of clinical application.
【００１０】前記のような末梢（腹腔内）投与に代え
て、ジンセノサイドＲｂ１を３分間あるいは３．５分間
の総頚動脈血流遮断の直後に、直接脳室内の持続注入す
ると遅発性神経細胞死と学習行動障害が抑止されること
を本発明者の一人（阪中）が報告している（Ｌｉｍ
Ｊ．−Ｈ．ｅｔ ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，Ｒｅ
ｓ．，２８，１９１−２００，１９９７）。さらに、脳
卒中易発症高血圧自然発症（ＳＨ−ＳＰ）ラットの中大
脳動脈皮質枝（ＭＣＡ）永久閉塞モデル（脳梗塞ラッ
ト）においても、ジンセノサイドＲｂ１をＭＣＡ永久閉
塞直後より脳室内へ持続注入すると、大脳皮質梗塞巣が
有意に縮小し、同動物の場所学習障害も軽減されること
を発明者ら（阪中、田中、前田）が証明した（Ｚｈａｎ
ｇ Ｂ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｓｔｒｏｋｅ Ｃｅｒｅｂ
ｒｏｖａｓｃ．Ｄｉｓ．，７，１−９，１９９８）。[0010] instead of the peripheral (intraperitoneal), such as administration, immediately after the common carotid artery hemostasis of ginsenoside Rb1 3 min or 3.5 min, delayed neuronal With continuous infusion directly intraventricular One of the present inventors (Sakanaka) reports that death and learning behavioral disorders are suppressed (Lim
J. -H. et al. , Neurosci. , Re
s. , 28, 191-200, 1997). Further, the stroke-prone hypertensive spontaneously (SH-SP) in the rat cerebral artery cortical branch (MCA) permanent occlusion model (infarct rats) also when continuous infusion of ginsenoside Rb1 intracerebroventricularlly immediately after MCA permanent occlusion, The inventors (Sakanaka, Tanaka, Maeda) proved that the cerebral cortical infarction was significantly reduced and the place learning disability of the animal was also reduced (Zhan
g B. et al. , J. et al. Stroke Cereb
rovasc. Dis. , 7, 1-9, 1998).
【００１１】しかしながら、他のペプチド性成長因子と
同様に（Ｓａｋａｎａｋａ Ｍ．ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏ
ｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９５，４６
３５−４６４０，１９９８；Ｗｅｎ Ｔ．−Ｃ．ｅｔ
ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１８８，６３５−６４
９，１９９８）、たとえジンセノサイドＲｂ１が脳室内
直接投与で効果を示しても投与経路の問題からやはりヒ
トの一過性前脳虚血発作や脳梗塞症例にジンセノサイド
Ｒｂ１を応用することは不可能と考えられた。However, like other peptidic growth factors (Sakanaka M. et al., Pro.
c. Natl. Acad. Sci. USA, 95, 46
35-4640, 1998; -C. et
al. , J. et al. Exp. Med. , 188, 635-64
9,1998), even the ginsenoside Rb1 is applied ginsenoside Rb1 to also transient forebrain ischemia attack or stroke human cases from problems of administration routes show the effect intraventricular direct administration not It was considered possible.
【００１２】さて、脳梗塞の治療・予防・処置のため使
用しうる化合物を検索する目的で、近年スナネズミやラ
ットの脳虚血再灌流モデルを用いて、脳梗塞の予防・治
療・処置のための候補物質をスクリーニングするという
方法がしばしば採用されている。しかし、ここで注意す
べきことは、スナネズミやラットの脳虚血再灌流障害モ
デルは、後述のごとく、ヒトの脳梗塞の病態を必ずしも
反映しないということである。先述のごとく、本発明者
の一人（阪中）はすでにスナネズミの脳虚血再灌流モデ
ルを用いて、脳虚血負荷前にジンセノサイドＲｂ１を１
０ｍｇ／ｋｇ／日もしくは２０ｍｇ／ｋｇ／日の用量で
腹腔内投与しておくと、海馬ＣＡ１領域の神経細胞のう
ち３０％程度が救済されることを報告している。（Ｗｅ
ｎ Ｔ．−Ｃ．ｅｔ ａｌ．，Ａｃｔａ Ｎｅｕｒｏｐ
ａｔｈｏｌ．，９１，１５−２２，１９９６）。また、
Ｚｈａｎｇ Ｙ．Ｇ．とＬｉｕ Ｔ．Ｐ．は、１０〜４
０ｍｇ／ｋｇの用量のジンセノサイドＲｂ１をラットの
中大脳動脈虚血再灌流モデルに単回静脈内投与すると、
虚血前投与で梗塞サイズが対照群に比べて２０％〜４９
％程度縮小し、再灌流直後の投与で梗塞サイズが対照群
に比べて１２％〜３５％程度縮小することを報告してい
る（Ｚｈａｎｇ Ｙ．Ｇ．ａｎｄ ＬｉｕＴ．Ｐ．，Ｃ
ｈｕｎｇ Ｋｕｏ Ｙａｏ Ｌｉ Ｈｓｕｅｃｈ Ｐａ
ｏ，中国薬理学報，１７，４４−４８，１９９６）。し
かしながら、この効果は、これまでに開発された脳虚血
再灌流治療薬の候補物質（たとえば、グルタミン酸拮抗
薬やフリーラジカル消去剤）の効果と比べて必ずしも優
れているとは言えず、むしろかなり見劣りするものであ
った。（Ｓｌｕｓｈｅｒ Ｂ．Ｓ．ｅｔ ａｌ．，Ｎａ
ｔｕｒｅ Ｍｅｄ．５，１３９６−１４０２，１９９
９）。しかも、前述のＺｈａｎｇ Ｙ．Ｇ．とＬｉｕ
Ｔ．Ｐ．の論文で、脳虚血再灌流障害の予防・治療に比
較的良好な効果・効能を示した４０ｍｇ／ｋｇというジ
ンセノサイドＲｂ１の静脈内投与量は、静脈内投与され
たジンセノサイドＲｂ１のＬＤ５０が４４８ｍｇ／ｋｇ
前後であることを考慮すると（Ｓａｉｔｏ Ｈ．，ｅｔ
ａｌ．，Ｓｈｏｙａｋｕｇａｋｕ Ｚａｓｓｈｉ，生
薬学雑誌 ３４，１７７−１８１，１９８０）、単回静
脈内投与するだけでも副作用が出現する可能性も否定で
きないほど高用量であると言える。このような高用量の
ジンセノサイドＲｂ１は単回投与が限度であり、連日静
脈内投与や静脈内への持続注入はまず困難と考えられ
る。また、実際のヒト脳梗塞（脳血栓、脳塞栓）症例で
は、閉塞した脳血管近傍にカテーテルを挿入したのちに
血栓溶解療法を実施して血管を再開通せしめた一部の症
例を除いては、脳血管が永久に閉塞する場合が非常に多
いと考えられる。すなわち、真に有用な脳梗塞治療薬
は、脳血管の一部（たとえば中大脳動脈）が永久閉塞し
たのちに静脈内投与可能で、かつ脳梗塞（脳血栓、脳塞
栓）病巣がほぼ安定期にはいる発症後１ヶ月の時期ま
で、すなわちひとたび破綻した脳血管網が再生・再構築
するまで、虚血巣周辺部（ｉｓｃｈｅｍｉｃ ｐｅｎｕ
ｍｂｒａ）領域の脳細胞や神経細胞を確実に保護する薬
物が必要と考えられる。すなわち、脳梗塞治療薬の候補
物質の薬効解析は脳血管が永久に閉塞した動物を用いて
なされるべきものであると考えられる。しかるに、Ｚｈ
ａｎｇ Ｙ．Ｇ．とＬｉｕＴ．Ｐ．の前掲の論文による
と、中大脳動脈を永久閉塞する前に、ラットにジンセノ
サイドＲｂ１を１０ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内投与して
もまったく効果はみられず、ジンセノサイドＲｂ１を４
０ｍｇ／ｋｇの用量で中大脳動脈永久閉塞前に静脈内投
与したときのみ梗塞サイズが対照群に比べて約１４％程
度縮小したと記述されている。すなわち、中大脳動脈を
永久閉塞したラットに高用量（４０ｍｇ／ｋｇ）のジン
セノサイドＲｂ１をあらかじめ単回静脈内投与しておい
ても、中大脳動脈虚血再灌流ラットにジンセノサイドＲ
ｂ１を静脈内投与した場合と比較して、明らかに効果が
弱いと考えられた。しかも、中大脳動脈を永久閉塞され
たラットに対して脳梗塞前投与で多少なりとも効果を示
すジンセノサイドＲｂ１の投与量が４０ｍｇ／ｋｇとい
う高用量なので、やはり静脈内投与されたジンセノサイ
ドＲｂ１のＬＤ５０が４４８ｍｇ／ｋｇ前後であること
を勘案すると、このような高用量のジンセノサイドＲｂ
１を連日もしくは持続的に静脈内投与することは不可能
と考えられた。本発明者らの経験によれば、脳血管の一
部（たとえば中大脳動脈）が永久閉塞した実験動物に１
回ないし２回程度脳梗塞治療薬の候補物質を静脈内投与
して脳梗塞発症後１〜２日程度は効果がみられても、そ
の後同候補物質が持続的に投与されなければ脳梗塞病変
は確実に拡大し脳血管永久閉塞後１ヶ月（すなわち脳梗
塞病変がほぼ安定期に入る頃）には、ほぼ効果がみられ
なくなると考えられる。すなわち、脳梗塞治療薬の重要
な条件として、長期静脈内投与もしくは連日静脈内投与
可能な化合物であることがあげられる。しかしながら、
Ｚｈａｎｇ Ｙ．Ｇ．とＬｉｕ Ｔ．Ｐ．が発表した前
述の論文からも判断するかぎり、高用量のジンセノサイ
ドＲｂ１の静脈内持続投与を脳梗塞や脳卒中の治療・予
防・処置に応用することは事実上不可能と考えられた。Now, in order to search for compounds that can be used for the treatment, prevention, and treatment of cerebral infarction, cerebral ischemia-reperfusion models of gerbils and rats have recently been used to prevent, treat, and treat cerebral infarction. A method of screening for a candidate substance is often adopted. However, it should be noted here that gerbil and rat cerebral ischemia-reperfusion injury models do not necessarily reflect the pathology of human cerebral infarction, as described below. As described above, one of the present inventors (Osakanaka) has already used a gerbil cerebral ischemia-reperfusion model to add1 ginsenoside Rb1 before cerebral ischemia load.
It has been reported that intraperitoneal administration at a dose of 0 mg / kg / day or 20 mg / kg / day rescues about 30% of neurons in the hippocampal CA1 area. (We
nT. -C. et al. , Acta Neurop
atol. , 91, 15-22, 1996). Also,
Zhang Y. G. FIG. And Liu T. P. Is 10-4
When 0 mg / kg of ginsenoside Rb1 dose administered single intravenous cerebral artery ischemia-reperfusion model in the rat,
Infarct size in pre-ischemic administration was 20% -49 compared to control group
%, And the infarct size is reduced by about 12% to 35% as compared with the control group by administration immediately after reperfusion (Zhang YG and LiuTP, C.
hung Kuo Yao Li Hsuech Pa
o, Chinese Pharmacological Journal, 17, 44-48, 1996). However, this effect is not necessarily superior to the effects of candidate therapeutic agents for cerebral ischemia / reperfusion (e.g., glutamate antagonists and free radical scavengers) that have been developed so far. It was inferior. (Slusher BS et al., Na
cure Med. 5,1396-1402,199
9). In addition, the aforementioned Zhang Y. G. FIG. And Liu
T. P. In the paper, intravenous dose of prevention and treatment in a relatively good effectiveness and efficacy of ginsenoside Rb1 of 40 mg / kg showing cerebral ischemia reperfusion injury, LD50 of ginsenoside Rb1 administered intravenously 448mg / kg
Taking into account that it is before and after (Saito H., et.
al. , Shoyakugaku Zasshi, Biopharmaceutical Journal 34,177-181, 1980), and it can be said that even a single intravenous administration is such a high dose that the possibility of the appearance of side effects cannot be ruled out. Such high doses of ginsenoside Rb1 of a single dose is limited, continuous infusion into daily intravenous or intravenous is considered first difficult. In actual human cerebral infarction (cerebral thrombosis, cerebral embolism) cases, except for some cases in which a catheter was inserted near the occluded cerebral blood vessels, thrombolytic therapy was performed, and blood vessels were reopened, It is very likely that cerebral blood vessels are permanently obstructed. In other words, a truly useful therapeutic agent for cerebral infarction can be administered intravenously after the permanent occlusion of a part of the cerebral blood vessels (for example, the middle cerebral artery), and the lesion of cerebral infarction (cerebral thrombosis, cerebral embolism) is almost stable. Until one month after the onset of the disease, that is, until the broken cerebrovascular network regenerates and reconstructs, ischemic penu (ischemic penu)
It is thought that a drug that reliably protects brain cells and nerve cells in the mbra) region is necessary. That is, it is considered that the efficacy analysis of the candidate substance for the therapeutic drug for cerebral infarction should be performed using an animal in which cerebral blood vessels are permanently occluded. However, Zh
ang Y. G. FIG. And LiuT. P. Of said supra papers, the middle cerebral artery before permanent occlusion, no effect even when the ginsenoside Rb1 was intravenously administered at a dose of 10 mg / kg in rats was not observed, the ginsenoside Rb1 4
It is described that the infarct size was reduced by about 14% compared to the control group only when intravenously administered at a dose of 0 mg / kg before the permanent occlusion of the middle cerebral artery. That is, even preadministrated single intravenous ginsenoside Rb1 high dose middle cerebral artery permanent occlusion rats (40 mg / kg), ginsenoside the middle cerebral artery ischemia-reperfusion rats R
The b1 as compared with the case of intravenous administration, clearly the effect was considered to be weak. Moreover, the doses of ginsenoside Rb1 showing a more or less effect in cerebral infarction before administering the middle cerebral artery with respect to permanent occlusion rats is high dose of 40 mg / kg, of ginsenoside Rb1 administered also intravenously Considering that the LD50 is around 448 mg / kg, such a high dose of ginsenoside Rb
It was considered impossible to administer1 intravenously daily or continuously. According to the experience of the present inventors, one experimental animal in which a part of the cerebral blood vessels (for example, the middle cerebral artery) is permanently occluded is considered to be one.
Intravenous administration of a candidate for a therapeutic agent for cerebral infarction about once or twice is effective for about 1 to 2 days after the onset of cerebral infarction. It is considered that the effect is surely enlarged, and one month after the permanent cerebral vascular occlusion (ie, when the cerebral infarction lesion almost enters a stable period), almost no effect is seen. That is, an important condition of a therapeutic agent for cerebral infarction is a compound that can be administered intravenously for a long time or daily. However,
Zhang Y. G. FIG. And Liu T. P. There Judging from the foregoing papers published, applying the continuous intravenous administration of ginsenoside Rb1 high dose treatment, prevention and treatment of cerebral infarction or stroke was considered virtually impossible.
【００１３】さて、ジンセノサイドＲｂ１を脳梗塞の治
療・予防・処置のために実用化することはほぼ不可能で
あるという従来の考え方を覆すような発明が、その後本
発明者ら（阪中、田中）によりなされた。その詳細につ
いては、特願平１０−３６５５６０号、ＰＣＴ／ＪＰ９
９／０２５５０（ジンセノサイドＲｂ１からなる脳細胞
又は神経細胞保護剤）ならびに特願平１１−３４０８５
０号、ＰＣＴ／ＪＰ９９／０６８０４（ジンセノサイド
Ｒｂ１からなる脳血管再生・再構築促進剤ならびに神経
組織二次変性抑止剤）に記述されている。すなわち、脳
卒中易発症高血圧自然発症ラット（ＳＨ−ＳＰラット）
の中大脳動脈皮質枝（ＭＣＡ）を永久閉塞したのちに、
ジンセノサイドＲｂ１を６０μｇ／日もしくは６μｇ／
日の用量で２８日間静脈内へ持続注入すると、脳梗塞
（脳塞栓）病巣体積が生理食塩水（ｖｅｈｉｃｌｅ、媒
体）注入脳梗塞群の約４分の１程度に縮小することを本
発明者ら（阪中、田中）は前述の既出願特許において見
出した。すなわち、ＭＣＡを永久閉塞したのちに低用量
のジンセノサイドＲｂ１を静脈内へ持続投与することに
より、脳梗塞病巣体積が対照群に比べて７５％程度縮小
したことになる。しかも、このように少量のジンセノサ
イドＲｂ１を２８日間静脈内へ持続注入することによ
り、ＭＣＡ永久閉塞後ひとたび破綻した脳血管が再生・
再構築し、ジンセノサイドＲｂ１の静脈内投与を以後中
止しても、もはや脳梗塞病変は悪化しないことが見出さ
れた。本発明者ら（阪中、田中）が用いたＳＨ−ＳＰラ
ットの体重は約３００ｇであるので、１日あたりのジン
セノサイドＲｂ１投与量は２００μｇ／ｋｇもしくは２
０μｇ／ｋｇということになる。従って、Ｚｈａｎｇ
Ｙ．Ｇ．ａｎｄ Ｌｉｕ Ｔ．Ｐ．の論文（Ｃｈｕｎｇ
Ｋｕｏ Ｙａｏ Ｌｉ Ｈｓｕｅｃｈ Ｐａｏ，中国
薬理学報，１７，４４−４８，１９９６）にて用いられ
た４０ｍｇ／ｋｇのジンセノサイドＲｂ１単回静脈内投
与と比較して、ＳＨ−ＳＰラットへの１日あたりの投与
量はその２００分の１もしくは２０００分の１というこ
とになる。すなわち、特願平１０−３６５５６０号、Ｐ
ＣＴ／ＪＰ／０２５５０、特願平１１−３４０８５０、
ＰＣＴ／ＪＰ９９／０６８０４において、本発明者ら
（阪中、田中）は、少量（低用量）のジンセノサイドＲ
ｂ１の長期間静脈内持続投与という極めて優れた脳梗塞
（脳血栓、脳塞栓）、脳卒中、脳血管障害の治療法を発
明したことになる。もちろん、少量のジンセノサイドＲ
ｂ１を脳卒中発症後、連日静脈内への単回注入を実施す
ることもできるし、連日点滴用組成物に少量のジンセノ
サイドＲｂ１を混入した上で静脈内へ一定時間をかけて
投与することも可能である。さらに、ジンセノサイドＲ
ｂ１の脳室内投与や腹腔内投与が虚血神経組織の二次変
性を抑止するという本発明者らの既発表論文（Ｗｅｎ
Ｔ．−Ｃ．ｅｔ ａｌ．，Ａｃｔａ Ｎｅｕｒｏｐａｔ
ｈｏｌ．，９１，１５−２２，１９９６；Ｚｈａｎｇ
Ｂ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．ＳｔｒｏｋｅＣｅｒｅｂｒｏｖ
ａｓｃ．Ｄｉｓ．，７，１−９，１９９８）に加えて、
前述の既出願特許において、本発明者ら（阪中、田中）
は、少量のジンセノサイドＲｂ１の静脈内持続投与が神
経組織の二次変性を極めて効果的に抑止することを見出
した。また、前述の既出願特許において、本発明者ら
（阪中、田中）は、少量のジンセノサイドＲｂ１の静脈
内持続投与が神経外傷、頭部外傷、脊髄損傷の予防・治
療・処置にも利用できることを見出した。[0013] Now, the ginsenoside Rb1 as overturn conventional thinking that it is almost impossible to put into practical use for the treatment, prevention and treatment of cerebral infarction invention, then the present inventors (Sakanaka, Tanaka). For details, refer to Japanese Patent Application No. 10-365560, PCT / JP9.
9/02550 (Brain cell or nerve cell-protective agents comprising ginsenoside Rb1) and Japanese Patent Application No. 11-34085
No. 0, PCT / JP99 / 06804 (a cerebral blood vessel regeneration / remodeling promoter comprising ginsenoside Rb1 and an inhibitor of secondary degeneration of nerve tissue). That is, stroke-prone spontaneously hypertensive rats (SH-SP rats)
After permanent occlusion of the middle cerebral artery cortical branch (MCA),
Ginsenoside Rb1 at 60 μg / day or 6 μg / day
The inventors of the present invention have shown that continuous intravenous infusion at a daily dose for 28 days reduces the volume of cerebral infarction (cerebral embolism) lesion to about one-fourth that of a cerebral infarction group injected with saline (vehicle, medium). (Sakanaka, Tanaka) were found in the above-mentioned patent application. That is, by continuous administration of ginsenoside Rb1 low dose intravenous and MCA in After permanent occlusion, so that the cerebral infarction lesion volume was reduced approximately 75% compared to the control group. Moreover, by continuous infusion such small amounts of ginsenoside Rb1 to 28 days intravenously, once bankrupt cerebrovascular after MCA permanent occlusion Play ·
Rebuild be stopped thereafter the intravenous administration of ginsenoside Rb1, longer stroke lesions were found not to deteriorate. Since the weight of SH-SP rats used by the present inventors (Osakanaka, Tanaka) is about 300 g,one dose of ginsenoside Rb per day is 200 μg / kg or 2 g.
It means 0 μg / kg. Therefore, Zhang
Y. G. FIG. and Liu T. P. Paper (Chung
Kuo Yao Li Hsuech Pao, China pharmacology report, in comparison with the ginsenoside Rb1 single intravenous dose of 40mg / kg, which is used in the 17,44-48,1996), per day to the SH-SP rats Will be 200/2000 or 1/2000 of that. That is, Japanese Patent Application No. Hei 10-365560, P
CT / JP / 02550, Japanese Patent Application No. 11-340850,
In PCT / JP99 / 06804, the present inventors (Sakanaka, Tanaka) proposed that a small amount (low dose) of ginsenoside R
excellent cerebral infarction that long-term continuous intravenous administration of b1 (cerebral thrombosis, cerebral embolism), stroke, so that the invented method of treating cerebrovascular disorders. Of course, a small amount of ginsenoside R
After the b1 stroke onset, to a single injection into daily intravenous can also be carried out, be administered over a certain time into the vein on mixed with a small amount of ginsenoside Rb1 in daily infusion composition Is also possible. Furthermore, ginsenoside R
The present inventors have already published papers that intraventricular administration and intraperitoneal administration of b1 to suppress the secondary degeneration of ischemic neural tissue (Wen
T. -C. et al. , Acta Neuropat
hol. , 91, 15-22, 1996; Zhang.
B. et al. , J. et al. StrokeCerebrov
asc. Dis. , 7, 1-9, 1998)
In the above-mentioned patents already filed, the present inventors (Sakanaka, Tanaka)
Found that continuous intravenous administration of small amounts of ginsenoside Rb1 to suppress secondary degeneration of nervous tissue very effectively. Further, in the prior patent application mentioned above, the present inventors (Sakanaka, Tanaka) is a small amount of continuous intravenous administration neurotrauma of ginsenoside Rb1, head trauma, for the prevention, treatment or the treatment of spinal cord injury use I found what I can do.
【００１４】ところで、脳卒中、神経外傷、頭部外傷、
脊髄損傷、頭蓋内出血、心停止、低酸素脳症、脳炎等の
病態において、脳神経組織に大きな侵襲が加わると、脳
浮腫が出現し、その結果脳圧が著しく亢進して生命を脅
かすことがしばしばある。臨床現場では、この脳浮腫・
脳圧亢進に伴う脳組織のヘルニアを予防・治療・処置す
るために、マニトール、グリセロール、ステロイド剤が
しばしば使用されるが、投薬を中止した後のリバウンド
現象や副作用の問題を必ずしも克服しきれていない。従
って、安全かつ長期的に投与可能な脳浮腫の治療薬が将
来是非必要になると考えられるが、目下の所そのような
医薬組成物は見当たらない。By the way, stroke, nerve trauma, head trauma,
In pathologies such as spinal cord injury, intracranial hemorrhage, cardiac arrest, hypoxic encephalopathy, and encephalitis, major invasion of cranial nerve tissue can result in cerebral edema, resulting in significant increases in brain pressure and often life threatening . In clinical practice, this brain edema
Manitol, glycerol, and steroids are often used to prevent, treat, and treat brain tissue hernias associated with elevated cerebral pressure.However, they do not always overcome the problems of rebound and side effects after drug discontinuation. Absent. Therefore, it is considered that a therapeutic agent for cerebral edema that can be administered safely and for a long term will be definitely needed in the future, but such a pharmaceutical composition is not found at present.
【００１５】また、ジンセノサイドＲｂ１の末梢（腹腔
内）投与による神経細胞保護作用のメカニズムについ
て、本発明者らはこれまでに低濃度（０．１〜１００ｆ
ｇ／ｍｌ）の同薬物をあらかじめ培養液に混入しておく
と、ヒドロキシルラジカル誘発剤（硫酸第一鉄）による
神経細胞の壊死（ネクローシス）が軽減されることを報
告している（Ｌｉｍ Ｊ．−Ｈ．ｅｔ ａｌ．，Ｎｅｕ
ｒｏｓｃｉ．Ｒｅｓ．，２８，１９１−２００，１９９
７；Ｚｈａｎｇ Ｂ．，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｓｔｒｏｋ
ｅ Ｃｅｒｅｂｒｏｖａｓｃ．Ｄｉｓ．，７，１−９，
１９９８）。本発明者らは、ジンセノサイドＲｂ１がヒ
ドロキシルラジカルを消去することにより、細胞膜の過
酸化脂質を減少せしめ、培養神経細胞を保護するものと
推測してきたが、これまでにこの仮説を証明した報告は
みられない。Further, the mechanism of neuronal cell protective effect of ginsenoside Rb1 by peripheral (intraperitoneal) administration, the present inventors have so far lower concentration (0.1～100F
g / ml) of the same drug in the culture solution in advance reduces neuronal necrosis (necrosis) due to hydroxyl radical inducer (ferrous sulfate) (Lim J. -H. et al., Neu.
rosci. Res. , 28, 191-200, 199
7; Zhang B. , Et al. , J. et al. Strok
e Cerebrovasc. Dis. , 7, 1-9,
1998). The present inventors have found that by ginsenoside Rb1 erases the hydroxyl radical, allowed reducing the lipid peroxidation of the cell membrane has been assumed that protects cultured neurons, reports that prove this hypothesis so far I can't see it.
【００１６】また、高濃度（約０．１１〜１１μｇ／ｍ
ｌ）のジンセノサイドＲｂ１がグルタミン酸の神経毒性
を軽減して神経細胞死を予防すること（Ｋｉｍ Ｙ．−
Ｃ．，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｒｅ
ｓ．，５３，４２６−４３２，１９９８；Ｌｉｕ Ｍ．
ａｎｄ Ｚｈａｎｇ ＪＴ．，Ａｃｔａ Ｐｈａｒｍａ
ｃｅｕｔｉｃａ Ｓｉｎｉｃａ，３０，６７４−６７
８，１９９５）、あるいは５００μＭ（５５０μｇ／ｍ
ｌ）という高濃度のジンセノサイドＲｂ１がアポトーシ
ス様神経細胞死を予防する可能性があること（田中知明
ら、Ｔｈｅ Ｇｉｎｓｅｎｇ Ｒｅｖｉｅｗ，２４，６
１−６５，１９９８）が培養実験で報告されているが、
高濃度のジンセノサイドＲｂ１は本発明者らの培養実験
によれば神経細胞死を抑止しないことが判明している
（Ｌｉｍ Ｊ．−Ｈ．ｅｔ ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｓｃ
ｉ．Ｒｅｓ．，２８，１９１−２００，１９９７；Ｚｈ
ａｎｇ Ｂ．，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｓｔｒｏｋｅ Ｃｅ
ｒｅｂｒｏｖａｓｃ．Ｄｉｓ．，７，１−９，１９９
８）。In addition, a high concentration (about 0.11 to 11 μg / m
the ginsenoside Rb1 of l) to prevent neuronal cell death by reducing the glutamate neurotoxicity (Kim Y.-
C. , Et al. , J. et al. Neurosci. Re
s. Liu M., 53, 426-432, 1998;
and Zhang JT. , Acta Pharma
ceutica Sinica, 30, 674-67
8, 1995), or 500 μM (550 μg / m
the ginsenoside Rb1 high concentration of l) is likely to prevent apoptosis-like nerve cell death (Tomoaki Tanaka et al, The Ginseng Review, 24,6
1-65, 1998) in a culture experiment,
Ginsenoside Rb1 of high concentration is found not to suppress neuronal cell death according to the culture experiments of the present inventors (Lim J.-H.et al., Neurosc
i. Res. , 28, 191-200, 1997; Zh
ang B. , Et al. , J. et al. Stroke Ce
rebrovasc. Dis. , 7,1-9,199
8).
【００１７】しかも、このように高濃度のジンセノサイ
ドＲｂ１を患部の生体組織内もしくは脳神経組織内の細
胞外液で再現又は維持することは極めて困難であるのみ
ならず、コスト面や副作用出現の可能性を考えても大量
のジンセノサイドＲｂ１を生体に投与することは不可能
である。実際、これまでの本発明者らの実験結果から
も、高用量のジンセノサイドＲｂ１は生体にとって必ず
しも好ましい効果・効能をもたらさないことが判明して
いる（Ｚｈａｎｇ Ｂ．，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｓｔｒｏ
ｋｅ Ｃｅｒｅｂｒｏｖａｓｃ．Ｄｉｓ．，７，１−
９，１９９８）。すなわち、ジンセノサイドＲｂ１によ
る神経細胞保護作用のメカニズムはこれまで充分に解明
されていないというのが現状であった。[0017] Moreover, the possibility of the thus be reproduced or maintained in the extracellular fluid of the high concentration in the ginsenoside Rb1 diseased living tissue or the nerve tissue is not only extremely difficult, cost and side effects appeared it is not possible to a large amount of ginsenoside Rb1 be considered sexual administering to the living body. Indeed, previous from the experimental results of the present inventors, high doses of ginsenoside Rb1 has been found to not provide necessarily preferred Effect effect to living organisms (Zhang B., et al., J.Stro
ke Cerebrovasc. Dis. , 7,1-
9, 1998). In other words, because the mechanism of nerve cell protective action by ginsenoside Rb1 has not been thoroughly elucidated so far has been at present.
【００１８】そこで、特願平１０−３６５５６０、ＰＣ
Ｔ／ＪＰ９９／０２５５０（ジンセノサイドＲｂ１から
なる脳細胞又は神経細胞保護剤）において、本発明者ら
（阪中、田中）は、ジンセノサイドＲｂ１が１ｎｇ／ｍ
ｌ以下、好ましくは１ｆｇ／ｍｌ前後から１００ｆｇ／
ｍｌ前後という世界に類をみない低濃度域で、細胞死抑
制遺伝子物産Ｂｃｌ−ｘＬの発現増加を促し、アポトー
シス様神経細胞死を抑止することを見出した。すなわ
ち、前述の既出願特許において、ジンセノサイドＲｂ１
は世界で唯一の非ペプチド性のＢｃｌ−ｘＬ発現増強剤
であることが見出された。また、１００ｆｇ／ｍｌの濃
度ではわずかにジンセノサイドＲｂ１の過酸化脂質生成
抑制効果はみられたが、それよりも低い濃度域ではその
ような効果はみられなかった。従って、ジンセノサイド
Ｒｂ１の作用機構に関する従来の仮説（すなわちジンセ
ノサイドＲｂ１は細胞膜脂質の過酸化を強力に抑止する
という仮説）は必ずしも妥当ではないことが判明した。
さらに、前述の既出願特許において、生体内でも、ジン
セノサイドＲｂ１がアポトーシス様神経細胞死を抑止す
ることが見出された。Therefore, Japanese Patent Application No. 10-365560, PC
In T / JP99 / 02550 (a brain cell or nerve cell protective agent comprising ginsenoside Rb1 ), the present inventors (Sakanaka, Tanaka) reported that ginsenoside Rb1 contained1 ng / m 2.
l or less, preferably from about 1 fg / ml to 100 fg / ml.
ml in the low concentration range that does not look at the kind in the world of before and after, prompting the increased expression of cell death-suppressing gene Bussan Bcl-xL, was found to inhibit the apoptosis-like nerve cell death. That is, in the above-mentioned patent, the ginsenoside Rb1
It has been found that is the only non-peptidic Bcl-xL expression enhancer in the world. Further, 100 fg / ml slightly lipid peroxidation inhibiting effect of ginsenoside Rb1 at concentrations have been observed, such effect was not seen in it than lower concentration range. Therefore, it has been found that the conventional hypothesis regarding the mechanism of action of ginsenoside Rb1 (that is, the hypothesis that ginsenoside Rb1 strongly inhibits peroxidation of cell membrane lipids) is not always valid.
Further, in the prior patent application mentioned above, even in vivo, ginsenoside Rb1 was found to inhibit the apoptosis-like nerve cell death.
【００１９】ところで、Ｂｃｌ−ｘＬは神経細胞のみな
らず他の末梢組織の細胞やグリア細胞にも発現している
ので、ジンセノサイドＲｂ１が神経細胞のＢｃｌ−ｘＬ
発現を増強するという事実は、ジンセノサイドＲｂ１が
その他の細胞に対しても同様の作用を有することが推測
される。中でも、心筋細胞はＢｃｌ−ｘＬを豊富に発現
しているので、低濃度、低用量のジンセノサイドＲｂ１
が効果・効能を示す標的細胞として可能性が極めて高い
ということを、本発明者ら（阪中、田中）は既出願特許
において記載している（特願平１０−３６５５６０、Ｐ
ＣＴ／ＪＰ９９／０２５５０、ジンセノサイドＲｂ１か
らなる脳細胞又は神経細胞保護剤；特願平１１−３４０
８５０、ＰＣＴ／ＪＰ９９／０６８０４（ジンセノサイ
ドＲｂ１からなる脳血管再生・再構築促進剤ならびに神
経組織二次変性抑止剤）。[0019] By the way,Bcl-x L is because it is also expressed in cells and glial cells of other peripheral tissues as well as nerve cells only, ginsenoside Rb1 is a nerve cellBcl-x L
The fact that enhancing expression, ginsenoside Rb1 that is suspected to have a similar effect also for other cells. Among them, the heart muscle cells express a wealth ofBcl-x L, low density, low dose ginsenoside Rb1
The present inventors (Sakanaka, Tanaka) have described in their already-filed patents that the potential of the target cells is extremely high as a target cell showing an effect / efficacy (Japanese Patent Application No. 10-365560, p.
CT / JP99 / 02550, Brain cell or nerve cell-protective agents comprising ginsenoside Rb1; Japanese Patent Application No. 11-340
850, PCT / JP99 / 06804 (Cerebrovascular regeneration and reconstruction promoter comprising ginsenoside Rb1 and nerve tissue secondary degeneration inhibitor).
【００２０】また、ジンセノサイドＲｂ１は薬用人蔘に
含まれる精製サポニンの一種であるが、単独経口投与に
より血中ではまったく検出されないため事実上ジンセノ
サイドＲｂ１の経口投与自体の薬理作用は否定されてき
た。従って、特願平１０−３６５５６０、ＰＣＴ／ＪＰ
９９／２０５５０（ジンセノサイドＲｂ１からなる脳細
胞又は神経細胞保護剤）ならびに特願平１１−３４０８
５０、ＰＣＴ／ＪＰ９９／０６８０４（ジンセノサイド
Ｒｂ１からなる脳血管再生・再構築促進剤ならびに神経
組織二次変性抑止剤）において、本発明者ら（阪中、田
中）は少量静脈内投与されたジンセノサイドＲｂ１が薬
用人蔘とは独立した効果・効能・用途をもつことが明ら
かにしたわけである。Ginsenoside Rb1 is a kind of purified saponin contained in ginseng, but is not detected in blood at all by single oral administration, so that the pharmacological action of oral administration of ginsenoside Rb1 itself has been denied. Was. Therefore, Japanese Patent Application No. 10-365560, PCT / JP
99/20550 (Brain cell or nerve cell-protective agents comprising ginsenoside Rb1) and Japanese Patent Application No. 11-3408
50, PCT / JP99 / 06804 (a cerebral blood vessel regeneration / reconstruction promoting agent consisting of ginsenoside Rb1 and an inhibitor of secondary degeneration of nerve tissue), the present inventors (Sakanaka, Tanaka) administered a small amount of ginsenoside administered intravenously. rb1 is not revealed to have independent effects, efficacy and usages and ginseng.
【００２１】さて、薬用人蔘の粗サポニン分画には、ジ
ンセノサイドＲｂ１に加えてジンセノサイドＲｂ１と化
学構造が類似している精製サポニンが少なくとも３０種
類前後存在する（庄司、薬用人蔘’９５、ＰＰ２５１−
２６１、熊谷 郎編、共立出版株式会社）。当然のこと
ながらこれらジンセノサイドＲｂ１以外の精製サポニン
も本発明者らの先の出願（特願平１１−２４３３７８、
薬用人蔘からなる脳細胞または神経細胞保護剤）に記載
されたごとく、低用量のジンセノサイドＲｂ１の静脈内
投与と同様の効果・効能を示すことが期待される。ま
た、ジンセノサイドＲｂ１を始めとする薬用人蔘成分を
リード化合物として新規の有用な化合物を作成できるこ
とも本発明の先の出願（特願平１１−２４３３７８）に
おいて記載している。[0021] Now, the crude saponin fraction of ginseng, in addition to the ginsenoside Rb1 ginsenoside Rb1 and the chemical structure is purified saponins are similar there are at least 30 different longitudinal (Shoji, ginseng '95 , PP251-
261, edited by K. Kumagai, Kyoritsu Publishing Co., Ltd.). Naturally application of these purified saponins other than ginsenoside Rb1 also the present inventors previously (Japanese Patent Application No. 11-243378,
As described in Brain cell or nerve cell-protective agents) comprising ginseng, it is expected to show similar effects and efficacy and intravenous administration of low dose ginsenoside Rb1. It is also described in the earlier application of the present invention (Japanese Patent Application No. 11-243378) that can create new useful compounds ginseng蔘成fraction including ginsenoside Rb1 as a lead compound.
【００２２】以上、薬用人蔘経口投与の作用メカニズム
探究の必要性、少量ジンセノサイドＲｂ１の静脈内持続
投与の画期的効果、脳浮腫の予防・治療・処置剤の重要
性、ジンセノサイドＲｂ１のＢｃｌ−ｘＬ発現増強作
用、薬用人蔘の粗サポニン分画もしくはその成分の生理
作用追究の必要性について言及しながら、従来の技術の
概略を記述した。本発明では、まずコウジン末の経口投
与が、スナネズミの一過性前脳虚血モデルよりも重篤で
かつヒト脳梗塞の病態に近い中大脳動脈皮質枝永久閉塞
ラットにおいて、思いもよらぬ優れた脳梗塞抑止作用、
脳浮腫改善効果、ならびに場所学習障害改善作用を示す
ことを見出した。また、コウジン末の経口投与が、細胞
死抑制遺伝子産物Ｂｃｌ−ｘＬ蛋白質の神経組織におけ
る発現を増強することを見出した。さらに、少量もしく
は低用量のジンセノサイドＲｂ１の静脈内持続投与が脳
浮腫の出現を極めて効果的に抑止すること、０．０１〜
１０４ｆｇ／ｍｌもしくは１〜１０４ｆｇ／ｍｌの濃度
のジンセノサイドＲｂ１が心筋細胞のＢｃｌ−ｘＬ発現
を増強し、心筋細胞のアポトーシスもしくはアポトーシ
ス様細胞死を抑止すること、薬用人蔘（コウジン末）の
粗サポニン分画の少量静脈内持続投与が、低用量のジン
セノサイドＲｂ１の静脈内持続投与と同様の脊髄損傷治
療効果を示すことを見出し、本発明を完成した。また、
ジンセノサイドＲｂ１の新規化学的誘導体すなわちジヒ
ドロジンセノサイドＲｂ１が優れた脳梗塞治療効果を示
すことを見出し、本発明を完成した。[0022] Thus, the need for action mechanism exploration of ginseng蔘経port administration, a small amount revolutionary effect of continuous intravenous administration of ginsenoside Rb1, the importance of prevention, treatment and treatment agent for cerebral edema, the ginsenoside Rb1 Bcl-xL expression enhancing action, while referring to the need for physiological effects pursuit of the crude saponin fraction or component thereof ginseng, describing the outline of the prior art. In the present invention, first, oral administration of kojin powder is unexpectedly superior in rats with permanent occlusion of the cortical branch of the middle cerebral artery, which is more severe than the gerbil transient forebrain ischemia model and close to the pathology of human cerebral infarction. Depressed cerebral infarction,
It has been found that the compound has a cerebral edema-improving effect and a location-learning disorder-improving effect. Furthermore, oral administration of powder red ginseng were found to enhance expression in neural tissue of a cell death-suppressing gene product Bcl-xL protein. Further, the continuous intravenous administration of ginsenoside Rb1 minor or low dose to suppress the occurrence of cerebral edema very effectively, 0.01
The 104 fg / ml or 1 to 104 fg / ml ginsenoside Rb1 concentration of enhanceBcl-x L expression cardiomyocytes inhibits apoptosis or apoptosis-like cell death of myocardial cells, ginseng ( small amount continuous intravenous administration of the crude saponin fraction red ginseng powder) is found to exhibit the same spinal cord injury therapeutic and continuous intravenous administration of low doses of ginsenoside Rb1, thereby completing the present invention. Also,
Found to exhibit a novel chemical derivative ie dihydro ginsenosides side Rb1 is excellent cerebral infarction therapeutic effect of ginsenoside Rb1, thereby completing the present invention.
【００２３】[0023]
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、優れ
た脳細胞又は神経細胞保護効果を示し、かつ細胞死抑制
遺伝子産物Ｂｃｌ−ｘＬ蛋白の発現を促すことにより細
胞を保護する薬物を提供することである。さらに本発明
者は、脳浮腫、脳神経組織の浮腫、もしくは脊髄組織の
浮腫を予防、治療、処置するための少量静脈内投与用製
剤を提供すること、脊髄損傷に伴う褥創を予防、治療、
処置するための低用量静脈内投与用製剤を提供するこ
と、神経組織の細胞死抑制遺伝子Ｂｃｌ−ｘＬの発現を
促進させるための静脈内投与用製剤を提供すること、オ
リゴデンドロサイトの細胞死抑制遺伝子産物Ｂｃｌ−ｘ
Ｌの発現を促進させるための医薬組成物を提供するこ
と、オリゴデンドロサイトの保護剤を提供すること、心
筋細胞の細胞死抑制遺伝子産物Ｂｃｌ−ｘＬの発現を促
進するための医薬組成物を提供すること、心筋細胞のア
ポトーシス又はアポトーシス様細胞死を抑止するための
医薬組成物を提供すること、を目的とする。また本発明
の目的は、神経組織又は脊髄組織の損傷・外傷による疾
患の予防、処置、又は治療用の静脈内投与用製剤を提供
すること、ならびに神経組織又は脊髄組織又は脊髄組織
の損傷・外傷によって惹起される脱髄、オリゴデンドロ
サイトのアポトーシス又はアポトーシス様細胞死、神経
組織の二次変性を抑止するための医薬組成物を提供する
ことである。An object of the present invention is to provide a superior brain cells or show the neuroprotective effect, and drugs that protect cells by prompting the expression of a cell death-suppressing gene product Bcl-xL protein To provide. Furthermore, the present inventor, to prevent, treat, prevent cerebral edema, edema of cranial nerve tissue, or edema of spinal cord tissue, to provide a preparation for intravenous administration in a small amount, to prevent and treat pressure sores associated with spinal cord injury,
To provide a low-dose intravenous formulation for the treatment, providing intravenous formulation for promoting the expression of a cell death-suppressing gene Bcl-xL nervous tissue cell death of oligodendrocytes Suppressor gene product Bcl-x
To provide a pharmaceutical composition for promotingL expression, providing a protective agent of oligodendrocytes, the pharmaceutical composition for promoting the expression of a cell death-suppressing gene product Bcl-xL in myocardial cells An object of the present invention is to provide a pharmaceutical composition for inhibiting cardiomyocyte apoptosis or apoptosis-like cell death. Another object of the present invention is to provide a preparation for intravenous administration for preventing, treating, or treating diseases caused by damage or trauma to nerve tissue or spinal cord tissue, and to provide damage or trauma to nerve tissue or spinal cord tissue or spinal cord tissue. To provide a pharmaceutical composition for inhibiting demyelination, apoptosis or apoptotic-like cell death of oligodendrocytes, and secondary degeneration of nervous tissue.
【００２４】本発明は、脳梗塞もしくは脳卒中の予防、
治療、処置のための少量静脈内持続投与製剤を提供する
こと、ならびに神経細胞のアポトーシス又はアポトーシ
ス様神経細胞死を抑止するための医薬組成物を提供する
こと、も目的とする。さらに本発明は、薬用人蔘含有成
分もしくはそれらの代謝産物をリード化合物として利用
することにより新規の有用な脳細胞保護剤又は神経細胞
保護剤が作成できることを実証することを目的とする。The present invention provides a method for preventing cerebral infarction or stroke,
It is another object of the present invention to provide a small-volume intravenous continuous administration preparation for therapy and treatment, and a pharmaceutical composition for inhibiting apoptosis or apoptotic nerve cell death of nerve cells. A further object of the present invention is to demonstrate that a novel and useful agent for protecting brain cells or nerve cells can be prepared by using ginseng-containing components or metabolites thereof as lead compounds.
【００２５】本発明は、細胞保護剤として有用な薬用人
蔘若しくはそのエキス又は薬用人蔘成分若しくはそれら
の代謝産物の有効な経口投与用製剤を提供する。より詳
細には、薬用人蔘若しくはそのエキス又は薬用人蔘成分
若しくはそれらの代謝産物を含有してなるアポトーシス
又はアポトーシス様細胞死抑止用医薬組成物、又は、薬
用人蔘若しくはそのエキス又は薬用人蔘成分若しくはそ
れらの代謝産物を含有してなる細胞死抑制遺伝子産物Ｂ
ｃｌ−ｘＬ蛋白の発現を促進させるための医薬組成物を
提供するものである。また、本発明は薬用人蔘若しくは
そのエキス又は薬用人蔘成分若しくはそれらの代謝産物
を含有してなる脳・神経疾患もしくは脳浮腫の治療、予
防又は処置などのために有用な経口投与製剤を提供する
ものである。The present invention provides a ginseng or an extract thereof, a ginseng component or a metabolite thereof, which is useful as a cytoprotective agent. More specifically, a pharmaceutical composition for inhibiting apoptosis or apoptosis-like cell death comprising a ginseng or an extract thereof, a ginseng component or a metabolite thereof, or a ginseng or an extract thereof or a ginseng Cell death suppressor gene product B comprising the components or their metabolites
there is provided a pharmaceutical composition for promoting the expression of cl-xL protein. The present invention also provides an orally administered preparation containing ginseng or an extract thereof, or a ginseng component or a metabolite thereof, useful for the treatment, prevention or treatment of brain / nervous disease or cerebral edema. Is what you do.
【００２６】さらに、本発明が提供するものは、ジンセ
ノサイドＲｂ１もしくはその代謝産物又はそれらの塩を
含有してなる脳浮腫、脳神経組織の浮腫もしくは脊髄組
織の浮腫を予防、治療、処置するための低用量の静脈内
投与用製剤、ジンセノサイドＲｂ１もしくはその代謝産
物又はそれらの塩を含有してなる脊髄損傷に伴う褥創を
予防、治療、処置するための静脈内持続投与用製剤、ジ
ンセノサイドＲｂ１もしくはその代謝産物又はそれらの
塩を含有してなる、神経組織の細胞死抑制遺伝子Ｂｃｌ
−ｘＬ発現を促進させるための静脈内投与用製剤、ジン
セノサイドＲｂ１もしくはその代謝産物又はそれらの塩
を含有してなるオリゴデンドロサイトの細胞死抑制遺伝
子産物Ｂｃｌ−ｘＬの発現を促進させるための医薬組成
物、ジンセノサイドＲｂ１もしくはその代謝産物又はそ
れらの塩を含有してなるオリゴデンドロサイト保護剤、
ジンセノサイドＲｂ１もしくはその代謝産物又はそれら
の塩を含有してなる心筋細胞の細胞死抑制遺伝子産物Ｂ
ｃｌ−ｘＬの発現を促進するための医薬組成物、ジンセ
ノサイドＲｂ１もしくはその代謝産物又はそれらの塩を
低濃度で含有してなる心筋細胞のアポトーシス又はアポ
トーシス様細胞死を抑止するための医薬組成物、であ
る。Furthermore, those provided by the present invention, ginsenoside Rb1 or cerebral edema comprising a metabolite thereof, or a salt thereof, preventing edema edema or spinal cord tissue brain tissue, treatment, for treating Low-dose intravenous formulation, ginsenoside Rb1 containing ginsenoside Rb1 or a metabolite thereof or a salt thereof for preventing, treating and treating pressure sores associated with spinal cord injury, ginsenoside Rb1 Or a cell death suppressor gene Bcl of neural tissue comprising a metabolite or a salt thereof.
Intravenous formulation for promoting the -xL expression, in order to promote expression of a cell death-suppressing gene product Bcl-xL of ginsenoside Rb1 or oligodendrocytes comprising a metabolite thereof, or a salt thereof A oligodendrocyte protective agent comprising ginsenoside Rb1 or a metabolite thereof or a salt thereof;
Cardiomyocyte cell death suppressor gene product B comprising ginsenoside Rb1 or a metabolite thereof or a salt thereof
The pharmaceutical compositions for promoting the expression of cl-xL, pharmaceutical compositions for suppressing apoptosis or apoptosis-like cell death of myocardial cells comprising at ginsenoside Rb1 or low concentration metabolites or salts thereof that Thing.
【００２７】また、本発明は薬用人蔘の粗サポニン分画
またはその構成成分のいずれかもしくはその代謝産物又
はそれらの塩を含有してなる神経組織又は脊髄組織の損
傷・外傷による疾患の予防、処置又は治療用医薬組成物
を提供する。より詳細には、本発明は神経組織の損傷に
よる神経組織の二次変性の予防、処置又は治療用の医薬
組成物、脊髄損傷、頭部外傷、神経組織又は脊髄組織の
外傷による疾患の予防、処置又は治療用の医薬組成物、
脱髄を伴う神経組織又は脊髄組織の損傷による疾患の予
防、処置又は治療用の医薬組成物、を提供する。また、
本発明は、薬用人蔘の粗サポニン分画またはその成分の
いずれかもしくはその代謝産物又はそれらの塩を含有し
てなるオリゴデンドロサイトのアポトーシス又はアポト
ーシス様細胞死を抑止させるための医薬組成物を提供す
る。本発明は、神経組織二次変性抑止剤として有用な、
薬用人蔘の粗サポニン分画またはその成分のいずれかも
しくはその代謝産物又はそれらの塩をも提供する。ま
た、本発明は前記疾患や病変の予防、処置又は治療のた
めの有効性分、又は脳細胞保護剤若しくは神経細胞保護
剤を探索するためのリード化合物としての薬用人蔘の成
分又はその代謝産物の使用法を提供する。The present invention also provides a method for preventing a disease caused by damage or trauma to nerve tissue or spinal cord tissue containing a crude saponin fraction of ginseng or any of its components or metabolites or salts thereof. A therapeutic or therapeutic pharmaceutical composition is provided. More specifically, the present invention provides a pharmaceutical composition for preventing, treating or treating secondary degeneration of nerve tissue due to nerve tissue damage, spinal cord injury, head trauma, prevention of disease due to nerve tissue or spinal cord tissue injury, A pharmaceutical composition for treatment or therapy,
Provided is a pharmaceutical composition for preventing, treating or treating a disease caused by damage to nerve tissue or spinal cord tissue accompanied by demyelination. Also,
The present invention provides a pharmaceutical composition for inhibiting apoptosis or apoptosis-like cell death of oligodendrocytes comprising a crude saponin fraction of ginseng or any of its components or a metabolite or a salt thereof. provide. The present invention is useful as a nerve tissue secondary degeneration inhibitor,
The present invention also provides a crude saponin fraction of ginseng or any of its components, a metabolite thereof, or a salt thereof. In addition, the present invention provides a component of ginseng or a metabolite thereof as an effective component for the prevention, treatment or treatment of the disease or lesion, or a lead compound for searching for a brain cell protective agent or a neuronal cell protective agent. Provides usage of
【００２８】さらに、本発明は薬用人蔘の成分物質の１
つであるジンセノサイドＲｂ１をリード化合物として作
成できる新規ジンセノサイドＲｂ１誘導体、すなわち細
胞保護剤として有用なジヒドロジンセノサイドＲｂ１を
提供する。より詳細には、ジヒドロジンセノサイドＲｂ
１もしくはその代謝産物又はそれらの塩を含有してな
る、脳梗塞もしくは脳卒中の予防、治療、処置のための
医薬組成物、もしくは神経細胞のアポトーシス又はアポ
トーシス様神経細胞死を抑止するための医薬組成物を提
供する。また、ジヒドロジンセノサイドＲｂ１もしくは
その代謝産物又はそれらの塩を含有してなる静脈内投与
用製剤である医薬組成物、すなわち低濃度、低用量の静
脈内持続投与用製剤もしくは単回静脈内注入製剤である
医薬組成物を提供する。Further, the present invention relates to one of the constituent substances of ginseng.
New ginsenoside Rb1 derivative of ginsenoside Rb1 can be created as a lead compound is One, that provide useful dihydro ginsenosides side Rb1 as cytoprotective agents. More specifically, dihydroginsenoside Rb
A pharmaceutical composition for preventing, treating, or treating cerebral infarction or stroke, or a pharmaceutical composition for inhibiting apoptosis or apoptotic-like nerve cell death of nerve cells, comprising1 or a metabolite thereof or a salt thereof. Offer things. Also, a pharmaceutical composition which is a preparation for intravenous administration containing dihydroginsenoside Rb1 or a metabolite thereof or a salt thereof, that is, a low-concentration, low-dose preparation for continuous intravenous administration or a single intravenous injection preparation A pharmaceutical composition that is:
【００２９】さて前述のごとく、本発明では薬用人蔘の
経口投与実験、低用量ジンセノサイドＲｂ１の静脈内持
続投与実験、ジンセノサイドＲｂ１を用いた培養実験、
薬用人蔘の粗サポニン分画の少量静脈内持続投与実験、
ジンセノサイドＲｂ１の新規化学的誘導体すなわちジヒ
ドロジンセノサイドＲｂ１の静脈内投与実験等に基づい
て記述されているが、以下の記述では、先の出願（特願
平１１−２４３３７８号、薬用人蔘からなる脳細胞また
は神経細胞保護剤）において明らかにされた薬用人蔘の
経口投与実験においてまず説明することとする。その
後、粗サポニン分画の静脈内投与実験を交えながら、低
用量のジンセノサイドＲｂ１の静脈内持続投与実験なら
びに低濃度のジンセノサイドＲｂ１を用いた培養実験に
ついて記述することにする。また、最後にジンセノサイ
ドＲｂ１の新規化学的誘導体ジヒドロジンセノサイドＲ
ｂ１を用いた実験結果を説明する。[0029] Now As described hereinbefore, oral administration experiments ginseng in the present invention, continuous intravenous administration experiment of low doses of ginsenoside Rb1, culture experiments with ginsenoside Rb1,
Intravenous small dose administration experiment of crude saponin fraction of ginseng,
It has been described based on the intravenous administration experiment of new chemical derivative ie dihydro ginsenosides Side Rb1 of ginsenoside Rb1, in the following description, previous application (Japanese Patent Application No. 11-243378, comprising ginseng This will be described first in an oral administration experiment of ginseng clarified in a brain cell or nerve cell protective agent). Then, along with some intravenous experiments of the crude saponin fraction and to describe culture experiments using ginsenoside Rb1 in continuous intravenous administration experiment and low concentrations of ginsenoside Rb1 in low doses. Moreover, finally the new chemical derivative of ginsenoside Rb1-dihydro ginsenosides side R
The experimental results will be described using b1.
【００３０】[0030]
【課題を解決するための手段】本発明は、薬用人蔘もし
くはそのエキス又は薬用人蔘成分もしくはそれらの代謝
産物又はそれらの塩、及び製薬上許容される担体を含有
してなる、細胞死抑制遺伝子産物Ｂｃｌ−ｘＬの発現を
促進させるための医薬組成物に関する。好ましくは、薬
用人蔘もしくはそのエキス又は薬用人蔘成分もしくはそ
れらの代謝産物又はそれらの塩の患部組織における細胞
外液濃度が、１４５ｎｇ／ｍｌ以下、好ましくは１４．
５ｎｇ／ｍｌ以下又は１ｎｇ／ｍｌ以下、より好ましく
は０．０１〜１４５０００ｆｇ／ｍｌ、さらに好ましく
は１〜１４５０００ｆｇ／ｍｌとなるように調整されて
いる細胞死抑制遺伝子産物Ｂｃｌ−ｘＬの発現を促進さ
せるための医薬組成物に関する。また、本発明は、細胞
死抑制遺伝子産物Ｂｃｌ−ｘＬの発現を促進させること
により予防、治療又は処置することができる疾患を有す
る患者に、有効量の、好ましくは患部組織における細胞
外液濃度が１４５ｎｇ／ｍｌ以下、より好ましくは０．
０１〜１４５０００ｆｇ／ｍｌ、さらに好ましくは１〜
１４５０００ｆｇ／ｍｌとなる量の、薬用人蔘もしくは
そのエキス又は薬用人蔘成分もしくはそれらの代謝産物
又はそれらの塩を投与することからなる細胞死抑制遺伝
子産物Ｂｃｌ−ｘＬの発現を促進させることにより予
防、治療又は処置することができる疾患を予防、治療又
は処置する方法に関する。さらに、本発明は、細胞死抑
制遺伝子産物Ｂｃｌ−ｘＬの発現を促進させるための医
薬組成物を製造するための、薬用人蔘もしくはそのエキ
ス又は薬用人蔘成分もしくはそれらの代謝産物又はそれ
らの塩の使用に関する。本発明の細胞死抑制遺伝子産物
Ｂｃｌ−ｘＬの発現を促進させる組織としては、脳神経
組織、脊髄組織、肝臓、脾臓などが挙げられ、脳血管性
痴呆、脳梗塞、脳卒中などの脳・神経疾患の予防、治療
又は処置に有用である。本発明の細胞死抑制遺伝子産物
Ｂｃｌ−ｘＬの発現を促進させるための医薬組成物は、
経口投与用製剤又は静脈内投与用製剤として使用するこ
とができる。DISCLOSURE OF THE INVENTION The present invention relates to a method for inhibiting cell death, comprising ginseng or an extract thereof, a ginseng component or a metabolite or a salt thereof, and a pharmaceutically acceptable carrier. a pharmaceutical composition for promoting the expression of the gene product Bcl-xL. Preferably, the concentration of extracellular fluid in the affected tissue of ginseng, its extract, ginseng component, their metabolites, or salts thereof is 145 ng / ml or less, preferably 14.
5 ng / ml or less or 1 ng / ml or less, more preferably promote expression of 0.01~145000fg / ml, more preferably 1~145000fg / ml and so as coordinated with that cell death suppressing gene productBcl-x L To a pharmaceutical composition. The present invention also prevented by promoting the expression of a cell death-suppressing gene product Bcl-xL, to a patient having a disease that can be treated or treatment, an effective amount, preferably the extracellular fluid concentrations of diseased tissues Is 145 ng / ml or less, more preferably 0.1 ng / ml or less.
01 to 145000 fg / ml, more preferably 1 to
Amount of the 145000fg / ml, by promoting the expression of ginseng or cell death suppressing gene product Bcl-xL comprising administering the extract or ginseng蔘成min, metabolites thereof or salts thereof The present invention relates to a method for preventing, treating or treating a disease that can be prevented, treated or treated. Furthermore, the present invention is to promote the expression of a cell death-suppressing gene product Bcl-xL pharmaceutical composition for the manufacture, ginseng or its extract or ginseng蔘成content or metabolites or their their Related to the use of salt. The cell death suppressing gene product Bcl-xL tissue to facilitate expression of the present invention, cranial tissue, spinal cord tissue, liver, spleen and the like, cerebrovascular dementia, cerebral infarction, brain and neurological disorders such as stroke Is useful for prevention, treatment or treatment of The pharmaceutical compositions for promoting the expression of a cell death-suppressing gene product Bcl-xL of the present invention,
It can be used as a preparation for oral administration or a preparation for intravenous administration.
【００３１】本発明は、薬用人蔘もしくはそのエキス又
は薬用人蔘成分もしくはそれらの代謝産物又はそれらの
塩、及び製薬上許容される担体を含有してなる細胞のア
ポトーシス又はアポトーシス様細胞死抑止用医薬組成物
に関する。好ましくは、薬用人蔘もしくはそのエキス又
は薬用人蔘成分もしくはそれらの代謝産物又はそれらの
塩の患部組織における細胞外液濃度が、１４５ｎｇ／ｍ
ｌ以下、好ましくは１４．５ｎｇ／ｍｌ以下又は１ｎｇ
／ｍｌ以下、より好ましくは０．０１〜１４５０００ｆ
ｇ／ｍｌ、さらに好ましくは１〜１４５０００ｆｇ／ｍ
ｌとなるように調整されている細胞のアポトーシス又は
アポトーシス様細胞死抑止用医薬組成物に関する。ま
た、本発明は、細胞のアポトーシス又はアポトーシス様
細胞死を抑止することにより予防、治療又は処置するこ
とができる疾患を有する患者に、有効量の、好ましくは
患部組織における細胞外液濃度が１４５ｎｇ／ｍｌ以
下、好ましくは１４．５ｎｇ／ｍｌ以下又は１ｎｇ／ｍ
ｌ以下、より好ましくは０．０１〜１４５０００ｆｇ／
ｍｌ、さらに好ましくは１〜１４５０００ｆｇ／ｍｌと
なる量の、薬用人蔘もしくはそのエキス又は薬用人蔘成
分もしくはそれらの代謝産物又はそれらの塩を投与する
ことからなる、細胞のアポトーシス又はアポトーシス様
細胞死を抑止ことにより予防、治療又は処置することが
できる疾患を予防、治療又は処置する方法に関する。さ
らに、本発明は、細胞のアポトーシス又はアポトーシス
様細胞死抑止用医薬組成物を製造するための、薬用人蔘
もしくはそのエキス又は薬用人蔘成分もしくはそれらの
代謝産物又はそれらの塩の使用に関する。本発明の当該
細胞としては、脳細胞、神経細胞、神経幹細胞、グリア
細胞、血管内皮細胞、血管平滑筋細胞、肝細胞、クッパ
ー細胞、類洞内皮細胞、線維芽細胞、胆管上皮細胞、脂
肪蓄積細胞、リンパ球、白血球、細網細胞、大食細胞、
形質細胞などが挙げられ、これらの細胞のアポトーシス
もしくはアポトーシス様細胞死をきたす疾患の治療、予
防、又は処置に有用である。本発明の細胞のアポトーシ
ス又はアポトーシス様細胞死抑止用医薬組成物は、経口
投与用製剤又は静脈内投与用製剤として使用することが
できる。The present invention is directed to inhibiting apoptosis or apoptosis-like cell death of cells comprising ginseng or an extract thereof, a ginseng component or a metabolite or a salt thereof, and a pharmaceutically acceptable carrier. It relates to a pharmaceutical composition. Preferably, the extracellular fluid concentration of the ginseng, its extract, the ginseng component, their metabolites, or their salts in the affected tissue is 145 ng / m2.
l or less, preferably 14.5 ng / ml or less or 1 ng
/ Ml or less, more preferably 0.01 to 145000f
g / ml, more preferably 1 to 145000 fg / m
The present invention relates to a pharmaceutical composition for inhibiting apoptosis or apoptosis-like cell death of cells, which is adjusted to be 1. The present invention also provides a patient having a disease which can be prevented, treated or treated by inhibiting cell apoptosis or apoptosis-like cell death, to obtain an effective amount, preferably an extracellular fluid concentration of 145 ng / cell in the affected tissue. ml or less, preferably 14.5 ng / ml or less or 1 ng / m.
l or less, more preferably 0.01 to 145000 fg /
apoptosis or apoptosis-like cell death, which comprises administering ginseng, an extract thereof, a ginseng component or a metabolite thereof, or a salt thereof in an amount of 1 g / ml, more preferably 1 to 145000 fg / ml. The present invention relates to a method for preventing, treating or treating a disease that can be prevented, treated or treated by inhibiting the disease. Furthermore, the present invention relates to the use of ginseng or an extract thereof, a ginseng component, a metabolite thereof, or a salt thereof for producing a pharmaceutical composition for inhibiting cell apoptosis or apoptosis-like cell death. The cells of the present invention include brain cells, nerve cells, neural stem cells, glial cells, vascular endothelial cells, vascular smooth muscle cells, hepatocytes, Kupffer cells, sinusoidal endothelial cells, fibroblasts, bile duct epithelial cells, and fat accumulation. Cells, lymphocytes, leukocytes, reticulocytes, macrophages,
It is useful for treating, preventing, or treating diseases that cause apoptosis or apoptosis-like cell death of these cells. The pharmaceutical composition for inhibiting cell apoptosis or apoptosis-like cell death of the present invention can be used as a preparation for oral administration or a preparation for intravenous administration.
【００３２】本発明は、薬用人蔘もしくはそのエキス又
は薬用人蔘成分もしくはそれらの代謝産物又はそれらの
塩、及び製薬上許容される担体を含有してなる脳・神経
疾患の治療、予防又は処置のための医薬組成物に関す
る。好ましくは、薬用人蔘もしくはそのエキス又は薬用
人蔘成分もしくはそれらの代謝産物又はそれらの塩の患
部組織における細胞外液濃度が、１４５ｎｇ／ｍｌ以
下、好ましくは１４．５ｎｇ／ｍｌ以下又は１ｎｇ／ｍ
ｌ以下、より好ましくは０．０１〜１４５０００ｆｇ／
ｍｌ、さらに好ましくは１〜１４５０００ｆｇ／ｍｌと
なるように調整されている脳・神経疾患の治療、予防又
は処置のための医薬組成物に関する。また、本発明は、
脳・神経疾患を有する患者に、有効量の、好ましくは患
部組織における細胞外液濃度が１４５ｎｇ／ｍｌ以下、
好ましくは１４．５ｎｇ／ｍｌ以下又は１ｎｇ／ｍｌ以
下、より好ましくは０．０１〜１４５０００ｆｇ／ｍ
ｌ、さらに好ましくは１〜１４５０００ｆｇ／ｍｌとな
る量の、薬用人蔘もしくはそのエキス又は薬用人蔘成分
もしくはそれらの代謝産物又はそれらの塩を投与するこ
とからなる、脳・神経疾患を予防、治療又は処置する方
法に関する。さらに、本発明は、脳・神経疾患の治療、
予防又は処置のための医薬組成物を製造するための、薬
用人蔘もしくはそのエキス又は薬用人蔘成分もしくはそ
れらの代謝産物又はそれらの塩の使用に関する。本発明
の前記脳・神経疾患としては、脊髄損傷などの神経組織
又は脊髄組織の損傷；頭部外傷や神経外傷などの神経組
織又は脊髄組織の外傷；オリゴデンドロサイトのアポト
ーシス又はアポトーシス様細胞死による疾患；脳卒中、
脳梗塞、脳出血、クモ膜下出血、頭部外傷、頭蓋内出
血、脊髄損傷、又は神経外傷などによる脳浮腫、脳神経
組織の浮腫もしくは脊髄組織の浮腫；脳血管性痴呆；脳
梗塞；脳卒中；一過性脳虚血発作；神経組織又は脊髄組
織の損傷又は外傷などによる上肢もしくは下肢の麻痺、
排尿障害、自律神経障害、性機能障害もしくは排便障
害、神経因性膀胱などが挙げられる。本発明の脳・神経
疾患の治療、予防又は処置のための医薬組成物は、経口
投与用製剤又は静脈内投与用製剤として使用することが
できる。The present invention relates to the treatment, prevention or treatment of brain and neurological diseases comprising ginseng or an extract thereof, a ginseng component or a metabolite or a salt thereof, and a pharmaceutically acceptable carrier. And a pharmaceutical composition for Preferably, the concentration of extracellular fluid in the diseased tissue of ginseng, its extract, ginseng component, their metabolites, or their salts is 145 ng / ml or less, preferably 14.5 ng / ml or less, or 1 ng / m2.
l or less, more preferably 0.01 to 145000 fg /
The present invention relates to a pharmaceutical composition for the treatment, prevention or treatment of cerebral / neurological diseases, which is adjusted to be 0.1 ml, more preferably 1 to 145000 fg / ml. Also, the present invention
In a patient having a brain / neurological disorder, an effective amount, preferably an extracellular fluid concentration in an affected tissue of 145 ng / ml or less,
Preferably 14.5 ng / ml or less or 1 ng / ml or less, more preferably 0.01 to 145000 fg / m.
Prevention and treatment of cerebral and neurological diseases, comprising administering ginseng or an extract thereof, a ginseng component or a metabolite thereof, or a salt thereof, in an amount of preferably 1 to 145000 fg / ml. Or a method of treating. Further, the present invention is a treatment for brain and neurological diseases,
The present invention relates to the use of ginseng or an extract thereof, a ginseng component or a metabolite thereof, or a salt thereof for producing a pharmaceutical composition for prevention or treatment. The cerebral / nervous diseases of the present invention include damage to nerve tissue or spinal cord tissue such as spinal cord injury; trauma to nerve tissue or spinal cord tissue such as head injury or nerve injury; Disease; stroke,
Cerebral infarction, cerebral hemorrhage, subarachnoid hemorrhage, head trauma, intracranial hemorrhage, spinal cord injury, cerebral edema due to nerve trauma, edema of cerebral nerve tissue or spinal cord tissue; cerebrovascular dementia; cerebral infarction; stroke; Cerebral ischemic attack; paralysis of upper or lower limb due to injury or trauma to nerve tissue or spinal cord tissue,
Urination disorders, autonomic nervous disorders, sexual dysfunction or defecation disorders, neuropathic bladder, and the like. The pharmaceutical composition for treating, preventing or treating brain / neurological diseases of the present invention can be used as a preparation for oral administration or a preparation for intravenous administration.
【００３３】また、本発明は、薬用人蔘もしくはそのエ
キス又は薬用人蔘成分もしくはそれらの代謝産物又はそ
れらの塩からなる脳・神経疾患又は脳浮腫の治療、予防
若しくは処置剤、又は脳細胞若しくは神経細胞保護剤に
関する。The present invention also relates to an agent for treating, preventing or treating brain / nervous diseases or cerebral edema comprising ginseng or its extract, ginseng component or their metabolites or salts thereof, or brain cells or ginseng. The present invention relates to a nerve cell protective agent.
【００３４】本発明は、薬用人蔘もしくはそのエキス又
は薬用人蔘成分もしくはそれらの代謝産物又はそれらの
塩、及び製薬上許容される担体を含有してなる心臓疾患
の治療、予防又は処置のための医薬組成物に関する。好
ましくは、薬用人蔘もしくはそのエキス又は薬用人蔘成
分もしくはそれらの代謝産物又はそれらの塩の患部組織
における細胞外液濃度が、１４５ｎｇ／ｍｌ以下、好ま
しくは１４．５ｎｇ／ｍｌ以下又は１ｎｇ／ｍｌ以下、
より好ましくは０．０１〜１４５０００ｆｇ／ｍｌ、さ
らに好ましくは１〜１４５０００ｆｇ／ｍｌとなるよう
に調整されている心臓疾患の治療、予防又は処置のため
の医薬組成物に関する。また、本発明は、心臓疾患を有
する患者に、有効量の、好ましくは患部組織における細
胞外液濃度が１４５ｎｇ／ｍｌ以下、好ましくは１４．
５ｎｇ／ｍｌ以下又は１ｎｇ／ｍｌ以下、より好ましく
は０．０１〜１４５０００ｆｇ／ｍｌ、さらに好ましく
は１〜１４５０００ｆｇ／ｍｌとなる量の、薬用人蔘も
しくはそのエキス又は薬用人蔘成分もしくはそれらの代
謝産物又はそれらの塩を投与することからなる、心臓疾
患を予防、治療又は処置する方法に関する。さらに、本
発明は、心臓疾患の治療、予防又は処置のための医薬組
成物を製造するための、薬用人蔘もしくはそのエキス又
は薬用人蔘成分もしくはそれらの代謝産物又はそれらの
塩の使用に関する。本発明の心臓疾患としては、心筋細
胞のアポトーシスもしくはアポトーシス様心筋細胞死を
伴うものが好ましい。本発明の心臓疾患の治療、予防又
は処置のための医薬組成物は、経口投与用製剤又は静脈
内投与用製剤として使用することができる。The present invention is intended for the treatment, prevention or treatment of heart disease comprising ginseng or an extract thereof, a ginseng component or a metabolite or a salt thereof, and a pharmaceutically acceptable carrier. And a pharmaceutical composition of Preferably, the ginseng or its extract, the ginseng component or their metabolites or their salts have an extracellular fluid concentration of 145 ng / ml or less, preferably 14.5 ng / ml or less or 1 ng / ml in the affected tissue. Less than,
More preferably, it relates to a pharmaceutical composition for treating, preventing or treating a heart disease, which is adjusted to have a concentration of 0.01 to 145000 fg / ml, still more preferably 1 to 145000 fg / ml. The present invention also provides a patient having a heart disease with an effective amount, preferably an extracellular fluid concentration of 145 ng / ml or less, preferably 14.
5 g / ml or less or 1 ng / ml or less, more preferably 0.01 to 145000 fg / ml, and still more preferably 1 to 145000 fg / ml, in an amount of ginseng or an extract thereof, a ginseng component or a metabolite thereof. Or a method for preventing, treating or treating a heart disease, comprising administering a salt thereof. Furthermore, the present invention relates to the use of ginseng or an extract thereof, a ginseng component or a metabolite thereof or a salt thereof for producing a pharmaceutical composition for the treatment, prevention or treatment of heart disease. As the heart disease of the present invention, those accompanied by apoptosis of cardiomyocytes or apoptotic-like cardiomyocyte death are preferable. The pharmaceutical composition for treating, preventing or treating a heart disease of the present invention can be used as a preparation for oral administration or a preparation for intravenous administration.
【００３５】本発明は、薬用人蔘もしくはそのエキス又
は薬用人蔘成分もしくはそれらの代謝産物又はそれらの
塩、及び製薬上許容される担体を含有してなる静脈内投
与用製剤に関する。より詳細には、脊髄損傷、頭部外
傷、神経外傷、脳血管性痴呆、脳梗塞、脳卒中若しくは
一過性脳虚血発作などの脳・神経疾患、又は心筋細胞の
アポトーシスもしくはアポトーシス様心筋細胞死を伴う
心臓疾患などの心臓疾患の治療、予防又は処置のための
静脈内投与用製剤に関する。好ましくは、薬用人蔘もし
くはそのエキス又は薬用人蔘成分もしくはそれらの代謝
産物又はそれらの塩の患部組織における細胞外液濃度
が、１４５ｎｇ／ｍｌ以下、好ましくは１４．５ｎｇ／
ｍｌ以下又は１ｎｇ／ｍｌ以下、より好ましくは０．０
１〜１４５０００ｆｇ／ｍｌ、さらに好ましくは１〜１
４５０００ｆｇ／ｍｌとなるように調整されている、低
濃度の静脈内投与用製剤に関する。本発明の静脈内投与
用製剤は、単回静脈内注入製剤又は静脈内持続投与製剤
のいずれのものであってもよい。したがって、本発明
は、前記した本発明の静脈内投与用製剤からなる脳細
胞、神経細胞又は心筋細胞の保護剤を提供する。また、
本発明は、脳・神経疾患及び／又は心臓疾患を有する患
者に、有効量の、好ましくは患部組織における細胞外液
濃度が１４５ｎｇ／ｍｌ以下、好ましくは１４．５ｎｇ
／ｍｌ以下又は１ｎｇ／ｍｌ以下、より好ましくは０．
０１〜１４５０００ｆｇ／ｍｌ、さらに好ましくは１〜
１４５０００ｆｇ／ｍｌとなる量の、薬用人蔘もしくは
そのエキス又は薬用人蔘成分もしくはそれらの代謝産物
又はそれらの塩を含有してなる静脈内投与用製剤を投与
することからなる、脳・神経疾患及び／又は心臓疾患を
予防、治療又は処置する方法に関する。さらに、本発明
は、脳・神経疾患及び／又は心臓疾患の治療、予防又は
処置のための静脈内投与用製剤を製造するための、薬用
人蔘もしくはそのエキス又は薬用人蔘成分もしくはそれ
らの代謝産物又はそれらの塩の使用に関する。The present invention relates to a preparation for intravenous administration comprising ginseng or an extract thereof, a ginseng component or a metabolite or a salt thereof, and a pharmaceutically acceptable carrier. More specifically, cerebral / neurological diseases such as spinal cord injury, head trauma, neurotrauma, cerebrovascular dementia, cerebral infarction, stroke or transient ischemic attack, or apoptosis or apoptotic-like cardiomyocyte death of cardiomyocytes The present invention relates to a preparation for intravenous administration for the treatment, prevention or treatment of a heart disease such as a heart disease accompanied by the above. Preferably, the concentration of extracellular fluid in the affected tissue of ginseng, its extract, ginseng component, their metabolites, or salts thereof is 145 ng / ml or less, preferably 14.5 ng / ml.
ml or less or 1 ng / ml or less, more preferably 0.0
1-15000 fg / ml, more preferably 1-1
It relates to a low concentration preparation for intravenous administration, which is adjusted to be 45000 fg / ml. The preparation for intravenous administration of the present invention may be either a single intravenous injection preparation or a continuous intravenous preparation. Therefore, the present invention provides a protective agent for brain cells, nerve cells or cardiomyocytes comprising the above-mentioned preparation for intravenous administration of the present invention. Also,
The present invention provides a patient having a brain / nervous disease and / or a heart disease with an effective amount, preferably an extracellular fluid concentration of not more than 145 ng / ml, preferably 14.5 ng in the affected tissue.
/ Ml or less or 1 ng / ml or less, more preferably 0.1 ng / ml or less.
01 to 145000 fg / ml, more preferably 1 to
Administering a ginseng or an extract thereof, a ginseng component or a metabolite or a salt thereof to an amount of 145,000 fg / ml for intravenous administration; And / or a method for preventing, treating or treating heart disease. Further, the present invention relates to a ginseng or an extract thereof, a ginseng component or a metabolite thereof for producing a preparation for intravenous administration for the treatment, prevention or treatment of brain / nervous disease and / or heart disease. It relates to the use of the products or their salts.
【００３６】また、本発明は、ジンセノサイドＲｂ１も
しくはその代謝産物又はそれらの塩、及び製薬上許容さ
れる担体を含有してなる生体組織の浮腫を予防・治療・
処置又は軽減するための医薬組成物に関する。好ましく
は、ジンセノサイドＲｂ１もしくはその代謝産物又はそ
れらの塩の患部における細胞外液濃度が、１０ｎｇ／ｍ
ｌ以下または約９ｎＭ以下、好ましくは１ｎｇ／ｍｌ以
下または約０．９ｎＭ以下、より好ましくは０．０１〜
１００ｆｇ／ｍｌ（約０．００９〜９０ｆＭ）、さらに
好ましくは１〜１０４ｆｇ／ｍｌ（約０．９〜９０００
ｆＭ）となるように調整されている生体組織の浮腫を予
防・治療・処置又は軽減するための医薬組成物に関す
る。また、本発明は、生体組織の浮腫を有する患者に、
有効量の、好ましくは患部組織における細胞外液濃度
が、１０ｎｇ／ｍｌ以下または約９ｎＭ以下、好ましく
は１ｎｇ／ｍｌ以下または約０．９ｎＭ以下、より好ま
しくは０．０１〜１００ｆｇ／ｍｌ（約０．００９〜９
０ｆＭ）、さらに好ましくは１〜１０４ｆｇ／ｍｌ（約
０．９〜９０００ｆＭ）となる量の、ジンセノサイドＲ
ｂ１もしくはその代謝産物又はそれらの塩を投与するこ
とからなる、生体組織の浮腫を予防、治療又は処置する
方法に関する。さらに、本発明は、生体組織の浮腫を予
防・治療・処置又は軽減するための医薬組成物を製造す
るための、ジンセノサイドＲｂ１もしくはその代謝産物
又はそれらの塩の使用に関する。本発明の生体組織の浮
腫としては、脳卒中、脳梗塞、脳出血、クモ膜下出血、
頭部外傷、頭蓋内出血、脊髄損傷、神経外傷などによる
脳浮腫、脳神経組織の浮腫又は脊髄組織の浮腫などが挙
げられる。本発明の生体組織の浮腫を予防・治療・処置
又は軽減するための医薬組成物は、単回静脈内注入製剤
又は静脈内持続投与用製剤などの静脈内投与用製剤が好
ましい。Further, the present invention provides ginsenoside Rb1, metabolites thereof or salts thereof, and edema prevention, treatment, and a pharmaceutically acceptable comprising a carrier body tissue
Pharmaceutical compositions for treating or alleviating. Preferably, ginsenoside Rb1 or a metabolite thereof or a salt thereof has an extracellular fluid concentration of 10 ng / m in the affected area.
1 or less, or about 9 nM or less, preferably 1 ng / ml or less or about 0.9 nM or less, more preferably 0.01 to
100 fg / ml (about 0.009 to 90 fM), more preferably 1 to 104 fg / ml (about 0.9 to 9000)
The present invention relates to a pharmaceutical composition for preventing, treating, treating or reducing edema of a living tissue adjusted to be fM). The present invention also provides a patient having edema of living tissue,
An effective amount, preferably an extracellular solution concentration in the affected tissue of 10 ng / ml or less or about 9 nM or less, preferably 1 ng / ml or less or about 0.9 nM or less, more preferably 0.01 to 100 fg / ml (about 0 .009-9
0 fM), more preferably 1 to 104 fg / ml (about 0.9 to 9000 fM).
comprising administering a b1 or metabolite or salt thereof thereof, preventing edema biological tissue, to a method of treating or treatment. Furthermore, the present invention provides for the manufacture of a pharmaceutical composition for the prevention, treatment, and treatment or reduce the edema of the living tissue, the use of ginsenoside Rb1, metabolites thereof or salts thereof. As the edema of the living tissue of the present invention, stroke, cerebral infarction, cerebral hemorrhage, subarachnoid hemorrhage,
Examples include head trauma, intracranial hemorrhage, spinal cord injury, brain edema due to nerve trauma, edema of cranial nerve tissue, and edema of spinal cord tissue. The pharmaceutical composition for preventing, treating, treating or reducing edema of living tissue of the present invention is preferably a preparation for intravenous administration such as a single intravenous injection preparation or a preparation for continuous intravenous administration.
【００３７】本発明は、ジンセノサイドＲｂ１もしくは
その代謝産物又はそれらの塩、及び製薬上許容される担
体を含有してなる褥創の予防、処置又は治療用医薬組成
物に関する。好ましくは、ジンセノサイドＲｂ１もしく
はその代謝産物又はそれらの塩の患部における細胞外液
濃度が、１０ｎｇ／ｍｌ以下または約９ｎＭ以下、好ま
しくは１ｎｇ／ｍｌ以下または約０．９ｎＭ以下、より
好ましくは０．０１〜１００ｆｇ／ｍｌ（約０．００９
〜９０ｆＭ）、さらに好ましくは１〜１０４ｆｇ／ｍｌ
（約０．９〜９０００ｆＭ）となるように調整されてい
る褥創の予防、処置又は治療用医薬組成物に関する。ま
た、本発明は、褥創の患者に、有効量の、好ましくは患
部組織における細胞外液濃度が、１０ｎｇ／ｍｌ以下ま
たは約９ｎＭ以下、好ましくは１ｎｇ／ｍｌ以下または
約０．９ｎＭ以下、より好ましくは０．０１〜１００ｆ
ｇ／ｍｌ（約０．００９〜９０ｆＭ）、さらに好ましく
は１〜１０４ｆｇ／ｍｌ（約０．９〜９０００ｆＭ）と
なる量の、ジンセノサイドＲｂ１もしくはその代謝産物
又はそれらの塩を投与することからなる、褥創を予防、
治療又は処置する方法に関する。さらに、本発明は、褥
創の予防、処置又は治療用医薬組成物を製造するため
の、ジンセノサイドＲｂ１もしくはその代謝産物又はそ
れらの塩の使用に関する。本発明の褥創としては、脊髄
損傷などによる褥創などが挙げられる。本発明の褥創の
予防、処置又は治療用医薬組成物は、単回静脈内注入製
剤又は静脈内持続投与用製剤などの静脈内投与用製剤が
好ましい。The present invention, ginsenoside Rb1, metabolites thereof or salts thereof, and prevention of decubitus wounds comprising a pharmaceutically acceptable carrier, for the treatment or therapeutic pharmaceutical composition. Preferably, the extracellular fluid concentration of ginsenoside Rb1 or a metabolite thereof or a salt thereof in the affected area is 10 ng / ml or less or about 9 nM or less, preferably 1 ng / ml or less or about 0.9 nM or less, more preferably 0.1 g / ml or less. 01 to 100 fg / ml (about 0.009
９０90 fM), more preferably 1 to 104 fg / ml.
(About 0.9 to 9000 fM), which relates to a pharmaceutical composition for preventing, treating or treating pressure sores. The present invention also provides a patient with a pressure sore with an effective amount, preferably an extracellular fluid concentration of 10 ng / ml or less or about 9 nM or less, preferably 1 ng / ml or less or about 0.9 nM or less, in the affected tissue. Preferably 0.01 to 100f
g / ml (approximately 0.009~90fM), administering more preferably in an amount to be 1~104 fg / ml (approximately 0.9~9000fM), ginsenoside Rb1 or its metabolite or a salt thereof Prevent pressure sores, consisting of
It relates to a method of treatment or treatment. Furthermore, the present invention is the prevention of bedsore, for the manufacture of a treatment or pharmaceutical composition for the treatment, the use of ginsenoside Rb1, metabolites thereof or salts thereof. Examples of the pressure sore of the present invention include a pressure sore due to spinal cord injury and the like. The pharmaceutical composition for prevention, treatment or treatment of pressure sores of the present invention is preferably a preparation for intravenous administration such as a single intravenous infusion preparation or a preparation for continuous intravenous administration.
【００３８】本発明は、ジンセノサイドＲｂ１もしくは
その代謝産物又はそれらの塩、及び製薬上許容される担
体を含有してなる神経麻痺の予防・治療・処置用医薬組
成物に関する。好ましくは、ジンセノサイドＲｂ１もし
くはその代謝産物又はそれらの塩の患部における細胞外
液濃度が、１０ｎｇ／ｍｌ以下または約９ｎＭ以下、好
ましくは１ｎｇ／ｍｌ以下または約０．９ｎＭ以下、よ
り好ましくは０．０１〜１００ｆｇ／ｍｌ（約０．００
９〜９０ｆＭ）、さらに好ましくは１〜１０４ｆｇ／ｍ
ｌ（約０．９〜９０００ｆＭ）となるように調整されて
いる神経麻痺の予防・治療・処置用医薬組成物に関す
る。また、本発明は、神経麻痺の患者に、有効量の、好
ましくは患部組織における細胞外液濃度が、１０ｎｇ／
ｍｌ以下または約９ｎＭ以下、好ましくは１ｎｇ／ｍｌ
以下または約０．９ｎＭ以下、より好ましくは０．０１
〜１００ｆｇ／ｍｌ（約０．００９〜９０ｆＭ）、さら
に好ましくは１〜１０４ｆｇ／ｍｌ（約０．９〜９００
０ｆＭ）となる量の、ジンセノサイドＲｂ１もしくはそ
の代謝産物又はそれらの塩を投与することからなる、神
経麻痺を予防、治療又は処置する方法に関する。さら
に、本発明は、神経麻痺の予防・治療・処置用医薬組成
物を製造するための、ジンセノサイドＲｂ１もしくはそ
の代謝産物又はそれらの塩の使用に関する。本発明の神
経麻痺としては、脊髄損傷後の上肢または下肢の麻痺な
どが挙げられる。本発明の神経麻痺の予防・治療・処置
用医薬組成物は、単回静脈内注入製剤又は静脈内持続投
与用製剤などの静脈内投与用製剤が好ましい。The present invention, ginsenoside Rb1, metabolites thereof or salts thereof, and to prevention, treatment, and a pharmaceutical composition for the treatment of nerve paralysis comprising a pharmaceutically acceptable carrier. Preferably, the extracellular fluid concentration of ginsenoside Rb1 or a metabolite thereof or a salt thereof in the affected area is 10 ng / ml or less or about 9 nM or less, preferably 1 ng / ml or less or about 0.9 nM or less, more preferably 0.1 g / ml or less. 01-100 fg / ml (about 0.00
9 to 90 fM), more preferably 1 to 104 fg / m.
The present invention relates to a pharmaceutical composition for prevention, treatment and treatment of nerve palsy, which is adjusted to 1 (about 0.9 to 9000 fM). The present invention also provides a patient with a nerve palsy with an effective amount, preferably an extracellular fluid concentration in the affected tissue, of 10 ng / cell.
ml or less or about 9 nM or less, preferably 1 ng / ml
Or less, or about 0.9 nM or less, more preferably 0.01 or less.
１００100 fg / ml (about 0.009 to 90 fM), more preferably 1 to 104 fg / ml (about 0.9 to 900 fg / ml).
Amount of the 0FM), comprising administering a ginsenoside Rb1 or metabolites, or salts thereof that, preventing nerve paralysis, to a method of treating or treatment. Furthermore, the present invention provides for the manufacture of a prevention, treatment, and a pharmaceutical composition for the treatment of paralysis, relates to the use of ginsenoside Rb1, metabolites thereof or salts thereof. The paralysis of the present invention includes paralysis of the upper limb or lower limb after spinal cord injury. The pharmaceutical composition for preventing / treating / treating nerve palsy of the present invention is preferably a preparation for intravenous administration such as a single intravenous injection preparation or a preparation for continuous intravenous administration.
【００３９】本発明は、ジンセノサイドＲｂ１もしくは
その代謝産物又はそれらの塩、及び製薬上許容される担
体を含有してなる排尿障害、性機能障害、もしくは排便
障害の予防・治療・処置用医薬組成物に関する。好まし
くは、ジンセノサイドＲｂ１もしくはその代謝産物又は
それらの塩の患部における細胞外液濃度が、１０ｎｇ／
ｍｌ以下または約９ｎＭ以下、好ましくは１ｎｇ／ｍｌ
以下または約０．９ｎＭ以下、より好ましくは０．０１
〜１００ｆｇ／ｍｌ（約０．００９〜９０ｆＭ）、さら
に好ましくは１〜１０４ｆｇ／ｍｌ（約０．９〜９００
０ｆＭ）となるように調整されている排尿障害、性機能
障害、もしくは排便障害の予防・治療・処置用医薬組成
物に関する。また、本発明は、排尿障害、性機能障害、
もしくは排便障害を有する患者に、有効量の、好ましく
は患部組織における細胞外液濃度が、１０ｎｇ／ｍｌ以
下または約９ｎＭ以下、好ましくは１ｎｇ／ｍｌ以下ま
たは約０．９ｎＭ以下、より好ましくは０．０１〜１０
０ｆｇ／ｍｌ（約０．００９〜９０ｆＭ）、さらに好ま
しくは１〜１０４ｆｇ／ｍｌ（約０．９〜９０００ｆ
Ｍ）となる量の、ジンセノサイドＲｂ１もしくはその代
謝産物又はそれらの塩を投与することからなる、排尿障
害、性機能障害、もしくは排便障害を予防、治療又は処
置する方法に関する。さらに、本発明は、排尿障害、性
機能障害、もしくは排便障害の予防・治療・処置用医薬
組成物を製造するための、ジンセノサイドＲｂ１もしく
はその代謝産物又はそれらの塩の使用に関する。本発明
の排尿障害、性機能障害、もしくは排便障害の予防・治
療・処置用医薬組成物は、単回静脈内注入製剤又は静脈
内持続投与用製剤などの静脈内投与用製剤が好ましい。The present invention, ginsenoside Rb1, metabolites thereof or salts thereof, and a pharmaceutically acceptable comprising a carrier dysuria, sexual dysfunction or prevention, treatment, and treatment for pharmaceutical defecation disorders, About things. Preferably, the extracellular fluid concentration of ginsenoside Rb1 or a metabolite thereof or a salt thereof in the affected area is 10 ng / g.
ml or less or about 9 nM or less, preferably 1 ng / ml
Or less, or about 0.9 nM or less, more preferably 0.01 or less.
１００100 fg / ml (about 0.009 to 90 fM), more preferably 1 to 104 fg / ml (about 0.9 to 900 fg / ml).
0fM). Further, the present invention provides urination disorder, sexual dysfunction,
Alternatively, in patients with defecation disorders, an effective amount, preferably an extracellular fluid concentration in the affected tissue of 10 ng / ml or less or about 9 nM or less, preferably 1 ng / ml or less or about 0.9 nM or less, more preferably 0.1 g / ml or less. 01-10
0 fg / ml (about 0.009 to 90 fM), more preferably 1 to 104 fg / ml (about 0.9 to 9000 fM).
M) comprising administering ginsenoside Rb1 or a metabolite thereof or a salt thereof, to a method for preventing, treating or treating a dysuria, sexual dysfunction or defecation disorder. Furthermore, the present invention is, dysuria, sexual dysfunction or for producing a prevention, treatment, and a pharmaceutical composition for the treatment of bowel disorders, relates to the use of ginsenoside Rb1, metabolites thereof or salts thereof. The pharmaceutical composition for the prevention, treatment and treatment of urination disorder, sexual dysfunction or defecation disorder of the present invention is preferably a preparation for intravenous administration such as a single intravenous injection preparation or a preparation for continuous intravenous administration.
【００４０】本発明は、ジンセノサイドＲｂ１もしくは
その代謝産物又はそれらの塩、及び製薬上許容される担
体を含有してなる神経因性膀胱の予防・治療・処置用医
薬組成物に関する。好ましくは、ジンセノサイドＲｂ１
もしくはその代謝産物又はそれらの塩の患部における細
胞外液濃度が、１０ｎｇ／ｍｌ以下または約９ｎＭ以
下、好ましくは１ｎｇ／ｍｌ以下または約０．９ｎＭ以
下、より好ましくは０．０１〜１００ｆｇ／ｍｌ（約
０．００９〜９０ｆＭ）、さらに好ましくは１〜１０４
ｆｇ／ｍｌ（約０．９〜９０００ｆＭ）となるように調
整されている神経因性膀胱の予防・治療・処置用医薬組
成物に関する。また、本発明は、神経因性膀胱の患者
に、有効量の、好ましくは患部組織における細胞外液濃
度が、１０ｎｇ／ｍｌ以下または約９ｎＭ以下、好まし
くは１ｎｇ／ｍｌ以下または約０．９ｎＭ以下、より好
ましくは０．０１〜１００ｆｇ／ｍｌ（約０．００９〜
９０ｆＭ）、さらに好ましくは１〜１０４ｆｇ／ｍｌ
（約０．９〜９０００ｆＭ）となる量の、ジンセノサイ
ドＲｂ１もしくはその代謝産物又はそれらの塩を投与す
ることからなる、神経因性膀胱を予防、治療又は処置す
る方法に関する。さらに、本発明は、神経因性膀胱の予
防・治療・処置用医薬組成物を製造するための、ジンセ
ノサイドＲｂ１もしくはその代謝産物又はそれらの塩の
使用に関する。本発明の神経因性膀胱の予防・治療・処
置用医薬組成物は、単回静脈内注入製剤又は静脈内持続
投与用製剤などの静脈内投与用製剤が好ましい。The present invention, ginsenoside Rb1, metabolites thereof or salts thereof, and to prevention, treatment, and a pharmaceutical composition for the treatment of neurogenic bladder comprising a pharmaceutically acceptable carrier. Preferably, ginsenoside Rb1
Alternatively, the extracellular fluid concentration of the metabolite or a salt thereof in the affected area is 10 ng / ml or less or about 9 nM or less, preferably 1 ng / ml or less or about 0.9 nM or less, more preferably 0.01 to 100 fg / ml ( about 0.009~90fM), more preferably 1 to 104
The present invention relates to a pharmaceutical composition for preventing, treating, or treating neurogenic bladder, which is adjusted to be fg / ml (about 0.9 to 9000 fM). The present invention also provides a patient with neurogenic bladder having an effective amount, preferably an extracellular fluid concentration in the affected tissue of 10 ng / ml or less or about 9 nM or less, preferably 1 ng / ml or less or about 0.9 nM or less. , More preferably 0.01 to 100 fg / ml (about 0.009 to
90 fM), more preferably 1 to 104 fg / ml
(Approximately 0.9-9000 fM) to a method for preventing, treating or treating neuropathic bladder, comprising administering ginsenoside Rb1 or a metabolite thereof or a salt thereof. Furthermore, the present invention provides for the manufacture of a prevention, treatment, and a pharmaceutical composition for the treatment of neurogenic bladder, relates to the use of ginsenoside Rb1, metabolites thereof or salts thereof. The pharmaceutical composition for prevention, treatment and treatment of neurogenic bladder of the present invention is preferably a preparation for intravenous administration such as a single intravenous injection preparation or a continuous intravenous preparation.
【００４１】本発明は、ジンセノサイドＲｂ１もしくは
その代謝産物又はそれらの塩、及び製薬上許容される担
体を含有してなるオリゴデンドロサイトの細胞死抑制遺
伝子産物Ｂｃｌ−ｘＬの発現を促進させるための医薬組
成物に関する。好ましくは、ジンセノサイドＲｂ１もし
くはその代謝産物又はそれらの塩の患部における細胞外
液濃度が、１０ｎｇ／ｍｌ以下または約９ｎＭ以下、好
ましくは１ｎｇ／ｍｌ以下または約０．９ｎＭ以下、よ
り好ましくは０．０１〜１００ｆｇ／ｍｌ（約０．００
９〜９０ｆＭ）、さらに好ましくは１〜１０４ｆｇ／ｍ
ｌ（約０．９〜９０００ｆＭ）となるように調整されて
いるオリゴデンドロサイトの細胞死抑制遺伝子産物Ｂｃ
ｌ−ｘＬの発現を促進させるための医薬組成物に関す
る。また、本発明は、オリゴデンドロサイトの細胞死抑
制遺伝子産物Ｂｃｌ−ｘＬの発現を促進させることによ
り予防、治療又は処置することができる疾患を有する患
者に、有効量の、好ましくは患部組織における細胞外液
濃度が、１０ｎｇ／ｍｌ以下または約９ｎＭ以下、好ま
しくは１ｎｇ／ｍｌ以下または約０．９ｎＭ以下、より
好ましくは０．０１〜１００ｆｇ／ｍｌ（約０．００９
〜９０ｆＭ）、さらに好ましくは１〜１０４ｆｇ／ｍｌ
（約０．９〜９０００ｆＭ）となる量の、ジンセノサイ
ドＲｂ１もしくはその代謝産物又はそれらの塩を投与す
ることからなる、オリゴデンドロサイトの細胞死抑制遺
伝子産物Ｂｃｌ−ｘＬの発現を促進させることにより予
防、治療又は処置することができる疾患を予防、治療又
は処置する方法に関する。さらに、本発明は、オリゴデ
ンドロサイトの細胞死抑制遺伝子産物Ｂｃｌ−ｘＬの発
現を促進させるための医薬組成物を製造するための、ジ
ンセノサイドＲｂ１もしくはその代謝産物又はそれらの
塩の使用に関する。本発明は、ジンセノサイドＲｂ１も
しくはその代謝産物又はそれらの塩を含有してなるオリ
ゴデンドロサイト保護剤に関する。本発明のオリゴデン
ドロサイトの細胞死抑制遺伝子産物Ｂｃｌ−ｘＬの発現
を促進させるための医薬組成物は、単回静脈内注入製剤
又は静脈内持続投与用製剤などの静脈内投与用製剤が好
ましい。The present invention, in order to promote expression of ginsenoside Rb1 or metabolites thereof or salts thereof, and cell death suppressing gene product Bcl-xL in oligodendrocytes comprising a pharmaceutically acceptable carrier And a pharmaceutical composition. Preferably, the extracellular fluid concentration of ginsenoside Rb1 or a metabolite thereof or a salt thereof in the affected area is 10 ng / ml or less or about 9 nM or less, preferably 1 ng / ml or less or about 0.9 nM or less, more preferably 0.1 g / ml or less. 01-100 fg / ml (about 0.00
9 to 90 fM), more preferably 1 to 104 fg / m.
1 (approximately 0.9 to 9000 fM), an oligodendrocyte cell death suppressor gene product Bc
a pharmaceutical composition for promoting the expression of l-xL. Further, the present invention comprises administering to a patient having a disease that can be prevented by promoting the expression of a cell death-suppressing gene product Bcl-xL in oligodendrocytes, therapy or treatment, an effective amount of, at preferably diseased tissue The extracellular fluid concentration is 10 ng / ml or less or about 9 nM or less, preferably 1 ng / ml or less or about 0.9 nM or less, more preferably 0.01 to 100 fg / ml (about 0.009 g / ml).
９０90 fM), more preferably 1 to 104 fg / ml.
(About 0.9～9000FM) and qs, comprising administering ginsenoside Rb1, metabolites thereof or salts thereof, that promote the expression of a cell death-suppressing gene productBcl-x L in oligodendrocytes The present invention relates to a method for preventing, treating, or treating a disease that can be prevented, treated, or treated. Furthermore, the present invention provides for the manufacture of a pharmaceutical composition for promoting the expression of a cell death-suppressing gene product Bcl-xL in oligodendrocytes, it relates to the use of ginsenoside Rb1, metabolites thereof or salts thereof. The present invention relates to oligodendrocytes protective agent comprising ginsenoside Rb1, metabolites thereof or salts thereof. The pharmaceutical compositions for promoting the expression of a cell death-suppressing gene product Bcl-xL in oligodendrocytes of the present invention, intravenous administration preparation such as a single intravenous infusion preparations or continuous intravenous administration preparation is preferable .
【００４２】本発明は、ジンセノサイドＲｂ１もしくは
その代謝産物又はそれらの塩、及び製薬上許容される担
体を含有してなる心筋細胞のアポトーシス又はアポトー
シス様細胞死を抑止するための医薬組成物に関する。好
ましくは、ジンセノサイドＲｂ１もしくはその代謝産物
又はそれらの塩の患部における細胞外液濃度が、１０ｎ
ｇ／ｍｌ以下または約９ｎＭ以下、好ましくは１ｎｇ／
ｍｌ以下または約０．９ｎＭ以下、より好ましくは０．
０１〜１００ｆｇ／ｍｌ（約０．００９〜９０ｆＭ）、
さらに好ましくは１〜１０４ｆｇ／ｍｌ（約０．９〜９
０００ｆＭ）となるように調整されている心筋細胞のア
ポトーシス又はアポトーシス様細胞死を抑止するための
医薬組成物に関する。また、本発明は、心筋細胞のアポ
トーシス又はアポトーシス様細胞死を抑止することによ
り予防、治療又は処置することができる疾患を有する患
者に、有効量の、好ましくは患部組織における細胞外液
濃度が、１０ｎｇ／ｍｌ以下または約９ｎＭ以下、好ま
しくは１ｎｇ／ｍｌ以下または約０．９ｎＭ以下、より
好ましくは０．０１〜１００ｆｇ／ｍｌ（約０．００９
〜９０ｆＭ）、さらに好ましくは１〜１０４ｆｇ／ｍｌ
（約０．９〜９０００ｆＭ）となる量の、ジンセノサイ
ドＲｂ１もしくはその代謝産物又はそれらの塩を投与す
ることからなる、心筋細胞のアポトーシス又はアポトー
シス様細胞死を抑止することにより予防、治療又は処置
することができる疾患を予防、治療又は処置する方法に
関する。さらに、本発明は、心筋細胞のアポトーシス又
はアポトーシス様細胞死を抑止するための医薬組成物を
製造するための、ジンセノサイドＲｂ１もしくはその代
謝産物又はそれらの塩の使用に関する。本発明の心筋細
胞のアポトーシス又はアポトーシス様細胞死を抑止する
ための医薬組成物は、単回静脈内注入製剤又は静脈内持
続投与用製剤などの静脈内投与用製剤が好ましい。[0042] The present invention relates to a pharmaceutical composition for inhibiting ginsenoside Rb1 or apoptosis or apoptosis-like cell death of the metabolites thereof or salts and cardiomyocytes comprising a pharmaceutically acceptable carrier. Preferably, the concentration of extracellular fluid in the affected part of ginsenoside Rb1 or a metabolite thereof or a salt thereof is 10 n
g / ml or less or about 9 nM or less, preferably 1 ng / ml
ml or less, or about 0.9 nM or less, more preferably 0.
01-100 fg / ml (about 0.009-90 fM),
More preferably, 1 to 104 fg / ml (about 0.9 to 9
000 fM) and a pharmaceutical composition for inhibiting apoptosis or apoptosis-like cell death of cardiomyocytes. The present invention also provides a patient having a disease that can be prevented, treated or treated by inhibiting cardiomyocyte apoptosis or apoptosis-like cell death, an effective amount, preferably an extracellular fluid concentration in the affected tissue, 10 ng / ml or less or about 9 nM or less, preferably 1 ng / ml or less or about 0.9 nM or less, more preferably 0.01 to 100 fg / ml (about 0.009
９０90 fM), more preferably 1 to 104 fg / ml.
(Approximately 0.9-9000 fM) by preventing, treating or treating cardiomyocyte apoptosis or apoptosis-like cell death, which comprises administering ginsenoside Rb1 or a metabolite thereof or a salt thereof. The present invention relates to a method for preventing, treating or treating a disease that can be treated. Furthermore, the present invention provides for the manufacture of a pharmaceutical composition for suppressing apoptosis or apoptosis-like cell death of myocardial cells, to the use of ginsenoside Rb1, metabolites thereof or salts thereof. The pharmaceutical composition for inhibiting apoptosis or apoptotic cell death of cardiomyocytes of the present invention is preferably a preparation for intravenous administration such as a single intravenous infusion preparation or a preparation for continuous intravenous administration.
【００４３】本発明は、ジンセノサイドＲｂ１もしくは
その代謝産物又はそれらの塩、及び製薬上許容される担
体を含有してなる心筋細胞の細胞死抑制遺伝子産物Ｂｃ
ｌ−ｘＬの発現を促進するための医薬組成物。好ましく
は、ジンセノサイドＲｂ１もしくはその代謝産物又はそ
れらの塩の患部における細胞外液濃度が、１０ｎｇ／ｍ
ｌ以下または約９ｎＭ以下、好ましくは１ｎｇ／ｍｌ以
下または約０．９ｎＭ以下、より好ましくは０．０１〜
１００ｆｇ／ｍｌ（約０．００９〜９０ｆＭ）、さらに
好ましくは１〜１０４ｆｇ／ｍｌ（約０．９〜９０００
ｆＭ）となるように調整されている心筋細胞の細胞死抑
制遺伝子産物Ｂｃｌ−ｘＬの発現を促進するための医薬
組成物に関する。また、本発明は、心筋細胞の細胞死抑
制遺伝子産物Ｂｃｌ−ｘＬの発現を促進することにより
予防、治療又は処置することができる疾患を有する患者
に、有効量の、好ましくは患部組織における細胞外液濃
度が、１０ｎｇ／ｍｌ以下または約９ｎＭ以下、好まし
くは１ｎｇ／ｍｌ以下または約０．９ｎＭ以下、より好
ましくは０．０１〜１００ｆｇ／ｍｌ（約０．００９〜
９０ｆＭ）、さらに好ましくは１〜１０４ｆｇ／ｍｌ
（約０．９〜９０００ｆＭ）となる量の、ジンセノサイ
ドＲｂ１もしくはその代謝産物又はそれらの塩を投与す
ることからなる、心筋細胞の細胞死抑制遺伝子産物Ｂｃ
ｌ−ｘＬの発現を促進することにより予防、治療又は処
置することができる疾患を予防、治療又は処置する方法
に関する。さらに、本発明は、心筋細胞の細胞死抑制遺
伝子産物Ｂｃｌ−ｘＬの発現を促進するための医薬組成
物を製造するための、ジンセノサイドＲｂ１もしくはそ
の代謝産物又はそれらの塩の使用に関する。また、本発
明は、ジンセノサイドＲｂ１もしくはその代謝産物又は
それらの塩を含有してなる心筋細胞保護剤に関する。本
発明の心筋細胞の細胞死抑制遺伝子産物Ｂｃｌ−ｘＬの
発現を促進するための医薬組成物は、単回静脈内注入製
剤又は静脈内持続投与用製剤などの静脈内投与用製剤が
好ましい。[0043] The present invention, ginsenoside Rb1 or metabolites thereof or salts thereof, and cell death suppressing gene product Bc of cardiomyocytes comprising a pharmaceutically acceptable carrier
The pharmaceutical compositions for promoting the expression of l-xL. Preferably, ginsenoside Rb1 or a metabolite thereof or a salt thereof has an extracellular fluid concentration of 10 ng / m in the affected area.
1 or less, or about 9 nM or less, preferably 1 ng / ml or less or about 0.9 nM or less, more preferably 0.01 to
100 fg / ml (about 0.009 to 90 fM), more preferably 1 to 104 fg / ml (about 0.9 to 9000)
The pharmaceutical compositions for promoting the expression of a cell death-suppressing gene product Bcl-xL in myocardial cells are adjusted such that fM) relates. Further, the present invention comprises administering to a patient having a disease that can be prevented by promoting the expression of a cell death-suppressing gene product Bcl-xL cardiomyocytes, therapy or treatment, an effective amount of cells in preferably diseased tissue When the external solution concentration is 10 ng / ml or less or about 9 nM or less, preferably 1 ng / ml or less or about 0.9 nM or less, more preferably 0.01 to 100 fg / ml (about 0.009 to
90 fM), more preferably 1 to 104 fg / ml
(About 0.9～9000FM) become quantities, comprising administering ginsenoside Rb1, metabolites thereof or salts thereof, cardiomyocyte cell death suppressing gene product Bc
prevented by increasing the expression of l-xL, therapy or treatment preventing a disease that can be directed to a method of therapy or treatment. Furthermore, the present invention relates to expression of a cell death-suppressing gene product Bcl-xL for the manufacture of a pharmaceutical composition for promoting cardiomyocyte relates to the use of ginsenoside Rb1 or metabolites or their salts thereof. Further, the present invention relates to heart muscle cell-protective agents comprising ginsenoside Rb1, metabolites thereof or salts thereof. The pharmaceutical compositions for promoting the expression of a cell death-suppressing gene product Bcl-xL in myocardial cells of the present invention, intravenous administration preparation such as a single intravenous infusion preparations or continuous intravenous administration preparation is preferable.
【００４４】本発明は、下記構造式（ＩＩ）The present invention provides a compound represented by the following structural formula (II):
【００４５】[0045]
【化３】★３２Embedded image ★ 32
【００４６】で示されるジヒドロジンセノサイドＲｂ１
もしくはその代謝産物又はそれらの塩に関する。Dihydroginsenoside Rb1 represented by
Or a metabolite thereof or a salt thereof.
【００４７】本発明は、前記構造式（ＩＩ）で示される
ジヒドロジンセノサイドＲｂ１もしくは代謝物又はそれ
らの塩、及び製薬上許容される担体を含有してなる細胞
のアポトーシスもしくはアポトーシス様細胞死を抑止す
るための医薬組成物に関する。また、本発明は、細胞の
アポトーシスもしくはアポトーシス様細胞死を抑止する
ことにより予防、治療又は処置することができる疾患疾
患を有する患者に、有効量の前記構造式（ＩＩ）で示さ
れるジヒドロジンセノサイドＲｂ１もしくは代謝物又は
それらの塩を投与することからなる、細胞のアポトーシ
スもしくはアポトーシス様細胞死を抑止することにより
予防、治療又は処置することができる疾患を予防、治療
又は処置する方法に関する。さらに、本発明は、細胞の
アポトーシスもしくはアポトーシス様細胞死を抑止する
ための医薬組成物を製造するための、前記構造式（Ｉ
Ｉ）で示されるジヒドロジンセノサイドＲｂ１もしくは
代謝物又はそれらの塩の使用に関する。当該細胞として
は、虚血巣周辺部（ｉｓｃｈｅｍｉｃ ｐｅｎｕｍｂｒ
ａ）の脳細胞又は神経細胞などが挙げられる。本発明の
細胞のアポトーシスもしくはアポトーシス様細胞死を抑
止するための医薬組成物は、単回静脈内注入製剤又は静
脈内持続投与用製剤などの静脈内投与用製剤が好まし
い。[0047] The present invention suppresses dihydro ginsenosides side Rb1 or metabolites thereof or salts, and apoptosis or apoptosis-like cell death of a cell which comprises a pharmaceutically acceptable carrier represented by the structural formula (II) To a pharmaceutical composition. The present invention also provides a patient having a disease which can be prevented, treated or treated by inhibiting apoptosis or apoptosis-like cell death of a cell, in an effective amount of the dihydroginsenoside Rb represented by the above structural formula (II). A method for preventing, treating or treating a disease which can be prevented, treated or treated by inhibiting cell apoptosis or apoptosis-like cell death, comprising administering1 or a metabolite or a salt thereof. Furthermore, the present invention provides a pharmaceutical composition for inhibiting apoptosis or apoptosis-like cell death of a cell, comprising the structural formula (I)
It relates to the use of dihydroginsenoside Rb1 or a metabolite or a salt thereof shown in I). The cells include ischemic penumbrum (ischemic penumbr)
a) brain cells or nerve cells; The pharmaceutical composition for inhibiting apoptosis or apoptosis-like cell death of the cells of the present invention is preferably a preparation for intravenous administration such as a single intravenous injection preparation or a preparation for continuous intravenous administration.
【００４８】本発明は、前記構造式（ＩＩ）で示される
ジヒドロジンセノサイドＲｂ１もしくは代謝物又はそれ
らの塩、及び製薬上許容される担体を含有してなる脳・
神経疾患の治療、予防又は処置のための医薬組成物に関
する。また、本発明は、脳・神経疾患の患者に、有効量
の前記構造式（ＩＩ）で示されるジヒドロジンセノサイ
ドＲｂ１もしくは代謝物又はそれらの塩を投与すること
からなる、脳・神経疾患を予防、治療又は処置する方法
に関する。さらに、本発明は、脳・神経疾患の治療、予
防又は処置のための医薬組成物を製造するための、前記
構造式（ＩＩ）で示されるジヒドロジンセノサイドＲｂ
１もしくは代謝物又はそれらの塩の使用に関する。本発
明の前記脳・神経疾患としては、脊髄損傷などの神経組
織又は脊髄組織の損傷；頭部外傷や神経外傷などの神経
組織又は脊髄組織の外傷；オリゴデンドロサイトのアポ
トーシス又はアポトーシス様細胞死による疾患；脳卒
中、脳梗塞、脳出血、クモ膜下出血、頭部外傷、頭蓋内
出血、脊髄損傷、又は神経外傷などによる脳浮腫、脳神
経組織の浮腫もしくは脊髄組織の浮腫；脳血管性痴呆；
脳梗塞；脳卒中；一過性脳虚血発作；神経組織又は脊髄
組織の損傷又は外傷などによる上肢もしくは下肢の麻
痺、排尿障害、性機能障害もしくは排便障害、神経因性
膀胱などが挙げられる。本発明の脳・神経疾患の治療、
予防又は処置のための医薬組成物は、単回静脈内注入製
剤又は静脈内持続投与用製剤などの静脈内投与用製剤が
好ましい。[0048] The present invention, brain-comprising a dihydro ginsenosides side Rb1 or metabolites thereof or salts and a pharmaceutically acceptable carrier, represented by the structural formula (II)
The present invention relates to a pharmaceutical composition for treating, preventing or treating a neurological disease. The present invention also provides a method for preventing a brain / neurological disorder, which comprises administering to a patient having a brain / neurological disorder, an effective amount of dihydroginsenoside Rb1 represented by the structural formula (II) or a metabolite or a salt thereof. , Methods of treating or treating. Further, the present invention provides a dihydroginsenoside Rb represented by the above structural formula (II) for producing a pharmaceutical composition for treating, preventing or treating brain / neurological diseases.
1 or a metabolite or a salt thereof. The cerebral / nervous diseases of the present invention include damage to nerve tissue or spinal cord tissue such as spinal cord injury; trauma to nerve tissue or spinal cord tissue such as head injury or nerve injury; apoptosis or apoptosis-like cell death of oligodendrocytes Disease; cerebral edema due to stroke, cerebral infarction, cerebral hemorrhage, subarachnoid hemorrhage, head trauma, intracranial hemorrhage, spinal cord injury, or nerve trauma, edema of cranial nerve tissue or spinal cord tissue; cerebrovascular dementia;
Cerebral infarction; stroke; transient cerebral ischemic attack; paralysis of upper or lower limbs due to damage or trauma to nerve tissue or spinal cord tissue, urination disorder, sexual dysfunction or defecation disorder, neurogenic bladder, and the like. Treatment of brain and neurological diseases of the present invention,
The pharmaceutical composition for prevention or treatment is preferably a preparation for intravenous administration such as a single intravenous injection preparation or a preparation for continuous intravenous administration.
【００４９】本発明は、薬用人蔘もしくはそのエキス又
は薬用人蔘成分もしくはそれらの代謝産物又はそれらの
塩をリード化合物として、神経組織又は脊髄組織の疾患
に対する予防、処置又は治療のための有効成分を探索す
る方法に関する。本発明の薬用人蔘もしくはそのエキス
又は薬用人蔘成分もしくはそれらの代謝産物又はそれら
の塩としては、コウジン末又はその抽出物、薬用人蔘の
粗サポニン分画、非サポニン分画、精製サポニン類、又
はサポニン分画構成成分もしくはその塩などがあげら
れ、薬用人蔘のサポニン分画含有成分としてはジンセノ
サイドＲｂ１が好ましい。また、前記の神経組織又は脊
髄組織の疾患としては、神経組織又は脊髄組織の損傷に
よる疾患もしくは脳梗塞などが挙げられる。また、本発
明は、これらのいずれかに記載の方法により得られた神
経組織又は脊髄組織の疾患に対する予防、処置又は治療
剤に関する。さらに、本発明は、神経組織又は脊髄組織
の疾患に対する予防、処置又は治療のための有効成分、
神経外傷治療剤、脊髄損傷治療剤、頭部外傷治療剤、脳
細胞保護剤又は神経細胞保護剤、又は神経組織又は脊髄
組織の損傷による疾患の予防、処置又は治療用医薬組成
物を探索するためのリード化合物としての薬用人蔘サポ
ニン分画構成成分のいずれか又はその代謝産物の使用に
関する。また、本発明は、薬用人蔘に含有される成分を
リード化合物として脳細胞又は神経細胞の保護作用を有
する化合物を検索する方法又はその使用に関する。The present invention provides an active ingredient for preventing, treating or treating diseases of nerve tissue or spinal cord tissue using ginseng or its extract, ginseng component or metabolite or salt thereof as a lead compound. How to search for. The ginseng or extract thereof, ginseng component or metabolite or salt thereof of the present invention include ginseng powder or extract thereof, crude ginseng crude saponin fraction, non-saponin fraction, purified saponins , or the like saponin fraction constituents or a salt thereof can be mentioned, preferably ginsenoside Rb1 as saponin fraction containing components of ginseng. In addition, examples of the disease of the nerve tissue or the spinal cord tissue include a disease due to damage to the nerve tissue or the spinal cord tissue, cerebral infarction, and the like. The present invention also relates to a preventive, therapeutic or therapeutic agent for diseases of nerve tissue or spinal cord tissue obtained by any of the methods described above. Further, the present invention provides an active ingredient for preventing, treating or treating diseases of nerve tissue or spinal cord tissue,
To search for a pharmaceutical composition for preventing, treating, or treating a nerve injury, a spinal cord injury, a head injury, a brain cell protecting agent or a nerve cell protecting agent, or a disease caused by damage to nerve tissue or spinal cord tissue. The use of any of the components of the ginseng saponin fraction or a metabolite thereof as a lead compound of the present invention. The present invention also relates to a method for using a component contained in ginseng as a lead compound to search for a compound having a protective effect on brain cells or nerve cells, or a use thereof.
【００５０】本発明の「薬用人蔘もしくはそのエキス又
は薬用人蔘成分もしくはそれらの代謝産物又はそれらの
塩」としては、後述する薬用人蔘そのもの；薬用人蔘の
抽出物；当該抽出物からなるエキス；それらのいずれか
を含有してなる製剤；粗サポニン分画、サポニン分画、
精製サポニン分画などの薬用人蔘又はその抽出物からな
る分画；薬用人蔘成分；サポニン分画などの分画構成成
分；これらの代謝産物；それらの塩などが挙げられる。
以下の説明においては、本発明の「薬用人蔘もしくはそ
のエキス又は薬用人蔘成分もしくはそれらの代謝産物又
はそれらの塩」又はその一部を、便宜上「薬用人蔘の粗
サポニン分画構成成分のいずれかもしくはその代謝産物
又はそれらの塩」又は「薬用人蔘の粗サポニン分画又は
その塩」として表現することもある。これらの用語によ
り本発明を説明すると次のように表現することもでき
る。The “ginseng or its extract, or the ginseng component or metabolite or salt thereof” of the present invention includes: ginseng itself; extract of ginseng; Extracts; preparations containing any of them; crude saponin fraction, saponin fraction,
Fractions consisting of ginseng such as purified saponin fractions or extracts thereof; ginseng components; fractional components such as saponin fractions; metabolites thereof; salts thereof.
In the following description, the ginseng or its extract or ginseng component or their metabolites or salts thereof of the present invention or a part thereof is referred to as the `` crude ginseng crude saponin fraction component '' for convenience. Either or its metabolites or their salts "or" crude ginseng crude saponin fraction or its salts ". When the present invention is described by these terms, it can be expressed as follows.
【００５１】本発明は、薬用人蔘の粗サポニン分画構成
成分のいずれかもしくはその代謝産物又はそれらの塩を
含有してなるオリゴデンドロサイトのアポトーシス又は
アポトーシス様細胞死を抑止させるための医薬組成物に
関する。本発明は、神経組織二次変性抑止剤として有用
な、薬用人蔘の粗サポニン分画又はその成分のいずれか
もしくはその代謝産物又はそれらの塩にも関する。これ
らの本発明の医薬組成物は少量静脈内投与用製剤とする
ことが好ましい。さらに詳細には、単回静脈内投与用製
剤もしくは静脈内持続投与用製剤とすることが好まし
い。また本発明は、薬用人蔘もしくは薬用人蔘の粗サポ
ニン分画に含有される生理活性物質又は活性成分の１つ
であるジンセノサイドＲｂ１をリード化合物として作成
される、新規ジンセノサイドＲｂ１誘導体すなわち細胞
保護剤として有用なジヒドロジンセノサイドＲｂ１にも
関する。より詳細には、ジヒドロジンセノサイドＲｂ１
もしくはその代謝産物又はそれらの塩を含有してなる、
脳梗塞もしくは脳卒中の予防、治療、処置のための医薬
組成物、もしくは神経細胞のアポトーシス、アポトーシ
ス様神経細胞死、又は神経細胞の壊死（ネクローシス）
を抑止するための医薬組成物に関する。また、ジヒドロ
ジンセノサイドＲｂ１もしくはその代謝産物又はそれら
の塩を含有してなる静脈内投与用製剤である医薬組成
物、すなわち低濃度、低用量の静脈内持続投与用製剤も
しくは単回静脈内注入製剤である医薬組成物に関する。The present invention relates to a pharmaceutical composition for inhibiting apoptosis or apoptosis-like cell death of oligodendrocytes containing any of the crude saponin fraction constituents of ginseng, a metabolite thereof, or a salt thereof. About things. The present invention also relates to a crude ginseng saponin fraction or any of its components, or a metabolite or a salt thereof, useful as an inhibitor of secondary degeneration of nerve tissue. It is preferable that these pharmaceutical compositions of the present invention are formulated into a small amount for intravenous administration. More specifically, a preparation for single intravenous administration or a preparation for continuous intravenous administration is preferred. The present invention is created ginsenoside Rb1 is one of the physiologically active substance or active ingredient contained in the crude saponin fraction of ginseng or ginseng as a lead compound, new ginsenoside Rb1 derivatives i.e. cells also it relates to useful dihydro ginsenosides side Rb1 as a protective agent. More specifically, dihydroginsenoside Rb1
Or a metabolite thereof or a salt thereof,
Pharmaceutical composition for prevention, treatment and treatment of cerebral infarction or stroke, or apoptosis of nerve cells, apoptotic-like nerve cell death, or necrosis of nerve cells (necrosis)
The present invention relates to a pharmaceutical composition for deterring the disease. In addition, a pharmaceutical composition which is a preparation for intravenous administration comprising dihydroginsenoside Rb1 or a metabolite thereof or a salt thereof, that is, a low-concentration, low-dose preparation for intravenous continuous administration or a single intravenous injection preparation Or a pharmaceutical composition that is:
【００５２】本発明は、神経外傷・脊髄損傷治療効果、
脳細胞又は神経細胞の保護作用を有する化合物として薬
用人蔘に含まれる成分が活性であることを初めて提供す
るものであり、本発明のこの新規な知見に基づけば、本
発明は薬用人蔘に含有される活性成分をリード化合物と
して脳細胞又は神経細胞の保護作用を有する化合物を検
索する方法を提供するものであり、また、本発明は、脳
細胞又は神経細胞の保護作用を有する化合物を検索する
ために薬用人蔘に含有される活性成分のリード化合物と
しての使用を提供するものである。さらに、本発明が提
供するものは、ジンセノサイドＲｂ１もしくはその代謝
産物又はそれらの塩を含有してなる脳浮腫、脳神経組織
の浮腫もしくは脊髄組織の浮腫を予防、治療、処置する
ための低用量の静脈内投与用製剤、ジンセノサイドＲｂ
１もしくはその代謝産物又はそれらの塩を含有してなる
脊髄損傷に伴う褥創を予防、治療、処置するための静脈
内持続投与用製剤、ジンセノサイドＲｂ１もしくはその
代謝産物又はそれらの塩を含有してなる、神経組織の細
胞死抑制遺伝子Ｂｃｌ−ｘＬ発現を促進させるための静
脈内投与用製剤、ジンセノサイドＲｂ１もしくはその代
謝産物又はそれらの塩を含有してなるオリゴデンドロサ
イトの細胞死抑制遺伝子産物Ｂｃｌ−ｘＬの発現を促進
させるための医薬組成物、ジンセノサイドＲｂ１もしく
はその代謝産物又はそれらの塩を含有してなるオリゴデ
ンドロサイト保護剤、ジンセノサイドＲｂ１もしくはそ
の代謝産物又はそれらの塩を含有してなる心筋細胞の細
胞死抑制遺伝子産物Ｂｃｌ−ｘＬの発現を促進するため
の医薬組成物、ジンセノサイドＲｂ１もしくはその代謝
産物又はそれらの塩を低濃度で含有してなる心筋細胞の
アポトーシス又はアポトーシス様細胞死を抑止するため
の医薬組成物である。The present invention provides a therapeutic effect on nerve trauma and spinal cord injury,
The present invention provides, for the first time, an ingredient contained in ginseng as a compound having a protective effect on brain cells or nerve cells, and based on this novel finding of the present invention, the present invention relates to ginseng. The present invention provides a method for searching for a compound having a protective action on brain cells or nerve cells using the contained active ingredient as a lead compound, and the present invention also provides a method for searching for a compound having a protective action on brain cells or nerve cells. Therefore, the present invention provides the use of an active ingredient contained in ginseng as a lead compound. Further, the present invention provides a low dose of ginsenoside Rb1 or a metabolite thereof or a salt thereof for preventing, treating or treating brain edema, cerebral nerve tissue edema or spinal cord tissue edema. Formulation for intravenous administration, ginsenoside Rb
1 or a metabolite thereof, or a preparation for continuous intravenous administration for preventing, treating, or treating pressure sores associated with spinal cord injury comprising ginsenoside Rb1 or a metabolite thereof or a salt thereof. comprising Te, intravenous formulations for promoting cell death suppressing gene Bcl-xL expression of neural tissue, cell death suppressing gene of ginsenoside Rb1 or oligodendrocytes comprising a metabolite thereof, or a salt thereof the pharmaceutical compositions for promoting the expression of the product Bcl-xL, ginsenoside Rb1 or oligodendrocytes protective agent comprising a metabolic product thereof, or a salt thereof, ginsenoside Rb1, metabolites thereof or salts thereof the pharmaceutical compositions for promoting the expression of a cell death-suppressing gene product Bcl-xL in myocardial cells comprising Is a pharmaceutical composition for inhibiting ginsenoside Rb1 or apoptosis or apoptosis-like cell death of its metabolites or myocardial cells comprising the salts thereof at low concentrations.
【００５３】また、本発明は薬用人蔘の粗サポニン分画
又はその成分のいずれかもしくはその代謝産物又はそれ
らの塩を含有してなる神経組織又は脊髄組織の損傷・外
傷による疾患の予防、処置又は治療用医薬組成物を提供
する。より詳細には、本発明は神経組織の損傷による神
経組織の二次変性の予防、処置、治療用医薬組成物、脊
髄損傷、頭部外傷、神経組織又は脊髄組織の外傷による
疾患の予防、処置、治療用医薬組成物、脱髄を伴う神経
組織又は脊髄組織の損傷による疾患の予防、処置又は治
療用の医薬組成物を提供する。また、本発明は、薬用人
蔘の粗サポニン分画又はその成分のいずれかもしくはそ
の代謝産物又はそれらの塩を含有してなるオリゴデンド
ロサイトのアポトーシス又はアポトーシス様細胞死を抑
止させるための医薬組成物を提供する。本発明は、神経
組織二次変性抑止剤として有用な、薬用人蔘の粗サポニ
ン分画又はその成分のいずれかもしくはその代謝産物又
はそれらの塩をも提供する。また、本発明は前記疾患や
病変の予防、処置又は治療のための有効性分、又は脳細
胞保護剤若しくは神経細胞保護剤を探索するためのリー
ド化合物としての薬用人蔘の活性成分又はその代謝産物
の使用を提供する。The present invention also provides a method for preventing or treating diseases caused by damage or trauma to nerve tissue or spinal cord tissue containing a crude saponin fraction of ginseng or any of its components or metabolites or salts thereof. Alternatively, a therapeutic pharmaceutical composition is provided. More specifically, the present invention relates to the prevention, treatment and therapeutic pharmaceutical composition of nerve tissue secondary damage due to nerve tissue damage, spinal cord injury, head injury, prevention and treatment of diseases caused by nerve tissue or spinal cord tissue injury. , A therapeutic pharmaceutical composition, and a pharmaceutical composition for preventing, treating or treating a disease caused by damage to nerve tissue or spinal cord tissue accompanied by demyelination. The present invention also provides a pharmaceutical composition for inhibiting apoptosis or apoptotic cell death of oligodendrocytes comprising a crude saponin fraction of ginseng or any of its components or a metabolite or a salt thereof. Offer things. The present invention also provides a crude saponin fraction of ginseng, any of its components, a metabolite thereof, or a salt thereof, which is useful as an inhibitor of secondary degeneration of nerve tissue. Also, the present invention provides an active ingredient of ginseng or its metabolism as an effective component for preventing, treating or treating the above-mentioned disease or lesion, or a lead compound for searching for a brain cell protective agent or a neuronal cell protective agent. Provide use of the product.
【００５４】さらに、本発明は薬用人蔘の成分もしくは
生理活性物質の１つであるジンセノサイドＲｂ１をリー
ド化合物として作成できる新規ジンセノサイドＲｂ１誘
導体、すなわち細胞保護剤として有用なジヒドロジンセ
ノサイドＲｂ１を提供する。より詳細には、ジヒドロジ
ンセノサイドＲｂ１もしくはその代謝産物又はそれらの
塩を含有してなる、脳梗塞もしくは脳卒中の予防、治
療、処置のための医薬組成物、もしくはその神経細胞の
アポトーシス又はアポトーシス様神経細胞死を抑止する
ための医薬組成物を提供する。また、ジヒドロジンセノ
サイドＲｂ１もしくはその代謝産物又はそれらの塩を含
有してなる静脈内投与用製剤である医薬組成物、すなわ
ち低濃度、低用量の静脈内持続投与用製剤もしくは単回
静脈内注入製剤である医薬組成物を提供する。[0054] Further, the present invention provides a novel ginsenoside Rb1 derivatives, i.e. useful dihydro ginsenosides side Rb1 as cytoprotective agents that can create ginsenoside Rb1 is one of the components or bioactive substances ginseng as lead compounds I do. More specifically, a pharmaceutical composition for preventing, treating or treating cerebral infarction or stroke, or apoptosis or apoptotic-like nerve of the nerve cell, comprising dihydroginsenoside Rb1 or a metabolite thereof or a salt thereof Provided is a pharmaceutical composition for inhibiting cell death. Also, a pharmaceutical composition which is a preparation for intravenous administration containing dihydroginsenoside Rb1 or a metabolite thereof or a salt thereof, that is, a low-concentration, low-dose preparation for continuous intravenous administration or a single intravenous injection preparation A pharmaceutical composition that is:
【００５５】本発明の薬用人蔘若しくはそのエキス又は
薬用人蔘成分若しくはそれらの代謝産物としては、薬用
人蔘、その乾燥物、その一部、それらの粉末又は顆粒
物、コウジンエキスなどのそれらの抽出物、粗サポニン
分画や精製サポニン分画や非サポニン分画などのそれら
の分画、それらから分離される精製サポニン類もしくは
ジンセノサイド類などの成分、それらの成分の活性な代
謝産物などが挙げられる。好ましい薬用人蔘若しくはそ
のエキス又は薬用人蔘成分若しくはそれらの代謝産物と
しては、コウジン末が挙げられるがこれに限定されるも
のではない。本発明の好ましいコウジン末は、韓国煙草
人蔘公社がＰａｎａｘ ｇｉｎｓｅｎｇ Ｃ．Ａ．Ｍｅ
ｙｅｒ（和名オタネニンジン）の６年根を用いて調整し
た公知のものであり、その品質の安定性については、発
明者らもすでに公表した論文において確認している（Ｗ
ｅｎ，Ｔ．−Ｃ．ｅｔ ａｌ．，Ａｃｔａ Ｎｅｕｒｏ
ｐａｔｈｏｌ．，９１，１５−２２，１９９６）。な
お、本邦では、これを販売会社の名にちなんで正官庄コ
ウジン末と呼んでいる。以下の説明においては、本発明
の薬用人蔘若しくはそのエキス又は薬用人蔘成分若しく
はそれらの代謝産物としてコウジン末もしくはその抽出
物を例として使用する。The ginseng or its extract, the ginseng component or its metabolites of the present invention include ginseng, its dried product, a part thereof, their powder or granules, their extract such as kojin extract Products, crude saponin fraction, purified saponin fraction, non-saponin fraction and other such fractions, components separated therefrom such as purified saponins or ginsenosides, active metabolites of these components, etc. . Preferred ginseng or its extract, or ginseng component or metabolite thereof includes but is not limited to ginseng powder. A preferred ginseng powder according to the present invention is Panax ginseng C.I. A. Me
yer (Japanese panax ginseng) is a known product prepared using six-year roots, and the stability of its quality has been confirmed in a paper already published by the inventors (W
en, T .; -C. et al. , Acta Neuro
pathol. , 91, 15-22, 1996). In Japan, this is called Shokansho Kojin End after the name of the sales company. In the following description, ginseng powder or its extract will be used as the ginseng or its extract or ginseng component or metabolite thereof of the present invention.
【００５６】本発明の医薬組成物は、薬用人蔘もしくは
そのエキス又は薬用人蔘成分若しくはそれらの代謝産物
を有効成分とする単剤として使用することもできるが、
他の脳卒中危険因子軽減用薬剤（例えばビタミン剤、脳
循環代謝改善剤、活性酸素・フリーラジカル消去剤、高
脂血症治療薬、等）との合剤として使用することもでき
る。また、本発明の医薬組成物は、製薬上許容される担
体を含有することができる。これらの担体として、賦形
剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤などの医薬の製薬に通常使
用されるものを使用することができる。これらの担体を
用いて、錠剤、散剤、粉剤、徐放剤、顆粒剤、カプセル
剤、坐剤などの剤型に製剤化することもでき、必要に応
じてコーティング製剤とすることもできる。また、非経
口投与剤として製剤化することもできる。The pharmaceutical composition of the present invention can be used as a single agent containing ginseng or an extract thereof or a ginseng component or a metabolite thereof as an active ingredient.
It can also be used as a combination with other drugs for reducing stroke risk factors (for example, vitamins, cerebral circulatory metabolism improvers, active oxygen / free radical scavengers, drugs for treating hyperlipidemia, etc.). Further, the pharmaceutical composition of the present invention may contain a pharmaceutically acceptable carrier. As these carriers, those usually used in pharmaceutical pharmaceuticals such as excipients, lubricants, binders, disintegrants and the like can be used. Using these carriers, they can be formulated into dosage forms such as tablets, powders, powders, sustained-release preparations, granules, capsules, suppositories, etc., and if necessary, into coated preparations. It can also be formulated as a parenteral administration agent.
【００５７】本発明のコウジン末もしくはその抽出物
は、経口投与で虚血巣周辺部（ｉｓｃｈｅｍｉｃ ｐｅ
ｎｕｍｂｒａ）におけるアポトーシス様神経細胞死を抑
止することにより脳梗塞巣を有意に縮小させ、しかも細
胞死抑制遺伝子産物Ｂｃｌ−ｘＬ蛋白発現増強というユ
ニークな作用機序を有し、脳の神経細胞を保護するもの
であり、急性期・慢性期の脳梗塞のみならず脳出血・ク
モ膜下出血の急性期や慢性期あるいは一過性脳虚血発作
に対しても、神経細胞保護薬として利用することができ
る。すなわち、本発明のコウジン末もしくはその抽出物
は脳卒中が疑われる患者に対して、患者の意識と嚥下機
能が保持されている限り、在宅でも経口投与可能な薬物
である。また、糖尿病、高血圧症、脳動脈硬化症、心房
細動、脳動脈瘤、等の基礎疾患を有する脳卒中予備群と
も言うべき高齢者もしくは脳卒中の既往歴を有する患者
が、あらかじめコウジン末を服用しておくと、万一不幸
にして脳卒中発作に見舞われても、コウジン末を服用し
続けることにより脳卒中病巣や高次神経機能障害がコウ
ジン末非服用患者に比べて著しく改善する。脳虚血とい
う病態は脳梗塞のみならず、心不全、重症貧血、ショッ
ク、呼吸障害、心停止、心室細動、降圧剤投与、低血圧
等に伴って生じることが知られている。これらの疾患か
ら脳を守り患者の予後を改善するためにも、本発明のコ
ウジン末もしくはその抽出物からなる医薬組成物は極め
て有効なものである。さらに、コウジン末もしくはその
抽出物は歴史的にみても副作用をほとんど示さないこと
で知られており、本発明者らが今回の各実験例におい
て、コウジン末を経口投与した動物を注意深く観察した
範囲内でも、副作用は検出されなかった。The ginseng powder or the extract of the present invention can be administered orally to an ischemic pea (ischemic pea).
significantly reduced the cerebral infarct by inhibiting the apoptosis-like nerve cell death in Numbra), yet have a unique mechanism of action that cell death suppressing gene product Bcl-xL protein expression enhancing, the nerve cells in the brain Use as a neuroprotective agent not only for acute and chronic cerebral infarction but also for acute and chronic cerebral hemorrhage and subarachnoid hemorrhage or transient ischemic attack Can be. That is, the ginseng powder or the extract of the present invention is a drug that can be orally administered to a patient suspected of having a stroke as long as the patient's consciousness and swallowing function are maintained. In addition, elderly patients who have a basic stroke such as diabetes, hypertension, cerebral arteriosclerosis, atrial fibrillation, cerebral aneurysm, etc. It should be noted that, even if unfortunately suffering from a stroke attack, continuing to take Kojin powder significantly improves stroke foci and higher nervous dysfunction as compared to patients not taking Kojin powder. It is known that the pathological condition called cerebral ischemia occurs not only with cerebral infarction but also with heart failure, severe anemia, shock, respiratory disorders, cardiac arrest, ventricular fibrillation, administration of antihypertensive agents, hypotension, and the like. In order to protect the brain from these diseases and improve the prognosis of patients, the pharmaceutical composition comprising powdered ginseng or its extract of the present invention is extremely effective. Furthermore, Kojin powder or its extract is known to show almost no side effects even in the history, and in each of the experimental examples, the present inventors have carefully observed animals to which Kojin powder was orally administered. No side effects were detected.
【００５８】また、本発明の薬用人蔘若しくはそのエキ
ス又は薬用人蔘成分若しくはそれらの代謝産物、好まし
くはコウジン末を経口投与することにより神経組織にお
ける細胞死抑制遺伝子産物Ｂｃｌ−ｘＬ蛋白の発現が促
進されること、ならびにコウジン末の経口投与が虚血巣
周辺部（ｉｓｃｈｅｍｉｃ ｐｅｎｕｍｂｒａ）におけ
るアポトーシス様神経細胞死を抑止することから判断す
れば、本発明の薬用人蔘若しくはそのエキス又は薬用人
蔘成分若しくはそれらの代謝産物、好ましくはコウジン
末若しくはその抽出物からなる医薬組成物はアポトーシ
ス様神経細胞死を伴う一次性及び二次性神経変性疾患
（アルツハイマー病、ピック病、脊髄小脳変性症、パー
キンソン病、脱髄疾患、舞踏病、筋萎縮性側索硬化症、
緑内障、老人性黄斑変性症、糖尿病性網膜症、網膜中心
動静脈閉塞症、網膜剥離、網膜色素変性症、エイズ脳
症、肝性脳症、脳炎、脳性マヒ、頭部外傷、脊髄損傷、
一酸化炭素中毒、新生児仮死、末梢神経障害、痙性対麻
痺、進行性核上性麻痺、脊髄血管障害、ミトコンドリア
脳筋症、髄膜炎、等）に対しても効能を示すと思われ
る。[0058] In addition, ginseng or its extract or ginseng蔘成fraction or their metabolites of the invention, preferably expression of a cell death-suppressing gene product Bcl-xL protein in neural tissue by orally administering powder red ginseng Ginseng or its extract or ginseng of the present invention, judging from the fact that is promoted, and that oral administration of kojin powder inhibits apoptotic-like nerve cell death in the ischemic penumbra area (ischemic penumbra) Pharmaceutical compositions comprising the components or their metabolites, preferably kozin powder or an extract thereof, are suitable for primary and secondary neurodegenerative diseases associated with apoptotic neuronal death (Alzheimer's disease, Pick's disease, spinocerebellar degeneration, Parkinson's disease) Disease, demyelinating disease, chorea, amyotrophic lateral sclerosis,
Glaucoma, senile macular degeneration, diabetic retinopathy, central retinal arteriovenous obstruction, retinal detachment, retinitis pigmentosa, AIDS encephalopathy, hepatic encephalopathy, encephalitis, cerebral palsy, head trauma, spinal cord injury,
Carbon monoxide poisoning, neonatal asphyxia, peripheral neuropathy, spastic paraplegia, progressive supranuclear palsy, spinal vascular disorders, mitochondrial encephalomyopathy, meningitis, etc.).
【００５９】さて、体重６０ｋｇの成人に投与するある
薬物の量を１とすると、体重３ｋｇの新生児に投与する
同薬物の量は一般にその７分の１程度になる。すなわち
体重１ｋｇあたりの薬物投与量は新生児の場合、成人の
約３倍になるのである。このことから類推すると新生児
よりもさらに体重が少ないラット（体重２５０〜３００
ｇ）やスナネズミ（体重７０〜８０ｇ）では、体重１ｋ
ｇあたりの薬物投与量は、少なくともヒトの４倍程度に
増えるものと考えられる。一般に薬物の血中濃度は腎糸
球体濾過量（ＧＦＲ）に依存すると考えられている。ま
たＧＦＲは体表面積と相関があることが知られているの
で、体表面積から割り出した薬物投与量算定法としてＣ
ｒａｗｆｏｒｄの式、すなわち成人量×体表面積
（ｍ２）／１．７３を用いることができる。体重６０ｋ
ｇ身長１７０ｃｍのヒトの体表面積は約１．７ｍ２、体
重２ｋｇ身長４５ｃｍの新生児の体表面積は約０．１６
ｍ３であるので、この計算式によれば、体重６０ｋｇ身
長１７０ｃｍのヒトの薬物投与量を１としたとき体重２
ｋｇ身長４５ｃｍの新生児の薬物投与量は約１０分の１
ということになる。すなわち、体重１ｋｇあたりの薬物
投与量は、体重６０ｋｇ身長１７０ｃｍの成人で６０分
の１、体重２ｋｇ身長４５ｃｍの新生児で約２０分の１
（すなわち成人の３倍）となるので、やはり体表面積を
もとに薬物投与量を算出しても、前述のごとく体重１ｋ
ｇあたりの薬物投与量は、体重が少なくなるにつれて増
加することが分かる。従って、２ｋｇの新生児よりもさ
らに体重が少ないＳＨ−ＳＰラットやスナネズミでは、
体重１ｋｇあたりの薬物投与量は、ヒト成人（体重６０
ｋｇ）の体重１ｋｇあたりの薬物投与量と比較して少な
くとも４倍程度には多くなると考えられる。Now, assuming that the amount of a certain drug to be administered to an adult weighing 60 kg is 1, the amount of the same drug to be administered to a newborn weighing 3 kg is generally about one seventh of that amount. That is, the dose of a drug per kg of body weight is about three times that of a newborn baby compared to an adult. By analogy with this, rats weighing even less than newborns (weights 250-300)
g) and gerbils (weight 70-80 g)
It is considered that the dose of the drug per g increases at least about four times that of a human. It is generally believed that the blood concentration of a drug depends on the renal glomerular filtration rate (GFR). Since GFR is known to have a correlation with body surface area, CFR is used as a method for calculating a drug dose calculated from body surface area.
The formula of rawford, that is, the amount of adult × body surface area (m2 ) /1.73 can be used. Weight 60k
g A human body with a height of 170 cm has a body surface area of about 1.7 m2 , and a body weight of 2 kg and a newborn baby with a height of 45 cm has a body surface area of about 0.16.
Since in m3, according to this formula, weight 2 when one drug dosage in humans weighing 60kg 170cm tall
The dose of drug for a newborn baby with a height of 45 cm is about 1/10
It turns out that. That is, the dose of a drug per kg of body weight is 1/60 for an adult weighing 60 kg and a height of 170 cm, and about 1/20 for a newborn baby weighing 2 kg and a height of 45 cm.
(Ie, three times that of an adult), so even if the drug dose is calculated based on the body surface area, the
It can be seen that the drug dose per gram increases as the body weight decreases. Therefore, in SH-SP rats and gerbils that weigh less than a 2 kg newborn,
The dose of drug per kg of body weight is human adult (body weight 60
It is considered that the amount is at least about four times as large as the dose of the drug per 1 kg of body weight.
【００６０】ところで、本発明のコウジン末は中大脳動
脈皮質枝（ＭＣＡ）を永久閉塞されたＳＨ−ＳＰラット
（体重２５０〜３００ｇ）において、０．７５〜１．２
ｇ／ｋｇ／日の用量でＭＣＡ永久閉塞前後５週間経口投
与することにより脳梗塞巣を縮小せしめ場所学習障害
（脳血管性痴呆）を改善するという本実験結果に基づけ
ば、体重６０ｋｇのヒト脳卒中患者もしくは脊椎動物
（ペット、家畜等）に投与する量は、体重あたりその４
分の１として計算すると、１日総量で１１．２５ｇから
１８ｇということになる。従って、本発明の医薬組成物
（コウジン末）のヒト脳卒中患者での経口投与量として
は患者の個人差や病状にもよるが、１日あたり２．０ｇ
〜９０ｇ、好ましくは５．６２５ｇ〜３６ｇ、より好ま
しくは１１．２５ｇ〜１８ｇである。神経組織における
Ｂｃｌ−ｘＬ蛋白発現増強剤として、コウジン末を既述
の一次性及び二次性神経変性疾患の予防・治療・処置に
使用する場合も、同様の用量で患者に経口投与すること
が好ましい。また、コウジン末の抽出物（コウジンエキ
ス、粗サポニン分画、非サポニン分画、各種精製サポニ
ン）を経口投与する際にも、前記の用量のコウジン末か
ら抽出した量を投与することが好ましい。おそらくもっ
とも好ましい薬用人蔘（コウジン末）もしくはそのエキ
スの経口投与法は、体重６０ｋｇの哺乳動物において１
日あたり１０ｇ〜３０ｇを３〜４回に分けて投与するこ
とと考えられる。The ginseng powder of the present invention was used in SH-SP rats (body weight: 250-300 g) in which the cortical branch (MCA) of the middle cerebral artery was permanently occluded, in 0.75-1.2 g.
Based on the results of this experiment, cerebral infarction was reduced by oral administration for 5 weeks before and after MCA permanent occlusion at a dose of g / kg / day to improve location learning disability (cerebrovascular dementia). The amount administered to a patient or vertebrate (pet, livestock, etc.) is 4 per body weight.
If calculated as a fraction, the total amount per day is 11.25 g to 18 g. Therefore, the oral dose of the pharmaceutical composition (kojin powder) of the present invention for human stroke patients depends on individual differences and medical conditions of patients, but is 2.0 g per day.
90 g, preferably 5.625 g to 36 g, more preferably 11.25 g to 18 g. As Bcl-xL protein expression enhancer in neuronal tissue, even when using the red ginseng powder to prevention, treatment, and treatment of aforementioned primary and secondary neurodegenerative disease, be administered orally to a patient in the same dosage Is preferred. In addition, when orally administering an extract of ginseng powder (kojin extract, crude saponin fraction, non-saponin fraction, various purified saponins), it is preferable to administer the amount extracted from the ginseng powder of the above-mentioned dose. Perhaps the most preferred method of oral administration of ginseng (kozin powder) or an extract thereof is one in a mammal weighing 60 kg.
It is considered that 10 g to 30 g per day is administered in 3 to 4 divided doses.
【００６１】このように脳神経疾患の治療・予防・処置
のためには比較的高用量のコウジン末を経口投与する必
要があるが、末梢臓器におけるＢｃｌ−ｘＬ発現増強剤
としてコウジン末を経口投与するときは、比較的低用量
で事足りることを本発明では見出している。すなわち２
００ｍｇ／ｋｇ／日の用量でスナネズミにコウジン末を
経口投与することにより、肝臓・脾臓でのＢｃｌ−ｘＬ
蛋白発現増強が認められるという本実験結果に基づけ
ば、体重６０ｋｇのヒトの末梢臓器におけるＢｃｌ−ｘ
Ｌ蛋白発現を促進するのに必要な量は、体重あたりその
４分の１として計算すると、５０ｍｇ／ｋｇ／日という
ことになる。従って、本発明の医薬組成物（コウジン
末）をヒトの末梢臓器におけるＢｃｌ−ｘＬ発現増強剤
として使用する場合には、１日あたりの経口投与量とし
ては、患者の個人差や病状にもよるが、０．６ｇ〜１５
ｇ、好ましくは１．５ｇ〜６ｇ、より好ましくは２ｇ〜
４ｇと考えられる。またこれと同量のコウジン末から抽
出したコウジンエキス（紅蔘エキス）ならびに粗サポニ
ン分画を経口投与しても同様に末梢臓器でのＢｃｌ−ｘ
Ｌ蛋白発現量が増加するものと考えられる。[0061] While such is necessary to orally administered red ginseng powder of relatively high doses for the treatment, prevention and treatment of brain diseases, the oral administration of red ginseng powder as Bcl-xL expression enhancer in peripheral organs In doing so, the present invention has found that relatively low doses are sufficient. That is, 2
200 mg / kg / by orally administering red ginseng powder in gerbils a daily dose,Bcl-x L in the liver, spleen
Based on the results of this experiment that protein expression was enhanced, Bcl-x in human peripheral organs weighing 60 kg was determined.
The amount required to promoteL protein expression, calculated as one quarter of that per body weight, would be 50 mg / kg / day. Therefore, when using the pharmaceutical compositions of the present invention (red ginseng powder) as Bcl-xL expression enhancer in the peripheral organs of human, as the oral dose per day, in individual difference or condition of the patient According to, 0.6g ~ 15
g, preferably 1.5 g to 6 g, more preferably 2 g to
It is considered 4 g. Also, the same amount of ginseng extract (red ginseng extract) extracted from ginseng powder and crude saponin fraction were orally administered, and Bcl-x in peripheral organs was similarly obtained.
It is considered that the expression level ofL protein increases.
【００６２】細胞死抑制遺伝子産物Ｂｃｌ−ｘＬは細胞
を生かすための最後の砦とも言うべき蛋白質であり、脳
神経組織のみならず肝臓、脾臓、免疫系組織、循環系組
織、皮膚を始めとするあらゆる末梢臓器・組織に分布し
て、細胞の生存を支持している。従って、低用量のコウ
ジン末経口投与が肝臓・脾臓等の末梢臓器におけるＢｃ
ｌ−ｘＬ蛋白発現量を増加させるという本実験結果は、
低用量のコウジン末が細胞死を伴う末梢臓器・組織の疾
病や老化に伴う諸症状の治療・予防・処置に有効である
ことを物語っている。このような細胞死を伴う末梢臓器
・組織の疾病の中には、心筋・肝臓・腎臓の虚血再灌流
障害、心筋症、心不全、心筋梗塞、末梢循環不全、褥
創、創傷、熱傷、皮膚潰瘍、口腔内アフタ、口内炎、花
粉症、春季カタル、アトピー性皮膚炎、エイズ、自己免
疫病、免疫不全病、臓器移植後の拒絶反応、筋ジストロ
フィー、角膜損傷、肺梗塞、骨折、筋炎、腱鞘炎、ポリ
オ、壊死性筋膜炎、阻血性拘縮、二分脊椎、放射線障
害、紫外線障害、感染症、膠原病、大動脈炎症候群、急
性動脈閉塞症、筋・腱付着部炎、筋区画症候群、髄膜
瘤、絞扼輪症候群、偽関節、閉塞性血栓血管炎、閉塞性
動脈硬化症、レイノー病、レイノー症候群、血栓性静脈
炎、骨端線離開、骨端症、食中毒、腸管出血性大腸菌感
染症、膵炎、肝炎、腎炎、糖尿病性腎症、糖尿病性心筋
症、舌痛症、等が含まれる。なお、広義には褥創、熱
傷、皮膚潰瘍なども創傷の中に含まれる。その他の細胞
死を伴う器質的疾患や病態については、成書（今日の治
療指針；監修、日野原重明、阿部正和、医学書院；１９
９５）に記載されているが、前述のすべての疾患や病態
の予防・治療・処置のためにコウジン末もしくはその成
分が有効と考えられる。なお、コウジン末、エキス、粗
サポニン分画もしくはその構成成分は、細胞保護作用を
介して、魚介類・甲殻類の養殖、農作物の栽培・育成、
化粧品組成物、入浴剤、健康食品、健康薬、洗眼液、洗
顔液、タバコの栽培、水栽培に利用することができる。
もちろん、内分泌撹乱物質、外傷、毒素、微生物、バイ
オハザード、環境汚染から細胞を保護することもでき
る。本発明の医薬組成物は副作用が少なく、投与量の上
限としてはかなり多量にすることもできるが、１日あた
り１８０ｇ以下、好ましくは１００ｇ以下である。[0062] Cell death-suppressing gene product Bcl-xL is a protein should be called last bastion to take the cell, liver not only brain tissue, spleen, immune system tissue, circulatory system tissues, including the skin It is distributed in all peripheral organs and tissues and supports the survival of cells. Therefore, oral administration of a low dose of kojin powder can reduce Bc in peripheral organs such as liver and spleen.
This experimental result of increasing the l-xL protein expression level,
The results show that low-dose kojin powder is effective in treating, preventing, and treating diseases of peripheral organs and tissues accompanied by cell death and various symptoms associated with aging. Among diseases of peripheral organs and tissues accompanied by such cell death, ischemia / reperfusion injury of myocardium, liver and kidney, cardiomyopathy, heart failure, myocardial infarction, peripheral circulatory insufficiency, pressure sores, wounds, burns, skin Ulcer, oral aphthous, stomatitis, hay fever, spring catarrh, atopic dermatitis, AIDS, autoimmune disease, immunodeficiency disease, rejection after organ transplantation, muscular dystrophy, corneal injury, pulmonary infarction, fracture, myositis, tendonitis, Polio, necrotizing fasciitis, ischemic contracture, spina bifida, radiation damage, ultraviolet damage, infection, collagen disease, aortic syndrome, acute arterial occlusion, muscle and tendon attachment, compartment syndrome, meningeal membrane Aneurysm, strangulated ring syndrome, pseudoarthritis, obstructive thromboangitis, obstructive arteriosclerosis, Raynaud's disease, Raynaud's syndrome, thrombophlebitis, epiphyseal dissection, osteophytosis, food poisoning, enterohemorrhagic Escherichia coli infection , Pancreatitis, hepatitis, nephritis, diabetic nephropathy, diabetes Sex cardiomyopathy, included glossodynia, and the like. In a broad sense, wounds include pressure sores, burns, and skin ulcers. For other organic diseases and pathologies accompanied by cell death, please refer to the Synopsis (Today's Treatment Guidelines; supervision, Shigeaki Hinohara, Masakazu Abe, Medical Shoin;
95), ginseng powder or its components are considered to be effective for the prevention, treatment and treatment of all the above-mentioned diseases and conditions. In addition, ginseng powder, extract, crude saponin fraction or its components are cultivated for fish and shellfish, crustaceans, cultivation and cultivation of agricultural products,
It can be used for cosmetic compositions, bath additives, health foods, health medicines, eyewashes, facewashes, tobacco cultivation and hydroponics.
Of course, it can also protect cells from endocrine disruptors, trauma, toxins, microorganisms, biohazard, and environmental pollution. The pharmaceutical composition of the present invention has few side effects, and the upper limit of the dose can be considerably large, but is 180 g or less, preferably 100 g or less per day.
【００６３】本発明のジンセノサイドＲｂ１からなる医
薬組成物は、ジンセノサイドＲｂ１もしくはその代謝産
物又はそれらの塩を低濃度で含有してなるものが好まし
い。また、本発明は、ジンセノサイドＲｂ１もしくはそ
の代謝産物又はそれらの塩を好ましくは低濃度で含有し
てなる非経口投与製剤が好ましい。これらの本発明の医
薬組成物は、静脈内投与用製剤が好ましいが患部におけ
る細胞外液濃度を低く維持できるのであれば、病変部局
所外用剤、病変部局所注射剤、経口投与製剤、点鼻薬、
点眼薬、点耳薬、坐薬、皮下注射薬、皮内注射薬、筋肉
注射薬、吸入薬、舌下薬、経皮吸収薬等、任意の投与経
路が選択できる。また、ジンセノサイドＲｂ１について
の本発明は前記の静脈内投与用製剤又は病変部局所外用
剤などからなる、浮腫を伴う脳・神経疾患の長期にわた
る治療、予防、若しくは処置剤、褥創の予防、処置、治
療剤、オリゴデンドロサイトの保護剤、Ｂｃｌ−ｘＬ発
現増強剤、又は心筋細胞保護剤に関する。[0063] Pharmaceutical compositions comprising ginsenoside Rb1 of the present invention, it is preferable that ginsenoside Rb1 or its metabolites or salts thereof comprising at low concentrations. Further, the present invention may be formulated for parenteral administration formulation preferably ginsenoside Rb1, metabolites thereof or salts thereof comprising a low concentration is preferred. The pharmaceutical composition of the present invention is preferably a preparation for intravenous administration. ,
Arbitrary administration routes such as eye drops, ear drops, suppositories, subcutaneous injections, intradermal injections, intramuscular injections, inhalants, sublinguals, and transdermal absorbents can be selected. In addition, the present invention for ginsenoside Rb1 comprises a long-term therapeutic, preventive or therapeutic agent for cerebral and neurological diseases accompanied by edema, comprising the above-mentioned preparation for intravenous administration or a topical external preparation for lesions, prevention of pressure sore, treatment, therapeutic agents, protecting agents of oligodendrocytes, Bcl-xL expression enhancer, or to myocardial cell protecting agent.
【００６４】また本発明は、ジンセノサイドＲｂ１又は
その代謝産物を神経組織又は脊髄損傷による疾患もしく
は脳梗塞・脳卒中の予防、処置又は治療用の他の有効成
分を探索するためのリード化合物として使用することが
できることを提供するものである。また、ジンセノサイ
ドＲｂ１の化学構造の一部を修飾してプロドラッグを作
成したのちに、任意の投与経路を選択することも可能で
ある。さらにジンセノサイドＲｂ１もしくはその代謝産
物の標的分子を同定することにより、標的分子の機能を
修飾する新規化合物をも合成して脳梗塞・脳卒中・脊髄
損傷・神経外傷・外傷治療薬の開発を目指すこともでき
る。したがって、本発明は、これらの疾患の新しい予
防、処置又は治療用の有効成分を検索するためのリード
化合物としてのジンセノサイドＲｂ１又はその代謝産物
を提供するものである。[0064] The present invention uses a ginsenoside Rb1 or metabolites thereof nervous tissue or spinal cord injury prevention of a disease or cerebral infarction, stroke due, as lead compounds for exploring other active ingredients for the treatment or therapy It provides what can be done. Further, after creating the prodrug and modified part of the chemical structure of ginsenoside Rb1, it is also possible to select any route of administration. Furthermore, by identifying a target molecule of ginsenoside Rb1 or metabolites thereof, to aim to develop and also synthesized novel compounds that modulate the function of a target molecule cerebral infarction, stroke, spinal cord injuries, neurotrauma, wound treatment agents Can also. Accordingly, the present invention is to provide a new prevention, ginsenoside Rb1 or metabolites thereof as a leading compound for searching an active ingredient for the treatment or therapy of these diseases.
【００６５】本発明のジンセノサイドＲｂ１は、前記し
た構造式（Ｉ）で示されるものであり、ジンセノサイド
Ｒｂ１は、例えば、柴田ら（Ｓｈｉｂａｔａ Ｓ．ｅｔ
ａｌ．，Ｅｃｏｎｏｍｉｃ ａｎｄ ｍｅｄｉｃｉｎ
ａｌ Ｐｌａｎｔ ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｗｏｒｌｄ Ｓ
ｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ｐｐ
２１７−２８４，１９８５）の方法に準じて分離・精
製することができる。このような方法により精製された
ものはその純度が９８％以上であることが、薄層クロマ
トグラフィーならびに核磁気共鳴スペクトルにより確認
されている（Ｋａｗａｓｈｉｍａ Ｙ．ａｎｄ Ｓａｍ
ｕｋａｗａ Ｋ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．
Ｓｏｃ．Ｗａｋａｎ−Ｙａｋｕ，３，２３５−２３６，
１９８６）。[0065] Ginsenoside Rb1 of the present invention are those represented by the structure formula (I), the ginsenoside Rb1, for example, Shibata et al. (Shibata S. et
al. , Economic and medicin
al Plant research, World S
scientific, Philadelphia, pp
217-284, 1985). It is confirmed by thin layer chromatography and nuclear magnetic resonance spectrum that the purity of the product purified by such a method is 98% or higher (Kawashima Y. and Sam).
Ukawa K. et al. , J. et al. Med. Pharmacol.
Soc. Wakan-Yaku, 3, 235-236,
1986).
【００６６】本発明のジンセノサイドＲｂ１は遊離のも
のを使用することもできるが、それを適当な塩と使用す
ることもできる。また、それらの水和物のような溶媒和
物として使用することもできる。本発明のジンセノサイ
ドＲｂ１の濃度は、低濃度が好ましく、より具体的に
は、細胞外液濃度が１ｎｇ／ｍｌ以下、好ましくは１０
ｐｇ／ｍｌ以下、より好ましくは１００ｆｇ／ｍｌ以下
となる濃度である。本発明のジンセノサイドＲｂ１を、
静脈内投与用製剤として使用する場合にも、患者の患部
における細胞外液濃度が前記の濃度になるように製剤を
調整することが好ましい。本発明の医薬組成物や製剤
は、患部組織の細胞外液濃度が０．０１〜１００ｆｇ／
ｍｌもしくは１〜１００００ｆｇ／ｍｌ程度でも充分な
効果が得られる。[0066] Ginsenoside Rb1 of the present invention can also be used as free, although it is also possible to use it with a suitable salt. Also, they can be used as solvates such as hydrates thereof. The concentration of ginsenoside Rb1 of the present invention, low concentrations are preferred, and more specifically, the extracellular fluid concentrations 1 ng / ml or less, preferably 10
pg / ml or less, more preferably 100 fg / ml or less. The ginsenoside Rb1 of the present invention,
Even when used as a preparation for intravenous administration, it is preferable to adjust the preparation so that the concentration of extracellular fluid in the affected area of the patient becomes the above-mentioned concentration. The pharmaceutical composition or preparation of the present invention has an extracellular fluid concentration of the affected tissue of 0.01 to 100 fg /.
Sufficient effects can be obtained even at about ml or 1 to 10,000 fg / ml.
【００６７】少量静脈内投与されたジンセノサイドＲｂ
１は、従来の末梢（腹腔内）投与によるものとは異な
り、脳・神経系に速やかに伝達されることがすでに見出
されている（特願平１０−３６５５６０号、ＰＣＴ／Ｊ
Ｐ９９／０２５５０、ジンセノサイドＲｂ１からなる脳
細胞又は神経細胞保護剤）。本発明の静脈内投与用製剤
は、血管内、好ましくは静脈に直接投与できるものであ
ればよく、生理食塩水、蒸留水、リン酸緩衝液、ブドウ
糖液、リポソーム、脂肪乳剤等に溶解したのちに、単回
静脈内注入用製剤もしくは静脈内持続投与用製剤として
使用できる。また、点滴用組成物などの静脈内投与製剤
に添加して使用できる剤型であってもよい。また、ジン
セノサイドＲｂ１の化学構造の一部を修飾してプロドラ
ッグを作成し、任意の投与経路、投与方法を選択するこ
とができる。たとえば、ジンセノサイドＲｂ１の水酸基
をエステル化してプロドラッグを作成し、脳血液関門を
通過せしめたのち、内因性エステラーゼで加水分解して
脳内へのジンセノサイドＲｂ１移行量を増やすことも可
能となる。Ginsenoside Rb administered in small doses intravenously
No. 1 has been found to be rapidly transmitted to the brain and nervous system, unlike the conventional method by peripheral (intraperitoneal) administration (Japanese Patent Application No. 10-365560, PCT / J
P99 / 02550, Brain cell or nerve cell-protective agents comprising ginsenoside Rb1). The preparation for intravenous administration of the present invention may be any one that can be directly administered intravascularly, preferably intravenously, and is dissolved in physiological saline, distilled water, phosphate buffer, glucose solution, liposome, fat emulsion, In addition, it can be used as a single intravenous injection preparation or a continuous intravenous administration preparation. It may be a dosage form that can be used by adding to an intravenous preparation such as a composition for infusion. Moreover, by modifying a part of the chemical structure of ginsenoside Rb1 to create a prodrug, any route of administration can be selected method of administration. For example, by esterifying the hydroxyl group of ginsenoside Rb1 to create a prodrug, after passed through the blood-brain barrier, it is possible to endogenous esterases hydrolyze increase the ginsenoside Rb1 transition amount into the brain .
【００６８】特願平１０−３６５５６０号、ＰＣＴ／Ｊ
Ｐ９９／０２５５０（ジンセノサイドＲｂ１からなる脳
細胞又は神経細胞保護剤）に記述されたごとく、低用量
のジンセノサイドＲｂ１は静脈内持続投与で脳梗塞巣を
非投与群の１／４程度にまで縮小させ、しかも細胞死抑
制遺伝子産物Ｂｃｌ−ｘＬ発現増強というユニークな作
用機序を有し、脳の神経細胞を保護するものであり、急
性期・慢性期の脳梗塞（脳血栓・脳塞栓）のみならず脳
出血・クモ膜下出血の急性期や慢性期あるいは一過性脳
虚血発作に対しても、神経保護薬として利用することが
できる。すなわち出血傾向を助長しない低用量・低濃度
のジンセノサイドＲｂ１は脳卒中が疑われる患者に対し
て救急車の中でも点滴静注が可能な医薬組成物である。
また、ジンセノサイドＲｂ１を血栓溶解療法を実施する
脳梗塞患者に投与することにより、患者の予後が改善す
る。Japanese Patent Application No. 10-365560, PCT / J
As described in P99 / 02550 (a brain cell or nerve cell protective agent comprising ginsenoside Rb1 ), low-dose ginsenoside Rb1 reduces intracerebral infarction to about 1/4 of that in the non-administration group by continuous intravenous administration. is, moreover have a unique mechanism of action that cell death suppressing gene product Bcl-xL expression enhancement is intended to protect the nerve cells in the brain, cerebral infarction acute-chronic phase (cerebral thrombosis, cerebral embolism) only In addition, it can be used as a neuroprotective drug for acute and chronic phases of cerebral hemorrhage and subarachnoid hemorrhage or for transient ischemic attacks. That ginsenoside Rb1 low doses and low concentrations without promoting bleeding tendency is a pharmaceutical composition capable of intravenous infusion among ambulance to a patient suspected of stroke.
Further, by administering ginsenoside Rb1 in cerebral infarction patients thrombolytic therapy improves the patient's prognosis.
【００６９】それに加えてジンセノサイドＲｂ１は特願
平１１−３４０８５０、ＰＣＴ／ＪＰ９９／０６８０４
（ジンセノサイドＲｂ１からなる脳血管再生・再構築促
進剤ならびに神経組織二次変性抑止剤）において記述さ
れたごとく、最長２８日間の静脈内持続投与により、脳
梗塞病変を１／４程度に縮小するのみならず特に虚血巣
周辺部（ｉｓｃｈｅｍｉｃ ｐｅｎｕｍｂｒａ）で破綻
・減少した血管網をほぼ正常状態にまで復することがで
きる。従って、ジンセノサイドＲｂ１の静脈内投与は脳
卒中後に破綻あるいは減少した脳血管網の再生・再構築
を促進することにより、同薬剤の静脈内投与終了後もひ
とたび救済された脳組織が時間を経過しても正常に機能
することができると思われる。すなわち、本発明のジン
セノサイドＲｂ１は、Ｂｃｌ−ｘＬ蛋白の発現増強なら
びにアポトーシス様神経細胞死抑止という神経細胞への
直接的な保護効果に加えて、脳血管網の再生・再構築と
いうより間接的かつ長期的に起きる防御機構を介して、
障害を受けた脳を守ることが期待される。このように、
脳梗塞発症後すなわち脳血管永久閉塞後の静脈内投与に
より、急性期のみならず発症後１ヶ月目においても脳梗
塞病変を４分の１程度にまで縮小せしめる化合物として
は、ジンセノサイドＲｂ１が人類史上最初のものと考え
られる。従って、今後ジンセノサイドＲｂ１もしくはそ
の代謝産物をリード化合物として、様々な脳細胞又は神
経細胞保護剤を検索、作成製造できる。[0069] Ginsenoside Rb1 in addition to the Japanese Patent Application No. 11-340850, PCT / JP99 / 06804
As described in (Ginsenoside Rb1 consisting of a cerebral blood vessel regeneration / remodeling promoter and a suppressive agent for secondary degeneration of nerve tissue), cerebral infarction lesions are reduced to about 1/4 by continuous intravenous administration for up to 28 days. In addition, the broken and reduced vascular network in the ischemic penumbra, in particular, can be restored to a substantially normal state. Thus, intravenous administration of ginsenoside Rb1 is by promoting regeneration and reconstruction of the cerebral vascular network which collapsed or decreased after stroke, brain tissue after completion of intravenous administration of the drug was also rescued once has passed the time It seems that it can function normally. That is, the indirect than ginsenoside Rb1 of the present invention, in addition to the Bcl-xL direct protective effects on neuronal cells that express enhanced and apoptosis-like nerve cell death suppressing protein, referred to as regeneration and reconstruction of the cerebral vascular network Through a long-lasting defense mechanism
It is expected to protect the disabled brain. in this way,
Ginsenoside Rb1 is a compound that can reduce cerebral infarction lesions to about one-quarter not only in the acute phase but also in the first month after the onset by intravenous administration after the onset of cerebral infarction, that is, after permanent cerebral vascular occlusion. Probably the first in history. Therefore, the future ginsenoside Rb1 or lead compound metabolites thereof, various Brain cell or nerve cell-protective agents search, create manufacturing.
【００７０】一般臨床の場では、脳卒中後に新たな発作
がないにもかかわらず高次神経機能が持続的に低下し、
いわゆる脳卒中後遺症状が悪化の一途をたどる症例があ
とを絶たない。その理由の１つとして脳卒中発作で破綻
・減少した脳血管網の再生や再構築が時として不充分な
ことがあげられる。このような脳卒中後遺症状の改善の
ために、少量のジンセノサイドＲｂ１の静脈内投与、舌
下投与、挿肛投与もしくは点鼻投与が著効を示すことが
期待される。In a general clinical setting, higher nervous function is continuously reduced despite no new attacks after a stroke,
There are no endless cases of worsening post-stroke symptoms. One of the reasons is that regeneration and reconstruction of a cerebrovascular network that has been destroyed or reduced by a stroke attack is sometimes insufficient. For such stroke sequelae like improved intravenous administration of small amounts of ginsenoside Rb1, sublingual administration, it is expected that挿肛administration or nasal administration exhibits remarkable effects.
【００７１】また、ジンセノサイドＲｂ１静脈内投与は
特願平１１−３４０８５０、ＰＣＴ／ＪＰ９９／０６８
０４（ジンセノサイドＲｂ１からなる脳血管再生・再構
築促進剤ならびに神経組織二次変性抑止剤）において発
明されたごとく、血管の再生・再構築という新規な効果
・効能を示す故、血流障害を主症状とする疾病（大動脈
炎症候群、急性末梢動脈閉塞症、閉塞性血栓血管炎、閉
塞性動脈硬化症、レイノー病、痔疾、レイノー症候群
等）に効能を示す可能性がある。もちろんこれらの血流
障害を主症状とする疾病において、血流障害にさらされ
た当該組織における細胞死を抑止することもジンセノサ
イドＲｂ１の忘れてはならない効能である。従って、末
梢組織の血流障害においてもジンセノサイドＲｂ１は少
なくとも２つの作用機構を介して、組織障害を軽減する
ことが期待される。[0071] In addition, ginsenoside Rb1 intravenous administration Hei 11-340850, PCT / JP99 / 068
04 (inhibitor of cerebral blood vessel regeneration / remodeling consisting of ginsenoside Rb1 and inhibitor of secondary degeneration of nerve tissue), it exhibits a novel effect / efficacy of vascular regeneration / remodeling, and thus impairs blood flow. It may be efficacious against diseases as main symptoms (aorticitis syndrome, acute peripheral arterial occlusion, obstructive thromboangitis, obstructive arteriosclerosis, Raynaud's disease, hemorrhoids, Raynaud's syndrome, etc.). Of course in diseases that these blood flow disorders and main symptom, it is also efficacious to remember the ginsenoside Rb1 to suppress cell death in the tissue exposed to blood flow failure. Therefore, ginsenoside Rb1 also in impaired blood flow in the peripheral tissues through at least two mechanisms of action, it is expected to reduce tissue damage.
【００７２】ジンセノサイドＲｂ１からなる医薬組成物
は特願平１１−３４０８５０、ＰＣＴ／ＪＰ９９／０６
８０４（ジンセノサイドＲｂ１からなる脳血管再生・再
構築促進剤ならびに神経組織二次変性抑止剤）において
発明されたごとく、静脈内持続投与により、一次神経病
変とシナプス連絡を有する脳の領域における二次病変を
抑止するので、多くの神経変性疾患や脱髄疾患（アルツ
ハイマー病、ピック病、脊髄小脳変性症、パーキンソン
病、舞踏病、ポリグルタミン病、筋萎縮性側索硬化症、
多発性硬化症等）の二次病変にも効能を示し、これらの
疾病による高次神経機能障害の進行を緩らげ患者のＱＯ
Ｌ（生活の質、Ｑｕａｌｉｔｙ ｏｆＬｉｆｅ）を高め
ることが期待される。もちろん、特願平１０−３６５５
６０号、ＰＣＴ／ＪＰ９９／０２５５０（ジンセノサイ
ドＲｂ１からなる脳細胞又は神経細胞保護剤）に記述さ
れたごとく、アポトーシス様神経細胞死抑止効果、Ｂｃ
ｌ−ｘＬ発現増強効果を介して、これら神経変性疾患の
一次病変にも効果を発揮することが考えられる。[0072] Pharmaceutical compositions comprising ginsenoside Rb1 is Japanese Patent Application No. Hei 11-340850, PCT / JP99 / 06
As invented in 804 (a cerebral blood vessel regeneration / remodeling promoter comprising ginsenoside Rb1 and an inhibitor of secondary degeneration of nerve tissue), intravenous continuous administration causes secondary nervous system in the brain region having synaptic communication with primary nerve lesions. Because it inhibits lesions, many neurodegenerative and demyelinating diseases (Alzheimer's disease, Pick's disease, spinocerebellar degeneration, Parkinson's disease, chorea, polyglutamine, amyotrophic lateral sclerosis,
It also has an effect on secondary lesions such as multiple sclerosis, and slows the progression of higher nervous dysfunction due to these diseases.
It is expected that L (Quality of Life) will be improved. Of course, Japanese Patent Application Hei 10-3655
60 No., PCT / JP99 / 02550 as described in (Brain cell or nerve cell-protective agents comprising ginsenoside Rb1), apoptosis-like nerve cell death suppressing effect, Bc
through l-xL expression enhancing effect, it is conceivable to also effective in primary lesions of neurodegenerative diseases.
【００７３】さらに、ジンセノサイドＲｂ１の静脈内投
与は特願平１１−３４０８５０号、ＰＣＴ／ＪＰ９９／
０６８０４（ジンセノサイドＲｂ１からなる脳血管再生
・再構築促進剤ならびに神経組織二次変性抑止剤）にお
いて発明されたごとく、脊髄損傷動物の対麻痺を著しく
改善する。周知のごとく、神経組織は他の末梢組織に比
べて外傷に対して最も脆弱な組織であるので、ジンセノ
サイドＲｂ１からなる医薬組成物が脊髄損傷の治療・予
防・処置に著効を示すという事実は、ジンセノサイドＲ
ｂ１が中枢神経組織以外の末梢組織の外傷・創傷・熱傷
等にも有効であることを物語っている。後述の実施例に
示すごとく、下位胸髄に圧負荷を加えられた脊髄損傷ラ
ットは、損傷後にジンセノサイドＲｂ１を静脈内投与す
ることにより下肢麻痺（対麻痺）が改善し立ち上がるこ
とが可能となる。生理食塩水（すなわちｖｅｈｉｃｌ
ｅ、媒体）のみを投与された脊髄損傷ラットは両下肢の
麻痺をきたしたままで、まったく立ち上がることができ
なかった。また、現在脊髄損傷治療薬として用いられて
いるソルメドロール（メチルプレドニゾロン）を静脈内
投与しても、脊髄損傷ラットの両下肢麻痺（対麻痺）を
改善することはできなかった。これらのことから判断す
ると、ジンセノサイドＲｂ１の脊髄損傷治療効果は歴史
上最強のものと考えられる。従って、今後ジンセノサイ
ドＲｂ１もしくはその代謝産物をリード化合物として使
用することにより、さらに様々な脊髄損傷ならびに神経
外傷・外傷治療薬が開発されるものと期待される。[0073] In addition, intravenous administration of ginsenoside Rb1 is Japanese Patent Application No. Hei 11-340850, PCT / JP99 /
06804 (an agent for promoting cerebral blood vessel regeneration / remodeling comprising ginsenoside Rb1 and an agent for inhibiting secondary degeneration of nerve tissue) significantly improves paraplegia in spinal cord injured animals. As is well known, since the nerve tissue is the most vulnerable tissue against injury than other peripheral tissues, the fact that they exhibit remarkable effects pharmaceutical composition comprising ginsenoside Rb1 is in the treatment, prevention and treatment of spinal cord injury Is Ginsenoside R
It tells us that b1 is also effective in the central nervous tissue other than the peripheral tissue trauma, wounds, burns, etc.. As shown in the examples below, the spinal cord injured rats applied with pressure load to the lower thoracic cord, it is possible to rise and improve paraplegia (paraplegia) is by intravenous administration of ginsenoside Rb1 after injury . Saline (ie, vehicle)
e, vehicle) alone, the spinal cord injured rats remained paralyzed in both lower limbs and could not stand at all. Intravenous administration of solmedrol (methylprednisolone), which is currently used as a therapeutic drug for spinal cord injury, failed to improve bilateral lower limb paralysis (paraplegia) in rats with spinal cord injury. Judging from these facts, spinal cord injury therapeutic effects of ginsenoside Rb1 is believed to be of history strongest. Therefore, it is expected that by the use of ginsenoside Rb1 or metabolites thereof as a leading compound future, further various spinal cord injury and neurotrauma, wound treatment agents are developed.
【００７４】本発明の低用量ジンセノサイドＲｂ１は、
静脈内持続投与により、脳浮腫、脳神経組織の浮腫もし
くは脊髄組織の浮腫を改善するという新規な効果・効能
を示す。従って、脳出血、脳梗塞、脳塞栓、クモ膜下出
血、頭部外傷、頭蓋内出血、脊髄損傷、けいれん発作
時、けいれん発作後、脳神経外科手術中、脳神経外科手
術前後、脊椎外科手術中、脊椎外科手術前後、脊髄外科
手術中、脊髄外科手術前後において、ジンセノサイドＲ
ｂ１を静脈内投与しておけば前述の疾患、病変、症状、
症候に伴う脳神経組織・脊髄組織の浮腫を予防・治療・
処置することができる。[0074] Low-dose ginsenoside Rb1 of the present invention,
It shows a novel effect / efficacy to improve brain edema, edema of cranial nerve tissue or edema of spinal cord tissue by continuous intravenous administration. Therefore, cerebral hemorrhage, cerebral infarction, cerebral embolism, subarachnoid hemorrhage, head trauma, intracranial hemorrhage, spinal cord injury, during seizures, after seizures, during neurosurgery, before and after neurosurgery, during spine surgery, spine surgery Before and after surgery, during spinal surgery, before and after spinal surgery, ginsenoside R
If b1 is administered intravenously, the aforementioned diseases, lesions, symptoms,
Prevention and treatment of edema of cranial nerve tissue and spinal cord tissue associated with symptoms
Can be treated.
【００７５】また、本発明の低用量ジンセノサイドＲｂ
１の静脈内投与は、褥創の予防・治療・処置にも有用で
あることが新規に見出された。従って、ジンセノサイド
Ｒｂ１は、寝たきり患者の褥創、特に神経外傷、頭部外
傷、脳卒中、脊髄損傷、末梢神経障害、神経痛、神経変
性疾患、脱髄疾患等を有する寝たきり患者の褥創に対し
て優れた効果・効能を示す。The low-dose ginsenoside Rb of the present invention
It was newly found that intravenous administration ofNo. 1 was also useful for prevention, treatment and treatment of pressure sores. Therefore, ginsenoside Rb1 is effective for bed wounds of bedridden patients, particularly for bedridden patients with nerve trauma, head trauma, stroke, spinal cord injury, peripheral neuropathy, neuralgia, neurodegenerative disease, demyelinating disease, etc. Shows excellent effects and efficacy.
【００７６】さらに、本発明のジンセノサイドＲｂ
１は、１０４ｆｇ／ｍｌ以下の濃度域でオリゴデンドロ
サイトのアポトーシスもしくはアポトーシス様細胞死を
抑止し、オリゴデンドロサイトの細胞死抑制遺伝子産物
Ｂｃｌ−ｘＬの発現を上昇せしめるという新規な作用を
示した。従って、低濃度・低用量のジンセノサイドＲｂ
１はオリゴデンドロサイトの細胞死を伴う疾患（例えば
多発性硬化症、ビンスワンガー病、脳の慢性低灌流障
害、白質脳炎（ｌｅｕｋｏ−ｅｎｃｅｐｈａｌｉｔｉ
ｓ）、ａｄｒｅｎｏｌｅｕｋｏｄｙｓｔｒｏｐｈｙ等）
に有用と考えられる。Further, the ginsenoside Rb of the present invention
1 suppresses 10 4fg / ml apoptosis or apoptosis-like cell death of oligodendrocytes in the following concentration range, a novel effect of allowed to increase the expression of a cell death-suppressing gene product Bcl-xL in oligodendrocytes Indicated. Therefore, low concentration and low dose of ginsenoside Rb
1 is a disease associated with oligodendrocyte cell death (eg, multiple sclerosis, Binswanger's disease, chronic hypoperfusion injury of the brain, leuko-encephalitis)
s), adrenoleukodystrophy, etc.)
It is considered useful.
【００７７】本発明のジンセノサイドＲｂ１を静脈内投
与することにより、脳神経組織においても細胞死抑制遺
伝子Ｂｃｌ−ｘＬの発現が上昇することが新規に見出さ
れた。脳神経組織には、神経細胞、グリア細胞（アスト
ロサイト、ミクログリア、オリゴデンドロサイト）、神
経幹細胞、血管内皮細胞、血管平滑筋細胞等が含まれて
いるので、ジンセノサイドＲｂ１の静脈内投与が脳神経
組織における細胞死抑制遺伝子Ｂｃｌ−ｘＬの発現を上
昇せしめるという事実は、前述の脳神経組織構成細胞の
うちのいずれか１つもしくは複数の細胞種が、ジンセノ
サイドＲｂ１の静脈内投与によりＢｃｌ−ｘＬ発現を上
昇せしめると考えられる。すなわち、ジンセノサイドＲ
ｂ１は、前述の細胞のアポトーシスもしくはアポトーシ
ス様細胞死を伴う疾患や症候（たとえば膠原病、動脈硬
化症、腎炎、肝炎、血管損傷等）に有効とされる。ま
た、最近は神経幹細胞移植が難治性神経疾患の治療法の
１つとして注目を浴びつつあるが、ジンセノサイドＲｂ
１を神経幹細胞の保護剤として使用することも可能であ
る。[0077] By the ginsenoside Rb1 of the present invention is administered intravenously, the expression of a cell death-suppressing gene Bcl-xL increases even in cranial nerve tissue has been found in the new. The cranial nerve tissue, nerve cells, glial cells (astrocytes, microglia, oligodendrocytes), neural stem cells, vascular endothelial cells, because it contains vascular smooth muscle cells and the like, intravenous administration of ginsenoside Rb1 is brain tissue the fact that allowed to increase the expression of a cell death-suppressing gene Bcl-xL in may be any one or more cell types of the aforementioned nerve tissue structure cells, Bcl-xL by intravenous administration of ginsenoside Rb1 It is thought to increase expression. That is, ginsenoside R
b1, the disease or symptom (e.g. collagen diseases, arteriosclerosis, nephritis, hepatitis, vascular injury, etc.) with apoptosis or apoptosis-like cell death of the aforementioned cells are effective. Recently, neural stem cell transplantation has been receiving attention as one of the treatment methods for intractable neurological diseases, but ginsenoside Rb
It is also possible to use1 as a protective agent for neural stem cells.
【００７８】前述の中枢神経組織や脳・神経細胞に対す
るジンセノサイドＲｂ１の好ましい効果・効能に加えて
本発明のジンセノサイドＲｂ１は、１ｎｇ／ｍｌ以下の
低濃度域で、より詳しくは１０ｐｇ／ｍｌ以下の低濃度
域で、心筋細胞のアポトーシスもしくはアポトーシス様
細胞死を抑止し、心筋細胞における細胞死抑制遺伝子産
物Ｂｃｌ−ｘＬの発現を上昇せしめた。従って、本発明
の低用量、低濃度のジンセノサイドＲｂ１は心筋細胞の
細胞死を伴うあらゆる疾病（たとえば心筋梗塞、心不
全、心筋症、狭心症、不整脈等）に効果・効能を示すと
される。[0078] Preferred ginsenoside Rb1 of the present invention beside the effectiveness and efficacy of ginsenoside Rb1 for the aforementioned central nervous system and brain, neurons, at 1 ng / ml or lower density region, more particularly below 10 pg / ml in the low concentration range, suppresses apoptosis or apoptosis-like cell death of myocardial cells was raised to expression of a cell death-suppressing gene product Bcl-xL in cardiomyocytes. Thus, low doses of the present invention, are ginsenoside Rb1 in low concentrations all diseases (e.g. myocardial infarction, heart failure, cardiomyopathy, angina pectoris, arrhythmia, etc.) with the cell death of myocardial cells to exhibit effectiveness and efficacy in .
【００７９】さらに、本発明のジンセノサイドＲｂ１の
薬剤としての特徴で、見逃せないのが、これと言った副
作用を示さない点である。たとえば特願平１０−３６５
５６０号、ＰＣＴ／ＪＰ９９／０２５５０（ジンセノサ
イドＲｂ１からなる脳細胞又は神経細胞保護剤）に記述
されたごとく、一酸化窒素供与体であるニトロプルシッ
ドナトリウム（ＳＮＰ）処理をしていない通常の培養神
経細胞にジンセノサイドＲｂ１を添加しても代謝活性に
まったく影響を与えず、ＳＮＰ処理をして傷害を受けた
神経細胞のみを低濃度（１〜１００ｆｇ／ｍｌ）のジン
セノサイドＲｂ１が保護するので、ジンセノサイドＲｂ
１は正常な神経組織の機能にはあまり影響を与えず、病
変部にのみ好ましい効果を発揮することができる。この
点は神経保護薬として開発途上にあるグルタミン酸受容
体拮抗薬よりもはるかに優れた特性といえる。[0079] Further, a feature of the drugs of ginsenoside Rb1 of the present invention, not overlooked is the point showing no side effects said this. For example, Japanese Patent Application No. Hei 10-365
560 No., as described in PCT / JP99 / 02550 (Brain cell or nerve cell-protective agents comprising ginsenoside Rb1), normal culture which does not sodium nitroprusside (SNP) process is a nitric oxide donor be added ginsenoside Rb1 into neural cells without affecting at all the metabolic activity, only neurons injured by the SNP process since ginsenoside Rb1 in low concentrations (1~100fg / ml) protects , Ginsenoside Rb
No. 1 does not significantly affect the function of normal nervous tissue, and can exert a favorable effect only on a lesion. This can be said to be a property far superior to glutamate receptor antagonists that are being developed as neuroprotective drugs.
【００８０】また、ジンセノサイドＲｂ１の脳室内投与
により脳温、脳血流、血圧にも影響が及ばないこともす
でに報告されている（Ｌｉｍ Ｊ．−Ｈ．ｅｔ ａ
ｌ．，Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｒｅｓ．，２８，１９１−２
００，１９９７；Ｚｈａｎｇ Ｂ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．
Ｓｔｒｏｋｅ Ｃｅｒｅｂｒｏｖａｓｃ．Ｄｉｓ．，
７，１−９，１９９８）。発明者らはジンセノサイドＲ
ｂ１の６０μｇ／日の静脈内注入によっても、脳血流に
変化が生じないことを確認している。また、ジンセノサ
イドＲｂ１は低用量、低濃度のものを使用する限り出血
傾向を助長しないことも知られている。もちろん、本発
明者らが、今回の各実験例において、本発明のジンセノ
サイドＲｂ１を投与した動物を注意深く観察した範囲内
でも、副作用は検出されなかった。[0080] Furthermore, intraventricular administration by brain temperature of ginsenoside Rb1, cerebral blood flow, also affects blood pressure have also been reported already that do not span (Lim J.-H.et a
l. , Neurosci. Res. , 28, 191-2
00, 1997; et al. , J. et al.
Stroke Cerebrovasc. Dis. ,
7, 1-9, 1998). The inventors have developed ginsenoside R
by intravenous infusion of 60 [mu] g / day of b1, it was confirmed that the change in cerebral blood flow does not occur. Furthermore, ginsenoside Rb1 is also known to not promote bleeding tendency as long to use a low dose, the low concentration. Of course, the present inventors have, in each of the experimental examples of this, even to the extent that the ginsenoside Rb1 of the present invention was observed carefully animals administered, side effects were detected.
【００８１】特願平１０−３６５５６０号、ＰＣＴ／Ｊ
Ｐ９９／０２５５０（ジンセノサイドＲｂ１からなる脳
細胞又は神経細胞保護剤）ならびに本発明で記載された
ごとく、ジンセノサイドＲｂ１は中大脳動脈皮質枝（Ｍ
ＣＡ）永久閉塞ラット（体重約３００ｇ）において、１
日量６μｇ及び６０μｇの静脈内持続投与で脳梗塞巣を
非投与群の４分の１程度に縮小せしめ、場所学習障害
（脳血管性痴呆）を改善せしめ、かつ脳浮腫も顕著に軽
減する。しかも本発明のジンセノサイドＲｂ１は、同じ
静脈内投与量でＭＣＡ永久閉塞ラットの虚血巣周辺部
（ｉｓｃｈｅｍｉｃｐｅｎｕｍｂｒａ）における脳血管
の再生・再構築を促進し、大脳皮質梗塞巣（一次病変）
の縮小に加えて視床の二次病変（変性）を顕著に抑止す
る。また、脊髄損傷ラット（下位胸髄損傷ラット）に対
しては、１日量６０μｇもしくは１２μｇのジンセノサ
イドＲｂ１静脈内持続投与で対麻痺もしくは神経麻痺の
程度が顕著に改善する。Japanese Patent Application No. 10-365560, PCT / J
As described in P99 / 02550 (a brain cell or neuronal cell protector consisting of ginsenoside Rb1 ) and as described in the present invention, ginsenoside Rb1 is composed of middle cerebral artery cortical branch (M
CA) In a permanently occluded rat (weighing about 300 g), 1
Continuous intravenous administration of a daily dose of 6 μg and 60 μg reduces cerebral infarction to about one-fourth of the non-administration group, improves location learning disorder (cerebrovascular dementia), and remarkably reduces cerebral edema. Moreover ginsenoside Rb1 of the present invention, the same intravenous dose promotes regeneration and reconstruction of cerebral blood vessels in ischemic lesion periphery of MCA permanent occlusion rats (Ischemicpenumbra), cerebral cortex infarct (primary lesion)
In addition to reducing the size of the thalamus, it significantly inhibits secondary lesions (degeneration) of the thalamus. Further, with respect to the spinal cord injured rats (lower thoracic cord injured rats), the degree of paraplegia or paralysis in a daily dose 60μg or 12μg of ginsenoside Rb1 continuous intravenous administration is remarkably improved.
【００８２】このような実験結果に基づけば、体重６０
ｋｇのヒト脳卒中患者の静脈内への至適薬物投与量は、
体重当たりで計算すると１日当たり１．２ｍｇから１２
ｍｇということになる。従って本発明の医薬組成物のヒ
ト脳卒中患者あるいは脊髄損傷患者での１日あたりの投
与量としては、患者の個人差や病状にもよるが、０．１
ｍｇ以上、好ましくは１ｍｇ以上、より好ましくは１０
ｍｇ以上である。しかし、一般に動物の体重が増加する
につれて体重当たりの必要薬物投与量が減少することか
らヒトでは、この用量の１／１０以下でも十分効能を示
す可能性がある。ジンセノサイドＲｂ１を脳神経疾患以
外の疾病の予防・治療・処置に使用する時は、前述の投
与量と同等もしくはその１／１０から１／１０００００
程度の投与量を選択することが好ましい。本発明の医薬
組成物は副作用が少なく、投与量の上限としてはかなり
多量にすることもできるが、１日当たり１ｇ以下、好ま
しくは０．１ｇ以下である。Based on the results of such an experiment, a weight of 60
The optimal intravenous drug dosage for a human stroke patient in kg is
From 1.2 mg per day to 12 per body weight
mg. Therefore, the daily dose of the pharmaceutical composition of the present invention in human stroke patients or spinal cord injured patients depends on the individual differences and medical conditions of the patients, but may be 0.1%.
mg or more, preferably 1 mg or more, more preferably 10 mg or more.
mg or more. However, since the required drug dose per body weight generally decreases as the weight of the animal increases, humans may be able to exhibit efficacy even at 1/10 or less of this dose. When using ginsenoside Rb1 to prevention, treatment, and treatment of diseases other than brain diseases from the dose equal to or 1/10 of above 1/100000
It is preferred to select a dose of the order. The pharmaceutical composition of the present invention has few side effects and the upper limit of the dose can be considerably large, but it is 1 g or less, preferably 0.1 g or less per day.
【００８３】本発明の医薬組成物の投与方法としては、
血管内投与特に静脈内投与が好ましく、前記した投与量
を断続的又は連続的に投与することができる。本発明の
有効成分であるジンセノサイドＲｂ１はサポニンの１種
であり、通常の方法により製剤化することができる。例
えば、本発明の水溶性医薬組成物は、凍結乾燥結晶を生
理食塩水、蒸留水、リン酸緩衝液、ブドウ糖液等に溶解
することにより静脈内投与用製剤とすることができる。
脂肪乳剤、リポソーム製剤としても使用可能である。静
脈内投与するときの製剤の濃度としては余り高濃度でな
い限り任意の濃度に調整することができ、例えば０．０
１〜１０ｍｇ／ｍｌ、好ましくは０．１〜１ｍｇ／ｍｌ
程度にして投与することができる。The administration method of the pharmaceutical composition of the present invention includes
Intravascular administration, particularly intravenous administration, is preferable, and the above-mentioned dose can be administered intermittently or continuously. Ginsenoside Rb1 as an active ingredient of the present invention is one saponin may be formulated by conventional methods. For example, the water-soluble pharmaceutical composition of the present invention can be made into a preparation for intravenous administration by dissolving freeze-dried crystals in physiological saline, distilled water, phosphate buffer, glucose solution and the like.
It can also be used as a fat emulsion or liposome preparation. The concentration of the formulation for intravenous administration can be adjusted to any concentration as long as it is not too high, such as 0.0
1 to 10 mg / ml, preferably 0.1 to 1 mg / ml
It can be administered to a certain degree.
【００８４】また、本発明における動物実験において
は、左中大脳動脈皮質枝（ＭＣＡ）永久閉塞後２８日間
にわたって、ジンセノサイドＲｂ１を静脈内へ持続注入
したが実際の急性期脳卒中症例では、発症後何の治療も
施さなければ２週間以内に虚血巣周辺部（ｉｓｃｈｅｍ
ｉｃ ｐｕｎｕｍｂｒａ）における脳血管の破綻・脱落
・退縮が急速に進行した結果脳梗塞巣が拡大し、その上
脳浮腫もしばしば出現して、一次病変に続く二次病変も
非可逆的な状態になるので、この期間内だけでもジンセ
ノサイドＲｂ１を静脈内投与すれば、脳梗塞病巣の縮
小、破綻した虚血巣周辺部血管網の再生・再構築、二次
病変抑止、ならびに脳浮腫の改善に役立てることができ
る。[0084] In the animal experiments in the present invention, over the left middle cerebral artery cortical branch (MCA) 28 days after permanent occlusion, ginsenoside Rb1 in continuous infusion was actually acute stroke patients intravenously after onset If no treatment is given, ischemic foci (ischem) within 2 weeks
Rapid progression of cerebral vascular rupture, shedding, and regression in ic punumbra results in enlarged cerebral infarct lesions, frequent cerebral edema, and irreversible secondary lesions following the primary lesion Therefore, intravenous administration of ginsenoside Rb1 during this period alone will help to reduce cerebral infarction lesions, regenerate and reconstruct vascular networks around broken ischemic lesions, suppress secondary lesions, and improve cerebral edema be able to.
【００８５】本発明の薬用人蔘の粗サポニン分画からな
る医薬組成物は、薬用人蔘の粗サポニン分画ならびにそ
の成分もしくはその代謝産物又はそれらの塩を低濃度で
含有してなるものが好ましい。また、本発明の医薬組成
物は、静脈内投与や粘膜投与などの非経口投与形態のも
のが好ましい。より詳細には、本発明の医薬組成物は、
薬用人蔘の粗サポニン分画ならびにその成分もしくはそ
の代謝産物又はそれらの塩を低濃度で含有してなる非経
口投与製剤が好ましい。また、本発明は、薬用人蔘の粗
サポニン分画ならびにその成分もしくはその代謝産物又
はそれらの塩を好ましくは低濃度で含有してなる神経組
織又は脊髄組織の損傷による疾患の予防、処置又は治療
用の非経口投与製剤、好ましくは静脈内投与用製剤に関
する。これらの本発明の医薬組成物は、静脈内投与用製
剤が好ましいが患部組織における濃度を低く維持できる
のであれば、病変部局所外用剤、病変部局所注射剤、経
口投与製剤、徐放剤、点鼻薬、点眼薬、点耳薬、坐薬、
皮下注射薬、皮内注射薬、筋肉注射薬、吸入薬、舌下
薬、経皮吸収薬等、任意の投与経路が選択できる。ま
た、本発明は前記の静脈内投与用製剤又は病変部局所外
用剤などからなる脊髄損傷、頭部外傷、神経外傷の長期
にわたる治療、予防、若しくは処置剤、に関する。The pharmaceutical composition comprising the crude saponin fraction of ginseng of the present invention comprises the crude saponin fraction of ginseng and its components, its metabolites or salts thereof at low concentrations. preferable. The pharmaceutical composition of the present invention is preferably in a parenteral administration form such as intravenous administration or mucosal administration. More specifically, the pharmaceutical composition of the present invention comprises:
A parenteral administration preparation comprising a crude saponin fraction of ginseng and its components or metabolites or salts thereof at low concentrations is preferred. Further, the present invention provides a crude saponin fraction of ginseng, and its prevention, treatment or treatment due to damage to nerve tissue or spinal cord tissue preferably containing a low concentration of the component or metabolite thereof or a salt thereof. For parenteral administration, preferably for intravenous administration. These pharmaceutical compositions of the present invention are preferably preparations for intravenous administration, but if the concentration in the affected tissue can be kept low, a topical external preparation for lesions, a local injection for lesions, an oral administration preparation, a sustained release agent, Nasal drops, eye drops, ear drops, suppositories,
An arbitrary administration route such as a subcutaneous injection, an intradermal injection, an intramuscular injection, an inhalant, a sublingual drug, a transdermal absorbent, and the like can be selected. The present invention also relates to a long-term therapeutic, preventive, or therapeutic agent for spinal cord injury, head injury, or nerve injury, comprising the above-mentioned preparation for intravenous administration or a topical external preparation for a lesion.
【００８６】また、本発明らは、薬用人蔘の粗サポニン
分画もしくはその成分又はその代謝産物が、低用量の静
脈内投与により優れた脊髄損傷治療効果を示すことを始
めて見出したものであり、したがって本発明は、薬用人
蔘の粗サポニン分画ならびにその成分又はその代謝産物
を神経組織または脊髄組織の損傷による疾患もしくは脳
卒中の予防、処置又は治療用の他の有効成分を探索する
ためのリード化合物として使用することができることを
提供するものである。また、薬用人蔘の粗サポニン分画
に含有される成分の化学構造の一部を修飾してプロドラ
ッグを作成したのちに、任意の投与経路を選択すること
も可能である。さらに、薬用人蔘の粗サポニン分画の成
分もしくはその代謝産物の標的分子を同定することによ
り、標的分子の機能を修飾する新規化合物をも合成して
脊髄損傷・神経外傷・外傷治療薬の開発を目指すことも
できる。したがって、本発明は、これらの疾患の新しい
予防、処置又は治療用の有効成分を探索するためのリー
ド化合物としての薬用人蔘の粗サポニン分画成分又はそ
の代謝産物を提供するものである。Further, the present invention has been found for the first time that a crude saponin fraction of ginseng or a component thereof or a metabolite thereof exhibits an excellent therapeutic effect on spinal cord injury by intravenous administration at a low dose. Therefore, the present invention provides a crude saponin fraction of ginseng and its components or its metabolites for searching for other active ingredients for preventing, treating or treating diseases or strokes caused by damage to nerve tissue or spinal cord tissue. It provides that it can be used as a lead compound. Further, it is also possible to select a desired administration route after modifying a part of the chemical structure of the component contained in the crude saponin fraction of ginseng to produce a prodrug. Furthermore, by identifying the target component of the crude saponin fraction of ginseng or its metabolites, a new compound that modulates the function of the target molecule is also synthesized to develop drugs for treating spinal cord injury, nerve trauma and trauma. You can also aim for. Therefore, the present invention provides a crude saponin fraction of ginseng or a metabolite thereof as a lead compound for searching for a new active ingredient for preventing, treating or treating these diseases.
【００８７】本発明の薬用人蔘の粗サポニン分画は、紅
蔘をメタノール抽出し、そのエキスを水に懸濁して、エ
ーテルで洗浄後、水飽和１−ブタノールで振出すという
通常の方法により得たものであり、収率は約８％であ
る。なお、後述の実施例で用いた粗サポニン分画は、本
発明者の一人（阪中）の既発表論文（Ｗｅｎ，Ｔ．−
Ｃ．ｅｔ ａｌ．，Ａｃｔａ Ｎｅｕｒｏｐａｔｈａ
ｌ．，９１，１５−２２，１９９６）において用いたも
のと同じものである。The crude saponin fraction of ginseng of the present invention is obtained by a conventional method in which red ginseng is extracted with methanol, the extract is suspended in water, washed with ether, and shaken with water-saturated 1-butanol. Obtained, yield is about 8%. The crude saponin fraction used in the examples described later was prepared by a paper published by one of the present inventors (Sakanaka) (Wen, T.-
C. et al. , Acta Neuropatha
l. , 91, 15-22, 1996).
【００８８】本発明の粗サポニン分画ならびにその成分
は遊離のものを使用することもできるが、それを適当な
塩と使用することもできる。また、それらの水和物のよ
うな溶媒和物として使用することもできる。本発明の薬
用人蔘の粗サポニン分画の濃度は、低濃度が好ましく、
より具体的には、細胞外液濃度が、１４５ｎｇ／ｍｌ以
下、好ましくは１４．５ｎｇ／ｍｌ以下、より好ましく
は１４５ｐｇ／ｍｌ以下、さらに好ましくは１４５０ｆ
ｇ／ｍｌ以下となる濃度である。本発明の粗サポニン分
画を、静脈内投与用製剤として使用する場合にも、患者
の患部組織における細胞外液濃度が前記の濃度になるよ
うに製剤を調整することが好ましい。本発明の粗サポニ
ン分画からなる医薬組成物や製剤は、患部組織の細胞外
液濃度が１４．５〜１４５０ｆｇ／ｍｌ程度でも充分な
効果が得られる。また薬用人蔘の粗サポニン分画に含ま
れる成分の濃度も低濃度が好ましく、より具体的には、
細胞外液濃度が１０ｎｇ／ｍｌ以下、好ましくは１ｎｇ
／ｍｌ以下、より好ましくは１０ｐｇ／ｍｌ以下、さら
に好ましくは１００ｆｇ／ｍｌ以下となる濃度である。
本発明の粗サポニン分画構成成分を、静脈内投与用製剤
として使用する場合にも、患者の患部組織における細胞
外液濃度が前記の濃度になるように製剤を調整すること
が好ましい。本発明の粗サポニン分画構成成分のいずれ
かからなる医薬組成物や製剤は、患部組織の細胞外液濃
度が０．０１〜１００ｆｇ／ｍｌ程度でも充分な効果が
得られる。The crude saponin fraction of the present invention and its components can be used in free form, but they can also be used with an appropriate salt. Also, they can be used as solvates such as hydrates thereof. The concentration of the crude saponin fraction of the ginseng of the present invention is preferably low,
More specifically, the extracellular solution concentration is 145 ng / ml or less, preferably 14.5 ng / ml or less, more preferably 145 pg / ml or less, and further more preferably 1450 f / ml.
g / ml or less. Even when the crude saponin fraction of the present invention is used as a preparation for intravenous administration, it is preferable to adjust the preparation so that the concentration of extracellular fluid in the affected tissue of the patient becomes the above-mentioned concentration. The pharmaceutical composition or preparation comprising the crude saponin fraction of the present invention can provide a sufficient effect even when the extracellular fluid concentration of the affected tissue is about 14.5 to 1450 fg / ml. In addition, the concentration of the components contained in the crude saponin fraction of ginseng is also preferably low, more specifically,
Extracellular fluid concentration is 10 ng / ml or less, preferably 1 ng
/ Ml, preferably 10 pg / ml or less, more preferably 100 fg / ml or less.
Even when the crude saponin fraction component of the present invention is used as a preparation for intravenous administration, it is preferable to adjust the preparation so that the concentration of extracellular fluid in the affected tissue of the patient becomes the above-mentioned concentration. Pharmaceutical compositions and preparations comprising any of the crude saponin fraction components of the present invention can provide a sufficient effect even when the extracellular fluid concentration of the affected tissue is about 0.01 to 100 fg / ml.
【００８９】本発明の静脈内投与用製剤は、血管内、好
ましくは静脈内に直接投与できるものであればよく、生
理食塩水、蒸留水、リン酸緩衝液、ブドウ糖液、リポソ
ーム、脂肪乳剤等に溶解したのちに、単回静脈内注入用
製剤もしくは静脈内持続投与用製剤として使用できる。
また、点滴用組成物などの静脈内投与用製剤に添加して
使用できる剤型であってもよい。また、薬用人蔘の粗サ
ポニン分画に含有される成分の化学構造の一部を修飾し
てプロドラッグを作成し、任意の投与経路、投与方法を
選択することができる。The preparation for intravenous administration of the present invention may be any one which can be directly administered intravascularly, preferably intravenously, and includes physiological saline, distilled water, phosphate buffer, glucose solution, liposome, fat emulsion and the like. And then used as a preparation for single intravenous injection or a preparation for continuous intravenous administration.
It may also be a dosage form that can be used by being added to a preparation for intravenous administration such as a composition for infusion. In addition, a prodrug can be prepared by modifying a part of the chemical structure of a component contained in the crude saponin fraction of ginseng, and any administration route and administration method can be selected.
【００９０】さらに、本発明の薬用人蔘の粗サポニン分
画の静脈内投与は脊髄損傷動物の麻痺を著しく改善す
る。周知のごとく、神経組織は他の末梢組織に比べて外
傷に対して最も脆弱な組織であるので、薬用人蔘の粗サ
ポニン分画からなる医薬組成物が脊髄損傷の治療・処置
に著効を示すという事実は、薬用人蔘の粗サポニン分画
が中枢神経組織以外の末梢組織の外傷・創傷・熱傷等に
も有効であることを物語っている。後述の実施例１０に
示すごとく下位胸髄に圧負荷を加えられた脊髄損傷ラッ
トは、損傷後に薬用人蔘の粗サポニン分画を静脈内投与
することにより両下肢麻痺（対麻痺）が改善し立ち上が
ることが可能となる。この効果は、ジンセノサイドＲｂ
１の静脈内投与の効果に匹敵するものであった。一方、
生理食塩水（すなわちｖｅｈｉｃｌｅ、媒体）のみを投
与された脊髄損傷ラットは両下肢の麻痺をきたしたまま
で、まったく立ち上がることができなかった。また、現
在脊髄損傷治療薬として用いられているソルメドロール
（メチルプレドニゾロン）を静脈内投与しても、脊髄損
傷ラットの両下肢麻痺（対麻痺）を改善することはでき
なかった。これらのことから判断すると、薬用人蔘の粗
サポニン分画もしくはその成分が、ジンセノサイドＲｂ
１と同様に、かつてないほど優れた脊髄損傷治療効果を
示すものと考えられる。従って、今後薬用人蔘の粗サポ
ニン分画の構成成分もしくはその代謝産物をリード化合
物として使用することにより、さらに様々な脊髄損傷な
らびに神経外傷・外傷治療薬が開発されるものと期待さ
れる。Further, the intravenous administration of the crude ginseng fraction of ginseng of the present invention significantly improves paralysis in spinal cord injured animals. As is well known, nervous tissue is the most vulnerable to trauma as compared to other peripheral tissues, and thus a pharmaceutical composition consisting of crude saponin fraction of ginseng has a remarkable effect on the treatment and treatment of spinal cord injury. This fact indicates that the crude saponin fraction of ginseng is also effective for trauma, wounds, burns, etc. of peripheral tissues other than central nervous tissue. As shown in Example 10 below, spinal cord injured rats to which a pressure load was applied to the lower thoracic cord improved bilateral lower limb paralysis (paraplegia) by intravenously administering the crude saponin fraction of ginseng after injury. It is possible to get up. This effect is due to ginsenoside Rb
1 was comparable to the effect of intravenous administration. on the other hand,
Spinal cord injured rats that received only saline (ie, vehicle, vehicle) remained paralyzed in both lower limbs and could not stand at all. Intravenous administration of solmedrol (methylprednisolone), which is currently used as a therapeutic drug for spinal cord injury, failed to improve bilateral lower limb paralysis (paraplegia) in rats with spinal cord injury. Judging from these facts, the crude saponin fraction of ginseng or its component was identified as ginsenoside Rb
As in the case of No. 1 , it is considered that the compound has an unprecedented therapeutic effect on spinal cord injury. Therefore, it is expected that various therapeutic agents for spinal cord injury and nerve trauma / trauma will be further developed by using a component of the crude saponin fraction of ginseng or a metabolite thereof as a lead compound in the future.
【００９１】このように、本発明では、薬用人蔘の粗サ
ポニン分画を低用量で静脈内へ持続注入すると、ジンセ
ノサイドＲｂ１の静脈内持続投与と同様に、優れた脊髄
損傷治療効果が得られたので、このことから判断する
と、低用量の粗サポニン分画もしくはその成分の静脈内
持続投与はその他の脳神経疾患（たとえば脳卒中、脳梗
塞）においても、低濃度・低用量のジンセノサイドＲｂ
１と同様の効果・効能を示すと考えられる。また、特願
平１０−３６５５６０、ＰＣＴ／ＪＰ９９／０２５５０
（ジンセノサイドＲｂ１からなる脳細胞又は神経細胞保
護剤）ならびに特願平１１−３６５５６０、ＰＣＴ／Ｊ
Ｐ９９／０６８０４（ジンセノサイドＲｂ１からなる脳
血管再生・再構築促進剤ならびに神経組織二次変性抑止
剤）において、本発明者らが見出したジンセノサイドＲ
ｂ１の効果・効能・用途・作用は、すべて薬用人蔘の粗
サポニン分画もしくはその成分が兼ね備えているものと
考えられる。もちろん、薬用人蔘の粗サポニン分画もし
くはその成分のいずれかが、低用量、低濃度で、優れた
脳神経細胞保護作用、細胞死抑制遺伝子Ｂｃｌ−ｘＬの
発現増強作用、脳梗塞・脳卒中治療効果、脊髄損傷・神
経外傷治療効果、心筋細胞保護作用、褥創の治療効果、
脳浮腫改善効果等を示すと思われる。さらに、本発明の
薬用人蔘の粗サポニン分画の薬剤としての特徴で、見逃
せないのが、これと言った副作用を示さない点である。[0091] Thus, in the present invention, when continuous infusion crude saponin fraction of ginseng intravenously with a low dose, as with continuous intravenous administration of ginsenoside Rb1, obtained excellent spinal cord injury therapeutic effect Judging from this fact, low-dose crude saponin fraction or continuous intravenous administration of its components can be applied to other cranial nerve diseases (eg, stroke, cerebral infarction) even at low concentrations and low doses of ginsenoside Rb.
It is thought that it shows the same effect and efficacy as1 . Japanese Patent Application No. 10-365560, PCT / JP99 / 02550
(Brain cell or nerve cell-protective agents comprising ginsenoside Rb1) and Japanese Patent Application No. Hei 11-365560, PCT / J
In P99 / 06804 (a cerebral blood vessel regeneration / remodeling promoter comprising ginsenoside Rb1 and an inhibitor of secondary degeneration of nerve tissue), the present inventors found ginsenoside R
effectiveness, efficacy and usages and operation of b1 is all considered that the crude saponin fraction or component thereof ginseng is both. Of course, any of the crude saponin fraction or component thereof ginseng is low doses, at low concentrations, excellent brain cell protective action, the expression enhancing action of cell death suppressing gene Bcl-xL, cerebral infarction, stroke treatment Effect, spinal cord injury / neurotrauma treatment effect, cardiomyocyte protection effect, treatment effect of pressure sore,
It seems to show a cerebral edema improving effect. Furthermore, a characteristic of the crude ginseng fraction of the present invention, which is a crude saponin fraction, cannot be overlooked because it does not exhibit such side effects.
【００９２】特願平１０−３６５５６０号、ＰＣＴ／Ｊ
Ｐ９９／０２５５０（ジンセノサイドＲｂ１からなる脳
細胞又は神経細胞保護剤）ならびに後述の実施例８で記
載されたごとく、ジンセノサイドＲｂ１は中大脳動脈皮
質枝（ＭＣＡ）永久閉塞ラット（体重約３００ｇ）にお
いて、１日量６μｇ及び６０μｇの静脈内持続投与で脳
梗塞巣を非投与群の約４分の１程度に縮小せしめ、場所
学習障害（脳血管性痴呆）を改善する。しかも本発明の
ジンセノサイドＲｂ１は、同じ静脈内投与量でＭＣＡ永
久閉塞ラットの虚血巣周辺部（ｉｓｃｈｅｍｉｃ ｐｅ
ｎｕｍｂｒａ）における脳血管の再生・再構築を促進
し、脳浮腫を顕著に改善するとともに大脳皮質梗塞巣
（一次病変）を縮小せしめ、視床の二次病変（変性）を
抑止する。また、脊髄損傷ラット（下位胸髄損傷ラッ
ト）に対しては、１日量６０μｇもしくは１２μｇのジ
ンセノサイドＲｂ１の静脈内持続投与で神経麻痺の程度
が顕著に改善する。さらに、本発明では薬用人蔘の組サ
ポニン分画（８７０μｇ／日）の静脈内持続投与が、ジ
ンセノサイドＲｂ１（６０μｇ／日）の静脈内持続投与
とほぼ同等の脊髄損傷治療効果を示した。Japanese Patent Application No. 10-365560, PCT / J
P99 / 02550 (comprising ginsenoside Rb1 Brain cell or nerve cell-protective agents) as well as described in Example 8 below, ginsenoside Rb1 in the middle cerebral artery cortical branch (MCA) permanent occlusion rats (weighing about 300 g) The intravenous continuous administration of 6 μg and 60 μg of the daily dose reduces the cerebral infarction to about one-fourth of the non-administration group, and improves the place learning disorder (cerebrovascular dementia). Moreover ginsenoside Rb1 of the present invention, ischemic lesion periphery of MCA permanent occlusion rats at the same intravenous dose (ischemic pe
Numbra promotes the regeneration and remodeling of cerebral blood vessels, remarkably improves cerebral edema, reduces cerebral cortical infarct (primary lesion), and suppresses secondary lesion (degeneration) of the thalamus. Further, with respect to the spinal cord injured rats (lower thoracic cord injured rats), the degree of paralysis is remarkably improved continuous intravenous administration of a daily dose 60μg or 12μg of ginsenoside Rb1. Further, in the present invention, continuous intravenous administration of the ginseng group saponin fraction (870 μg / day) showed almost the same therapeutic effect on spinal cord injury as continuous intravenous administration of ginsenoside Rb1 (60 μg / day).
【００９３】このような実験結果に基づけば、ヒト脳卒
中患者の静脈内への粗サポニン分画の至適投与量は、体
重１ｋｇ当たりで計算すると１日当たり０．２９ｍｇ／
ｋｇから２．９ｍｇ／ｋｇということになる。しかし、
一般に動物の体重が増加するにつれて体重当たりの必要
薬物投与量が減少することからヒトでは、この用量の２
分の１から２０分の１程度にする必要があると考えられ
る。すなわち粗サポニン分画の静脈内投与を脳神経疾患
の予防・処置・治療に使用する時は、患者の病状や個人
差にもよるが１日あたり１４．５μｇ／ｋｇ〜１４５０
μｇ／ｋｇに設定することが好ましい。なお、粗サポニ
ン分画を脳神経疾患以外の疾病の予防・治療・処置に使
用するときは前述の投与量と同等もしくはその１／１０
から１／１０００００程度の投与量を選択することが好
ましい。また、粗サポニン分画構成成分のいずれかを静
脈内投与するときの投与量は、前述の量の１０分の１程
度を目安にすればよい。本発明の医薬組成物は副作用が
少なく、投与量の上限としてはかなり多量にすることも
できるが、体重６０ｋｇのヒトに対して１日当たり１ｇ
以下、好ましくは０．１ｇ以下である。Based on these experimental results, the optimal dose of the crude saponin fraction intravenously in human stroke patients was calculated to be 0.29 mg / day / kg body weight.
From kg to 2.9 mg / kg. But,
Generally, in humans, the required drug dose per body weight decreases as the body weight of the animal increases.
It is thought that it is necessary to make it about 1/20 to about 1/20. That is, when the intravenous administration of the crude saponin fraction is used for the prevention, treatment, or treatment of cranial nerve diseases, 14.5 μg / kg to 1450 per day, depending on the patient's condition and individual differences.
It is preferable to set to μg / kg. When the crude saponin fraction is used for the prevention, treatment or treatment of diseases other than cranial nerve diseases, it is equivalent to the above-mentioned dose or 1/10 of the above-mentioned dose.
It is preferable to select a dose of about 1 / 100,000. In addition, the dose when any of the crude saponin fraction constituents is administered intravenously may be about 1/10 of the above-mentioned amount. Although the pharmaceutical composition of the present invention has few side effects and the upper limit of the dose can be considerably large, 1 g / day for a human weighing 60 kg.
Or less, preferably 0.1 g or less.
【００９４】本発明の粗サポニン分画からなる医薬組成
物の投与方法としては、血管内投与特に静脈内投与が好
ましく、前記した投与量を断続的又は連続的に投与する
ことができる。本発明の薬用人蔘粗サポニン分画は、通
常の方法により製剤化することができる。例えば、本発
明の水溶性の医薬組成物は、凍結乾燥結晶を生理食塩
水、蒸留水、リン酸緩衝液、ブドウ糖液等に溶解するこ
とにより静脈内投与用製剤とすることができる。脂肪乳
剤、リポソーム製剤としても使用可能である。静脈内投
与するときの製剤の濃度としては余り高濃度でない限り
任意の濃度に調整することができ、例えば０．１〜１０
０ｍｇ／ｍｌ、好ましくは１〜１０ｍｇ／ｍｌ程度にし
て投与することができる。なお、粗サポニン分画構成成
分のいずれかについても、前述の方法で製剤化すること
ができるが、製剤の濃度は粗サポニン分画の濃度の１０
分の１程度に設定することが好ましい。As a method for administering the pharmaceutical composition comprising the crude saponin fraction of the present invention, intravascular administration, particularly intravenous administration, is preferable, and the above-mentioned dose can be administered intermittently or continuously. The crude ginseng fraction of ginseng of the present invention can be formulated by a usual method. For example, the water-soluble pharmaceutical composition of the present invention can be made into a preparation for intravenous administration by dissolving freeze-dried crystals in physiological saline, distilled water, phosphate buffer, glucose solution and the like. It can also be used as a fat emulsion or liposome preparation. The concentration of the preparation for intravenous administration can be adjusted to any concentration as long as it is not too high, for example, 0.1 to 10
It can be administered at 0 mg / ml, preferably about 1 to 10 mg / ml. In addition, any of the crude saponin fraction components can be formulated by the above-mentioned method.
It is preferable to set the value to about 1 /.
【００９５】本発明のジヒドロジンセノサイドＲｂ１か
らなる医薬組成物は本発明者の知る限り新規化合物であ
る。本発明のジヒドロジンセノサイドＲｂ１を含有して
なる医薬組成物は、ジヒドロジンセノサイドＲｂ１もし
くはその代謝産物又はそれの塩を低濃度で含有してなる
ものが好ましい。また、本発明のこの医薬組成物は、静
脈内投与や粘膜投与などの非経口投与形態のものが好ま
しい。より詳細には、本発明のこの医薬組成物は、ジヒ
ドロジンセノサイドＲｂ１もしくはその代謝産物又はそ
れらの塩を低濃度で含有してなる非経口投与製剤が好ま
しい。また、本発明は、ジヒドロジンセノサイドＲｂ１
もしくはその代謝産物又はそれらの塩を好ましくは低濃
度で含有してなる脳神経疾患もしくは細胞死を伴うあら
ゆる疾患の予防、処置又は治療用の非経口投与製剤、好
ましくは静脈内投与用製剤に関する。これらの本発明の
医薬組成物は、静脈内投与用製剤が好ましいが病変部局
所外用剤、病変部局所注射剤、経口投与製剤、点鼻薬、
点眼薬、眼軟膏、点耳薬、坐薬、皮下注射薬、皮内注射
薬、筋肉注射薬、吸入薬、舌下薬、経皮吸収薬等、任意
の投与経路が選択できる。また、本発明は前記の静脈内
投与用製剤又は病変部局所外用剤などからなる脳・神経
疾患の長期にわたる治療、予防、若しくは処置剤、又は
脳細胞もしくは神経細胞保護剤に関する。[0095] Pharmaceutical compositions comprising a dihydro ginsenosides Side Rb1 of the present invention are novel compounds far as the present inventors know. The pharmaceutical composition containing dihydroginsenoside Rb1 of the present invention preferably contains dihydroginsenoside Rb1 or a metabolite or a salt thereof at a low concentration. The pharmaceutical composition of the present invention is preferably in a parenteral administration form such as intravenous administration or mucosal administration. More particularly, the pharmaceutical compositions of the invention may be formulated for parenteral administration formulation comprising a dihydro ginsenosides side Rb1, metabolites thereof or salts thereof contained in a low concentration is preferred. In addition, the present invention relates to dihydroginsenoside Rb1
Alternatively, the present invention relates to a preparation for parenteral administration, preferably for intravenous administration, comprising a metabolite or a salt thereof, preferably at a low concentration, for preventing, treating or treating cranial nerve disease or any disease involving cell death. These pharmaceutical compositions of the present invention are preferably preparations for intravenous administration, but topical external preparations for lesions, local injections for lesions, oral preparations, nasal drops,
Any administration route can be selected, such as eye drops, eye ointments, ear drops, suppositories, subcutaneous injections, intradermal injections, intramuscular injections, inhalants, sublinguals, and percutaneous absorptions. The present invention also relates to a long-term therapeutic, preventive, or therapeutic agent for cerebral / neurological disorders, or an agent for protecting brain cells or nerve cells, comprising the above-mentioned preparation for intravenous administration or topical external preparation for lesions.
【００９６】また、本発明者らは、ジンセノサイドＲｂ
１を還元することにより新規に得られた新規なジヒドロ
ジンセノサイドＲｂ１もしくはその代謝産物又はそれら
の塩が優れた脳梗塞巣縮小作用を有することを始めて見
出したものであり、したがって本発明は、ジンセノサイ
ドＲｂ１又はその代謝産物を、神経組織又は脊髄組織の
損傷による疾患もしくは脳卒中の予防、処置又は治療用
の他の有効成分を探索するためのリード化合物として使
用することができることを証明するものである。また、
ジヒドロジンセノサイドＲｂ１の化学構造の一部を修飾
してプロドラッグを作成したのちに、任意の投与経路を
選択することも可能である。さらに、ジヒドロジンセノ
サイドＲｂ１もしくはその代謝産物の標的分子を同定す
ることにより、標的分子の機能を修飾する新規化合物を
も合成して脳卒中・頭部外傷・脊髄損傷・神経外傷・外
傷治療薬の開発を目指すこともできる。したがって、本
発明は、これらの疾患の新しい予防、処置又は治療用の
有効成分を探索するためのリード化合物としての薬用人
蔘の成分又はその代謝産物を提供するものである。Further, the present inventors have determined that ginsenoside Rb
Was found for thefirst time that a novel dihydroginsenoside Rb1 or a metabolite thereof or a salt thereof obtained by reducing1 has an excellent cerebral infarction lesion reducing action. rb1 or its metabolite, nervous tissue or injury prevention of a disease or stroke by spinal cord tissues, is to demonstrate that it can be used as lead compounds for exploring other active ingredients for the treatment or therapy . Also,
To After creating a prodrug by modifying a part of the chemical structure of dihydroginsenoside Seno side Rb1, it is also possible to select any route of administration. Furthermore, by identifying the target molecule dihydro ginsenosides side Rb1 or metabolites thereof, development of also synthesized novel compounds that modulate the function of a target molecule stroke, head trauma, spinal cord injury, neurotrauma, wound treatment agents You can also aim for. Accordingly, the present invention provides a ginseng component or a metabolite thereof as a lead compound for searching for a new active component for preventing, treating or treating these diseases.
【００９７】本発明のジヒドロジンセノサイドＲｂ１は
前記した構造式（ＩＩ）で示されるものであり、ジヒド
ロジンセノサイドＲｂ１は、本発明者が所有する高純度
のジンセノサイドＲｂ１に水素添加することにより容易
に製造することができる。このように作成されたジヒド
ロジンセノサイドＲｂ１はその純度が９８％以上である
ことが核磁気共鳴スペクトル（ＮＭＲ）により確認され
ている。The dihydroginsenoside Rb1 of the present invention is represented by the aforementioned structural formula (II). The dihydroginsenoside Rb1 can be easily obtained by hydrogenating high-purity ginsenoside Rb1 owned by the present inventors. Can be manufactured. It has been confirmed by the dihydro ginsenosides side Rb1 created in this way it is a nuclear magnetic resonance spectrum and its purity is greater than 98% (NMR).
【００９８】本発明のジヒドロジンセノサイドＲｂ１は
遊離のものを使用することもできるが、それを適当な塩
と使用することもできる。また、それらの水和物のよう
な溶媒和物として使用することもできる。本発明のジヒ
ドロジンセノサイドＲｂ１の濃度は、低濃度が好まし
く、より具体的には、細胞外液濃度が１００ｎｇ／ｍｌ
以下、好ましくは１０ｐｇ／ｍｌ以下、より好ましくは
１００ｆｇ／ｍｌ以下となる濃度である。本発明のジヒ
ドロジンセノサイドＲｂ１を、静脈内投与用製剤として
使用する場合にも、患者の患部における細胞外液濃度が
前記の濃度になるように製剤を調整することが好まし
い。本発明の医薬組成物や製剤は、患部組織の細胞外液
濃度が０．０１〜１００ｆｇ／ｍｌもしくは１〜１００
００ｆｇ／ｍｌ程度でも充分な効果が得られる。[0098] dihydro ginsenosides Side Rb1 of the present invention can also be used as free, although it is also possible to use it with a suitable salt. Also, they can be used as solvates such as hydrates thereof. The concentration of dihydro ginsenosides Side Rb1 of the present invention, low concentrations are preferred, and more specifically, the extracellular fluid concentrations 100 ng / ml
The concentration is preferably 10 pg / ml or less, more preferably 100 fg / ml or less. The dihydro ginsenosides Side Rb1 of the present invention, even when used as intravenous preparations, it is preferable to adjust the formulation so that the extracellular fluid concentrations of the patient's affected area a concentration of said. The pharmaceutical composition or preparation of the present invention has an extracellular fluid concentration of the affected tissue of 0.01 to 100 fg / ml or 1 to 100 fg / ml.
A sufficient effect can be obtained even at about 00 fg / ml.
【００９９】本発明のジヒドロジンセノサイドＲｂ１又
はその塩からなる静脈内投与用製剤は、血管内、好まし
くは静脈に直接投与できるものであればよく、生理食塩
水、蒸留水、リン酸緩衝液、ブドウ糖液、リポソーム、
脂肪乳剤等に溶解したのちに、単回静脈内注入用製剤も
しくは静脈内持続投与用製剤として使用できる。また、
点滴用組成物などの静脈内投与製剤に添加して使用でき
る剤型であってもよい。また、ジヒドロジンセノサイド
Ｒｂ１の化学構造の一部を修飾してプロドラッグを作成
し、任意の投与経路、投与方法を選択することができ
る。たとえば、ジンセノサイドＲｂ１の水酸基をエステ
ル化してプロドラッグを作成し、脳血液関門を通過せし
めたのち、内因性エステラーゼで加水分解して脳内への
ジヒドロジンセノサイドＲｂ１移行量を増やすことも可
能となる。[0099] dihydro ginsenosides side Rb1 or intravenous administration preparation consisting of a salt thereof of the present invention, the blood vessel as long as it preferably administered directly into a vein, physiological saline, distilled water, phosphate buffer, Glucose solution, liposome,
After being dissolved in a fat emulsion or the like, it can be used as a preparation for single intravenous injection or a preparation for continuous intravenous administration. Also,
It may be a dosage form that can be used by adding to an intravenous preparation such as a composition for infusion. Also, to create a prodrug by modifying a part of the chemical structure of dihydroginsenoside Seno side Rb1, any route of administration can be selected method of administration. For example, by esterifying the hydroxyl group of ginsenoside Rb1 to create a prodrug, after passed through the blood-brain barrier, the endogenous esterases hydrolyze increase dihydro ginsenosides side Rb1 transition of the brain also possible and Become.
【０１００】本発明のジヒドロジンセノサイドＲｂ
１は、ジンセノサイドＲｂ１と同様に、静脈内投与で脳
梗塞病巣体積を非投与群の１／４程度にまで縮小させる
ので、急性期・慢性期の脳梗塞（脳血栓・脳塞栓）のみ
ならず脳出血・クモ膜下出血の急性期や慢性期あるいは
一過性脳虚血発作に対しても、神経保護剤として利用す
ることができる。すなわちジヒドロジンセノサイドＲｂ
１は脳卒中が疑われる患者に対して救急車の中でも点滴
静注が可能な薬物である。また、ジヒドロジンセノサイ
ドＲｂ１を血栓溶解療法を実施する前の脳梗塞患者に投
与することにより患者の予後が改善する。The dihydroginsenoside Rb of the present invention
1 reduces the volume of cerebral infarction lesion by intravenous administration to about 1/4 that of the non-administration group, similar to ginsenoside Rb1 ; It can also be used as a neuroprotective agent in acute and chronic phases of cerebral hemorrhage and subarachnoid hemorrhage or in transient ischemic attacks. That is, dihydroginsenoside Rb
1 is a drug that can be intravenously infused in an ambulance for a patient suspected of having a stroke. Moreover, to improve the patient's prognosis by administering dihydro ginsenosides side Rb1 in stroke patients before thrombolytic therapy.
【０１０１】それに加えて本発明のジヒドロジンセノサ
イドＲｂ１は、これを少量静脈内持続投与することによ
り、脳梗塞病変を１／４程度に縮小するのみならず虚血
巣周辺部（ｉｓｃｈｅｍｉｃ ｐｅｎｕｍｂｒａ）にお
けるアポトーシス様神経細胞死を抑止し、さらには虚血
巣中心部（ｉｓｃｈｅｍｉｃ ｃｏｒｅ）における神経
細胞、グリア細胞、血管内皮細胞の壊死（ネクローシ
ス）をも抑止する可能性があることが見出された。すな
わち、本発明のジヒドロジンセノサイドＲｂ１は、ジン
セノサイドＲｂ１とほぼ同様の脳梗塞治療効果を示すと
言える。しかもジヒドロジンセノサイドＲｂ１の静脈内
投与量は、ジンセノサイドＲｂ１の静脈内投与量とほぼ
近似していることから判断しても、ジヒドロジンセノサ
イドＲｂ１はジンセノサイドＲｂ１とほぼ同様の薬理作
用を有すると考えられる。すなわち特願平１０−３６５
５６０号、ＰＣＴ／ＪＰ／０２５５０（ジンセノサイド
Ｒｂ１からなる脳細胞又は神経細胞保護剤）ならびに特
願平１１−２４３３７８号、ＰＣＴ／ＪＰ９９／０６８
０４（ジンセノサイドＲｂ１からなる脳血管再生・再構
築保護剤ならびに神経組織二次変性抑止剤）もしくは特
願２０００−１６３０２６号（ジンセノサイドＲｂ１か
らなる皮膚組織再生促進剤）において本発明者らが見出
したジンセノサイドＲｂ１もしくはその代謝産物の効果
・効能・用途・作用は、すべてジヒドロジンセノサイド
Ｒｂ１もしくはその代謝産物が兼ね備えているものと考
えられる。もちろん、本発明において新規に見出された
ジンセノサイドＲｂ１の効果・効能・用途・作用につい
ても、ジヒドロジンセノサイドＲｂ１もしくはその代謝
産物が兼ね備えていると考えられる。より具体的には、
ジヒドロジンセノサイドＲｂ１もしくはその代謝産物又
はそれらの塩を含有してなる医薬組成物が、優れた脳神
経細胞保護作用、細胞死抑制遺伝子Ｂｃｌ−ｘＬの発現
増強作用、脳梗塞・脳卒中治療効果、脊髄損傷・神経外
傷治療効果、神経組織二次変性抑止作用、脳血管再生・
再構築促進作用、心筋細胞保護作用、褥創の治療効果、
脳浮腫改善効果等を示すと考えられる。[0102] dihydro ginsenosides Side Rb1 in addition to that the invention, by this small amount continuous intravenous administration, ischemic lesion periphery not only reducing the cerebral infarct lesion to about 1/4 in (ischemic penumbra) It has been found that it may inhibit apoptotic neuronal cell death and may also inhibit the necrosis (necrosis) of nerve cells, glial cells, and vascular endothelial cells in the ischemic core. That is, dihydro ginsenosides Side Rb1 of the present invention can be said to show substantially the same stroke therapeutic effect as ginsenoside Rb1. Moreover intravenous dose of dihydro ginsenosides side Rb1 is be determined from the fact that almost approximates the intravenous administration of ginsenoside Rb1, dihydro ginsenosides side Rb1 is to have substantially the same pharmacological effect as ginsenoside Rb1 Conceivable. That is, Japanese Patent Application No. 10-365.
No. 560, PCT / JP / 02550 (a brain cell or nerve cell protecting agent comprising ginsenoside Rb1 ) and Japanese Patent Application No. 11-243378, PCT / JP99 / 068.
The present inventors have found in JP 04 (a cerebral blood vessel regeneration / reconstruction protective agent consisting of ginsenoside Rb1 and an inhibitor of nervous tissue secondary degeneration) or Japanese Patent Application No. 2000-163026 (a skin tissue regeneration promoting agent consisting of ginsenoside Rb1 ). effects, efficacy and usages, the action of ginsenoside Rb1 or metabolites thereof are all considered to dihydro ginsenosides side Rb1 or its metabolites has both. Of course, the effects, efficacy and usages, the action of ginsenoside Rb1 which newly discovered in the present invention, dihydro ginsenosides side Rb1 or metabolites thereof is considered to combine. More specifically,
Dihydro ginsenosides side Rb1 or a pharmaceutical composition comprising a metabolite thereof, or salts thereof, excellent brain cell protective action, the cell death suppressing gene Bcl-xL expression enhancing action, cerebral infarction, stroke therapeutic effect, spinal cord Injury / nerve trauma treatment effect, nervous tissue secondary degeneration inhibitory effect, cerebral revascularization
Remodeling promoting effect, cardiomyocyte protective effect, therapeutic effect of pressure sore,
It is thought to show an effect of improving cerebral edema.
【０１０２】ジヒドロジンセノサイドＲｂ１もしくはそ
の代謝産物又はそれらの塩からなる医薬組成物はアポト
ーシス様神経細胞死、神経細胞のアポトーシス、グリア
細胞のアポトーシスを抑止するので、多くの神経変性疾
患（アルツハイマー病、ピック病、脊髄小脳変性症、パ
ーキンソン病、舞踏病、ポリグルタミン病、筋萎縮性側
索硬化症等）や脱髄疾患（白質脳炎、ビンスワンガー
病、脳の慢性低灌流障害、多発性硬化症等）にも効能を
示し、これらの疾病による高次神経機能障害の進行を緩
らげ患者のＱＯＬ（生活の質、Ｑｕａｌｉｔｙ ｏｆ
Ｌｉｆｅ）を高めることが期待される。[0102] dihydro ginsenosides side Rb1 or metabolite or a pharmaceutical composition consisting of a salt thereof apoptosis-like nerve cell death, apoptosis of neurons, so to suppress apoptosis of glial cells, a number of neurodegenerative diseases (Alzheimer's disease, Pick's disease, spinocerebellar degeneration, Parkinson's disease, chorea, polyglutamine disease, amyotrophic lateral sclerosis, etc. and demyelinating disease (leukoencephalitis, Binswanger's disease, chronic hypoperfusion injury of the brain, multiple sclerosis, etc.) ) Also slows the progression of higher nervous dysfunction due to these diseases and reduces the quality of life (QOL) of patients.
Life) is expected to be increased.
【０１０３】さらに、本発明のジヒドロジンセノサイド
Ｒｂ１の薬剤としての特徴で、見逃せないのが、ジンセ
ノサイドＲｂ１と同様にこれと言った副作用を示さない
点である。[0103] Further, a feature of the dihydro ginsenosides drug side Rb1 of the present invention, not overlooked is the point showing no side effects said this in the same manner as ginsenoside Rb1.
【０１０４】特願平１０−３６５５６０号、ＰＣＴ／Ｊ
Ｐ９９／０２５５０（ジンセノサイドＲｂ１からなる脳
細胞又は神経細胞保護剤）で記載されたごとく、ジンセ
ノサイドＲｂ１は中大脳動脈皮質枝（ＭＣＡ）永久閉塞
ラット（体重約３００ｇ）において、１日量６μｇ及び
６０μｇの静脈内持続投与で脳梗塞巣を縮小せしめ、場
所学習障害（脳血管性痴呆）を改善する。一方本発明の
ジヒドロジンセノサイドＲｂ１は、１日あたり６μｇの
投与量でＭＣＡ永久閉塞ラットの大脳皮質梗塞巣（一次
病変）を顕著に縮小せしめ、その効果はジンセノサイド
Ｒｂ１（６μｇ／日）の効果に匹敵するものであった。
従って、ジヒドロジンセノサイドＲｂ１を１日あたり６
０μｇの用量でＭＣＡ永久閉塞ラットに静脈内投与して
も、ほぼジンセノサイドＲｂ１を６０μｇ／日の用量で
静脈内投与したときと同様の効果がみられると考えられ
る。Japanese Patent Application No. 10-365560, PCT / J
As described in P99 / 02550 (a brain cell or neuronal cell protector consisting of ginsenoside Rb1 ), ginsenoside Rb1 was administered in a rat with permanent occlusion of the middle cerebral artery cortical branch (MCA) (weight of about 300 g) at a daily dose of 6 μg and Continuous intravenous administration of 60 μg reduces cerebral infarct lesions and improves location learning disorders (cerebrovascular dementia). Meanwhile dihydro ginsenosides Side Rb1 of the present invention, the effect of significantly allowed reduced cortical infarct MCA permanent occlusion rats (primary lesion) at a dose of 6 [mu] g per day, the effects of ginsenoside Rb 1(6 [mu] g / day) Was comparable to
Therefore, dihydroginsenoside Rb1 is added at a rate of 6 per day.
Be administered intravenously to MCA permanent occlusion rats at a dose of 0 Pg, the same effect as when administered intravenously almost ginsenoside Rb1 at a dose of 60 [mu] g / day is considered to be seen.
【０１０５】このような実験結果に基づけば、体重６０
ｋｇのヒト脳卒中患者の静脈内へのジヒドロジンセノサ
イドＲｂ１の至適薬物投与量は、体重当たりで計算する
と１日当たり１．２ｍｇから１２ｍｇということにな
る。従って本発明の医薬組成物のヒト脳卒中患者での１
日当たりの投与量としては、患者の個人差や病状にもよ
るが、０．１ｍｇ以上、好ましくは１ｍｇ以上、より好
ましくは１０ｍｇ以上である。しかし一般に動物の体重
が増加するにつれて体重当たりの必要薬物投与量が減少
することから、ヒトでは、この用量の１／１０以下でも
充分効果を示す可能性がある。逆に、血液脳関門の破綻
の程度が軽微な脳神経疾患（たとえばアルツハイマー
病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、ポリグルタ
ミン病を始めとする神経変性疾患、脱髄疾患、神経外
傷、一過性脳虚血発作、脊髄損傷、頭部外傷）にジヒド
ロジンセノサイドＲｂ１を投与するときは、前述の投与
量と同量もしくはそれより５〜１０倍程度用量を増やす
ことが必要になると考えられる。また、ジヒドロジンセ
ノサイドＲｂ１を脳神経疾患以外の疾病の予防・治療・
処置に使用する時は、前述の投与量と同等もしくはその
１／１０から１／１０００００程度の投与量を選択する
ことが好ましい。本発明の医薬組成物は副作用が少な
く、投与量の上限としてはかなり多量にすることもでき
るが、１日当たり１ｇ以下、好ましくは０．１ｇ以下で
ある。Based on these experimental results, a weight of 60
optimal drug dose of dihydro ginsenosides Side Rb1 to intravenous kg human stroke patients would that 12mg per day 1.2mg when calculated per body weight. Therefore, the use of the pharmaceutical composition of the present invention in human stroke patients
The daily dose is 0.1 mg or more, preferably 1 mg or more, and more preferably 10 mg or more, although it depends on the individual differences and medical conditions of patients. However, since the required drug dose per body weight generally decreases as the weight of the animal increases, in humans, even 1/10 or less of this dose may be sufficiently effective. Conversely, neurodegenerative diseases such as Alzheimer's disease, Parkinson's disease, amyotrophic lateral sclerosis, polyglutamine disease, demyelinating diseases, nerve trauma, etc. over ischemic attacks, spinal cord injury, when administered dihydro ginsenosides side Rb1 in head trauma) is considered to be necessary to increase the dose in the same amount or even from 5 to 10 times the dose of the aforementioned . Also, prevention and treatment of diseases other than brain disease dihydroginsenoside Seno side Rb1 &
When used for treatment, it is preferable to select a dose equivalent to the above-mentioned dose or about 1/10 to 1 / 100,000. The pharmaceutical composition of the present invention has few side effects and the upper limit of the dose can be considerably large, but it is 1 g or less, preferably 0.1 g or less per day.
【０１０６】本発明の医薬組成物の投与方法としては、
血管内投与特に静脈内投与が好ましく、前記した投与量
を断続的又は連続的に投与することができる。本発明の
有効成分のひとつであるジヒドロジンセノサイドＲｂ１
は、通常の方法により製剤化することができる。例え
ば、本発明の水溶性の医薬組成物は、凍結乾燥結晶を生
理食塩水、蒸留水、リン酸緩衝液、ブドウ糖液等に溶解
することにより静脈内投与製剤とすることができる。脂
肪乳剤、リポソーム製剤としても使用可能である。静脈
内投与するときの製剤の濃度としては余り高濃度でない
限り任意の濃度に調整することができ、例えば０．０１
〜１０ｍｇ／ｍｌ、好ましくは０．１〜１ｍｇ／ｍｌ程
度にして投与することができる。The administration method of the pharmaceutical composition of the present invention includes:
Intravascular administration, particularly intravenous administration, is preferable, and the above-mentioned dose can be administered intermittently or continuously. Dihydroginsenoside Rb1 which is one of the active ingredients of the present invention
Can be formulated by an ordinary method. For example, the water-soluble pharmaceutical composition of the present invention can be made into an intravenous preparation by dissolving freeze-dried crystals in physiological saline, distilled water, phosphate buffer, glucose solution and the like. It can also be used as a fat emulsion or liposome preparation. The concentration of the preparation for intravenous administration can be adjusted to any concentration as long as it is not too high, such as 0.01
It can be administered at a dose of about 10 to 10 mg / ml, preferably about 0.1 to 1 mg / ml.
【０１０７】次に本発明の薬用人蔘若しくはそのエキス
又は薬用人蔘成分若しくはそれらの代謝産物又はこれら
の塩、ジンセノサイドＲｂ１、薬用人蔘の粗サポニン分
画、ならびにジヒドロジンセノサイドＲｂ１の作用につ
いて詳細に説明する。まず発明者らは、コウジン末（韓
国煙草人蔘公社製の６年根を原材料としたコウジン末す
なわち本邦における正官庄コウジン末）の経口投与によ
る作用を検討した。このために、例えば１２〜１３週齢
の雄性ＳＨ−ＳＰラット（体重２５０〜３００ｇ）を使
用した。同動物は１２時間ごとの明暗サイクル室で飼育
し、水ならびに餌は自由摂取とした。同動物の左中大脳
動脈皮質枝（ＭＣＡ）を発明者らの論文に記載した方法
を用いて吸入麻酔下で凝固・切離した（Ｉｇａｓｅ，
Ｋ．，ｅｔａｌ．，Ｊ．Ｃｅｒｅｂ．Ｂｌｏｏｄ Ｆｌ
ｏｗ Ｍｅｔａｂ．，１９，２９８−３０６，１９９
９；Ｓａｄａｍｏｔｏ，Ｙ．，ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃ
ｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．，２
５３，２６−３２，１９９８）。コウジン末を蒸留水に
混入し、ＭＣＡ永久閉塞前１週間、ＭＣＡ永久閉塞後３
２日間、１日単回経口投与した（０．６ｇ／ｋｇ／日、
０．７５ｇ／ｋｇ／日、０．９ｇ／ｋｇ／日または１．
２ｇ／ｋｇ／日）。なお、ＭＣＡを閉塞した対照動物
（虚血コントロール動物）と、偽手術をした動物には同
量の蒸留水のみを経口投与した。Next, the action of the ginseng of the present invention, its extract, the ginseng component or their metabolites or salts thereof, ginsenoside Rb1 , crude saponin fraction of ginseng, and dihydroginsenoside Rb1 This will be described in detail. First, the inventors examined the effect of oral administration of kojin powder (kojin powder manufactured by Korean Tobacco Ginseng Corporation using 6-year root as a raw material, that is, Shokansho Kojin powder in Japan). For this purpose, for example, male SH-SP rats aged 12 to 13 weeks (weight: 250 to 300 g) were used. The animals were housed in a 12 hour light / dark cycle room with free access to water and food. The left middle cerebral artery cortical branch (MCA) of the animal was coagulated and dissected under inhalation anesthesia using the method described in our paper (Igase,
K. , Et al. , J. et al. Cereb. Blood Fl
ow Metab. , 19, 298-306, 199.
9; Sadamoto, Y .; , Et al. , Bioc
hem. Biophys. Res. Commun. , 2
53, 26-32, 1998). The kojin powder was mixed with distilled water, one week before MCA permanent occlusion, 3 days after MCA permanent occlusion.
Oral administration once daily for 2 days (0.6 g / kg / day,
0.75 g / kg / day, 0.9 g / kg / day or 1.
2 g / kg / day). In addition, the same amount of distilled water alone was orally administered to a control animal in which MCA was occluded (ischemic control animal) and a sham-operated animal.
【０１０８】ＭＣＡ永久閉塞後、発明者らの方法に従っ
て（Ｚｈａｎｇ，Ｂ．，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｓｔｒｏｋ
ｅ Ｃｅｒｅｂｒｏｖａｓｃ．Ｄｉｓ．，７，１−９，
１９９８；Ｉｇａｓｅ，Ｋ．，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｅ
ｒｅｂ．Ｂｌｏｏｄ Ｆｌｏｗ Ｍｅｔａｂ．，１９，
２９８−３０６，１９９９；Ｓａｄａｍｏｔｏ，Ｙ．，
ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅ
ｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．，２５３，２６−３２，１９９
８）、２週目と４週目にそれぞれ４日間連続で水迷路テ
ストを実施し、ＳＨ−ＳＰラットの場所学習能力を判定
した。その結果を図１に示す。図１の上側は２週目の結
果であり、同下側は４週目の結果である。統計解析法は
ＡＮＯＶＡ＋ＦｉｓｈｅｒのＰＬＳＤにより、データは
平均±標準偏差（ＳＥ）で示されており、＊印はＰ＜
０．０５を、＊＊印はＰ＜０．０１であることを示す。
図１中の白丸印は蒸留水投与虚血群、黒丸印は偽手術
群、白四角印はコウジン末０．６ｇ／ｋｇ／日投与虚血
群、黒四角印はコウジン末０．７５ｇ／ｋｇ／日投与虚
血群、白三角印はコウジン末０．９ｇ／ｋｇ／日投与虚
血群、黒三角印はコウジン末１．２ｇ／ｋｇ／日投与虚
血群を示す。図１のごとくＭＣＡ永久閉塞後（脳梗塞
後）の場所学習障害が、蒸留水投与虚血群に比べて、コ
ウジン末０．７５〜１．２ｇ／ｋｇ／日投与虚血群で有
意に改善された。特にコウジン末０．９ｇ／ｋｇ／日投
与虚血群でもっとも良好な効果がみられた。なお、ＳＨ
−ＳＰラットの水泳速度には各群で有意差はみられなか
った。After permanent occlusion of the MCA, following the method of the inventors (Zhang, B., et al., J. Strok).
e Cerebrovasc. Dis. , 7, 1-9,
1998; Igase, K .; , Et al. , J. et al. Ce
reb. Blood Flow Metab. , 19,
298-306, 1999; Sadamoto, Y .; ,
et al. , Biochem. Biophys. Re
s. Commun. , 253, 26-32, 199
8) A water maze test was performed for four consecutive days on the second and fourth weeks, respectively, to determine the place learning ability of SH-SP rats. The result is shown in FIG. The upper part of FIG. 1 shows the result of the second week, and the lower part of FIG. 1 shows the result of the fourth week. The statistical analysis was performed using ANOVA + Fisher PLSD, and the data are shown as mean ± standard deviation (SE).
0.05, ** indicates that P <0.01.
In FIG. 1, the white circles represent the ischemic group administered with distilled water, the black circles represent the sham operation group, the white squares represent the ischemic group administered with ginseng powder 0.6 g / kg / day, and the black squares represent the ginseng powder 0.75 g / kg. / Day-administered ischemia group, open triangles indicate kogine powder 0.9 g / kg / day administered ischemia group, and black triangles indicate kojin powder 1.2 g / kg / day-administered ischemia group. As shown in FIG. 1, the learning impairment after MCA permanent occlusion (after cerebral infarction) is significantly improved in the ischemic group administered with kojin powder 0.75 to 1.2 g / kg / day as compared with the ischemic group administered with distilled water. Was done. In particular, the best effect was observed in the ischemic group administered with kojin powder at 0.9 g / kg / day. In addition, SH
-There was no significant difference in the swimming speed of the SP rats between the groups.
【０１０９】４週目の水迷路テスト終了後に、ＳＨ−Ｓ
Ｐラットを抱水クロラールにて麻酔し、４％パラホルム
アルデヒドを含有する０．１モルリン酸緩衝液で経心的
に灌流固定した。その後、同動物の脳を摘出し大脳皮質
梗塞巣の写真を撮影した（図３参照）。左大脳皮質梗塞
面積を左大脳半球面積で除することにより大脳皮質梗塞
比率（％）を算出した。その結果を図２に示す。統計解
析法はＭａｎｎ−ＷｈｉｔｎｅｙＵテストにより、デー
タは平均±標準偏差（ＳＥ）で示されており、＊印はＰ
＜０．０５を、＊＊印はＰ＜０．０１であることを示
す。左側は蒸留水を用いたコントロールであり、その右
側の４種がコウジン末を用いたものであり、左から０．
６ｇ／ｋｇ／ｄａｙ投与群（黒斜線）、０．７５ｇ／ｋ
ｇ／ｄａｙ投与群（横線）、０．９ｇ／ｋｇ／ｄａｙ投
与群（斜線）、１．２ｇ／ｋｇ／ｄａｙ投与群（白抜
き）をそれぞれ示す。図２に示されるごとく、コウジン
末０．７５〜１．２ｇ／ｋｇ／日投与虚血群で蒸留水投
与虚血群に比して、大脳皮質梗塞比率も有意に減少して
いた。特にコウジン末０．９ｇ／ｋｇ／日投与虚血群で
最も効果が強く、その大脳皮質梗塞比率の平均値が蒸留
水投与虚血群の２分の１以下に減少していた。このこと
から、実際の脳梗塞体積は、コウジン末０．９ｇ／ｋｇ
／日の経口投与により約４分の１程度に縮小したことに
なる。After finishing the water maze test in the fourth week, SH-S
P rats were anesthetized with chloral hydrate, and perfused and fixed transcardially with 0.1 M phosphate buffer containing 4% paraformaldehyde. Thereafter, the brain of the animal was excised and a photograph of the cerebral cortical infarction was taken (see FIG. 3). The cerebral cortical infarction ratio (%) was calculated by dividing the left cerebral cortical infarct area by the left cerebral hemispheric area. The result is shown in FIG. Statistical analysis was performed by the Mann-Whitney U test. Data are shown as mean ± standard deviation (SE).
<0.05, ** indicates that P <0.01. The left side is a control using distilled water, and the four kinds on the right side are those using kojin powder.
6 g / kg / day administration group (black oblique line), 0.75 g / k
The g / day administration group (horizontal line), the 0.9 g / kg / day administration group (shaded line), and the 1.2 g / kg / day administration group (open) are shown, respectively. As shown in FIG. 2, the cerebral cortical infarction ratio was significantly reduced in the ischemic group administered with kojin powder at 0.75 to 1.2 g / kg / day as compared with the ischemic group administered with distilled water. In particular, the effect was strongest in the ischemic group administered with kojin powder at 0.9 g / kg / day, and the average value of the cerebral cortical infarction ratio was reduced to half or less of the ischemic group administered with distilled water. From this, the actual volume of cerebral infarction was 0.9 g / kg of kojin powder.
Per day of oral administration reduced to about a quarter.
【０１１０】図３の上段に蒸留水投与虚血群の脳梗塞巣
（４例）の写真を、図３の下段にコウジン末０．９ｇ／
ｋｇ／日投与虚血群の脳梗塞巣（４例）の写真を、図面
に変わる写真として示す。また図４に本実験の方法及び
結果をまとめた模式図を示す。まず、試験ラットの中大
脳動脈を永久閉塞し、これを２群に分け、１群にはコウ
ジン末を経口投与し（図４の下段）、他の１群には蒸留
水を経口投与（図４の上段）する。その後、水迷路テス
トにおいて目的のプラットホームに到達するまでの時間
を測定した。蒸留水投与虚血群では脳梗塞病巣部が大き
く虚血側の大脳半球に脳浮腫も認められ、水迷路テスト
において目的のプラットホームに到達するまでに長時間
を要しているのに対して、コウジン末投与虚血群におい
ては病巣部が縮小して脳浮腫も軽減しており、この結果
水迷路テストにおいて目的のプラットホームに短時間で
到達している。The upper part of FIG. 3 shows photographs of cerebral infarction lesions (4 cases) of the ischemic group administered with distilled water, and the lower part of FIG.
Pictures of cerebral infarction lesions (4 cases) in the ischemic group administered with kg / day are shown as pictures in place of the drawings. FIG. 4 is a schematic diagram summarizing the method and results of the experiment. First, the middle cerebral artery of the test rat was permanently occluded, divided into two groups, one group was orally administered with kojin powder (the lower part of FIG. 4), and the other group was orally administered with distilled water (FIG. 4). 4). Thereafter, the time required to reach the target platform in the water maze test was measured. In the ischemic group treated with distilled water, cerebral infarction lesions were large and cerebral edema was also observed in the cerebral hemisphere on the ischemic side, whereas in the water maze test it took a long time to reach the target platform, In the kojin powder-administered ischemia group, the lesion area was reduced and cerebral edema was reduced, and as a result, the target platform was quickly reached in the water maze test.
【０１１１】この実験に用いたＭＣＡ永久閉塞動物（脳
梗塞ラット）は明らかに、スナネズミの一過性前脳虚血
モデル（ヒト一過性脳虚血発作のモデル）よりも重篤で
ありかつヒトの脳梗塞の病態に近いモデルである。従っ
て、このＭＣＡ永久閉塞動物において、コウジン末の経
口投与が著効を示したということは、コウジン末が脳梗
塞や脳浮腫の予防・治療・処置に有用であることを物語
っている。経口投与により、このように画期的な効果を
示す薬物としてはコウジン末が世界で最初のものと考え
られる。特願平１０−３６５５６０（ジンセノサイドＲ
ｂ１からなる脳細胞又は神経細胞保護剤）において、本
発明者ら（阪中、田中）は、コウジン末の主成分である
ジンセノサイドＲｂ１の少量静脈内持続投与がＭＣＡ永
久閉塞ラットの脳梗塞巣を顕著に縮小せしめることを発
明している。しかし、ジンセノサイドＲｂ１そのものを
経口投与しても神経細胞保護効果を示さないことを最近
発明者は確認しているので、目下の所コウジン末が急性
期脳梗塞ならびにそれに伴う学習行動障害の予防・治療
・処置に利用される経口用医薬組成物として非常に有用
なものと思われる。事実、ジンセノサイドＲｂ１やコウ
ジン末を経口投与しても血中にジンセノサイドＲｂ１は
検出されず、ジンセノサイドＲｂ１自体を単独で経口投
与しても何ら生理作用は認められないと報告されている
（赤尾光昭ら、Ｔｈｅ Ｇｉｎｓｅｎｇ Ｒｅｖｉｅ
ｗ，２２，９７−１０２，１９９６）。The animals with permanent MCA occlusion (cerebral infarction rats) used in this experiment are clearly more severe than the gerbil transient forebrain ischemia model (model of human transient cerebral ischemia attack) and This model is similar to the pathology of human cerebral infarction. Therefore, the fact that oral administration of kojin powder showed a remarkable effect in this MCA permanently occluded animal indicates that kojin powder is useful for prevention, treatment and treatment of cerebral infarction and cerebral edema. Kojin powder is considered to be the first drug in the world to show such a breakthrough effect by oral administration. Japanese Patent Application No. 10-365560 (Ginsenoside R
In Brain cell or nerve cell-protective agents) consisting of b1, the present inventors (Sakanaka, Tanaka) is cerebral infarction minor continuous intravenous administration MCA permanent occlusion rats of ginsenoside Rb1 is a major component of end red ginseng It has been invented that the nest is significantly reduced. However, the present inventors have recently confirmed that oral administration of ginsenoside Rb1 itself does not show a neuroprotective effect, so that at present the ginseng powder can prevent acute cerebral infarction and associated learning behavioral disorders. It is considered to be very useful as an oral pharmaceutical composition used for therapy and treatment. In fact, ginsenoside Rb1 and ginsenoside Rb1 or red ginseng powder in the blood be administered orally is not detected, no physiological effect even when orally administered ginsenoside Rb1 itself alone has been reported not observed ( Mitsuaki Akao et al., The Ginseng Review
w, 22, 97-102, 1996).
【０１１２】コウジン末の成分は大きく分けて粗サポニ
ン分画と非サポニン分画からなるが、粗サポニン分画
は、さらにプロトパナキサジオール系サポニン、プロト
パナキサトリオール系サポニン、オレアノール酸系サポ
ニンから構成される。プロトパナキサジオール系サポニ
ンの代表がジンセノサイドＲｂ１、プロトパナキサトリ
オール系サポニンの代表がジンセノサイドＲｇ１、オレ
アノール酸系サポニンの代表がジンセノサイドＲｏであ
る（Ｓｈｉｂａｔａ，Ｓ．，ｅｔ ａｌ．，Ｅｃｏｎｏ
ｍｉｃ ａｎｄ ｍｅｄｉｃｉｎａｌ ｐｌａｎｔ ｒ
ｅｓｅａｒｃｈ，Ｗｏｒｌｄ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，
Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ｐｐ２１７−２８４，１９
８５）。これまでこれら３つの代表的精製サポニンのほ
かに、３０種類前後の精製サポニンの化学構造が決定さ
れている。コウジン末の経口投与が明らかに神経細胞保
護効果（神経細胞死抑止効果）を示し、ジンセノサイド
Ｒｂ１自体の経口投与にはそのような効果がないことか
ら判断すると、コウジン末中にはジンセノサイドＲｂ１
以外にも神経細胞保護作用を示す物質が豊富に含まれる
ことがまず想定される。ただし、コウジン末を経口投与
することによりジンセノサイドＲｂ１の分解が抑止され
測定閾値以下のジンセノサイドＲｂ１が消化管より血中
に吸収される可能性は否定できないので、このように微
量血中移行したジンセノサイドＲｂ１とコウジン末中の
他の神経細胞保護物質の効果があいまって、有意な脳梗
塞巣の縮小と場所学習能力障害改善作用がもたらされた
と推測することも不可能ではない。コウジン末中に含ま
れるジンセノサイドＲｂ１以外の神経細胞保護物質の候
補として、これまで化学構造が決定された精製サポニン
もしくはジンセノサイド類、粗サポニン分画ならびに非
サポニン分画に含まれる未知の成分があげられる。The components of kojin are roughly divided into a crude saponin fraction and a non-saponin fraction. The crude saponin fraction is further divided into protopanaxadiol-based saponins, protopanaxatriol-based saponins, and oleanolic acid-based saponins. Be composed. Ginsenoside Rb1 is representative of protopanaxadiol type saponins, ginsenoside Rg1 is representative of protopanaxatriol type saponins, and ginsenoside Ro is representative of oleanolic acid type saponins (Shibata, S., et al., Econo).
mic and medical plant
essearch, World Scientific,
Philadelphia, pp217-284, 19
85). So far, in addition to these three representative purified saponins, the chemical structures of about 30 types of purified saponins have been determined. Oral administration of powder red ginseng showed apparently neuroprotective effects (neuronal cell death suppressing effect), the oral administration of ginsenoside Rb1 itself determines since there is no such effect, during late red ginseng ginsenoside Rb1
In addition to the above, it is assumed that a substance having a neuroprotective effect is abundantly contained. However, since the ginsenoside Rb1 decomposition is suppressed below the measurement threshold ginsenoside Rb1 by orally administering red ginseng powder will not be denied likely to be absorbed into the blood from the gastrointestinal tract, and thus moves in trace blood ginsenoside Rb and1 and the effect of other neuroprotective substances red ginseng powder in the Aima', it is not impossible to guess the reduced and where learning disorder improving effect of significant cerebral infarct has resulted. As a candidate of ginsenoside Rb1 other neuroprotective substances contained red ginseng powder in hitherto purified saponins or ginsenosides chemical structure has been determined, the unknown components contained in the crude saponin fraction and non-saponin fraction mentioned Can be
【０１１３】さて、ＭＣＡが永久閉塞するとＭＣＡだけ
で栄養されている部位すなわち虚血中心部（ｉｓｃｈｅ
ｍｉｃ ｃｏｒｅ）の神経細胞はＭＣＡが再開通しない
限り、すみやかに壊死（ネクローシス）に陥り脳梗塞病
変が形成されるので、いかなる薬物といえども虚血中心
部の脳組織を救うことはまず困難と考えられる。なお、
細胞死はその形態学的特徴よりネクローシス（壊死）と
アポトーシスに大別されている。ただ、神経細胞死に関
しては、ネクローシスという概念は定着しているもの
の、一方のアポトーシスについては、病的成熟脳で類似
の現象は観察されるがリンパ球にみられるような典型的
特徴を示すものが非常に少ない。従って、本明細書では
ネクローシスとは異なり緩徐に進行する神経細胞の死を
“神経細胞のアポトーシス”あるいは“アポトーシス様
神経細胞死”と定義することにする。しかし、神経細胞
死を壊死（ネクローシス）とアポトーシス様神経細胞死
に区別することすら困難な例もあることは周知の事実で
ある。たとえば神経細胞が死に至る際、当初アポトーシ
ス様の形態をとるものの、ある時期を境にして突然ネク
ローシスの特徴を呈するいわゆるｐｏｓｔ−ａｐｏｐｔ
ｏｔｉｃ ｎｅｃｒｏｓｉｓという現象が存在すること
も事実である。そこで、本明細書ではこのような区別を
することが困難な場合には、単に神経細胞死という用語
を使うこととする。Now, when the MCA is permanently occluded, the site nourished only by the MCA, that is, the ischemic center (ische)
Unless MCA is reopened, neurons of the mic core immediately fall into necrosis (necrosis) and cerebral infarction lesions are formed. Therefore, it is difficult for any drug to rescue the brain tissue in the central ischemic region. Conceivable. In addition,
Cell death is roughly classified into necrosis (necrosis) and apoptosis based on its morphological characteristics. However, although the concept of necrosis is well established in neuronal cell death, apoptosis, on the other hand, is similar to that observed in pathologically mature brain but shows typical characteristics found in lymphocytes But very few. Therefore, in the present specification, the death of a slowly progressing nerve cell, unlike necrosis, is defined as “apoptosis of a nerve cell” or “apoptotic-like nerve cell death”. However, it is a well-known fact that it is difficult even to distinguish neuronal death into necrosis (necrosis) and apoptotic neuronal death. For example, when a nerve cell dies, it initially assumes an apoptotic form, but after a certain time, suddenly exhibits a characteristic of necrosis, a so-called post-apopt.
It is also true that there is a phenomenon called optic necrosis. Therefore, in the present specification, when it is difficult to make such a distinction, the term “neural cell death” will be used simply.
【０１１４】一方、神経細胞の壊死（ネクローシス）が
起こる虚血中心部（ｉｓｃｈｅｍｉｃ ｃｏｒｅ）とは
異なり虚血巣周辺部（ｉｓｃｈｅｍｉｃ ｐｅｎｕｍｂ
ｒａ）ではＭＣＡからの血液供給がまったくなくなった
あとでも、わずかながら前大脳動脈や後大脳動脈の皮質
枝から血液供給があるので、同部の神経細胞はＭＣＡ閉
塞後しばらくは瀕死の状態で生きていると考えられる。
もちろん何の手だても施さなければ虚血巣周辺部（ｉｓ
ｃｈｅｍｉｃ ｐｅｎｕｍｂｒａ）でやがてアポトーシ
ス様神経細胞死が起こり同部がすべて脳梗塞病変に様変
わりすることは周知の事実である。臨床的にはこの虚血
巣周辺部（ｉｓｃｈｅｍｉｃ ｐｅｎｕｍｂｒａ）の神
経細胞を救うことがもっとも大切であるが、このことを
可能にならしむるほど強力に神経細胞保護作用を示す経
口投与用医薬組成物は、発明者の知る限りこれまで皆無
であった。On the other hand, unlike ischemic core where necrosis of nerve cells (necrosis) occurs, ischemic penumbium (ischemic penumb)
In (ra), even after the blood supply from the MCA is completely lost, there is a slight blood supply from the cortical branch of the anterior cerebral artery and the posterior cerebral artery. It is thought that it is.
Of course, if no hand is applied, the area around the ischemic foci (is
It is a well-known fact that in a chemical penumbra, apoptosis-like neuronal cell death eventually occurs, and the entire area turns into a cerebral infarction lesion. Clinically, it is most important to rescue the nerve cells in the ischemic penumbra area. However, a pharmaceutical composition for oral administration showing a nerve cell protective action so powerful as to make this possible. Has never existed as far as the inventor knows.
【０１１５】本発明者らは、ＳＨ−ＳＰラットのＭＣＡ
を永久閉塞する１週間前より、ＭＣＡ永久閉塞後４週間
までコウジン末を経口投与しておくと、同ラットの大脳
皮質梗塞体積が非投与群の約４分の１程度にまで縮小
し、場所学習障害も有意に改善することを証明した。こ
のことは、糖尿病、脳動脈硬化症、高血圧症、心房細
動、等の基礎疾患を有する患者すなわち脳梗塞予備群と
総称される患者や高齢者もしくは脳卒中既往歴を有する
患者が、あらかじめコウジン末を服用しておけば、不幸
にして脳梗塞発作に見舞われた場合でも引き続きコウジ
ン末を経口投与することにより、脳梗塞病変が著しく改
善され脳血管性痴呆症も抑止されることを物語ってい
る。さらにコウジン末の経口投与により脳梗塞病巣体積
が非投与群の４分の１程度に縮小したことは、同薬剤の
経口投与が虚血巣周辺部（ｉｓｃｈｅｍｉｃ ｐｅｎｕ
ｍｂｒａ）における神経細胞のアポトーシスもしくはア
ポトーシス様神経細胞死を顕著に抑止したことを明らか
にするものである。The present inventors have studied the MCA of SH-SP rats.
Oral administration of kojin powder from one week before permanent occlusion to 4 weeks after MCA permanent occlusion reduces the cerebral cortical infarct volume of the same rat to about one-fourth that of the non-administered group. Learning disabilities also proved to be significantly improved. This means that patients with underlying diseases such as diabetes, cerebral arteriosclerosis, hypertension, atrial fibrillation, etc., that is, patients who are collectively referred to as a cerebral infarction reserve group, elderly people or patients with a history of stroke, It shows that, even if unfortunately suffering a cerebral infarction attack, oral administration of kojin powder will significantly improve cerebral infarction lesions and suppress cerebrovascular dementia . Furthermore, the oral administration of kojin powder reduced the volume of cerebral infarction lesions to about one-fourth that of the non-administration group.
mbra) significantly attenuated the apoptosis of neurons or apoptotic-like neuronal death in Mbra).
【０１１６】一般に、神経細胞保護剤や保護因子は脳室
内あるいは脳実質内に直接投与した場合にもっとも大き
な効果を発揮し、静脈内投与や腹腔内投与をした場合に
は、脳血液関門に遮断されてその効果・効能が激減ある
いは発現しないことがほとんどである。ましてや神経細
胞保護剤や保護因子の経口投与となると、消化管での分
解・吸収、血中への移行量・移行速度、血中での分解、
脳血液関門での障壁、等、越えるべきハードルが山積み
している。最近ようやく、本発明者ら（阪中、田中）は
特願平１０−３６５５６０（ジンセノサイドＲｂ１から
なる脳細胞又は神経細胞保護剤）に記載されたごとく、
優れた静脈内投与用神経細胞保護剤を発明することがで
きたが、この静脈内投与用神経細胞保護剤（すなわちジ
ンセノサイドＲｂ１）ですら、単に経口投与しただけで
は神経細胞保護作用を示さないことを最近発明者らは確
認した。もちろん、ジンセノサイドＲｂ１でも、消化管
での分解を阻止する担体（たとえばゼラチン、油層、シ
ェラック等）あるいは消化管での吸収を促進する担体に
混入・封入又は結合させたのちに、経口投与剤として使
用できる可能性は残されているが、目下の所経口投与用
神経細胞保護剤としてはコウジン末がその効果・効能を
斟酌した場合、世界中でもっとも優れたものと思われ
る。発明者の知る限り、コウジン末は世界で唯一の優れ
た経口投与用神経細胞保護剤である。In general, neuroprotective agents and protective factors exert the greatest effects when administered directly into the intraventricular or intracerebral parenchyma, and block the blood-brain barrier when administered intravenously or intraperitoneally. In most cases, their effects and effects are drastically reduced or not exhibited. Even more, oral administration of nerve cell protective agents and protective factors causes degradation and absorption in the gastrointestinal tract, the amount and speed of translocation into the blood, degradation in the blood,
There are plenty of hurdles to overcome, such as barriers at the blood-brain barrier. Only recently, the present inventors (Sakanaka, Tanaka) is as described in Japanese Patent Application No. 10-365560 (Brain cell or nerve cell-protective agents comprising ginsenoside Rb1),
Although an excellent neuroprotective agent for intravenous administration could be invented, even this intravenous neuroprotective agent (namely, ginsenoside Rb1 ) does not show a neuroprotective effect simply by oral administration. The inventors have recently confirmed this. Of course, ginsenoside Rb1 can also be mixed with a carrier that inhibits decomposition in the digestive tract (eg, gelatin, an oil layer, shellac, etc.) or a carrier that promotes absorption in the gastrointestinal tract, and then encapsulated or bound, and then used for oral administration. Although there is a possibility that it can be used, Kojin Powder is considered to be currently the best as a neuroprotective agent for oral administration in the world, considering its effect and efficacy, in view of its effect and efficacy. As far as the inventor knows, kojin powder is the world's only superior neuroprotectant for oral administration.
【０１１７】次に本発明者らは、ＭＣＡを永久閉塞した
後にコウジン末の経口投与を開始してその効果を調べ
た。ＭＣＡ永久閉塞の前後にコウジン末を経口投与した
前述の実験において０．９ｇ／ｋｇ／日の用量でコウジ
ン末を投与したときにもっとも良好な結果が得られたの
で、本実験ではこの用量で実験を実施した。１２〜１３
週齢の雄性ＳＨ−ＳＰラット（体重２５０〜３００ｇ）
の左中大脳動脈皮質枝（ＭＣＡ）を吸入麻酔下で凝固・
切離したのち、麻酔を終了した。同動物が麻酔から覚醒
した後に、コウジン末を０．９ｇ／ｋｇ／日の用量で１
日単回３２日間経口投与した。なお、ＭＣＡを閉塞した
対照動物（虚血コントロール動物）には、蒸留水のみを
投与した。Next, the present inventors started oral administration of kojin powder after permanent occlusion of MCA, and examined the effect. Since the best results were obtained when the ginseng powder was administered at a dose of 0.9 g / kg / day in the above-mentioned experiment in which ginseng powder was orally administered before and after MCA permanent occlusion, this experiment was conducted with this dose. Was carried out. 12-13
Week-old male SH-SP rats (weight: 250-300 g)
Of the left middle cerebral artery cortex (MCA) under inhalation anesthesia
After dissection, the anesthesia was terminated. After the animal was awake from anesthesia, kojin powder was administered at a dose of 0.9 g / kg / day for 1 hour.
Oral administration once a day for 32 days. Control animals in which MCA was occluded (ischemic control animals) were administered only distilled water.
【０１１８】ＭＣＡ永久閉塞後、発明者らの方法に従っ
て（Ｚｈａｎｇ，Ｂ．，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｓｔｒｏｋ
ｅ Ｃｅｒｅｂｒｏｖａｓｃ．Ｄｉｓ．，７，１−９，
１９９８；Ｉｇａｓｅ，Ｋ．，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｅ
ｒｅｂ．Ｂｌｏｏｄ Ｆｌｏｗ Ｍｅｔａｂ．，１９，
２９８−３０６，１９９９；Ｓａｄａｍｏｔｏ，Ｙ．，
ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅ
ｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．，２５３，２６−３２，１９９
８）、２週目と４週目にそれぞれ４日間連続で水迷路テ
ストを実施し、ＳＨ−ＳＰラットの場所学習能力を判定
した。その結果を図５に示す。図５の上段は２週目の結
果であり、同下段は４週目の結果である。統計解析法は
ＡＮＯＶＡ＋ＦｉｓｈｅｒのＰＬＳＤにより、データは
平均±標準偏差（ＳＥ）で示されており、＊印はＰ＜
０．０５であることを示す。また、図５の白丸印は蒸留
水投与虚血群、黒四角印はコウジン末０．９ｇ／ｋｇ／
日投与虚血群を示す。参考として、図１で用いた偽手術
群の実験値を黒丸印で示す。図５に示されるごとく、Ｍ
ＣＡ永久閉塞後（脳梗塞後）の場所学習障害が、コウジ
ン末０．９ｇ／ｋｇ／日の虚血後経口投与で蒸留水注入
虚血群に比べて有意に改善された。特に、ＭＣＡ閉塞後
４週目に良好な効果がみられた。なお、ＳＨ−ＳＰラッ
トの水泳速度には各群で有意差はみられなかった。After MCA permanent occlusion, following the method of the inventors (Zhang, B., et al., J. Strok).
e Cerebrovasc. Dis. , 7, 1-9,
1998; Igase, K .; , Et al. , J. et al. Ce
reb. Blood Flow Metab. , 19,
298-306, 1999; Sadamoto, Y .; ,
et al. , Biochem. Biophys. Re
s. Commun. , 253, 26-32, 199
8) A water maze test was performed for four consecutive days on the second and fourth weeks, respectively, to determine the place learning ability of SH-SP rats. The result is shown in FIG. The upper part of FIG. 5 shows the results of the second week, and the lower part of FIG. 5 shows the results of the fourth week. The statistical analysis was performed using ANOVA + Fisher PLSD, and the data are shown as mean ± standard deviation (SE).
It shows that it is 0.05. In FIG. 5, white circles indicate ischemia group administered with distilled water, and black squares indicate kogine powder at 0.9 g / kg / kg.
3 shows an ischemic group administered daily. For reference, the experimental values of the sham operation group used in FIG. 1 are indicated by black circles. As shown in FIG.
The place learning disorder after permanent CA occlusion (after cerebral infarction) was significantly improved by oral administration of kojin powder at 0.9 g / kg / day after ischemia as compared with the ischemia group injected with distilled water. In particular, good effects were seen 4 weeks after MCA occlusion. In addition, there was no significant difference in the swimming speed of the SH-SP rats between the groups.
【０１１９】４週目の水迷路テスト終了後に、ＳＨ−Ｓ
Ｐラットを抱水クローラルにて麻酔し、４％パラホルム
アルデヒドを含有する０．１モルリン酸緩衝液で経心的
に灌流固定した。その後、同動物の脳を摘出し大脳皮質
梗塞巣の写真を撮影した。左大脳半球面積と左大脳皮質
梗塞面積を、写真上で画像解析装置を用いて計測し、左
大脳皮質梗塞面積を左大脳半球面積で除することにより
大脳皮質梗塞比率（％）を算出した。その結果を図６に
示す。統計解析法はＭａｎｎ−ＷｈｉｔｎｅｙＵテスト
により、データは平均±標準偏差（ＳＥ）で示されてお
り、＊印はＰ＜０．０５であることを示す。左側は蒸留
水を用いたコントロールであり、その右側はコウジン末
０．９ｇ／ｋｇ／ｄａｙ投与群（黒斜線）を示す。図６
に示されるごとく、コウジン末０．９ｇ／ｋｇ／日投与
虚血群で蒸留水投与虚血群に比して、大脳皮質梗塞比率
も有意に減少していた。しかしながら、その効果は、Ｍ
ＣＡ永久閉塞前後にコウジン末を０．９ｇ／ｋｇ／日の
用量で投与した場合と比べて、弱いものであった。従っ
て、コウジン末は脳梗塞が起こる前から、服用（経口投
与）し始め、不幸にして脳梗塞に見舞われても経口投与
し続けることが肝要であると考えられる。もちろん、コ
ウジン末をＭＣＡ永久閉塞後に経口投与した場合の効果
は、低用量のジンセノサイドＲｂ１をＭＣＡ永久閉塞後
に静脈内持続投与した場合の効果に比べて（特願平１０
−３６５５６０、ジンセノサイドＲｂ１からなる脳細胞
又は神経細胞保護剤）不充分であるが、ジンセノサイド
Ｒｂ１のような速効性のある静脈内投与製剤が普及して
いないことを考えると、コウジン末の経口投与を脳梗塞
発症後に開始することも次善の策として可能と思われ
る。After finishing the water maze test in the fourth week, the SH-S
P rats were anesthetized with chloral hydrate and perfusion fixed with 0.1 M phosphate buffer containing 4% paraformaldehyde. Thereafter, the brain of the animal was excised and a photograph of the cerebral cortical infarction was taken. The left cerebral hemisphere area and the left cerebral cortical infarct area were measured on a photograph using an image analyzer, and the cerebral cortical infarction ratio (%) was calculated by dividing the left cerebral cortical infarct area by the left cerebral hemispheric area. FIG. 6 shows the result. Statistical analysis was performed by the Mann-Whitney U test, and data are shown as mean ± standard deviation (SE). The left side shows the control using distilled water, and the right side shows the group administered with ginseng powder 0.9 g / kg / day (black oblique line). FIG.
As shown in the figure, the ratio of cerebral cortical infarction was also significantly reduced in the ischemic group administered with ginseng powder at 0.9 g / kg / day as compared with the ischemic group administered with distilled water. However, the effect is M
It was weaker than when ginseng powder was administered at a dose of 0.9 g / kg / day before and after CA permanent occlusion. Therefore, it is considered important to start taking (oral administration) kojin powder before cerebral infarction occurs, and to continue oral administration even if unfortunately suffers from cerebral infarction. Of course, the effect in the case of oral administration of red ginseng powder after MCA permanent occlusion, ginsenoside Rb1 low doses compared to the effect in the case of continuous intravenous administration after MCA permanent occlusion (Japanese Patent Application No. 10
-365560, is a ginsenoside Rb1 consisting Brain cell or nerve cell-protective agents) insufficient, given that intravenous formulation with a fast-acting, such as ginsenoside Rb1 is not widespread, red ginseng powder oral Initiating administration after the onset of cerebral infarction seems to be a sub-optimal measure.
【０１２０】医療機関でのみ可能な薬物の静脈内投与や
点滴静注に比べて、少なくともコウジン末の経口投与
は、いつどこででも脳梗塞患者の意識と嚥下機能が保持
されている限り実施可能であるという利点を備えている
と思われる。また、脳梗塞患者の意識や嚥下機能が芳し
くないときには、胃管を挿入することにより長期的に医
療機関のみならず在宅でも、コウジン末を投与できるの
で、その利用価値は極めて高いと思われる。また、コウ
ジン末はすでに人類が数千年の長きにわたって服用して
いる薬物であるので、その安全性も確立されていること
を考えると、少なくともジンセノサイドＲｂ１の静脈内
投与が一般臨床の場で適用されるまでは、急性期脳梗塞
患者にコウジン末を速やかに経口投与することが重要か
つ必須の治療上の選択肢となることを、本発明は明らか
にするものである。Compared to intravenous administration or intravenous infusion of drugs that can only be performed in medical institutions, at least oral administration of kojin powder can be performed anytime and anywhere as long as the consciousness and swallowing function of the cerebral infarction patient are maintained. It seems to have the advantage that there is. In addition, when cerebral infarction patients have poor consciousness and swallowing function, kojin powder can be administered not only at medical institutions but also at home for a long time by inserting a stomach tube, so its utility value is considered to be extremely high. Furthermore, since red ginseng powder are already drug humanity are taking for a long time in thousands of years, given that it is established to be safe, at least intravenous administration of ginsenoside Rb1 is a general clinical practice Until applied, the present invention demonstrates that rapid oral administration of kojin powder to patients with acute cerebral infarction is an important and essential therapeutic option.
【０１２１】次に、本発明者らはコウジン末の経口投与
がどのようなメカニズムで神経細胞を保護するかを調べ
た。もしこの作用メカニズムが解明されればコウジン末
の新たな効果・効能が発明されるものと期待される。こ
のため、本発明者らは細胞死抑制遺伝子産物であるＢｃ
ｌ−ｘＬ蛋白に着目した。Ｂｃｌ−ｘＬ蛋白は神経組
織、免疫系組織、皮膚組織、循環系組織を始めとするあ
らゆる組織に発現しており、細胞が生存する上で重要な
役割を担っていることが証明されている（Ａｄａｍｓ，
Ｊ．Ｍ．ａｎｄ Ｃｏｒｙ，Ｓ．Ｓｃｉｅｎｃｅ，２８
１，１３２２−１３２６，１９９８；Ｂｏｉｓｅ，Ｌ．
Ｈ．ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ，７４．５９７−６０８，
１９９３；Ｇｏｔｔｓｃｈａｌｋ，Ａ．Ｒ．ｅｔ ａ
ｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳ
Ａ，９１，７３５０−７３５４，１９９４；Ｇｏｎｚａ
ｌｅｔｚ−Ｇａｒｃｉａ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏ
ｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９２，４３
０４−４３０８，１９９５）。Next, the present inventors examined the mechanism by which oral administration of kojin powder protects nerve cells. If this mechanism of action is elucidated, it is expected that new effects and efficacy of kojin powder will be invented. Therefore, the present inventors have determined that the cell death suppressor gene product Bc
Attention was paid to l-xL protein. Bcl-xL protein nerve tissue, immune system tissue, skin tissue, is expressed in all tissues including the circulatory system tissue, it has been demonstrated that cells plays an important role in survival (Adams,
J. M. and Cory, S.M. Science, 28
1, 1322-1326, 1998; Boise, L .;
H. et al. , Cell, 74.597-608,
1993; Gottschalk, A .; R. et a
l. Proc. Natl. Acad. Sci. US
A, 91, 7350-7354, 1994; Gonza
letz-Garcia, M .; et al. , Pro
c. Natl. Acad. Sci. USA, 92, 43
04-4308, 1995).
【０１２２】そこで、本発明者らはコウジン末の経口投
与が神経組織におけるＢｃｌ−ｘＬ蛋白の発現を増加さ
せるかどうか、スナネズミの一過性前脳虚血モデルを用
いて調べた。本発明者らの既発表の論文において（Ｗｅ
ｎ，Ｔ．−Ｃ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，
１８８，６３５−６４９，１９９８）、本発明者らは一
過性前脳虚血後の海馬ＣＡ１領域においてＢｃｌ−ｘＬ
蛋白の発現量を調べる実験系を確立しているので、この
系を用いてコウジン末経口投与の効果を検討した。とこ
ろで、図７に示すように、スナネズミに５分間の一過性
前脳虚血を負荷する１週間前より１日単回、７日間コウ
ジン末を０．９ｇ／ｋｇ／日又は１．５ｇ／ｋｇ／日の
用量で経口投与しておくと、蒸留水投与虚血群に比べて
海馬ＣＡ１領域の神経細胞死が有意に予防され、受動的
回避学習実験の反応潜時も延長することを、本発明者の
１人（阪中）はすでに論文として発表している（Ｗｅ
ｎ，Ｔ．−Ｃ．ｅｔ ａｌ．，Ａｃｔａ Ｎｅｕｒｏｐ
ａｔｈｏｌ．，９１，１５−２２，１９９６）。図７の
上段は反応潜時（秒）を示し、下段は神経細胞密度（数
／ｍｍ）を示す。左側の白抜きの２本は偽手術のものを
示し、その左側は偽手術で無処理群を、右側は偽手術で
蒸留水投与群を示す。右側の黒抜きの４本は、左から蒸
留水投与虚血群、コウジン末０．６ｇ／ｋｇ／日投与虚
血群、コウジン末０．９ｇ／ｋｇ／日投与虚血群、コウ
ジン末１．５ｇ／ｋｇ／日投与虚血群をそれぞれ示す。
特にスナネズミにおいてはコウジン末１．５ｇ／ｋｇ／
日投与虚血群で０．９ｇ／ｋｇ／日投与虚血群よりも良
好な効果が見られるので、本実験ではコウジン末を１．
５ｇ／ｋｇ／日の用量で５分間の一過性前脳虚血を負荷
する１週間前より１日単回７日間経口投与し、５分虚血
後さらにコウジン末を経口投与した。最後のコウジン末
投与から２４時間目に海馬ＣＡ１領域の組織を採取し
た。その後電気泳動用サンプル緩衝液で細胞を溶解し、
電気泳動を実施した。泳動により分離された蛋白をさら
にニトロセルロース膜に転写し、抗Ｂｃｌ−ｘＬ蛋白抗
体を用いてウエスタンブロッティングを行った。偽手術
動物ならびに５分間の一過性前脳虚血を負荷した対照動
物（虚血コントロール動物）には、同量の蒸留水のみを
経口投与した。また、１．５ｇ／ｋｇ／日という高用量
のコウジン末経口投与が、末梢臓器のＢｃｌ−ｘＬ蛋白
発現に影響を与えるかどうか調べるため、肝臓と脾臓を
採取して、同様の手順でウエスタンブロッティングを実
施した。以上の実験手順の詳細は発明者らの既報（Ｗｅ
ｎ，Ｔ．−Ｃ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，
１８８，６３５−６４９，１９９８）に記述されてい
る。結果を図８に示す。図８は、コウジン末１．５ｇ／
ｋｇ／日投与による、海馬ＣＡ１領域におけるＢｃｌ−
ｘＬ蛋白の発現の結果を示す図面に変わる写真である。
左側の４本が偽手術のものであり、中央の４本がコウジ
ン末投与のものであり、右側の４本が蒸留水投与のもの
である。また、各４検体における、抗Ｂｃｌ−ｘＬ蛋白
抗体と反応するバンドを画像解析装置で定量化した。結
果を図９に示す。図９の縦軸はＢｃｌ−ｘＬ蛋白発現量
を示し、グラフの左から偽手術（黒色）、コウジン末投
与群（黒斜線）、蒸留水投与群（破線斜線）をそれぞれ
示す。統計解析法はＡＮＯＶＡ＋Ｓｃｈｅｆｆｅ’ｓ
ｐｏｓｔ ｈｏｃテストにより、＊＊印はＰ＜０．０１
であることを示す。[0122] Therefore, the present inventors whether oral administration of powder red ginseng increases the expression of Bcl-xL protein in neural tissue was investigated using transient forebrain ischemia model of gerbils. In our published paper (We
n, T. -C. et al. , J. et al. Exp. Med. ,
188,635-649,1998), weBcl-x L in the hippocampus CA1 region after transient forebrain ischemia
We have established an experimental system for examining the expression level of protein, and studied the effect of oral administration of kojin powder using this system. By the way, as shown in FIG. 7, gerbils were given 0.9 g / kg / day or 1.5 g / kg of ginseng powder once a day for 7 days, one week before one week of transient cerebral ischemia loading for 5 minutes. Oral administration at a dose of kg / day significantly prevents neuronal cell death in the hippocampal CA1 region and prolongs the response latency of passive avoidance learning experiments, compared to distilled water-administered ischemic groups. One of the present inventors (Sakanaka) has already published a paper (We
n, T. -C. et al. , Acta Neurop
atol. , 91, 15-22, 1996). The upper part of FIG. 7 shows the reaction latency (second), and the lower part shows the nerve cell density (number / mm). The two white outlines on the left side show the sham operation, the left side shows the untreated group with the sham operation, and the right side shows the distilled water administration group with the sham operation. The four black boxes on the right are the ischemic group administered with distilled water, the ischemic group administered with kogine powder 0.6 g / kg / day, the ischemic group administered with kogine powder 0.9 g / kg / day, and the kogin powder 1. The ischemia group administered at 5 g / kg / day is shown.
Especially in gerbils, kojin powder 1.5 g / kg /
Since a better effect is seen in the ischemic group administered daily than in the ischemic group administered 0.9 g / kg / day, in the present experiment, kojin powder was added in the amount of 1.
A single dose of 5 g / kg / day was orally administered once a day for 7 days from one week before the transient forebrain ischemia was loaded for 5 minutes, and kojin powder was further orally administered after 5 minutes of ischemia. Twenty-four hours after the last administration of kojin powder, tissue in the CA1 region of the hippocampus was collected. Then lyse the cells with electrophoresis sample buffer,
Electrophoresis was performed. Transferred to further nitrocellulose membrane separated proteins by electrophoresis, Western blotting was performed using anti-Bcl-xL protein antibody. Sham-operated animals and control animals loaded with transient forebrain ischemia for 5 minutes (ischemic control animals) were orally administered only the same amount of distilled water. Further, 1.5 g / kg / day red ginseng powder oral administration of doses as high as is, to see if affects the Bcl-xL protein expression in peripheral organs, liver and spleen were collected, western by the same procedure Blotting was performed. Details of the above experimental procedure are described in the previous report (We
n, T. -C. et al. , J. et al. Exp. Med. ,
188, 635-649, 1998). FIG. 8 shows the results. FIG. 8 shows that ginseng powder 1.5 g /
kg / day Bcl- in the hippocampal CA1 area
7 is a photograph replacing a drawing showing the result of expression ofxL protein.
The four on the left are for sham operation, the four on the center are for kojin powder administration, and the four on the right are for distilled water administration. In each of the four samples, the band reacting with the anti-Bcl-xL protein antibody was quantified by an image analyzer. FIG. 9 shows the results. The vertical axis in FIG. 9 shows the expression level of Bcl-xL protein, and the left side of the graph shows the sham operation (black), the kojin powder administration group (black oblique line), and the distilled water administration group (dashed oblique line), respectively. Statistical analysis method is ANOVA + Scheffe's
According to the post hoc test, ** indicates P <0.01.
Is shown.
【０１２３】図８に示すごとく、コウジン末を１．５ｇ
／ｋｇ／日の用量でスナネズミに５分間の一過性前脳虚
血を負荷する１週間前より１日単回、７日間経口投与し
虚血負荷直後にも同量のコウジン末を単回経口投与する
と、２４時間後海馬ＣＡ１領域におけるＢｃｌ−ｘＬ蛋
白発現量は、偽手術群ならびに蒸留水投与虚血群に比べ
て、全例で増加していた。この抗Ｂｃｌ−ｘＬ蛋白抗体
と反応するバンドを画像解析装置で定量化した結果、図
９に示すごとくコウジン末の経口投与が海馬ＣＡ１領域
におけるＢｃｌ−ｘＬ蛋白発現量を有意に増加させるこ
とが判明した。しかし、このように高用量のコウジン末
を経口投与しても肝臓や脾臓におけるＢｃｌ−ｘＬ蛋白
発現量は増加しなかった。As shown in FIG. 8, 1.5 g of kojin powder was used.
Gerbils were orally administered once daily for 7 days from one week before transient cerebral ischemia was loaded for 5 minutes at a dose of / kg / day, and the same amount of kojin powder was given immediately after ischemic loading When administered orally, Bcl-xL protein expression levels after 24 hours hippocampal CA1 region, sham operation group and compared to distilled water administration ischemia group was increased in all cases. As a result of quantifying the band reacting with the anti-Bcl-xL protein antibody with an image analyzer, as shown in FIG. 9, oral administration of kojin powder significantly increased the expression level of Bcl-xL protein in the hippocampal CA1 region. There was found. However, Bcl-xL protein expression level in such high doses the liver and spleen even when administered orally powder red ginseng in did not increase.
【０１２４】本発明者らは次に、低用量のコウジン末を
１週間よりも長期にわたり経口投与すれば海馬ＣＡ１領
域におけるＢｃｌ−ｘＬ蛋白の発現量が増加するかどう
か調べた。このため、たとえば２００ｍｇ／ｋｇ／日の
用量で、スナネズミに５分間の一過性前脳虚血を負荷す
る４週間前より１日単回経口投与し、５分虚血直後にさ
らに単回経口投与した。２４時間後に海馬ＣＡ１領域を
採取し、図８に示した実験同様抗Ｂｃｌ−ｘＬ蛋白抗体
によるウエスタンブロッティングを実施した。偽手術動
物ならびに５分間の一過性前脳虚血を負荷した対照動物
（虚血コントロール動物）には、同量の蒸留水のみを経
口投与した。また、２００ｍｇ／ｋｇ／日のコウジン末
経口投与が、末梢臓器のＢｃｌ−ｘＬ蛋白発現に影響を
与えるかどうか調べるため、肝臓と脾臓を採取して、同
様の手順でウエスタンブロッティングを実施した。図１
０に、２００ｍｇ／ｋｇ／日のコウジン末経口投与によ
る、肝臓におけるＢｃｌ−ｘＬ蛋白の発現の結果を示
す。図１０のＡ（上段）は、ウエスタンブロッティング
の結果を示す図面に変わる写真であり、左側の４本は蒸
留水投与群を、右側の４本はコウジン末投与群をそれぞ
れ示す。図１０のＢ（下段）は各４検体における、抗Ｂ
ｃｌ−ｘＬ蛋白抗体と反応するバンドを画像解析装置で
定量化した結果を示す。図１０のＢの縦軸はＢｃｌ−ｘ
Ｌ蛋白発現量を示し、グラフの左側は蒸留水投与群（破
線斜線）を、右側はコウジン末投与群（黒斜線）をそれ
ぞれ示す。統計解析法はＡＮＯＶＡ＋Ｓｃｈｅｆｆｅ’
ｓ ｐｏｓｔ ｈｏｃテストにより、＊印はＰ＜０．０
５であることを示す。図１１に、２００ｍｇ／ｋｇ／日
のコウジン末経口投与による、脾臓におけるＢｃｌ−ｘ
Ｌ蛋白の発現の結果を示す。図１１のＡ（上段）は、ウ
エスタンブロッティングの結果を示す図面に変わる写真
であり、左側の４本は蒸留水投与群を、右側の４本はコ
ウジン末投与群をそれぞれ示す。図１１のＢ（下段）は
各４検体における、抗Ｂｃｌ−ｘＬ蛋白抗体と反応する
バンドを画像解析装置で定量化した結果を示す。図１１
のＢの縦軸はＢｃｌ−ｘＬ蛋白発現量を示し、グラフの
左側は蒸留水投与群（破線斜線）を、右側はコウジン末
投与群（黒斜線）をそれぞれ示す。統計解析法はＡＮＯ
ＶＡ＋Ｓｃｈｅｆｆｅ’ｓ ｐｏｓｔ ｈｏｃテストに
より、＊印はＰ＜０．０５であることを示す。[0124] We then expression level of Bcl-xL protein in the hippocampal CA1 region if orally administered red ginseng powder of the low dose over a long period than 1 week was investigated whether increased. Therefore, for example, at a dose of 200 mg / kg / day, gerbils are orally administered once a day for 4 minutes before transient cerebral ischemia is loaded for 5 minutes, and once more immediately after 5 minutes ischemia. Was administered. Hippocampal CA1 region were harvested after 24 hours, was performed Western blotting with experiment similar anti Bcl-xL protein antibody shown in FIG. Sham-operated animals and control animals loaded with transient forebrain ischemia for 5 minutes (ischemic control animals) were orally administered only the same amount of distilled water. Further, red ginseng powder oral administration of 200 mg / kg / day, to see if affects the Bcl-xL protein expression in peripheral organs, the liver and spleen were collected and conducted Western blotting in the same procedure. FIG.
0, by red ginseng powder oral administration of 200 mg / kg / day, shows the results of the expression ofBcl-x L protein in the liver. A (upper part) of FIG. 10 is a photograph instead of a drawing showing the result of Western blotting, wherein four on the left side show a group administered with distilled water, and four on the right side show a group with goutine powder. B (lower) in FIG. 10 shows anti-B in each of the four samples.
shows the results of quantifying the bands reacted with cl-xL protein antibody an image analyzer. The vertical axis of B in FIG. 10 is Bcl-x.
The L protein expression level is shown, and the left side of the graph shows the distilled water administration group (shaded broken line), and the right side shows the kojin powder administration group (black shaded line). Statistical analysis method is ANOVA + Scheffe '
According to the s post hoc test, * mark is P <0.0
5 is shown. FIG. 11 shows Bcl-x in the spleen by oral administration of kojin powder at 200 mg / kg / day.
The result ofL protein expression is shown. FIG. 11A (upper row) is a photograph instead of a drawing showing the results of Western blotting, where the four on the left side show the group administered with distilled water, and the four on the right side show the group with ginseng powder administration. Figure 11 B (lower) is in each 4 specimen, shows the results of quantifying the bands reacted with anti Bcl-xL protein antibody an image analyzer. FIG.
The vertical axis of B shows the expression level of Bcl-xL protein, the left side of the graph shows the group administered with distilled water (shaded broken line), and the right side shows the group administered with ginseng powder (black oblique line). Statistical analysis method is ANO
In the VA + Scheffe's post hoc test, the asterisk indicates that P <0.05.
【０１２５】しかしながら、コウジン末を２００ｍｇ／
ｋｇ／日の用量で４週間経口投与しても海馬ＣＡ１領域
におけるＢｃｌ−ｘＬ蛋白の発現量には有意な増加は認
められなかった。また、２００ｍｇ／ｋｇ／日の用量で
コウジン末を５分虚血前４週間、１日単回経口投与し、
さらに５分虚血後同じ要領で１週間コウジン末を経口投
与しても、スナネズミの受動的回避学習障害ならびに海
馬ＣＡ１領域の神経細胞死は軽減されなかった。このこ
とは、低用量のコウジン末経口投与によりＢｃｌ−ｘＬ
蛋白の発現量の増加が誘導されなければ、神経細胞保護
効果もみられないことを物語っている。言い換えれば、
１．５ｇ／ｋｇ／日という高用量のコウジン末をスナネ
ズミに１週間程度経口投与した結果、図８のごとく海馬
ＣＡ１領域におけるＢｃｌ−ｘＬ蛋白の発現量が増加
し、図７に示すごとく同領域における虚血性神経細胞死
が軽減されたと考えられる。脳室内投与で海馬ＣＡ１領
域のＢｃｌ−ｘＬ蛋白量を増加せしめることにより、同
領域の神経細胞を保護する生理活性物質として、本発明
者らはインターロイキン３を同定しているが（Ｗｅｎ，
Ｔ．−Ｃ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１８
８，６３５−６４９，１９９８）、経口投与により同様
の作用を有する薬剤は本発明者の知る限りコウジン末が
世界で唯一のものである。おそらく、ＭＣＡを永久閉塞
された動物の虚血巣周辺部（ｉｓｃｈｅｍｉｃ ｐｅｎ
ｕｍｂｒａ）でも、高用量のコウジン末をあらかじめ経
口投与することにより同部でのＢｃｌ−ｘＬ発現量が増
加して、脳梗塞巣が縮小したと思われる。ただし、ＭＣ
Ａを永久閉塞したラットの虚血巣周辺部におけるＢｃｌ
−ｘＬ蛋白発現量を増加させるのに必要なコウジン末投
与はスナネズミの場合より少量であり、図２の結果から
推測すると０．７５〜１．２ｇ／ｋｇ／日と思われる。However, kojin powder was 200 mg /
A significant increase in the expression level of Bcl-xL protein be administered 4 weeks oral at doses of kg / day in the hippocampal CA1 region were observed. Further, kojin powder was orally administered once a day at a dose of 200 mg / kg / day for 4 minutes before ischemia for 5 minutes,
Further oral administration of kojin powder for 1 week after the ischemia for 5 minutes in the same manner did not reduce gerbil passive learning impairment learning and neuronal cell death in hippocampal CA1 area. This is,Bcl-x L by red ginseng powder oral administration of low dose
Unless an increase in the expression level of the protein is induced, no neuronal protective effect is observed. In other words,
1.5 g / kg / day to a week orally administered results red ginseng powder of high dose gerbils that the expression level of Bcl-xL protein in the hippocampal CA1 region as in FIG. 8 is increased, the as shown in FIG. 7 It is believed that ischemic nerve cell death in the area was reduced. By allowed to increase the Bcl-xL protein levels in the hippocampus CA1 region in intraventricular administration, as a physiologically active substance that protects nerve cells in the same region, but the present inventors have identified interleukin 3 (Wen,
T. -C. et al. , J. et al. Exp. Med. , 18
8,635-649,1998), and as far as the present inventor knows, kojin powder is the only drug in the world that has the same effect by oral administration. Possibly, the ischemic pen of an animal with MCA permanently occluded (ischemic pen)
umbra) But, Bcl-xL expression level of the same parts by previously orally administered red ginseng powder of high dose is increased, seems to cerebral infarction is reduced. However, MC
Bcl around ischemic foci of rats with permanent occlusion of A
-XL protein expression level red ginseng powder dose required to increase the is minor than in the case of gerbils, seems 0.75~1.2g / kg / day when estimated from the results of FIG.
【０１２６】前述のごとく、スナネズミとＳＨ−ＳＰラ
ットでは、神経細胞死を抑止するのに必要なコウジン末
投与量は異なることにも注意する必要がある。体重７５
ｇ程度のスナネズミでは明らかに１．５ｇ／ｋｇ／日の
コウジン末経口投与が、神経細胞を虚血侵襲から効果的
に保護すると考えられるが、体重３００ｇ程度のＳＨ−
ＳＰラットでは明らかに０．９ｇ／ｋｇ／日のコウジン
末経口投与量が１．２ｇ／ｋｇ／日のコウジン末投与量
よりも、良好な神経細胞保護効果を示すことが図２から
読みとれる。従って、動物の体重が増加するのに逆比例
して、神経細胞保護作用を発揮するために必要なコウジ
ン末の至適投与量は減少するものと考えられる。このこ
とは、ヒトの場合にもあてはまる。例えば、体重６０ｋ
ｇの成人に投与するある薬物の量を１とすると、体重３
ｋｇの新生児に投与する同薬物の量は一般にその７分の
１になる。すなわち体重１ｋｇあたりの薬物投与量は新
生児の場合、成人の約３倍になるのである。このことか
ら類推すると、新生児よりさらに体重が少ないＳＨ−Ｓ
Ｐラットやスナネズミでは、体重１ｋｇあたりの薬物投
与量は新生児の１．５倍程度にはなると考えられる。す
なわち、体重１ｋｇあたりのコウジン末投与量は、ＳＨ
−ＳＰラットやスナネズミの場合、少なくともヒトの４
倍程度に増えるものと考えられる。As described above, it should also be noted that the gerbil and SH-SP rats require different amounts of kojin powder to suppress neuronal cell death. Weight 75
It is considered that oral administration of kojin powder at 1.5 g / kg / day apparently effectively protects nerve cells from ischemic invasion in gerbils of about g, while SH-
From FIG. 2, it can be seen from FIG. 2 that SP rats have a clear neuronal protective effect at an oral dose of 0.9 g / kg / day, which is better than that at a dose of 1.2 g / kg / day. Therefore, it is considered that the optimal dosage of kojin powder required to exert the neuroprotective effect decreases in inverse proportion to the increase in the body weight of the animal. This is also true for humans. For example, weight 60k
Assuming that the amount of a certain drug to be administered to an adult of 1 g is 1, the body weight is 3
The amount of the drug administered to a kg newborn is typically one-seventh that amount. That is, the dose of a drug per kg of body weight is about three times that of a newborn baby compared to an adult. By analogy with this, SH-S, which weighs less than newborn babies,
In P rats and gerbils, the dose of drug per kg of body weight is expected to be about 1.5 times that of neonates. That is, the dose of kojin powder per kg of body weight is SH
-In the case of SP rats and gerbils, at least 4
It is thought that it will increase about twice.
【０１２７】ところで、図２の結果によれば、ＭＣＡを
永久閉塞されたＳＨ−ＳＰラットの大脳皮質梗塞巣は、
コウジン末を０．７５〜１．２ｇ／ｋｇ／日の用量でＭ
ＣＡ閉塞前後に投与することにより有意に改善される。
従って体重６０ｋｇのヒトに対しては、コウジン末とし
て０．１８５〜０．３／ｋｇ／日の用量で、同様の効果
が期待されることになる。おそらく、体重６０ｋｇのヒ
トの脳細胞（グリア細胞を含む）又は神経細胞の保護の
ために必要なコウジン末の投与量としては、患者の個人
差や病状にもよるが、１日あたり２．０ｇ〜９０ｇ、好
ましくは５．６２５ｇ〜３６ｇ、より好ましくは１１．
２５ｇ〜１８ｇとなる。また、これと同量のコウジン末
から抽出したコウジンエキス（紅蔘エキス）ならびに粗
サポニン分画を経口投与しても同様の脳細胞又は神経細
胞保護効果が期待される。さらに粗サポニン分画に関し
ては、経口投与剤としてのみならず、静脈内投与剤、徐
放剤、点鼻薬、吸入薬、舌下錠、坐薬、局所注入剤、皮
膚外用剤、局所塗布剤、筋内注射薬、皮内注射薬、皮下
注射薬としても使用可能である。特に静脈内投与剤とし
て粗サポニン分画を使用する際には、後述の実施例１０
に示すごとく経口投与の場合よりも量を少なくする必要
がある。また、使用するコウジン末としては、韓国煙草
人蔘公社製のオタネニンジン６年根から調整したものが
好ましいが、成分が類似しているものであればあるいは
一定量以上の神経細胞保護成分を含有しているものであ
れば、その他任意の産地由来のコウジン末や白蔘を経口
投与しても神経細胞保護効果が得られる。According to the results shown in FIG. 2, the cerebral cortical infarction lesion of SH-SP rats in which MCA was permanently occluded was
Kojin powder at a dose of 0.75 to 1.2 g / kg / day
It is significantly improved by administration before and after CA occlusion.
Therefore, for a human weighing 60 kg, a similar effect can be expected at a dose of 0.185 to 0.3 / kg / day as ginseng powder. Probably, the dosage of kojin powder required for protection of human brain cells (including glial cells) or nerve cells weighing 60 kg is 2.0 g per day, depending on individual differences and medical conditions of patients. To 90 g, preferably 5.625 g to 36 g, more preferably 11.
25 g to 18 g. In addition, the same protective effect on brain cells or nerve cells can be expected by orally administering a ginseng extract (red ginseng extract) and a crude saponin fraction extracted from the same amount of ginseng powder. Furthermore, regarding the crude saponin fraction, not only as an oral agent, but also as an intravenous agent, sustained release agent, nasal drop, inhalant, sublingual tablet, suppository, local injection, topical skin preparation, topical application, muscle It can also be used as an internal injection, intradermal injection, or subcutaneous injection. In particular, when a crude saponin fraction is used as an intravenous agent, the following Example 10 was used.
As shown in the figure, the dose needs to be smaller than that for oral administration. The ginseng powder to be used is preferably prepared from the roots of Panax ginseng manufactured by Korean Tobacco Ginseng Public Corporation, but if the ingredients are similar or contain a certain amount or more of neuronal protective components. As long as it is administered, the ginseng powder and white ginseng derived from any other locality can be orally administered to obtain a neurocyte protective effect.
【０１２８】前述のごとく、２００ｍｇ／ｋｇ／日の用
量でコウジン末を、スナネズミに脳虚血を負荷する前に
４週間経口投与しても、海馬ＣＡ１領域でのＢｃｌ−ｘ
Ｌ蛋白発現量は増加しなかったが、同量のコウジン末を
同様のスケジュールで経口投与すると、図１０及び図１
１に示すごとく肝臓や脾臓におけるＢｃｌ−ｘＬ蛋白の
発現量が有意に増加した。スナネズミにおいて２００ｍ
ｇ／ｋｇ／日のコウジン末投与により、肝臓や脾臓でＢ
ｃｌ−ｘＬ蛋白発現量が増加したことより、前記の体重
１ｋｇあたりの投与量算出理論を適用すれば、体重６０
ｋｇのヒトではおよそ５０ｍｇ／ｋｇ／日のコウジン末
投与で肝臓及び脾臓でのＢｃｌ−ｘＬ蛋白発現量が増加
することが予想される。すなわち体重６０ｋｇのヒトの
肝臓及び脾臓でのＢｃｌ−ｘＬ蛋白発現を増強するため
に必要なコウジン末の投与量としては、個人差にもよる
が、１日あたり０．６ｇ〜１５ｇ、好ましくは１．５ｇ
〜６ｇ、より好ましくは２ｇ〜４ｇと考えられる。ま
た、これと同量のコウジン末から抽出したコウジンエキ
ス（紅蔘エキス）ならびに粗サポニン分画、非サポニン
分画を経口投与しても同様に末梢臓器でのＢｃｌ−ｘＬ
蛋白発現量が増加するものと考えられる。さらに、粗サ
ポニン分画や非サポニン分画に関しては経口投与剤とし
てのみならず、静脈内投与剤、点鼻薬、吸入薬、舌下
錠、坐薬、局所注入剤、徐放剤、皮膚外用剤、局所塗布
剤、筋肉注射薬、皮内注射薬、皮下注射薬としても使用
可能である。特に静脈内投与剤として粗サポニン分画を
使用する際には、経口投与の場合よりも量を少なくする
必要がある。As described above, even if kojin powder was orally administered at a dose of 200 mg / kg / day for 4 weeks before cerebral ischemia was applied to gerbils, Bcl-x in the hippocampal CA1 area was also obtained.
Although the amount ofL protein expression did not increase, when the same amount of kojin powder was orally administered on the same schedule, the results shown in FIGS.
The expression level of Bcl-xL protein in the liver and spleen as shown in 1 was significantly increased. 200m in a gerbil
g / kg / day kojin powder administration, B in liver and spleen
Since the expression amount of cl-xL protein was increased, if the above-mentioned theory of calculating the dose per 1 kg of body weight was applied, the body weight of 60 kg was obtained.
Bcl-x L protein expression level in the liver and spleen in red ginseng powder dose of approximately 50 mg / kg / day in kg human is expected to increase. That is, as the dose of red ginseng powder necessary for enhancingBcl-x L protein expression in human liver and spleen weight 60 kg, depending on the individual difference, per day 0.6G～15g, preferably 1.5g
-6 g, more preferably 2-4 g. Further, this same amount red ginseng extract (red ginseng extract) extracted from red ginseng powder in and the crude saponin fraction, Bcl-xL of the non-saponin fraction in similarly peripheral organs be administered orally
It is thought that the protein expression level increases. Furthermore, regarding the crude saponin fraction and the non-saponin fraction, not only oral administration, but also intravenous administration, nasal drops, inhalants, sublingual tablets, suppositories, local injections, sustained-release preparations, external preparations for skin, It can also be used as a topical application, intramuscular injection, intradermal injection, or subcutaneous injection. In particular, when using the crude saponin fraction as an intravenous agent, it is necessary to use a smaller amount than in the case of oral administration.
【０１２９】このように、高用量のコウジン末経口投与
により脳神経組織におけるＢｃｌ−ｘＬ蛋白の発現量が
増加し、神経細胞保護効果が発揮され、低用量のコウジ
ン末経口投与により肝臓、脾臓を始めとする末梢臓器で
Ｂｃｌ−ｘＬ蛋白発現量が増加するのが本発明の特徴で
ある。神経組織には、神経細胞、神経幹細胞、グリア細
胞、血管内皮細胞、血管平滑筋細胞が含まれ、肝臓や膵
臓には、肝細胞、免疫担当細胞、白血球、リンパ球、赤
血球、クッパー細胞、線維芽細胞、脂肪摂取細胞、胆管
上皮細胞、類洞内皮細胞等が含まれるので、これらの細
胞のいずれかでコウジン末（薬用人蔘）経口投与により
Ｂｃｌ−ｘＬ蛋白の発現増強が起こるものと考えられ
る。これまで、神経組織におけるＢｃｌ−ｘＬ蛋白の発
現量を増加せしめる物質として、インターロイキン３と
ジンセノサイドＲｂ１を本発明者らは同定しているが
（Ｗｅｎ，Ｔ．−Ｃ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅ
ｄ．，１８８，６３５−６４９，１９９８；特願平１０
−３６５５６０、ジンセノサイドＲｂ１からなる脳細胞
又は神経細胞保護剤）、経口投与により脳細胞もしくは
神経細胞のＢｃｌ−ｘＬ蛋白発現量を増加させる薬剤と
しては、高用量のコウジン末が世界で唯一のものであ
る。薬用人蔘成分ジンセノサイドＲｂ１そのものの経口
投与は神経細胞保護作用を示さないので、ジンセノサイ
ドＲｂ１単独投与では脳のＢｃｌ−ｘＬ蛋白発現量を増
加せしめることはまず有り得ないと考えられる。もちろ
ん、脳室内投与したときのみ脳におけるＢｃｌ−ｘＬ蛋
白発現量を増加せしめ、神経細胞保護作用を示すインタ
ーロイキン３もペプチドであるが故に、消化管ですぐに
分解され、しかも脳血液関門を通過できないので、経口
投与により神経細胞保護効果を発揮するとは思えない。
なお、ジンセノサイドＲｂ１とプロサポシン関連ペプチ
ド（特願平１１−１８５１５５）はともに脳室内投与に
よりＭＣＡ永久閉塞ラットの脳梗塞を顕著に縮小せし
め、しかも極めて低濃度でＢｃｌ−ｘＬ発現増強作用を
介して細胞保護作用を示す。このことから判断すると、
その他の成長因子類、サイトカイン類、ケモカイン類、
非ペプチド性化合物類（たとえばプロスタグランディン
類、イソカルバサイクリン類）等の中でも、もし脳室内
投与により脳梗塞巣縮小作用を示すものがあれば、同様
の低モル濃度域でＢｃｌ−２蛋白群の発現調節を介して
細胞保護作用を示すと考えられる。さらに、ジンセノサ
イドＲｂ１とプロサポシン関連ペプチドの効果・効能・
用途は共通していると考えられる。[0129] Thus, the expression level of Bcl-xL protein in brain tissue by red ginseng powder oral administration of high doses increased, neuroprotective effect is exhibited by red ginseng powder oral administration of low dose liver, spleen is a feature of the present invention of Bcl-xL protein expression levels in peripheral organs including increases. Nerve tissue includes nerve cells, neural stem cells, glial cells, vascular endothelial cells, vascular smooth muscle cells, and liver and pancreas include hepatocytes, immunocompetent cells, leukocytes, lymphocytes, erythrocytes, Kupffer cells, fibers blasts, fat intake cells, biliary epithelial cells, because it contains sinusoidal endothelial cells and the like, and those red ginseng powder in one of these cells (ginseng) enhanced expression of Bcl-xL protein by oral administration takes place Conceivable. Previously, as a substance allowed to increase the expression level ofBcl-x L protein in the nervous tissues, the present inventors interleukin 3 and ginsenoside Rb1 are identified (Wen, T.-C.et al., J. Exp.Me
d. , 188, 635-649, 1998;
-365560, Brain cell or nerve cell-protective agents comprising ginsenoside Rb1), by oral administration The agents that increase Bcl-xL protein expression level of brain cells or nerve cells, high doses of red ginseng powder is only in the world Things. Because ginseng蔘成content ginsenoside Rb1 Oral administration of itself not exhibit neuroprotective action, the ginsenoside Rb1 alone is considered that it is highly unlikely that allowed to increase the Bcl-xL protein expression level in the brain. Of course, it allowed increasing the Bcl-xL protein expression level in viewing the brain when administered intracerebroventricularly, because interleukin 3 showing the neuroprotective effect also a peptide, is quickly degraded in the digestive tract, yet the blood-brain barrier Since it cannot pass, it is unlikely that oral administration exerts a neuroprotective effect.
Incidentally, ginsenoside Rb1 and prosaposin-related peptides (Japanese Patent Application No. 11-185155) are both markedly allowed reduced cerebral infarction MCA permanent occlusion rats by intracerebroventricular administration, moreover via theBcl-x L expression enhancing action at very low concentrations Shows a cytoprotective effect. Judging from this,
Other growth factors, cytokines, chemokines,
Among non-peptidic compounds (for example, prostaglandins, isocarbacyclines) and the like, if there is a compound exhibiting a cerebral infarction lesion reducing action by intracerebroventricular administration, the Bcl-2 protein group in the same low molar concentration range Are thought to exert cytoprotective effects through regulation of the expression of. Furthermore, the effect, efficacy and of ginsenoside Rb1 and prosaposin-related peptides
The uses are considered to be common.
【０１３０】さて、高用量のコウジン末経口投与が肝臓
・脾臓のＢｃｌ−ｘＬ蛋白発現量には影響を与えなかっ
たことは、生体の恒常性を維持する上で非常に重要なこ
とと思われる。すなわち、高用量のコウジン末を経口投
与することによりコウジン末中に含まれるＢｃｌ−ｘＬ
蛋白発現促進成分が過剰に消化管から吸収され、血液循
環を介して肝臓・脾臓を始めとする末梢臓器に到達する
が、このような末梢臓器ではたとえ一時期Ｂｃｌ−ｘＬ
蛋白発現量が増加しても、その後速やかにＢｃｌ−ｘＬ
蛋白発現量がダウンレギュレーション（ｄｏｗｎ−ｒｅ
ｇｕｌａｔｉｏｎ）されてＢｃｌ−ｘＬ蛋白量がコント
ロール値に戻るものと思われる。あるいは、高用量のコ
ウジン末を経口投与しても、末梢臓器におけるＢｃｌ−
ｘＬ蛋白発現増加はまったく起こらない可能性も充分あ
ると思われる。従って、生体がある一定量のコウジン末
経口投与に対してのみ、反応するということは、コウジ
ン末をヒトに大量投与あるいは長期投与しても副作用が
ほとんど認められないことを支持するものである。ま
た、コウジン末を低用量であれ高用量であれ、経口投与
した際には、消化管の上皮組織は高濃度のＢｃｌ−ｘＬ
蛋白発現促進成分に暴露されるはずであるが、これまで
コウジン末を経口投与したヒトにおいて消化器癌等が高
頻度で発症するという報告もなく、もちろん消化器系副
作用出現の報告もほとんどみられない。一方、高用量の
コウジン末を経口投与することにより血中に過剰のＢｃ
ｌ−ｘＬ蛋白発現促進成分が流れても、脳血液関門を通
過できるＢｃｌ−ｘＬ蛋白発現促進成分はそのうちのご
く一部になると思われるので、脳に関しては高用量のコ
ウジン末を経口投与したときのみ至適量のＢｃｌ−ｘＬ
蛋白発現促進成分が神経細胞又は脳細胞に到達し、同細
胞におけるＢｃｌ−ｘＬ蛋白の発現量が増加するものと
思われる。[0130] Now, the red ginseng powder oral administration of high doses had no effect on Bcl-xL protein expression level of liver, spleen, seems very important in maintaining the homeostasis of a living body It is. That, Bcl-xL contained in the powder red ginseng by the red ginseng powder of the high-dose oral administration
Protein expression promoting component is absorbed from excessive gastrointestinal tract, and reaches the peripheral organs and via the blood circulation began liver, spleen, in such peripheral organs even one time Bcl-xL
Even protein expression amount is increased, then promptlyBcl-x L
Protein expression level was down-regulated (down-re
It is thought that the amount of Bcl-xL protein is returned to the control value. Alternatively, even if a high dose of kojin powder is orally administered, Bcl-
may not occur xL protein expression increased at all seems to be enough there. Therefore, the fact that the living body responds only to a certain amount of oral ginseng powder only in oral administration supports the fact that even if ginseng powder is administered to humans in large amounts or for a long period of time, almost no side effects are observed. Moreover, it is high doses it is low dose of red ginseng powder, upon oral administration, epithelial tissue of the gastrointestinal tract higher concentrations of Bcl-xL
Expected to be exposed to protein expression-promoting components, but there have been no reports of gastrointestinal cancer occurring at high frequency in humans to which kojin powder has been orally administered, and of course, there have been almost no reports of gastrointestinal side effects. Absent. On the other hand, oral administration of a high dose of kojin powder causes excessive Bc in the blood.
even flow l-xL protein expression-promoting components, since Bcl-xL protein expression-promoting components that can pass through the blood brain barrier is believed to of them becomes a small part, with respect to the brain orally administered red ginseng powder of the high dose The optimal amount of Bcl-xL only when
Protein expression promoting component reaches the nerve cells or brain cells, the expression level of Bcl-xL protein in the cells is expected to increase.
【０１３１】また、逆に低用量のコウジン末を経口投与
したときには、Ｂｃｌ−ｘＬ蛋白発現促進成分は高用量
のコウジン末を経口投与した場合に比べて、少量血中に
移行するため、おそらくこの至適濃度のＢｃｌ−ｘＬ発
現促進成分が肝臓・脾臓を始めとする末梢臓器のＢｃｌ
−ｘＬ蛋白を増加せしめるものと考えられる。しかし、
低用量のコウジン末を経口投与しても、Ｂｃｌ−ｘＬ蛋
白発現促進成分の血中濃度はそれほど高くならないの
で、脳血液関門を通過して脳に到達する同成分が不足す
るため、脳内のＢｃｌ−ｘＬ蛋白量は増加せず神経細胞
保護効果もみられなくなると推測される。このように生
理活性物質あるいは薬剤がある一定の細胞外液濃度で存
在するときのみ、細胞に作用するという概念はすでに生
命科学領域で定着しつつあるものと発明者らは考えてい
る。エリスロポエチンを例にとってこのことをもう少し
詳しく説明すると、発明者の一人（阪中）は脳室内投与
されたエリスロポエチンの１日量が２．５ユニットから
２５ユニットの範囲内であるときのみ、海馬ＣＡ１錐体
神経細胞の保護作用が発揮され、エリスロポエチンの１
日投与量がそれよりも多くてもあるいは少なくても神経
細胞保護作用がみられないことをすでに公表している
（Ｓａｋａｎａｋａ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎ
ａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９５，４６３５−
４６４０，１９９８）。[0131] Further, when the red ginseng powder of the low dose was administered orally to the contrary, Bcl-xL protein expression-promoting components in comparison with the case where the red ginseng powder of the high dose was administered orally, to shift to a small amount in the blood, possibly Bcl peripheral organs Bcl-xL expression promoting component of the optimum concentration, including liver, spleen
It is believed that allowed to increase the -xL protein. But,
Be orally administered red ginseng powder of the low dose, the Bcl-xL blood levels of protein expression-promoting components are not so high, due to the lack of the component to reach through the blood-brain barrier to the brain, the brain Bcl-xL protein of increased without neuroprotective effect is presumed to not be seen. The inventors believe that the concept of acting on cells only when a physiologically active substance or drug is present at a certain extracellular solution concentration is already being established in the life science field. To explain this in more detail using erythropoietin as an example, one of the inventors (Sakanaka) found that hippocampal CA1 pyramid was obtained only when the daily dose of intracerebroventricularly administered erythropoietin was in the range of 2.5 to 25 units. The protective effect of somatic nerve cells is exerted, and erythropoietin 1
It has already been shown that higher or lower daily doses do not have neuroprotective effects (Sakanaka, M. et al., Proc. N).
atl. Acad. Sci. USA, 95, 4635-
4640, 1998).
【０１３２】コウジン末中に含まれるＢｃｌ−ｘＬ蛋白
発現促進成分の候補として、粗サポニン分画の各種精製
サポニンもしくはジンセノサイド類、非サポニン分画が
考えられる。粗サポニン分画に含まれる精製サポニン
（プロトパナキサジオール系サポニン、プロトパナキサ
トリオール系サポニン、オレアノール酸系サポニン）に
ついては庄司の著書（庄司順三、薬用人蔘サポニンの化
学、ｐｐ２５１−２６１、薬用人蔘’９５、熊谷 朗
編、１９９４、共立出版）に既述されている。プロトパ
ナキサジオール系サポニンの代表であるジンセノサイド
Ｒｂ１はコウジン末１ｇ中に約４ｍｇ前後含有されてい
るが、もしコウジン末として経口投与することにより、
ジンセノサイドＲｂ１の消化管での分解が抑止される
か、あるいはジンセノサイドＲｂ１の消化管での吸収が
促進された結果、測定感度以下のジンセノサイドＲｂ１
がわずかながらも血中に移行するのであれば、ジンセノ
サイドＲｂ１もＢｃｌ−ｘＬ蛋白発現促進成分の１つと
して挙げられる。ただ、コウジン末を経口投与してもジ
ンセノサイドＲｂ１は血中に検出されないといわれてお
り、さらにジンセノサイドＲｂ１自体を経口投与しても
血清中や各臓器にジンセノサイドＲｂ１は検出されない
と報告されているので（赤尾光昭ら、Ｔｈｅ Ｇｉｎｓ
ｅｎｇ Ｒｅｖｉｅｗ，２２，９７−１０２，１９９
６）、ジンセノサイドＲｂ１単独の経口投与が神経組織
や末梢臓器でＢｃｌ−ｘＬ蛋白発現を促進する可能性は
まずないと思われる。事実、これまでの報告によればジ
ンセノサイドＲｂ１自体を経口投与しても、何ら生理作
用は認められないし、本発明者らもジンセノサイドＲｂ
１の経口投与では神経細胞保護作用も認められないこと
をすでに確認している。従って、特願平１０−３６５５
６０（ジンセノサイドＲｂ１からなる脳細胞又は神経細
胞保護効果）にも既述したごとく、ジンセノサイドＲｂ
１が神経細胞保護作用を発揮するためには、血中にある
一定濃度以上存在する必要があると思われる。[0132] As a candidate of Bcl-xL protein expression-promoting components contained in the powder red ginseng, various purified saponins or ginsenosides in the crude saponin fraction, the non-saponin fractions can be considered. Regarding the purified saponins (protopanaxadiol-based saponins, protopanaxatriol-based saponins, and oleanolic acid-based saponins) contained in the crude saponin fraction, Shoji's book (Junzo Shoji, Chemistry of Ginseng Saponin, pp 251-261, Ginseng '95, edited by Akira Kumagai, 1994, Kyoritsu Shuppan). Ginsenoside Rb1, which is a representative of protopanaxadiol-based saponins, is contained in about 4 mg in 1 g of ginseng powder, but if orally administered as ginseng powder,
Or degradation in the digestive tract of ginsenoside Rb1 is inhibited, or a result of absorption in the gastrointestinal tract of ginsenoside Rb1 is promoted, the following measurement sensitivity ginsenoside Rb1
If also to migrate in the blood while slightly, ginsenoside Rb1 are also described as one of the Bcl-xL protein expression-promoting components. However, ginsenoside Rb1 be orally administered red ginseng powder is reported to have been said to not be detected in the blood, ginsenoside Rb1 in the serum and organs be further orally administered ginsenoside Rb1 itself is not detected (Mitsuaki Akao et al., The Gins
eng Review, 22, 97-102, 199
6) seems to oral administration of ginsenoside Rb1 alone is unlikely possibility of promoting Bcl-xL protein expression in the nervous tissues and peripheral organs. In fact, according to previous reports, even if ginsenoside Rb1 itself was orally administered, no physiological effect was observed, and the present inventors also found that ginsenoside Rb1 did not.
It has already been confirmed that oral administration ofNo. 1 has no neuroprotective effect. Therefore, Japanese Patent Application No. 10-3655.
As described above, ginsenoside Rb 60 (protective effect of ginsenoside Rb1 on brain cells or nerve cells)
In order for 1 to exert a neuroprotective effect, it seems necessary to have a certain concentration or more in the blood.
【０１３３】ミトコンドリア関連タンパクであるＢｃｌ
−ｘＬはＡｐａｆ１と結合することにより、Ａｐａｆ１
とプロカスパーゼ９（ｐｒｏｃａｓｐａｓｅ ９）との
結合を阻害するといわれている（Ａｄａｍｓ，Ｊ．Ｍ．
ａｎｄ Ｃｏｒｙ，Ｓ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２８１，１
３２２−１３２６，１９９８）。Ｂｃｌ−ｘＬ蛋白の減
少あるいは機能低下が起きると、Ａｐａｆ１がＢｃｌ−
ｘＬ蛋白から解離し、ミトコンドリアからのチトクロー
ムＣの漏出とあいまって、プロカスパーゼ９が活性化さ
れると考えられている（Ａｄａｍｓ，Ｊ．Ｍ．ａｎｄ
Ｃｏｒｙ，Ｓ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２８１，１３２２−
１３２６，１９９８）。ひとたび細胞質内のプロカスパ
ーゼ９が活性化されると引き続いてカスパーゼ９（ｃａ
ｓｐａｓｅ ９）ならびにカスパーゼ３（ｃａｓｐａｓ
ｅ ３）が活性化され、これらの蛋白分解酵素により細
胞は自己融解し、死（アポトーシス）に至る過程が加速
される。おそらく、プロカスパーゼ９が活性化された段
階で、細胞が死に至る運命が決定される可能性が高いの
で、経口投与用Ｂｃｌ−ｘＬ蛋白発現増強剤（コウジン
末）によりプロカスパーゼ９の活性化をくい止めること
が、細胞死を防ぐための得策と考えられる。Bcl, a mitochondrial-related protein
-XL by binding with APAF1, APAF1
It is said to inhibit the binding of procaspase 9 to procaspase 9 (Adams, JM.
and Cory, S.M. , Science, 281, 1
322-1326, 1998). When Bcl-xL protein decreases or its function decreases, Apaf1 becomes Bcl-
dissociates from xL protein, along with leakage of cytochrome C from mitochondria, procaspase 9 is believed to be activated (Adams, J.M.and
Cory, S .; , Science, 281, 1322-
1326, 1998). Once procaspase 9 in the cytoplasm is activated, it is subsequently caspase 9 (ca
space 9) and caspase 3 (caspas)
e3) is activated, the cells self-lyse by these proteases, and the process leading to death (apoptosis) is accelerated. Perhaps, in the stage of procaspase 9 is activated, there is a high possibility that the cells are destined death is determined, the activation of pro-caspase 9 by oral administration for Bcl-xL protein expression enhancer (red ginseng powder) Is considered to be a good measure to prevent cell death.
【０１３４】さて、発明者の一人（阪中）はスナネズミ
に５分間の一過性前脳虚血を負荷した後に１週間、コウ
ジン末を経口投与しても海馬ＣＡ１領域の神経細胞は保
護されないことを発表しているので（Ｗｅｎ，Ｔ．−
Ｃ．，ｅｔ ａｌ．，ＡｃｔａＮｅｕｒｐａｔｈｏ
ｌ．，９１，１５−２２，１９９６）、コウジン末をヒ
ト一過性脳虚血発作の治療や処置に実用化することは困
難であると１９９６年当時判断していた。しかし、本発
明では、スナネズミの一過性前脳虚血発作よりも重篤で
かつヒト脳梗塞の病態を反映するＭＣＡ永久閉塞ＳＨ−
ＳＰラットにおいて、コウジン末をＭＣＡ永久閉塞後か
ら４週間程度経口投与すると図５、図６に示すごとく場
所学習障害の改善と脳梗塞巣の縮小が認められた。従っ
て、本発明により、脳梗塞後にコウジン末を４週間程度
経口投与すれば脳梗塞治療効果が発揮されることが明ら
かにされた。従って、スナネズミの一過性前脳虚血モデ
ルでも、虚血後４週間程度コウジン末を経口投与すれば
海馬ＣＡ１領域の神経細胞保護効果が認められるかも知
れないと本発明者らは推測した。しかしながら、スナネ
ズミの５分間前脳虚血モデルでは、虚血後１週間以内に
海馬ＣＡ１領域の神経細胞がほとんどすべて死に至って
しまうので、４週間にわたるコウジン末経口投与の効果
を判定するのには、このモデルは不適当と考えられた。
そこで、本発明者らはスナネズミの３分間前脳虚血モデ
ルを用いて、コウジン末を４週間経口投与したときの効
果を判定することにした。By the way, one of the inventors (Sakanaka) did not protect neurons in hippocampal CA1 region by oral administration of kojin powder for 1 week after transient cerebral ischemia was applied to gerbils for 5 minutes. (Wen, T.-
C. , Et al. , ActaNeurpatho
l. , 91, 15-22, 1996), and it was determined at the time of 1996 that it was difficult to apply kojin powder to treatment and treatment of human transient cerebral ischemic attack. However, in the present invention, MCA permanent occlusion SH-, which is more serious than the gerbil transient forebrain ischemic attack and reflects the pathology of human cerebral infarction,
In SP rats, when kojin powder was orally administered for about 4 weeks after the permanent occlusion of MCA, as shown in FIG. 5 and FIG. 6, improvement in location learning disorder and reduction of cerebral infarction lesion were observed. Therefore, according to the present invention, it has been clarified that a therapeutic effect on cerebral infarction is exerted by orally administering kojin powder for about 4 weeks after cerebral infarction. Therefore, the present inventors speculated that even in a transient cerebral forebrain ischemia model of gerbils, if ginseng powder was orally administered for about 4 weeks after ischemia, a neuronal protective effect in the hippocampal CA1 region might be recognized. However, in a gerbil 5 min forebrain ischemia model, almost all neurons in the hippocampal CA1 region die within 1 week after ischemia. Therefore, to determine the effect of oral administration of kojin over 4 weeks, This model was deemed inappropriate.
Then, the present inventors decided to determine the effect of oral administration of kojin powder for 4 weeks using a gerbil 3 minute forebrain ischemia model.
【０１３５】スナネズミの脳温を３７℃±０．２℃に維
持した状態で３分間両側総頚動脈の血流を遮断し、再灌
流させると、１週間後に海馬ＣＡ１領域の神経細胞が約
半数死に至ることを発明者の一人（阪中）はすでに発表
している（Ｓａｋａｎａｋａ，Ｍ．，ｅｔ ａｌ．，Ｐ
ｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ｓｃｉ．Ａｃａｄ．ＵＳＡ，９５，
４６３５−４６４０，１９９８）。しかも、この時点で
生存していると考えられる海馬ＣＡ１領域の神経細胞に
おいて、アポトーシス様細胞死の指標である核の断片化
がさらに進行中であることが、ＴＵＮＥＬ染色法により
発明者らは確認している（Ｗｅｎ，Ｔ．−Ｃ．，ｅｔ
ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１８８，６３５−６４
９，１９９８；Ｐｅｎｇ，Ｈ．，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃ
ｅｒｅｂ．Ｂｌｏｏｄ Ｆｌｏｗ Ｍｅｔａｂ．，１
８，３４９−３６０，１９９８）。従って、３分間の一
過性前脳虚血を負荷されたスナネズミの海馬ＣＡ１領域
では、５分間虚血を負荷した場合と異なり、虚血後１週
目以降も神経細胞変性が進行することが明らかにされて
いる。本発明者らは、このように比較的長期にわたって
神経細胞死が進行する３分間の一過性前脳虚血モデルを
用いて、コウジン末を虚血後４週間経口投与したときの
効果を調べた。When gerbils were kept at a brain temperature of 37 ° C. ± 0.2 ° C., the blood flow in the bilateral common carotid arteries was cut off for 3 minutes and reperfusion was performed. One of the inventors (Sakanaka) has already announced that this is the case (Sakanaka, M., et al., P.
rc. Natl. Sci. Acad. USA, 95,
4635-4640, 1998). In addition, the inventors confirmed by TUNEL staining that the nuclear fragmentation, which is an indicator of apoptosis-like cell death, is still in progress in neurons in the hippocampal CA1 region, which are considered to be alive at this time. (Wen, T.-C., et.
al. , J. et al. Exp. Med. , 188, 635-64
9, 1998; Peng, H .; , Et al. , J. et al. C
ereb. Blood Flow Metab. , 1
8, 349-360, 1998). Therefore, in the hippocampus CA1 region of gerbils loaded with transient forebrain ischemia for 3 minutes, neuronal degeneration may progress even after 1 week after ischemia, unlike the case of loading ischemia for 5 minutes. It has been revealed. The present inventors examined the effects of oral administration of kojin powder for 4 weeks after ischemia using a transient forebrain ischemia model for 3 minutes in which nerve cell death progresses for a relatively long time as described above. Was.
【０１３６】発明者らの方法に準じて（Ｓａｋａｎａｋ
ａ，Ｍ．，ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａ
ｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９５，４６３５−４６４０， １
９９８；Ｗｅｎ，Ｔ．−Ｃ．，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｅｘ
ｐ．Ｍｅｄ．，１８８，６３５−６４９，１９９８；Ｐ
ｅｎｇ，Ｈ．，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｅｒｅｂ．Ｂｌｏ
ｏｄ Ｆｌｏｗ Ｍｅｔａｂ．，１８，３４９−３６
０，１９９８）、吸入麻酔下でスナネズミの脳温を３７
℃±０．２℃に維持しながら両側総頚動脈血流を３分間
遮断した。同動物が麻酔から覚醒したのちに、コウジン
末を１．５ｇ／ｋｇ／日の用量で１日単回２８日間経口
投与した。偽手術動物と３分間の前脳虚血を負荷した対
照動物（虚血コントロール動物）には、同量の蒸留水の
みを経口投与した。その後、ステップダウン型受動的回
避学習実験を実施し、次いで同動物をペントバルビター
ル麻酔下で４％パラホルムアルデヒド及び２．５％グル
タルアルデヒド含有リン酸緩衝液を用いて経心的に灌流
固定した。脳を摘出したのち、パラフィンに包埋し、５
μｍの厚みのパラフィン切片を作成した。各動物の海馬
ＣＡ１領域１ｍｍあたりの神経細胞密度を発明者らの方
法により計測した（Ｓａｋａｎａｋａ，Ｍ．，ｅｔ ａ
ｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳ
Ａ，９５，４６３５−４６４０，１９９８；Ｗｅｎ，
Ｔ．−Ｃ．，ｅｔａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１８
８，６３５−６４９，１９９８；Ｐｅｎｇ，Ｈ．，ｅｔ
ａｌ．，Ｊ．Ｃｅｒｅｂ．Ｂｌｏｏｄ Ｆｌｏｗ Ｍ
ｅｔａｂ．，１８，３４９−３６０，１９９８）。以下
に前掲の論文で記述したステップダウン型受動的回避学
習実験の概略を記述する。３分虚血後２８日目にスナネ
ズミを受動的回避学習実験装置の安全域（プラットホー
ム）に置くと、当初スナネズミは何度か下のグリッド部
に降りるが、その都度電撃刺激を受けて安全域に戻る。
５分間の訓練施行中に、多くのスナネズミは安全域にと
どまるようになる。２４時間後、グリッド部の電源を切
った状態で、再びスナネズミを安全域に置き、グリッド
部に降りるまでの時間（反応潜時）を測定して、同動物
の学習能力の指標とした。According to the method of the present inventors (Sakanak)
a, M. , Et al. Proc. Natl. Aca
d. Sci. USA, 95, 4635-4640, 1
998; -C. , Et al. , J. et al. Ex
p. Med. , 188, 635-649, 1998; P
eng, H .; , Et al. , J. et al. Cereb. Blo
od Flow Metab. , 18, 349-36
0, 1998), the brain temperature of gerbils was 37
The bilateral common carotid artery blood flow was shut off for 3 minutes while maintaining the temperature at ± 0.2 ° C. After the animal was awake from anesthesia, kojin powder was orally administered at a dose of 1.5 g / kg / day once a day for 28 days. Sham-operated animals and control animals loaded with forebrain ischemia for 3 minutes (ischemic control animals) were orally administered only the same amount of distilled water. Thereafter, a step-down passive avoidance learning experiment was performed, and then the animals were perfused and fixed percutaneously under pentobarbital anesthesia using phosphate buffer containing 4% paraformaldehyde and 2.5% glutaraldehyde. After the brain is removed, it is embedded in paraffin and
A μm thick paraffin section was prepared. The nerve cell density per 1 mm of hippocampal CA1 area of each animal was measured by the method of the inventors (Sakanaka, M., et a).
l. Proc. Natl. Acad. Sci. US
A, 95, 4635-4640, 1998; Wen,
T. -C. , Et al. , J. et al. Exp. Med. , 18
8, 635-649, 1998; Peng, H .; , Et
al. , J. et al. Cereb. Blood Flow M
etab. , 18, 349-360, 1998). The outline of the step-down passive avoidance learning experiment described in the above paper is described below. When the gerbil was placed in the safety zone (platform) of the passive avoidance learning experiment device on day 28 after 3 minutes of ischemia, the gerbil descended on the lower grid several times at first, but each time receiving an electric shock, Return to
Many gerbils stay in a safe margin during the five-minute training session. Twenty-four hours later, the gerbils were again placed in the safety zone with the grid section turned off, and the time until the gerbils descended to the grid section (reaction latency) was measured and used as an index of the learning ability of the animal.
【０１３７】結果を図１２及び図１３に示す。図１２の
Ａ（上段）は受動的回避学習実験の反応潜時（秒）を、
図１２のＢ（下段）は海馬ＣＡ１領域１ｍｍあたりの神
経細胞密度（数／ｍｍ）を示す。各グラフの左側（白抜
き）は偽手術を、中央（黒）は蒸留水投与群を、右側
（黒）はコウジン末１．５ｇ／ｋｇ／日投与群をそれぞ
れ示す。図１２のＡに示すごとく、コウジン末を３分虚
血後４週間経口投与すると、受動的回避学習実験の反応
潜時が蒸留水投与虚血群に比べて有意に延長した。ま
た、図１２のＢに示すごとくコウジン末の経口投与によ
り、海馬ＣＡ１領域の神経細胞密度も蒸留水投与虚血群
に比べて有意に増加していた。図１３のＡ（上段）は偽
手術動物、Ｂ（中段）は蒸留水投与虚血動物、Ｃ（下
段）はコウジン末経口投与虚血動物の、海馬ＣＡ１領域
の光学顕微鏡像をそれぞれ示す、図面に代わる写真であ
る。図１３に示すごとく、偽手術動物（Ａ）に比べて、
蒸留水投与虚血動物では（Ｂ）３分虚血後、１週間目以
後も神経細胞がさらに変性脱落し（死に至り）、虚血後
１週間に生存していた正常の２分の１程度の海馬ＣＡ１
神経細胞が、虚血後２８日目にはさらに正常の４分の１
前後まで減少することがわかった。しかし、コウジン末
を３分虚血負荷後から２８日間経口投与しておくと
（Ｃ）、虚血後一週間目から２８日目までに起こる神経
細胞死が有意に抑止されることが判明した。The results are shown in FIG. 12 and FIG. A (upper part) of FIG. 12 shows the response latency (second) of the passive avoidance learning experiment.
B (lower part) of FIG. 12 shows the nerve cell density (number / mm) per 1 mm of the hippocampal CA1 area. The left side (open) of each graph indicates the sham operation, the center (black) indicates the group administered with distilled water, and the right side (black) indicates the group administered with ginseng powder 1.5 g / kg / day. As shown in FIG. 12A, when ginseng powder was orally administered for 3 weeks after ischemia for 3 minutes, the response latency of the passive avoidance learning experiment was significantly prolonged as compared with the ischemia group administered with distilled water. In addition, as shown in FIG. 12B, oral administration of kojin powder also significantly increased the nerve cell density in the hippocampal CA1 region as compared with the distilled water-administered ischemic group. FIG. 13A is an optical microscope image of the hippocampal CA1 region of a sham-operated animal, B (middle) is an ischemic animal administered with distilled water, and C (lower) is an ischemic animal administered orally with kojin powder. This is an alternative photo. As shown in FIG. 13, compared with the sham-operated animal (A),
In distilled water-administered ischemic animals, (B) neurons further degenerate and shed (death) even after 1 week after ischemia for 3 minutes, and about one-half of normal that survived 1 week after ischemia. Hippocampus CA1
Nerve cells are a quarter of normal on day 28 after ischemia.
It was found to decrease to around. However, when kojin powder was orally administered for 3 days after ischemic load for 3 minutes (C), it was found that nerve cell death occurring from 1 week to 28 days after ischemia was significantly suppressed. .
【０１３８】従って、３分虚血という比較的軽い脳虚血
負荷でも脳の神経細胞は徐々に死に至り、生体の高次神
経機能が損なわれることを本モデル動物は示している。
このモデル動物と類似した神経細胞の長期変性とも言う
べき現象は、軽症の一過性脳虚血発作・脳梗塞・脳出血
・クモ膜下出血発作を経験した患者、一酸化炭素中毒患
者、神経変性疾患を有する患者にもみられることがあ
る。これらの患者に共通する特徴は、当初高次神経機能
障害が比較的軽微であっても、時間を経るにつれて、脳
において神経細胞死がゆっくりと進行するため、高次神
経機能障害が重症化するということである。Ｂｃｌ−ｘ
Ｌ蛋白発現増強作用を有するコウジン末を３分虚血後に
経口投与しておくと、緩徐に進行する海馬ＣＡ１神経細
胞変性が抑止されるという実験事実は、高用量のコウジ
ン末経口投与が前記の患者の治療に有効であるというこ
とを物語っている。以上のようにコウジン末の経口投与
はＢｃｌ−ｘＬ蛋白の発現上昇を介して、細胞死を伴う
あらゆる疾患や病態に効果・効能を発揮する。従って、
今後新たな細胞死を伴う疾患が同定された場合にもコウ
ジン末、コウジンエキス、粗サポニン分画、ジンセノサ
イド類を第一選択薬として使用できる。[0138] Therefore, the present model animal shows that nerve cells in the brain gradually die even with a relatively light cerebral ischemia load of 3 minutes ischemia, and the higher nervous function of the living body is impaired.
The phenomenon similar to long-term degeneration of nerve cells similar to this model animal is a patient who has experienced mild transient ischemic attack, cerebral infarction, cerebral hemorrhage, subarachnoid hemorrhage attack, carbon monoxide poisoning patient, neurodegeneration It may also be found in patients with the disease. A common feature of these patients is that, over time, neuronal cell death in the brain progresses slowly, even if the higher neuronal dysfunction is relatively minor, so the higher nervous dysfunction becomes more severe That's what it means. Bcl-x
The experimental fact that if ginseng powder havingL protein expression enhancing action is orally administered for 3 minutes after ischemia, the slow progression of hippocampal CA1 neuronal degeneration is suppressed, is that high dose ginseng powder is orally administered as described above. It is effective in treating patients. Oral administration of powder red ginseng as described above through the increased expression of Bcl-xL protein, exhibit effectiveness and efficacy for all diseases and pathological conditions involving cell death. Therefore,
Even if a new disease involving cell death is identified in the future, ginseng powder, ginseng extract, crude saponin fraction, and ginsenosides can be used as first-line drugs.
【０１３９】前述の薬用人蔘（コウジン末）の経口投与
実験の次に、本発明者は少量のジンセノサイドＲｂ１の
静脈内持続投与で脳梗塞（脳塞栓）後の脳浮腫が改善す
るかどうかを調べた。このために、例えば、１２〜１３
週齢の雄性ＳＨ−ＳＰラット（体重２５０〜３００ｇ）
を使用した。同動物は１２時間ごとの明暗サイクル室で
飼育し、水ならびに餌は自由摂取とした。吸入麻酔下で
同動物の左中大脳動脈皮質枝（ＭＣＡ）を凝固・切離し
た。ジンセノサイドＲｂ１をＭＣＡ永久閉塞直後に単回
静脈内注入し（６μｇ又は６０μｇ）、その後アルザミ
ニ浸透圧ポンプを用いて２８日間静脈内へ持続注入（６
μｇ／日又は６０μｇ／日）した。なお、ＭＣＡを永久
閉塞した対照動物（虚血コントロール動物）と、偽手術
をした動物には同量の生理食塩水（ｖｅｈｉｃｌｅ、媒
体）のみを投与した。ＭＣＡ永久閉塞後３２日目に、Ｓ
Ｈ−ＳＰラットを抱水クロラールにて麻酔し、４％パラ
ホルムアルデヒドを含有する０．１Ｍリン酸緩衝液で経
心的に灌流固定した。その後、同動物の脳を摘出し大脳
皮質梗塞巣の写真を撮影した。結果を図１４に、図面に
代わる写真として示す。[0139] Whether the following oral administration experiments aforementioned ginseng (red ginseng powder), the present inventors to improve brain edema following cerebral infarction (cerebral embolism) in continuous intravenous administration of small amounts of ginsenoside Rb1 Was examined. For this purpose, for example, 12-13
Week-old male SH-SP rats (weight: 250-300 g)
It was used. The animals were housed in a 12 hour light / dark cycle room with free access to water and food. Under inhalation anesthesia, the left middle cerebral artery cortical branch (MCA) of the animal was coagulated and dissected. A single intravenous infusion of ginsenoside Rb1 immediately after MCA permanent occlusion (6 μg or 60 μg) followed by continuous intravenous infusion using an Alzamini osmotic pump for 28 days (6 μg)
μg / day or 60 μg / day). In addition, the same amount of physiological saline (vehicle, medium) was administered only to the control animal (ischemic control animal) in which MCA was permanently occluded and the sham-operated animal. On day 32 after MCA permanent occlusion, S
H-SP rats were anesthetized with chloral hydrate, and transfusionally fixed with 0.1 M phosphate buffer containing 4% paraformaldehyde. Thereafter, the brain of the animal was excised and a photograph of the cerebral cortical infarction was taken. The result is shown in FIG. 14 as a photograph replacing the drawing.
【０１４０】図１４の上段が生理食塩水投与脳梗塞（脳
塞栓）例８個体の脳を背側より撮影した実体顕微鏡写真
である。図１４の下段がジンセノサイドＲｂ１（６μｇ
／日）静脈内持続投与脳梗塞（脳塞栓）例８個体の脳を
背側より撮影した実体顕微鏡像である。脳の先端が写真
の右側を向くように配列してあるので、黒くなった脳梗
塞病変を有する左大脳半球は大脳縦裂の上側にみられ
る。大脳縦裂の下側にみられる正常の右大脳半球は、一
部分のみ実体顕微鏡写真に含まれている。図１４の上段
に示すごとく、生理食塩水投与脳梗塞例では、脳梗塞
（脳塞栓）発症後３２日目には、左大脳半球の黒く見え
る脳梗塞病巣が大きく拡大し、程度の差はあるもののす
べての例において左大脳半球が右大脳半球より大きくな
っている。特に上段に示した生理食塩水投与脳梗塞例の
うち、１段目の右端の脳及び２段目の左から２番目の脳
において、左大脳半球が右大脳半球より明らかに大きく
なっている。このことは、ＭＣＡが永久閉塞した左大脳
半球に脳浮腫が出現し、おそらく脳圧も亢進しているこ
とを物語っている。一方、図１４の下段に示すごとくジ
ンセノサイドＲｂ１（６μｇ／日）静脈内投与脳梗塞
（脳塞栓）例では、全例において明らかに脳梗塞病巣が
縮小しており、左大脳半球と右大脳半球の大きさにもほ
とんど差は認められない。すなわち、ジンセノサイドＲ
ｂ１静脈内持続投与によりコウジン末の経口投与の場合
と同様に脳浮腫がみられなくなったのである。The upper part of FIG. 14 is a stereoscopic microscope photograph of the brain of eight individuals with cerebral infarction (cerebral embolism) administered with physiological saline taken from the dorsal side. The lower part of FIG. 14 shows ginsenoside Rb1 (6 μg
/ Day) Intravenous continuous administration cerebral infarction (cerebral embolism) Example 8 A stereomicroscope image of the brain of 8 individuals taken from the dorsal side. The left cerebral hemisphere with the darkened cerebral infarction lesion is seen above the longitudinal cerebral fissure, as the tip of the brain is oriented to the right of the photograph. The normal right cerebral hemisphere below the longitudinal cerebral fissure is only partially contained in the stereomicrograph. As shown in the upper part of FIG. 14, in the case of cerebral infarction administered with saline, on the 32nd day after the onset of cerebral infarction (cerebral embolism), the cerebral infarction lesion, which looks black in the left cerebral hemisphere, greatly expands, and the degree varies. In all cases, the left cerebral hemisphere is larger than the right cerebral hemisphere. In particular, in the case of cerebral infarction treated with saline solution shown in the upper row, the left cerebral hemisphere is clearly larger than the right cerebral hemisphere in the rightmost brain in the first row and the second brain from the left in the second row. This indicates that cerebral edema appeared in the left cerebral hemisphere in which MCA was permanently occluded, and that cerebral pressure was probably also increased. On the other hand, in the case of cerebral infarction (cerebral embolism) intravenously administered with ginsenoside Rb1 (6 μg / day), as shown in the lower part of FIG. There is hardly any difference in the size of. That is, ginsenoside R
The b1 continuous intravenous administration is the case as well as cerebral edema oral administration of red ginseng powder is no longer observed.
【０１４１】なお、特願平１０−３６５５６０、ＰＣＴ
／ＪＰ９９／０２５５０（ジンセノサイドＲｂ１からな
る脳細胞又は神経細胞保護剤）ならびに特願平１１−３
４０８５０、ＰＣＴ／ＪＰ９９／０６８０４（ジンセノ
サイドＲｂ１からなる脳血管再生・再構築促進剤ならび
に神経組織二次変性抑止剤）において、本発明者ら（阪
中、田中）は左大脳半球面積と左大脳皮質梗塞面積を、
写真上で画像解析装置を用いて計測し、左大脳皮質梗塞
面積を左大脳半球面積で除することにより大脳皮質梗塞
比率（％）を算出した。その結果、ジンセノサイドＲｂ
１静脈内投与脳梗塞群で生理食塩水投与脳梗塞群に比し
て、大脳皮質梗塞比率が有意に減少していた。この大脳
皮質梗塞比率は梗塞面積をもとに算出したのであるが、
その比率の平均値がジンセノサイドＲｂ１静脈内投与群
で生理食塩水投与群の５０％程度あるいはそれ以下に減
少していたことから、実際の脳梗塞体積は、ジンセノサ
イドＲｂ１の静脈内投与により生理食塩水投与群の約４
分の１程度に縮小したことになる。改めて言うまでもな
く、脳血管の一部（たとえばＭＣＡ）が永久閉塞したの
ちに、静脈内へ少量持続投与することにより、脳梗塞病
巣体積をＭＣＡ永久閉塞後３２日目においても生理食塩
水投与脳梗塞例の４分の１程度に縮小せしめる化合物と
しては、ジンセノサイドＲｂ１が歴史上最初のものと考
えられる。おそらく低濃度のジンセノサイドＲｂ１は、
アポトーシス様神経細胞死抑止作用、Ｂｃｌ−ｘＬ発現
促進作用、脳血管再生・再構築促進作用等複数の極めて
優れた作用機構を介して、虚血巣周辺部（ｉｓｃｈｅｍ
ｉｃ ｐｅｎｕｍｂｒａ）の脳細胞（グリア細胞）や神
経細胞を長期にわたって虚血侵襲から守るものと考えら
れる（特願平１０−３６５５６０、ＰＣＴ／ＪＰ９９／
０２５５０、ジンセノサイドＲｂ１からなる脳細胞又は
神経細胞保護剤；特願平１１−３４０８５０、ＰＣＴ／
ＪＰ９９／０６８０４、ジンセノサイドＲｂ１からなる
脳血管再生・再構築促進剤ならびに神経組織二次変性抑
止剤）。さらに、少量のジンセノサイドＲｂ１を静脈内
投与する限りにおいては、ジンセノサイドＲｂ１は出血
傾向を助長しないので、脳梗塞のみならず脳出血やクモ
膜下出血を発症した患者に対しても、ＣＴ検査で脳卒中
の病型診断を下す前に少量のジンセノサイドＲｂ１を速
やかに静脈内投与できる。すなわち、ジンセノサイドＲ
ｂ１は従来の血栓溶解剤よりも広い用途・効果・効能を
有すると言える。Incidentally, Japanese Patent Application No. 10-365560, PCT
/ JP99 / 02550 (comprising ginsenoside Rb1 Brain cell or nerve cell-protective agents) as well as Japanese Patent Application No. 11-3
40850, PCT / JP99 / 06804 (a cerebral blood vessel regeneration / remodeling promoter comprising ginsenoside Rb1 and an inhibitor of secondary nervous tissue degeneration), the present inventors (Osakanaka, Tanaka) reported the left cerebral hemisphere area and the left cerebrum. Cortical infarct area,
The cerebral cortical infarction ratio (%) was calculated by measuring the area of the left cerebral cortical infarction by the area of the left cerebral cortical infarction on the photograph using an image analyzer. As a result, ginsenoside Rb
1. The ratio of cerebral cortical infarction was significantly decreased in the intravenous cerebral infarction group as compared to the physiological saline-administered cerebral infarction group. This cerebral cortical infarction ratio was calculated based on the infarct area,
Since the average value of the ratio was reduced to about 50% or less of the physiological saline-administered group by ginsenoside Rb1 intravenous administration group, the actual stroke volume, physiologically by intravenous administration of ginsenoside Rb1 About 4 in the saline administration group
This means that it has been reduced to about one-half. Needless to say again, after a part of the cerebral blood vessels (for example, MCA) is permanently occluded, the volume of the cerebral infarction lesion is reduced by intravenously administering a small amount of cerebral infarction lesion even on the 32nd day after MCA permanent occlusion. the compound is one that reduced to approximately one quarter of example, ginsenoside Rb1 is believed historical first. Probably the low concentration of ginsenoside Rb1 is
Apoptosis-like nerve cell death inhibiting effect, Bcl-xL expression promoting effect, via the excellent action mechanism of the plurality cerebrovascular regeneration and reconstruction-promoting action and the like, ischemic lesion periphery (Ischem
ic penumbra) are considered to protect brain cells (glial cells) and nerve cells from ischemic invasion for a long time (Japanese Patent Application No. 10-365560, PCT / JP99 /
02550, a brain cell or nerve cell protective agent comprising ginsenoside Rb1 ; Japanese Patent Application No. 11-340850, PCT /
JP99 / 06804, Cerebrovascular regeneration and reconstruction promoter comprising ginsenoside Rb1 and nerve tissue secondary degeneration inhibitor). Furthermore, as long as a small amount of ginsenoside Rb1 is administered intravenously, ginsenoside Rb1 does not promote bleeding tendency. Therefore, CT examination is performed not only for cerebral infarction but also for patients who have developed cerebral hemorrhage and subarachnoid hemorrhage. It can be quickly intravenously a small amount of ginsenoside Rb1 before making a disease type diagnosis of stroke. That is, ginsenoside R
b1 is said to have a wide application, effectiveness and efficacy than conventional thrombolytic agents.
【０１４２】低濃度のジンセノサイドＲｂ１が有する前
述の好ましい作用機構に加えて、本発明ではジンセノサ
イドＲｂ１が優れた脳浮腫の予防・治療・処置剤となる
ことが見出された。一般に、脳浮腫もしくは神経組織の
浮腫という病態は脳出血、脳梗塞、脳塞栓、クモ膜下出
血、頭蓋内出血、頭部外傷、神経外傷、中毒、脳炎、脳
腫瘍、髄膜炎、脊髄損傷、けいれん発作時、けいれん発
作後、脳神経外科手術中、脳神経外科手術後、脊椎外科
手術中、脊髄外科手術後、心停止もしくは呼吸停止後に
蘇生した際、等においてしばしば出現し、患者の生命予
後や神経症状に悪影響を与えることが知られている。従
って、少量のジンセノサイドＲｂ１の静脈内持続投与が
脳梗塞（脳塞栓）発症後の脳浮腫を治療するということ
を見出した本実験結果は、ジンセノサイドＲｂ１が前述
の疾病、疾患、症状、症候に伴う脳神経組織の浮肺の予
防・治療・処置にも有用であることを物語っている。[0142] In addition to the aforementioned preferred mechanism of action low concentrations of ginsenoside Rb1 has, in the present invention has been found to be a prevention, treatment and treatments excellent cerebral edema ginsenoside Rb1. In general, the condition of cerebral edema or edema of nerve tissue is cerebral hemorrhage, cerebral infarction, cerebral embolism, subarachnoid hemorrhage, intracranial hemorrhage, head trauma, neurotrauma, poisoning, encephalitis, brain tumor, meningitis, spinal cord injury, convulsive seizure Occasionally, after seizures, during neurosurgery, during neurosurgery, during spinal surgery, after spinal surgery, when resuscitated after cardiac arrest or respiratory arrest, etc., it affects the prognosis of the patient's life and neurological symptoms It is known to have a negative effect. Thus, the experimental results which found that continuous intravenous administration of small amounts of ginsenoside Rb1 is the treatment of cerebral infarction (cerebral embolism) brain edema after the onset, ginsenoside Rb1 is the aforementioned diseases, disorders, symptoms, symptom It is also useful for the prevention, treatment and treatment of pulmonary effusion of cranial nerve tissue associated with the disease.
【０１４３】さらに、生体組織の浮腫という病態は、脳
血管が永久閉塞した脳組織のみならず、末梢の血管が閉
塞した場合や末梢臓器・組織の血流が障害された場合に
も、生じることが知られている。従って、脳血管（ＭＣ
Ａ）が永久閉塞した後に少量のジンセノサイドＲｂ１を
静脈内投与して脳浮腫が改善・治療されたという本実験
結果に基づけば、ジンセノサイドＲｂ１は末梢組織や末
梢臓器の循環障害（たとえば大動脈炎症候群、膠原病、
急性末梢動脈閉塞症、閉塞性血栓血管炎、閉塞性動脈硬
化症、血栓性静脈炎、糖尿病性網膜症、糖尿病性腎症、
網膜中心動静脈閉塞症、レイノー病、レイノー症候群、
外傷、痔疾、心筋梗塞、褥創、糖尿病性皮膚潰瘍、末梢
循環不全、狭心症、肝・腎・心虚血再灌流障害等）に効
能を示すと考えられる。もちろん、前記の疾病のうち痔
疾や褥創に伴う病変組織の浮腫に対しては、ジンセノサ
イドＲｂ１を適当な基剤に混入した上で外用塗布もしく
は挿肛投与してもよい。Furthermore, the pathological condition of edema of living tissue occurs not only in brain tissue in which cerebral blood vessels are permanently occluded, but also when peripheral blood vessels are occluded or blood flow in peripheral organs / tissues is impaired. It has been known. Therefore, cerebral blood vessels (MC
Based small amounts of ginsenoside Rb1 after A) has permanent occlusion administered intravenously to the experimental result that cerebral edema is improved and treatment, ginsenoside Rb1 are circulatory disorders (e.g. aortitis peripheral tissues and peripheral organs Syndrome, collagen disease,
Acute peripheral arterial occlusion, obstructive thromboangiitis, obstructive atherosclerosis, thrombophlebitis, diabetic retinopathy, diabetic nephropathy,
Central retinal arteriovenous obstruction, Raynaud's disease, Raynaud's syndrome,
Trauma, hemorrhoids, myocardial infarction, pressure sores, diabetic skin ulcer, peripheral circulatory insufficiency, angina, liver / kidney / cardiac ischemia / reperfusion injury). Of course, for the edema of diseased tissue associated with hemorrhoids and pressure sore of the disease, it may be externally applied or挿肛administered on mixed in the ginsenoside Rb1 suitable base.
【０１４４】さて、特願平１０−３６５５６０号、ＰＣ
Ｔ／ＪＰ９９／０２５５０（ジンセノサイドＲｂ１から
なる脳細胞又は神経細胞保護剤）において、少量のジン
セノサイドＲｂ１の静脈内持続投与が、従来報告された
高用量ジンセノサイドＲｂ１の末梢（腹腔内）投与、高
用量ジンセノサイドＲｂ１の単回静脈内投与ならびにジ
ンセノサイドＲｂ１の脳室内投与の虚血脳保護作用から
はまったく想像することすら及ばなかった程に、優れた
脳梗塞巣縮小効果を示すことを、本発明者ら（阪中、田
中）がすでに発明している。すなわち、少量のジンセノ
サイドＲｂ１（６〜６０μｇ／日）をＳＨ−ＳＰラット
の中大脳動脈皮質枝永久閉塞後（すなわち脳塞栓発症
後）に２８日間静脈内投与することにより、脳塞栓発症
後約１ヶ月においても脳梗塞（脳塞栓）巣が対照群（生
理食塩水投与脳塞栓ラット）の約４分の１程度に縮小す
ることが、前述の発明において見出されたわけである。
このように、脳塞栓発症後に静脈内投与でき、脳梗塞
（脳塞栓）病巣体積を発症後約１ヶ月目においても対照
群の４分の１程度に縮小せしめる医薬組成物としてはジ
ンセノサイドＲｂ１が歴史上最初のものであると思われ
る。ちなみにジンセノサイドＲｂ１は薬用人蔘中に含有
される精製サポニン分画の中のひとつの成分であるが、
経口投与により血中ではまったく検出されず、本発明者
らの経験でもジンセノサイドＲｂ１単独の経口投与では
虚血脳保護作用はほとんど認められないので、本発明者
ら（阪中、田中）が前述の特許（特願平１０−３６５５
６０号、ＰＣＴ／ＪＰ９９／０２５５０、ジンセノサイ
ドＲｂ１からなる脳細胞又は神経細胞保護剤）を出願す
るまでは、ジンセノサイドＲｂ１自体、特にその経口投
与の薬理作用は否定されてきたわけである（小橋ら、薬
用人蔘’９５、ｐｐ２１３−２２１、熊谷 朗編、共立
出版株式会社）。従って、特願平１０−３６５５６０
号、ＰＣＴ／ＪＰ９９／０２５５０（ジンセノサイドＲ
ｂ１からなる脳細胞又は神経細胞保護剤）において、初
めて静脈内へ持続投与されたジンセノサイドＲｂ１が薬
用人蔘とは独立したより優れた効果・効能・用途をもつ
ことが明らかにされたのである。Now, Japanese Patent Application No. 10-365560, PC
In T / JP99 / 02550 (a brain cell or neuronal cell protector consisting of ginsenoside Rb1 ), continuous intravenous administration of a small amount of ginsenoside Rb1 was achieved by the previously reported peripheral (intraperitoneal) administration of high-dose ginsenoside Rb1 ; A single intravenous administration of high-dose ginsenoside Rb1 and an ischemic cerebral protective effect of intracerebroventricular administration of ginsenoside Rb1 show an excellent cerebral infarction lesion-reducing effect, which could not be imagined at all. The present inventors (Sakanaka, Tanaka) have already invented. That is, by administering a small amount of ginsenoside Rb1 (6 to 60 μg / day) intravenously for 28 days after permanent occlusion of the middle cerebral artery cortical branch (ie, after onset of cerebral embolism) in SH-SP rats, about 30 minutes after onset of cerebral embolism, It has been found in the above-mentioned invention that the cerebral infarction (cerebral embolism) lesion is reduced to about one-fourth of that in the control group (cerebral embolism-treated rats) even in one month.
Thus, it intravenously after onset of cerebral embolism, the ginsenoside Rb1 is as a pharmaceutical composition allowed to shrink to about one quarter of the control group in the cerebral infarction about 1 month after the onset of (cerebral embolism) lesion volume Seems to be the first in history. By the way, ginsenoside Rb1 is one component in the purified saponin fraction contained in ginseng,
Not detected at all in the blood by oral administration, since hardly recognized in ischemic brain protective effect in oral administration of ginsenoside Rb1 alone in our experience, the present inventors (Sakanaka, Tanaka) is above Patent (Japanese Patent Application No. 10-3655)
No. 60, PCT / JP99 / 02550, a brain cell or nerve cell protective agent comprising ginsenoside Rb1 ), the pharmacological effects of ginsenoside Rb1 itself, especially its oral administration, have been denied (Kohashi et al.). Ginseng '95, pp213-221, edited by Akira Kumagai, Kyoritsu Shuppan Co., Ltd.). Therefore, Japanese Patent Application No. Hei 10-365560.
No., PCT / JP99 / 02550 (Ginsenoside R
In Brain cell or nerve cell-protective agents) consisting of b1, since the first time with ginsenoside Rb1, which is continuously administered intravenously has excellent effects, efficacy and usages than independent of the ginseng it was revealed is there.
【０１４５】ところで、ジンセノサイドＲｂ１単独の経
口投与がさしたる虚血脳保護作用を示さないのに、コウ
ジン末の経口投与が本発明のごとくジンセノサイドＲｂ
１の静脈内投与には劣るものの、優れた虚血脳保護作用
を発揮するという実験結果は、コウジン末の中にジンセ
ノサイドＲｂ１以外の神経細胞保護成分が含有されてい
ることを示唆している。また、特願平１０−３６５５６
０号、ＰＣＴ／ＪＰ９９／０２５５０（ジンセノサイド
Ｒｂ１からなる脳細胞又は神経細胞保護剤）において、
本発明者ら（阪中、田中）は低用量のジンセノサイドＲ
ｂ１の静脈内持続投与が優れた脊髄損傷・神経外傷の治
療効果を発揮することを発明しているので、ジンセノサ
イドＲｂ１と構造が類似している他の精製サポニンも同
様の効果を有する可能性があると考えられた。そこでこ
のことを検証するために、本発明者らは脊髄損傷モデル
ラットを用いて、薬用人蔘（コウジン末）の粗サポニン
分画の静脈内持続投与の効果を調べた。ジンセノサイド
Ｒｂ１もしくは薬用人蔘の粗サポニン分画には、図１５
に示すごとくジンセノサイドＲｂ１に加えて少なくとも
３０種類前後の類似化学構造を有する精製サポニン類も
しくはジンセノサイド類が含まれているので（庄司、薬
用人蔘’９５、ｐｐ２５１−２６１、熊谷朗編、共立出
版株式会社）、もし低用量の粗サポニン分画（ｃｒｕｄ
ｅ ｇｉｎｓｅｎｇ ｓａｐｏｎｉｎ、ＣＧＳ）の静脈
内持続投与が、ジンセノサイドＲｂ１と同様に脊髄損傷
治療効果を示せば、粗サポニン分画に含有される精製サ
ポニンのいずれかが神経外傷や脊髄損傷の予防・治療・
処置のために利用できると言える。Although oral administration of ginsenoside Rb1 alone does not show the ischemic brain protective effect, oral administration of ginsenoside Rb1 is not effective as in the present invention.
Experimental results showing that although it is inferior to the intravenous administration ofNo. 1 but exerts an excellent ischemic brain protective action, it indicates that neuronal protective components other than ginsenoside Rb1 are contained in ginseng powder. . In addition, Japanese Patent Application No. 10-36556
No. 0, PCT / JP99 / 02550 (a brain cell or nerve cell protective agent comprising ginsenoside Rb1 )
The present inventors (Osakanaka, Tanaka) reported that low-dose ginsenoside R
since the invention that the continuous intravenous administration of b1 exerts a therapeutic effect superior spinal cord injury and neurological trauma, possible other purification saponins ginsenoside Rb1 and structure are similar have similar effects It was thought that there was sex. In order to verify this, the present inventors examined the effect of continuous intravenous administration of crude saponin fraction of ginseng (kouji powder) using spinal cord injury model rats. The crude saponin fraction of ginsenoside Rb1 or ginseng, 15
As shown in FIG.2 , in addition to ginsenoside Rb1, at least about 30 kinds of purified saponins or ginsenosides having a similar chemical structure are contained (Shoji, Ginseng '95, pp 251-261, pp. 251-261, edited by Akira Kumagai, Kyoritsu Shuppan) Co., Ltd., if low-dose crude saponin fraction (crud
e ginseng saponin, continuous intravenous administration of CGS) is, if tendency is also shown in spinal cord injury therapeutic effect as ginsenoside Rb1, or purified saponins contained in the crude saponin fraction prevention and treatment of neurotrauma or spinal cord injury・
It can be said that it is available for treatment.
【０１４６】図１５に粗サポニン分画に含有されている
サポニン類を示す。図１５の上から１段目の左からジン
セノサイドＲａ１、ジンセノサイドＲａ２、ジンセノサ
イドＲａ３、ジンセノサイドＲ４、２段目の左からジン
セノサイドＲｂ１（Ｒ＝Ｈ）、キンケノサイドＲ１（Ｒ
＝ＣＨ３ＣＯ−）、マロニルジンセノサイドＲｂ１（Ｒ
＝ＨＯＯＣ−ＣＨ２ＣＯ−）、その右がジンセノサイド
Ｒｂ２（Ｒ＝Ｈ）、ジンセノサイドＲＳ１（Ｒ＝ＣＨ３
ＣＯ−）、マロニルジンセノサイドＲｂ２（Ｒ＝ＨＯＯ
Ｃ−ＣＨ２ＣＯ−）、左から３番目がジンセノサイドＲ
ｃ（Ｒ＝Ｈ）、ジンセノサイドＲＳ２＊（Ｒ＝ＣＨ３Ｃ
Ｏ−）、マロニルジンセノサイドＲｃ（Ｒ＝ＨＯＯＣ−
ＣＨ２ＣＯ−）、右端がジンセノサイドＲｄ（Ｒ＝
Ｈ）、マロニルジンセノサイドＲｄ（Ｒ＝ＨＯＯＣ−Ｃ
Ｈ２ＣＯ−）、上から３段目の左からジンセノサイドＲ
ｂ３、ジンセノサイドＲｇ３＊、ジンセノサイドＲ
ｇ３、ジンセノサイドＲｈ２＊、上から４段目の左から
２０−グルコジンセノサイドＲｆ、ジンセノサイドＲ
ｅ、ノトジンセノサイドＲ１、ジンセノサイドＲｆ、ジ
ンセノサイドＲｇ１、上から５段目（最下段）の左から
ジンセノサイドＲｇ２、（２０Ｒ）−ジンセノサイドＲ
ｇ２＊、ジンセノサイドＲｈ１、（２０Ｒ）−ジンセノ
サイドＲｈ１＊、チクセツサポニンＶ（ジンセノサイド
Ｒｏ）である。FIG. 15 shows saponins contained in the crude saponin fraction. Ginsenoside Ra1 , ginsenoside Ra2 , ginsenoside Ra3 , ginsenoside R4 from the left in the first row from the top in FIG. 15, ginsenoside Rb1 (R = H), and kinkenoside R1 (R
ＣＨCH3 CO—), malonylzine senoside Rb1 (R
=HOOC-CH 2 CO-), the right ginsenosideRb 2 (R = H), ginsenosideRS 1 (R = CH3
CO-), malonyl ginsenoside Rb2 (R = HOO
C-CH2 CO-), the third from the left is ginsenoside R
c (R = H), ginsenoside RS2* (R = CH3 C
O-), malonyl ginsenoside Rc (R = HOOC-
CH2 CO—) and the right end is ginsenoside Rd (R =
H), malonyl ginsenoside Rd (R = HOOC-C
H2 CO-), ginsenoside R from the third row from the left
b3 , ginsenoside Rg3* , ginsenoside R
g3 , ginsenoside Rh2* , 20-glucoginsenoside Rf, ginsenoside R from the left in the fourth row from the top
e, notoginsenoside R1 , ginsenoside Rf, ginsenoside Rg1 , ginsenoside Rg2 from the left of the fifth row from the top (bottom row), (20R) -ginsenoside R
g2*, ginsenosideRh 1, (20R) - is a ginsenosideRh1 *, tick Seth saponin V (ginsenoside Ro).
【０１４７】そこでまず本発明者らは、脊髄損傷ラット
を用いて、ジンセノサイドＲｂ１静脈内持続投与の効果
を調べ、その効果を粗サポニン分画静脈内投与の効果と
比較した。脊髄のある分節たとえば下位胸髄に圧負荷が
加わると、同部の灰白質神経細胞のみならず同部の白質
伝導路が障害を受ける。白質伝導路の障害はさらに遠位
部（尾側）へと進展し、かつ伝導路の起始細胞すなわち
伝導路に線維を投射している上位の神経細胞体（すなわ
ち起始細胞）の二次変性をもたらす。このようにして、
圧負荷を受けた下位胸髄の白質伝導路の障害は、伝導路
の起始細胞体（神経細胞体）ならびに下位胸髄以下（す
なわち腰髄、仙髄）の伝導路の二次変性を惹起すること
により、両下肢の対麻痺を引き起こす。また、下位胸髄
の損傷により、腰髄・仙髄に対する上位の脳からの神経
支配が途絶えるため、さらに腰髄・仙髄の灰白質でも神
経細胞の二次変性が進行し、両下肢の対麻痺が回復不能
となるものと思われる。発明者らは、このような脊髄損
傷のモデルとして、下位胸髄に２０ｇの圧力を２０分間
負荷された雄性ウィスターラット（体重約３００ｇ）を
用いた。[0147] Therefore, first the present inventors used a spinal cord injured rats, investigated the effects of ginsenoside Rb1 continuous intravenous administration were compared to the effects of the crude saponin fraction intravenous administration of the effect. When pressure is applied to a segment of the spinal cord, for example, the lower thoracic cord, not only the gray matter nerve cells in the same region but also the white matter conduction path in the same region are damaged. Impairment of white matter pathways extends further distally (caudal side) and is secondary to the cells that originate the pathways, or higher neuronal bodies that project fibers into the pathways (ie, the originating cells). Causes denaturation. In this way,
Impairment of white matter pathways in the lower thoracic cord under pressure overload causes secondary degeneration of the pathway's originating cell body (neuron cell body) and the lower thoracic cord (ie, lumbar spinal cord, sacral medulla). Cause paraplegia in both lower limbs. In addition, since lower thoracic spinal cord injury interrupts innervation of the lumbar and sacral cords from the upper brain, secondary degeneration of nerve cells also progresses in the gray matter of the lumbar and sacral cords, and the pair of lower limbs Paralysis may not be recoverable. The present inventors used a male Wistar rat (approximately 300 g in weight) in which 20 g of pressure was applied to the lower thoracic cord for 20 minutes as a model of such spinal cord injury.
【０１４８】ハロセン、笑気による吸入麻酔下で、ラッ
トの下位胸髄に２０ｇの圧力を２０分間負荷した後、３
０分以上経過してから左大腿静脈にジンセノサイドＲｂ
１（１２μｇまたは６０μｇ）を単回注入し、さらに同
静脈へジンセノサイドＲｂ１（１２μｇ／日または６０
μｇ／日）をアルザミニ浸透圧ポンプにて７日間持続投
与した。対照動物ならびに偽手術動物には同様のスケジ
ュールで同量の生理食塩水（ｖｅｈｉｃｌｅ、媒体）を
投与した。脊髄損傷前、脊髄損傷当日、脊髄損傷後１日
目から７日目まで、各ラットのＯｐｅｎ ｆｉｅｌｄ
ｌｏｃｏｍｏｔｏｒ ｓｃｏｒｅｓ（Ｂａｓｓｏ，Ｂｅ
ｔｔｉｅ ａｎｄ Ｂｒｅｓｎａｋａｎ（ＢＢＢ）ｓｃ
ｏｒｅｓ）を計測して運動能力の指標とした（Ｂａｓｓ
ｏ Ｄ．Ｍ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｔｒａｕｍ
ａ，１３，３４３−３５９，１９９６）。ちなみに偽手
術ラット（正常ラット）のＢＢＢ ｓｃｏｒｅｓ（ＢＢ
Ｂスコア）は２０ないし２１である。Under inhalation anesthesia with halothane and laughter, 20 g of pressure was applied to the lower thoracic spinal cord of rats for 20 minutes.
After 0 minutes or more, ginsenoside Rb is added to the left femoral vein.
1 (12 μg or 60 μg) was injected once, and ginsenoside Rb1 (12 μg / day or 60 μg) was injected into the same vein.
μg / day) was continuously administered for 7 days with an Alzamini osmotic pump. Control animals and sham-operated animals received the same amount of saline (vehicle, vehicle) on a similar schedule. Before the spinal cord injury, on the day of the spinal cord injury, from day 1 to day 7 after the spinal cord injury, the open field of each rat
locomor scores (Basso, Be
tie and Bresnakan (BBB) sc
ores) as an index of athletic ability (Bass
o D. M. et al. , J. et al. Neurotraum
a, 13, 343-359, 1996). By the way, BBB scores (BB) of sham-operated rats (normal rats)
B score) is 20-21.
【０１４９】図１６は脊髄損傷当日及び翌日の生理食塩
水投与ラットならびにジンセノサイドＲｂ１（６０μｇ
／日）投与ラットをそれぞれ示す、図面に代わる写真で
ある。図１６の下段の２匹のラットが写っている写真
は、脊髄損傷当日の写真であり、左側のラットは生理食
塩水投与のものであり、右側のラットはジンセノサイド
Ｒｂ１投与ラット（静脈内６０μｇ／日）である。図１
６の上段の左側の写真は脊髄損傷翌日のジンセノサイド
Ｒｂ１投与ラットのものであり、右側は生理食塩水投与
ラットのものである。図１６に示すごとく、下位胸髄に
２０ｇの圧力を２０分間負荷された当日は生理食塩水投
与ラットならびにジンセノサイドＲｂ１投与ラットは明
らかに両下肢の対麻痺を呈する。しかし下位胸髄に２０
ｇの圧力を２０分間負荷したのちに３０分以上経過して
からジンセノサイドＲｂ１（６０μｇ／日）を静脈内投
与すると、図１６に示すごとく１〜２日後には、両下肢
の対麻痺が著しく改善し、ラットは物につかまりながら
立ち上がることができるようになる。一方、生理食塩水
投与ラットの対麻痺はまったく改善しなかった。FIG. 16 shows the saline-administered rats and ginsenoside Rb1 (60 μg) on and after the day of spinal cord injury.
/ Day) is a photograph instead of a drawing, showing each administered rat. Photo 2 rats lower part of FIG. 16 is captured is a photograph of the spinal cord injury day, left in rats is of physiological saline administration, the right side of the rat ginsenoside Rb1 treated rats (intravenous 60μg / Day). FIG.
Upper left picture of 6 is of spinal cord injury the next day of ginsenoside Rb1 treated rats, right is of saline treated rats. As shown in FIG. 16, the day that the pressure of 20g loaded 20 minutes to the lower thoracic cord are saline-treated rats and ginsenoside Rb1 rats clearly exhibit paraplegia of both lower limbs. But 20 in the lower thoracic spinal cord
When ginsenoside Rb1 (60 μg / day) was administered intravenously 30 minutes or more after applying a pressure of 20 g for 20 minutes, paraplegia of both lower limbs was remarkable after 1-2 days as shown in FIG. Improving, the rat will be able to stand up while holding onto the object. On the other hand, paraplegia of the saline-administered rats did not improve at all.
【０１５０】脊髄損傷後７日目のＢＢＢ ｓｃｏｒｅｓ
（スコア）にてラットの運動能力を定量化したグラフの
みを図１７に示す。図１７の縦軸はＢＢＢスコアーの点
数を示し、横軸はジンセノサイドＲｂ１の投与量（μｇ
／日）を示す。統計解析法はＭａｎｎ−Ｗｈｉｔｎｅｙ
Ｕテストにより、データは平均値±標準誤差で示され
ており、＊印はｐ＜０．０１、＊＊印はｐ＜０．００５
であることを示す。図１７に示すごとく、脊髄損傷ラッ
トの運動能力はジンセノサイドＲｂ１静脈内投与の用量
に依存して有意に改善する。なお、脊髄損傷治療薬とし
て現在臨床現場で使用されているソルメドロール（メチ
ルプレドニゾロン）を３０ｍｇ／ｋｇの用量で発明者ら
が作成した脊髄損傷ラットの大腿静脈にジンセノサイド
Ｒｂ１を投与する場合と同様のスケジュールで静脈内投
与しても有意な神経麻痺改善効果はみられず、およそ４
０％（１０匹中４匹）の実験動物が脊髄損傷後７日以内
に死亡した。また、ソルメドロール投与ラットでは背部
の手術創の治癒が生理食塩水投与ラットに比べて明らか
に遅延したが、ジンセノサイドＲｂ１投与ラットではそ
のような副作用は認められなかった。このことは、ジン
セノサイドＲｂ１が脊髄損傷・神経外傷治療薬としては
ソルメドロールよりも優れた特性を有していることを物
語っている。しかも、ジンセノサイドＲｂ１の投与量は
ソルメドロールの投与量よりもはるかに少なく、さらに
ジンセノサイドＲｂ１はソルメドロールのような免疫機
能抑制作用や消化性潰瘍誘発作用を有していないので、
極めて安全な脊髄損傷・神経外傷治療薬となることが期
待される。BBB scores 7 days after spinal cord injury
FIG. 17 shows only a graph quantifying the motor ability of the rat by (score). The vertical axis of FIG. 17 shows the number of the BBB score, the horizontal axis represents the dose of ginsenoside Rb1 ([mu] g
/ Day). Statistical analysis method is Mann-Whitney
According to the U test, data are shown as a mean value ± standard error. * Indicates p <0.01, ** indicates p <0.005.
Is shown. As shown in FIG. 17, motor skills spinal cord injured rats is significantly improved depending on the dose of ginsenoside Rb1 intravenous administration. As in the case of administration Sol are used Medrol (methyl prednisolone) to the femoral vein of rats with spinal cord injuries that we created at a dose of 30 mg / kg in the current clinical practice ginsenoside Rb1 as spinal cord injury treatment Intravenous administration on a schedule of 4 showed no significant effect on amelioration of nerve palsy.
0% (4/10 animals) died within 7 days after spinal cord injury. Although healing of surgical wounds back in Solumedrol treated rats was clearly delayed as compared to saline treated rats, such side effects in ginsenoside Rb1 treated rats were observed. This is ginsenoside Rb1 is a spinal cord injury, neurotrauma therapeutic tells us that it has better performance than Solumedrol. Moreover, the dose of ginsenoside Rb1 is much less than the dose of Solumedrol, since further ginsenoside Rb1 has no immune function suppression effects or peptic ulcer-inducing action, such as Solumedrol,
It is expected to be an extremely safe drug for treating spinal cord injury and neurotrauma.
【０１５１】脊髄損傷ラットを用いた本実験結果より、
ジンセノサイドＲｂ１からなる静脈内投与製剤の脊髄損
傷治療効果は歴史上最強のものと考えられる。おそらく
ジンセノサイドＲｂ１もしくはその代謝産物が極めて強
力な脊髄損傷治療作用を発揮するものと思われるが、こ
のことはジンセノサイドＲｂ１もしくはその代謝産物が
脊髄損傷・神経外傷治療のためのリード化合物になり得
ることも支持している。本実験結果は、さらに低用量の
ジンセノサイドＲｂ１が脊髄損傷後の神経組織二次変性
をも抑止することを支持している。また、周知のごとく
神経組織は他の末梢組織に比べて外傷に対して最も脆弱
な組織であるので、ジンセノサイドＲｂ１からなる医薬
組成物が脊髄損傷の治療・予防・処置に著効を示すとい
う事実は、ジンセノサイドＲｂ１が中枢神経組織以外の
組織すなわち末梢組織の外傷・創傷・熱傷等にも有効で
あることを物語っている。このようにジンセノサイドＲ
ｂ１の脊髄損傷・神経外傷治療効果は画期的なものであ
るので、ジンセノサイドＲｂ１もしくはその代謝産物を
リード化合物として新規脊髄損傷・神経外傷治療薬を合
成できるのみならず、ジンセノサイドＲｂ１もしくはそ
の代謝産物の標的分子を同定することにより、標的分子
の機能を修飾する新規化合物をも合成して脊髄損傷・神
経外傷・外傷治療薬の開発を目指すことができる。From the results of this experiment using spinal cord injured rats,
Spinal cord injury therapeutic effects of intravenous formulation comprising ginsenoside Rb1 is believed to be of history strongest. Although probably shall ginsenoside Rb1 or its metabolites to exhibit extremely potent spinal cord injury therapeutic action, this is ginsenoside Rb1 or its metabolites can become lead compounds for spinal cord injuries, neurotrauma treatment We support that. This experimental results further support that the ginsenoside Rb1 low doses to suppress even the nerve tissue secondary degeneration after spinal cord injury. Also, well-known as nerve tissue because it is the most vulnerable tissue against injury than other peripheral tissues, a pharmaceutical composition comprising ginsenoside Rb1 is that shown significant effects in the treatment, prevention and treatment of spinal cord injury in fact tells us that ginsenoside Rb1 is also effective in the central nervous tissue other than the tissue i.e. peripheral tissue trauma, wounds, burns, etc.. Thus, ginsenoside R
Since spinal cord injuries, neurotrauma therapeutic effects of b1 is a milestone, not only it can synthesize new spinal cord injuries, neurotrauma therapeutic agents as ginsenoside Rb1 or lead compound metabolites thereof, or ginsenoside Rb1 By identifying the target molecule of the metabolite, a novel compound that modifies the function of the target molecule can also be synthesized to aim at the development of a therapeutic drug for spinal cord injury, nerve trauma and trauma.
【０１５２】また、脊髄損傷においては、グリア細胞の
うちでも特にオリゴデンドロサイトが傷害を受けてアポ
トーシスに陥った結果、脱髄現象が起こり神経症状が悪
化・進行すると報告されている（Ｃｒｏｗｅ，Ｍ．Ｊ．
ｅｔ ａｌ．，ＮａｔｕｒｅＭｅｄ．３，７３−７６，
１９９７；Ｅｍｅｒｙ，Ｅ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｎｅｕ
ｒｏｓｕｒｇ．８９，９１１−９２０，１９９８）。ジ
ンセノサイドＲｂ１の静脈内投与が顕著に脊髄損傷ラッ
トの両下肢麻痺を改善するという実験結果は、ジンセノ
サイドＲｂ１がオリゴデンドロサイトのアポトーシスも
しくはアポトーシス様神経細胞死を抑止することによ
り、脊髄損傷の症状を改善することを物語っている。従
って、本発明の低用量・低濃度のジンセノサイドＲｂ１
はオリゴデンドロサイトを保護することにより、脱髄を
きたす脳神経疾患（多発性硬化症、ビンスワンガー病、
脱髄脳炎、脳の慢性低灌流障害等）の予防・治療・処置
にも有効であると考えられる。さらに、ジンセノサイド
Ｒｂ１の静脈内投与が脊髄損傷ラットの両下肢麻痺（対
麻痺）を改善するという実験結果は、損傷を受けた神経
線維もしくは神経組織がジンセノサイドＲｂ１投与によ
り再生することも示している。In spinal cord injury, it has been reported that, among the glial cells, oligodendrocytes, in particular, are damaged and apoptosis occurs, resulting in demyelination, resulting in deterioration and progression of neurological symptoms (Crowe, M. .
et al. , NatureMed. 3,73-76,
1997; Emery, E .; et al. , J. et al. Neu
rosurg. 89, 911-920, 1998). Experimental results of intravenous administration of ginsenoside Rb1 is remarkably improved paraplegia of spinal cord injured rats, by ginsenoside Rb1 to suppress apoptosis or apoptosis-like nerve cell death of oligodendrocytes, the symptoms of spinal cord injury Tells us to improve. Therefore, low dose and low concentration of ginsenoside Rb1 of the present invention
Protects oligodendrocytes and causes cranial nerve disorders (multiple sclerosis, Binswanger's disease,
Demyelinating encephalitis, chronic hypoperfusion of the brain, etc.). Furthermore, the experimental result that intravenous administration of ginsenoside Rb1 improves the paraplegia of spinal cord injured rats (paraplegia) is also shown that nerve fibers or nerve tissue damaged reproduces administration of ginsenoside Rb1 I have.
【０１５３】次に、薬用人蔘の粗サポニン分画が低用量
のジンセノサイドＲｂ１の静脈内持続投与の効果と同様
の効果を示すかどうかを調べるため、本発明者らは、前
述の脊髄損傷モデル動物の静脈内に粗サポニン分画を低
用量で持続投与した。なお、粗サポニン分画は、本発明
者の一人（阪中）の論文（Ｗｅｎ Ｔ．−Ｃ．ｅｔａ
ｌ．，Ａｃｔａ Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌ．９１，１５
−２２，１９９６）で使用されたものを投与した。[0153] Next, to find out if the crude saponin fraction of ginseng exhibits the same effects as the effects of continuous intravenous administration of ginsenoside Rb1 low doses, the present inventors have previously described spinal cord injury The crude saponin fraction was continuously administered at a low dose intravenously in the model animals. The crude saponin fraction was prepared by a paper (Wen T.-C. eta) by one of the present inventors (Sakanaka).
l. , Acta Neuropathol. 91,15
-22, 1996).
【０１５４】ハロセン、笑気による吸入麻酔下で、ラッ
トの下位胸髄に２０ｇの圧力を２０分間負荷した後、３
０分以上経過してから左大腿静脈に粗サポニン分画（８
７０μｇ）の生理食塩水溶解液を単回注入し、さらに同
静脈へ粗サポニン分画（８７０μｇ／日）をアルザミニ
浸透圧ポンプにて７日間持続投与した。対照脊髄損傷動
物には同様のスケジュールで同量の生理食塩水（ｖｅｈ
ｉｃｌｅ、媒体）を投与した。結果を図１８及び図１９
に示す。図１８は粗サポニン分画投与例を、図１９は生
理食塩水（ｖｅｈｉｃｌｅ、媒体）投与例を示す、図面
に代わる写真である。図１８の左中段が脊髄損傷を負荷
した当日のものであり、左下段がその翌日のものであ
り、下段右側が２日後のものであり、右中段が４日後の
ものであり、上段の大きな写真が７日後のものである。
図１９では、左下段が脊髄損傷を負荷した当日のもので
あり、右下段がその翌日のものであり、中段右側が２日
後のものであり、右上段が４日後のものであり、左上段
の大きな写真が７日後のものである。Under inhalation anesthesia with halothane and laughter, 20 g of pressure was applied to the lower thoracic spinal cord of rats for 20 minutes.
After 0 minutes or more, the crude saponin fraction (8
70 μg) of a physiological saline solution was injected once, and a crude saponin fraction (870 μg / day) was continuously administered to the same vein with an Alzamini osmotic pump for 7 days. Control spinal cord injured animals received the same amount of saline (veh) on a similar schedule.
icles, vehicle). 18 and 19 show the results.
Shown in FIG. 18 is a photograph instead of a drawing, showing an example of administration of a crude saponin fraction, and FIG. 19 is an example of administration of a physiological saline (vehicle, medium). The middle left column in FIG. 18 is the day on which the spinal cord injury was loaded, the lower left column is the next day, the lower right column is 2 days later, the right middle column is 4 days later, and the upper row is larger. The picture is after 7 days.
In FIG. 19, the lower left row is the day on which the spinal cord injury was loaded, the lower right row is the next day, the middle right side is 2 days later, the upper right row is 4 days later, and the upper left row The big picture is after 7 days.
【０１５５】図１８に示すごとく、脊髄損傷を負荷した
当日には、ラットは両下肢の対麻痺をきたし、粗サポニ
ン分画を静脈内投与しても立ち上がることができない
が、翌日より粗サポニン分画を静脈内投与したラットの
下肢対麻痺が改善し始め、脊髄損傷後７日目には、オー
プンフィールドの外壁（高さ８ｃｍ）をささえにして同
ラットは立ち上がることが可能となった。一方、脊髄損
傷負荷後に生理食塩水のみを投与したラットでは、図１
９に示すごとく、脊髄損傷後１週間を経過してもまった
く下肢対麻痺に改善はみられなかった。なお、脊髄損傷
治療薬として現在臨床現場で使用されているソルメドロ
ール（メチルプレドニゾロン）を３０ｍｇ／ｋｇの用量
で、発明者らが作成した前述の脊髄損傷ラットの大腿静
脈に粗サポニン分画を投与する場合と同様のスケジュー
ルで静脈内投与してもまったく麻痺改善効果はみられな
かった。また、ソルメドロール投与ラットでは、背部の
手術創の治癒が生理食塩水投与ラットに比べて明らかに
遅延したが、粗サポニン分画投与ラットではそのような
副作用は認められなかった。このことは、粗サポニン分
画が脊髄損傷・神経外傷治療薬としてはソルメドロール
よりも優れた特性を有していることを物語っている。し
かも、粗サポニン分画の投与量はソルメドロールの投与
量よりも少なく、さらに粗サポニン分画はソルメドロー
ルのような免疫機能抑制作用や消化性潰瘍誘発作用を有
していないので、極めて安全な脊髄損傷・神経外傷治療
薬となることが期待される。As shown in FIG. 18, on the day of spinal cord injury, the rats had paraplegia in both lower limbs and could not stand up even if the crude saponin fraction was intravenously administered. The lower limb paraplegia of the rats to which the painting was administered intravenously began to improve, and on day 7 after spinal cord injury, the rats were able to stand up against the outer wall of the open field (height 8 cm). On the other hand, in rats to which only saline was administered after the spinal cord injury was loaded, FIG.
As shown in FIG. 9, no improvement was observed in lower limb paraplegia even after one week from spinal cord injury. The crude saponin fraction was administered to the femoral vein of the above-mentioned spinal cord-injured rat prepared by the inventors at a dose of 30 mg / kg of solmedrol (methylprednisolone) currently used in clinical practice as a therapeutic drug for spinal cord injury. Intravenous administration on the same schedule as that performed did not show any paralytic improvement effect. In addition, healing of the surgical wound on the back was significantly delayed in rats administered with solmedrol as compared with rats administered with saline, but no such side effect was observed in rats administered with the crude saponin fraction. This indicates that the crude saponin fraction has better properties as a drug for treating spinal cord injury and nerve trauma than solmedrol. Moreover, the dose of the crude saponin fraction is smaller than the dose of solmedrol, and furthermore, the crude saponin fraction does not have an immune function-inhibiting effect or a peptic ulcer-inducing effect like solmedrol, which is extremely safe. It is expected to be a therapeutic drug for spinal cord injury and nerve trauma.
【０１５６】脊髄損傷ラットを用いた本実験結果より、
低用量の粗サポニン分画からなる静脈内投与製剤の脊髄
損傷治療効果はジンセノサイドＲｂ１と比べて遜色ない
くらい優れたものと考えられる。従って粗サポニン分画
に含有される精製サポニンのいずれかもしくはそれらの
代謝産物が極めて強力な脊髄損傷治療作用を発揮するも
のと思われるが、このことは粗サポニン分画に含有され
る精製サポニンのいずれかもしくはそれらの代謝産物が
脊髄損傷・神経外傷治療のためのリード化合物になり得
ることも支持している。本実験結果は、さらに粗サポニ
ン分画に含有される精製サポニン（図１５）のいずれか
が脊髄損傷後の神経組織二次変性をも抑止することを支
持している。なお、本実験では、オタネニンジン（Ｐａ
ｎａｘｇｉｎｓｅｎｇＣ．Ａ．Ｍｅｙｅｒ）の粗サポニ
ン分画を用いたが、その他の薬用人蔘（たとえば三七人
蔘、人参田七、ヒマラヤ人蔘、アメリカ人蔘、チクセツ
ニンジン等）の粗サポニン分画を用いても同様の結果が
得られると考えられる。従って、前述の薬用人蔘の粗サ
ポニン分画に含有される成分のいずれかが脊髄損傷・神
経外傷・頭部外傷の予防・治療・処置に有用であると考
えられる。また、周知のごとく神経組織は他の末梢組織
に比べて外傷に対して最も脆弱な組織であるので粗サポ
ニン分画からなる医薬組成物が脊髄損傷の治療・処置に
著効を示すという事実は、低用量・低濃度の粗サポニン
分画が中枢神経組織以外の組織すなわち末梢組織の外傷
にも有効であることを物語っている。From the results of this experiment using spinal cord injured rats,
Spinal cord injury therapeutic effects of intravenous formulation consisting crude saponin fraction of low doses is considered to have excellent long not inferior as compared with the ginsenoside Rb1. Therefore, it is considered that any of the purified saponins contained in the crude saponin fraction or their metabolites exert an extremely strong therapeutic effect on spinal cord injury, which indicates that the purified saponin contained in the crude saponin fraction contains He also supports that either or their metabolites can be lead compounds for the treatment of spinal cord injury and neurotrauma. The results of this experiment further support that any of the purified saponins (FIG. 15) contained in the crude saponin fraction also inhibits secondary degeneration of nerve tissue after spinal cord injury. In this experiment, Panax ginseng (Pa
nagginsengC. A. Meyer's crude saponin fraction, but crude saponin fractions of other ginseng (for example, 37 ginseng, ginseng, Himalayan ginseng, American ginseng, and ginseng) can also be used. It is expected that similar results will be obtained. Therefore, it is considered that any of the components contained in the crude saponin fraction of ginseng described above is useful for the prevention, treatment, and treatment of spinal cord injury, nerve injury, and head injury. Also, as is well known, nerve tissue is the tissue most vulnerable to trauma as compared to other peripheral tissues, so the fact that a pharmaceutical composition comprising a crude saponin fraction has a remarkable effect in the treatment and treatment of spinal cord injury It indicates that the low-dose, low-concentration crude saponin fraction is also effective for trauma to tissues other than central nervous tissue, that is, peripheral tissues.
【０１５７】また、脊髄損傷においては、グリア細胞の
うちでも特にオリゴデンドロサイトが傷害を受けてアポ
トーシスに陥った結果、脱髄現象が起こり神経症状が悪
化・進行すると報告されている（Ｃｒｏｗｅ，Ｍ．Ｊ．
ｅｔ ａｌ．，ＮａｔｕｒｅＭｅｄ．３，７３−７６，
１９９７；Ｅｍｅｒｙ，Ｅ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｎｅｕ
ｒｏｓｕｒｇ．８９，９１１−９２０，１９９８）。低
用量の粗サポニン分画の静脈内持続投与が顕著に脊髄損
傷ラットの両下肢麻痺を改善するという実験結果は、粗
サポニン分画に含有される精製サポニンのいずれかがオ
リゴデンドロサイトのアポトーシスもしくはアポトーシ
ス様神経細胞死を抑止することにより、脊髄損傷の症状
を改善することを物語っている。従って、本発明の粗サ
ポニン分画に含有される精製サポニンのいずれかがオリ
ゴデンドロサイトを保護することにより、脱髄をきたす
脳神経疾患（多発性硬化症、ビンスワンガー病、脳の慢
性低灌流障害、白質脳炎等）の予防・治療・処置にも有
効であると考えられる。さらに、粗サポニン分画の静脈
内投与が脊髄損傷ラットの両下肢麻痺（対麻痺）を改善
するという実験結果は、損傷を受けた神経線維もしくは
神経組織が粗サポニン分画投与により再生することも示
している。In spinal cord injury, it has been reported that, among glial cells, oligodendrocytes, in particular, are injured and apoptosis occurs, resulting in demyelination, resulting in deterioration and progression of neurological symptoms (Crowe, M. .
et al. , NatureMed. 3,73-76,
1997; Emery, E .; et al. , J. et al. Neu
rosurg. 89, 911-920, 1998). Experimental results show that continuous intravenous administration of a low-dose crude saponin fraction significantly improves bilateral lower limb paralysis in spinal cord-injured rats, suggesting that either of the purified saponins contained in the crude saponin fraction could induce oligodendrocyte apoptosis or It has been shown to improve the symptoms of spinal cord injury by inhibiting apoptotic neuronal death. Therefore, any of the purified saponins contained in the crude saponin fraction of the present invention protects oligodendrocytes, thereby causing demyelination in cranial nerve diseases (multiple sclerosis, Binswanger's disease, chronic hypoperfusion injury of the brain, It is also considered to be effective for prevention, treatment and treatment of leukoencephalitis. Furthermore, the experimental results that intravenous administration of crude saponin fraction improves paraplegia (paraplegia) in spinal cord injured rats show that damaged nerve fibers or nerve tissue can be regenerated by administration of crude saponin fraction. Is shown.
【０１５８】また、脊髄損傷を起こした神経組織では、
しばしば当該脊髄組織に浮腫が生じ神経症状（上肢又は
下肢の対麻痺、性機能障害、排尿・排便困難等）を悪化
せしむると言われているが、低用量の粗サポニン分画の
静脈内持続投与が優れた脊髄損傷治療効果を示すという
本実験結果は、粗サポニン分画もしくは粗サポニン分画
に含有される成分のいずれかが脊髄組織の浮腫の予防・
治療・処置に有用であることを物語っている。In the nerve tissue that has caused spinal cord injury,
It is often said that edema occurs in the spinal cord tissue and exacerbates neurological symptoms (paraplegia of the upper or lower limbs, sexual dysfunction, difficulty urinating / defecating, etc.). This experimental result, which shows that continuous administration shows an excellent therapeutic effect on spinal cord injury, indicates that either the crude saponin fraction or the components contained in the crude saponin fraction prevent or prevent edema of spinal cord tissue.
It is useful for medical treatment and treatment.
【０１５９】以上の結果から、低用量の粗サポニン分画
又はその塩を含有している静脈内投与用製剤が脊髄損傷
による神経組織の二次変性を抑止することが発明され
た。さらに、粗サポニン分画からなる医薬組成物は脊髄
損傷・神経外傷・頭部外傷の画期的治療薬となるのみな
らず、末梢組織の外傷にも効果・効能を示すことが期待
される。このように粗サポニン分画の脊髄損傷・神経外
傷治療効果は画期的なものであるので、粗サポニン分画
に含有される成分もしくはそれらの代謝産物をリード化
合物として新規脊髄損傷・神経外傷治療薬を合成できる
のみならず、粗サポニン分画に含有される成分もしくは
それらの代謝産物の標的分子を同定することにより、標
的分子の機能を修飾する新規化合物をも合成して脊髄損
傷・神経外傷・外傷治療薬の開発を目指すことができ
る。From the above results, it was invented that a preparation for intravenous administration containing a low-dose crude saponin fraction or a salt thereof inhibits secondary degeneration of nerve tissue due to spinal cord injury. Furthermore, a pharmaceutical composition comprising a crude saponin fraction is expected to be not only an epoch-making therapeutic agent for spinal cord injury, nerve trauma and head trauma, but also to be effective and effective for peripheral tissue trauma. As described above, the therapeutic effect of crude saponin fraction on spinal cord injury and nerve trauma is epoch-making, so that components contained in crude saponin fraction or metabolites thereof are used as lead compounds to treat novel spinal cord injury and neurotrauma. In addition to being able to synthesize drugs, by identifying the components contained in the crude saponin fraction or the target molecules of their metabolites, it is also possible to synthesize new compounds that modify the function of the target molecules, resulting in spinal cord injury and neurotrauma・ We can aim at development of trauma treatment.
【０１６０】さて、前述の脊髄損傷ラットを用いた実験
結果において、薬用人蔘の粗サポニン分画（８７０μｇ
／日）の静脈内持続投与が、ジンセノサイドＲｂ１（６
０μｇ／日）の静脈内持続投与と同様の効果を示したと
いうことは、ジンセノサイドＲｂ１よりおよそ１４．５
倍程度多い粗サポニン分画を持続投与すれば、患部組織
の細胞外液において有効な粗サポニン分画の濃度が維持
できることを示している。ちなみに本発明者ら（阪中、
田中）は、ジンセノサイドＲｂ１が患部組織における細
胞外液濃度が１ｎｇ／ｍｌ以下、好ましくは１０ｐｇ／
ｍｌ以下、より好ましくは１００ｆｇ／ｍｌ以下となる
濃度で効果・効能を発揮することを特願平１０−３６５
５６０、ＰＣＴ／ＪＰ９９／０２５５０（ジンセノサイ
ドＲｂ１からなる脳細胞又は神経細胞保護剤）ならびに
後述の実施例１５、１６において明らかにしている。従
って、本発明の低用量の粗サポニン分画に関しては、患
部組織における細胞外液濃度が、１４．５ｎｇ／ｍｌ以
下、好ましくは１４５ｐｇ／ｍｌ以下、より好ましくは
１４５０ｆｇ／ｍｌ以下となるように製剤を調整するこ
とが好ましい。また、ジンセノサイドＲｂ１は患部組織
の細胞外液濃度が１〜１００ｆｇ／ｍｌ程度でも充分な
効果が得られるので（特願平１０−３６５５６０、ＰＣ
Ｔ／ＪＰ９９／０２５５０、ジンセノサイドＲｂ１から
なる脳細胞又は神経細胞保護剤）本発明の粗サポニン分
画からなる医薬組成物や製剤は、患部組織の細胞外液濃
度が１４．５〜１４５０ｆｇ／ｍｌ程度でも充分な効果
が得られる。In the above experimental results using the spinal cord injured rat, the crude saponin fraction of ginseng (870 μg
/ Day) given ginsenoside Rb1 (6
That showed continuous intravenous administration the same effect as the 0 Pg / day), approximately from ginsenoside Rb1 14.5
This indicates that the continuous administration of about twice the amount of the crude saponin fraction can maintain an effective concentration of the crude saponin fraction in the extracellular fluid of the affected tissue. By the way, the present inventors (Sakanaka,
Tanaka) is ginsenoside Rb1 is extracellular fluid concentrations of diseased tissue 1 ng / ml or less, preferably 10 pg /
Japanese Patent Application No. 10-365 discloses that an effect is exhibited at a concentration of not more than 100 ml / ml, more preferably not more than 100 fg / ml.
560, PCT / JP99 / 02550 (comprising ginsenoside Rb1 Brain cell or nerve cell-protective agents) as well as revealed in Examples 15 and 16 below. Therefore, the low-dose crude saponin fraction of the present invention is formulated so that the extracellular fluid concentration in the affected tissue is 14.5 ng / ml or less, preferably 145 pg / ml or less, more preferably 1450 fg / ml or less. Is preferably adjusted. In addition, ginsenoside Rb1 has a sufficient effect even when the extracellular solution concentration of the affected tissue is about1 to 100 fg / ml (Japanese Patent Application No. 10-365560, PC
T / JP99 / 02550, the pharmaceutical composition or formulation comprising a crude saponin fraction of ginsenoside Rb1 Brain cell or nerve cell-protective agents comprising) the present invention, the extracellular fluid concentrations of the affected tissue 14.5~1450fg / ml Sufficient effects can be obtained even with this degree.
【０１６１】ところで、ジンセノサイドＲｂ１（６０μ
ｇ／日）の静脈内持続投与は、特願平１０−３６５５６
０、ＰＣＴ／ＪＰ９９／０２５５０（ジンセノサイドＲ
ｂ１からなる脳細胞又は神経細胞保護剤）において本発
明者ら（阪中、田中）により明らかにされたごとく、優
れた脳卒中・脳梗塞治療効果を発揮することが判明して
いる。また、前述の実験結果から、粗サポニン分画（８
７０μｇ／日）の静脈内持続投与が、ジンセノサイドＲ
ｂ１（６０μｇ／日）の静脈内持続投与と同様に、優れ
た脊髄損傷治療効果を示すことも明らかになった。これ
らのことから考えると、粗サポニン分画（８７０μｇ／
日）の静脈内持続投与は、ジンセノサイドＲｂ１（６０
μｇ／日）の静脈内持続投与と同様に、優れた脳卒中・
脳梗塞治療効果を発揮することが容易に推測できる。さ
らに、ジンセノサイドＲｂ１ ６μｇ／日の静脈内持続
投与も優れた脳梗塞・脳卒中治療効果を示すことより、
粗サポニン分画８７μｇ／日の静脈内持続投与も優れた
脳梗塞・脳卒中治療効果を発揮すると考えられる。すな
わち、薬用人蔘の粗サポニン分画は体重約３００ｇのラ
ットにおいて、１日あたり８７μｇから８７０μｇの静
脈内持続投与により、優れた脳細胞又は神経細胞保護作
用を示すと言える。従って１日あたり２．９ｍｇ／ｋｇ
から０．２９ｍｇ／ｋｇの粗サポニン分画を静脈内へ持
続投与することにより、優れた脳細胞保護効果もしくは
神経細胞保護効果が得られることになる。しかし、これ
はあくまでも体重３００ｇ程度のラットに対する粗サポ
ニン分画投与量の目安であって、粗サポニン分画をヒト
に静脈内投与するときは、体重１ｋｇあたりの投与量
を、前述の量の２分の１から２０分の１程度にする必要
があると考えられる。すなわち、ヒトに粗サポニン分画
を静脈内持続投与するときは、患者の病状や個人差にも
よるが１日あたり１４５０μｇ／ｋｇ以下、１４．５μ
ｇ／ｋｇ以上に設定することが好ましい。By the way, ginsenoside Rb1 (60 μm
g / day) is disclosed in Japanese Patent Application No. 10-36556.
0, PCT / JP99 / 02550 (Ginsenoside R
In Brain cell or nerve cell-protective agents) consisting b1 present inventors (Sakanaka, as revealed by Tanaka) have been found to exhibit excellent stroke, cerebral infarction therapeutic effect. Also, from the above experimental results, the crude saponin fraction (8
70 μg / day) was given by ginsenoside R
As in the case of continuous intravenous administration of b1 (60 μg / day), it was also revealed that the compound exhibits an excellent spinal cord injury treatment effect. Considering these facts, the crude saponin fraction (870 μg /
Intravenous continuous administration of ginsenoside Rb1 (60
μg / day), as well as continuous stroke
It can be easily inferred that the cerebral infarction therapeutic effect is exhibited. Furthermore, from the exhibit ginsenoside Rb1 6 [mu] g / day continuous intravenous administration also excellent cerebral infarction, stroke therapeutic effect,
It is considered that the intravenous continuous administration of the crude saponin fraction of 87 μg / day also exerts an excellent therapeutic effect on cerebral infarction and stroke. In other words, it can be said that the crude saponin fraction of ginseng shows an excellent brain cell or neuronal cell protective effect in rats weighing about 300 g by continuous intravenous administration of 87 μg to 870 μg per day. Therefore, 2.9 mg / kg per day
By intravenously continuously administering the crude saponin fraction of 0.29 mg / kg to 0.25, an excellent brain cell protection effect or neuronal cell protection effect can be obtained. However, this is only a guideline for the dose of crude saponin fraction for rats weighing about 300 g. When the crude saponin fraction is intravenously administered to humans, the dose per kg of body weight should be 2% of the aforementioned amount. It is thought that it is necessary to make it about 1/20 to about 1/20. That is, when a crude saponin fraction is continuously administered intravenously to a human, 1450 μg / kg or less, 14.5 μg / day or less, depending on the condition of the patient and individual differences.
It is preferably set to g / kg or more.
【０１６２】また、後述の実施例１４で示すごとく、ジ
ンセノサイドＲｂ１（６０μｇ／日）の静脈内持続投与
により、脳神経組織のＢｃｌ−ｘＬ遺伝子発現が上昇す
るので、粗サポニン分画（８７０μｇ／日）の静脈内持
続投与でもＢｃｌ−ｘＬ遺伝子発現が上昇すると考えら
れる。すなわち、粗サポニン分画は、患部組織における
細胞外液濃度が、１４．５ｎｇ／ｍｌ以下、好ましくは
１４５ｐｇ／ｍｌ以下、より好ましくは１４５０ｆｇ／
ｍｌ以下の濃度で、神経細胞のＢｃｌ−ｘＬ遺伝子の発
現を促進すると考えられる。[0162] Further, as shown in Example 14 described later, by continuous intravenous administration of ginsenosideRb 1 (60 [mu] g / day), becauseBcl-x L gene expression cranial nerve tissue is increased, the crude saponin fraction (870μg / in continuous intravenous administration of day) is considered to Bcl-xL gene expression is increased. That is, the crude saponin fraction has an extracellular fluid concentration of 14.5 ng / ml or less, preferably 145 pg / ml or less, more preferably 1450 fg / ml in the affected tissue.
ml at a concentration believed to promote the expression ofBcl-x L gene of neurons.
【０１６３】さらに、低用量の粗サポニン分画の静脈内
持続投与が、脊髄損傷・脳梗塞・脳卒中の予防、治療、
処置に有用であるということは、粗サポニン分画に含有
される成分のいずれかが前述の脳・神経疾患に対して優
れた効果・効能を示すことを明らかにしている。もちろ
ん、粗サポニン分画の複数の成分が前述の脳・神経疾患
に対して優れた効果・効能を示すことも考えられる。さ
て、粗サポニン分画の中に含有される代表的な成分であ
る精製サポニン類としてはジンセノサイドＲｏ、ジンセ
ノサイドＲｂ１、ジンセノサイドＲｂ２、ジンセノサイ
ドＲｃ、ジンセノサイドＲｄ、ジンセノサイドＲｅ、ジ
ンセノサイドＲｆ、ジンセノサイドＲｇ１、ジンセノサ
イドＲｇ２、ジンセノサイドＲｇ３、ジンセノサイドＲ
ｈ１、ジンセノサイドＲｈ２等であるが、このうちジン
セノサイドＲｂ１の含量が他の精製サポニンの２倍量以
上存在することが知られている。ジンセノサイドＲｂ１
は、患部における細胞外液濃度が１ｎｇ／ｍｌ以下、好
ましくは１０ｐｇ／ｍｌ以下、より好ましくは１００ｆ
ｇ／ｍｌ以下のときに神経細胞もしくは脳細胞保護作用
を示すことを考えると、その他の精製サポニンもこれと
同等ないし、それよりも１０分の１程度低い濃度域で脳
細胞又は神経細胞を保護するものと考えられる。ただ
し、粗サポニン分画に含まれる成分は、前述の精製サポ
ニン類に限定されるものではない。Further, continuous intravenous administration of a low-dose crude saponin fraction is effective in preventing and treating spinal cord injury, cerebral infarction and stroke.
The fact that it is useful for treatment has revealed that any of the components contained in the crude saponin fraction shows an excellent effect / efficacy against the aforementioned brain / neurological diseases. Of course, it is also conceivable that a plurality of components of the crude saponin fraction show excellent effects and efficacies against the aforementioned brain and neurological diseases. Now, purified saponins which are typical components contained in the crude saponin fraction include ginsenoside Ro, ginsenoside Rb1 , ginsenoside Rb2 , ginsenoside Rc, ginsenoside Rd, ginsenoside Re, ginsenoside Rf, ginsenoside Rg1 , Ginsenoside Rg2 , Ginsenoside Rg3 , Ginsenoside R
h1 and ginsenoside Rh2 , among which it is known that the content of ginsenoside Rb1 is at least twice as large as that of other purified saponins. Ginsenoside Rb1
Means that the extracellular fluid concentration in the affected area is 1 ng / ml or less, preferably 10 pg / ml or less, more preferably 100 fg / ml or less.
Considering that neurons or brain cells have a protective effect when the concentration is less than g / ml, other purified saponins are equivalent to this or protect brain cells or neurons in a concentration range about one tenth lower than that. It is thought to be. However, the components contained in the crude saponin fraction are not limited to the aforementioned purified saponins.
【０１６４】以上のことより、薬用人蔘の粗サポニン分
画もしくは粗サポニン分画構成成分のいずれかがジンセ
ノサイドＲｂ１と同様に優れた脳細胞・神経細胞保護作
用ならびに脊髄損傷、頭部外傷、神経外傷治療効果を示
すことが明らかにされた。従って、本発明の低濃度・低
用量の粗サポニン分画、もしくは粗サポニン分画構成成
分のいずれかが、特願平１０−３６５５６０、ＰＣＴ／
ＪＰ９９／０２５５０、ジンセノサイドＲｂ１からなる
脳細胞又は神経細胞保護剤）ならびに特願平１１−２４
３３７８、ＰＣＴ／ＪＰ９９／０６８０４（ジンセノサ
イドＲｂ１からなる脳血管再生・再構築促進剤ならびに
神経組織二次変性抑止剤）において本発明者らが記載し
たジンセノサイドＲｂ１の効果・効能・用途を、すべて
兼ね備えていると考えられる。すなわち、低濃度・低用
量の粗サポニン分画もしくは粗サポニン分画構成成分の
いずれかは、ジンセノサイドＲｂ１と同様に細胞死抑制
遺伝子産物Ｂｃｌ−ｘＬの発現を上昇せしめるかもしく
はその他のＢｃｌ−ｘＬ蛋白群の発現を調節することに
より、神経細胞のアポトーシスもしくはアポトーシス様
神経細胞死を抑止するものと考えられる。さらに、低濃
度・低用量の粗サポニン分画もしくは粗サポニン分画構
成成分のいずれかは、ジンセノサイドＲｂ１と同様に、
神経細胞死を伴うあらゆる脳神経疾病（アルツハイマー
病、脳卒中、脳梗塞、脳血栓、脳塞栓、クモ膜下出血、
一過性脳虚血発作、ピック病、脊髄小脳変性症、パーキ
ンソン病、脱随疾患、舞踏病を始めとするポリグルタミ
ン病、筋萎縮性側索硬化症、緑内障、老人性黄斑変性
症、糖尿病性網膜症、網膜中心動静脈閉塞症、網膜剥
離、網膜色素変性症、エイズ脳症、肝性脳症、脳炎、脳
性マヒ、頭部外傷、脊髄損傷、一酸化炭素中毒、新生児
仮死、末梢神経障害、痙性対麻痺、進行性核上性麻痺、
脊髄血管障害、シャイドレージャー病、スフィンゴリピ
ドーシス、ミトコンドリア脳筋症、髄膜炎等）に効果・
効能を示すとされる。[0164] than that from either the ginsenoside Rb1 and likewise superior brain cell-nerve cell protective action and spinal cord injury of the crude saponin fraction or the crude saponin fraction constituents of ginseng, head trauma, It was revealed that it shows a neurotrauma treatment effect. Therefore, any of the low-concentration and low-dose crude saponin fractions or the components of the crude saponin fraction of the present invention can be obtained by the method described in Japanese Patent Application No. 10-365560, PCT /
JP99 / 02550, Brain cell or nerve cell-protective agents comprising ginsenoside Rb1) and Japanese Patent Application No. 11-24
3378, PCT / JP99 / 06804 (a cerebral blood vessel regeneration / remodeling promoter comprising ginsenoside Rb1 and an inhibitor of secondary degeneration of nerve tissue), all of the effects, indications and uses of ginsenoside Rb1 described by the present inventors. It is thought to have both. That is, either crude saponin fraction or the crude saponin fraction constituents of low concentrations and low doses of ginsenoside Rb1 in the same manner as in cell death suppressing gene product Bcl-xL expressed allowed to whether or other elevated Bcl- by modulating the expression of xL protein groups, presumably to prevent apoptosis or apoptosis-like nerve cell death of neurons. Further, any of the crude saponin fraction or the crude saponin fraction constituents of low concentrations and low doses, in the same manner as ginsenoside Rb1,
Any cranial nerve disease with neuronal death (Alzheimer's disease, stroke, cerebral infarction, cerebral thrombosis, cerebral embolism, subarachnoid hemorrhage,
Transient cerebral ischemic attack, Pick's disease, spinocerebellar degeneration, Parkinson's disease, paralytic disease, polyglutamine disease including chorea, amyotrophic lateral sclerosis, glaucoma, senile macular degeneration, diabetes Retinopathy, central retinal arteriovenous obstruction, retinal detachment, retinitis pigmentosa, AIDS encephalopathy, hepatic encephalopathy, encephalitis, cerebral palsy, head trauma, spinal cord injury, carbon monoxide poisoning, neonatal asphyxia, peripheral neuropathy, Spastic paraplegia, progressive supranuclear palsy,
Effects on spinal vascular disorders, Shyde-Rajer disease, sphingolipidosis, mitochondrial encephalomyopathy, meningitis, etc.)
It is said to show efficacy.
【０１６５】さて、細胞死抑制遺伝子産物Ｂｃｌ−ｘＬ
は細胞を生かすための最後の砦とも言うべき蛋白質であ
り、脳神経組織のみならず肝臓、脾臓、免疫系組織、循
環系組織、皮膚を始めとする多くの末梢臓器・組織に分
布して、細胞の生存を支持している。従って、低濃度・
低用量の粗サポニン分画もしくは粗サポニン分画構成成
分のいずれかがジンセノサイドＲｂ１と同様に、Ｂｃｌ
−ｘＬの発現を上昇せしめるという前記の推測に基づけ
ば、低濃度・低用量の粗サポニン分画もしくは粗サポニ
ン分画構成成分のいずれかが細胞死を伴うあらゆる末梢
臓器・組織の疾病の治療・予防・処置に有効であること
を物語っている。このような細胞死を伴う末梢臓器・組
織の疾病の中には、心筋・肝臓・腎臓の虚血再灌流障
害、心筋症、心不全、心筋梗塞、狭心症、末梢循環不
全、褥創、創傷、皮膚潰瘍、皮膚の創傷、外傷、熱傷、
放射線障害、アトピー性皮膚炎、老化、紫外線障害、電
撃症、脱毛症、乾皮症、花粉症、皮脂欠乏症、自己免疫
病、免疫不全病、臓器移植後の拒絶反応、筋ジストロフ
ィー、角膜損傷、感染症、膠原病、大動脈炎症候群、急
性動脈閉塞症、閉塞性血栓血管炎、消化性潰瘍、閉塞性
動脈硬化症、レイノー病、レイノー症候群、痔疾、血栓
性静脈炎、膵炎、肝炎、腎炎、糖尿病性腎症、糖尿病性
心筋症、舌痛症等が含まれる。その他の細胞死を伴う疾
患や病態として、成書（今日の治療指針；監修、日野原
重明、阿部正和；医学書院；１９９５）に記載されたす
べての器質的疾患や病態が考えられる。また、本発明の
低濃度・低用量の粗サポニン分画もしくは粗サポニン分
画構成成分のいずれかは、加齢に伴う免疫機能低下、皮
膚機能低下、循環機能低下、消化機能低下、性機能減退
の諸症状を改善する目的で、健康薬としても使用可能で
ある。さらに、低濃度・低用量の粗サポニン分画もしく
は粗サポニン分画構成成分のいずれかを化粧品の組成物
として利用することにより、加齢に伴う皮膚の老化症状
（皮膚の萎縮、白髪、ふけ、皮脂欠乏、角層剥離、角質
細胞剥離、脱毛、亀裂、たるみ、かゆみ、かさつき、ひ
びわれ、そばかす、色素沈着、日焼け、乾燥、しわ、し
み等）の予防・治療・処置にも利用できる。さらに、農
作物育成、魚介類の養殖、甲殻類の養殖、ペットの疾病
治療、ケミカルピーリング、生花の保存、水栽培、開花
時期の延長にも利用できる。[0165] Now, cell death-suppressing gene productBcl-x L
Is a protein that can be said to be the last fort to make use of cells.It is distributed not only in brain nerve tissue but also in many peripheral organs and tissues including liver, spleen, immune system, circulatory system, skin, etc. Support their survival. Therefore, low concentration
Like any of the crude saponin fraction or the crude saponin fraction constituents of the low dose and ginsenoside Rb1, Bcl
Based on estimation of the called allowed to increase the expression of -xL, treating one of the crude saponin fraction or the crude saponin fraction constituents of low concentrations and low doses of all peripheral organs and tissues of diseases involving cell death・ It shows that it is effective for prevention and treatment. Among diseases of peripheral organs and tissues accompanying such cell death, ischemia / reperfusion injury of myocardium, liver and kidney, cardiomyopathy, heart failure, myocardial infarction, angina, peripheral circulatory insufficiency, pressure sores, wounds , Skin ulcers, skin wounds, trauma, burns,
Radiation injury, atopic dermatitis, aging, ultraviolet damage, lightning, alopecia, xeroderma, hay fever, sebum deficiency, autoimmune disease, immunodeficiency disease, rejection after organ transplantation, muscular dystrophy, corneal injury, infection Disease, collagen disease, aortitis syndrome, acute arterial occlusion, obstructive thromboangitis, peptic ulcer, obstructive arteriosclerosis, Raynaud's disease, Raynaud's syndrome, hemorrhoids, thrombophlebitis, pancreatitis, hepatitis, nephritis, diabetes Sexual nephropathy, diabetic cardiomyopathy, glossodynia and the like. As other diseases and conditions accompanied by cell death, all the organic diseases and conditions described in the compendium (today's treatment guideline; supervision, Hinohara Shigeaki, Abe Masakazu; Medical Shoin; 1995) can be considered. Further, the low-concentration / low-dose crude saponin fraction or any of the crude saponin fraction constituents of the present invention may have decreased immunity with age, decreased skin function, decreased circulatory function, decreased digestive function, decreased sexual function. It can also be used as a health drug for the purpose of improving various symptoms. Furthermore, by using either a low-concentration / low-dose crude saponin fraction or any of the crude saponin fraction components as a cosmetic composition, aging symptoms of the skin with aging (skin atrophy, gray hair, dandruff, It can also be used for the prevention, treatment, and treatment of sebum deficiency, stratum corneum detachment, keratinocyte detachment, hair loss, cracks, sagging, itching, dryness, cracks, freckles, pigmentation, tanning, drying, wrinkles, spots, etc.). Furthermore, it can also be used for growing crops, cultivating fish and shellfish, cultivating crustaceans, treating pet diseases, chemical peeling, preserving fresh flowers, hydroponics, and extending flowering time.
【０１６６】特願平１１−２４３３７８、ＰＣＴ／ＪＰ
９９／０６８０４（ジンセノサイドＲｂ１からなる脳血
管再生・再構築促進剤ならびに神経組織二次変性抑止
剤）において、本発明者ら（阪中、田中）はジンセノサ
イドＲｂ１の少量静脈内持続投与が、脳血管再生・再構
築促進作用、神経組織二次変性抑止作用、オリゴデンド
ロサイトのアポトーシス又はアポトーシス様細胞死の抑
止作用等を介して、寝たきりの脊髄損傷ラットを起立せ
しめることを見出した。低濃度・低用量の粗サポニン分
画もしくは粗サポニン分画構成成分のいずれかがジンセ
ノサイドＲｂ１と同様に優れた脊髄損傷治療効果を示す
という本実験結果は、低濃度・低用量の粗サポニン分画
もしくは粗サポニン分画構成成分のいずれかが脊髄損傷
・頭部外傷・神経外傷の治療薬となり得ることを物語っ
ている。すなわち、特願平１１−２４３３７８、ＰＣＴ
／ＪＰ９９／０６８０４（ジンセノサイドＲｂ１からな
る脳血管再生・再構築促進剤ならびに神経組織二次変性
抑止剤）もしくは特願２０００−１６３０２６号（ジン
セノサイドＲｂ１からなる皮膚組織再生促進剤）におい
て、本発明者ら（阪中、田中）が記載したジンセノサイ
ドＲｂ１の効果・効能・用途は、低濃度・低用量の粗サ
ポニン分画もしくは粗サポニン分画構成成分のいずれか
にも当てはまると言える。もちろん、本発明の粗サポニ
ン分画もしくは粗サポニン分画構成成分の投与方法とし
ては、ジンセノサイドＲｂ１と同様に患部組織における
細胞外液濃度が既述のごとく低濃度に維持できるのであ
れば任意の投与経路が選択できる。具体的には、低濃度
・低用量の粗サポニン分画もしくは粗サポニン分画構成
成分のいずれかは静脈内投与剤としてのみならず外用剤
や病変部局所注射剤としても使用可能である。さらに、
粗サポニン分画もしくは粗サポニン分画構成成分のいず
れかの投与法として、皮下注射、筋肉注射、点眼、点
鼻、点耳、吸入、挿肛投与、経口投与、舌下投与、経皮
投与等任意の経路が選択できる。ただし、粗サポニン分
画もしくは粗サポニン分画構成成分のいずれかを経口投
与剤として使用する時は、粗サポニン分画もしくは粗サ
ポニン分画構成成分のいずれか単独に投与したのでは効
果があまり期待できない場合があるので、消化管での分
解を阻止する担体あるいは消化管での吸収を促進する担
体に粗サポニン分画もしくは粗サポニン分画構成成分の
いずれかを混入・封入又は結合させたのちに、経口投与
することが必要になるかもしれない。また、粗サポニン
分画もしくは粗サポニン分画構成成分のいずれかの代謝
産物のうち、粗サポニン分画もしくは粗サポニン分画構
成成分のいずれかと同等もしくはそれ以上の効果・効能
を有するものが同定されれば、低濃度・低用量の粗サポ
ニン分画もしくは粗サポニン分画構成成分のいずれかの
適応が期待される前述の疾病に対して、その活性代謝産
物を既述の方法で投与することもできる。また本発明の
低濃度・低用量の粗サポニン分画もしくは粗サポニン分
画構成成分のいずれかと高分子化合物との分散体を作成
した後、噴霧乾燥させて任意の投与経路を選択すること
も可能である。さらに、高分子化合物のミクロ粒子に粗
サポニン分画もしくは粗サポニン分画構成成分のいずれ
かをコーティングしたのちに、任意の投与経路を選択し
てもよい。もちろん、粗サポニン分画構成成分のいずれ
かを用いてプロドラッグを作成したのちに、任意の投与
経路を選択してもよい。Japanese Patent Application No. 11-243378, PCT / JP
In 99/06804 (a cerebral blood vessel regeneration / reconstruction promoting agent comprising ginsenoside Rb1 and an inhibitor of secondary degeneration of nerve tissue), the present inventors (Sakanaka, Tanaka) reported that a small amount of ginsenoside Rb1 was continuously administered intravenously. It has been found that a bedridden spinal cord-injured rat can be erected through a cerebral blood vessel regeneration / remodeling promoting action, an inhibitory action on secondary degeneration of neural tissue, an inhibitory action on oligodendrocyte apoptosis or apoptotic cell death. This experimental result is that any of the crude saponin fraction or the crude saponin fraction constituents of low concentrations and low doses exhibit similarly superior spinal cord injury therapeutic effect as ginsenoside Rb1, low concentrations and low doses crude saponin fraction of It demonstrates that either the fraction or the crude saponin fraction can be a therapeutic agent for spinal cord injury, head trauma, and neurotrauma. That is, Japanese Patent Application No. 11-243378, PCT
/ JP99 / 06804 (a cerebral blood vessel regeneration / reconstruction promoting agent comprising ginsenoside Rb1 and an inhibitor of secondary degeneration of nerve tissue) or Japanese Patent Application No. 2000-163026 (a skin tissue regeneration promoting agent comprising ginsenoside Rb1 ) Shah et al. (Sakanaka, Tanaka) effects, efficacy and usages of ginsenoside Rb1 described is can be said to also apply to any of the crude saponin fraction or the crude saponin fraction constituents of low concentrations and low doses. Of course, the method of administration crude saponin fraction or the crude saponin fraction constituents of the present invention, the extracellular fluid concentrations of diseased tissue in the same manner as ginsenoside Rb1 any as long as it can maintain a low concentration as described above The administration route can be selected. Specifically, either the crude saponin fraction or the component of the crude saponin fraction having a low concentration and a low dose can be used not only as an intravenous agent but also as an external preparation or a local injection for a lesion. further,
Subcutaneous injection, intramuscular injection, eye drops, nasal drops, ear drops, inhalation, anal injection, oral administration, sublingual administration, transdermal administration, etc., as either the crude saponin fraction or the crude saponin fraction component administration method Any route can be selected. However, when either the crude saponin fraction or the crude saponin fraction component is used as an oral administration agent, it is expected to be less effective if the crude saponin fraction or the crude saponin fraction component alone is administered alone. After mixing, encapsulating or binding either the crude saponin fraction or the crude saponin fraction component to a carrier that inhibits degradation in the digestive tract or a carrier that promotes absorption in the digestive tract, May need to be administered orally. Further, among the metabolites of either the crude saponin fraction or the crude saponin fraction component, those having an effect or efficacy equivalent to or higher than any of the crude saponin fraction or the crude saponin fraction component have been identified. If the above-mentioned disease is expected to be indicated by either a low-concentration / low-dose crude saponin fraction or a component of the crude saponin fraction, the active metabolite may be administered by the method described above. it can. In addition, after preparing a dispersion of the high-molecular compound with either the low-concentration / low-dose crude saponin fraction or the crude saponin fraction constituting component of the present invention, it is possible to select an arbitrary administration route by spray-drying. It is. Furthermore, after coating either the crude saponin fraction or the crude saponin fraction component on the microparticles of the polymer compound, an arbitrary administration route may be selected. Of course, an arbitrary route of administration may be selected after preparing a prodrug using any of the crude saponin fraction components.
【０１６７】また、皮膚移植用ケラチノサイト培養シー
トの保護・維持にも低濃度・低用量の粗サポニン分画も
しくは粗サポニン分画構成成分のいずれかが有効と思わ
れる。その他の移植用臓器・組織（肝臓、腎臓、心臓、
膵臓、肺、消化管、角膜、血管等）についても、移植手
術が実施されるまでの間に低濃度の粗サポニン分画もし
くは粗サポニン分画構成成分のいずれかで浸すか灌流す
ることにより、同臓器の細胞傷害や血管網の破綻が抑止
され移植手術の成績も向上するものと期待される。さら
に、低濃度・低用量の粗サポニン分画もしくは粗サポニ
ン分画構成成分のいずれかは輸血用血球成分・血小板の
保護・維持、凍結卵子、凍結精子あるいは幹細胞の保護
・維持にも有効と思われる。In addition, it is considered that either low-concentration, low-dose crude saponin fractions or crude saponin fraction components are effective in protecting and maintaining the keratinocyte culture sheet for skin transplantation. Other transplant organs / tissues (liver, kidney, heart,
Pancreas, lungs, gastrointestinal tract, cornea, blood vessels, etc.) by immersion or perfusion with either a low-concentration crude saponin fraction or a crude saponin fraction component until transplantation surgery is performed. It is expected that the cell injury of the same organ and the breakdown of the vascular network will be suppressed, and the results of transplant surgery will be improved. In addition, either low-concentration, low-dose crude saponin fraction or any component of the crude saponin fraction may be effective in protecting and maintaining blood transfusion components and platelets, as well as protecting and maintaining frozen eggs, frozen sperm or stem cells. It is.
【０１６８】脊髄損傷ラットを用いた本実験結果より、
ジンセノサイドＲｂ１もしくは低用量・低濃度の粗サポ
ニン分画からなる静脈内投与製剤の脊髄損傷治療効果は
歴史上最強のものと考えられる。おそらくジンセノサイ
ドＲｂ１もしくはその代謝産物又は粗サポニン分画構成
成分のいずれかが極めて強力な脊髄損傷治療作用を発揮
するものと思われるが、このことはジンセノサイドＲｂ
１もしくはその代謝産物又は粗サポニン分画構成成分の
いずれかが、脊髄損傷・神経外傷・頭部外傷のためのリ
ード化合物になることを支持している。また、ジンセノ
サイドＲｂ１もしくはその代謝産物又は粗サポニン分画
構成成分のいずれかをリード化合物として利用すること
により、新規の脊髄損傷治療薬が開発されれば、当該新
規化合物が脳梗塞や脳卒中に効果・効能を示すことが容
易に推定される。もちろん、ジンセノサイドＲｂ１もし
くはその代謝産物又は粗サポニン分画構成成分のいずれ
かをリード化合物として利用することにより、まず脳梗
塞・脳卒中治療用医薬組成物を新規に作成することも可
能である。その場合は、逆に当該新規脳梗塞・脳卒中治
療用化合物が、脊髄損傷・頭部外傷・神経外傷治療用医
薬組成物にもなると考えられる。さて、そのような新規
に作成されるジンセノサイドＲｂ１誘導体のうち、脊髄
損傷・神経外傷・頭部外傷治療用医薬組成物、脳細胞保
護剤もしくは神経細胞保護剤として実用化される可能性
がもっとも高いのが、下記構造式（ＩＩ）From the results of this experiment using spinal cord injured rats,
Spinal cord injury therapeutic effects of intravenous formulation consisting crude saponin fraction of ginsenoside Rb1 or low doses and low concentrations are considered to the history of the strongest. It is likely that ginsenoside Rb1 or any of its metabolites or the crude saponin fraction component exerts a very potent spinal cord injury healing action, which indicates that ginsenoside Rb 1
Either1 or its metabolites or the crude saponin fraction component supports being a lead compound for spinal cord injury, nerve trauma and head trauma. In addition, if a new therapeutic drug for spinal cord injury is developed by using ginsenoside Rb1 or a metabolite thereof or a crude saponin fraction component as a lead compound, the new compound will have an effect on cerebral infarction and stroke・ Efficacy is easily estimated. Of course, by utilizing any of ginsenoside Rb1 or metabolites or crude saponin fraction constituents thereof as a lead compound, it is also possible to first create a cerebral infarction, stroke a pharmaceutical composition for treating a new one. In that case, on the contrary, the novel compound for treating cerebral infarction / stroke is considered to be a pharmaceutical composition for treating spinal cord injury, head injury, and nerve injury. Now, among such novel ginsenoside Rb1 derivative to be created, spinal cord injuries, neurotrauma, head injuries pharmaceutical composition for the treatment, could be put to practical use as a brain cell protecting agent or neuroprotective agent is most High is due to the following structural formula (II)
【０１６９】[0169]
【化４】★３２Embedded image ★ 32
【０１７０】で示される化合物（ジヒドロジンセノサイ
ドＲｂ１、ｄｉｈｙｄｒｏ−ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ
Ｒｂ１）であり、本化合物は、本発明者らが所有してい
る高純度のジンセノサイドＲｂ１があれば、ジンセノサ
イドＲｂ１のダマラン骨格（ステロイド様骨格）に結合
した側鎖（カーボンチェーン）の二重結合を還元（すな
わち水素添加）することにより容易に作成することがで
きる。(Dihydroginsenoside Rb1 , dihydro-ginsenoside)
Rb1 ), and the present compound, if high-purity ginsenoside Rb1 owned by the present inventors, has a side chain (carbon chain) bonded to the damamaran skeleton (steroid-like skeleton) of ginsenoside Rb1 It can be easily prepared by reducing (ie, hydrogenating) a double bond.
【０１７１】また、図２０に示したような、ジンセノサ
イドＲｂ１の化学的誘導体もジンセノサイドＲｂ１と同
様に脳細胞保護作用もしくは神経細胞保護作用を有する
ものと期待される。図２０はジンセノサイドＲｂ１のダ
マラン骨格の修飾の例を示す。左上の（１）はアセチル
化誘導体の例であり、（２）は側鎖の二重結合をジヒド
ロ化した誘導体の例であり、（３）は側鎖の二重結合を
切断して末端をアルデヒド基にした誘導体の例であり、
（４）は側鎖の二重結合の先を延長したりカルボキシル
基誘導体にした例であり、（５）は側鎖の二重結合を切
断してカルボキシル基誘導体にした例である。右側の
（６）は前記カルボキシル基誘導体の糖鎖部分を他の誘
導体にした例であり、（７）及び（８）も他の糖鎖を有
する誘導体の例である。図２０に示したジンセノサイド
Ｒｂ１の化学的誘導体は、原則としてダマラン骨格（ス
テロイド様骨格）に結合した側鎖（カーボンチェーン）
に任意の修飾を加えたものである。このカーボンチェー
ンは、粗サポニン分画に含まれる３０種類前後の精製サ
ポニンの大半に共通して存在するので（図１５）、も
し、粗サポニン分画に含まれるジンセノサイドＲｂ１以
外の脊髄損傷・神経外傷・頭部外傷治療用成分もしくは
神経細胞保護用成分が同定されれば、当該成分もしくは
精製サポニンのカーボンチェーンもジンセノサイドＲｂ
１と同様に還元（水素添加）するか図２０に示した要領
で修飾することにより、新規脳神経細胞保護用化合物の
探索に利用することができる。ただし、リード化合物と
して利用できる粗サポニン分画の成分は前述の精製サポ
ニンに限定されるものではない。また、粗サポニン分画
構成成分をリード化合物として作成できる新規化合物
は、前述のダマラン骨格（ステロイド様骨格）側鎖を任
意に化学修飾したものに限定されるものではない。以上
の結果から、粗サポニン分画又はその塩を含有してなる
静脈内投与用製剤が脊髄損傷による神経組織の二次変性
を抑止することが発明された。さらに、粗サポニン分画
からなる医薬組成物は脊髄損傷・神経外傷・頭部外傷の
画期的治療薬となるのみならず、末梢組織の外傷にも効
果・効能を示すことが期待される。このように粗サポニ
ン分画の脊髄損傷・神経外傷治療効果は画期的なもので
あるので、粗サポニン分画に含有される成分や精製サポ
ニン（ジンセノサイド類）もしくはそれらの代謝産物を
リード化合物として新規脊髄損傷・神経外傷治療薬を合
成できるのみならず、粗サポニン分画に含有される成分
や精製サポニンもしくはそれらの代謝産物の標的分子を
同定することにより、標的分子の機能を修飾する新規化
合物をも合成して脊髄損傷・神経外傷・外傷治療薬の開
発を目指すことができる。[0171] Further, as shown in FIG. 20, the chemical derivative of ginsenoside Rb1 it is also expected to have a cerebral cytoprotective or neuroprotective effects in the same manner as ginsenoside Rb1. Figure 20 shows an example of a modification of the dammarane skeleton of ginsenoside Rb1. (1) at the upper left is an example of an acetylated derivative, (2) is an example of a derivative obtained by dihydrogenating a double bond in a side chain, and (3) is a fragment obtained by cleaving a double bond in a side chain to terminate the terminal. Examples of aldehyde-based derivatives,
(4) is an example in which the end of the double bond in the side chain is extended or a carboxyl group derivative is obtained, and (5) is an example in which the double bond in the side chain is cleaved to obtain a carboxyl group derivative. (6) on the right side is an example in which the sugar chain portion of the carboxyl group derivative is replaced with another derivative, and (7) and (8) are also examples of a derivative having another sugar chain. Chemical derivatives of ginsenoside Rb1 shown in FIG. 20, the side chains attached to the dammarane skeleton (steroidal skeleton) principle (carbon chain)
With arbitrary modifications. This carbon chain is present in common to the majority of the 30 different before and after purification saponins contained in the crude saponin fraction (Fig. 15), if ginsenoside Rb1 other than spinal cord injury, nerve contained in the crude saponin fraction If a component for treating trauma / head injury or a component for protecting neurons is identified, the carbon chain of the component or the purified saponin is also ginsenoside Rb.
By reducing (hydrogenation) or modifying in the manner shown in FIG. 20 in the same manner as in1 , the compound can be used for searching for a novel compound for protecting brain nerve cells. However, the components of the crude saponin fraction that can be used as a lead compound are not limited to the above-mentioned purified saponins. In addition, the novel compound which can be prepared as a lead compound using the crude saponin fraction component is not limited to those obtained by arbitrarily chemically modifying the above-mentioned damamaran skeleton (steroid-like skeleton) side chain. From the above results, it was invented that a preparation for intravenous administration containing a crude saponin fraction or a salt thereof inhibits secondary degeneration of nerve tissue due to spinal cord injury. Furthermore, a pharmaceutical composition comprising a crude saponin fraction is expected to be not only an epoch-making therapeutic agent for spinal cord injury, nerve trauma and head trauma, but also to be effective and effective for peripheral tissue trauma. As described above, the therapeutic effect of crude saponin fraction on spinal cord injury and nerve trauma is epoch-making, so that components contained in crude saponin fraction, purified saponins (ginsenosides) or their metabolites are used as lead compounds. A novel compound that not only can synthesize novel therapeutic drugs for spinal cord injury and nerve trauma, but also modifies the functions of target molecules by identifying components contained in crude saponin fractions and target molecules of purified saponins or their metabolites To develop drugs for treating spinal cord injury, nerve trauma and trauma.
【０１７２】さて、特願平１１−３４０８５０、ＰＣＴ
／ＪＰ９９／０６８０４（ジンセノサイドＲｂ１からな
る脳血管再生・再構築促進剤ならびに神経組織二次変性
抑止剤）においては、前述の粗サポニン分画静脈内投与
と同様に、本発明者ら（阪中、田中）はラットの下位胸
髄に２０ｇの圧力を２０分間負荷した後、３０分以上経
過してから左大腿静脈にジンセノサイドＲｂ１の投与を
開始した。すなわち、下位胸髄に圧負荷を加え始めてか
ら、およそ１時間後にジンセノサイドＲｂ１を静脈内投
与して、脊髄損傷治療効果を判定したといえる。しか
し、一般にヒト脊髄損傷症例では、脊髄損傷発症後２時
間以内が非常に重要で、この時間内に何らかの処置を施
すことにより患者の予後が改善されると言われている。
もっとも、ジンセノサイドＲｂ１の脊髄損傷治療効果に
関する発明がなされるまでは、脊髄損傷発症後１時間前
後に静脈内投与することにより、下肢対麻痺をきたした
脊髄損傷動物を起立せしめる化合物すら見出されていな
かったのが現状であるので、具体的には、前述の“何ら
かの処置”がどのような処置法や治療法であるのかまっ
たく明らかにはされていない。そこで、本発明者は次に
脊髄損傷発症後２時間目よりジンセノサイドＲｂ１を静
脈内投与し、その効果を調べた。Now, Japanese Patent Application No. 11-340850, PCT
/ JP99 / 06804 (a cerebral blood vessel regeneration / reconstruction promoting agent comprising ginsenoside Rb1 and an inhibitor of secondary degeneration of nerve tissue), as in the case of intravenous administration of the crude saponin fraction described above, the present inventors (Sakanaka Tanaka) after loaded with pressure of 20 g 20 minutes in the lower thoracic cord of rats began the administration of ginsenoside Rb1 in the left femoral vein for at least 30 minutes. That is, from the beginning of the addition of the pressure load on the lower thoracic cord, ginsenoside Rb1 was administered intravenously approximately 1 hour after, it can be said that to determine the spinal cord injury therapeutic effect. However, in human spinal cord injury cases, generally within 2 hours after the onset of spinal cord injury is very important, and it is said that the prognosis of patients is improved by performing some treatment within this time period.
However, until invention relates spinal cord injury therapeutic effects of ginsenoside Rb1 is made, by intravenously administered 1 hour before and after after the onset of spinal cord injury, is even found compounds allowed to standing spinal cord injury animals has brought the leg paraplegia At present, it has not been clarified exactly what kind of treatment or treatment the above-mentioned “some treatment” is. Accordingly, the present inventors have ginsenoside Rb1 from 2 hours after spinal cord injury onset administered intravenously next examined the effect.
【０１７３】ハロセン、笑気による吸入麻酔下で、ウィ
スターラット（体重３００ｇ程度）の下位胸髄に２０ｇ
の圧力を２０分間負荷した後にいったん覚醒せしめ、下
肢対麻痺をきたしたラットをケージ内に１時間４０分放
置した。すなわちラットの下位胸髄に２０ｇの圧力を加
え始めた時点から、約２時間いかなる処置・治療も施さ
ず脊髄損傷ラットを放置したことになる。その後速やか
に左大腿静脈へジンセノサイドＲｂ１（６０μｇ）を単
回注入し、さらに同静脈へジンセノサイドＲｂ１（６０
μｇ／日）をアルザミニ浸透圧ポンプにて７日間持続投
与した。対照の脊髄損傷動物には同様のスケジュールで
同量の生理食塩水（ｖｅｈｉｃｌｅ、媒体）を投与し
た。結果を図２１に示す。図２１は、下肢対麻痺をきた
したラットの経過を示す、図面に代わる写真である。左
側中段が下肢対麻痺をきたした直後の写真であり、下段
がその２時間後からジンセノサイドＲｂ１（６０μｇ）
を投与した場合のラットの写真であり、上段はコントロ
ールとして生理食塩水を投与したラットの写真である、
それぞれ左側は１日後、右側は１週間後のものである。Under inhalation anesthesia with halothane and laughter, 20 g was added to the lower thoracic spinal cord of Wistar rats (body weight: about 300 g).
After a pressure of 20 minutes was applied for 20 minutes, the rats were awakened once and the rats with paraplegia were left in the cage for 1 hour and 40 minutes. That is, the spinal cord injured rat was left without any treatment or treatment for about 2 hours from the time when the pressure of 20 g was applied to the lower thoracic cord of the rat. Immediately thereafter ginsenosideRb 1 a (60 [mu] g) was injected single to left femoral vein, ginsenosideRb 1 (60 further in the same vein
μg / day) was continuously administered for 7 days with an Alzamini osmotic pump. Control spinal cord injured animals received the same amount of saline (vehicle, vehicle) on a similar schedule. The results are shown in FIG. FIG. 21 is a photograph instead of a drawing, showing the course of a rat having paraplegia in the lower limbs. The middle part on the left side is a photograph immediately after paralysis of the lower limb, and the lower part shows ginsenoside Rb1 (60 μg) from 2 hours later.
Is a photograph of a rat when administered, the upper row is a photograph of a rat to which saline was administered as a control,
The left side is one day later, and the right side is one week later.
【０１７４】図２１に示すごとく、下位胸髄への圧負荷
を開始後２時間を経過した時点よりジンセノサイドＲｂ
１を静脈内投与されたラットは、脊髄損傷当日には下肢
の対麻痺をきたしてまったく立ち上がることができず、
翌日にもやや下肢対麻痺に改善はみられるものの依然と
して起立することができなかった。しかし同ラットは、
脊髄損傷発症後３〜４日目より徐々に下肢の対麻痺が回
復し始め、図２１に示すごとく脊髄損傷後１週間目には
オープンフィールドの壁（高さ８ｃｍ）につかまりなが
ら起立するようになった。一方、図２１に示すごとく、
下位胸髄への圧負荷を開始後２時間を経過した時点より
生理食塩水（ｖｅｈｉｃｌｅ、媒体）のみを静脈内投与
されたラットは、脊髄損傷後１週間を経過しても下肢の
対麻痺はまったく改善しなかった。しかも、生理食塩水
のみを静脈内投与された脊髄損傷ラットでは、個体によ
り程度の差はあるものの、図２１に示すごとくしばしば
下腹部に褥創が認められた。しかし、ジンセノサイドＲ
ｂ１静脈内投与例では下腹部の褥創はほとんどみられな
かった。As shown in FIG. 21, the ginsenoside Rb starts from 2 hours after the start of pressure loading on the lower thoracic spinal cord.
1 was administered intravenously rats, spinal cord injury day can not rise at all in Kitaichi paraplegia of the lower limbs,
On the following day, her paraplegia was slightly improved, but she still could not stand. But the rat
From 3 to 4 days after the onset of spinal cord injury, paraplegia of the lower limbs began to recover gradually, and as shown in FIG. 21, one week after the spinal cord injury, the patient was standing up while holding onto the open field wall (height 8 cm). became. On the other hand, as shown in FIG.
Rats administered intravenously only with saline (vehicle, vehicle) 2 hours after the start of pressure loading on the lower thoracic cord, paraplegia of the lower limbs was not observed even one week after spinal cord injury. No improvement at all. Moreover, in spinal cord-injured rats to which only saline was intravenously administered, pressure wounds were often observed in the lower abdomen as shown in FIG. However, ginsenoside R
bedsore lower abdomen was hardly observed in the b1 intravenous administration examples.
【０１７５】以上の実験結果より、ジンセノサイドＲｂ
１の静脈内投与は、脊髄損傷発症後はもとより、脊髄損
傷発症後２時間以上経過したのちに開始されても、優れ
た治療効果を示すことが発明された。また、ジンセノサ
イドＲｂ１は明らかに脊髄損傷に伴う褥創にも効果・効
能を発揮することが示された。このことは、脊髄損傷の
みならず他の神経外傷（頭部外傷、末梢神経障害）、脳
卒中、脱髄疾患、神経変性疾患に伴う褥創の予防、治
療、処置にもジンセノサイドＲｂ１が有効であることを
物語っている。従って、脊髄損傷以外の神経外傷、すな
わち頭部外傷や末梢神経の外傷・損傷においても、ジン
セノサイドＲｂ１を傷害発症後２時間以上経過したのち
に静脈内投与しても優れた効果を示すと考えられる。From the above experimental results, ginsenoside Rb
It has been invented that the intravenous administration ofNo. 1 exhibits an excellent therapeutic effect even if started 2 hours or more after the onset of spinal cord injury as well as after the onset of spinal cord injury. Furthermore, ginsenoside Rb1 was shown to clearly exhibit effectiveness and efficacy in decubitus wounds caused by spinal cord injury. This is another neurotrauma not spinal cord injury only (head trauma, peripheral neuropathy), stroke, demyelinating diseases, the prevention of pressure sore accompanying neurodegenerative diseases, treatment, ginsenoside Rb1 is also effective in the treatment It tells something. Therefore, neurotrauma other than spinal cord injury, that is, even in trauma-injury of head injuries and peripheral nerve, indicating an excellent effect even when administered intravenously to after a lapse of ginsenoside Rb1 injury onset 2 hours or more after thinking Can be
【０１７６】また、脊髄損傷を起こした神経組織では、
しばしば当該脊髄組織に浮腫が生じ神経症状（下肢又は
上肢の対麻痺、排尿・排便困難等）を悪化せしむること
が知られているが、少量のジンセノサイドＲｂ１の静脈
内持続投与が優れた脊髄損傷治療効果を示すという本実
験結果は、ジンセノサイドＲｂ１が脊髄組織の浮腫の予
防・治療・処置に有用であるということを物語ってい
る。もちろん、ジンセノサイドＲｂ１は脊髄損傷に伴う
性機能障害、排尿・排便困難、自律神経障害、神経因性
膀胱の優れた治療剤とも考えられる。In the nerve tissue that has caused spinal cord injury,
Often the spinal cord tissue edema caused neurological symptoms (leg or a pair of upper limb paralysis, urination, defecation difficulties, etc.) it is known Shimuru was worse, was excellent continuous intravenous administration of small amounts of ginsenoside Rb1 the present experimental results that show spinal cord injury therapeutic effect, tells us that ginsenoside Rb1 is useful for prevention, treatment and the treatment of edema of spinal cord tissue. Of course, ginsenoside Rb1 is dysfunction due to spinal cord injury, urination-defecation difficulty, autonomic neuropathy, also considered an excellent therapeutic agent for neurogenic bladder.
【０１７７】本発明の実験結果で示したように、ジンセ
ノサイドＲｂ１の脊髄損傷・神経外傷治療効果は画期的
なものであるので、ジンセノサイドＲｂ１もしくはその
代謝産物をリード化合物として新規脊髄損傷・神経外傷
治療薬を合成できるのみならず、ジンセノサイドＲｂ１
もしくはその代謝産物の標的分子を同定することによ
り、標的分子の機能を修飾する新規化合物をも合成して
脊髄損傷・神経外傷・外傷治療薬の開発を目指すことが
できる。[0177] As shown in the experimental results of the present invention, since the spinal cord injury, neurotrauma therapeutic effects of ginsenoside Rb1 is a breakthrough, new spinal cord injuries, ginsenoside Rb1 or metabolites thereof as a leading compound Ginsenoside Rb1
Alternatively, by identifying the target molecule of the metabolite, a novel compound that modifies the function of the target molecule can also be synthesized to aim at development of a drug for treating spinal cord injury, nerve trauma, or trauma.
【０１７８】また、脊髄損傷においては、グリア細胞の
うちでも特にオリゴデンドロサイトが傷害を受けてアポ
トーシスに陥った結果、脱髄現象が起こり神経症状が悪
化・進行すると報告されている（Ｃｒｏｗｅ，Ｍ．Ｊ．
ｅｔ ａｌ．，ＮａｔｕｒｅＭｅｄ．３，７３−７６，
１９９７；Ｅｍｅｒｙ，Ｅ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｎｅｕ
ｒｏｓｕｒｇ．８９，９１１−９２０，１９９８）。ジ
ンセノサイドＲｂ１の静脈内持続投与が顕著に脊髄損傷
ラットの両下肢麻痺を改善するという実験結果は、ジン
セノサイドＲｂ１がオリゴデンドロサイトのアポトーシ
スもしくはアポトーシス様神経細胞死を抑止することに
より、脊髄損傷の症状を改善することを物語っている。
従って、本発明の低用量・低濃度のジンセノサイドＲｂ
１はオリゴデンドロサイトを保護することにより、脱髄
をきたす脳神経疾患（多発性硬化症、ビンスワンガー
病、急性散在性脳脊髄炎、脱髄脳炎、脳の慢性低灌流障
害等）の予防・治療・処置にも有効であると考えられ
る。さらに、低用量・低濃度のジンセノサイドＲｂ１の
静脈内持続投与が脊髄損傷ラットの両下肢麻痺（対麻
痺）を改善するという実験結果は、損傷を受けた神経線
維もしくは神経組織が低用量・低濃度の粗サポニン分画
投与により再生することも示している。In spinal cord injury, it has been reported that, among glial cells, oligodendrocytes, in particular, are injured and apoptosis occurs, resulting in demyelination, resulting in deterioration and progression of neurological symptoms (Crowe, M. .
et al. , NatureMed. 3,73-76,
1997; Emery, E .; et al. , J. et al. Neu
rosurg. 89, 911-920, 1998). Experimental result that continuous intravenous administration significantly improves paraplegia spinal cord injured rats of ginsenoside Rb1, by ginsenoside Rb1 to suppress apoptosis or apoptosis-like nerve cell death of oligodendrocytes, spinal cord injury It shows that the symptoms improve.
Therefore, low dose and low concentration of ginsenoside Rb of the present invention
1 ) Prevention and treatment of cranial nerve diseases (such as multiple sclerosis, Binswanger's disease, acute sporadic encephalomyelitis, demyelinating encephalitis, and chronic hypoperfusion of the brain) that cause demyelination by protecting oligodendrocytes. It is also considered effective for treatment. Furthermore, the experimental result that continuous intravenous administration of low doses and low concentrations of ginsenoside Rb1 improves paraplegia of spinal cord injury rats (paraplegia), the nerve fibers or nerve tissue damaged is low doses and low It also shows that regeneration is achieved by administration of a crude saponin fraction at a high concentration.
【０１７９】一般に脳神経組織内の有髄神経線維におい
て、オリゴデンドロサイトは神経細胞の軸索突起（ａｘ
ｏｎ）を何重にもとりまいて髄鞘（ミエリン、ｍｙｅｌ
ｉｎ）を形成することで知られている。また、無髄神経
線維においても、オリゴデンドロサイトの突起が神経細
胞の軸索突起（ａｘｏｎ）をほぼ一重に取り囲んでいる
ことが知られている。このように、脳神経組織内におい
ては、神経細胞とオリゴデンドロサイトは常時密接な位
置関係を保持していると言える。そこで、本発明者ら
は、神経細胞とオリゴデンドロサイトを共培養して、ジ
ンセノサイドＲｂ１が両細胞の生存を促進するかどうか
を調べた。このため、神経細胞は、妊娠１７日のラット
胎仔大脳皮質より分離した。オリゴデンドロサイトは、
生直後ラットの前脳より開始した混合脳細胞培養より分
離した。神経細胞５０万個に対し、オリゴデンドロサイ
ト５万個を共培養し、この培養系にジンセノサイドＲｂ
１を１ｆｇ／ｍｌから１０ｐｇ／ｍｌの濃度で１％牛胎
仔血清を含むＤＭＥＭ中に添加し、５日間培養した。そ
の後電気泳動サンプルを作成し、培養ウェル中の神経細
胞特異タンパク質ＭＡＰ２とオリゴデンドロサイト特異
タンパク質のＣＮＰａｓｅの存在量をウェスタンブロッ
トにより調べた。結果を図２２に示す。図２２は、神経
細胞−オリゴデンドロサイト共培養系に対するジンセノ
サイドＲｂ１をの生存促進効果をみたウェスタンブロッ
トの結果を示す図面に代わる写真である。Generally, in myelinated nerve fibers in cranial nerve tissue, oligodendrocytes are used to express neurites (ax) of nerve cells.
on) around myelin (myelin, myel)
in). Also, in unmyelinated nerve fibers, it is known that the processes of oligodendrocytes substantially surround the axon of neurons. As described above, it can be said that the nerve cells and the oligodendrocytes always maintain a close positional relationship in the brain nerve tissue. Accordingly, the present inventors, the nerve cells and oligodendrocytes by co-culture, ginsenoside Rb1 was examined whether promotes survival of both cells. For this reason, the nerve cells were separated from the rat fetal cerebral cortex on the 17th day of gestation. Oligodendrocytes are
It was isolated from a mixed brain cell culture started from the forebrain of a newborn rat. 50,000 oligodendrocytes were co-cultured with 500,000 neurons, and ginsenoside Rb was added to this culture system.
1 was added at a concentration of 1 fg / ml to 10 pg / ml in DMEM containing 1% fetal calf serum and cultured for 5 days. Thereafter, an electrophoresis sample was prepared, and the abundances of the neuron-specific protein MAP2 and the oligodendrocyte-specific protein CNPase in the culture well were examined by Western blot. The results are shown in FIG. Figure 22 is a nerve cell - is a photograph as a drawing which shows the results of Western blot viewed survival promoting effect of ginsenoside Rb1 against oligodendrocytes coculture system.
【０１８０】図２２の上段がＭＡＰ２のウェスタンブロ
ットを、図２２の下段がＣＮＰａｓｅのウェスタンブロ
ットをそれぞれ示し、横方向はジンセノサイドＲｂ１の
濃度（ｆｇ／ｍｌ）を示す。ジンセノサイドＲｂ１を１
ｆｇ／ｍｌから１００ｆｇ／ｍｌの濃度で、神経細胞と
オリゴデンドロサイトの共培養系に添加すると、ＭＡＰ
２のバンドならびにＣＮＰａｓｅのバンドが、ジンセノ
サイドＲｂ１非添加例及びジンセノサイドＲｂ１ １０
４ｆｇ／ｍｌ添加例と比べて、明らかに濃くなってい
た。このことは、低濃度のジンセノサイドＲｂ１を１ｆ
ｇ／ｍｌから１００ｆｇ／ｍｌの濃度で添加しておく
と、ＭＡＰ２とＣＮＰａｓｅの存在量が明らかに多くな
ることを示している。すなわち、ジンセノサイドＲｂ１
により神経細胞ならびにオリゴデンドロサイトの生存が
促進されたことになる。このことは、低濃度のジンセノ
サイドＲｂ１がオリゴデンドロサイトの細胞死を伴う疾
患（多発性硬化症、ビンスワンガー病等の脱髄をきたす
脳神経疾患）の予防・治療・処置に有効であることを強
く支持するものである。ちなみにジンセノサイドＲｂ１
の分子量は約１１０９．４６であるので、１ｆｇ／ｍｌ
のジンセノサイドＲｂ１はおよそ０．９ｆＭのジンセノ
サイドＲｂ１に相当すると考えられる。[0180] Western blot of the upper part of FIG. 22 is MAP2, respectively Western blot lower row of CNPase in FIG 22, the horizontal direction indicates the concentration of ginsenoside Rb1 (fg / ml). Ginsenoside Rb1 to 1
When added to a co-culture system of neurons and oligodendrocytes at a concentration of fg / ml to 100 fg / ml,
2 bands and band CNPase is, ginsenoside Rb1 was not added examples and ginsenosideRb 1 10
The density was clearly higher than in the case of adding4 fg / ml. This means that low concentrations of ginsenoside Rb1
This shows that the addition of g / ml to 100 fg / ml clearly increases the abundance of MAP2 and CNPase. That is, ginsenoside Rb1
Thus, the survival of neurons and oligodendrocytes was promoted. This strongly ginsenoside Rb1 in low concentrations are effective in prevention, treatment, and treatment of diseases involving cell death of oligodendrocytes (multiple sclerosis, cranial nerve diseases causing demyelination Binswanger's disease, etc.) I support it. By the way, ginsenoside Rb1
Has a molecular weight of about 1109.46, so 1 fg / ml
Ginsenoside Rb1 of is believed to correspond to the ginsenoside Rb1 in approximately 0.9FM.
【０１８１】次に、本発明者らは、ジンセノサイドＲｂ
１がオリゴデンドロサイトにおけるＢｃｌ−ｘＬの発現
を増強するかどうかを調べた。そのため、たとえば一次
培養ラットオリゴデンドロサイトにジンセノサイドＲｂ
１を１ｆｇ／ｍｌから１０ｐｇ／ｍｌの濃度で添加し、
６時間培養した後に、総ＲＮＡを回収し、Ｂｃｌ−ｘＬ
のｍＲＮＡをＲＴ−ＰＣＲにて測定した。ＲＴ−ＰＣＲ
の内部標準には、βアクチンｍＲＮＡを用いている。ま
た、一部のオリゴデンドロサイトはジンセノサイドＲｂ
１で処理後にＳＤＳ電気泳動サンプルとし、培養ウェル
中の抗アポトーシス因子Ｂｃｌ−ｘＬの存在量をイムノ
ブロット（ウェスタンブロット）により検討した。な
お、オリゴデンドロサイトは、生直後ラット前脳より開
始した混合脳細胞培養より分離した。結果を図２３に示
す。図２３は、ジンセノサイドＲｂ１のオリゴデンドロ
サイトにおけるＢｃｌ−ｘＬの発現増加の効果をみたイ
ムノブロット（ウェスタンブロット）の結果を示す、図
面に代わる写真である。図２３の上段はＲＴ−ＰＣＲの
結果を、図２３の下段はイムノブロット（ウェスタンブ
ロット）の結果をそれぞれ示す。上段のＲＴ−ＰＣＲに
おける左側はβアクチンｍＲＮＡの場合であり、右側は
Ｂｃｌ−ｘＬのｍＲＮＡの場合である。Ｒｂ１（−）は
ジンセノサイドＲｂ１不添加例、Ｒｂ１（＋）はジンセ
ノサイドＲｂ１を１００ｆｇ／ｍｌ添加した例である。
下段の横方向はジンセノサイドＲｂ１の濃度（ｆｇ／ｍ
ｌ）を示す。Next, the present inventors considered that ginsenoside Rb
1 It was investigated whether or not to enhance the expression of Bcl-xL in oligodendrocytes. Therefore, for example, ginsenoside Rb is added to primary cultured rat oligodendrocytes.
1 at a concentration of1 pg / ml to 10 pg / ml,
After culturing for 6 hours, to recover a total RNA,Bcl-x L
Was measured by RT-PCR. RT-PCR
Β-actin mRNA is used as an internal standard for. Also, some oligodendrocytes are ginsenoside Rb
And SDS electrophoresis sample after treatment with1, the abundance of the anti-apoptotic factor Bcl-xL in culture wells were examined by immunoblotting (Western blot). Oligodendrocytes were isolated from a mixed brain cell culture started from the rat forebrain immediately after birth. The results are shown in FIG. Figure 23 shows the results of Bcl-xL immunoblot viewed the effect of increased expression of (Western blot) in oligodendrocytes of ginsenoside Rb1, a photograph as a drawing. The upper part of FIG. 23 shows the result of RT-PCR, and the lower part of FIG. 23 shows the result of immunoblot (Western blot). Left side of the upper RT-PCR is the case of β-actin mRNA, right is the case of the mRNA ofBcl-x L. Rb1 (−) is an example where ginsenoside Rb1 was not added, and Rb1 (+) is an example where ginsenoside Rb1 was added at 100 fg / ml.
Transverse of ginsenoside Rb1 concentration in the lower (fg / m
1) is shown.
【０１８２】ＲＴ−ＰＣＲにより、ジンセノサイドＲｂ
１を１００ｆｇ／ｍｌの濃度で添加しておくと、オリゴ
デンドロサイトにおいてＢｃｌ−ｘＬ ｍＲＮＡの発現
が明らかに増強した。また、イムノブロット（ウェスタ
ンブロット）によって、Ｂｃｌ−ｘＬ蛋白もジンセノサ
イドＲｂ１の添加により増加することが判明した。本実
験結果は、脊髄損傷や脱髄をきたす脳神経疾患におい
て、少量のジンセノサイドＲｂ１の静脈内持続投与が、
オリゴデンドロサイトの保護作用を発揮することを強く
支持するものである。By RT-PCR, ginsenoside Rb
If you leave adding1 at a concentration of 100 fg / ml, expression ofBcl-x L mRNA in oligodendrocytes it was obviously enhanced. Further, by immunoblot (Western blot), alsoBcl-x L protein was found to be increased by the addition of ginsenoside Rb1. This experimental results in cranial nerve diseases causing a spinal cord injury or demyelination, the continuous intravenous administration of small amounts of ginsenoside Rb1,
It strongly supports that oligodendrocytes exert their protective action.
【０１８３】特願平１０−３６５５６０、ＰＣＴ／ＪＰ
９９／０２５５０（ジンセノサイドＲｂ１からなる脳細
胞又は神経細胞保護剤）において、本発明者ら（阪中、
田中）は培養神経細胞にジンセノサイドＲｂ１を１−１
００ｆｇ／ｍｌ前後の濃度で添加しておくと、同細胞に
おけるＢｃｌ−ｘＬの発現が上昇することを見出してい
る。そこで本発明者らは次に少量のジンセノサイドＲｂ
１を静脈内持続投与した際にも、脳組織においてＢｃｌ
−ｘＬ ｍＲＮＡの発現増加がみられるかどうかを調べ
た。このため、たとえば１２週齢のＳＨ−ＳＰラット
（体重２５０〜３００ｇ）を用いた。吸入麻酔下でＳＨ
−ＳＰラットのＭＣＡを永久閉塞した直後に、ジンセノ
サイドＲｂ１（６０μｇ）を単回静脈内注入し、その
後、ジンセノサイドＲｂ１を６０μｇ／日の用量で静脈
内へ持続投与した。対照のＭＣＡ閉塞動物ならびに偽手
術動物には、ＭＣＡ永久閉塞後同量の生理食塩水（ｖｅ
ｈｉｃｌｅ、媒体）のみを静脈内投与した。Japanese Patent Application No. 10-365560, PCT / JP
In 99/02550 (a brain cell or nerve cell protective agent comprising ginsenoside Rb1 ), the present inventors (Osakanaka,
Tanaka) is a ginsenoside Rb1 in cultured neurons 1-1
When 00fg / ml should be added at a concentration of about, have found that the expression ofBcl-x L in the same cells increases. Therefore, the present inventors next developed a small amount of ginsenoside Rb.
1 even when the continuous intravenous administration of, Bcl in brain tissue
Increased expression of -xL mRNA was examined whether or not seen. For this purpose, for example, 12-week-old SH-SP rats (weight: 250 to 300 g) were used. SH under inhalation anesthesia
-A single intravenous injection of ginsenoside Rb1 (60 μg) immediately after the permanent occlusion of the MCA of SP rats, followed by continuous intravenous administration of ginsenoside Rb1 at a dose of 60 μg / day. Control MCA occluded animals as well as sham operated animals received the same volume of saline (ve) after permanent MCA occlusion.
(vehicle, vehicle) alone was administered intravenously.
【０１８４】結果を図２４に示す。図２４は、生体内に
おけるジンセノサイドＲｂ１のＢｃｌ−ｘＬの発現増加
の効果をみたＲＴ−ＰＣＲの結果を示す、図面に代わる
写真である。図２４の上段２種はグループ１の動物群の
場合であり、下段２種はグループ２の動物群の場合であ
る。それぞれのグループの上段はβアクチンの場合であ
り、下側はＢｃｌ−ｘＬの場合である。Ｓｈａｍは偽手
術動物、Ｒｂ１（−）は生理食塩水投与脳梗塞動物、Ｒ
ｂ１（＋）はジンセノサイドＲｂ１静脈内投与脳梗塞動
物でＭＣＡ永久閉塞後４時間目（Ｒｂ１（＋）の左側）
の場合とＭＣＡ永久閉塞後６時間目（Ｒｂ１（＋）の右
側）の場合を示す。The results are shown in FIG. Figure 24 shows RT-PCR results seen the effect of increased expression ofBcl-x L of ginsenoside Rb1 in vivo is a photograph instead of a drawing. The upper two species in FIG. 24 are for the group 1 animal group, and the lower two species are for the group 2 animal group. Upper each group is the case for β-actin, the lower is the case of the Bcl-xL. Sham is a sham-operated animal, Rb1 (−) is a cerebral infarction animal administered with physiological saline, R
b1 (+) is ginsenoside Rb1 intravenously administered cerebral infarction animal 4 hours after permanent MCA occlusion (left side of Rb1 (+))
And the case 6 hours after MCA permanent occlusion (to the right of Rb1 (+)).
【０１８５】Ｇｒｏｕｐ１（グループ１）は偽手術動
物、生理食塩水投与ＭＣＡ永久閉塞動物（ＭＣＡ永久閉
塞後すなわち脳梗塞後４時間目）、ジンセノサイドＲｂ
１投与脳梗塞動物（ＭＣＡ永久閉塞後４時間目）、ジン
セノサイドＲｂ１投与脳梗塞動物（ＭＣＡ永久閉塞後６
時間目）の動物群を示す。Ｇｒｏｕｐ２（グループ２）
も同様の条件の動物で構成されている。Ｓｈａｍは偽手
術動物、Ｒｂ１（−）は生理食塩水投与脳梗塞動物、Ｒ
ｂ１（＋）はジンセノサイドＲｂ１静脈内投与脳梗塞動
物を示す。偽手術後、ならびにＭＣＡ永久閉塞後４時間
目もしくは６時間目に、ラットを抱水クロラールにて麻
酔し左側大脳皮質（すなわちＭＣＡ永久閉塞側の大脳皮
質）を取り出したのちに、総ＲＮＡを調整してＲＴ−Ｐ
ＣＲに供した。なお内部標準としてβ−アクチン（β−
ａｃｔｉｎ）のｍＲＮＡを用いた。Group 1 (Group 1) was a sham-operated animal, a saline-administered MCA permanent occlusion animal (after permanent MCA occlusion, ie, 4 hours after cerebral infarction), ginsenoside Rb
1 administration cerebral infarction animal (4 hours after MCA permanent occlusion), ginsenoside Rb1 administration cerebral infarction animal (6 hours after MCA permanent occlusion)
The animal group at (time point) is shown. Group2 (Group 2)
Are also composed of animals under similar conditions. Sham is a sham-operated animal, Rb1 (−) is a cerebral infarction animal administered with physiological saline, R
b1 (+) indicates a cerebral infarction animal administered with ginsenoside Rb1 intravenously. After sham operation and 4 or 6 hours after MCA permanent occlusion, rats were anesthetized with chloral hydrate and the left cerebral cortex (ie, cerebral cortex on the MCA permanent occlusion side) was removed, and total RNA was adjusted. RT-P
Subjected to CR. As an internal standard, β-actin (β-actin
actin) mRNA was used.
【０１８６】図２４に示すごとく、Ｇｒｏｕｐ１、Ｇｒ
ｏｕｐ２ともに偽手術動物や生理食塩水投与脳梗塞動物
に比べて、ジンセノサイドＲｂ１静脈内投与例において
ＭＣＡ永久閉塞後４時間目、６時間目ともに大脳皮質の
Ｂｃｌ−ｘＬ ｍＲＮＡ発現が明らかに上昇していた。As shown in FIG. 24, Group1, Gr
oup2 both compared to sham-operated animals and saline administration cerebral infarction animals, 4 hours after MCA permanent occlusion in the ginsenoside Rb1 intravenous administration examples clearly increaseBcl-x L mRNA expression in the cerebral cortex both 6 hours Was.
【０１８７】大脳皮質の神経組織には、神経細胞、神経
幹細胞、グリア細胞（アストロサイト、ミクログリア、
オリゴデンドロサイト）、血管内皮細胞、血管平滑筋細
胞等が含まれている。従って、ジンセノサイドＲｂ１の
静脈内投与が大脳皮質におけるＢｃｌ−ｘＬ ｍＲＮＡ
発現を促進せしめるという本実験結果は、前述の大脳皮
質構成細胞のいずれかがジンセノサイドＲｂ１の静脈内
投与によりＢｃｌ−ｘＬ ｍＲＮＡ発現を増強すること
を物語っている。従って、ジンセノサイドＲｂ１は細胞
の種を超えて、Ｂｃｌ−ｘＬ発現増強作用を示すと考え
られた。また、脳梗塞ラットのみならず脊髄損傷ラット
においても、ジンセノサイドＲｂ１の（６０μｇ／日）
の静脈内投与が脊髄組織においてＢｃｌ−ｘＬ ｍＲＮ
Ａの発現を上昇せしめるものと考えられる。さらに、低
用量・低濃度の粗サポニン分画の静脈内投与が、ジンセ
ノサイドＲｂ１（６０μｇ／日）の静脈内投与と同様
に、寝たきりの脊髄損傷ラットを起立せしめるという前
述の実験結果に基づけば、低用量・低濃度の粗サポニン
分画の静脈内投与も脳神経組織におけるＢｃｌ−ｘＬｍ
ＲＮＡの発現を上昇せしめるものと考えられる。Nerve tissue of the cerebral cortex includes nerve cells, neural stem cells, and glial cells (astrocytes, microglia,
Oligodendrocytes), vascular endothelial cells, vascular smooth muscle cells, and the like. Thus,Bcl-x L mRNA intravenous administration of ginsenoside Rb1 is in the cerebral cortex
The present experimental results that allowed to promote the expression testifies that any of the aforementioned cortical structure cells enhances Bcl-xL mRNA expression by intravenous administration of ginsenoside Rb1. Therefore, ginsenoside Rb1 exceed the type of cell, it was considered to indicate aBcl-x L expression enhancing action. In addition, not only the cerebral infarction rat even in rats with spinal cord injuries, of ginsenoside Rb1 (60μg / day)
Bcl-x L mRNA in intravenous administration of spinal cord tissue
It is thought to increase the expression of A. Furthermore, based on the above experimental results that intravenous administration of a low-dose, low-concentration crude saponin fraction, as well as intravenous administration of ginsenoside Rb1 (60 μg / day), erect rats in bed-ridden spinal cord injured rats. , Bcl-xL m in intravenous administration also cranial tissue low doses and low concentrations of the crude saponin fraction
It is thought to increase the expression of RNA.
【０１８８】さて、本発明者らはこれまで神経組織や神
経組織構成細胞（神経細胞、オリゴデンドロサイト）を
用いて、薬用人蔘（コウジン末）、粗サポニン分画、ジ
ンセノサイドＲｂ１の効果・効能を調べてきたが、次に
心臓に対するジンセノサイドＲｂ１の効果を検討した。
このため、たとえば一次培養心筋細胞をジンセノサイド
Ｒｂ１存在下で１８時間培養した際の、Ｂｃｌ−ｘＬ
ｍＲＮＡと、Ｂｃｌ−ｘＬタンパク質の発現変動をＲＴ
−ＰＣＲとイムノブロッティングにより検討した。心筋
細胞は、妊娠１７日齢のラット胎仔心臓をトリプシンＥ
ＤＴＡを用いて細胞分散したものを、１０％ＦＣＳ（牛
胎仔血清）を含有するＤＭＥＭ中で数日間培養したもの
を用いた。ＲＴ−ＰＣＲは、βアクチンｍＲＮＡを内部
標準として用いた。イムノブロットでは、横紋筋特異的
タンパク質であるトロポニンＴを内部標準として、Ｂｃ
ｌ−ｘＬタンパク質の発現を検討した。イムノブロット
では、異なるロットの心筋細胞を用いて、同様の実験を
１０回繰り返し、Ｂｃｌ−ｘＬ免疫反応陽性のバンドを
デンシトメトリーにて解析し、統計学的検討を行った。[0188] Now, the present inventors have found that by using this to neural tissue and nerve tissue component cells (neurons, oligodendrocytes), ginseng (red ginseng powder), crude saponin fraction, effect-of ginsenoside Rb1 have examined the efficacy, but then examined the effect of ginsenoside Rb1 on the heart.
Therefore, when the primary cultured myocardial cells were cultured for 18 hours in the presence of ginsenoside Rb1 for example,Bcl-x L
and mRNA, the expression change ofBcl-x L protein RT
-Investigated by PCR and immunoblotting. Cardiomyocytes were obtained by converting trypsin E from rat fetal heart at 17 days of gestation.
A cell dispersed with DTA was used and cultured for several days in DMEM containing 10% FCS (fetal calf serum). RT-PCR used β-actin mRNA as an internal standard. In the immunoblot, troponin T, a striated muscle-specific protein, was used as an internal standard, and Bc
We examined the expression ofl-x L protein. In immunoblotting, using the cardiomyocytes different lots, the same experiment was repeated 10 times, by analyzing the band of Bcl-xL immunoreactive with densitometry, it was carried out statistical study.
【０１８９】結果を図２５に示す。図２５の上段はＲＴ
−ＰＣＲの結果を示す図面に代わる写真であり、中段は
イムノブロット（ウェスタンブロット）の結果を示す図
面に代わる写真である。横方向はジンセノサイドＲｂ１
の濃度（ｆｇ／ｍｌ）を示す。図２５の下段はウェスタ
ンブロットの結果をデンシトメトリー解析に供したもの
を示す。統計解析法はＡｎｏｖａ＋Ｆｉｓｃｈｅｒ’ｓ
ＰＬＳＤであり、個数ｎは１０であり、＊印はｐ＜
０．０５を、＊＊印はｐ＜０．０１であることを示す。The results are shown in FIG. The upper part of FIG. 25 is RT
-It is a photograph replacing a drawing showing the result of PCR, and the middle row is a photograph replacing the drawing showing the result of immunoblot (Western blot). Ginsenoside Rb1 in the horizontal direction
Is shown (fg / ml). The lower part of FIG. 25 shows the results of Western blots subjected to densitometric analysis. Statistical analysis method is Anova + Fischer's
PLSD, number n is 10, and * is p <
0.05, ** indicates that p <0.01.
【０１９０】図２５に示すごとく、ジンセノサイドＲｂ
１ １ｆｇ／ｍｌ−１００ｆｇ／ｍｌ存在時に、Ｂｃｌ
−ｘＬ ｍＲＮＡの発現が明らかに上昇した。Ｂｃｌ−
ｘＬ蛋白レベルでは１ｆｇ／ｍｌから１０４ｆｇ／ｍｌ
の濃度域でジンセノサイドＲｂ１が有意にＢｃｌ−ｘＬ
蛋白の発現を増強せしめた。本実験では、ジンセノサイ
ドＲｂ１ １０４ｆｇ／ｍｌの濃度でＢｃｌ−ｘＬ ｍ
ＲＮＡの発現とＢｃｌ−ｘＬ蛋白の発現に解離が生じて
いるが、Ｂｃｌ−ｘＬ ｍＲＮＡの発現は、比較的高濃
度のジンセノサイドＲｂ１を投与した場合には、投与１
８時間後にはすでにダウンレギュレーションを受けるも
のと考えられる。As shown in FIG. 25, ginsenoside Rb
To1 1fg /ml-100fg / ml the presence, Bcl
Expression of -xL mRNA was obviously increased. Bcl-
xL protein level from 1 fg / ml to 104 fg / ml
Ginsenoside Rb1 significantlyBcl-x L in the concentration range
Increased protein expression. In this experiment,Bcl-x L m at a concentration of ginsenosideRb 110 4 fg / ml
Although dissociation for expression of expression andBcl-x L protein RNA occurs, the expression ofBcl-x L mRNA, when administered relatively high concentrations of ginsenoside Rb1 is administered 1
After 8 hours, it is considered that the down regulation is already taken.
【０１９１】次に本発明者らは、ジンセノサイドＲｂ１
がＢｃｌ−ｘＬ蛋白の発現を上昇せしめる濃度域で、実
際に心筋細胞の細胞死を抑止できるかどうかを調べた。
このために、たとえば一次培養心筋細胞を、グルコース
非存在下で培養した際の、ジンセノサイドＲｂ１の心筋
細胞保護効果を検討した。グルコースを含有しない無血
清ＤＭＥＭ中にジンセノサイドＲｂ１を０から１ｎｇ／
ｍｌの濃度で添加しておき、心筋細胞を４ないし５日間
培養した。その後電気泳動サンプルを作成し、抗横紋筋
特異αアクチニン抗体を用いてイムノブロッティング
（ウェスタンブロット）を行った。結果を図２６に示
す。図２６の上段はα−アクチニン（α−Ａｃｔｉｎｉ
ｎ）のウェスタンブロットの結果を示す図面に代わる写
真であり、横方向はジンセノサイドＲｂ１の濃度（ｆｇ
／ｍｌ）を示す。図２６の下段はウェスタンブロットの
結果をデンシトメトリー解析したものを、それぞれ示
す。統計解析は、ＡＮＯＶＡ＋Ｓｃｈｅｆｆｅ’ｓ ｐ
ｏｓｔ ｈｏｃ ｔｅｓｔによる。個数ｎは３であり、
＊印はｐ＜０．０５を、＊＊印はｐ＜０．０１であるこ
とを示す。Next, the present inventors considered that ginsenoside Rb1
There was examined whether a concentration range allowed to increase the expression of Bcl-xL protein, can actually suppressed cell death of myocardial cells.
For this, for example, primary cultured cardiomyocytes, when cultured in the absence of glucose were investigated myocardial cytoprotective effect of ginsenoside Rb1. Ginsenoside Rb1 in serum-free DMEM without glucose at 0 to 1 ng / g
The cardiomyocytes were cultured for 4 to 5 days. Thereafter, an electrophoresis sample was prepared, and immunoblotting (Western blot) was performed using an anti-striated muscle-specific α-actinin antibody. The results are shown in FIG. The upper part of FIG. 26 shows α-actinin (α-Actini).
a photograph as a drawing which shows the results of Western blot of n), the lateral ginsenoside Rb1 Concentration (fg
/ Ml). The lower part of FIG. 26 shows the results of densitometry analysis of the results of the Western blot. Statistical analysis is based on ANOVA + Scheffe's p
According to ost hoc test. The number n is 3,
* Indicates p <0.05, and ** indicates p <0.01.
【０１９２】図２６に示すごとく、無グルコース無血清
培養液のみで心筋細胞を培養した場合は、培養４−５日
目にはすでに心筋細胞は消失してαアクチニンのバンド
も検出されなかった。ジンセノサイドＲｂ１を１ｆｇ／
ｍｌから１０４ｆｇ／ｍｌの濃度で添加しておいた場合
には、拍動を続ける多数の心筋細胞が観察され、イムノ
ブロットにより横紋筋特異的αアクチニンの有意な存在
が認められた。As shown in FIG. 26, when cardiomyocytes were cultured only in a glucose-free serum-free culture medium, cardiomyocytes were already lost on day 4-5 of the culture, and no α-actinin band was detected. Ginsenoside Rb1 at1 fg /
When added at a concentration of ml to 104 fg / ml, a large number of beating cardiomyocytes were observed, and immunoblot showed significant presence of striated muscle-specific α-actinin.
【０１９３】以上の結果よりジンセノサイドＲｂ１は、
神経細胞に対する場合よりもやや広い濃度域で（０．０
１−１０−４ｆｇ／ｍｌもしくは１−１０４ｆｇ／ｍ
ｌ）心筋細胞のＢｃｌ−ｘＬ発現を上昇せしめ、心筋細
胞を保護する作用を有することが見出された。ところ
で、本発明者ら（阪中、田中）は特願平１０−３６５５
６０、ＰＣＴ／ＪＰ９９／０２５５０（ジンセノサイド
Ｒｂ１からなる脳細胞又は神経細胞保護剤）において、
１ｆｇ／ｍｌ、１００ｆｇ／ｍｌ、１０５ｆｇ／ｍｌの
濃度のジンセノサイドＲｂ１が、アポトーシス様神経細
胞死を抑止するか否かということと、神経細胞のＢｃｌ
−ｘＬ蛋白の発現を促進するか否かということを調べた
結果、１ｆｇ／ｍｌと１００ｆｇ／ｍｌの濃度で有意な
効果を得ている。しかし、実際には１０４ｆｇ／ｍｌの
濃度のジンセノサイドＲｂ１が有意に、心筋細胞のＢｃ
ｌ−ｘＬ蛋白発現を上昇せしめ、心筋細胞の細胞死を抑
止したので、神経細胞においても同様の濃度域（１ｆｇ
／ｍｌから１０４ｆｇ／ｍｌ）でジンセノサイドＲｂ１
がＢｃｌ−ｘＬ蛋白の発現を促進し、アポトーシス様神
経細胞死を抑止する可能性があるものと考えられる。[0193] or more of ginsenoside Rb1 than results,
In a slightly wider concentration range than for neurons (0.0
1-10-4 fg / ml or 1-104 fg / m
l) raised the Bcl-xL expression cardiomyocytes were found to have an effect of protecting cardiomyocytes. By the way, the present inventors (Sakanaka, Tanaka) have disclosed in Japanese Patent Application No. 10-3655.
60, PCT / JP99 / 02550 (a brain cell or nerve cell protective agent comprising ginsenoside Rb1 )
1fg / ml, 100fg / ml, 10 5 fg / ml ginsenoside Rb1 concentration of, and that whether to suppress apoptosis-like nerve cell death, neuronal Bcl
-XL protein results of examining that whether to promote the expression of, to obtain a significant effect at concentrations of 1 fg / ml and 100 fg / ml. In practice, however,10 4 fg / ml concentration of ginsenoside Rb1 is significant, the cardiomyocytes Bc
raised the l-xL protein expression, since abrogated cell death of myocardial cells, similar concentration range also in neurons (1 fg
/ Ml to 104 fg / ml) with ginsenoside Rb1
There promotes the expression of Bcl-xL protein is believed that there is a possibility to suppress apoptosis-like nerve cell death.
【０１９４】１〜１０４ｆｇ／ｍｌという低濃度のジン
セノサイドＲｂ１が心筋細胞における細胞死抑制遺伝子
産物Ｂｃｌ−ｘＬの発現を上昇せしめ、無グルコース条
件下の心筋細胞死を抑止するという本実験結果より、低
濃度のジンセノサイドＲｂ１が心筋細胞の細胞死を伴う
あらゆる疾病（たとえば心筋梗塞、心筋炎、川崎病、心
筋症、心不全、心停止、狭心症等）に効果・効能を示す
と考えられる。また、心臓外科手術時に、人工心肺灌流
液の中に低濃度のジンセノサイドＲｂ１を添加しておく
ことにより、心筋細胞や心臓をより効果的に保護できる
と思われる。もちろん、心肺蘇生術を実施する際にも、
低用量・低濃度のジンセノサイドＲｂ１を静脈内へ投与
することにより、蘇生後の心筋細胞障害を最小限にくい
止めることができる。さらに、低血糖発作に見舞われた
患者、もしくは頻回に低血糖発作を起こす恐れがある患
者に、低濃度のジンセノサイドＲｂ１を静脈内投与、挿
肛投与、舌下投与もしくは点鼻投与しておけば、より効
果的に低血糖による心筋細胞障害を軽減するものと期待
される。もちろん、前述の心筋細胞に対する好ましい効
果は、低用量・低濃度の粗サポニン分画によっても、も
たらされると考えられる。[0194] 1 to 104 fg / ginsenoside Rb1 in a concentration as low as ml is raised the expression of a cell death-suppressing gene productBcl-x L in cardiomyocytes, this experiment that suppress myocardial cell death in glucose-free conditions results from any disease (e.g. myocardial infarction, myocarditis, Kawasaki disease, cardiomyopathy, cardiac failure, cardiac arrest, angina pectoris, etc.) that ginsenoside Rb1 low concentrations involves cell death of cardiomyocytes when indicating the effectiveness and efficacy in Conceivable. Also, during heart surgery, by previously adding ginsenoside Rb1 in low concentrations in the heart-lung perfusate, it appears to cardiomyocytes and heart can be more effectively protected. Of course, when performing cardiopulmonary resuscitation,
By administering to the low doses and low concentrations of ginsenoside Rb1 intravenously, myocardial cell damage after resuscitation can halt minimized. Furthermore, patients with a risk of hypoglycemia episodes hypoglycemic attack patients was hit, or frequent, ginsenoside Rb1 low concentrations administered intravenously,挿肛administration, and administration or nasal administration sublingually If so, it is expected that myocardial cell damage due to hypoglycemia will be reduced more effectively. Of course, the above-mentioned favorable effects on cardiomyocytes are also expected to be brought about by low-dose, low-concentration crude saponin fractionation.
【０１９５】本発明では、薬用人蔘（コウジン末）やジ
ンセノサイドＲｂ１のＢｃｌ−ｘＬ発現増強作用につい
て記載したが、周知のごとくＢｃｌ−２ファミリー蛋白
は、Ｂｃｌ−２、Ｂｃｌ−ｘＬ、Ｂｃｌ−ｗ等の細胞死
抑制因子群とＢａｘ、Ｂａｄ、Ｂｉｄ、Ｂｉｋ等の細胞
死促進因子から構成されている。これらのＢｃｌ−２フ
ァミリー蛋白は臓器特異的ならびに細胞特異的な発現パ
ターンを有することも知られている。従って、神経組織
や心筋細胞に対しては、ジンセノサイドＲｂ１はＢｃｌ
−ｘＬの発現を上昇せしめることが本発明ならびに本発
明者ら（阪中、田中）の既出願特許（特願平１０−３６
５５６０、ＰＣＴ／ＪＰ９９／０２５５０、ジンセノサ
イドＲｂ１からなる脳細胞又は神経細胞保護剤）におい
て見出されているが、他の臓器や細胞においては、ジン
セノサイドＲｂ１がＢｃｌ−ｘＬ以外の細胞死抑制因子
の発現を促進するかもしくは前記の細胞死促進因子の発
現を抑止することもあり得ると考えられる。もちろん、
ジンセノサイドＲｂ１が神経組織や神経細胞において
も、Ｂｃｌ−ｘＬ以外の細胞死抑制因子（たとえばＢｃ
ｌ−２やＢｃｌ−ｗ）の発現を促進するか、もしくは細
胞死促進因子の発現を抑制することも考えられる。ま
た、細胞死抑制遺伝子産物Ｂｃｌ−ｘＬは細胞死のシグ
ナル伝達において、プロカスパーゼ９、カスパーゼ９、
プロカスパーゼ３やカスパーゼ３等の上流に存在するの
で、ジンセノサイドＲｂ１がＢｃｌ−ｘＬの発現を上昇
せしめ、強力に神経細胞死を抑止するという事実は、ジ
ンセノサイドＲｂ１がカスパーゼの活性化をも抑制する
ことを明らかにしている。[0195] In the present invention has been described forBcl-x L expression enhancing action of ginseng (red ginseng powder) or ginsenoside Rb1, Bcl-2 family protein as is wellknown, Bcl-2, Bcl-x L, It is composed of a group of cell death suppressing factors such as Bcl-w and cell death promoting factors such as Bax, Bad, Bid and Bik. It is also known that these Bcl-2 family proteins have organ-specific and cell-specific expression patterns. Thus, for nerve tissue and cardiac muscle cells, ginsenoside Rb1 is Bcl
It allowed to increase the expression of -xL is the invention as well as the present inventors (Sakanaka, Tanaka) prior patent application of the (Japanese Patent Application No. 10-36
5560, PCT / JP99 / 02550, have been found in the brain cells or nerve cell-protective agents) comprising ginsenoside Rb1, in other organs and cells, ginsenoside Rb1 is cell death suppressing nonBcl-x L It is thought that the expression of the factor may be promoted or the expression of the cell death promoting factor may be suppressed. of course,
Also ginsenoside Rb1 is in neuronal tissue and nerve cells, cell death inhibitors of otherBcl-x L (e.g. Bc
It is also conceivable to promote the expression of 1-2 or Bcl-w) or to suppress the expression of a cell death promoting factor. Further, the cell death suppressing gene productBcl-x L in the signal transduction of cell death, procaspase 9, caspase-9,
Since present upstream of such pro-caspase 3 or caspase-3, raised the expression of ginsenoside Rb1 is Bcl-xL, is the fact that strongly suppress neuronal death, even the activation of ginsenoside Rb1 is caspase It is clear that it suppresses.
【０１９６】さて、本発明の先行出願（特願平１１−２
４３３７８、薬用人蔘からなる脳細胞または神経細胞保
護剤）において、本発明者らは薬用人蔘に含有される活
性成分の候補物質をリード化合物として脳細胞又は神経
細胞の保護作用を有する化合物を新規に検索できると記
載したが、本発明においてこのことを実証することを試
みた。そのために、たとえば、本発明の前記構造式（Ｉ
Ｉ）で示されるジヒドロジンセノサイドＲｂ１（ｄｉｈ
ｙｄｒｏ−ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ Ｒｂ１）を用い
た。ジヒドロジンセノサイドＲｂ１は本発明者らの知る
限り、新規化合物であると考えられるが、本発明者が有
している高純度のジンセノサイドＲｂ１をパラジウムチ
ャーコールを触媒として還元（すなわち水素添加）する
ことにより製造することができる。The prior application of the present invention (Japanese Patent Application No. 11-2)
43378, a brain cell or nerve cell protective agent comprising ginseng), the present inventors have developed a compound having a protective effect on brain cells or nerve cells using a candidate active ingredient contained in ginseng as a lead compound. Although it was described that a new search was possible, an attempt was made to demonstrate this in the present invention. For that purpose, for example, the above-mentioned structural formula (I) of the present invention
Dihydroginsenoside Rb1 represented by I) (dih
ydro-ginsenoside Rb1 ) was used. Dihydro ginsenosides side Rb1 is the best of the inventors' knowledge, it is believed to be novel compounds, high purity ginsenoside Rb1 of the present inventors has reduced palladium on charcoal as catalyst (i.e., hydrogenation) It can be manufactured by the following.
【０１９７】ジヒドロジンセノサイドＲｂ１の薬理作用
を解析するため、約１６週齢の雄性ＳＨ−ＳＰラット
（体重３００−３２０ｇ）を使用した。同動物は１２時
間ごとの明暗サイクル室で飼育し、水ならびに餌は自由
摂取とした。吸入麻酔下で同動物の左中大脳動脈皮質枝
（ＭＣＡ）を凝固・切離した。ジヒドロジンセノサイド
Ｒｂ１をＭＣＡ永久閉塞直後に単回静脈内注入し（約６
μｇ）、その後アルザミニ浸透圧ポンプを用いて２４時
間静脈内へ持続注入（約６μｇ／日）した。なお、ＭＣ
Ａを永久閉塞した対照動物（虚血コントロール動物）に
は同量の生理食塩水（ｖｅｈｉｃｌｅ、媒体）のみを静
脈内投与した。ＭＣＡ永久閉塞後２４時間目に、致死量
のペントバルビタールをラットの腹腔内に注入した。同
動物が死亡した直後に脳を摘出し、２ｍｍの厚みの前額
切片を作成した。同切片を、１％の２，３，５−ｔｒｉ
ｐｈｅｎｙｌ−ｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ ｃｈｌｏｒｉ
ｄｅ（ＴＴＣ）溶液に３０分間３７℃で浸漬し、１０％
ホルマリンにて１２時間以上固定した。結果を、図２
７、図２８に示す。図２７は生理食塩水を投与した２例
を、図２８はジヒドロジンセノサイドＲｂ１を静脈内投
与した２例を示す。[0197] To analyze the pharmacological action of dihydro ginsenosides side Rb1, it was used in approximately 16 weeks old male SH-SP rats (body weight 300-320g). The animals were housed in a 12 hour light / dark cycle room with free access to water and food. Under inhalation anesthesia, the left middle cerebral artery cortical branch (MCA) of the animal was coagulated and dissected. A single intravenous infusion of dihydroginsenoside Rb1 immediately after MCA permanent occlusion (approximately 6
μg) followed by continuous infusion (about 6 μg / day) intravenously for 24 hours using an Alzamini osmotic pump. Note that MC
Control animals in which A was permanently occluded (ischemic control animals) were intravenously administered only the same amount of saline (vehicle, vehicle). At 24 hours after permanent MCA occlusion, a lethal dose of pentobarbital was injected intraperitoneally into rats. Immediately after the animal died, the brain was removed and a 2 mm thick forehead section was prepared. The sections were 1% 2,3,5-tri
phenyl-tetrazolium chlori
de (TTC) solution for 30 minutes at 37 ° C, 10%
The cells were fixed in formalin for at least 12 hours. The results are shown in FIG.
7, shown in FIG. Figure 27 is a 2 cases administered with physiological saline, 28 shows two examples was administered intravenously dihydro ginsenosides side Rb1.
【０１９８】図２７に示すごとく、ＭＣＡ永久閉塞後生
理食塩水を投与したラットでは、向かって左側の大脳皮
質に、ＴＴＣで染色されない白色の脳梗塞病巣が明らか
に認められた。一方、図２８に示すごとく、ＭＣＡ永久
閉塞後にジヒドロジンセノサイドＲｂ１を静脈内投与し
たラットでは脳梗塞病巣が顕著に縮小していた。特に、
図２８の右側のカラムにした脳においては、脳梗塞病変
が著しく縮小し、同病変が大脳皮質のごく表層に限局し
ていた。このことは、ジヒドロジンセノサイドＲｂ１が
虚血巣周辺部（ｉｓｃｈｅｍｉｃ ｐｅｎｕｍｂｒａ）
のアポトーシス様神経細胞死を抑止するのみならず、虚
血巣中心部（ｉｓｃｈｅｍｉｃ ｃｏｒｅ）の神経細胞
や脳細胞の壊死（ネクローシス）をも抑止することがる
ことを示している。As shown in FIG. 27, in the rats to which physiological saline was administered after permanent MCA occlusion, a white cerebral infarction lesion not stained with TTC was clearly observed in the left cerebral cortex. On the other hand, as shown in FIG. 28, is a dihydro ginsenosides side Rb1 after MCA permanent occlusion administered intravenously in rats cerebral infarction lesion was markedly reduced. In particular,
In the brain shown in the right column of FIG. 28, the cerebral infarction lesion was remarkably reduced, and the lesion was localized to the very surface layer of the cerebral cortex. This dihydro ginsenosides side Rb1 is ischemic lesion periphery (ischemic penumbra)
Not only apoptosis-like neuronal cell death, but also necrosis (necrosis) of nerve cells and brain cells in the ischemic core.
【０１９９】ジヒドロジンセノサイドＲｂ１もしくはそ
の代謝産物がＭＣＡを永久閉塞されたＳＨ−ＳＰラット
において、ジンセノサイドＲｂ１と同様の脳梗塞縮小作
用を示すという本実験結果は、ジンセノサイドＲｂ１を
リード化合物として利用することにより特に低用量・低
濃度で作用する新規神経細胞保護剤もしくは新規脳細胞
保護剤を作成できることを証明したものである。しか
も、ジヒドロジンセノサイドＲｂ１の有効な静脈内投与
量は、ジンセノサイドＲｂ１の有効な静脈内投与量とほ
ぼ一致しているので、ジンセノサイドＲｂ１と同様にジ
ヒドロジンセノサイドＲｂ１も低濃度、低用量で優れた
神経細胞保護作用、脳細胞保護作用を示すと考えられ
る。もちろん、特願平１０−３６５５６０、ＰＣＴ／Ｊ
Ｐ９９／０２５５０（ジンセノサイドＲｂ１からなる脳
細胞又は神経細胞保護剤）において本発明者らが記載し
たジンセノサイドＲｂ１の効果・効能・用途は、すべて
ジヒドロジンセノサイドＲｂ１も兼ね備えていると考え
られる。すなわち、ジヒドロジンセノサイドＲｂ１は、
ジンセノサイドＲｂ１と同様に細胞死抑制遺伝子産物Ｂ
ｃｌ−ｘＬの発現を上昇せしめ、神経細胞のアポトーシ
スもしくはアポトーシス様神経細胞死を抑止するものと
考えられる。さらに、ジヒドロジンセノサイドＲｂ
１は、ジンセノサイドＲｂ１と同様に、神経細胞死を伴
うあらゆる脳神経疾患（アルツハイマー病、脳卒中、脳
梗塞、脳血栓、脳塞栓、クモ膜下出血、一過性脳虚血発
作、ピック病、脊髄小脳変性症、パーキンソン病、脱随
疾患、舞踏病を始めとするポリグルタミン病、筋萎縮性
側索硬化症、緑内障、老人性黄斑変性症、糖尿病性網膜
症、網膜中心動静脈閉塞症、網膜剥離、網膜色素変性
症、エイズ脳症、肝性脳症、脳炎、脳性マヒ、頭部外
傷、脊髄損傷、シャイドレージャー病、脳腫瘍、中毒性
神経疾患、一酸化炭素中毒、新生児仮死、末梢神経障
害、痙性対麻痺、進行性核上性麻痺、脊髄血管障害、ミ
トコンドリア脳筋症、髄膜炎等）に効果・効能を示すと
される。[0199] dihydroginsenoside in Seno side Rb1 or SH-SP rats its metabolites is permanently occlude the MCA, the experimental result that shows the same stroke reduction effect as ginsenoside Rb1 is utilized ginsenoside Rb1 as lead compounds By doing so, it has been proved that a novel agent for protecting neurons or a new agent for protecting brain cells can be prepared which acts particularly at a low dose and a low concentration. Moreover, effective intravenous dose of dihydro ginsenosides side Rb1, since substantially coincides with an effective intravenous dose of ginsenoside Rb1, similarly dihydro ginsenosides side Rb1 also low concentrations ginsenoside Rb1, at low doses It is thought to have excellent neuronal and brain cell protective effects. Of course, Japanese Patent Application No. 10-365560, PCT / J
In P99 / 02550 (a brain cell or neuronal cell protective agent comprising ginsenoside Rb1 ), the effects, efficacy and use of ginsenoside Rb1 described by the present inventors are considered to also have dihydroginsenoside Rb1 . That is, dihydroginsenoside Rb1 is
Similar to the ginsenoside Rb1 cell death suppressing gene product B
raised the expression of cl-xL, it believed to prevent apoptosis or apoptosis-like nerve cell death of neurons. Further, dihydroginsenoside Rb
1 is, like ginsenoside Rb1 , any cranial nerve disease associated with neuronal cell death (Alzheimer's disease, stroke, cerebral infarction, cerebral thrombosis, cerebral embolism, subarachnoid hemorrhage, transient ischemic attack, Pick's disease, spinal cerebellum Degeneration, Parkinson's disease, paralytic disease, polyglutamine disease including chorea, amyotrophic lateral sclerosis, glaucoma, senile macular degeneration, diabetic retinopathy, central retinal arteriovenous obstruction, retinal detachment , Retinitis pigmentosa, AIDS encephalopathy, hepatic encephalopathy, encephalitis, cerebral palsy, head trauma, spinal cord injury, sydreager disease, brain tumor, toxic neurological disease, carbon monoxide poisoning, neonatal asphyxia, peripheral neuropathy, spasticity Paraplegia, progressive supranuclear palsy, spinal vascular disorders, mitochondrial encephalomyopathy, meningitis, etc.).
【０２００】さて、細胞死抑制遺伝子産物Ｂｃｌ−ｘＬ
は細胞を生かすための最後の砦とも言うべき蛋白質であ
り、脳神経組織のみならず肝臓、脾臓、免疫系組織、循
環系組織、皮膚を始めとする多くの末梢臓器・組織に分
布して、細胞の生存を支持している。従って、ジヒドロ
ジンセノサイドＲｂ１がジンセノサイドＲｂ１と同様
に、Ｂｃｌ−ｘＬの発現を上昇せしめるという前記の推
測に基づけば、ジヒドロジンセノサイドＲｂ１が細胞死
を伴う末梢臓器・組織の疾病の治療・予防・処置に有効
であることを物語っている。このような細胞死を伴う末
梢臓器・組織の疾病の中には、心筋・肝臓・腎臓の虚血
再灌流障害、心筋症、心不全、心筋梗塞、狭心症、末梢
循環不全、褥創、皮膚潰瘍、皮膚の創傷、外傷、熱傷、
放射線障害、電撃症、老化、紫外線障害、脱毛症、乾皮
症、皮脂欠乏症、自己免疫病、免疫不全病、臓器移植後
の拒絶反応、筋ジストロフィー、角膜損傷、放射線障
害、感染症、膠原病、大動脈炎症候群、急性動脈閉塞
症、閉塞性血栓血管炎、消化性潰瘍、閉塞性動脈硬化
症、レイノー病、レイノー症候群、痔疾、血栓性静脈
炎、膵炎、肝炎、腎炎、糖尿病性腎症、糖尿病性心筋
症、舌痛症、糖尿病、動脈硬化症等が含まれる。また、
本発明のジヒドロジンセノサイドＲｂ１は、加齢に伴う
免疫機能低下、循環機能低下、消化機能低下、皮膚機能
低下、性機能減退の諸症状を改善する目的で、健康薬と
しても使用可能である。さらに、ジヒドロジンセノサイ
ドＲｂ１を化粧品の組成物として利用することにより、
加齢に伴う皮膚の老化（皮膚の萎縮、たるみ、ふけ、か
ゆみ、白髪、角層剥離、角質細胞剥離、かさつき、ひび
われ、そばかす、色素沈着、日焼け、乾燥、しわ、しみ
等）の予防・治療・処置にも利用できる。また、ジヒド
ロジンセノサイドＲｂ１は発毛剤、育毛剤、脱毛の進行
予防剤としても利用可能である。もちろん、特願２００
０−１６３０２６号（ジンセノサイドＲｂ１からなる皮
膚組織再生促進剤）に記載されたジンセノサイドＲｂ１
の効果・効能・用途は、すべてジヒドロジンセノサイド
Ｒｂ１にもあてはまる。[0200] Now, cell death-suppressing gene productBcl-x L
Is a protein that can be said to be the last fort to make use of cells.It is distributed not only in brain nerve tissue but also in many peripheral organs and tissues including liver, spleen, immune system, circulatory system, skin, etc. Support their survival. Therefore, similarly dihydro ginsenosides side Rb1 is ginsenoside Rb1, Bcl-xL Based expression to the speculation that allowed to rise to the, treatment and prevention of diseases of the peripheral organs and tissues dihydro ginsenosides side Rb1 is accompanied by cell death・ It shows that it is effective for treatment. Among diseases of peripheral organs / tissues accompanied by such cell death, ischemia / reperfusion injury of myocardium / liver / kidney, cardiomyopathy, heart failure, myocardial infarction, angina, peripheral circulatory insufficiency, pressure sore, skin Ulcers, skin wounds, trauma, burns,
Radiation damage, electrostroke, aging, ultraviolet light damage, alopecia, xeroderma, sebum deficiency, autoimmune disease, immunodeficiency disease, rejection after organ transplantation, muscular dystrophy, corneal damage, radiation damage, infectious disease, collagen disease, Aorticitis syndrome, acute arterial occlusion, obstructive thromboangitis, peptic ulcer, obstructive arteriosclerosis, Raynaud's disease, Raynaud's syndrome, hemorrhoids, thrombophlebitis, pancreatitis, hepatitis, nephritis, diabetic nephropathy, diabetes Sexual cardiomyopathy, tongue pain, diabetes, arteriosclerosis and the like. Also,
Dihydro ginsenosides Side Rb1 of the present invention, the immune dysfunction associated with aging, circulatory hypofunction, gastrointestinal dysfunction, reduced skin function, in order to improve the symptoms of sexual function decline, can also be used as a health drug. Further, by using dihydroginsenoside Rb1 as a cosmetic composition,
Prevention of age-related skin aging (skin atrophy, sagging, dandruff, itching, gray hair, exfoliation of the stratum corneum, exfoliation of keratinocytes, dryness, cracks, freckles, pigmentation, tanning, drying, wrinkles, spots, etc.) It can also be used for treatment and treatment. Further, dihydro ginsenosides side Rb1 is hair growth agents, hair growth agents, can also be utilized as a traveling agent for preventing hair loss. Of course, Japanese Patent Application 200
0-163026 Patent ginsenoside Rb1 described in (skin tissue regeneration-promoting agents comprising ginsenoside Rb1)
Effectiveness, efficacy and usages of all applies to dihydro ginsenosides side Rb1.
【０２０１】特願平１１−２４３３７８、ＰＣＴ／ＪＰ
９９／０６８０４（ジンセノサイドＲｂ１からなる脳血
管再生・再構築促進剤ならびに神経組織二次変性抑止
剤）において、ジンセノサイドＲｂ１の少量静脈内持続
投与が、脳血管再生・再構築促進作用、神経組織二次変
性抑止作用、オリゴデンドロサイトのアポトーシス又は
アポトーシス様細胞死の抑止作用等を介して、寝たきり
の脊髄損傷ラットを起立せしめることを見出した。ジヒ
ドロジンセノサイドＲｂ１がジンセノサイドＲｂ１と同
様に優れた脳梗塞治療効果を示すという本実験結果は、
ジヒドロジンセノサイドＲｂ１が脊髄損傷・頭部外傷・
神経外傷の治療薬となり得ることを物語っている。すな
わち、特願平１１−２４３３７８、ＰＣＴ／ＪＰ９９／
０６８０４（ジンセノサイドＲｂ１からなる脳血管再生
・再構築促進剤ならびに神経組織二次変性抑止剤）にお
いて、本発明者ら（阪中、田中）が記載したジンセノサ
イドＲｂ１の効果・効能・用途は、ジヒドロジンセノサ
イドＲｂ１にも当てはまると言える。もちろん、本発明
のジヒドロジンセノサイドＲｂ１の投与方法としては、
ジンセノサイドＲｂ１と同様に任意の投与経路が選択で
きる。具体的には、ジヒドロジンセノサイドＲｂ１は静
脈内投与剤としてのみならず外用剤や病変部局所注射剤
としても使用可能である。さらに、ジヒドロジンセノサ
イドＲｂ１の投与法として、皮下注射、筋肉注射、眼軟
膏、点眼、点鼻、点耳、吸入、挿肛投与、経口投与、舌
下投与、経皮投与等任意の経路が選択できる。ただし、
ジヒドロジンセノサイドＲｂ１を経口投与剤として使用
する時は、ジヒドロジンセノサイドＲｂ１単独投与では
効果があまり期待できない場合があるので、消化管での
分解を阻止する担体（シェラック、ゼラチン、油層等）
あるいは消化管での吸収を促進する担体にジヒドロジン
セノサイドＲｂ１を混入・封入又は結合させたのちに、
経口投与することが必要になるかもしれない。また、ジ
ヒドロジンセノサイドＲｂ１の代謝産物のうちジヒドロ
ジンセノサイドＲｂ１と同等もしくはそれ以上の効果・
効能を有するものが同定されれば、ジヒドロジンセノサ
イドＲｂ１の適応が期待される前述の疾病に対して、そ
の活性代謝産物を既述の方法で投与することもできる。
また本発明のジヒドロジンセノサイドＲｂ１と高分子化
合物との分散体を作成した後、噴霧乾燥させて任意の投
与経路を選択することも可能である。さらに、高分子化
合物のミクロ粒子にジヒドロジンセノサイドＲｂ１をコ
ーティングしたのちに、任意の投与経路を選択してもよ
い。また、ジヒドロジンセノサイドＲｂ１のプロドラッ
グを作成して、任意の投与経路を選択してもよい。たと
えば、ジヒドロジンセノサイドＲｂ１の水酸基をエステ
ル化してプロドラッグを作成し、脳血液関門を通過せし
めたのちに、内因性エステラーゼで加水分解して脳内へ
のジヒドロジンセノサイドＲｂ１移行量を増やすことも
可能となる。Japanese Patent Application No. 11-243378, PCT / JP
99/06804 in (ginsenoside cerebrovascular regeneration and reconstruction promoter consisting Rb1 and nerve tissue secondary degeneration inhibitor), a small amount continuous intravenous administration of ginsenoside Rb1 is cerebrovascular regeneration and reconstruction-promoting action, nerve tissue It has been found that the bedridden spinal cord-injured rat is erected through the inhibitory action on secondary degeneration and the inhibitory action on oligodendrocyte apoptosis or apoptosis-like cell death. This experimental result that dihydroginsenoside Rb1 shows an excellent cerebral infarction treatment effect similarly to ginsenoside Rb1
Dihydroginsenoside Rb1 causes spinal cord injury, head injury,
It indicates that it can be a therapeutic agent for neurotrauma. That is, Japanese Patent Application No. 11-243378, PCT / JP99 /
In 06804 (a cerebral blood vessel regeneration / remodeling promoter comprising ginsenoside Rb1 and an inhibitor for secondary degeneration of nerve tissue), the effects, indications, and uses of ginsenoside Rb1 described by the present inventors (Osakanaka, Tanaka) are as follows: It said to be true dihydro ginsenosides side Rb1. Of course, the method of administration dihydro ginsenosides Side Rb1 of the present invention,
Any route of administration as well as ginsenoside Rb1 can be selected. Specifically, dihydro ginsenosides side Rb1 can also be used as not without external preparation or lesions topical injections only as an intravenous dosage. Furthermore, as the administration of dihydro ginsenosides side Rb1, subcutaneous injection, intramuscular injection, eye ointments, eye drops, nasal drops, Tenmimi, inhalation,挿肛administration, oral administration, sublingual administration, any route such as transdermal administration selected it can. However,
When using dihydro ginsenosides side Rb1 as an oral dosage, since dihydro ginsenosides side Rb1 effect in single administration may not be expected so much, the carrier to prevent degradation in the digestive tract (shellac, gelatin, oil layer, etc.)
Or after the dihydro ginsenosides side Rb1 was mixed, encapsulated, or coupled to a carrier to promote absorption in the gastrointestinal tract,
Oral administration may be required. Further, dihydro ginsenosides side Rb1 equivalent or more effects-of-dihydro ginsenosides Side Rb1 metabolite
If what has been identified to have efficacy against the aforementioned diseases adaptation dihydro ginsenosides side Rb1 is expected, it is also possible to administer the active metabolite in the method described above.
Also after creating the dispersion of the dihydro ginsenosides side Rb1 and polymer compound of the present invention, it is also possible to select any route of administration by spray drying. Moreover, after coated with dihydro ginsenosides side Rb1 in microparticles of a polymer compound, may be selected any route of administration. Further, by creating a prodrug of dihydro ginsenosides side Rb1, may select any route of administration. For example, to create a prodrug by esterifying the hydroxyl groups of dihydro ginsenosides side Rb1, the After passed through the blood-brain barrier, the endogenous esterases hydrolyze increase dihydro ginsenosides side Rb1 transition amount into the brain It becomes possible.
【０２０２】また、皮膚移植用ケラチノサイト培養シー
トの保護・維持にもジヒドロジンセノサイドＲｂ１が有
効と思われる。その他の移植用臓器・組織（肝臓、腎
臓、心臓、膵臓、肺、消化管、角膜、血管等）について
も、移植手術が実施されるまでの間に低濃度のジヒドロ
ジンセノサイドＲｂ１で浸すか灌流することにより、同
臓器の細胞傷害や血管網の破綻が抑止され移植手術の成
績も向上するものと期待される。さらに、ジヒドロジン
セノサイドＲｂ１は輸血用血球成分・血小板の保護・維
持、凍結卵子あるいは精子の保護・維持、凍結幹細胞の
保護・維持にも有効と思われる。もちろん、ジヒドロジ
ンセノサイドＲｂ１が、本発明において記載されたジン
セノサイドＲｂ１と同様の効果・効能・用途を示すこと
は、容易に推測される。[0202] In addition, dihydro ginsenosides side Rb1 in the protection and maintenance of keratinocytes cultured sheets for skin graft is deemed valid. Other transplant organs and tissues (liver, kidney, heart, pancreas, lung, gut, cornea, blood vessel, etc.) for also, or perfusion transplant surgery immersed in a low concentration of dihydro ginsenosides side Rb1 until carried out By doing so, it is expected that cell injury and vascular network breakdown of the same organ will be suppressed, and the results of transplant surgery will be improved. Furthermore, dihydro ginsenosides side Rb1 protection and maintenance of transfusion blood cells, platelets, protection and maintenance of frozen ova or sperm, seems effective in protecting and maintaining the frozen stem cells. Of course, dihydro ginsenosides side Rb1 is to show similar effects, efficacy and usages ginsenoside Rb1 described in the present invention are readily inferred.
【０２０３】以上のコウジン末を用いた実験結果から、
コウジン末からなる経口投与用Ｂｃｌ−ｘＬ発現増強剤
が、高用量では脳血管性痴呆、脳梗塞、脳出血、クモ膜
下出血、一過性脳虚血発作、神経変性疾患、脱髄疾患、
脳性マヒ、脊髄損傷などの脳・神経疾患の治療、予防、
又は処置に有効であることが明らかにされた。また低用
量のコウジン末を経口投与することにより、肝臓・膵臓
を始めとする末梢臓器において細胞死抑制遺伝子産物Ｂ
ｃｌ−ｘＬ蛋白の発現が増強されることもわかった。従
って、低用量のコウジン末経口投与は、細胞死を伴う末
梢臓器の疾病（心筋症、心不全、心筋梗塞、心筋炎、肝
・腎・心虚血再灌流障害、肝炎、腎炎、糖尿病、免疫不
全病、褥創、皮膚潰瘍、創傷、外傷、放射線障害、紫外
線障害等）にも有効と考えられる。ただし、細胞死を伴
う末梢臓器や末梢組織の疾患に対するコウジン末経口投
与の効果については、少なくとも一部は、本発明者らが
把握できない東洋医学関連論文もしくは漢方医学関連論
文において、既に記載されている可能性もあることをこ
こに付記しておきたい。さらに、前述のジンセノサイド
Ｒｂ１を用いた実験結果から、低用量のジンセノサイド
Ｒｂ１の静脈内持続投与が、脳浮腫の予防・治療・処置
に有効であること、脊髄損傷に伴う褥創に優れた効果を
示すこと、脳神経組織のＢｃｌ−ｘＬ発現を増強するこ
とが明らかにされた。また、低濃度のジンセノサイドＲ
ｂ１がオリゴデンドロサイトの生存を延長し、同細胞の
Ｂｃｌ−ｘＬ発現を上昇せしめること、ならびに心筋細
胞の生存を促進し、同細胞のＢｃｌ−ｘＬ発現を上昇せ
しめることが判明した。それに加えて、低濃度・低用量
の粗サポニン分画の静脈内投与が、優れた脳梗塞治療効
果、脊髄損傷治療効果を発揮することを証明し、同分画
に含有される成分のいずれかが脊髄損傷・頭部外傷・神
経外傷治療用の医薬組成物になることを示した。From the results of experiments using the above powdered ginseng,
For oral administration Bcl-xL expression enhancer consisting of powder red ginseng is, cerebrovascular dementia at higher doses, cerebral infarction, cerebral hemorrhage, subarachnoid hemorrhage, transient ischemic attack, neurodegenerative diseases, demyelinating diseases,
Treatment and prevention of cerebral and neurological diseases such as cerebral palsy and spinal cord injury;
Alternatively, it was found to be effective for treatment. In addition, oral administration of low-dose kojin powder enables cell death-suppressing gene product B in peripheral organs such as liver and pancreas.
It was also found that the expression of the cl-xL protein is enhanced. Therefore, oral administration of low-dose kojin powder to peripheral organs with cell death (cardiomyopathy, heart failure, myocardial infarction, myocarditis, hepatic / renal / cardiac ischemia / reperfusion injury, hepatitis, nephritis, diabetes, immunodeficiency disease) , Pressure sores, skin ulcers, wounds, trauma, radiation damage, ultraviolet damage, etc.). However, the effect of oral administration of kojin on peripheral organs and peripheral tissue diseases accompanied by cell death is at least partially described in Oriental medicine-related papers or Kampo medicine-related papers that the present inventors cannot grasp. I would like to add here that there is a possibility that there is. Furthermore, experimental results using ginsenoside Rb1 described above, continuous intravenous administration of low doses of ginsenoside Rb1 is to be effective in prevention, treatment, and treatment of cerebral edema, excellent pressure sore with spinal cord injury to exhibit the effect, it has been revealed to enhance Bcl-xL expression in brain tissue. In addition, low concentration ginsenoside R
b1 is extended survival of oligodendrocytes, the allowed to increase the Bcl-xL expression in the same cells, and promotes the survival of cardiomyocytes, it was found that allowed to increase the Bcl-xL expression in the cell. In addition, it was demonstrated that intravenous administration of a low-concentration, low-dose crude saponin fraction exerts excellent therapeutic effects on cerebral infarction and spinal cord injury, and any of the components contained in the fraction Is a pharmaceutical composition for treating spinal cord injury, head injury and nerve injury.
【０２０４】最後にジンセノサイドＲｂ１の新規還元化
合物すなわちジヒドロジンセノサイドＲｂ１が、少量静
脈内投与によりジンセノサイドＲｂ１と同様の優れた脳
梗塞治療効果を示すことが判明した。すなわち、ジヒド
ロジンセノサイドＲｂ１が、本発明者らの既出願特許
（特願平１０−３６５５６０、ＰＣＴ／ＪＰ９９／０２
５５０；特願平１１−３４０８５０、ＰＣＴ／ＪＰ９９
／０６８０４）に記載されたジンセノサイドＲｂ１の効
果・効能・用途と同様の効果・効能・用途を有すること
が推測された。もちろん、ジヒドロジンセノサイドＲｂ
１は、これまで他の発明者や研究者により報告されたジ
ンセノサイドＲｂ１の効果・効能・用途をすべて有して
いると考えられる。ジヒドロジンセノサイドＲｂ１を用
いた本実験より、ジンセノサイドＲｂ１をリード化合物
として利用することにより、多くの神経細胞保護剤、脳
細胞保護剤、脳卒中治療薬、神経変性疾患治療薬、脊髄
損傷・頭部外傷・神経外傷治療薬、細胞保護剤等が開発
されることが実証された。一方、本発明で使用されるコ
ウジン末、低濃度・低用量のジンセノサイドＲｂ１、低
濃度・低用量の粗サポニン分画は副作用の極めて少ない
物質として知られている。[0204] Finally, a new reducing compound i.e. dihydro ginsenosides Side Rb1 of ginsenoside Rb1, to exhibit similar superior cerebral infarction therapeutic effect as ginsenoside Rb1 was found with a small amount intravenous administration. That is, dihydro ginsenosides side Rb1 is prior patent application by the present inventors (Japanese Patent Application No. Hei 10-365560, PCT / JP99 / 02
550; Japanese Patent Application No. 11-340850, PCT / JP99
/ 06804), it might have a similar effect, efficacy and usages and effects, efficacy and usages of ginsenoside Rb1 described in. Of course, dihydroginsenoside Rb
No. 1 is considered to have all the effects, indications, and uses of ginsenoside Rb1 reported by other inventors and researchers. From this experiment using dihydro ginsenosides side Rb1, by utilizing the ginsenoside Rb1 as a lead compound, a number of neuronal cell protective agent, brain cell protectant, stroke treatment, neurodegenerative diseases by, spinal cord injury, head It has been demonstrated that therapeutic agents for trauma and nerve trauma, cytoprotective agents and the like are developed. On the other hand, red ginseng powder used in the present invention, ginsenoside Rb 1 in low concentrations and lowdoses, the crude saponin fraction of low concentrations and low doses are known as very few materials side effects.
【０２０５】[0205]
【実施例】次に、具体的な試験例により本発明を詳細に
説明するが、本発明はこれらの具体例に限定されるもの
ではない。Next, the present invention will be described in detail with reference to specific test examples, but the present invention is not limited to these specific examples.
【０２０６】実施例１（コウジン末の脳梗塞前後経口投
与実験） １２〜１３週齢の雄性ＳＨ−ＳＰラット（体重２５０〜
３００ｇ）を使用した。同動物は１２時間ごとの明暗サ
イクル室で飼育し、水ならびに餌は自由摂取とした。同
動物の左中大脳動脈皮質枝（ＭＣＡ）を発明者らの論文
に記載した方法を用いて吸入麻酔下で凝固、切離した
（Ｉｇａｓｅ，Ｋ．，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｅｒｅｂ．
Ｂｌｏｏｄ Ｆｌｏｗ Ｍｅｔａｂ．，１９，２９８−
３０６，１９９９；Ｓａｄａｍｏｔｏ，Ｙ．，ｅｔ ａ
ｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏ
ｍｍｕｎ．，２５３，２６−３２，１９９８）。コウジ
ン末を蒸留水に混入し、ＭＣＡ永久閉塞前１週間、ＭＣ
Ａ永久閉塞後３２日間、１日単回経口投与した（０．６
ｇ／ｋｇ／日、０．７５ｇ／ｋｇ／日、０．９ｇ／ｋｇ
／日、または１．２ｇ／ｋｇ／日１各群ｎ＝５−８）。
なお、ＭＣＡを閉塞した対照動物（虚血コントロール動
物）と、偽手術をした動物には同量の蒸留水のみを経口
投与した。Example 1 (Oral administration experiment before and after cerebral infarction of kojin powder) Male SH-SP rats 12 to 13 weeks old (body weight 250 to
300 g) were used. The animals were housed in a 12 hour light / dark cycle room with free access to water and food. The left middle cerebral artery cortical branch (MCA) of the animal was coagulated and dissected under inhalation anesthesia using the method described in our paper (Igase, K., et al., J. Cereb.
Blood Flow Metab. , 19,298-
306, 1999; Sadamoto, Y .; , Et a
l. , Biochem. Biophys. Res. Co
mmun. , 253, 26-32, 1998). Kojin powder was mixed with distilled water, and one week before MCA permanent occlusion, MC
A Oral administration once daily for 32 days after permanent occlusion (0.6
g / kg / day, 0.75 g / kg / day, 0.9 g / kg
/ Day, or 1.2 g / kg / day, each group n = 5-8).
In addition, the same amount of distilled water alone was orally administered to a control animal in which MCA was occluded (ischemic control animal) and a sham-operated animal.
【０２０７】ＭＣＡ永久閉塞後、発明者らの方法に従っ
て（Ｚａｎｇ，Ｂ．，ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｓｔｒｏｋｅ
Ｃｅｒｅｂｒｏｖａｓｃ．Ｄｉｓ．，７，１−９，１
９９８；Ｉｇａｓｅ，Ｋ．，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｅｒ
ｅｂ．Ｂｌｏｏｄ ＦｌｏｗＭｅｔａｂ．，１９，２９
８−３０６，１９９９；Ｓａｄａｍｏｔｏ，Ｙ．，ｅｔ
ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．
Ｃｏｍｍｕｎ．，２５３，２６−３２，１９９８）、２
週目と４週目にそれぞれ４日間連続で水迷路テストを実
施し、ＳＨ−ＳＰラットの場所学習能力を判定した。そ
の結果を図１に示す。図１の上側は２週目の結果であ
り、同下側は４週目の結果である。また図１中の白丸印
は蒸留水投与虚血群、黒丸印は偽手術群、白四角印はコ
ウジン末０．６ｇ／ｋｇ／日投与虚血群、黒四角印はコ
ウジン末０．７５ｇ／ｋｇ／日投与虚血群、白三角印は
コウジン末０．９ｇ／ｋｇ／日投与虚血群、黒三角印は
コウジン末１．２ｇ／ｋｇ／日投与虚血群を示す。図１
のごとくＭＣＡ永久閉塞後（脳梗塞後）の場所学習障害
が、蒸留水投与虚血群に比べて、コウジン末０．７５ｇ
〜１．２ｇ／ｋｇ／日投与虚血群で有意に改善された。
特にコウジン末０．９ｇ／ｋｇ／日投与虚血群でもっと
も良好な効果がみられた。データは平均値±標準誤差で
示されており、統計解析法はＡＮＯＶＡ＋Ｆｉｓｈｅｒ
のＰＬＳＤによっている。なお、ＳＨ−ＳＰラットの水
泳速度には各群で有意差はみられなかった。After MCA permanent occlusion, following the method of the inventors (Zang, B., et al., J Stroke).
Cerebrovasc. Dis. , 7,1-9,1
998; , Et al. , J. et al. Cer
eb. Blood FlowMetab. , 19,29
8-306, 1999; Sadamoto, Y .; , Et
al. , Biochem. Biophys. Res.
Commun. , 253, 26-32, 1998), 2
The water maze test was performed for four consecutive days on the week and the fourth week, respectively, and the place learning ability of the SH-SP rat was determined. The result is shown in FIG. The upper part of FIG. 1 shows the result of the second week, and the lower part of FIG. 1 shows the result of the fourth week. In FIG. 1, the white circles represent the ischemic group administered with distilled water, the black circles represent the sham operation group, the white squares represent the ischemic group administered with ginseng powder 0.6 g / kg / day, and the black squares represent the ginseng powder 0.75 g / kg. In the ischemic group administered with kg / day, the white triangle indicates the ischemic group administered with kogine powder 0.9 g / kg / day, and the black triangle indicates the ischemic group administered with kojin powder 1.2 g / kg / day. FIG.
As shown in the figure, the place learning disorder after permanent MCA occlusion (after cerebral infarction) was 0.75 g of kojin powder compared with the distilled water-administered ischemic group.
The improvement was significantly improved in the ischemic group administered with １．２1.2 g / kg / day.
In particular, the best effect was observed in the ischemic group administered with kojin powder at 0.9 g / kg / day. Data are shown as mean ± standard error, statistical analysis was ANOVA + Fisher
PLSD. In addition, there was no significant difference in the swimming speed of the SH-SP rats between the groups.
【０２０８】４週目の水迷路テスト終了後に、ＳＨ−Ｓ
Ｐラットを抱水クロラールにて麻酔し、４％パラホルム
アルデヒドを含有する０．１モルリン酸緩衝液で経心的
に灌流固定した。その後、同動物の脳を摘出し大脳皮質
梗塞巣の写真を撮影した。左大脳皮質梗塞面積を左大脳
半球面積で除することにより大脳皮質梗塞比率（％）を
算出した。その結果を図２に示す。データは平均値±標
準誤差で示されており、統計解析法はＭａｎｎ−Ｗｈｉ
ｔｎｅｙ Ｕテストによっている。図２に示されるごと
く、コウジン末０．７５〜１．２ｇ／ｋｇ／日投与虚血
群で蒸留水投与虚血群に比して、大脳皮質梗塞比率も有
意に減少していた。特にコウジン末０．９ｇ／ｋｇ／日
投与虚血群で、最も効果が強く、大脳皮質梗塞比率の平
均値が蒸留水投与虚血群の２分の１以下に減少してい
た。このことから、実際の脳梗塞体積は、コウジン末
０．９ｇ／ｋｇ／日の経口投与により約４分の１程度に
縮小したことになる。After the water maze test of the fourth week, SH-S
P rats were anesthetized with chloral hydrate, and perfused and fixed transcardially with 0.1 M phosphate buffer containing 4% paraformaldehyde. Thereafter, the brain of the animal was excised and a photograph of the cerebral cortical infarction was taken. The cerebral cortical infarction ratio (%) was calculated by dividing the left cerebral cortical infarct area by the left cerebral hemispheric area. The result is shown in FIG. The data are shown as mean ± standard error, and the statistical analysis method is Mann-Whi.
It depends on the tney U test. As shown in FIG. 2, the cerebral cortical infarction ratio was significantly reduced in the ischemic group administered with kojin powder at 0.75 to 1.2 g / kg / day as compared with the ischemic group administered with distilled water. In particular, in the ischemic group administered with kojin powder at 0.9 g / kg / day, the effect was the strongest, and the average value of the cerebral cortical infarction ratio was reduced to half or less of the ischemic group administered with distilled water. This indicates that the actual volume of cerebral infarction was reduced to about one-fourth by oral administration of ginseng powder at 0.9 g / kg / day.
【０２０９】図３上段に蒸留水投与虚血群の脳梗塞巣
（４例）、図３下段にコウジン末０．９ｇ／ｋｇ／日投
与虚血群の脳梗塞巣（４例）を示す。また図４に本実験
結果をまとめた模式図を示す。蒸留水投与虚血群では脳
梗塞病巣部が大きく脳浮腫もみられるが、コウジン末投
与虚血群においては脳梗塞病巣部が縮小して脳浮腫も軽
減しており、この結果水迷路テストにおいて目的のプラ
ットホームに短時間で到達している。[0209] The upper part of Fig. 3 shows cerebral infarction lesions of the ischemic group administered with distilled water (four cases), and the lower part of Fig. 3 shows cerebral infarction lesions of the ischemic group administered with kojin powder at 0.9 g / kg / day (four cases). FIG. 4 is a schematic diagram summarizing the results of this experiment. In the ischemic group to which distilled water was administered, cerebral infarction lesions were large and cerebral edema was also observed, but in the ischemic group to which kojin powder was administered, cerebral infarction lesions were reduced and cerebral edema was reduced. Platform in a short time.
【０２１０】実施例２（コウジン末の脳梗塞後経口投与
実験） １２〜１３週齢の雄性ＳＨ−ＳＰラット（体重２５０〜
３００ｇ）の左中大脳動脈皮質（ＭＣＡ）を吸入麻酔下
で凝固・切離した後に、コウジン末を０．９ｇ／ｋｇ／
日の用量で１日単回３２日間経口投与した（ｎ＝７）。
なお、ＭＣＡを閉塞した対照動物（虚血コントロール動
物）には、蒸留水のみを投与した（ｎ＝８）。Example 2 (Oral administration experiment after cerebral infarction of kojin powder) Male SH-SP rats 12 to 13 weeks old (body weight 250 to
300 g) of the left middle cerebral artery cortex (MCA) was coagulated and dissected under inhalation anesthesia.
Oral administration once daily for 32 days at a daily dose (n = 7).
Control animals in which MCA was occluded (ischemic control animals) were administered only distilled water (n = 8).
【０２１１】ＭＣＡ永久閉塞後、発明者らの方法に従っ
て（Ｚａｎｇ，Ｂ．，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｓｔｒｏｋｅ
Ｃｅｒｅｂｒｏｖａｓｃ．Ｄｉｓ．，７，１−９，１
９９８；Ｉｇａｓｅ，Ｋ．，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｅｒ
ｅｂ．Ｂｌｏｏｄ ＦｌｏｗＭｅｔａｂ．，１９，２９
８−３０６，１９９９；Ｓａｄａｍｏｔｏ，Ｙ．，ｅｔ
ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．
Ｃｏｍｍｕｎ．，２５３，２６−３２，１９９８）、２
週目と４週目にそれぞれ４日間連続で水迷路テストを実
施し、ＳＨ−ＳＰラットの場所学習能力を判定した。そ
の結果を図５を示す。図５の上段は２週目の結果であ
り、同下段は４週目の結果である。また図５の白丸印は
蒸留水投与虚血群（ｎ＝８）、黒四角印はコウジン末
０．９ｇ／ｋｇ／日投与虚血群（ｎ＝８）を示す。参考
として、図１で用いた偽手術群の実験値を黒丸印で示
す。図５のごとくＭＣＡ永久閉塞後（脳梗塞後）の場所
学習障害が、コウジン末０．９ｇ／ｋｇ／日の虚血後経
口投与で蒸留水注入虚血群に比べて有意に改善された。
特に、ＭＣＡ閉塞後４週目に良好な効果がみれれた。デ
ータは平均値±標準誤差で示されており、統計解析法は
ＡＮＯＶＡ＋ＦｉｓｈｅｒのＰＬＳＤによっている。After MCA permanent occlusion, following our method (Zang, B., et al., J. Stroke).
Cerebrovasc. Dis. , 7,1-9,1
998; , Et al. , J. et al. Cer
eb. Blood FlowMetab. , 19,29
8-306, 1999; Sadamoto, Y .; , Et
al. , Biochem. Biophys. Res.
Commun. , 253, 26-32, 1998), 2
The water maze test was performed for four consecutive days on the week and the fourth week, respectively, and the place learning ability of the SH-SP rat was determined. FIG. 5 shows the result. The upper part of FIG. 5 shows the results of the second week, and the lower part of FIG. 5 shows the results of the fourth week. In FIG. 5, white circles indicate the ischemic group administered with distilled water (n = 8), and black squares indicate the ischemic group administered with ginseng powder at 0.9 g / kg / day (n = 8). For reference, the experimental values of the sham operation group used in FIG. 1 are indicated by black circles. As shown in FIG. 5, the impairment of learning after the permanent occlusion of MCA (after cerebral infarction) was significantly improved by the oral administration after the ischemia at a dose of 0.9 g / kg / day of powdered ginseng compared with the ischemia group injected with distilled water.
In particular, good effects were seen 4 weeks after MCA occlusion. Data are shown as mean ± standard error, statistical analysis is by ANOVA + Fisher's PLSD.
【０２１２】４週目の水迷路テスト終了後に、ＳＨ−Ｓ
Ｐラットを抱水クロラールにて麻酔し、４％パラホルム
アルデヒドを含有する０．１モルリン酸緩衝液で経心的
に灌流固定した。その後、同動物の脳を摘出し大脳皮質
梗塞巣の写真を撮影した。左大脳半球面積と左大脳皮質
梗塞面積を、写真上で画像解析装置を用いて計測し、左
大脳皮質梗塞面積を左大脳半球面積で除することにより
大脳皮質梗塞比率（％）を算出した。その結果を図６に
示す。データは平均値±標準誤差で示されており、統計
解析法はＭａｎｎ−Ｗｈｉｔｎｅｙ Ｕテストによって
いる。図６に示されるごとく、コウジン末０．９ｇ／ｋ
ｇ／日投与虚血群で蒸留水投与虚血群に比して、大脳皮
質梗塞比率も有意に減少していた。After the end of the fourth week of the water maze test, the SH-S
P rats were anesthetized with chloral hydrate, and perfused and fixed transcardially with 0.1 M phosphate buffer containing 4% paraformaldehyde. Thereafter, the brain of the animal was excised and a photograph of the cerebral cortical infarction was taken. The left cerebral hemisphere area and the left cerebral cortical infarct area were measured on a photograph using an image analyzer, and the cerebral cortical infarction ratio (%) was calculated by dividing the left cerebral cortical infarct area by the left cerebral hemispheric area. FIG. 6 shows the result. Data are shown as mean ± standard error, and statistical analysis was performed by the Mann-Whitney U test. As shown in FIG. 6, kogine powder 0.9 g / k
The cerebral cortical infarction ratio was also significantly reduced in the ischemic group administered g / day compared with the ischemic group administered distilled water.
【０２１３】実施例３（高用量コウジン末による神経組
織内Ｂｃｌ−ｘＬ蛋白発現増強作用解析実験） コウジン末の経口投与が神経組織におけるＢｃｌ−ｘＬ
蛋白の発現を増加させるかどうか、スナネズミの一過性
前脳虚血モデルを用いて調べた。本発明者らの既発表の
論文において（Ｗｅｎ，Ｔ．−Ｃ．，ｅｔ ａｌ．，
Ｊ．Ｅｘｐ．Ｈｅｄ．，１８８，６３５−６４９，１９
９８）、本発明者らは一過性前脳虚血後の海馬ＣＡ１領
域においてＢｃｌ−ｘＬ蛋白の発現量を調べる実験系を
確立しているので、この系を用いてコウジン末経口投与
の効果を検討した。ところで、図７に示すように、スナ
ネズミに５分間の一過性前脳虚血を負荷する１週間前よ
り１日単回、７日間コウジン末を０．９ｇ／ｋｇ／日又
は１．５ｇ／ｋｇ／日の用量で経口投与しておくと、蒸
留水投与虚血群に比べて海馬ＣＡ１領域の神経細胞死が
有意に予防され、受動的回避学習実験の反応潜時も延長
することを、本発明者の１人（阪中）はすでに論文とし
て発表している（Ｗｅｎ，Ｔ−Ｃ．，ｅｔ ａｌ．，Ａ
ｃｔａ Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌ．，９１，１５−２
２，１９９６）。特に、コウジン末１．５ｇ／ｋｇ／日
投与虚血群で０．９ｇ／ｋｇ／日投与虚血群よりも良好
な効果が見られるので、本実験ではコウジン末を１．５
ｇ／ｋｇ／日の用量で、５分間の一過性前脳虚血を負荷
する１週間前より１日単回７日間経口投与し、５分間虚
血後さらにコウジン末を経口投与した（ｎ＝４）。最後
のコウジン末投与から２４時間目に海馬ＣＡ１領域の組
織を採取した。その後電気泳動用サンプル緩衝液で細胞
を溶解し、電気泳動を実施した。泳動により分離された
蛋白をさらにニトロセルロース膜に転写し、抗Ｂｃｌ−
ｘＬ蛋白抗体を用いてウエスタンブロッティングを行っ
た。偽手術動物（ｎ＝４）ならびに５分間の一過性前脳
虚血を負荷した対照動物（虚血コントロール動物、ｎ＝
４）には、同量の蒸留水のみを経口投与した。また、
１．５ｇ／ｋｇ／日という高用量のコウジン末経口投与
が、末梢臓器のＢｃｌ−ｘＬ蛋白発現に影響を与えるか
どうか調べるため、肝臓と脾臓を採取して、同様の手順
でウエスタンブロッティングを実施した。以上の実験手
順の詳細は発明者らの既報（Ｗｅｎ，Ｔ．−Ｃ．，ｅｔ
ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１８８，６３５−６
４９，１９９８）に記述されている。結果を図８に示
す。また、抗Ｂｃｌ−ｘＬ蛋白抗体と反応するバンドを
画像解析装置で定量化した。結果を図９に示す。Example 3 (Experiment for Analyzing Bcl-xL Protein Expression in Nerve Tissue by High-Dose Kojin Powder) Oral administration of kojin powder resulted in Bcl-xL in neural tissue
The increase in protein expression was examined using a gerbil transient forebrain ischemia model. In our published papers (Wen, T.-C., et al.,
J. Exp. Hed. , 188, 635-649, 19
98), the present inventors therefore have established an experimental system to study the expression level of Bcl-xL protein in the hippocampus CA1 region after transient forebrain ischemia, the red ginseng powder orally using this system The effect was examined. By the way, as shown in FIG. 7, gerbils were given 0.9 g / kg / day or 1.5 g / kg of ginseng powder once a day for 7 days, one week before one week of transient cerebral ischemia loading for 5 minutes. Oral administration at a dose of kg / day significantly prevents neuronal cell death in the hippocampal CA1 region and prolongs the response latency of passive avoidance learning experiments, compared to distilled water-administered ischemic groups. One of the present inventors (Sakanaka) has already published a paper (Wen, TC, et al., A).
cta Neuropathol. , 91, 15-2
2, 1996). In particular, in the ischemic group administered with ginseng powder 1.5 g / kg / day, a better effect is seen than in the ischemic group administered with ginseng powder 0.9 g / kg / day.
At a dose of g / kg / day, oral administration was performed once a day for 7 days once a day from one week before the application of transient forebrain ischemia for 5 minutes, and kojin powder was further administered orally after 5 minutes of ischemia (n = 4). Twenty-four hours after the last administration of kojin powder, tissue in the CA1 region of the hippocampus was collected. Thereafter, the cells were lysed with a sample buffer for electrophoresis, and electrophoresis was performed. The protein separated by the electrophoresis was further transferred to a nitrocellulose membrane, and the anti-Bcl-
Western blotting was performed using xL protein antibody. Sham-operated animals (n = 4) as well as control animals loaded with transient forebrain ischemia for 5 minutes (ischemic control animals, n = 4)
In 4), only the same amount of distilled water was orally administered. Also,
1.5 g / kg / day red ginseng powder oral administration of doses as high as is, to see if affects the Bcl-xL protein expression in peripheral organs, the liver and spleens were harvested and western blotting in the same procedure Carried out. The details of the above experimental procedure are described in the previous report of the inventors (Wen, T.-C., et.
al. , J. et al. Exp. Med. , 188, 635-6
49, 1998). FIG. 8 shows the results. Further, a band reacting with the anti-Bcl-xL protein antibody was quantified by an image analyzer. FIG. 9 shows the results.
【０２１４】図８に示すごとく、コウジン末を１．５ｇ
／ｋｇ／日の用量でスナネズミに５分間の一過性前脳虚
血を負荷する１週間前より１日単回、７日間経口投与し
虚血負荷直後にも同量のコウジン末を経口投与すると、
２４時間後海馬ＣＡ１領域におけるＢｃｌ−ｘＬ蛋白発
現量は、偽手術群ならびに蒸留水投与虚血群に比べて、
全例で増加していた。この抗Ｂｃｌ−ｘＬ蛋白抗体と反
応するバンドを画像解析装置で定量化した結果、図９に
示すごとく、コウジン末の経口投与が海馬ＣＡ１領域に
おけるＢｃｌ−ｘＬ蛋白発現量を有意に増加させること
が判明した。しかし、このような高用量のコウジン末を
経口投与しても肝臓や脾臓におけるＢｃｌ−ｘＬ蛋白発
現量は増加しなかった。統計解析法はＡＮＯＶＡ＋Ｓｃ
ｈｅｆｆｅのｐｏｓｔ ｈｏｃ ｔｅｓｔによってい
る。[0214] As shown in FIG.
Gerbils were orally administered once daily for 7 days from 1 week before transient cerebral ischemia was loaded to gerbils at a dose of / kg / day, and the same amount of kojin powder was orally administered immediately after ischemic loading Then
Twenty-four hours later, the expression level of Bcl-xL protein in the hippocampal CA1 region was higher than that in the sham-operated group and the distilled water-administered ischemia group.
It increased in all cases. As a result of quantifying the band reacting with the anti-Bcl-xL protein antibody with an image analyzer, as shown in FIG. 9, oral administration of kojin powder significantly increased the expression level of Bcl-xL protein in the hippocampal CA1 region. It has been found. However, Bcl-xL protein expression of the red ginseng powder of such high doses in the liver and spleen be administered orally did not increase. Statistical analysis method is ANOVA + Sc
Heffe's post hoc test.
【０２１５】実施例４（低用量コウジン末経口投与によ
る肝臓・脾臓内Ｂｃｌ−ｘＬ蛋白発現増強作用解析実
験） 発明者らは次に、低用量のコウジン末を１週間よりも長
期にわたり経口投与すれば海馬ＣＡ１領域におけるＢｃ
ｌ−ｘＬ蛋白発現量が増加するかどうか調べた。このた
め、たとえば２００ｍｇ／ｋｇ／日の用量で、スナネズ
ミに５分間の一過性前脳虚血を負荷する４週間前より１
日単回経口投与し、５分間虚血直後にさらに単回経口投
与した（ｎ＝４）。２４時間後に海馬ＣＡ１領域を採取
し、図８に示した実験同様抗Ｂｃｌ−ｘＬ蛋白抗体によ
るウエスタンブロッティングを実施した。偽手術動物な
らびに５分間の一過性前脳虚血を負荷した対照動物（虚
血コントロール動物）には、同量の蒸留水のみを経口投
与した（各群ｎ＝４）。また、２００ｍｇ／ｋｇ／日の
コウジン末経口投与が、末梢臓器のＢｃｌ−ｘＬ蛋白発
現に影響を与えるかどうか調べるため、肝臓と脾臓を採
取して、同様の手順でウエスタンブロッティングを実施
した（各群ｎ＝４）。[0215] Example 4 (low-dose red ginseng powder orally by the liver, spleen in Bcl-xL protein expression enhancing action Analysis Experimental) We then orally administered red ginseng powder of the low dose over a long period than 1 week Bc in hippocampal CA1 area
l-xL protein expression levels were examined whether or not to increase. Thus, for example, at a dose of 200 mg / kg / day, gerbils are 1 week more than 4 weeks before challenge with transient forebrain ischemia for 5 minutes.
A single oral administration was carried out daily, and a single oral administration was performed immediately after ischemia for 5 minutes (n = 4). Hippocampal CA1 region were harvested after 24 hours, was performed Western blotting with experiment similar anti Bcl-xL protein antibody shown in FIG. Sham-operated animals and control animals loaded with transient forebrain ischemia for 5 minutes (ischemic control animals) were orally administered only the same amount of distilled water (n = 4 in each group). Further, red ginseng powder oral administration of 200 mg / kg / day, to see if affects the Bcl-xL protein expression in peripheral organs, the liver and spleen were collected and conducted Western blotting in the same procedure ( Each group n = 4).
【０２１６】しかしながらコウジン末を２００ｍｇ／ｋ
ｇ／日の用量で４週間経口投与しても海馬ＣＡ１領域に
おけるＢｃｌ−ｘＬ蛋白の発現量には有意な増加は認め
られなかった。また、２００ｍｇ／ｋｇ／日の用量でコ
ウジン末を５分虚血前４週間、１日単回経口投与し、さ
らに５分虚血後同じ用量で一週間コウジン末を経口投与
しても、スナネズミの受動的回避学習障害ならびに海馬
ＣＡ１領域の神経細胞死は軽減されなかった。このこと
は低用量のコウジン末経口投与によりＢｃｌ−ｘＬ蛋白
発現量の増加が誘導されなければ、神経細胞保護効果も
見られないことを物語っている。However, kojin powder was 200 mg / k
A significant increase in the expression level of Bcl-xL protein be administered 4 weeks oral at doses of g / day in the hippocampal CA1 region were observed. Even if ginseng powder was orally administered once a day at a dose of 200 mg / kg / day for 5 minutes before ischemia for 5 weeks before ischemia, and then ginseng powder was orally administered at the same dose for 5 weeks after ischemia for 5 minutes. Did not reduce passive avoidance learning impairment as well as neuronal death in the hippocampal CA1 area. This is telling that no to be induced increase in Bcl-xL protein expression level by red ginseng powder oral administration of low dose, neuroprotective effect observed.
【０２１７】前述のごとく、２００ｍｇ／ｋｇ／日の用
量でコウジン末を、スナネズミに脳虚血を負荷する前に
４週間経口投与しても、海馬ＣＡ１領域でのＢｃｌ−ｘ
Ｌ蛋白発現量は増加しなかったが同量のコウジン末を同
様のスケジュールで経口投与すると、図１０及び図１１
に示すごとく肝臓や脾臓におけるＢｃｌ−ｘＬ蛋白発現
量が有意に増加した。統計解析法はＡＮＯＶＡ＋Ｓｃｈ
ｅｆｆｅのｐｏｓｔｈｏｃ ｔｅｓｔによっている。As described above, kojin powder was orally administered at a dose of 200 mg / kg / day for 4 weeks before cerebral ischemia was applied to gerbils.
The L protein expression level did not increase, but when the same amount of kojin powder was orally administered on the same schedule, the results were as shown in FIG. 10 and FIG.
As shown in the figure, the expression level of Bcl-xL protein in the liver and spleen significantly increased. Statistical analysis method is ANOVA + Sch
It depends on the post post test of effe.
【０２１８】実施例５（高用量コウジン末の経口投与に
よる海馬ＣＡ１神経細胞の長期変性抑止効果） スナネズミの脳温を３７℃±０．２℃に維持した状態で
３分間両側総頚動脈の血流を遮断し、再灌流させると、
１週間後に海馬ＣＡ１領域の神経細胞が約半数死に至る
ことを発明者の一人はすでに発表している（Ｓａｋａｎ
ａｋａ，Ｍ．，ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａ
ｃａｄ．ＵＳＡ，９５，４６３５−４６４０，１９９
８）。しかも、この時点で生存していると考えられる海
馬ＣＡ１領域の神経細胞において、アポトーシス様細胞
死の指標である核の断片化がさらに進行中であること
が、ＴＵＮＥＬ染色法により発明者らは確認している
（Ｗｅｎ，Ｔ．−Ｃ．，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍ
ｅｄ．，１８８，６３５−６４９，１９９８；Ｐｅｎ
ｇ，Ｈ．，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｅｒｅｂ．Ｂｌｏｏｄ
Ｆｌｏｗ Ｍｅｔａｂ．，１８，３４９−３６０，１
９９８）。従って３分間の一過性前脳虚血を負荷された
スナネズミの海馬ＣＡ１領域では、５分間虚血を負荷し
た場合と異なり、虚血後１週目以降も神経細胞変性が進
行することが明らかにされている。本発明者らは、この
ように比較的長期にわたって神経細胞死が進行する３分
間の一過性前脳虚血モデルを用いて、コウジン末を虚血
後４週間経口投与したときの効果を調べた。Example 5 (Effects of Oral Administration of High-Dose Kojin Powder on Long-Term Degeneration of Hippocampal CA1 Neurons) Blood Flow in Bilateral Common Carotid Arteries for 3 Minutes While Maintaining a Gerbil Temperature at 37 ° C. ± 0.2 ° C. And reperfusion,
One week, one of the inventors has already reported that one week later, neurons in the hippocampal CA1 area die about half. (Sakan
aka, M .; , Et al. Proc. Natl. A
cad. USA, 95, 4635-4640, 199
8). In addition, the inventors confirmed by TUNEL staining that the nuclear fragmentation, which is an indicator of apoptosis-like cell death, is further in progress in neurons in the hippocampal CA1 region, which are considered to be alive at this time. (Wen, T.-C., et al., J. Exp. M.
ed. , 188, 635-649, 1998; Pen.
g, H .; , Et al. , J. et al. Cereb. Blood
Flow Metab. , 18, 349-360, 1
998). Therefore, in the hippocampus CA1 region of gerbils loaded with transient forebrain ischemia for 3 minutes, neuronal degeneration progresses even after the first week after ischemia, unlike the case of loading ischemia for 5 minutes. Has been. The present inventors examined the effects of oral administration of kojin powder for 4 weeks after ischemia using a transient forebrain ischemia model for 3 minutes in which nerve cell death progresses for a relatively long time as described above. Was.
【０２１９】発明者らの方法に準じて（Ｓａｋａｎａｋ
ａ，Ｍ．，ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａ
ｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９５，４６３５−４６４０，１９
９８；Ｗｅｎ，Ｔ．−Ｃ．，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｅｘ
ｐ．Ｍｅｄ．，１８８，６３５−６４９，１９９８；Ｐ
ｅｎｇ，Ｈ．，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｅｒｅｂ．Ｂｌｏ
ｏｄ Ｆｌｏｗ Ｍｅｔａｂ．，１８，３４９−３６
０，１９９８）、吸入麻酔下でスナネズミの脳温を３７
℃±０．２℃に維持しながら両側総頚動脈血流を３分間
遮断した。同動物が麻酔から覚醒したのちに、コウジン
末を１．５ｇ／ｋｇ／日の用量で１日単回２８日間経口
投与した（ｎ＝１１）。偽手術動物（ｎ＝１２）と３分
間の前脳虚血を負荷した対照動物（虚血コントロール動
物）（ｎ＝８）には、同量の蒸留水のみを経口投与し
た。その後、ステップダウン型受動的回避学習実験を実
施して、同動物をペントバルビタール麻酔下で４％パラ
ホルムアルデヒド及び２．５％グルタルアルデヒド含有
リン酸緩衝液を用いて経心的に灌流固定した。脳を摘出
したのち、パラフィンに包埋し、５μｍの厚みのパラフ
ィン切片を作成した。各動物の海馬ＣＡ１領域１ｍｍあ
たりの神経細胞密度を発明者らの方法により計測した
（Ｓａｋａｎａｋａ，Ｍ．，ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．
Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９５，４６３５
−４６４０，１９９８；Ｗｅｎ，Ｔ．−Ｃ．，ｅｔ ａ
ｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１８８，６３５−６４
９，１９９８；Ｐｅｎｇ，Ｈ．，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃ
ｅｒｅｂ．Ｂｌｏｏｄ Ｆｌｏｗ Ｍｅｔａｂ．，１
８，３４９−３６０，１９９８）。以下に前掲の論文で
記述したステップダウン型受動的回避学習実験の概略を
記述する。３分虚血後２８日目にスナネズミを受動的回
避学習実験装置の安全域（プラットホーム）に置くと、
当初スナネズミは何度か下のグリッド部に降りるが、そ
の都度電撃刺激を受けて安全域に戻る。５分間の訓練施
行中に、多くのスナネズミは安全域をとどまるようにな
る。２４時間後、グリッド部の電源を切った状態で、再
びスナネズミを安全域に置き、グリッド部に降りるまで
の時間（反応潜時）を測定して、同動物の学習能力の指
標とした。According to the method of the present inventors (Sakanak)
a, M. , Et al. Proc. Natl. Aca
d. Sci. USA, 95, 4635-4640, 19
98; Wen, T .; -C. , Et al. , J. et al. Ex
p. Med. , 188, 635-649, 1998; P
eng, H .; , Et al. , J. et al. Cereb. Blo
od Flow Metab. , 18, 349-36
0, 1998), the brain temperature of gerbils was 37
The bilateral common carotid artery blood flow was shut off for 3 minutes while maintaining the temperature at ± 0.2 ° C. After the animal awoke from anesthesia, kojin powder was orally administered at a dose of 1.5 g / kg / day once a day for 28 days (n = 11). Sham-operated animals (n = 12) and control animals (ischemic control animals) (n = 8) loaded with forebrain ischemia for 3 minutes were orally administered only the same amount of distilled water. Thereafter, a step-down passive avoidance learning experiment was performed, and the animals were perfused and fixed transcardially under pentobarbital anesthesia using a phosphate buffer containing 4% paraformaldehyde and 2.5% glutaraldehyde. After excision of the brain, it was embedded in paraffin to prepare a paraffin section having a thickness of 5 μm. The nerve cell density per 1 mm of hippocampal CA1 area of each animal was measured by the method of the present inventors (Sakanaka, M., et al., Proc.
Natl. Acad. Sci. USA, 95, 4635
-4640, 1998; -C. , Et a
l. , J. et al. Exp. Med. , 188, 635-64
9, 1998; Peng, H .; , Et al. , J. et al. C
ereb. Blood Flow Metab. , 1
8, 349-360, 1998). The outline of the step-down passive avoidance learning experiment described in the above paper is described below. When gerbils were placed in the safety zone (platform) of the passive avoidance learning experiment device on day 28 after 3 minutes of ischemia,
At first, the gerbil descends to the lower grid part several times, but returns to the safe area by receiving electric shock each time. Many gerbils stay within a safe margin during the five minute training session. Twenty-four hours later, the gerbils were again placed in the safety zone with the grid section turned off, and the time until the gerbils descended to the grid section (reaction latency) was measured and used as an index of the learning ability of the animal.
【０２２０】結果を図１２、図１３に示す。図１２の
（Ａ）は受動的回避実習実験の反応潜時を、図１２の
（Ｂ）は海馬ＣＡ１領域１ｍｍあたりの神経細胞密度を
示す。図１２（Ａ）に示すごとく、コウジン末を３分虚
血後４週間経口投与すると、受動的回避学習実験の反応
潜時が蒸留水投与虚血群に比べて有意に延長した。ま
た、図１２（Ｂ）に示すごとくコウジン末の経口投与に
より、海馬ＣＡ１領域の神経細胞密度も蒸留水投与虚血
群に比べて有意に増加していた。図１３の（Ａ）は偽手
術動物、（Ｂ）は蒸留水投与虚血動物、（Ｃ）はコウジ
ン末投与虚血動物の、海馬ＣＡ１領域光学顕微鏡をそれ
ぞれ示す。図１３に示すごとく、偽手術動物（Ａ）に比
べて、蒸留水投与虚血動物（Ｂ）では３分虚血後、１週
間目以後も神経細胞がさらに変性脱落し（死に至り）、
虚血後１週間に生存していた正常の２分の１程度の海馬
ＣＡ１神経細胞が、虚血後２８日目にはさらに正常の４
分の１前後まで減少することがわかった。しかし、コウ
ジン末を３分虚血負荷後から２８日間経口投与しておく
と（Ｃ）、虚血後一週間目から２８日目までに起こる神
経細胞死が有意に抑止されることが判明した。[0220] The results are shown in Figs. FIG. 12A shows the response latency of the passive avoidance training experiment, and FIG. 12B shows the nerve cell density per 1 mm of the hippocampal CA1 area. As shown in FIG. 12 (A), when ginseng powder was orally administered for 3 weeks after ischemia for 3 minutes, the response latency of the passive avoidance learning experiment was significantly prolonged as compared with the ischemia group administered with distilled water. Further, as shown in FIG. 12 (B), the oral administration of kojin powder also significantly increased the nerve cell density in the hippocampal CA1 region as compared with the distilled water-administered ischemic group. 13A shows a hippocampal CA1 region optical microscope of a sham-operated animal, FIG. 13B shows an ischemic animal administered with distilled water, and FIG. 13C shows an ischemic animal administered with kojin powder. As shown in FIG. 13, compared to the sham-operated animal (A), the distilled water-administered ischemic animal (B) exhibited further degeneration and loss of neurons (death) even after 1 week after ischemia for 3 minutes,
About one-half of normal hippocampal CA1 neurons that survived one week after ischemia became more normal at 28 days after ischemia.
It was found to decrease to about one-half. However, when kojin powder was orally administered for 3 days after ischemic load for 3 minutes (C), it was found that nerve cell death occurring from 1 week to 28 days after ischemia was significantly suppressed. .
【０２２１】実施例６（コウジン末経口投与による舞踏
病の治療、予防及び処置） 舞踏病（ハンチントン病）は神経変性疾患の中でも代表
的な単一遺伝子病として知られており、ポリグルタミン
をコードするＣＡＧのくり返し配列が病因であると考え
られているが、その治療法はいまだ開発されていない。
舞踏病の責任遺伝子であるミュータントハンチンチン
（ｍｕｔａｎｔ ｈｕｎｔｉｎｇｔｉｎ）を線状体由来
の培養神経細胞に導入（ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ）す
ると、同細胞はアポトーシス様神経細胞死に陥る。しか
し、ミュータントハンチンチン（ｍｕｔａｎｔ ｈｕｎ
ｔｉｎｇｔｉｎ）とともにＢｃｌ−ｘＬ蛋白を培養神経
細胞に強制発現しておくと、同細胞の死がほぼ完全に抑
止されることが報告されている（Ｓａｕｄｏｕ，Ｆ．，
ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ，９５，５５−６６，１９９
８）。従って脳神経組織におけるＢｃｌ−ｘＬ蛋白発現
増強作用を有するコウジン末を、舞踏病発病前あるいは
発病後に経口投与すれば、効果・効能を示す可能性が高
い。また舞踏病以外のポリグルタミン病（Ｍａｃｈｅｄ
ｏ−Ｊａｓｅｐｈ病、ｄｅｎｔａｔｏｒｕｂｒａｌ−ｐ
ａｌｌｉｄｏｌｕｙｓｉａｎ ａｔｒｏｐｈｙ等）でも
コウジン末の経口投与が有効と思われる。遺伝子診断に
よって舞踏病あるいはその他のポリグルタミン病を将来
発症することが判明したヒト（体重６０ｋｇと仮定）、
あるいはすでにポリグルタミン病を発症した患者（体重
６０ｋｇと仮定）に、コウジン末を１日あたり、２．０
ｇ〜９０ｇ、好ましくは５．６２５ｇ〜３６ｇ、より好
ましくは１１．２５ｇ〜１８ｇ経口投与する。舞踏病あ
るいはその他のポリグルタミン病発症以前からコウジン
末を経口投与するときは不幸にして疾病が発症しても、
コウジン末の経口投与を病状が改善するかあるいは安定
するまで継続することが望ましい。また、舞踏病あるい
はその他のポリグルタミン病を発症した患者にコウジン
末を経口投与する場合には、病状が改善するかあるいは
病状が安定するまでコウジン末の経口投与を継続する。Example 6 (Treatment, Prevention and Treatment of Chorea by Oral Administration of Kojin Powder) Chorea (Huntington's disease) is known as a typical monogenic disease among neurodegenerative diseases and encodes polyglutamine. Although repeated CAG sequences are thought to be the cause of the disease, a cure for it has not yet been developed.
When mutant huntingtin, a gene responsible for chorea, is transfected into cultured neurons derived from striatum, the cells undergo apoptotic neuronal death. However, mutant huntingtin (mutant hun)
When Tingtin) together keep forcibly expressedBcl-x L protein in cultured neurons, it has been reported that death of the cells are almost completely suppressed (Saudou, F.,
et al. , Cell, 95, 55-66, 199.
8). Thus the red ginseng powder with Bcl-xL protein expression enhancing action in brain tissue, if oral administration after chorea premorbid or disease, likely to exhibit effectiveness and efficacy. In addition, polyglutamine diseases other than chorea (Mached
o-Jaseph's disease, dentatorrubral-p
Allodilusian atrophy) may be effective for oral administration of kojin powder. Humans who are found to develop chorea or other polyglutamine diseases by genetic diagnosis (assuming a body weight of 60 kg),
Alternatively, kojin powder was added to a patient who had already developed polyglutamine disease (assuming a body weight of 60 kg) for 2.0 days.
g-90 g, preferably 5.625 g-36 g, more preferably 11.25 g-18 g. When Kojin powder is orally administered before the onset of chorea or other polyglutamine diseases, even if the disease develops unfortunately,
It is desirable to continue oral administration of kojin powder until the condition improves or stabilizes. When orally administered ginseng powder to a patient who has developed chorea or other polyglutamine diseases, oral administration of the ginseng powder is continued until the condition is improved or the condition is stabilized.
【０２２２】実施例７（コウジン末経口投与による拡張
型心筋症の治療、予防及び処置） 拡張型心筋症は原因の不明な心筋細胞死（心筋細胞変
性）の結果、心機能の低下と心拡大を呈する疾患であ
る。心機能低下は進行性に増悪し、心不全症状を発症
し、死に至る。心不全が悪化したときには、心移植以外
に治療法はないと考えられてきた。おそらく、拡張型心
筋症患者の心筋細胞が死に至るときには、心筋細胞に豊
富に含まれる細胞死抑制遺伝子産物Ｂｃｌ−ｘＬ蛋白が
減少するものと推測されるので、このＢｃｌ−ｘＬ蛋白
の減少をコウジン末の経口投与によりくい止めることに
より、同患者の心筋細胞死を先延ばしすることができ、
ひいては同患者の心機能を長期にわたって維持すること
が可能になると思われる。拡張型心筋症と診断された患
者（体重６０ｋｇと仮定）に対して、速やかにコウジン
末を１日あたり、０．６ｇ〜１５ｇ、好ましくは１．５
ｇ〜６ｇ、より好ましくは２ｇ〜４ｇ連日経口投与す
る。経口投与は、病状が改善するかあるいは病状の進行
がとまるまで継続することが好ましい。また、コウジン
末の経口投与と、β−ブロッカー、カルシウム拮抗剤、
ＡＣＥ阻害剤、アンギオテンシン受容体阻害薬等任意の
循環系薬物の内服と併用することも可能である。Example 7 (Treatment, Prevention and Treatment of Dilated Cardiomyopathy by Oral Administration of Kojin Powder) Dilated cardiomyopathy results in myocardial cell death (cardiomyocyte degeneration) of unknown cause, resulting in decreased cardiac function and enlarged heart. It is a disease that presents. Decreased cardiac function progressively worsens, develops heart failure symptoms and leads to death. When heart failure worsens, it has been thought that there is no cure other than heart transplantation. Perhaps, when myocardial cells of patients with dilated cardiomyopathy is death, because cell death suppressing gene product Bcl-xL protein that is abundant in heart muscle cells are assumed to decrease, this decrease in Bcl-xL protein Can be postponed by oral administration of kojin powder to prolong myocardial cell death,
In turn, it will be possible to maintain the patient's heart function for a long time. For a patient diagnosed with dilated cardiomyopathy (assuming a body weight of 60 kg), Kojin powder is immediately added to 0.6 g to 15 g, preferably 1.5 g per day.
g to 6 g, more preferably 2 g to 4 g orally every day. Oral administration is preferably continued until the condition has improved or the disease progression has ceased. In addition, oral administration of kojin powder, β-blocker, calcium antagonist,
It can be used in combination with any circulating drug such as an ACE inhibitor or an angiotensin receptor inhibitor.
【０２２３】実施例８（低用量ジンセノサイドＲｂ１の
静脈内持続投与による脳浮腫の治療） 薬用人蔘（コウジン末）の経口投与実験の次に、本発明
者は少量のジンセノサイドＲｂ１の静脈内持続投与で脳
梗塞（脳塞栓）後の脳浮腫が改善するかどうかを調べ
た。このために、例えば、１２〜１３週齢の雄性ＳＨ−
ＳＰラット（体重２５０〜３００ｇ）を使用した。同動
物は１２時間ごとの明暗サイクル室で飼育し、水ならび
に餌は自由摂取とした。吸入麻酔下で同動物の左中大脳
動脈皮質枝（ＭＣＡ）を凝固・切離した。ジンセノサイ
ドＲｂ１をＭＣＡ永久閉塞直後に単回静脈内注入し（６
μｇ又は６０μｇ）、その後アルザミニ浸透圧ポンプを
用いて２８日間静脈内へ持続注入（６μｇ／日又は６０
μｇ／日）した。なお、ＭＣＡを永久閉塞した対照動物
（虚血コントロール動物）と、偽手術をした動物には同
量の生理食塩水のみを投与した。ＭＣＡ永久閉塞後３２
日目に、ＳＨ−ＳＰラットを抱水クロラールにて麻酔
し、４％パラホルムアルデヒドを含有する０．１Ｍリン
酸緩衝液で経心的に灌流固定した。その後、同動物の脳
を摘出し大脳皮質梗塞巣の写真を撮影した。結果を図１
４に示す。[0223] Example 8 (low-dose treatment of cerebral edema caused by continuous intravenous administration of ginsenoside Rb1) the following oral administration experiments ginseng (red ginseng powder), the present inventors intravenously of small amounts of ginsenoside Rb1 It was examined whether continuous administration improves cerebral edema after cerebral infarction (cerebral embolism). For this purpose, for example, 12- to 13-week-old male SH-
SP rats (weighing 250-300 g) were used. The animals were housed in a 12 hour light / dark cycle room with free access to water and food. Under inhalation anesthesia, the left middle cerebral artery cortical branch (MCA) of the animal was coagulated and dissected. A single intravenous infusion of ginsenoside Rb1 immediately after MCA permanent occlusion (6
μg or 60 μg) followed by continuous infusion (6 μg / day or 60 μg / day) for 28 days using an Alzamini osmotic pump.
μg / day). In addition, the same amount of physiological saline alone was administered to a control animal (perpetual ischemia control animal) in which MCA was permanently occluded and a sham-operated animal. 32 after MCA permanent occlusion
On the day, SH-SP rats were anesthetized with chloral hydrate, and transfusionally fixed with 0.1 M phosphate buffer containing 4% paraformaldehyde. Thereafter, the brain of the animal was excised and a photograph of the cerebral cortical infarction was taken. Figure 1 shows the results
It is shown in FIG.
【０２２４】図１４の上段が生理食塩水投与脳梗塞（脳
塞栓）例８個体の脳を背側より撮影した実体顕微鏡写真
である。図１４の下段がジンセノサイドＲｂ１（６μｇ
／日）静脈内投与脳梗塞（脳塞栓）例８個体の脳を背側
より撮影した実体顕微鏡像である。脳の先端が写真の右
側を向くように配列してあるので、黒くなった脳梗塞病
変を有する左大脳半球は大脳縦裂の上側にみられる。大
脳縦裂の下側にみられる正常の右大脳半球は、一部分の
み実体顕微鏡写真に含まれている。図１４の上段に示す
ごとく、生理食塩水投与脳梗塞例では、脳梗塞（脳塞
栓）発症後３２日目には、左大脳半球の黒く見える脳梗
塞病巣が大きく拡大し、程度の差はあるもののすべての
例において左大脳半球が右大脳半球より大きくなってい
る。特に上段の生理食塩水投与脳梗塞例のうち、１段目
の右端の脳ならびに２段目の左から２番目の脳におい
て、左大脳半球が右大脳半球より明らかに大きくなって
いる。このことは、ＭＣＡが永久閉塞した左大脳半球に
脳浮腫が出現し、おそらく脳圧も亢進していることを物
語っている。一方、図１４の下段に示すごとくジンセノ
サイドＲｂ１（６μｇ／日）静脈内投与脳梗塞（脳塞
栓）例では、全例において明らかに脳梗塞病巣が縮小し
ており、左大脳半球と右大脳半球の大きさにもほとんど
差は認められない。すなわち、ジンセノサイドＲｂ１静
脈内持続投与により脳浮腫がみられなくなったのであ
る。The upper part of FIG. 14 is a stereomicrograph of the brain of eight individuals with cerebral infarction (cerebral embolism) administered with physiological saline taken from the dorsal side. The lower part of FIG. 14 shows ginsenoside Rb1 (6 μg
/ Day) Intravenous administration cerebral infarction (cerebral embolism) Example 8 A stereomicroscope image of the brain of 8 individuals taken from the dorsal side. The left cerebral hemisphere with the darkened cerebral infarction lesion is seen above the longitudinal cerebral fissure, as the tip of the brain is oriented to the right of the photograph. The normal right cerebral hemisphere below the longitudinal cerebral fissure is only partially contained in the stereomicrograph. As shown in the upper part of FIG. 14, in the case of cerebral infarction administered with saline, on the 32nd day after the onset of cerebral infarction (cerebral embolism), the cerebral infarction lesion, which looks black in the left cerebral hemisphere, greatly expands, and the degree varies. In all cases, the left cerebral hemisphere is larger than the right cerebral hemisphere. In particular, in the case of cerebral infarction treated with saline in the upper row, the left cerebral hemisphere is clearly larger than the right cerebral hemisphere in the rightmost brain in the first row and the second brain from the left in the second row. This indicates that cerebral edema appeared in the left cerebral hemisphere in which MCA was permanently occluded, and that cerebral pressure was probably also increased. On the other hand, in the case of cerebral infarction (cerebral embolism) intravenously administered with ginsenoside Rb1 (6 μg / day), as shown in the lower part of FIG. There is hardly any difference in the size of. That is, the cerebral edema by ginsenoside Rb1 continuous intravenous administration is no longer observed.
【０２２５】実施例９（ジンセノサイドＲｂ１の静脈内
持続投与による脊髄損傷治療） 脊髄損傷のモデルとして、下位胸髄に２０ｇの圧力を２
０分間負荷されたウィスターラット（体重約３００ｇ）
を用いた。ハロセン、笑気による吸入麻酔下で、ラット
の下位胸髄に２０ｇの圧力を２０分間負荷した後、３０
分以上経過してから左大腿静脈にジンセノサイドＲｂ１
（１２μｇ又は６０μｇ）を単回注入し、さらに同静脈
へジンセノサイドＲｂ１（１２μｇ／日又は６０μｇ／
日）をアルザミニ浸透圧ポンプにて７日間持続投与し
た。対照動物ならびに偽手術動物には同様のスケジュー
ルで同量の生理食塩水（ｖｅｈｉｃｌｅ、媒体）を投与
した。脊髄損傷前、脊髄損傷当日、脊髄損傷後１日目か
ら７日目まで、各ラットのＯｐｅｎ ｆｉｅｌｄ ｌｏ
ｃｏｍｏｔｏｒｓｃｏｒｅｓ（Ｂａｓｓｏ，Ｂｅｔｔｉ
ｅ ａｎｄ Ｂｒｅｓｎａｋａｎ（ＢＢＢ）ｓｃｏｒｅ
ｓ）を計測して運動能力の指標とした（Ｂａｓｓｏ
Ｄ．Ｍ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｔｒａｕｍａ，
１３，３４３−３５９，１９９６）。ちなみに偽手術ラ
ット（正常ラット）のＢＢＢ ｓｃｏｒｅｓ（ＢＢＢス
コア）は２０ないし２１である。結果を図１６、図１７
に示す。[0225] As a model of spinal cord injury (spinal cord injury treatment by continuous intravenous administration of ginsenoside Rb1) Example 9, the pressure of 20g to the lower thoracic cord 2
Wistar rats loaded with 0 minutes (weight about 300g)
Was used. Under inhalational anesthesia with halothane and laughter, a pressure of 20 g was applied to the lower thoracic cord of the rat for 20 minutes, followed by 30 minutes.
After more than a minute, ginsenoside Rb1 is added to the left femoral vein.
(12 μg or 60 μg), and ginsenoside Rb1 (12 μg / day or 60 μg / day) was further injected into the same vein.
) Was continuously administered for 7 days with an Alzamini osmotic pump. Control animals and sham-operated animals received the same amount of saline (vehicle, vehicle) on a similar schedule. Before spinal cord injury, on the day of spinal cord injury, and from day 1 to day 7 after spinal cord injury, the open field lo
commotorscores (Basso, Betti)
e and Bresnakan (BBB) score
s) was measured and used as an index of athletic ability (Basso
D. M. et al. , J. et al. Neurotrauma,
13, 343-359, 1996). Incidentally, the sham-operated rats (normal rats) have a BBB scores (BBB score) of 20 to 21. 16 and 17 show the results.
Shown in
【０２２６】図１６は脊髄損傷当日及び翌日の生理食塩
水投与ラットならびにジンセノサイドＲｂ１（６０μｇ
／日）投与ラットを、それぞれ示している。図１６に示
すごとく、下位胸髄に２０ｇの圧力を２０分間負荷され
たラットは明らかに両下肢の対麻痺を呈する。しかし下
位胸髄に２０ｇの圧力を２０分間負荷したのちに３０分
以上経過してからジンセノサイドＲｂ１（６０μｇ／
日）を静脈内投与すると、図１６に示すごとく１〜２日
後には、両下肢の対麻痺が著しく改善し、ラットは物に
つかまりながら立ち上がることができるようになる。し
かし、生理食塩水投与ラットの下肢対麻痺はまったく改
善しない。FIG. 16 shows the rats treated with saline and the ginsenoside Rb1 (60 μg) on and after the day of spinal cord injury.
/ Day) administration rats are shown. As shown in FIG. 16, a rat subjected to 20 g of pressure applied to the lower thoracic spinal cord for 20 minutes clearly exhibits paraplegia of both lower limbs. However, after applying a pressure of 20 g to the lower thoracic spinal cord for 20 minutes and then 30 minutes or more, ginsenoside Rb1 (60 μg /
Intravenous administration of iv) significantly improves paraplegia of both lower limbs after 1 to 2 days as shown in FIG. However, the lower limb paraplegia of the saline-treated rats does not improve at all.
【０２２７】脊髄損傷後７日目のＢＢＢ ｓｃｏｒｅｓ
（ＢＢＢスコア）にてラットの運動能力を定量化したグ
ラフのみを図１７に示す。図１７に示すごとく、脊髄損
傷ラットの運動能力はジンセノサイドＲｂ１静脈内投与
の用量に依存して有意に改善した。データは平均値±標
準誤差で示しており、統計解析法はＭａｎｎ−Ｗｈｉｔ
ｎｅｙ Ｕテストによっている。BBB scores 7 days after spinal cord injury
FIG. 17 shows only a graph quantifying the motor ability of the rat by (BBB score). As shown in FIG. 17, motor skills spinal cord injured rats was significantly improved in a dose dependent manner of ginsenoside Rb1 intravenous administration. Data are shown as the mean ± standard error, and the statistical analysis method is Mann-Whit
It depends on the new U test.
【０２２８】実施例１０（低用量の薬用人蔘粗サポニン
分画の静脈内持続投与による脊髄損傷治療） 脊髄損傷のモデルとして、下位胸髄に２０ｇの圧力を２
０分間負荷されたウィスターラット（体重約３００ｇ）
を用いた。ハロセン、笑気による吸入麻酔下で、ラット
の下位胸髄に２０ｇの圧力を２０分間負荷した後、３０
分以上経過してから左大腿静脈に粗サポニン分画（８７
０μｇ）の生理食塩水溶解液を単回注入し、さらに同静
脈へ粗サポニン分画（８７０μｇ／日）をアルザミニ浸
透圧ポンプにて７日間持続投与した。対照脊髄損傷動物
には同様のスケジュールで同量の生理食塩水（ｖｅｈｉ
ｃｌｅ、媒体）を投与した。結果を図１８及び図１９に
示す。図１８は粗サポニン分画投与例を、図１９は生理
食塩水（ｖｅｈｉｃｌｅ、媒体）投与例を示す。Example 10 (Spine Cord Injury Treatment by Continuous Intravenous Administration of Low-Dose Ginseng Crude Saponin Fraction) As a model for spinal cord injury, a pressure of 20 g was applied to the lower thoracic spinal cord.
Wistar rats loaded with 0 minutes (weight about 300g)
Was used. Under inhalational anesthesia with halothane and laughter, a pressure of 20 g was applied to the lower thoracic cord of the rat for 20 minutes, followed by 30 minutes.
Minutes later, the crude saponin fraction (87
(0 μg) of a physiological saline solution was injected once, and a crude saponin fraction (870 μg / day) was continuously administered to the same vein with an Alzamini osmotic pump for 7 days. Control spinal cord injured animals were given the same amount of saline (vehi) on a similar schedule.
cle, vehicle). The results are shown in FIGS. FIG. 18 shows an example of crude saponin fraction administration, and FIG. 19 shows an example of physiological saline (vehicle, medium) administration.
【０２２９】図１８に示すごとく、脊髄損傷を負荷した
当日には、ラットは両下肢の対麻痺をきたし、粗サポニ
ン分画を静脈内投与しても立ち上がることができない
が、翌日より粗サポニン分画を静脈内投与したラットの
下肢対麻痺が改善し始め、脊髄損傷後７日目には、オー
プンフィールドの外壁（高さ８ｃｍ）をささえにして同
ラットは立ち上がることが可能となった。一方、脊髄損
傷負荷後に生理食塩水のみを投与したラットでは、図１
９に示すごとく、脊髄損傷後１週間を経過してもまった
く下肢対麻痺に改善はみられなかった。脊髄損傷ラット
を用いた本実験結果より、低用量の粗サポニン分画から
なる静脈内持続投与製剤の脊髄損傷治療効果はジンセノ
サイドＲｂ１と比べて遜色ないくらい優れたものと考え
られる。As shown in FIG. 18, on the day of spinal cord injury, the rats had paraplegia in both lower limbs and were unable to stand up even if the crude saponin fraction was intravenously administered. The lower limb paraplegia of the rats to which the painting was administered intravenously began to improve, and on day 7 after spinal cord injury, the rats were able to stand up against the outer wall of the open field (height 8 cm). On the other hand, in rats to which only saline was administered after the spinal cord injury was loaded, FIG.
As shown in FIG. 9, no improvement was observed in lower limb paraplegia even after one week from spinal cord injury. From this experimental results using rats with spinal cord injuries, spinal cord injuries therapeutic effects of continuous intravenous administration formulation consisting crude saponin fraction of low doses it is considered to have excellent long not inferior as compared with the ginsenoside Rb1.
【０２３０】実施例１１（ジンセノサイドＲｂ１の静脈
内持続投与による脊髄損傷ならびに褥創の治療） ハロセン、笑気による吸入麻酔下で、ウィスターラット
（体重３００ｇ程度）の下位胸髄に２０ｇの圧力を２０
分間負荷した後にいったん覚醒せしめ、下肢対麻痺をき
たしたラットをケージ内に１時間４０分放置した。すな
わちラットの下位胸髄に２０ｇの圧力を加え始めた時点
から、約２時間何の処置・治療も施さず脊髄損傷ラット
を放置したことになる。その後速やかに左大腿静脈へジ
ンセノサイドＲｂ１（６０μｇ）を単回注入し、さらに
同静脈へジンセノサイドＲｂ１（６０μｇ／日）をアル
ザミニ浸透圧ポンプにて７日間持続投与した。対照の脊
髄損傷動物には同様のスケジュールで同量の生理食塩水
（ｖｅｈｉｃｌｅ、媒体）を投与した。結果を図２１に
示す。[0230] Example 11 (spinal cord injury by continuous intravenous administration of ginsenoside Rb1 and treatment of bedsore) halothane, under inhalation anesthesia with laughing gas, the pressure of 20g in the lower thoracic cord of Wistar rats (body weight about 300 g) 20
After loading for 1 minute, the rats were once awake, and the rats with paraplegia were left in the cage for 1 hour and 40 minutes. That is, the spinal cord injured rat was left without any treatment or treatment for about 2 hours from the time when the pressure of 20 g was applied to the lower thoracic cord of the rat. Immediately thereafter ginsenosideRb 1 a (60 [mu] g) was injected single to left femoral vein, and further 7 days continuous administration ginsenosideRb 1 in the same vein (60 [mu] g / day) at Aruzamini osmotic pump. Control spinal cord injured animals received the same amount of saline (vehicle, vehicle) on a similar schedule. The results are shown in FIG.
【０２３１】図２１に示すごとく、下位胸髄への圧負荷
を開始後２時間を経過した時点よりジンセノサイドＲｂ
１を静脈内投与されたラットは、脊髄損傷当日には下肢
の対麻痺をきたしてまったく立ち上がることができず、
翌日にもやや下肢対麻痺に改善はみられるものの依然と
して起立することができなかった。しかし同ラットは、
脊髄損傷発症後３〜４日目より徐々に下肢の対麻痺が回
復し始め、図２１に示すごとく脊髄損傷後１週間目には
オープンフィールドの壁（高さ８ｃｍ）につかまりなが
ら起立するようになった。一方、図２１に示すごとく、
下位胸髄への圧負荷を開始後２時間を経過した時点より
生理食塩水（ｖｅｈｉｃｌｅ、媒体）のみを静脈内投与
されたラットは、脊髄損傷後１週間を経過しても下肢の
対麻痺はまったく改善しなかった。しかも、生理食塩水
のみを静脈内投与された脊髄損傷ラットでは、個体によ
り程度の差はあるものの、図２１に示すごとくしばしば
下腹部に褥創が認められた。しかし、ジンセノサイドＲ
ｂ１静脈内投与例では下腹部の褥創はほとんどみられな
かった。As shown in FIG. 21, the ginsenoside Rb starts from 2 hours after the start of pressure loading to the lower thoracic spinal cord.
1 was administered intravenously rats, spinal cord injury day can not rise at all in Kitaichi paraplegia of the lower limbs,
On the following day, her paraplegia was slightly improved, but she still could not stand. But the rat
From 3 to 4 days after the onset of spinal cord injury, paraplegia of the lower limbs began to recover gradually, and as shown in FIG. 21, one week after the spinal cord injury, the patient was standing up while holding onto the open field wall (height 8 cm). became. On the other hand, as shown in FIG.
Rats administered intravenously only with saline (vehicle, vehicle) 2 hours after the start of pressure loading on the lower thoracic cord, paraplegia of the lower limbs was not observed even one week after spinal cord injury. No improvement at all. Moreover, in spinal cord-injured rats to which only saline was intravenously administered, pressure wounds were often observed in the lower abdomen as shown in FIG. However, ginsenoside R
bedsore lower abdomen was hardly observed in the b1 intravenous administration examples.
【０２３２】実施例１２（ジンセノサイドＲｂ１による
オリゴデンドロサイト保護作用） 神経細胞とオリゴデンドロサイトを共培養して、ジンセ
ノサイドＲｂ１が両細胞の生存を促進するかどうかを調
べた。このため、神経細胞は、妊娠１７日のラット胎仔
大脳皮質より分離した。オリゴデンドロサイトは、生直
後ラットの前脳より開始した混合脳細胞培養より分離し
た。神経細胞５０万個に対し、オリゴデンドロサイト５
万個を共培養し、この培養系にジンセノサイドＲｂ１を
１ｆｇ／ｍｌから１０ｐｇ／ｍｌの濃度で１％牛胎仔血
清を含むＤＭＥＭ中に添加し、５日間培養した。その後
電気泳動サンプルを作成し、培養ウェル中の神経細胞特
異タンパク質ＭＡＰ２とオリゴデンドロサイト特異タン
パク質のＣＮＰａｓｅの存在量をウェスタンブロットに
より調べた。結果を図２２に示す。[0232] Example 12 (oligodendrocytes protective action of ginsenoside Rb1) were co-cultured neurons and oligodendrocytes, ginsenoside Rb1 was examined whether promotes survival of both cells. For this reason, the nerve cells were separated from the rat fetal cerebral cortex on the 17th day of gestation. Oligodendrocytes were isolated from mixed brain cell cultures initiated from the forebrain of newborn rats. Oligodendrocyte 5 for 500,000 neurons
Thousands cocultured, added ginsenoside Rb1 in this culture system in DMEM containing 1% fetal bovine serum from 1 fg / ml at a concentration of 10 pg / ml, were cultured for 5 days. Thereafter, an electrophoresis sample was prepared, and the abundances of the neuron-specific protein MAP2 and the oligodendrocyte-specific protein CNPase in the culture well were examined by Western blot. The results are shown in FIG.
【０２３３】図２２の上段がＭＡＰ２のウェスタンブロ
ットを、図２２の下段がＣＮＰａｓｅのウェスタンブロ
ットをそれぞれ示す。ジンセノサイドＲｂ１を１ｆｇ／
ｍｌから１００ｆｇ／ｍｌの濃度で、神経細胞とオリゴ
デンドロサイトの共培養系に添加すると、明らかにＭＡ
Ｐ２のバンドならびにＣＮＰａｓｅのバンドが、ジンセ
ノサイドＲｂ１非添加例及びジンセノサイドＲｂ１ １
０４ｆｇ／ｍｌ添加例と比べて、明らかに濃くなってい
た。このことは、低濃度のジンセノサイドＲｂ１を１ｆ
ｇ／ｍｌから１００ｆｇ／ｍｌの濃度で添加しておく
と、ＭＡＰ２とＣＮＰａｓｅの存在量が明らかに多くな
ることを示している。すなわち、ジンセノサイドＲｂ１
により神経細胞ならびにオリゴデンドロサイトの生存が
促進されたことになる。このことは、低濃度・低用量の
ジンセノサイドＲｂ１がオリゴデンドロサイトの細胞死
を伴う疾患（多発性硬化症、ビンスワンガー病、白質脳
炎等の脱髄をきたす脳神経疾患）の予防・治療・処置に
有効であることを強く支持するものである。[0233] The upper part of Fig. 22 shows the western blot of MAP2, and the lower part of Fig. 22 shows the western blot of CNPase. Ginsenoside Rb1 at1 fg /
When added to a co-culture system of neurons and oligodendrocytes at a concentration of from 100 ml / ml to 100 fg / ml, MA
Band Band and CNPase of P2 is, ginsenoside Rb1 was not added examples and ginsenosideRb 1 1
Compared with 04 fg / ml added example, it had become clearly darker. This means that low concentrations of ginsenoside Rb1
This shows that the addition of g / ml to 100 fg / ml clearly increases the abundance of MAP2 and CNPase. That is, ginsenoside Rb1
Thus, the survival of neurons and oligodendrocytes was promoted. This low concentration and low dose of ginsenoside Rb1 of diseases accompanied by cell death of oligodendrocytes in the prevention, treatment, and treatment of (multiple sclerosis, Binswanger's disease, brain diseases causing demyelination such as white matter encephalitis) I strongly support its effectiveness.
【０２３４】実施例１３（ジンセノサイドＲｂ１による
オリゴデンドロサイトにおけるＢｃｌ−ｘＬ発現増強） ジンセノサイドＲｂ１がオリゴデンドロサイトにおける
Ｂｃｌ−ｘＬの発現を増強するかどうかを調べた。その
ため、たとえば一次培養ラットオリゴデンドロサイトに
ジンセノサイドＲｂ１を１ｆｇ／ｍｌから１０ｐｇ／ｍ
ｌの濃度で添加し、６時間培養した後に、総ＲＮＡを回
収し、Ｂｃｌ−ｘＬ ｍＲＮＡをＲＴ−ＰＣＲにて測定
した。ＲＴ−ＰＣＲの内部標準には、βアクチンｍＲＮ
Ａを用いている。また、一部のオリゴデンドロサイトは
ジンセノサイドＲｂ１で処理後にＳＤＳ電気泳動サンプ
ルとし、培養ウェル中の抗アポトーシス因子Ｂｃｌ−ｘ
Ｌの存在量をイムノブロット（ウェスタンブロット）に
より検討した。なお、オリゴデンドロサイトは、生直後
ラット前脳より開始した混合脳細胞培養より分離した。
結果を図２３に示す。図２３上段はＲＴ−ＰＣＲの結果
を、図２３の下段はイムノブロット（ウェスタンブロッ
ト）の結果をそれぞれ示す。Ｒｂ１（−）はジンセノサ
イドＲｂ１不添加例、Ｒｂ１（＋）はジンセノサイドＲ
ｂ１ １００ｆｇ／ｍｌ添加例である。[0234] investigated whether Example 13(Bcl-x L expression enhancement in oligodendrocytes by ginsenoside Rb1) ginsenoside Rb1 enhances the expression ofBcl-x L in oligodendrocytes. Therefore, for example, ginsenoside Rb1 is added to primary cultured rat oligodendrocytes from1 fg / ml to 10 pg / m
It was added at a concentration of l, after culturing for 6 hours, the total RNA was collected and measuredBcl-x L mRNA by RT-PCR. RT-PCR internal standards include β-actin mRN
A is used. A part of the oligodendrocytes is the SDS electrophoresis sample after treatment with ginsenoside Rb1, anti-apoptotic factor Bcl-x in culture wells
The amount ofL was examined by immunoblot (Western blot). Oligodendrocytes were isolated from a mixed brain cell culture started from the rat forebrain immediately after birth.
The results are shown in FIG. The upper part of FIG. 23 shows the results of RT-PCR, and the lower part of FIG. 23 shows the results of immunoblot (Western blot). Rb1 (−) is ginsenoside Rb1 not added, Rb1 (+) is ginsenoside R
b1 is 100 fg / ml added examples.
【０２３５】ＲＴ−ＰＣＲにより、ジンセノサイドＲｂ
１を１００ｆｇ／ｍｌの濃度で添加しておくと、オリゴ
デンドロサイトにおいてＢｃｌ−ｘＬ ｍＲＮＡの発現
が明らかに増強した。また、イムノブロット（ウェスタ
ンブロット）によって、Ｂｃｌ−ｘＬ蛋白もジンセノサ
イドＲｂ１の添加により増加することが判明した。本実
験結果は、脊髄損傷や脱髄をきたす脳神経疾患におい
て、少量のジンセノサイドＲｂ１の静脈内投与が、オリ
ゴデンドロサイトの保護作用を発揮することを強く支持
するものである。By RT-PCR, ginsenoside Rb
If you leave adding1 at a concentration of 100 fg / ml, expression ofBcl-x L mRNA in oligodendrocytes it was obviously enhanced. Further, by immunoblot (Western blot), alsoBcl-x L protein was found to be increased by the addition of ginsenoside Rb1. This experimental results in cranial nerve diseases causing a spinal cord injury or demyelination, intravenous administration of small amounts of ginsenoside Rb1, in which strongly support that exert a protective effect of oligodendrocytes.
【０２３６】実施例１４（ジンセノサイドＲｂ１の静脈
内投与によるＢｃｌ−ｘＬ発現増強） ジンセノサイドＲｂ１を静脈内投与した際に、脳組織に
おいてＢｃｌ−ｘＬｍＲＮＡの発現増加がみられるかど
うかを調べた。このため、たとえば１２週齢のＳＨ−Ｓ
Ｐラット（体重２５０〜３００ｇ）を用いた。吸入麻酔
下でＳＨ−ＳＰラットのＭＣＡを永久閉塞した直後に、
ジンセノサイドＲｂ１（６０μｇ）を単回静脈内注入
し、その後、ジンセノサイドＲｂ１を６０μｇ／日の用
量で静脈内へ持続投与した。対照のＭＣＡ閉塞動物なら
びに偽手術動物には、ＭＣＡ永久閉塞後同量の生理食塩
水（ｖｅｈｉｃｌｅ、媒体）のみを静脈内投与した。結
果を図２４に示す。Ｇｒｏｕｐ１（グループ１）は偽手
術動物、生理食塩水投与ＭＣＡ永久閉塞動物（ＭＣＡ永
久閉塞後すなわち脳梗塞後４時間目）、ジンセノサイド
Ｒｂ１投与脳梗塞動物（ＭＣＡ永久閉塞後４時間目）、
ジンセノサイドＲｂ１投与脳梗塞動物（ＭＣＡ永久閉塞
後６時間目）の動物群を示す。Ｇｒｏｕｐ２（グループ
２）も同様の実験条件の動物で構成されている。Ｓｈａ
ｍは偽手術動物、Ｒｂ１（−）は生理食塩水投与脳梗塞
動物、Ｒｂ１（＋）はジンセノサイドＲｂ１静脈内投与
脳梗塞動物を示す。偽手術後、ならびにＭＣＡ永久閉塞
後４時間目もしくは６時間目に、ラットを抱水クロラー
ルにて麻酔し左側大脳皮質（すなわちＭＣＡ永久閉塞側
の大脳皮質）を取り出したのちに、総ＲＮＡを調整して
ＲＴ−ＰＣＲに供した。なお内部標準としてβ−アクチ
ン（β−ａｃｔｉｎ）のｍＲＮＡを用いた。[0236] When the ginsenoside Rb1(Bcl-x L expression enhancement by intravenous administration of ginsenoside Rb1) Example 14 was intravenously administered, whether increased expression ofBcl-x L mRNA is observed in brain tissue Examined. For this reason, for example, a 12-week-old SH-S
P rats (body weight 250-300 g) were used. Immediately after the MCA of SH-SP rats was permanently occluded under inhalation anesthesia,
Ginsenoside Rb1 (60 μg) was injected once intravenously and ginsenoside Rb1 was continuously administered intravenously at a dose of 60 μg / day. Control MCA occluded animals as well as sham operated animals received only the same volume of saline (vehicle, vehicle) intravenously after MCA permanent occlusion. The results are shown in FIG. Group1 (Group 1) sham-operated animals, saline administered MCA permanent occlusion animals (4 hours after ie after cerebral infarction MCA permanent occlusion), ginsenoside Rb1 administration cerebral infarction animals (4 hours after MCA permanent occlusion),
Shows the fauna of ginsenoside Rb1 administration cerebral infarction animals (6 hours after MCA permanent occlusion). Group 2 (Group 2) is composed of animals under similar experimental conditions. Sha
m is sham operated animals,Rb 1 (-) physiological saline-administered cerebral infarction animals,Rb 1 (+) indicates the ginsenoside Rb1 intravenously cerebral infarction animals. After sham operation and 4 or 6 hours after MCA permanent occlusion, rats were anesthetized with chloral hydrate and the left cerebral cortex (ie, cerebral cortex on the MCA permanent occlusion side) was removed, and total RNA was adjusted. And subjected to RT-PCR. As an internal standard, β-actin mRNA was used.
【０２３７】図２４に示すごとく、Ｇｒｏｕｐ１、Ｇｒ
ｏｕｐ２ともに偽手術動物や生理食塩水投与脳梗塞動物
に比べて、ジンセノサイドＲｂ１静脈内投与例において
ＭＣＡ永久閉塞後４時間目、６時間目ともに大脳皮質の
Ｂｃｌ−ｘＬ ｍＲＮＡ発現が明らかに上昇していた。As shown in FIG. 24, Group1, Gr
oup2 both compared to sham-operated animals and saline administration cerebral infarction animals, 4 hours after MCA permanent occlusion in the ginsenoside Rb1 intravenous administration examples clearly increaseBcl-x L mRNA expression in the cerebral cortex both 6 hours Was.
【０２３８】実施例１５（低濃度のジンセノサイドＲｂ
１による心筋細胞におけるＢｃｌ−ｘＬ発現増強） さて、本発明者らはこれまで神経組織や神経組織構成細
胞（神経細胞、オリゴデンドロサイト）を用いて、薬用
人蔘（コウジン末）、粗サポニン分画、ジンセノサイド
Ｒｂ１の効果・効能を調べてきたが、次に心臓に対する
ジンセノサイドＲｂ１の効果を検討した。このため、た
とえば一次培養心筋細胞をジンセノサイドＲｂ１存在下
で１８時間培養した際の、Ｂｃｌ−ｘＬ ｍＲＮＡと、
Ｂｃｌ−ｘＬタンパク質の発現変動をＲＴ−ＰＣＲとイ
ムノブロッティングにより検討した。心筋細胞は、妊娠
１７日齢のラット胎仔心臓をトリプシンＥＤＴＡを用い
て細胞分散したものを、１０％ＦＣＳ（牛胎仔血清）を
含有するＤＭＥＭ中で数日間培養したものを用いた。Ｒ
Ｔ−ＰＣＲは、βアクチンｍＲＮＡを内部標準として用
いた。イムノブロットでは、横紋筋特異的タンパク質で
あるトロポニンＴを内部標準として、Ｂｃｌ−ｘＬタン
パク質の発現を検討した。イムノブロットでは、異なる
ロットの心筋細胞を用いて、同様の実験を１０回繰り返
し、Ｂｃｌ−ｘＬ免疫反応陽性のバンドをデンシトメト
リーにて解析し、統計学的検討を行った。結果を図２５
に示す。図２５の上段はＲＴ−ＰＣＲの結果を、中段は
イムノブロット（ウェスタンブロット）の結果を、下段
はウェスタンブロットの結果をデンシトメトリー解析に
供したものを、それぞれ示す。Example 15 (Low concentration of ginsenoside Rb
1 Bcl-xL expression enhancement in cardiomyocytes by) Now, the present inventors using this to neural tissue and nerve tissue structure cells (neurons, oligodendrocytes), ginseng (red ginseng powder), crude saponin fractionation, has been investigated the effectiveness and efficacy of ginsenoside Rb1, was then examined the effect of ginsenoside Rb1 on the heart. Therefore, when the primary cultured myocardial cells were cultured for 18 hours in the presence of ginsenoside Rb1 for example, andBcl-x L mRNA,
Variation in the expression of Bcl-xL protein was examined by RT-PCR and immunoblotting. The cardiomyocytes used were those obtained by dispersing cells of a 17-day-old rat fetal heart using trypsin EDTA and cultured for several days in DMEM containing 10% FCS (fetal calf serum). R
T-PCR used β-actin mRNA as an internal standard. In immunoblots, the troponin T is a striated muscle-specific protein as an internal standard, were examined the expression of Bcl-xL protein. In immunoblotting, using the cardiomyocytes different lots, the same experiment was repeated 10 times, by analyzing the band of Bcl-xL immunoreactive with densitometry, it was carried out statistical study. FIG. 25 shows the results.
Shown in The upper part of FIG. 25 shows the results of RT-PCR, the middle part shows the results of immunoblot (Western blot), and the lower part shows the results of densitometry analysis of the results of Western blot.
【０２３９】図２５に示すごとく、ジンセノサイドＲｂ
１ １ｆｇ／ｍｌ〜１００ｆｇ／ｍｌ存在時に、Ｂｃｌ
−ｘＬ ｍＲＮＡの発現が明らかに上昇した。Ｂｃｌ−
ｘＬ蛋白レベルでは１ｆｇ／ｍｌから１０４ｆｇ／ｍｌ
の濃度域でジンセノサイドＲｂ１が有意にＢｃｌ−ｘＬ
蛋白の発現を増強せしめた。本実験では、ジンセノサイ
ドＲｂ１ １０４ｆｇ／ｍｌの濃度でＢｃｌ−ｘＬ ｍ
ＲＮＡの発現とＢｃｌ−ｘＬ蛋白の発現に解離が生じて
いるが、Ｂｃｌ−ｘＬ ｍＲＮＡの発現は、比較的高濃
度のジンセノサイドＲｂ１を投与した場合には、投与１
８時間後にはすでにダウンレギュレーションを受けるも
のと推測される。統計解析法はＡＮＯＶＡ＋Ｆｉｓｈｅ
ｒ’ｓ ＰＬＳＤを用いた。As shown in FIG. 25, ginsenoside Rb
11 When there is 11 fg / ml to 100 fg / ml, Bcl
Expression of -xL mRNA was obviously increased. Bcl-
1 fg / ml to 104 fg / ml at xL protein level
Ginsenoside Rb1 significantlyBcl-x L in the concentration range
Increased protein expression. In this experiment,Bcl-x L m at a concentration of ginsenosideRb 110 4 fg / ml
Although dissociation for expression of expression andBcl-x L protein RNA occurs, the expression ofBcl-x L mRNA, when administered relatively high concentrations of ginsenoside Rb1 is administered 1
It is presumed that after 8 hours, down regulation has already occurred. Statistical analysis method is ANOVA + Fishe
r's PLSD was used.
【０２４０】実施例１６（低濃度のジンセノサイドＲｂ
１による心筋細胞保護作用） 次に本発明者らは、ジンセノサイドＲｂ１がＢｃｌ−ｘ
Ｌ蛋白の発現を上昇せしめる濃度域で、実際に心筋細胞
の細胞死を抑止できるかどうかを調べた。このために、
たとえば一次培養心筋細胞を、グルコース非存在下で培
養した際の、ジンセノサイドＲｂ１の心筋細胞保護効果
を検討した。グルコースを含有しない無血清ＤＭＥＭ中
にジンセノサイドＲｂ１を０から１ｎｇ／ｍｌの濃度で
添加しておき、心筋細胞を４ないし５日間培養した。そ
の後電気泳動サンプルを作成し、抗横紋筋特異αアクチ
ニン抗体を用いてイムノブロッティング（ウェスタンブ
ロット）を行った。結果を図２６に示す。図２６の上段
はα−アクチニン（α−Ａｃｔｉｎｉｎ）のウェスタン
ブロットの結果を、図２６の下段はウェスタンブロット
の結果をデンシトメトリー解析したものを、それぞれ示
す。統計解析は、ＡＮＯＶＡ＋Ｓｃｈｅｆｆｅ’ｓ ｐ
ｏｓｔ ｈｏｃ ｔｅｓｔによる。Example 16 (Low concentration of ginsenoside Rb
Myocardial cytoprotection) then the present inventors by1, ginsenoside Rb1 is Bcl-x
It was examined whether or not the cell death of cardiomyocytes could actually be suppressed in a concentration range in which the expression ofL protein was increased. For this,
For example the primary cultured cardiomyocytes, when cultured in the absence of glucose were investigated myocardial cytoprotective effect of ginsenoside Rb1. Ginsenoside Rb1 in serum-free DMEM containing no glucose possible to add from 0 at a concentration of 1 ng / ml, and cultured for 4 to cardiomyocytes 5 days. Thereafter, an electrophoresis sample was prepared, and immunoblotting (Western blot) was performed using an anti-striated muscle-specific α-actinin antibody. The results are shown in FIG. 26 shows the results of Western blot of α-actinin, and the lower part of FIG. 26 shows the results of densitometry analysis of the results of Western blot. Statistical analysis is based on ANOVA + Scheffe's p
According to ost hoc test.
【０２４１】図２６に示すごとく、無グルコース無血清
培養液のみで培養した場合は、培養４〜５日目にはすで
に消失していた、ジンセノサイドＲｂ１を１ｆｇ／ｍｌ
から１０４ｆｇ／ｍｌの濃度で添加しておいた場合に
は、拍動を続ける多数の心筋細胞が観察され、イムノブ
ロットにより横紋筋特異的αアクチニンの有意な存在が
認められた。以上の結果よりジンセノサイドＲｂ１は、
神経細胞に対する場合よりもやや広い濃度域で（１〜１
０４ｆｇ／ｍｌ）心筋細胞のＢｃｌ−ｘＬ発現を上昇せ
しめ、心筋細胞を保護する作用を有することが見出され
た。As shown in FIG. 26, when culturing was performed using only a glucose-free serum-free culture medium, ginsenoside Rb1 which had disappeared on the 4th to 5th days of culture was added at1 fg / ml.
When added at a concentration of from 1 to 104 fg / ml, a large number of beating cardiomyocytes were observed, and immunoblot showed significant presence of striated muscle-specific α-actinin. From the above results, ginsenoside Rb1 is:
In a slightly wider concentration range than that for neurons (1-1
04 fg / ml) raised theBcl-x L expression cardiomyocytes were found to have an effect of protecting cardiomyocytes.
【０２４２】実施例１７（ジヒドロジンセノサイドＲｂ
１の脳梗塞治療効果） さて、本発明の先の出願（特願平１１−２４３３７８、
薬用人蔘からなる脳細胞または神経細胞保護剤）におい
て、本発明者らは薬用人蔘に含有される活性成分の候補
物質をリード化合物として脳細胞又は神経細胞の保護作
用を有する化合物を新規に検索できると記載したが、本
発明においてこのことを実証することを試みた。そのた
めに、たとえば、本発明の前記構造式（ＩＩ）で表され
るジヒドロジンセノサイドＲｂ１（ｄｉｈｙｄｒｏ−ｇ
ｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ Ｒｂ１）を用いた。ジヒドロジ
ンセノサイドＲｂ１は本発明者らの知る限り、新規化合
物であると考えられるが、ジンセノサイドＲｂ１を還元
することにより製造することができる。Example 17 (Dihydroginsenoside Rb
(1 ) Therapeutic effect of cerebral infarction) By the way, the earlier application of the present invention (Japanese Patent Application No. 11-243378,
The present inventors have newly developed a compound having a protective effect on brain cells or nerve cells using ginseng as a lead compound as a candidate active ingredient contained in ginseng. Although described as searchable, an attempt was made to demonstrate this in the present invention. For this purpose, for example, the dihydroginsenoside Rb1 (dihydro-g) represented by the structural formula (II) of the present invention is used.
insenoside Rb1 ) was used. Dihydroginsenoside Rb1 is considered to be a novel compound as far as the present inventors know, and can be produced by reducing ginsenoside Rb1 .
【０２４３】以下にジヒドロジンセノサイドＲｂ１の製
造例ならびにＮＭＲのデータを示す。１０％Ｐｄ／ｃ
１０．２ｍｇを秤量し、活セン付２口フラスコに入れ
る。メタノール（特級）を１ｍｌ加えて懸濁させる。水
素風船（約１．１気圧）をとりつけ３０分０℃で触媒を
活性化する。ジンセノサイドＲｂ１ １９．９ｍｇをメ
タノール１ｍｌで溶かし注射器で注入する。混合物を１
０時間半０℃で激しく攪拌する（磁気スターラー）。反
応混合物をろ紙及び０．４５μｍのメンブランフィルタ
ーでろ過する。メタノールを減圧除去する。純水１０ｍ
ｌに溶解させたのち凍結乾燥すると１９．１ｍｇ（収率
９７％）のジヒドロジンセノサイドＲｂ１を白色粉末と
して得た。融点は１９３−１９５℃である。ちなみに、
ジンセノサイドＲｂ１の融点は１９７−１９８℃（文献
値）である。図２９にＮＭＲチャート（４００ＭＨｚ，
ＣＤ３ＯＤ）を示す。[0243] indicates the data of the following dihydro ginsenosides Side Rb1 of Preparation and NMR. 10% Pd / c
10.2 mg is weighed and placed in a two-necked flask equipped with active sensation. 1 ml of methanol (special grade) is added and suspended. Attach a hydrogen balloon (about 1.1 atm) and activate the catalyst at 0 ° C. for 30 minutes. Dissolve 19.9 mg of ginsenoside Rb1 in 1 ml of methanol and inject with a syringe. Mix 1
Stir vigorously at 0 ° C. for 0 時間 hours (magnetic stirrer). The reaction mixture is filtered through filter paper and a 0.45 μm membrane filter. The methanol is removed under reduced pressure. Pure water 10m
Lyophilization then dissolved in l 19.1 mg of dihydro ginsenosides Side Rb1 (97% yield) as a white powder. The melting point is 193-195 ° C. By the way,
The melting point of ginsenoside Rb1 is 197-198 ° C. (literature value). FIG. 29 shows an NMR chart (400 MHz,
CD3 OD).
【０２４４】約１６週齢の雄性ＳＨ−ＳＰラット（体重
３００〜３２０ｇ）を使用した。同動物は１２時間ごと
の明暗サイクル室で飼育し、水ならびに餌は自由摂取と
した。吸入麻酔下で同動物の左中大脳動脈皮質枝（ＭＣ
Ａ）を凝固・切離した。ジヒドロジンセノサイドＲｂ１
をＭＣＡ永久閉塞直後に単回静脈内注入し（約６μ
ｇ）、その後アルザミニ浸透圧ポンプを用いて２４時間
静脈内へ持続注入（約６μｇ／日）した。なお、ＭＣＡ
を永久閉塞した対照動物（虚血コントロール動物）には
同量の生理食塩水（ｖｅｈｉｃｌｅ、媒体）のみを静脈
内投与した。ＭＣＡ永久閉塞後２４時間目に、致死量の
ペントバルビタールをラットの腹腔内に注入した。同動
物が死亡した直後に脳を摘出し、２ｍｍの厚みの前額切
片を作成した。同切片を、１％の塩化２，３，５−トリ
フェニル−テトラゾリウム（２，３，５−ｔｒｉｐｈｅ
ｎｙｌ−ｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ ｃｈｌｏｒｉｄｅ
（ＴＴＣ））溶液に３０分間３７℃で浸漬し、１０％ホ
ルマリンにて１２時間以上固定した。結果を、図２７、
図２８に示す。図２７は生理食塩水を投与した２例を、
図２８はジヒドロジンセノサイドＲｂ１を静脈内投与し
た２例を示す。About 16-week-old male SH-SP rats (weighing 300 to 320 g) were used. The animals were housed in a 12 hour light / dark cycle room with free access to water and food. Under inhalational anesthesia, the left middle cerebral artery cortical branch (MC
A) was coagulated and separated. Dihydroginsenoside Rb1
Was injected once immediately after MCA permanent occlusion (about 6μ).
g), followed by continuous infusion (about 6 μg / day) intravenously for 24 hours using an Alzamini osmotic pump. In addition, MCA
In the control animals (ischemia control animals) in which occlusion was permanently occluded, only the same amount of physiological saline (vehicle, vehicle) was intravenously administered. At 24 hours after permanent MCA occlusion, a lethal dose of pentobarbital was injected intraperitoneally into rats. Immediately after the animal died, the brain was removed and a 2 mm thick forehead section was prepared. The section was cut with 1% 2,3,5-triphenyl-tetrazolium chloride (2,3,5-triphe).
nyl-tetrazolium chloride
(TTC)) The sample was immersed in a solution at 37 ° C. for 30 minutes and fixed in 10% formalin for 12 hours or more. The results are shown in FIG.
As shown in FIG. FIG. 27 shows two examples of administration of physiological saline,
Figure 28 shows the two cases intravenously administered dihydroginsenoside Seno side Rb1.
【０２４５】図２７に示すごとく、ＭＣＡ永久閉塞後生
理食塩水を投与したラットでは、向かって左側の大脳皮
質に、ＴＴＣで染色されない白色の脳梗塞病巣が明らか
に認められた。一方、図２８に示すごとく、ジヒドロジ
ンセノサイドＲｂ１をＭＣＡ永久閉塞後に静脈内投与し
たラットでは脳梗塞病巣が顕著に縮小していた。この効
果は、ジンセノサイドＲｂ１の脳梗塞縮小作用に匹敵す
ると考えられた。As shown in FIG. 27, in the rat to which saline was administered after MCA permanent occlusion, a white cerebral infarction lesion not stained with TTC was clearly observed in the left cerebral cortex. On the other hand, as shown in FIG. 28, cerebral infarction lesion was markedly reduced by oral administration to rats dihydroginsenoside Seno side Rb1 after MCA permanent occlusion. This effect was thought to be comparable to the stroke reduction effect of ginsenoside Rb1.
【０２４６】実施例１８（ジヒドロジンセノサイドＲｂ
１による褥創の予防・治療・処置） 寝たきり患者ならびに高齢者の褥創は、全身状態を悪化
させるきっかけともなりＱＯＬ（生活の質、ｑｕａｌｉ
ｔｙ ｏｆ ｌｉｆｅ）を著しく損なう皮膚疾患であ
る。褥創の早期には病変部皮膚の発赤がみられるが、こ
の時点で病変部局所ならびにその周辺に塗布して効果・
効能を示す外用剤もしくは静脈内投与製剤がほとんどな
いことが、皮膚科領域で大きな問題となっている。もち
ろん、皮膚組織が欠損した褥創病変の治療も困難を究め
ることが多々ある。ブドウ糖を含有するか含有しない任
意の水溶性基剤あるいは脂溶性基剤にジンセノサイドＲ
ｂ１を混入して皮膚外用剤（クリームまたは軟膏）を作
成し、褥創部局所及びその周辺部に褥創病変が治癒する
か縮小するかあるいは悪化しなくなるまで、常時塗布す
る。その際に局部におけるジヒドロジンセノサイドＲｂ
１の細胞外液濃度が１００ｎｇ／ｍｌ以下、好ましくは
１０ｐｇ／ｍｌ以下、より好ましくは１００ｆｇ／ｍｌ
以下となるように基剤へのジヒドロジンセノサイドＲｂ
１混入量を調整する。また、必要に応じて、本実施例４
ならびに本実施例５に記載された要領でジヒドロジンセ
ノサイドＲｂ１の静脈内投与を併用する。Example 18 (Dihydroginsenoside Rb
1 ) Prevention, treatment and treatment of pressure sores by bedridden patients and elderly people can cause deterioration of their general condition, and QOL (quality of life, quali
It is a skin disease that significantly impairs ty of life. Redness of the skin of the affected part is seen at the early stage of the pressure sore.
The lack of effective external preparations or intravenous preparations has become a major problem in the field of dermatology. Of course, it is often difficult to treat pressure sore lesions that lack skin tissue. Ginsenoside R may be added to any water-soluble or fat-soluble base containing or not containing glucose.
b1 and mixed to create a skin external preparation (cream or ointment), decubitus wound topical and up bedsore lesion in the periphery portion may stop or exacerbated reduce or cure, coated at all times. At that time, dihydroginsenoside Rb
1 is 100 ng / ml or less, preferably 10 pg / ml or less, more preferably 100 fg / ml.
Dihydrogin Senoside Rb to the base as follows
(1 ) Adjust the mixing amount. Further, according to the fourth embodiment, if necessary.
And a combination of intravenous administration of dihydroginsenoside Seno side Rb1 in the manner described in this Example 5.
【０２４７】実施例１９（ジヒドロジンセノサイドＲｂ
１による角膜損傷の予防・治療・処置） コンタクトレ
ンズ装着あるいはエキシマレーザーによる近視矯正術後
に角膜損傷が生じることがよく知られているが、実際に
角膜組織を保護する点眼薬はほとんどないのが現状であ
る。各種点眼用基液もしくは基剤にジヒドロジンセノサ
イドＲｂ１を混入して点眼薬もしくは眼軟膏を作成し、
角膜損傷患者に連日必要回数点眼し、角膜病変が改善す
るまであるいは治癒するまで点眼を継続する。その際に
角膜病変組織におけるジヒドロジンセノサイドＲｂ１の
細胞外液濃度が１００ｎｇ／ｍｌ以下、好ましくは１０
ｐｇ／ｍｌ以下、より好ましくは１００ｆｇ／ｍｌ以下
となるように基液へのジンセノサイドＲｂ１混入量を調
整する。もちろん、ジヒドロジンセノサイドＲｂ１の代
わりにジンセノサイドＲｂ１を用いてもよい。Example 19 (Dihydroginsenoside Rb
1 ) Prevention, treatment and treatment of corneal damage) It is well known that corneal damage occurs after contact lens wearing or myopia correction by excimer laser, but there are few eye drops that actually protect corneal tissue. It is the current situation. Dihydroginsenoside Rb1 is mixed with various ophthalmic base solutions or bases to prepare eye drops or ointments,
The patient is instilled the required number of times a day for the corneal injured patient, and is continued until the corneal lesion improves or heals. At that time the extracellular fluid concentrations of dihydroginsenoside Seno side Rb1 is 100 ng / ml or less in the cornea diseased tissue in, preferably 10
pg / ml or less, more preferably adjusting the ginsenoside Rb1 mixed amount to as base liquid becomes less 100 fg / ml. Of course, ginsenoside Rb1 may be used instead of dihydro ginsenosides side Rb1.
【０２４８】実施例２０（ジヒドロジンセノサイドＲｂ
１による移植用角膜の保護） 角膜移植は、移植医療の中でももっとも成功率の高い治
療法として眼科領域では頻繁に実施されている。しか
し、御遺体から角膜を採取したのち移植手術を実施する
までの間にも移植用角膜組織を構成する細胞は確実に死
に至り始めるため、このことが角膜採取から移植手術ま
での時間を制約する最大の要因となっている。移植用角
膜を採取後、従来の角膜保存液の中にジヒドロジンセノ
サイドＲｂ１を１００ｎｇ／ｍｌ以下、好ましくは１０
ｐｇ／ｍｌ以下、さらに好ましくは１００ｆｇ／ｍｌ以
下となるように混入して移植用角膜を保護することがで
きる。Example 20 (Dihydroginsenoside Rb
(1 ) Protection of cornea for transplantation) Corneal transplantation is frequently performed in the ophthalmic field as the most successful treatment method in transplantation medicine. However, the cells that make up the corneal tissue for transplantation certainly begin to die even after the cornea is collected from the body and before transplantation surgery is performed, which limits the time from corneal collection to transplantation surgery. It is the biggest factor. After collection for transplantation cornea, the dihydro ginsenosides side Rb1 100 ng / ml in a conventional corneal preservation solution or less, preferably 10
pg / ml or less, more preferably 100 fg / ml or less, to protect the cornea for transplantation.
【０２４９】実施例２１（ジヒロジンセノサイドＲｂ１
による舞踏病の予防・治療・処置） 舞踏病（ハンチントン病）は神経変性疾患の中でも代表
的な単一遺伝子病として知られており、ポリグルタミン
をコードするＣＡＧのくり返し配列が病因であると考え
られているが、その治療法はいまだ開発されていない。
舞踏病の責任遺伝子であるミュータントハンチンチン
（ｍｕｔａｎｔ ｈｕｎｔｉｎｇｔｉｎ）を線状体由来
の培養神経細胞に導入（ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ）す
ると、同細胞はアポトーシス様神経細胞死に陥る。しか
し、ミュータントハンチンチン（ｍｕｔａｎｔ ｈｕｎ
ｔｉｎｇｔｉｎ）とともにＢｃｌ−ｘＬを培養神経細胞
に強制発現しておくと、同細胞の死がほぼ完全に抑止さ
れることが報告されている（Ｓａｕｄｏｕ，Ｆ．，ｅｔ
ａｌ．，Ｃｅｌｌ，９５，５５−６６，１９９８）。
従って、脳神経組織におけるＢｃｌ−ｘＬ発現増強作用
を有すると考えられるジヒドロジンセノサイドＲｂ
１を、舞踏病発病前あるいは発病後に点鼻、挿肛もしく
は静脈内投与すれば、効果・効能を示す可能性が高い。
また舞踏病以外のポリグルタミン病（Ｍａｃｈａｄｏ−
Ｊｏｓｅｐｈ病、ｄｅｎｔａｔｏｒｕｂｒａｌ−ｐａｌ
ｌｉｄｏｌｕｙｓｉａｎ ａｔｒｏｐｈｙ等）でもジヒ
ドロジンセノサイドＲｂ１の点鼻投与、挿肛投与もしく
は静脈内投与が有効と思われる。さらに、ジヒドロジン
セノサイドＲｂ１はジンセノサイドＲｂ１と同様に舞踏
病の一次病変（線状体病変）から、線状体と線維連絡を
有する他の脳領域へ二次変性が進展することも阻止する
と期待される。遺伝子診断によって舞踏病あるいはその
他のポリグルタミン病を将来発症することが判明したヒ
ト（体重６０ｋｇと仮定）、あるいはすでに舞踏病もし
くはその他のポリグルタミン病を発症した患者（体重６
０ｋｇと仮定）に、ジヒドロジンセノサイドＲｂ１を適
当量病状が改善するかあるいは安定するまで点鼻投与、
挿肛投与もしくは静脈内投与する。また、ポリグルタミ
ン病治療のためのジヒドロジンセノサイドＲｂ１静脈内
投与量は急性期脳卒中治療に要する投与量と同様もしく
はそれより５〜１０倍多い量とする。点鼻投与もしくは
挿肛投与については、静脈内投与されたジヒドロジンセ
ノサイドＲｂ１と同様の血中濃度が維持できるように、
投与量を調整すればよい。Example 21 (Dihirozin Senoside Rb1
Prevention, treatment, and treatment of chorea caused by chorea) Chorea (Huntington's disease) is known as a typical monogenic disease among neurodegenerative diseases, and it is thought that the repetitive sequence of CAG encoding polyglutamine is the cause. However, the treatment has not been developed yet.
When mutant huntingtin, a gene responsible for chorea, is transfected into cultured neurons derived from striatum, the cells undergo apoptotic neuronal death. However, mutant huntingtin (mutant hun)
When Tingtin) together keep forcibly expressedBcl-x L in cultured neurons, it has been reported that death of the cells are almost completely suppressed (Saudou, F., et
al. , Cell, 95, 55-66, 1998).
Therefore, Dihydroginsenoside considered to have Bcl-xL expression enhancing action in brain tissue Seno side Rb
If 1 is administered before or after the onset of chorea, nasal, anal or intravenous administration, it is highly likely that it will be effective and efficacious.
In addition, polyglutamine diseases other than chorea (Machado-
Joseph's disease, dentatorbral-pal
Lidoluysian atrophy etc.) even nasal point dihydro ginsenosides side Rb1,挿肛administration or intravenous administration is believed effective. Furthermore, expected also prevents the dihydro ginsenosides side Rb1 from a primary lesion of ginsenoside Rb1 in the same manner as in chorea (linear body lesion), to progress secondary modification to other brain regions with linear body and fibers Contact Is done. A human who is found to develop chorea or other polyglutamine diseases by genetic diagnosis (assuming a body weight of 60 kg), or a patient who has already developed chorea or other polyglutamine diseases (body weight 6
0 kg), an appropriate amount of dihydroginsenoside Rb1 administered intranasally until the condition improves or stabilizes,
Anal injection or intravenous administration. Also, the dihydro ginsenosides side Rb1 intravenous dose dose similar or even more 5 to 10 times larger amount required for the acute treatment of stroke for polyglutamine diseases therapy. For nasal administration or anal administration, a blood concentration similar to that of intravenously administered dihydroginsenoside Rb1 was maintained.
The dosage may be adjusted.
【０２５０】実施例２２（ジヒドロジンセノサイドＲｂ
１による拡張型心筋症の予防・治療・処置） 拡張型心筋症は原因の不明な心筋細胞死（心筋細胞変
性）の結果、心機能の低下と心拡大を呈する疾患であ
る。心機能低下は進行性に増悪し、心不全症状を発症
し、死に至る。心不全が悪化したときには、心移植以外
に治療法はないと考えられてきた。おそらく、拡張型心
筋症患者の心筋細胞が死に至るときには、心筋細胞に豊
富に含まれる細胞死抑制遺伝子産物Ｂｃｌ−ｘＬ蛋白が
減少するものと推測されるので、このＢｃｌ−ｘＬ蛋白
の減少をジヒドロジンセノサイドＲｂ１の静脈内投与、
挿肛投与もしくは点鼻投与によりくい止めることによ
り、同患者の心筋細胞死を先延ばしすることができ、ひ
いては同患者の心機能を長期にわたって維持することが
可能になると思われる。拡張型心筋症と診断された患者
（体重６０ｋｇと仮定）に対して、速やかにジヒドロジ
ンセノサイドＲｂ１を適当量病状が改善するかあるいは
病状の進行が止まるまで点鼻、挿肛もしくは静脈内投与
する。また、ジヒドロジンセノサイドＲｂ１の投与と、
β−ブロッカー、カルシウム拮抗剤、ＡＣＥ阻害剤等の
内服とを併用することも可能である。心疾患を始めとす
る末梢臓器・組織の疾病に対して、ジヒドロジンセノサ
イドＲｂ１を投与するときは、中枢神経疾患に対する投
与量と同等もしくはそれより１／１０から１／１０００
０程度少ない投与量を選択することが好ましい。Example 22 (Dihydroginsenoside Rb
Prevention, treatment, and treatment of dilated cardiomyopathy by1 ) Dilated cardiomyopathy is a disease in which cardiac function is reduced and cardiac expansion is caused as a result of myocardial cell death (cardiomyocyte degeneration) of unknown cause. Decreased cardiac function progressively worsens, develops heart failure symptoms and leads to death. When heart failure worsens, it has been thought that there is no cure other than heart transplantation. Perhaps, when myocardial cells of patients with dilated cardiomyopathy is death, because cell death suppressing gene product Bcl-xL protein that is abundant in heart muscle cells are assumed to decrease, this decrease in Bcl-xL protein the intravenous administration of dihydroginsenoside Seno side Rb1,
It is thought that the cardiomyocyte death of the patient can be prolonged by stopping the patient by anal or nasal administration, and thus the patient's cardiac function can be maintained for a long time. For patients diagnosed with dilated cardiomyopathy (assuming a body weight of 60 kg), immediately dihydro ginsenosides side Rb1 nose until it stops the progress of an appropriate amount condition improves or condition, administering挿肛or intravenously . Administering dihydroginsenoside Rb1 ;
It is also possible to use together with internal use such as β-blocker, calcium antagonist, ACE inhibitor and the like. On peripheral organs and tissues of diseases including heart disease, when administered dihydro ginsenosides side Rb1 from the dose equal to or greater than 1/10 to the central nervous diseases 1/1000
It is preferable to select a dose as small as about 0.
【０２５１】実施例２３（化粧品組成物としてのジンセ
ノサイドＲｂ１による皮膚の老化防止） 加齢に伴う皮膚の老化は主として紫外線照射によりもた
らされ、皮膚の萎縮、たるみ、白髪、角層剥離、角質細
胞剥離、ふけ、皮脂欠乏、亀裂、かゆみ、かさつき、ひ
びわれ、しみ、しわ、そばかす、色素沈着、日焼け、乾
燥等の症状を呈する。ジンセノサイドＲｂ１は患部組織
の細胞外液濃度が１ｎｇ／ｍｌ以下、好ましくは１０ｐ
ｇ／ｍｌ以下、より好ましくは１００ｆｇ／ｍｌ以下
で、表皮細胞、皮脂腺の細胞、毛包の細胞、汗腺の細
胞、線維芽細胞、幹細胞、間葉系細胞、脂肪細胞等を含
めた皮膚の細胞を保護する作用を発揮するので、あらゆ
る化粧品、たとえば化粧水（スキンローション）、乳液
（ミルクローション）、ファンデーション、コールドク
リーム、クレンジングクリーム、洗顔フォーム、ナイト
クリーム、美白クリーム、おしろい、口紅、リップクリ
ーム、下地クリーム（メイクアップベース）、うがい
薬、洗眼液、洗顔液、ＵＶリキッドファンデーション、
パウダーファンデーション等にジンセノサイドＲｂ１を
微量混入して皮膚局所における細胞外液濃度を前記のご
とく低濃度に維持すれば皮膚の老化症状に対して優れた
効果を発揮すると考えられる。液状の化粧品、たとえば
通常のＵＶリキッドファンデーションにジンセノサイド
Ｒｂ１を混入するときは、その濃度が１０００ｎｇ／ｍ
ｌ以下、好ましくは１０ｎｇ／ｍｌ以下、より好ましく
は１０ｆｇ／ｍｌ〜１００ｐｇ／ｍｌ以下となるように
調整した上で、連日皮膚に外用塗布もしくは外用噴霧す
れば皮膚局所におけるジンセノサイドＲｂ１の細胞外液
濃度が前記のごとく、低く維持され、皮膚の老化症状
（皮膚の萎縮、白髪、ふけ、角層剥離、角質細胞剥離、
皮脂欠乏、易感染性、たるみ、かゆみ、かさつき、ひび
われ、乾燥、しみ、しわ、そばかす、色素沈着、日焼
け）の改善、進行予防もしくは悪化予防に役立つ。ま
た、固形やゲル状の化粧品たとえば、通常の下地クリー
ムやナイトクリームにジンセノサイドＲｂ１を混入する
ときも、ジンセノサイドＲｂ１の混入量をクリーム１ｇ
あたり１０００ｎｇ以下、好ましくは１０ｎｇ以下、よ
り好ましくは１０ｆｇ〜１００ｐｇ程度にして、連日皮
膚に外用塗布すれば、皮膚の老化症状（萎縮、たるみ、
かゆみ、かさつき、ひびわれ、乾燥、しみ、しわ、そば
かす、色素沈着、日焼け等）の予防、治療、処置に役立
つ。ジンセノサイドＲｂ１を皮膚の老化症状の予防、改
善、処置の目的で上記の化粧品に混入する際の濃度の上
限は、液状化粧品の場合、１０μｇ／ｍｌ未満、固形も
しくはゲル状の化粧品の場合は１０μｇ／ｇ未満であ
る。すなわち、ジンセノサイドＲｂ１は０．００１％未
満の濃度で上記の化粧品に混入しなければならない。さ
もなければ、かえって皮膚の細胞の膜を障害することに
もなりかねない。もちろん、上記のごとくジンセノサイ
ドＲｂ１を微量含有する化粧品は、顔面に外用塗布、外
用噴霧するのみならず、日光に頻繁に照射されるその他
の皮膚組織（たとえば四肢や体幹）に外用塗布もしくは
外用噴霧できる。このように、低濃度のジンセノサイド
Ｒｂ１を含有する化粧品もしくは皮膚外用剤を長期にわ
たって常時使用することにより、皮膚の老化に伴う症状
を予防もしくは改善することができる。また、ジンセノ
サイドＲｂ１のかわりに、ほぼ同じ量のジヒドロジンセ
ノサイドＲｂ１や薬用人蔘粗サポニン分画及びその成分
を化粧品や皮膚外用剤に混入しても皮膚の老化に伴う諸
症状を防ぐことができる。ジンセノサイドＲｂ１、ジヒ
ドロジンセノサイドＲｂ１もしくは薬用人蔘のエキス又
は粗サポニン分画及びその成分は、前述のごとく低濃度
のものを用いる限り、既製のあらゆる化粧品や皮膚外用
剤に混入することができる。もちろん、任意の有効成分
を含有する化粧品の基剤を新規に開発する場合にも、そ
の中にジンセノサイドＲｂ１、ジヒドロジンセノサイド
Ｒｂ１、薬用人蔘のエキス又は粗サポニン分画、薬用人
蔘の粗サポニン分画の成分のいずれかを前述のごとく低
濃度で混入することにより皮膚の老化による諸症状を予
防、処置、改善することができる。また、前述のごとく
低濃度のジンセノサイドＲｂ１、ジヒドロジンセノサイ
ドＲｂ１、薬用人蔘のエキス又は粗サポニン分画、薬用
人蔘の粗サポニン分画の成分のいずれかを、複数組み合
わせて既製の化粧品や皮膚外用剤に混入するか、もしく
は任意の有効成分を含有する新規の化粧品の基剤に混入
することにより、皮膚の老化による諸症状を予防、処
置、改善するための化粧品や皮膚外用剤を作成できる。
ジンセノサイドＲｂ１、ジヒドロジンセノサイドＲ
ｂ１、薬用人蔘のエキス又は粗サポニン分画、薬用人蔘
の粗サポニン分画の成分のいずれかを、複数組み合わせ
て化粧品や皮膚外用剤に混入するときは、化粧品や皮膚
外用剤におけるそれぞれの濃度が前述のごとく低濃度で
ある限り、任意の濃度のものが選択できる。また、薬用
人蔘成分以外の公知の化粧品組成物を皮膚の老化防止用
の化粧品に混入するときも、従来報告された濃度より低
くすることが好ましい。さらに、ジンセノサイドＲ
ｂ１、ジヒドロジンセノサイドＲｂ１、薬用人蔘のエキ
ス又は粗サポニン分画、薬用人蔘の粗サポニン分画の成
分のいずれかは、既製の発毛・育毛剤や任意の有効成分
を含有する新規の発毛・育毛剤に、化粧品の場合と同様
の方法で低濃度で混入することにより、発毛、育毛、脱
毛の悪化予防、脱毛の進行予防のために使用することが
できる。また、化粧品、発毛剤もしくは育毛剤に混入す
る薬用人蔘の粗サポニン分画のかわりに、およそ５〜６
倍量以下の薬用人蔘抽出物（エキス）を使用してもよ
い。もちろん低濃度のものを使用する限り、薬用人蔘の
粗サポニン分画と薬用人蔘エキスを併用して、前述の化
粧品もしくは発毛剤、育毛剤、脱毛の進行予防剤に混入
してもよい。さらに、ジンセノサイドＲｂ１もしくはそ
の他の薬用人蔘成分を含有する任意の天然物や天然物の
組成物をあらゆる化粧品、発毛剤、育毛剤又は脱毛進行
予防剤に混入して、ジンセノサイドＲｂ１もしくはその
他の薬用人蔘成分の最終的な含有量が前述のごとく低濃
度に維持できるのであれば皮膚の老化症状や脱毛の改
善、予防又は処置のために利用できる。また薬用人蔘エ
キス、粗サポニン分画、粗サポニン分画構成成分、ジン
セノサイドＲｂ１、ジヒドロジンセノサイドＲｂ１及び
それらの化学的誘導体はケミカルピーリングにも利用で
きる。[0251] Example 23 skin aging associated with aging (anti-aging of the skin by ginsenoside Rb1 as a cosmetic composition) is brought mainly by ultraviolet radiation, atrophy of the skin, sagging, gray hair, desquamating horny Symptoms include cell detachment, dandruff, sebum deficiency, cracks, itching, dryness, cracks, spots, wrinkles, freckles, pigmentation, sunburn, and drying. Ginsenoside Rb1 has an extracellular fluid concentration of the affected tissue of 1 ng / ml or less, preferably
g / ml or less, more preferably 100 fg / ml or less, skin cells including epidermal cells, sebaceous gland cells, hair follicle cells, sweat gland cells, fibroblasts, stem cells, mesenchymal cells, adipocytes, etc. It works to protect all kinds of cosmetics, such as lotions (skin lotions), milky lotions (milk lotions), foundations, cold creams, cleansing creams, facial cleansers, night creams, whitening creams, whitening, lipsticks, lip balms, Base cream (makeup base), gargle, eyewash, face wash, UV liquid foundation,
It is contemplated that the extracellular fluid concentrations of ginsenoside Rb1 in trace contaminating skin topically powder foundation such exhibits an excellent effect against aging symptoms of the skin be maintained at a low concentration as described above. Liquid cosmetics, for example, when mixing the ginsenoside Rb1 in conventional UV liquid foundation, its concentration is 1000 ng / m
l or less, preferably 10 ng / ml or less, more preferably after having adjusted to less 10fg / ml~100pg / ml, extracellular fluid of ginsenoside Rb1 in the skin topically if daily topical application or topical spraying on the skin As described above, the concentration is maintained low, and the skin aging symptoms (skin atrophy, gray hair, dandruff, horny layer detachment, keratinocyte detachment,
It is useful for the improvement of sebum deficiency, susceptibility to infection, sagging, itching, dryness, cracking, dryness, spots, wrinkles, freckles, pigmentation, sunburn), prevention of progression or deterioration. Also, solid or gelled cosmetics for example, even when the normal base cream, night cream mixed ginsenoside Rb1, cream mixing amount of ginsenoside Rb1 1 g
When applied externally to the skin every day at 1000 ng or less, preferably 10 ng or less, more preferably about 10 fg to 100 pg, aging symptoms (atrophy, sagging,
Itching, dryness, cracks, dryness, spots, wrinkles, freckles, pigmentation, sunburn, etc.) are useful for prevention, treatment and treatment. Ginsenoside Rb1 prevention of aging skin conditions, improvement, the upper limit of the concentration when mixed with the cosmetic purpose of treatment in the case of liquid cosmetic, less than 10 [mu] g / ml, in the case of solid or gelled cosmetics 10 [mu] g / G. Namely, ginsenoside Rb1 must mixed with the cosmetics at a concentration of less than 0.001%. Otherwise, it could damage the skin's cell membrane. Of course, the cosmetic containing trace amounts of ginsenoside Rb1 as described above, the face on topical application, not only for external use spray, topical application or external to other skin tissue that is frequently irradiated to sunlight (for example limbs or trunk) Can be sprayed. Thus, by always using for a long time cosmetic or skin external preparation containing ginsenoside Rb1 in low concentrations, it is possible to prevent or improve the symptoms associated with skin aging. Also, in place of ginsenoside Rb1 , even if dihydroginsenoside Rb1 or a roughly ginseng crude saponin fraction and its components are mixed into cosmetics or an external preparation for skin, almost the same amount of dihydroginsenoside Rb1 can prevent various symptoms associated with skin aging. it can. Ginsenoside Rb1, extract or crude saponin fraction and its components dihydro ginsenosides side Rb1 or ginseng, unless used as a low concentration as described above may be incorporated into any cosmetic or skin external preparation of the ready-made. Of course, when a cosmetic base containing any active ingredient is newly developed, ginsenoside Rb1 , dihydroginsenoside Rb1 , ginseng extract or crude saponin fraction, crude ginseng crude By mixing any of the components of the saponin fraction at a low concentration as described above, various symptoms due to skin aging can be prevented, treated, and ameliorated. In addition, as described above, low-concentration ginsenoside Rb1 , dihydroginsenoside Rb1 , ginseng extract or crude saponin fraction, and components of crude saponin fraction of ginseng are used in combination with a plurality of ready-made cosmetics and Create cosmetics and external preparations for preventing, treating, and improving various symptoms caused by aging of the skin by mixing them into skin external preparations or mixing them with new cosmetic bases containing any active ingredients it can.
Ginsenoside Rb1 , dihydroginsenoside R
b1 , when a ginseng extract or a crude saponin fraction, or a component of a crude saponin fraction of a ginseng are mixed into a cosmetic or external preparation for skin in combination with a plurality of components, the cosmetic or external preparation for skin respectively As long as the density is low as described above, an arbitrary density can be selected. In addition, when a known cosmetic composition other than the ginseng component is mixed into a cosmetic for preventing skin aging, the concentration is preferably lower than the concentration conventionally reported. Furthermore, ginsenoside R
Any of b1 , dihydroginsenoside Rb1 , ginseng extract or crude saponin fraction, and components of crude saponin fraction of ginseng are novel products containing a ready-made hair growth and hair growth agent and any active ingredient. The hair growth / growth agent can be used in the same manner as in the case of cosmetics at a low concentration to prevent the growth of hair growth, hair growth and hair loss and prevent the progress of hair loss. In addition, instead of the crude saponin fraction of ginseng mixed in cosmetics, a hair growth agent or a hair restorer, about 5-6
Up to twice the amount of ginseng extract (extract) may be used. Of course, as long as a low concentration is used, the crude ginseng fraction of ginseng and the ginseng extract may be used in combination, and may be mixed with the above-mentioned cosmetics or a hair growth agent, a hair restorer, or an agent for preventing progression of hair loss. . Furthermore, ginsenoside Rb1 or any other natural product or composition of natural products containing ginseng ginseng Rb1 or other ginseng components may be mixed with any cosmetics, hair growth agent, hair restorer or hair loss progress preventive agent to form ginsenoside Rb1 or other ginsenoside Rb1 If the final content of the ginseng ingredient can be maintained at a low concentration as described above, it can be used for improving, preventing or treating aging symptoms and hair loss of the skin. Ginseng extract, crude saponin fraction, constituent components of crude saponin fraction, ginsenoside Rb1 , dihydroginsenoside Rb1 and chemical derivatives thereof can also be used for chemical peeling.
【０２５２】[0252]
【発明の効果】本発明は、比較的高用量のコウジン末の
経口投与用製剤からなる有効な急性期・慢性期の脳梗塞
（脳血栓・脳塞栓）のみならず脳出血・クモ膜下出血の
急性期や慢性期あるいは一過性脳虚血発作などに対す
る、脳・神経疾患の治療、予防剤及び、神経細胞・神経
組織保護薬を提供する。すなわち、本発明のコウジン末
は脳卒中が疑われる患者に対して、患者の意識と嚥下機
能が保持されている限り、在宅でも経口投与可能な薬物
である。また、糖尿病、高血圧症、脳動脈硬化症、心房
細動、脳動脈瘤等の基礎疾患を有する脳卒中予備軍とも
言うべき高齢者もしくは脳卒中の既往を有する患者がが
あらかじめコウジン末を服用しておくと、万一不幸にし
て脳卒中発作に見舞われても、コウジン末を服用しつづ
けることにより脳卒中病巣や高次神経機能障害が、コウ
ジン末非服用患者に比べて著しく抑制される。また、本
発明のコウジン末を比較的高用量経口投与することによ
り神経組織における細胞死抑制遺伝子産物すなわちＢｃ
ｌ−ｘＬ蛋白の発現が促進されること、ならびに比較的
高用量のコウジン末経口投与が虚血巣周辺部（ｉｓｃｈ
ｅｍｉｃ ｐｅｎｕｍｂｒａ）におけるアポトーシス様
神経細胞死を抑止することから判断すれば、本発明の比
較的高用量のコウジン末からなる医薬組成物はアポトー
シス様神経細胞死もしくはアポトーシスを伴う一次性・
二次性神経変性疾患（アルツハイマー病、ピック病、脊
髄小脳変性症、パーキンソン病、脱随疾患、舞踏病を始
めとするポリグルタミン病、筋萎縮性側索硬化症、緑内
障、老人性黄斑変性症、糖尿病性網膜症、網膜中心動静
脈閉塞症、網膜剥離、網膜色素変性症、エイズ脳症、肝
性脳症、脳炎、脳性マヒ、頭部外傷、脊髄損傷、一酸化
炭素中毒、新生児仮死、末梢神経障害、痙性対麻痺、脳
腫瘍、脳炎、アルコール中毒、中毒性神経疾患、スフィ
ンゴリピドーシス、進行性核上性麻痺、脊髄血管障害、
ミトコンドリア脳筋症、髄膜炎等）などにも有効である
とされる。さらに本発明のコウジン末は、加齢に伴う脳
神経細胞死に起因する諸症状（記銘力減退、振戦、筋力
低下、作業能力低下、思考力低下、見当識減退、計算力
低下、学習能力低下、意欲低下、動機付け低下、認知機
能低下、そしゃく機能低下、言語機能低下、判断能力低
下ならびにその他の高次脳神経機能低下）を改善する目
的で、健康食品、健康薬（ＯＴＣ製剤）としても使用可
能である。また、本発明の医薬組成物は副作用がほとん
どなく、安全性の高い薬物を提供するものである。Industrial Applicability The present invention is effective not only for effective acute / chronic cerebral infarction (cerebral thrombosis / cerebral embolism) but also for acute cerebral hemorrhage / subarachnoid hemorrhage comprising a preparation for oral administration of kojin powder at a relatively high dose. The present invention provides a therapeutic or preventive agent for cerebral / neurological disorders and a protective agent for nervous cells / nervous tissues in a cerebral / chronic phase or transient ischemic attack. That is, the kojin powder of the present invention is a drug that can be orally administered to a patient suspected of having a stroke, even at home, as long as the patient's consciousness and swallowing function are maintained. In addition, elderly or patients with a history of stroke who have a basic disease such as diabetes, hypertension, cerebral arteriosclerosis, atrial fibrillation, cerebral aneurysm, etc., should take Kojin powder in advance. Even if unfortunately suffering from a stroke attack, continuing to take Kojin powder will significantly reduce stroke foci and higher nervous dysfunction as compared to patients not taking Kojin powder. In addition, by administering orally the kojin powder of the present invention at a relatively high dose, a cell death suppressor gene product in neural tissue, ie, Bc
the expression of l-xL protein is promoted, and a relatively high dose red ginseng powder oral administration of ischemic lesion periphery (isch
Judging from the inhibition of apoptotic neuronal cell death in E. penicula, the pharmaceutical composition comprising a relatively high dose of kojin powder of the present invention can be used to inhibit apoptosis-like neuronal cell death or primary apoptosis associated with apoptosis.
Secondary neurodegenerative diseases (Alzheimer's disease, Pick's disease, spinocerebellar degeneration, Parkinson's disease, paralytic disease, polyglutamine disease including chorea, amyotrophic lateral sclerosis, glaucoma, senile macular degeneration , Diabetic retinopathy, central retinal arteriovenous obstruction, retinal detachment, retinitis pigmentosa, AIDS encephalopathy, hepatic encephalopathy, encephalitis, cerebral palsy, head injury, spinal cord injury, carbon monoxide poisoning, neonatal asphyxia, peripheral nerve Disorders, spastic paraplegia, brain tumors, encephalitis, alcoholism, toxic neurological disorders, sphingolipidosis, progressive supranuclear palsy, spinal vascular disorders,
Mitochondrial encephalomyopathy, meningitis, etc.). Furthermore, the kojin powder of the present invention can be used for various symptoms caused by cerebral nerve cell death associated with aging (reduced memory, tremor, decreased muscle strength, reduced work ability, reduced thinking ability, decreased orientation, reduced calculation ability, decreased learning ability). As well as health foods and health drugs (OTC preparations) for the purpose of improving motivation, motivation, cognitive function, masticatory function, language function, judgment ability and other higher cranial nerve function. It is possible. Further, the pharmaceutical composition of the present invention provides a highly safe drug with almost no side effects.
【０２５３】さて、細胞死抑制遺伝子産物Ｂｃｌ−ｘＬ
は細胞を生かすための最後の砦とも言うべき蛋白質であ
り、脳神経組織のみならず肝臓、脾臓、免疫系組織、循
環系組織、皮膚を始めとする多くの末梢臓器・組織に分
布して、細胞の生存を支持している。従って、低用量の
コウジン末経口投与が肝臓・脾臓等の末梢臓器における
Ｂｃｌ−ｘＬ蛋白発現量を増加させるという本実験結果
は、低用量のコウジン末が細胞死を伴うあらゆる末梢臓
器・組織の疾病の治療・予防・処置に有効であることを
物語っている。このような細胞死を伴う末梢臓器・組織
の疾病の中には、心筋・肝臓・腎臓の虚血再灌流障害、
心筋症、心不全、心筋梗塞、狭心症、末梢循環不全、褥
創、創傷、自己免疫病、免疫不全病、臓器移植後の拒絶
反応、筋ジストロフィー、角膜損傷、放射線障害、紫外
線障害、感染症、膠原病、大動脈炎症候群、急性動脈閉
塞症、閉塞性血栓血管炎、閉塞性動脈硬化症、レイノー
病、糖尿病、レイノー症候群、血栓性静脈炎、膵炎、肝
炎、腎炎、糖尿病性腎症、糖尿病性心筋症、舌痛症等が
含まれる。その他の細胞死を伴う疾患や病態について
は、成書（今日の治療指針；監修、日野原重明、阿部正
和；医学書院；１９９５）に記載されているが、これら
の疾患や病態の予防・治療・処置にコウジン末が有用で
ある。なお、広義には褥創、皮膚潰瘍、熱傷、凍傷など
も創傷に含まれる。また、本発明のコウジン末は、加齢
に伴う免疫機能低下、循環機能低下、消化機能低下、皮
膚機能低下、性機能減退の諸症状を改善する目的で、健
康薬としても使用可能である。コウジン末はヒトのみな
らずペットや家畜の疾患の予防・治療・処置にも利用で
きる。さらに海産物（魚介類、甲殻類、ウナギ、アナゴ
等）の養殖や農産物栽培にも利用される。この場合コウ
ジン末は、海洋資源や農作物を内分泌撹乱物質、毒素、
外傷、微生物、バイオハザード等から守る。さらに、コ
ウジン末から抽出した成分（紅蔘エキス（コウジンエキ
ス）、粗サポニン分画、各種精製サポニン、ジンセノサ
イド類、非サポニン分画）及びそれらの代謝産物もしく
は化学的誘導体も、コウジン末と同様の効果・効能を示
すものと期待される。[0253] Now, cell death-suppressing gene productBcl-x L
Is a protein that can be said to be the last fort to make use of cells.It is distributed not only in brain nerve tissue but also in many peripheral organs and tissues including liver, spleen, immune system, circulatory system, skin, etc. Support their survival. Thus, red ginseng powder oral administration of low dose, such as the liver, spleen present experimental result of increasing the Bcl-xL protein expression in peripheral organs, low dose red ginseng powder is any peripheral organs and tissues accompanied by cell death It shows that it is effective in treating, preventing and treating diseases. Among diseases of peripheral organs and tissues accompanied by such cell death, ischemia-reperfusion injury of myocardium, liver and kidney,
Cardiomyopathy, heart failure, myocardial infarction, angina pectoris, peripheral circulatory failure, pressure sores, wounds, autoimmune diseases, immunodeficiency diseases, rejection after organ transplantation, muscular dystrophy, corneal damage, radiation damage, ultraviolet damage, infectious diseases, Collagen disease, aortitis syndrome, acute arterial obstruction, obstructive thromboangitis, obstructive arteriosclerosis, Raynaud's disease, diabetes, Raynaud's syndrome, thrombophlebitis, pancreatitis, hepatitis, nephritis, diabetic nephropathy, diabetic Cardiomyopathy, tongue pain, etc. are included. Other diseases and conditions accompanied by cell death are described in a compendium (Today's treatment guidelines; supervision, Shigeaki Hinohara, Masakazu Abe; Medical Shoin; 1995). Kojin powder is useful for treatment. In a broad sense, wounds include pressure sores, skin ulcers, burns, and frostbite. The ginseng powder of the present invention can also be used as a health drug for the purpose of ameliorating various symptoms of immune function deterioration, circulatory function deterioration, digestive function deterioration, skin function deterioration and sexual function deterioration with aging. Kojin powder can be used for the prevention, treatment and treatment of diseases not only in humans but also in pets and livestock. It is also used for cultivation of marine products (seafood, crustaceans, eels, locusts, etc.) and cultivation of agricultural products. In this case, ginseng powder is used to endocrine disruptors, toxins,
Protect from trauma, microorganisms, biohazard, etc. In addition, the components (red ginseng extract (koujin extract), crude saponin fraction, various purified saponins, ginsenosides, non-saponin fractions) extracted from kojin powder and their metabolites or chemical derivatives are the same as those of kojin powder. It is expected to show effects and efficacy.
【０２５４】また、コウジン末の脳細胞（神経細胞、グ
リア細胞等）保護成分をリード化合物として、新規細胞
保護剤を開発することが可能になるのみならず、コウジ
ン末の脳細胞保護成分の標的分子あるいは受容体を同定
することにより、さらにそれらの機能を修飾・調節する
新規化合物を合成することができる。これらコウジン末
中の脳細胞保護成分の候補として、薬用人蔘の粗サポニ
ン分画成分、ジンセノサイドＲｂ１を始めとする精製サ
ポニン、薬用人蔘の非サポニン分画及びそれらの代謝産
物が考えられることは“発明の詳細な説明”で記述した
通りである。薬用人蔘中に含まれる精製サポニンやそれ
らの代謝産物を部分的に記述した文献として、庄司の著
書（庄司順三、薬用人蔘サポニンの化学、薬用人蔘’９
５、熊谷朗編、ｐｐ２５１−２６１）と小橋の著書（小
橋恭一ら、薬用人蔘の真の活性物質は？、−消化管で和
漢薬成分はすでに変化している−、薬用人蔘’９５、熊
谷 朗編、ｐｐ２１３−２２１）があげられる。従っ
て、本発明は上述のごとく細胞死を伴うあらゆる疾病の
予防・治療・処置剤を開発する上で必須のものとなる。
さらに、コウジン末中の脳細胞保護成分、代謝産物ある
いはコウジン末（薬用人蔘）そのものの細胞保護機構を
解析することにより、細胞内情報伝達分子のうち、どの
分子群が細胞の生死に関与するかが明らかにされ、それ
らの分子群の機能を促進または阻害する新規化合物を合
成すれば、細胞死を伴う疾病のみならず悪性腫瘍の予防
・治療・処置にも利用しうる薬剤が開発されるものと思
われる。In addition, it is possible not only to develop a novel cytoprotective agent by using a ginseng powder-protected brain cell (neural cell, glial cell, etc.) as a lead compound, but also to target a ginseng powder-protected brain cell component. By identifying molecules or receptors, novel compounds that further modify or regulate their function can be synthesized. As candidates for protecting brain cells components of these red ginseng powder in, that the crude saponin fraction components of ginseng, purified saponins, including ginsenoside Rb1, non-saponin fractions and their metabolites ginseng considered Is as described in “Detailed description of the invention”. As a literature partially describing purified saponins and their metabolites contained in ginseng, Shoji's book (Junzo Shoji, Chemistry of Ginseng Saponin, Ginseng '9
5, Akira Kumagai, pp. 251-261) and Kobashi's book (Kyoichi Kobashi et al., What is the true active substance of ginseng?-Japanese and Chinese herbal components are already changing in the digestive tract-Ginseng '95 Eds., Edited by Akira Kumagai, pp213-221). Therefore, the present invention is indispensable for developing an agent for preventing, treating, or treating any disease associated with cell death as described above.
Furthermore, by analyzing the cytoprotective mechanism of brain cell protective components and metabolites in ginseng powder or ginseng powder (ginseng) itself, which of the intracellular signaling molecules is involved in cell viability By synthesizing novel compounds that promote or inhibit the function of these molecules, drugs that can be used not only for diseases involving cell death but also for the prevention, treatment and treatment of malignant tumors will be developed. It seems to be.
【０２５５】一方、本発明ではジンセノサイドＲｂ１が
優れた脳浮腫の予防・治療・処置剤となることが見出さ
れた。一般に、脳浮腫もしくは神経組織の浮腫という病
態は脳出血、脳梗塞、脳塞栓、クモ膜下出血、頭部外
傷、脳腫瘍、脳炎、重金属中毒、神経外傷、脊髄損傷、
けいれん発作時、けいれん発作後、脳神経外科手術中、
脳神経外科手術前後、脊椎外科手術中、脊椎外科手術前
後、心停止もしくは呼吸停止後に蘇生した際、等におい
てしばしば出現し、患者の生命予後や神経症状に悪影響
を与えることが知られている。従って、低用量のジンセ
ノサイドＲｂ１の静脈内持続投与が脳梗塞（脳塞栓）発
症後の脳浮腫を治療するということを見出した本実験結
果は、ジンセノサイドＲｂ１が前述の疾病、疾患、症
状、症候に伴う脳神経組織の浮腫の予防・治療・処置に
も有用であることを物語っている。[0255] On the other hand, in the present invention it has been found to be a prevention, treatment and treatments excellent cerebral edema ginsenoside Rb1. In general, the condition of cerebral edema or edema of nerve tissue is cerebral hemorrhage, cerebral infarction, cerebral embolism, subarachnoid hemorrhage, head trauma, brain tumor, encephalitis, heavy metal poisoning, nerve trauma, spinal cord injury,
During a seizure, after a seizure, during neurosurgery,
It is known that it often appears before and after neurosurgery, during spine surgery, before and after spine surgery, when resuscitated after cardiac arrest or respiratory arrest, and adversely affects the prognosis of patients' lives and neurological symptoms. Therefore, the results of this experiment, which showed that continuous intravenous administration of low-dose ginsenoside Rb1 treats cerebral edema after the onset of cerebral infarction (cerebral embolism), indicate that ginsenoside Rb1 shows that the aforementioned diseases, diseases, symptoms, It is also useful for prevention, treatment and treatment of edema of cranial nerve tissue associated with symptoms.
【０２５６】さらに、生体組織の浮腫という病態は、脳
血管が永久閉塞した脳組織のみならず、末梢の血管が閉
塞した場合や末梢臓器・組織の血流が障害された場合に
も、生じることが知られている。従って、脳血管（ＭＣ
Ａ）が永久閉塞した後に少量のジンセノサイドＲｂ１を
静脈内投与して脳浮腫が改善・治療されたという本実験
結果に基づけば、ジンセノサイドＲｂ１は末梢組織や末
梢臓器の循環障害（たとえば大動脈炎症候群、膠原病、
急性末梢動脈閉塞症、閉塞性血栓血管炎、閉塞性動脈硬
化症、血栓性静脈炎、糖尿病性網膜症、糖尿病性腎症、
網膜中心動静脈閉塞症、急性末梢循環不全、ショック、
レイノー病、レイノー症候群、痔疾、心筋梗塞、褥創、
末梢循環不全、狭心症、肝・腎・心虚血再灌流障害等）
に効能を示すと考えられる。もちろん、前記の疾病のう
ち痔疾や褥創に伴う病変組織の浮腫に対しては、ジンセ
ノサイドＲｂ１を適当な基剤に混入した上で外用塗布、
外用噴霧もしくは挿肛投与してもよい。ジンセノサイド
Ｒｂ１は、患部組織における細胞外液濃度が１ｎｇ／ｍ
ｌ以下、好ましくは１０ｐｇ／ｍｌ以下、より好ましく
は１００ｆｇ／ｍｌ以下に維持できるのであれば、静脈
内投与に限らず既述のごとく任意の投与経路が選択でき
る。In addition, the pathological condition called edema of living tissue occurs not only in brain tissue in which cerebral blood vessels are permanently occluded, but also when peripheral blood vessels are occluded or blood flow in peripheral organs / tissues is impaired. It has been known. Therefore, cerebral blood vessels (MC
Based small amounts of ginsenoside Rb1 after A) has permanent occlusion administered intravenously to the experimental result that cerebral edema is improved and treatment, ginsenoside Rb1 are circulatory disorders (e.g. aortitis peripheral tissues and peripheral organs Syndrome, collagen disease,
Acute peripheral arterial occlusion, obstructive thromboangiitis, obstructive atherosclerosis, thrombophlebitis, diabetic retinopathy, diabetic nephropathy,
Central retinal arteriovenous obstruction, acute peripheral circulatory failure, shock,
Raynaud's disease, Raynaud's syndrome, hemorrhoids, myocardial infarction, pressure sores,
Peripheral circulatory insufficiency, angina, hepatic / renal / cardiac ischemia / reperfusion injury etc.)
It is considered to show efficacy. Of course, for the edema of diseased tissue associated with hemorrhoids and pressure sore of the disease, topical application in terms of mixed ginsenoside Rb1 in a suitable base,
External spray or anal injection may be used. Ginsenoside Rb1 has an extracellular fluid concentration of 1 ng / m in the affected tissue.
1 or less, preferably 10 pg / ml or less, more preferably 100 fg / ml or less, any administration route can be selected as described above, not limited to intravenous administration.
【０２５７】また、本発明では、低用量のジンセノサイ
ドＲｂ１の静脈内持続投与が脊髄損傷に伴う褥創にも効
果・効能を発揮することが示された。このことは脊髄損
傷のみならず他の神経外傷、末梢神経障害、末梢神経
痛、末梢神経麻痺、脳卒中、神経変性疾患、脱髄疾患に
伴う褥創にも、ジンセノサイドＲｂ１が有用であること
を物語っている。もちろん、前記の脳・神経疾患の一次
病変に対しても、低用量のジンセノサイドＲｂ１が優れ
た効果・効能を示すことは、本発明者らが、すでに明ら
かにしている。[0257] In the present invention, the continuous intravenous administration of low doses of ginsenoside Rb1 is also effective and efficacy in pressure sore due to spinal cord injury has been shown. This is another neurotrauma not only spinal cord injury, peripheral neuropathy, peripheral neuralgia, peripheral nerve palsy, stroke, neurodegenerative diseases, even pressure sore accompanying demyelinating disease, tells us that ginsenoside Rb1 are useful ing. Of course, even for a primary lesion of the brain and nervous diseases, to exhibit effectiveness and efficacy of ginsenoside Rb1 low doses excellent, the present inventors have been previously shown.
【０２５８】また、脊髄損傷を起こした神経組織では、
しばしば当該脊髄組織に浮腫が生じ、神経症状（上肢ま
たは下肢の対麻痺、排尿・排便困難、神経因性膀胱）を
も悪化せしめることが知られているが、低用量のジンセ
ノサイドＲｂ１の静脈内持続投与が優れた脊髄損傷治療
効果を示すという本実験結果は、ジンセノサイドＲｂ１
が脊髄組織の浮腫の予防・処置・治療に有用であるのみ
ならず、自律神経障害、排尿・排便困難や神経因性膀胱
の予防・処置・治療にも有用であることを物語ってい
る。In the nerve tissue that has caused spinal cord injury,
Often swelling occurs in the spinal cord tissue, neurological symptoms (upper limb or a pair of lower limb paralysis, urination, defecation difficulty, neurogenic bladder) but also allowed to exacerbate are known, low doses of intravenous ginsenoside Rb1 This experimental result, which shows that continuous administration shows an excellent spinal cord injury treatment effect, indicates that ginsenoside Rb1
Is useful not only for the prevention, treatment and treatment of edema of spinal cord tissue, but also for the prevention, treatment and treatment of autonomic nervous disorder, urination and defecation, and neuropathic bladder.
【０２５９】さらに低濃度のジンセノサイドＲｂ１は、
オリゴデンドロサイトならびに心筋細胞の細胞死抑制遺
伝子産物Ｂｃｌ−ｘＬの発現を増強し、同細胞の生存を
促進するので、低用量のジンセノサイドＲｂ１の静脈内
投与、静脈内持続投与、点鼻投与、舌下投与もしくは挿
肛投与等は多発性硬化症、ビンスワンガー病、白質脳炎
等の脱髄疾患、脳の慢性低灌流障害、心筋梗塞、心不
全、心筋症、心停止、狭心症、心肺蘇生術中、心肺蘇生
術前後、心臓外科手術中、心臓外科手術前後、等に有効
と考えられる。[0259] In addition low concentration of ginsenoside Rb1 of,
Oligodendrocytes and enhance the expression of a cell death-suppressing gene product Bcl-xL cardiomyocytes, so promoting the survival of the cell, intravenous administration of low dose ginsenoside Rb1, continuous intravenous administration, nasal administration , Sublingual administration or anal injection, etc. include demyelinating diseases such as multiple sclerosis, Binswanger's disease, leukoencephalitis, chronic hypoperfusion injury of the brain, myocardial infarction, heart failure, cardiomyopathy, cardiac arrest, angina pectoris, cardiopulmonary resuscitation It is considered to be effective during surgery, before and after cardiopulmonary resuscitation, during cardiac surgery, before and after cardiac surgery.
【０２６０】ジンセノサイドＲｂ１は前述のごとく医薬
組成物として有用であるのみならず、あらゆる細胞のア
ポトーシス様細胞死やアポトーシスを抑止するので、生
体の老化を防ぐための健康薬もしくは化粧品の組成物と
しても使用可能である。特に皮膚局所でのジンセノサイ
ドＲｂ１の細胞外液濃度が１ｎｇ／ｍｌ以下、好ましく
は１０ｐｇ／ｍｌ以下、より好ましくは１００ｆｇ／ｍ
ｌ以下となるように、あらゆる化粧品、たとえば化粧水
（スキンローション）、乳液（ミルクローション）、フ
ァンデーション、コールドクリーム、クレンジングクリ
ーム、洗顔フォーム、ナイトクリーム、美白クリーム、
おしろい、うがい薬、洗眼液、洗顔液、口紅、リップク
リーム、下地クリーム（メイクアップベース）、ＵＶリ
キッドファンデーション、パウダーファンデーション等
の中に微量のジンセノサイドＲｂ１を混入しておけば、
加齢に伴う皮膚の老化症状（紫外線障害、しみ、しわ、
そばかす、かさつき、ひびわれ、たるみ、かゆみ、日焼
け等）を防ぐ上で極めて有用であると考えられる。もち
ろん、低用量・低濃度のジンセノサイドＲｂ１は発毛
剤、育毛剤、脱毛の悪化予防剤としても使用可能であ
る。[0260] Ginsenoside Rb1 is not only useful as the above-mentioned as a pharmaceutical composition, since suppresses apoptosis-like cell death or apoptosis in any cells, as a health agent or cosmetic composition for preventing aging of the living body Can also be used. In particular the extracellular fluid concentrations of ginsenoside Rb1 in the skin topically is 1 ng / ml or less, preferably 10 pg / ml, more preferably 100 fg / m
l so that any cosmetics such as lotion (skin lotion), milky lotion (milk lotion), foundation, cold cream, cleansing cream, facial cleansing foam, night cream, whitening cream,
Face powder, mouthwash, eye wash, cleansing liquid, lipstick, lip cream, foundation cream (makeup base), UV liquid foundation, if mixed with ginsenoside Rb1 of trace amounts in such as powder foundation,
Age-related skin aging symptoms (UV damage, spots, wrinkles,
It is considered to be extremely useful in preventing freckles, rust, cracks, sagging, itching and sunburn. Of course, low doses and low concentrations of ginsenoside Rb1 of hair growth agents, hair growth agents, and can also be used as a deterioration preventive agent for hair loss.
【０２６１】ジンセノサイドＲｂ１のＢｃｌ−ｘＬ発現
増強作用は、神経細胞、グリア細胞、血管内皮細胞、血
管平滑筋細胞、神経幹細胞等を含めてあらゆる細胞にお
いて認められるので、この意味でジンセノサイドＲｂ１
は低用量・低濃度で優れた効果を発揮する細胞保護剤と
考えられる。従って、低用量・低濃度のジンセノサイド
Ｒｂ１は中枢神経組織のみならず末梢組織・末梢臓器に
おいても、細胞死を伴うあらゆる疾患、症候、症状に極
めて有用と考えられる。また、低用量・低濃度のジンセ
ノサイドＲｂ１は癌患者や肉腫患者においても、腫瘍細
胞に浸潤された健常組織の正常細胞を保護することによ
り、同患者のＱＯＬ改善や延命に役立つと考えられる。[0261] Bcl-xL expression enhancing action of ginsenosides Rb1 is, nerve cells, glial cells, vascular endothelial cells, vascular smooth muscle cells, since it is found in all cells, including neural stem cells, and the like, ginsenoside Rb1 In this sense
Is considered to be a cytoprotective agent that exhibits excellent effects at low doses and low concentrations. Thus, low doses and low concentrations of ginsenoside Rb1 in even in peripheral tissues, peripheral organs not only the central nervous tissue, any disease involving cell death, symptoms, is considered very useful in symptoms. Further, low doses and low concentrations of ginsenoside Rb1 in even in cancer patients and sarcoma patients, by protecting normal cells of healthy tissues infiltrated the tumor cells, is believed to be helpful in QOL improvement and survival of the patient.
【０２６２】また、本発明はジンセノサイドＲｂ１をリ
ード化合物として使用することにより、新規の有用な細
胞保護剤ジヒドロジンセノサイドＲｂ１が作成できるこ
とを見出したものである。このことは、薬用人蔘に含有
される他の成分をもリード化合物として利用することに
より、新規に有用な医薬組成物ならびに健康薬、健康食
品等を開発できることを物語っている。[0262] Further, the present invention is by the use of ginsenoside Rb1 as a lead compound, it has been found that a novel useful cytoprotective agents dihydro ginsenosides side Rb1 can be created. This indicates that by using other components contained in ginseng as a lead compound, it is possible to develop a novel and useful pharmaceutical composition, health drug, health food and the like.
【０２６３】脊髄損傷ラットを用いた本実験結果より、
低用量の粗サポニン分画からなる静脈内投与製剤の脊髄
損傷治療効果はジンセノサイドＲｂ１と比べて遜色ない
くらい優れたものと考えられる。従って粗サポニン分画
に含有される精製サポニンのいずれかもしくはそれらの
代謝産物が極めて強力な脊髄損傷治療作用を発揮するも
のと思われるが、このことは粗サポニン分画に含有され
る精製サポニンのいずれかもしくはそれらの代謝産物が
脊髄損傷・神経外傷治療のためのリード化合物になり得
ることも支持している。本実験結果は、さらに粗サポニ
ン分画に含有される精製サポニン（図１５）のいずれか
が脊髄損傷後の神経組織二次変性をも抑止することを支
持している。なお、本実験では、オタネニンジン（Ｐａ
ｎａｘｇｉｎｓｅｎｇ Ｃ．Ａ．Ｍｅｙｅｒ）の粗サポ
ニン分画を用いたが、その他の薬用人蔘（たとえば三七
人蔘、人参田七、ヒマラヤ人蔘、アメリカ人蔘、チクセ
ツニンジン等）の粗サポニン分画を用いても同様の結果
が得られると考えられる。従って、前述の薬用人蔘の粗
サポニン分画に含有される成分のいずれかが脊髄損傷・
神経外傷・頭部外傷の予防・治療・処置に有用であると
考えられる。また、周知のごとく神経組織は他の末梢組
織に比べて外傷に対して最も脆弱な組織であるので低用
量の粗サポニン分画からなる医薬組成物が脊髄損傷の治
療・処置に著効を示すという事実は、低用量の粗サポニ
ン分画が中枢神経組織以外の組織すなわち末梢組織の外
傷にも有効であることを物語っている。From the results of this experiment using spinal cord injured rats,
Spinal cord injury therapeutic effects of intravenous formulation consisting crude saponin fraction of low doses is considered to have excellent long not inferior as compared with the ginsenoside Rb1. Therefore, it is considered that any of the purified saponins contained in the crude saponin fraction or their metabolites exert an extremely strong therapeutic effect on spinal cord injury, which indicates that the purified saponin contained in the crude saponin fraction contains He also supports that either or their metabolites can be lead compounds for the treatment of spinal cord injury and neurotrauma. The results of this experiment further support that any of the purified saponins (FIG. 15) contained in the crude saponin fraction also inhibits secondary degeneration of nerve tissue after spinal cord injury. In this experiment, Panax ginseng (Pa
nagginseng C.I. A. Meyer's crude saponin fraction, but crude saponin fractions of other ginseng (for example, 37 ginseng, ginseng, Himalayan ginseng, American ginseng, and ginseng) can also be used. It is expected that similar results will be obtained. Therefore, any of the components contained in the crude saponin fraction of the aforementioned ginseng may cause spinal cord injury or damage.
It is considered useful for prevention, treatment and treatment of nerve trauma and head trauma. Also, as is well known, nerve tissue is the tissue most vulnerable to trauma as compared with other peripheral tissues, so that a pharmaceutical composition comprising a low-dose crude saponin fraction is remarkably effective in treating and treating spinal cord injury. This fact indicates that the low-dose crude saponin fraction is also effective for trauma to tissues other than central nervous tissue, that is, peripheral tissues.
【０２６４】また、脊髄損傷においては、グリア細胞の
うちでも特にオリゴデンドロサイトが傷害を受けてアポ
トーシスに陥った結果、脱髄現象が起こり神経症状が悪
化・進行すると報告されている（Ｃｒｏｗｅ，Ｍ．Ｊ．
ｅｔ ａｌ．，ＮａｔｕｒｅＭｅｄ．３，７３−７６，
１９９７；Ｅｍｅｒｙ，Ｅ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｎｅｕ
ｒｏｓｕｒｇ．８９，９１１−９２０，１９９８）。粗
サポニン分画の静脈内投与が顕著に脊髄損傷ラットの両
下肢麻痺を改善するという実験結果は、粗サポニン分画
に含有される精製サポニンのいずれかがオリゴデンドロ
サイトのアポトーシスもしくはアポトーシス様神経細胞
死を抑止することにより、脊髄損傷の症状を改善するこ
とを物語っている。従って、本発明の低濃度・低用量の
粗サポニン分画に含有される精製サポニンのいずれかは
オリゴデンドロサイトを保護することにより、脱髄をき
たす脳神経疾患（多発性硬化症、ビンスワンガー病、脳
の慢性低灌流障害、白質脳炎等）の予防・治療・処置に
も有効であると考えられる。さらに、粗サポニン分画の
静脈内投与が脊髄損傷ラットの両下肢麻痺（対麻痺）を
改善するという実験結果は、損傷を受けた神経線維もし
くは神経組織が粗サポニン分画投与により再生すること
も示唆している。In spinal cord injury, it has been reported that, among glial cells, oligodendrocytes, in particular, are injured and apoptosis occurs, resulting in demyelination, resulting in deterioration and progression of neurological symptoms (Crowe, M. .
et al. , NatureMed. 3,73-76,
1997; Emery, E .; et al. , J. et al. Neu
rosurg. 89, 911-920, 1998). The experimental results that intravenous administration of the crude saponin fraction significantly improved bilateral lower limb paralysis in spinal cord injured rats show that either of the purified saponins contained in the crude saponin fraction could induce oligodendrocyte apoptosis or apoptotic neurons. It has been shown to prevent death and improve the symptoms of spinal cord injury. Therefore, any of the purified saponins contained in the low-concentration, low-dose crude saponin fraction of the present invention protects oligodendrocytes and causes demyelination in cranial nerve diseases (multiple sclerosis, Binswanger's disease, Of chronic hypoperfusion injury, leukoencephalitis, etc.). Furthermore, the experimental results that intravenous administration of the crude saponin fraction improves paraplegia (paraplegia) in spinal cord injured rats indicate that damaged nerve fibers or nerve tissue can be regenerated by administration of the crude saponin fraction. Suggests.
【０２６５】また、脊髄損傷を起こした神経組織では、
しばしば当該脊髄組織に浮腫が生じ神経症状（下肢の対
麻痺、排尿・排便困難、神経因性膀胱等）を悪化せしむ
ると言われているが、低用量の粗サポニン分画の静脈内
投与が優れた脊髄損傷治療効果を示すという本実験結果
は、粗サポニン分画もしくは粗サポニン分画に含有され
る精製サポニンのいずれかが脊髄組織の浮腫ならびに脊
髄損傷に伴う排尿・排便困難・神経因性膀胱の予防・治
療・処置に有用であることを物語っている。In the nerve tissue that has caused spinal cord injury,
It is said that edema often occurs in the spinal cord tissue and exacerbates neurological symptoms (paraplegia of lower limbs, difficulty urinating / defecation, neurogenic bladder, etc.), but intravenous administration of low-dose crude saponin fraction The results of this experiment, which showed an excellent therapeutic effect on spinal cord injury, indicate that either the crude saponin fraction or the purified saponin contained in the crude saponin fraction caused edema of spinal cord tissue and urination / defecation difficulties / neuropathy associated with spinal cord injury. It is useful for prevention, treatment and treatment of sexual bladder.
【０２６６】さらに本発明では、粗サポニン分画又はそ
の塩を含有している静脈内投与用製剤が脊髄損傷による
神経組織の二次変性を抑止することが発明された。さら
に、低用量・低濃度の粗サポニン分画からなる医薬組成
物は脊髄損傷・神経外傷・頭部外傷の画期的治療薬とな
るのみならず、末梢組織の外傷にも効果・効能を示すこ
とが期待される。このように低用量・低濃度の粗サポニ
ン分画の脊髄損傷・神経外傷治療効果は画期的なもので
あるので、粗サポニン分画に含有される成分や精製サポ
ニンもしくはそれらの代謝産物をリード化合物として新
規脊髄損傷・神経外傷治療薬を合成できるのみならず、
粗サポニン分画に含有される成分や精製サポニンもしく
はそれらの代謝産物の標的分子を同定することにより、
標的分子の機能を修飾する新規化合物をも合成して脊髄
損傷・神経外傷・外傷治療薬の開発を目指すことができ
る。Further, in the present invention, it was invented that a preparation for intravenous administration containing a crude saponin fraction or a salt thereof inhibits secondary degeneration of nerve tissue due to spinal cord injury. Furthermore, a pharmaceutical composition comprising a low-dose, low-concentration crude saponin fraction is not only an innovative treatment for spinal cord injury, nerve trauma, and head trauma, but is also effective and effective against peripheral tissue trauma. It is expected. Since the therapeutic effect of low-dose / low-concentration crude saponin fraction on spinal cord injury and nerve trauma is revolutionary, it can lead to components contained in crude saponin fraction and purified saponins or their metabolites. In addition to being able to synthesize novel spinal cord injury and neurotrauma drugs as compounds,
By identifying the components contained in the crude saponin fraction and the target molecules of purified saponins or their metabolites,
We can also aim to develop drugs for treating spinal cord injury, nerve trauma and trauma by synthesizing novel compounds that modify the function of the target molecule.
【０２６７】本発明では、薬用人蔘の粗サポニン分画も
しくは粗サポニン分画構成成分のいずれかが低用量・低
濃度でジンセノサイドＲｂ１と同様に優れた脳細胞・神
経細胞保護作用ならびに脊髄損傷、頭部外傷、神経外傷
治療効果を示すことが明らかにされた。従って、本発明
の低用量・低濃度の粗サポニン分画、もしくは粗サポニ
ン分画構成成分のいずれかが、特願平１０−３６５５６
０、ＰＣＴ／ＪＰ９９／０２５５０、ジンセノサイドＲ
ｂ１からなる脳細胞又は神経細胞保護剤）ならびに特願
平１１−２４３３７８、ＰＣＴ／ＪＰ９９／０６８０４
（ジンセノサイドＲｂ１からなる脳血管再生・再構築促
進剤ならびに神経組織二次変性抑止剤）もしくは特願２
０００−１６３０２６号（ジンセノサイドＲｂ１からな
る皮膚組織再生促進剤）において本発明者らが記載した
ジンセノサイドＲｂ１の効果・効能・用途を、すべて兼
ね備えていると考えられる。すなわち、低用量・低濃度
の粗サポニン分画もしくは粗サポニン分画構成成分のい
ずれかは、ジンセノサイドＲｂ１と同様に細胞死抑制遺
伝子産物Ｂｃｌ−ｘＬの発現を上昇せしめ、神経細胞の
アポトーシスもしくはアポトーシス様神経細胞死を抑止
するものと考えられる。さらに、低用量・低濃度の粗サ
ポニン分画もしくは粗サポニン分画構成成分のいずれか
は、ジンセノサイドＲｂ１と同様に、神経細胞死を伴う
あらゆる脳神経疾病（アルツハイマー病、脳卒中、脳梗
塞、脳血栓、脳塞栓、クモ膜下出血、一過性脳虚血発
作、ピック病、脊髄小脳変性症、パーキンソン病、脱随
疾患、舞踏病を始めとするポリグルタミン病、筋萎縮性
側索硬化症、緑内障、老人性黄斑変性症、糖尿病性網膜
症、網膜中心動静脈閉塞症、網膜剥離、網膜色素変性
症、エイズ脳症、肝性脳症、脳炎、脳性マヒ、頭部外
傷、脊髄損傷、一酸化炭素中毒、新生児仮死、末梢神経
障害、痙性対麻痺、進行性核上性麻痺、脊髄血管障害、
ミトコンドリア脳筋症、髄膜炎等）に効果・効能を示す
とされる。[0267] In the present invention, either a low dose and low concentrations of ginsenoside Rb1 and likewise superior brain cell-nerve cell protective action and spinal cord injury of the crude saponin fraction or the crude saponin fraction constituents of ginseng It has been shown to have a therapeutic effect on head trauma and nerve trauma. Therefore, either the low-dose / low-concentration crude saponin fraction or the crude saponin fraction constituting component of the present invention is disclosed in Japanese Patent Application No. 10-36556.
0, PCT / JP99 / 02550, ginsenoside R
b1 consisting Brain cell or nerve cell-protective agents) as well as Japanese Patent Application No. Hei 11-243378, PCT / JP99 / 06804
(A cerebral blood vessel regeneration / remodeling promoter comprising ginsenoside Rb1 and an inhibitor of secondary degeneration of nerve tissue)
The 000-163026 Patent effects, efficacy and usages of ginsenoside Rb1 of the present inventors in (skin tissue regeneration-promoting agents comprising ginsenoside Rb1) has been described, it is considered that combines all. That is, either the low doses and low concentrations crude saponin fraction or the crude saponin fraction constituents of raised expression of ginsenoside Rb1 in the same manner as in cell death suppressing gene product Bcl-xL, neuronal apoptosis or It is thought to suppress apoptotic neuronal cell death. Further, any of the low doses and low concentrations crude saponin fraction or the crude saponin fraction constituents of, as well as ginsenoside Rb1, any cranial diseases involving neuronal cell death (Alzheimer's disease, stroke, cerebral infarction, cerebral thrombosis, Cerebral embolism, subarachnoid hemorrhage, transient ischemic attack, Pick's disease, spinocerebellar degeneration, Parkinson's disease, paralytic disease, polyglutamine disease including chorea, amyotrophic lateral sclerosis, glaucoma Senile macular degeneration, diabetic retinopathy, central retinal arteriovenous obstruction, retinal detachment, retinitis pigmentosa, AIDS encephalopathy, hepatic encephalopathy, encephalitis, cerebral palsy, head trauma, spinal cord injury, carbon monoxide poisoning , Neonatal asphyxia, peripheral neuropathy, spastic paraplegia, progressive supranuclear palsy, spinal vascular disorders,
Mitochondrial encephalomyopathy, meningitis, etc.).
【０２６８】さて、細胞死抑制遺伝子産物Ｂｃｌ−ｘＬ
は細胞を生かすための最後の砦とも言うべき蛋白質であ
り、脳神経組織のみならず肝臓、脾臓、免疫系組織、循
環系組織、皮膚を始めとする多くの末梢臓器・組織に分
布して、細胞の生存を支持している。従って、低用量・
低濃度の粗サポニン分画もしくは粗サポニン分画構成成
分のいずれかがジンセノサイドＲｂ１と同様に、Ｂｃｌ
−ｘＬの発現を上昇せしめるという推測に基づけば、低
用量・低濃度の粗サポニン分画もしくは粗サポニン分画
構成成分のいずれかが細胞死を伴う末梢臓器・組織の疾
病の治療・予防・処置に有効であることを物語ってい
る。このような細胞死を伴う末梢臓器・組織の疾病の中
には、心筋・肝臓・腎臓の虚血再灌流障害、心筋症、心
不全、心筋梗塞、狭心症、末梢循環不全、褥創、皮膚潰
瘍、皮膚の創傷、外傷、熱傷、放射線障害、老化、紫外
線障害、電撃症、脱毛症、乾皮症、自己免疫病、免疫不
全病、臓器移植後の拒絶反応、筋ジストロフィー、角膜
損傷、感染症、膠原病、大動脈炎症候群、急性動脈閉塞
症、閉塞性血栓血管炎、消化性潰瘍、閉塞性動脈硬化
症、レイノー病、レイノー症候群、痔疾、血栓性静脈
炎、膵炎、肝炎、腎炎、糖尿病性腎症、糖尿病性心筋
症、舌痛症等が含まれる。また、本発明の低用量・低濃
度の粗サポニン分画もしくは粗サポニン分画構成成分の
いずれかは、加齢に伴う免疫機能低下、循環機能低下、
消化機能低下、皮膚機能低下、性機能減退の諸症状を改
善する目的で、健康薬としても使用可能である。さら
に、低用量・低濃度の粗サポニン分画もしくは粗サポニ
ン分画構成成分のいずれかをジンセノサイドＲｂ１と同
様にあらゆる化粧品の組成物として利用することによ
り、皮膚の老化症状（紫外線障害、しわ、しみ、日焼け
等）の予防・治療・処置にも利用できる。また、低用量
・低濃度の粗サポニン分画もしくはその成分は、癌や肉
腫を有する患者においても腫瘍細胞に浸潤された健常組
織の正常細胞を保護することにより、同患者のＱＯＬ改
善や延命に役立つと考えられる。[0268] Now, cell death-suppressing gene productBcl-x L
Is a protein that can be said to be the last fort to make use of cells.It is distributed not only in brain nerve tissue but also in many peripheral organs and tissues including liver, spleen, immune system, circulatory system, skin, etc. Support their survival. Therefore, low dose
Like any of the crude saponin fraction or the crude saponin fraction constituents of low concentrations ginsenoside Rb1, Bcl
Based on assumption that allowed to increase the expression of -xL, treatment, prevention and one of low doses and low concentrations crude saponin fraction or the crude saponin fraction constituents of the peripheral organs and tissues accompanied by cell death disease It shows that it is effective for treatment. Among diseases of peripheral organs and tissues accompanied by such cell death, ischemia / reperfusion injury of myocardium, liver and kidney, cardiomyopathy, heart failure, myocardial infarction, angina, peripheral circulatory failure, pressure sore, skin Ulcers, skin wounds, trauma, burns, radiation damage, aging, UV damage, electrostroke, alopecia, xeroderma, autoimmune disease, immunodeficiency disease, rejection after organ transplantation, muscular dystrophy, corneal injury, infection , Collagen disease, aortitis syndrome, acute arterial occlusion, obstructive thromboangiitis, peptic ulcer, obstructive arteriosclerosis, Raynaud's disease, Raynaud's syndrome, hemorrhoids, thrombophlebitis, pancreatitis, hepatitis, nephritis, diabetic Nephropathy, diabetic cardiomyopathy, tongue pain and the like are included. In addition, any of the low-dose, low-concentration crude saponin fraction or the crude saponin fraction constituent component of the present invention may have reduced immune function with aging, decreased circulatory function,
It can also be used as a health agent for the purpose of improving various symptoms of digestive dysfunction, skin dysfunction and sexual dysfunction. Furthermore, the use of either a low-dose, low-concentration crude saponin fraction or a crude saponin fraction component as a composition for any cosmetic product as with ginsenoside Rb1 allows the aging of the skin (ultraviolet damage, wrinkles, It can also be used for prevention, treatment and treatment of spots, sunburn, etc.). In addition, the low-dose, low-concentration crude saponin fraction or its components protects normal cells of healthy tissue infiltrated by tumor cells even in patients with cancer or sarcoma, thereby improving QOL and extending the life of the patients. It is thought to be useful.
【０２６９】特願平１１−２４３３７８、ＰＣＴ／ＪＰ
９９／０６８０４（ジンセノサイドＲｂ１からなる脳血
管再生・再構築促進剤ならびに神経組織二次変性抑止
剤）において、本発明者ら（阪中、田中）はジンセノサ
イドＲｂ１の少量静脈内持続投与が、脳血管再生・再構
築促進作用、神経組織二次変性抑止作用、オリゴデンド
ロサイトのアポトーシス又はアポトーシス様細胞死の抑
止作用等を介して、寝たきりの脊髄損傷ラットを起立せ
しめることを見出した。低用量・低濃度の粗サポニン分
画もしくは粗サポニン分画構成成分のいずれかがジンセ
ノサイドＲｂ１と同様に優れた脊髄損傷治療効果を示す
という本発明の実験結果は、低用量・低濃度の粗サポニ
ン分画もしくは粗サポニン分画構成成分のいずれかが脊
髄損傷・頭部外傷・神経外傷の治療薬となり得ることを
物語っている。すなわち、特願平１１−２４３３７８、
ＰＣＴ／ＪＰ９９／０６８０４（ジンセノサイドＲｂ１
からなる脳血管再生・再構築促進剤ならびに神経組織二
次変性抑止剤）において、本発明者ら（阪中、田中）が
記載したジンセノサイドＲｂ１の効果・効能・用途は、
低用量・低濃度の粗サポニン分画もしくは粗サポニン分
画構成成分のいずれかにも当てはまると言える。もちろ
ん、本発明の粗サポニン分画もしくは粗サポニン分画構
成成分の投与方法としては、患部における粗サポニン分
画もしくは粗サポニン分画構成成分の濃度を既述のごと
く低濃度域に維持できるのであれば、ジンセノサイドＲ
ｂ１と同様に任意の投与経路が選択できる。具体的に
は、低用量・低濃度の粗サポニン分画もしくは粗サポニ
ン分画構成成分のいずれかは静脈内投与剤としてのみな
らず外用剤や病変部局所注射剤としても使用可能であ
る。さらに、粗サポニン分画もしくは粗サポニン分画構
成成分のいずれかの投与法として、皮下注射、筋肉注
射、点眼、点鼻、点耳、吸入、挿肛投与、経口投与、舌
下投与、経皮投与等任意の経路が選択できる。ただし、
粗サポニン分画もしくは粗サポニン分画構成成分のいず
れかを経口投与剤として使用する時は、粗サポニン分画
もしくは粗サポニン分画構成成分のいずれかを単独に投
与したのでは効果があまり期待できない場合があるの
で、消化管での分解を阻止する担体あるいは消化管での
吸収を促進する担体に粗サポニン分画もしくは粗サポニ
ン分画構成成分のいずれかを混入・封入又は結合させた
のちに、経口投与することが必要になるかもしれない。
また、粗サポニン分画もしくは粗サポニン分画構成成分
のいずれかの代謝産物のうち、粗サポニン分画もしくは
粗サポニン分画構成成分のいずれかと同等もしくはそれ
以上の効果・効能を有するものが同定されれば、低用量
・低濃度の粗サポニン分画もしくは粗サポニン分画構成
成分のいずれかの適応が期待される前述の疾病に対し
て、その活性代謝産物を既述の方法で投与することもで
きる。また本発明の粗サポニン分画もしくは粗サポニン
分画構成成分のいずれかと高分子化合物との分散体を作
成した後、噴霧乾燥させて任意の投与経路を選択するこ
とも可能である。さらに、高分子化合物のミクロ粒子に
粗サポニン分画もしくは粗サポニン分画構成成分のいず
れかをコーティングしたのちに、任意の投与経路を選択
してもよい。もちろん、粗サポニン分画構成成分のいず
れかを用いてプロドラッグを作成したのちに、任意の投
与経路を選択してもよい。Japanese Patent Application No. 11-243378, PCT / JP
In 99/06804 (a cerebral blood vessel regeneration / reconstruction promoting agent comprising ginsenoside Rb1 and an inhibitor of secondary degeneration of nerve tissue), the present inventors (Sakanaka, Tanaka) reported that a small amount of ginsenoside Rb1 was continuously administered intravenously. It has been found that a bedridden spinal cord-injured rat can be erected through a cerebral blood vessel regeneration / remodeling promoting action, an inhibitory action on secondary degeneration of neural tissue, an inhibitory action on oligodendrocyte apoptosis or apoptotic cell death. Experimental results of the present invention that either the low doses and low concentrations crude saponin fraction or the crude saponin fraction constituents of exhibit similarly superior spinal cord injury therapeutic effect as ginsenoside Rb1, the low-dose and low concentrations of the crude This indicates that either the saponin fraction or the crude saponin fraction component can be used as a therapeutic agent for spinal cord injury, head injury, and nerve injury. That is, Japanese Patent Application No. 11-243378,
PCT / JP99 / 06804 (Ginsenoside Rb1
Cerebrovascular regeneration and reconstruction promoter and nerve tissue secondary degeneration inhibitor) consisting of, the present inventors (Sakanaka, Tanaka) of ginsenoside Rb1 described effects, efficacy and usages are
It can be said that this applies to either the low-dose / low-concentration crude saponin fraction or the crude saponin fraction constituent. Of course, the method for administering the crude saponin fraction or the crude saponin fraction component of the present invention may be such that the concentration of the crude saponin fraction or the crude saponin fraction component in the affected area can be maintained in a low concentration range as described above. For example, ginsenoside R
b1 and any route of administration as well can be selected. Specifically, either the low-dose / low-concentration crude saponin fraction or the crude saponin fraction component can be used not only as an intravenous drug but also as an external preparation or a local injection for a lesion. Furthermore, as a method of administering the crude saponin fraction or any of the components of the crude saponin fraction, subcutaneous injection, intramuscular injection, eye drops, nose, ear drops, inhalation, anal injection, oral administration, sublingual administration, transdermal Any route such as administration can be selected. However,
When using either the crude saponin fraction or the crude saponin fraction component as an oral administration agent, the effect is not so much expected if either the crude saponin fraction or the crude saponin fraction component is administered alone. In some cases, either the crude saponin fraction or the crude saponin fraction component is mixed / encapsulated or bound into a carrier that inhibits degradation in the digestive tract or a carrier that promotes absorption in the digestive tract, Oral administration may be required.
Further, among the metabolites of either the crude saponin fraction or the crude saponin fraction component, those having an effect or efficacy equivalent to or higher than any of the crude saponin fraction or the crude saponin fraction component have been identified. If the above-mentioned disease is expected to be indicated by either a low-dose, low-concentration crude saponin fraction or a component of the crude saponin fraction, the active metabolite may be administered by the method described above. it can. After preparing a dispersion of either the crude saponin fraction or the crude saponin fraction constituent of the present invention and a polymer compound, it is also possible to select an arbitrary administration route by spray-drying. Furthermore, after coating either the crude saponin fraction or the crude saponin fraction component on the microparticles of the polymer compound, an arbitrary administration route may be selected. Of course, an arbitrary route of administration may be selected after preparing a prodrug using any of the crude saponin fraction components.
【０２７０】また、皮膚移植用ケラチノサイト培養シー
トの保護・維持にも低用量・低濃度の粗サポニン分画も
しくは粗サポニン分画構成成分のいずれかが有効と思わ
れる。その他の移植用臓器（肝臓、腎臓、心臓、膵臓、
肺、消化管、角膜、血管等）についても、移植手術が実
施されるまでの間に低濃度の粗サポニン分画もしくは粗
サポニン分画構成成分のいずれかで浸すか灌流すること
により、同臓器の細胞傷害や血管網の破綻が抑止され移
植手術の成績も向上するものと期待される。さらに、低
用量・低濃度の粗サポニン分画もしくは粗サポニン分画
構成成分のいずれかは輸血用血球成分・血小板・幹細胞
（ＥＳ細胞）・神経幹細胞等の保護・維持、凍結卵子あ
るいは精子の保護・維持にも有効と思われる。Further, it is considered that either a low-dose, low-concentration crude saponin fraction or a component of a crude saponin fraction is effective in protecting and maintaining the keratinocyte culture sheet for skin transplantation. Other transplant organs (liver, kidney, heart, pancreas,
Lungs, gastrointestinal tract, cornea, blood vessels, etc.) by immersion or perfusion with either a low-concentration crude saponin fraction or a crude saponin fraction component before transplantation is performed. It is expected that cell injury and vascular network breakdown will be suppressed, and the results of transplant surgery will be improved. Furthermore, any of the low-dose, low-concentration crude saponin fractions or the components of the crude saponin fraction protect or maintain blood cell components for blood transfusion, platelets, stem cells (ES cells), neural stem cells, etc., and protect frozen eggs or sperm.・ It seems to be effective for maintenance.
【０２７１】本発明においてジンセノサイドＲｂ１の新
規還元化合物すなわちジヒドロジンセノサイドＲｂ
１が、少量静脈内投与によりジンセノサイドＲｂ１と同
様の優れた脳梗塞治療効果を示すことが判明した。すな
わち、ジヒドロジンセノサイドＲｂ１が、本発明者らの
既出願特許（特願平１０−３６５５６０、ＰＣＴ／ＪＰ
９９／０２５５０；特願平１１−３４０８５０、ＰＣＴ
／ＪＰ９９／０６８０４）に記載されたジンセノサイド
Ｒｂ１の効果・効能・用途と同様の効果・効能・用途を
有することが推測された。ジヒドロジンセノサイドＲｂ
１を用いた本実験より、ジンセノサイドＲｂ１をリード
化合物として利用することにより、多くの神経細胞保護
剤、脳細胞保護剤、脳卒中治療薬、神経変性疾患治療
薬、脊髄損傷・頭部外傷・神経外傷治療薬、細胞保護剤
等が開発されることが実証されたわけである。薬用人蔘
に含まれる多くの精製サポニンは、ジンセノサイドＲｂ
１と同様にダマラン骨格（ステロイド様骨格）に側鎖
（カーボンチェーン）が結合するという共通の化学構造
を有している（図１５参照）。従って、薬用人蔘に含ま
れるジンセノサイドＲｂ１以外の精製サポニンについて
も、側鎖（カーボンチェーン）の二重結合を還元するこ
とにより、当該精製サポニンと同様の薬理作用・効果・
効能・用途を有する新規化合物が作成できる。[0271] novel reducing compounds of ginsenoside Rb1 in the present invention i.e. dihydro ginsenosides side Rb
1 showed an excellent therapeutic effect on cerebral infarction similar to that of ginsenoside Rb1 by intravenous administration in a small amount. That is, dihydro ginsenosides side Rb1 is prior patent application by the present inventors (Japanese Patent Application No. Hei 10-365560, PCT / JP
99/02550; Japanese Patent Application No. 11-340850, PCT
/ JP99 / 06804), it might have a similar effect, efficacy and usages and effects, efficacy and usages of ginsenoside Rb1 described in. Dihydroginsenoside Rb
In this experiment using Ginsenoside1 , ginsenoside Rb1 was used as a lead compound, and many nerve cell protective agents, brain cell protective agents, drugs for stroke, drugs for neurodegenerative diseases, spinal cord injury, head trauma, nerve It has been demonstrated that a therapeutic agent for trauma, a cytoprotective agent and the like are developed. Many purified saponins contained in ginseng are ginsenoside Rb
1 side chain (carbon chain) similarly to the dammarane skeleton (steroidal skeleton) and have a common chemical structure that binds (see Fig. 15). Accordingly, purified saponins other than ginsenoside Rb1 contained in ginseng also reduce the double bond of the side chain (carbon chain) to obtain the same pharmacological action, effects, and effects as those of the purified saponin.
A new compound having efficacy and use can be created.
【０２７２】ジヒドロジンセノサイドＲｂ１もしくはそ
の代謝産物がＭＣＡを永久閉塞されたＳＨ−ＳＰラット
において、ジンセノサイドＲｂ１と同様の脳梗塞縮小作
用を示すという本実験結果は、ジンセノサイドＲｂ１を
リード化合物として利用することにより新規神経細胞保
護剤もしくは新規脳細胞保護剤を作成できることを証明
したものである。しかも、ジヒドロジンセノサイドＲｂ
１の有効な静脈内投与量は、ジンセノサイドＲｂ１の有
効な静脈内投与量とほぼ一致しているので、ジンセノサ
イドＲｂ１と同様にジヒドロジンセノサイドＲｂ１も低
濃度、低用量で優れた神経細胞保護作用、脳細胞保護作
用を示すと考えられる。もちろん、特願平１０−３６５
５６０、ＰＣＴ／ＪＰ９９／０２５５０、ジンセノサイ
ドＲｂ１からなる脳細胞又は神経細胞保護剤）において
本発明者らが記載したジンセノサイドＲｂ１の効果・効
能・用途は、すべてジヒドロジンセノサイドＲｂ１も兼
ね備えていると考えられる。すなわち、ジヒドロジンセ
ノサイドＲｂ１は、ジンセノサイドＲｂ１と同様に細胞
死抑制遺伝子産物Ｂｃｌ−ｘＬの発現を上昇せしめ、神
経細胞のアポトーシスもしくはアポトーシス様神経細胞
死を抑止するものと考えられる。さらに、ジヒドロジン
セノサイドＲｂ１は、ジンセノサイドＲｂ１と同様に、
神経細胞死を伴うあらゆる脳神経疾患（アルツハイマー
病、脳卒中、脳梗塞、脳血栓、脳塞栓、クモ膜下出血、
一過性脳虚血発作、ピック病、脊髄小脳変性症、パーキ
ンソン病、脱随疾患、舞踏病を始めとするポリグルタミ
ン病、筋萎縮性側索硬化症、緑内障、老人性黄斑変性
症、糖尿病性網膜症、網膜中心動静脈閉塞症、網膜剥
離、網膜色素変性症、エイズ脳症、肝性脳症、脳炎、脳
性マヒ、頭部外傷、脊髄損傷、一酸化炭素中毒、新生児
仮死、末梢神経障害、痙性対麻痺、末梢神経麻痺、末梢
神経痛、進行性核上性麻痺、脊髄血管障害、ミトコンド
リア脳筋症、髄膜炎等）に効果・効能を示すとされる。[0272] dihydroginsenoside in Seno side Rb1 or SH-SP rats its metabolites is permanently occlude the MCA, the experimental result that shows the same stroke reduction effect as ginsenoside Rb1 is utilized ginsenoside Rb1 as lead compounds By doing so, it was proved that a new agent for protecting neurons or a new agent for protecting brain cells could be prepared. Moreover, dihydroginsenoside Rb
Effective intravenous dose of1, since substantially coincides with an effective intravenous dose of ginsenoside Rb1, similarly dihydro ginsenosides side Rb1 also low concentrations ginsenoside Rb1, excellent neuronal protection at lower doses It is thought to have an action and a protective action on brain cells. Of course, Japanese Patent Application Hei 10-365
560, PCT / JP99 / 02550, a brain cell or neuronal cell protective agent comprising ginsenoside Rb1 ) that the effects, efficacy and use of ginsenoside Rb1 described by the present inventors are all that dihydroginsenoside Rb1 is also provided. Conceivable. That is, dihydro ginsenosides side Rb1, similar to ginsenoside Rb1 raised the expression of a cell death-suppressing gene product Bcl-xL, it believed to prevent apoptosis or apoptosis-like nerve cell death of neurons. Further, dihydroginsenoside Rb1 is similar to ginsenoside Rb1 ,
Any cranial nerve disease with neuronal death (Alzheimer's disease, stroke, cerebral infarction, cerebral thrombosis, cerebral embolism, subarachnoid hemorrhage,
Transient cerebral ischemic attack, Pick's disease, spinocerebellar degeneration, Parkinson's disease, paralytic disease, polyglutamine disease including chorea, amyotrophic lateral sclerosis, glaucoma, senile macular degeneration, diabetes Retinopathy, central retinal arteriovenous obstruction, retinal detachment, retinitis pigmentosa, AIDS encephalopathy, hepatic encephalopathy, encephalitis, cerebral palsy, head trauma, spinal cord injury, carbon monoxide poisoning, neonatal asphyxia, peripheral neuropathy, Spastic paraplegia, peripheral nerve palsy, peripheral neuralgia, progressive supranuclear palsy, spinal vascular disorders, mitochondrial encephalomyopathy, meningitis, etc.).
【０２７３】さて、細胞死抑制遺伝子産物Ｂｃｌ−ｘＬ
は細胞を生かすための最後の砦とも言うべき蛋白質であ
り、脳神経組織のみならず肝臓、脾臓、免疫系組織、循
環系組織、皮膚を始めとする多くの末梢臓器・組織に分
布して、細胞の生存を支持している。従って、ジヒドロ
ジンセノサイドＲｂ１がジンセノサイドＲｂ１と同様
に、Ｂｃｌ−ｘＬの発現を上昇せしめるという前記の推
測に基づけば、ジヒドロジンセノサイドＲｂ１が細胞死
を伴うあらゆる末梢臓器・組織の疾病の治療・予防・処
置に有効であることを物語っている。このような細胞死
を伴う末梢臓器・組織の疾病の中には、心筋・肝臓・腎
臓の虚血再灌流障害、心筋症、心不全、心筋梗塞、狭心
症、末梢循環不全、褥創、皮膚潰瘍、皮膚の創傷、外
傷、熱傷、放射線障害、老化、紫外線障害、電撃症、脱
毛症、乾皮症、自己免疫病、免疫不全病、臓器移植後の
拒絶反応、筋ジストロフィー、角膜損傷、感染症、膠原
病、大動脈炎症候群、急性動脈閉塞症、閉塞性血栓血管
炎、消化性潰瘍、閉塞性動脈硬化症、レイノー病、レイ
ノー症候群、痔疾、血栓性静脈炎、膵炎、肝炎、腎炎、
糖尿病性腎症、糖尿病性心筋症、舌痛症等が含まれる。
その他の細胞死を伴う疾患や病態については、成書（今
日の治療指針；監修、日野原重明、阿部正和；医学書
院；１９９５）に記載されているので本明細書では割愛
する。また、ジヒドロジンセノサイドＲｂ１は癌患者や
肉腫の患者においても、腫瘍細胞に浸潤された健常組織
の正常細胞を保護することにより、同患者のＱＯＬ改善
や延命に役立つと考えられる。また、本発明のジヒドロ
ジンセノサイドＲｂ１は、加齢に伴う免疫機能低下、循
環機能低下、皮膚機能低下、消化機能低下、性機能減退
の諸症状を改善する目的で、ジンセノサイドＲｂ１と同
様に健康薬としても使用可能である。さらに、ジヒドロ
ジンセノサイドＲｂ１をジンセノサイドＲｂ１と同様に
あらゆる化粧品の組成物として利用することにより、皮
膚の老化症状（萎縮、白髪、ふけ、角層剥離、角質細胞
剥離、皮脂欠乏、たるみ、かゆみ、かさつき、ひびわ
れ、そばかす、色素沈着、乾燥、しわ、しみ、日焼け
等）の予防・治療・処置にも利用できる。またジヒドロ
ジンセノサイドＲｂ１はケミカルピーリングにも利用で
きる。ジヒドロジンセノサイドＲｂ１は発毛剤、育毛
剤、脱毛の悪化予防剤としても使用可能である。[0273] Now, cell death-suppressing gene productBcl-x L
Is a protein that can be said to be the last fort to make use of cells.It is distributed not only in brain nerve tissue but also in many peripheral organs and tissues including liver, spleen, immune system, circulatory system, skin, etc. Support their survival. Therefore, similarly dihydro ginsenosides side Rb1 is ginsenoside Rb1, Based on the speculation that allowed to increase the expression of Bcl-xL, treatment dihydro ginsenosides side Rb1 is a disease of all peripheral organs and tissues accompanied by cell death, It shows that it is effective for prevention and treatment. Among diseases of peripheral organs and tissues accompanied by such cell death, ischemia / reperfusion injury of myocardium, liver and kidney, cardiomyopathy, heart failure, myocardial infarction, angina, peripheral circulatory failure, pressure sore, skin Ulcers, skin wounds, trauma, burns, radiation damage, aging, UV damage, electrostroke, alopecia, xeroderma, autoimmune disease, immunodeficiency disease, rejection after organ transplantation, muscular dystrophy, corneal injury, infection , Collagen disease, aortitis syndrome, acute arterial occlusion, obstructive thromboangiitis, peptic ulcer, obstructive arteriosclerosis, Raynaud's disease, Raynaud's syndrome, hemorrhoids, thrombophlebitis, pancreatitis, hepatitis, nephritis,
Includes diabetic nephropathy, diabetic cardiomyopathy, glossodynia and the like.
Other diseases and conditions associated with cell death are described in a compendium (Today's treatment guidelines; supervision, Hinohara Shigeaki, Abe Masakazu; Medical Shoin; 1995), and are not described herein. Further, dihydro ginsenosides side Rb1 is also in patients with cancer patients and sarcoma, by protecting normal cells of healthy tissues infiltrated the tumor cells, is believed to be helpful in QOL improvement and survival of the patient. In addition, dihydroginsenoside Rb1 of the present invention is as healthy as ginsenoside Rb1 for the purpose of improving various symptoms of age-related decline in immunity, circulatory function, skin function, digestion, and sexual function. It can also be used as a medicine. Furthermore, by using dihydroginsenoside Rb1 as a composition for all kinds of cosmetics in the same manner as ginsenoside Rb1 , aging symptoms of the skin (atrophy, gray hair, dandruff, exfoliation of the stratum corneum, exfoliation of keratinocytes, lack of sebum, sagging, itching, It can also be used for the prevention, treatment and treatment of dryness, cracks, freckles, pigmentation, dryness, wrinkles, spots, sunburn, etc.). The dihydro ginsenosides side Rb1 can be used also in chemical peeling. Dihydro ginsenosides side Rb1 is hair growth agents, hair growth agents, and can also be used as a deterioration preventive agent for hair loss.
【０２７４】特願平１１−２４３３７８、ＰＣＴ／ＪＰ
９９／０６８０４（ジンセノサイドＲｂ１からなる脳血
管再生・再構築促進剤ならびに神経組織二次変性抑止
剤）において、ジンセノサイドＲｂ１の少量静脈内持続
投与が、脳血管再生・再構築促進作用、神経組織二次変
性抑止作用、オリゴデンドロサイトのアポトーシス又は
アポトーシス様細胞死の抑止作用等を介して、寝たきり
の脊髄損傷ラットを起立せしめることを見出した。ジヒ
ドロジンセノサイドＲｂ１がジンセノサイドＲｂ１と同
様に優れた脳梗塞治療効果を示すという本実験結果は、
ジヒドロジンセノサイドＲｂ１が脊髄損傷・頭部外傷・
神経外傷の治療薬となり得ることを物語っている。すな
わち、特願平１１−２４３３７８、ＰＣＴ／ＪＰ９９／
０６８０４（ジンセノサイドＲｂ１からなる脳血管再生
・再構築促進剤ならびに神経組織二次変性抑止剤）にお
いて、本発明者ら（阪中、田中）が記載したジンセノサ
イドＲｂ１の効果・効能・用途は、ジヒドロジンセノサ
イドＲｂ１にも当てはまると言える。もちろん、本発明
のジヒドロジンセノサイドＲｂ１の投与方法としては、
ジンセノサイドＲｂ１と同様に任意の投与経路が選択で
きる。具体的には、ジヒドロジンセノサイドＲｂ１は静
脈内投与剤としてのみならず外用剤や病変部局所注射剤
もしくは病変部局所噴霧剤としても使用可能である。さ
らに、ジヒドロジンセノサイドＲｂ１の投与法として、
皮下注射、筋肉注射、点眼、眼軟膏、点鼻、点耳、吸
入、挿肛投与、経口投与、舌下投与、経皮投与等任意の
経路が選択できる。ただし、ジヒドロジンセノサイドＲ
ｂ１を経口投与剤として使用する時は、ジヒドロジンセ
ノサイドＲｂ１単独投与では効果があまり期待できない
場合があるので、消化管での分解を阻止する担体（シェ
ラック、ゼラチン、油層等）あるいは消化管での吸収を
促進する担体にジヒドロジンセノサイドＲｂ１を混入・
封入又は結合させたのちに、経口投与することが必要に
なるかもしれない。また、ジヒドロジンセノサイドＲｂ
１の代謝産物のうちジヒドロジンセノサイドＲｂ１と同
等もしくはそれ以上の効果・効能を有するものが同定さ
れれば、ジヒドロジンセノサイドＲｂ１の適応が期待さ
れる前述の疾病に対して、その活性代謝産物を既述の方
法で投与することもできる。また本発明のジヒドロジン
セノサイドＲｂ１と高分子化合物との分散体を作成した
後、噴霧乾燥させて任意の投与経路を選択することも可
能である。さらに、高分子化合物のミクロ粒子にジヒド
ロジンセノサイドＲｂ１をコーティングしたのちに、任
意の投与経路を選択してもよい。Japanese Patent Application No. 11-243378, PCT / JP
99/06804 in (ginsenoside cerebrovascular regeneration and reconstruction promoter consisting Rb1 and nerve tissue secondary degeneration inhibitor), a small amount continuous intravenous administration of ginsenoside Rb1 is cerebrovascular regeneration and reconstruction-promoting action, nerve tissue It has been found that the bedridden spinal cord-injured rat is erected through the inhibitory action on secondary degeneration and the inhibitory action on oligodendrocyte apoptosis or apoptosis-like cell death. This experimental result that dihydroginsenoside Rb1 shows an excellent cerebral infarction treatment effect similarly to ginsenoside Rb1
Dihydroginsenoside Rb1 causes spinal cord injury, head injury,
It indicates that it can be a therapeutic agent for neurotrauma. That is, Japanese Patent Application No. 11-243378, PCT / JP99 /
In 06804 (a cerebral blood vessel regeneration / remodeling promoter comprising ginsenoside Rb1 and an inhibitor for secondary degeneration of nerve tissue), the effects, indications, and uses of ginsenoside Rb1 described by the present inventors (Osakanaka, Tanaka) are as follows: It said to be true dihydro ginsenosides side Rb1. Of course, the method of administration dihydro ginsenosides Side Rb1 of the present invention,
Any route of administration as well as ginsenoside Rb1 can be selected. Specifically, dihydro ginsenosides side Rb1 can also be used as not only external preparation or lesions topical injection or lesions topical spray as an intravenous dosage. Furthermore, as the administration of dihydro ginsenosides side Rb1,
Any route such as subcutaneous injection, intramuscular injection, eye drops, eye ointments, nasal drops, ear drops, inhalation, anal injection, oral administration, sublingual administration, and transdermal administration can be selected. However, dihydroginsenoside R
When using b1 as an oral dosage, since dihydro ginsenosides side Rb1 effect in single administration may not be expected so much, the carrier to prevent degradation in the digestive tract (shellac, gelatin, oil layer, etc.) or in the digestive tract Dihydroginsenoside Rb1 mixed into a carrier that promotes the absorption of
After encapsulation or conjugation, oral administration may be necessary. Also, dihydroginsenoside Rb
If one of the metabolites having an effect or efficacy equal to or more than that of dihydroginsenoside Rb1 is identified, the active metabolite of the above-mentioned disease for which dihydroginsenoside Rb1 is expected to be applied is identified. It can also be administered in the manner already described. Also after creating the dispersion of the dihydro ginsenosides side Rb1 and polymer compound of the present invention, it is also possible to select any route of administration by spray drying. Moreover, after coated with dihydro ginsenosides side Rb1 in microparticles of a polymer compound, may be selected any route of administration.
【０２７５】また、皮膚移植用ケラチノサイト培養シー
トの保護・維持にもジヒドロジンセノサイドＲｂ１が有
効と思われる。その他の移植用臓器・組織（肝臓、腎
臓、心臓、膵臓、肺、消化管、角膜、血管等）について
も、移植手術が実施されるまでの間に低濃度のジヒドロ
ジンセノサイドＲｂ１で浸すか灌流することにより、同
臓器の細胞傷害や血管網の破綻が抑止され移植手術の成
績も向上するものと期待される。さらに、ジヒドロジン
セノサイドＲｂ１は輸血用血球成分・血小板・幹細胞
（ＥＳ細胞）・神経幹細胞等の保護・維持、凍結卵子、
凍結精子、凍結細胞、凍結組織の保護・維持にもジンセ
ノサイドＲｂ１と同様に有用であると考えられる。[0275] In addition, dihydro ginsenosides side Rb1 in the protection and maintenance of keratinocytes cultured sheets for skin graft is deemed valid. Other transplant organs and tissues (liver, kidney, heart, pancreas, lung, gut, cornea, blood vessel, etc.) for also, or perfusion transplant surgery immersed in a low concentration of dihydro ginsenosides side Rb1 until carried out By doing so, it is expected that cell injury and vascular network breakdown of the same organ will be suppressed, and the results of transplant surgery will be improved. Furthermore, dihydro ginsenosides side Rb1 is transfused blood cells, platelets, stem cells (ES cells) neural stem cells protection and maintenance of such frozen egg,
Freezing sperm, frozen cells, believed to be similarly useful as ginsenoside Rb1 in the protection and maintenance of frozen tissue.
【図１】図１は、ＭＣＡ永久閉塞前後に蒸留水又はコウ
ジン末を経口投与されたラットの水迷路テストの結果を
示す図である。図１の上側は２週目の結果であり、同下
側は４週目の結果である。また図１中の白丸印は蒸留水
投与虚血群、黒丸印は偽手術群、白四角印はコウジン末
０．６ｇ／ｋｇ／日投与虚血群、黒四角印はコウジン末
０．７５ｇ／ｋｇ／日投与虚血群、白三角印はコウジン
末０．９ｇ／ｋｇ／日投与虚血群、黒三角印はコウジン
末１．２ｇ／ｋｇ／日投与虚血群を示す。FIG. 1 is a diagram showing the results of a water maze test in rats to which distilled water or kojin powder was orally administered before and after MCA permanent occlusion. The upper part of FIG. 1 shows the result of the second week, and the lower part of FIG. 1 shows the result of the fourth week. In FIG. 1, the white circles represent the ischemic group administered with distilled water, the black circles represent the sham operation group, the white squares represent the ischemic group administered with ginseng powder 0.6 g / kg / day, and the black squares represent the ginseng powder 0.75 g / kg. In the ischemic group administered with kg / day, the white triangle indicates the ischemic group administered with kogine powder 0.9 g / kg / day, and the black triangle indicates the ischemic group administered with kojin powder 1.2 g / kg / day.
【図２】図２は、ＭＣＡ永久閉塞前後に蒸留水又はコウ
ジン末を経口投与された動物の大脳皮質梗塞比率を示す
図である。FIG. 2 is a graph showing the cerebral cortical infarction ratio in animals to which distilled water or kojin powder was orally administered before and after MCA permanent occlusion.
【図３】図３は、大脳皮質梗塞巣の写真である。Ａが蒸
留水投与虚血群４例、Ｂがコウジン末０．９ｇ／ｋｇ／
日投与虚血群４例である。FIG. 3 is a photograph of a cerebral cortical infarction lesion. A: distilled water-administered ischemic group: 4 cases, B: kojin powder, 0.9 g / kg /
It is a daily administration ischemia group 4 cases.
【図４】図４は、実施例１の結果をまとめた模式図であ
る。FIG. 4 is a schematic diagram summarizing the results of Example 1.
【図５】図５は、ＭＣＡ永久閉塞後に蒸留水又はコウジ
ン末を経口投与されたラットの水迷路テストの結果を示
す図である。図５の上段は２週目の結果であり、同下段
は４週目の結果である。また図５の白丸印は蒸留水投与
虚血群、黒四角印はコウジン末０．９ｇ／ｋｇ／日投与
虚血群を示す。参考として、図１で用いた偽手術群の実
験値を黒丸印で示す。FIG. 5 is a diagram showing the results of a water maze test in rats to which distilled water or kojin powder was orally administered after MCA permanent occlusion. The upper part of FIG. 5 shows the results of the second week, and the lower part of FIG. 5 shows the results of the fourth week. In FIG. 5, white circles indicate ischemia group administered with distilled water, and black squares indicate ischemia group administered with kojin powder at 0.9 g / kg / day. For reference, the experimental values of the sham operation group used in FIG. 1 are indicated by black circles.
【図６】図６は、ＭＣＡ永久閉塞後に蒸留水又はコウジ
ン末０．９ｇ／ｋｇ／日を経口投与されたラットの大脳
皮質梗塞比率を示す。FIG. 6 shows the cerebral cortical infarction rate of rats to which 0.9 g / kg / day of distilled water or powdered ginseng was orally administered after MCA permanent occlusion.
【図７】図７は、スナネズミに５分間の一過性前脳虚血
を負荷する前に一週間１日単回コウジン末又は蒸留水を
投与したときの、反応潜時と海馬ＣＡ１領域神経細胞密
度を示す図である。上段（Ａ）が受動的回避学習実験の
反応潜時を、下段（Ｂ）が神経細胞密度を示す。偽手術
群を白カラム、蒸留水投与虚血群を灰色カラム、コウジ
ン末投与虚血群を黒カラム、で示す。FIG. 7 shows response latencies and hippocampal CA1 area nerves when gerbils were administered kojin powder or distilled water once a day once a week before loading transient cerebral ischemia for 5 minutes. It is a figure which shows a cell density. The upper row (A) shows the response latency of the passive avoidance learning experiment, and the lower row (B) shows the nerve cell density. The sham operation group is indicated by a white column, distilled water-administered ischemia group is indicated by a gray column, and kojin powder-administered ischemia group is indicated by a black column.
【図８】図８は、偽手術動物、蒸留水経口投与虚血動
物、コウジン末経口投与虚血動物（１．５ｇ／ｋｇ／
日）の海馬ＣＡ１領域におけるＢｃｌ−ｘＬ蛋白質発現
量を解析したウエスタンブロッティングの結果を示す、
図面に代わる写真である。FIG. 8 shows sham-operated animals, ischemic animals to which distilled water was orally administered, and ischemic animals to which kojin powder was orally administered (1.5 g / kg / kg).
Shows the results of Western blotting analyzes Bcl-xL protein expression in the hippocampal CA1 region of the day),
It is a photograph replacing a drawing.
【図９】図９は、図８のウエスタンブロッティングの結
果をデンシトメトリーで定量化したグラフである。FIG. 9 is a graph quantifying the results of the Western blotting of FIG. 8 by densitometry.
【図１０】図１０（Ａ）は、蒸留水投与動物とコウジン
末投与動物（２００ｍｇ／ｋｇ／日）の肝臓におけるＢ
ｃｌ−ｘＬ蛋白質発現量を解析したウエスタンブロッテ
ィングの結果を示す、図面に代わる写真である。図１０
（Ｂ）は、図１０（Ａ）のウエスタンブロッティングの
結果をデンシトメトリーで定量化したグラフである。FIG. 10 (A) shows B in the liver of an animal administered with distilled water and an animal administered with kojin powder (200 mg / kg / day).
shows the results of Western blotting analyzes cl-xL protein expression level is a photograph instead of a drawing. FIG.
(B) is a graph quantifying the results of the Western blotting of FIG. 10 (A) by densitometry.
【図１１】図１１（Ａ）は、蒸留水投与動物とコウジン
末投与動物（２００ｍｇ／ｋｇ／日）の脾臓におけるＢ
ｃｌ−ｘＬ蛋白質発現量を解析したウエスタンブロッテ
ィングの結果を示す、図面に代わる写真である。図１１
（Ｂ）は、図１１（Ａ）のウエスタンブロッティングの
結果をデンシトメトリーで定量化したグラフである。FIG. 11 (A) shows B in the spleen of an animal administered with distilled water and an animal administered with kojin powder (200 mg / kg / day).
shows the results of Western blotting analyzes cl-xL protein expression level is a photograph instead of a drawing. FIG.
(B) is a graph quantifying the results of the Western blotting of FIG. 11 (A) by densitometry.
【図１２】図１２は、スナネズミに３分間の前脳虚血を
負荷した後に、２８日間１日単回コウジン末又は蒸留水
を投与したときの、反応潜時と海馬ＣＡ１領域神経細胞
密度を示す図である。上段（Ａ）が受動的回避学習実験
の反応潜時を、下段（Ｂ）が神経細胞密度を示す。偽手
術群を白カラム、蒸留水投与虚血群を灰色カラム、コウ
ジン末投与虚血群を黒カラム、で示す。FIG. 12 shows response latencies and hippocampal CA1 area neuronal densities when gerbils were challenged for 3 minutes with forebrain ischemia and then administered once daily for 28 days with koujin powder or distilled water. FIG. The upper row (A) shows the response latency of the passive avoidance learning experiment, and the lower row (B) shows the nerve cell density. The sham operation group is indicated by a white column, distilled water-administered ischemia group is indicated by a gray column, and kojin powder-administered ischemia group is indicated by a black column.
【図１３】図１３の（Ａ）は偽手術動物、（Ｂ）は蒸留
水投与３分虚血動物、（Ｃ）はコウジン末投与３分虚血
動物の、海馬ＣＡ１領域光学顕微鏡像をそれぞれ示す。
バーは１００μｍを示す。FIG. 13 (A) is a sham-operated animal, (B) is a 3-minute ischemic animal administered with distilled water, and (C) is an optical micrograph of the hippocampal CA1 region of a 3-minute ischemic animal administered with kojin powder. Show.
Bars indicate 100 μm.
【図１４】図１４は、大脳皮質梗塞巣の写真である。上
段が生理食塩水静脈内投与虚血群８例、下段がジンセノ
サイドＲｂ１（６μｇ／日）静脈内投与虚血群８例であ
る。FIG. 14 is a photograph of a cerebral cortical infarction lesion. The upper row shows 8 cases of ischemic group administered intravenously with physiological saline, and the lower row shows 8 cases of ischemic group administered intravenously with ginsenoside Rb1 (6 μg / day).
【図１５】図１５は、薬用人蔘に含有される代表的サポ
ニンの化学構造を示す。FIG. 15 shows the chemical structure of a representative saponin contained in ginseng.
【図１６】図１６は、脊髄損傷当日と翌日の生理食塩水
静脈内投与ラットならびにジンセノサイドＲｂ１静脈内
投与ラット（６０μｇ／日）を示す図面に代わる写真で
ある。Figure 16 is a photograph as a drawing which shows a spinal cord injury day and next day saline intravenous rat and ginsenoside Rb1 Intravenous Rats (60 [mu] g / day).
【図１７】図１７は、脊髄損傷後７日目における、生理
食塩水静脈内投与ラット、ジンセノサイドＲｂ１（１２
μｇ／日、６０μｇ／日）静脈内投与ラットのＢＢＢ
ｓｃｏｒｅ（スコア）を示す。FIG. 17 shows a rat intravenously administered with saline, ginsenoside Rb1 (12 days), 7 days after spinal cord injury.
μg / day, 60 μg / day) BBB of rats administered intravenously
Indicates a score.
【図１８】図１８は、脊髄損傷当日から７日目の粗サポ
ニン分画（８７０μｇ／日）静脈内投与ラットを示す図
面に代わる写真である。FIG. 18 is a photograph instead of a drawing, showing rats intravenously administered with a crude saponin fraction (870 μg / day) on day 7 from the day of spinal cord injury.
【図１９】図１９は、脊髄損傷当日から７日目の生理食
塩水静脈内投与ラットを示す図面に代わる写真である。FIG. 19 is a photograph instead of a drawing, showing rats intravenously administered with saline on day 7 from the day of spinal cord injury.
【図２０】図２０は、ジンセノサイドＲｂ１の化学的誘
導体を示す。Figure 20 shows a chemical derivative of ginsenoside Rb1.
【図２１】図２１は、脊髄損傷の２時間後から生理食塩
水もしくはジンセノサイドＲｂ１（６０μｇ／日）を静
脈内投与されたラットを示す図面に代わる写真である。
また図２１は、脊髄損傷後生理食塩水を投与されたラッ
トが褥創を生じることを示す図面に代わる写真でもあ
る。さらに図２１は、脊髄損傷後ジンセノサイドＲｂ１
（６０μｇ／日）を静脈内投与されたラットが褥創を生
じないことを示す図面に代わる写真である。FIG. 21 is a photograph instead of a drawing, showing a rat to which saline or ginsenoside Rb1 (60 μg / day) was intravenously administered from 2 hours after spinal cord injury.
FIG. 21 is also a photograph instead of a drawing showing that rats administered with saline after spinal cord injury develop pressure sores. Furthermore, FIG. 21 shows ginsenoside Rb1 after spinal cord injury.
FIG. 4 is a photograph instead of a drawing, showing that rats administered intravenously (60 μg / day) do not develop pressure sores.
【図２２】図２２は、神経細胞とオリゴデンドロサイト
共培養系に対するジンセノサイドＲｂ１の細胞生存促進
効果を解析したウエスタンブロッティングの結果を示
す、図面に代わる写真である。１〜１００ｆｇ／ｍｌの
ジンセノサイドＲｂ１処置により、神経細胞のマーカー
であるＭＡＰ２とオリゴデンドロサイトのマーカーであ
るＣＮＰａｓｅが明らかに濃くなっている。すなわち、
低濃度のジンセノサイドＲｂ１により神経細胞ならびに
オリゴデンドロサイトの生存が促進されたといえる。Figure 22 shows the results of Western blotting analysis cell survival promoting effect of ginsenoside Rb1 to nerve cells and oligodendrocytes co-culture system is a photograph instead of a drawing. Treatment with ginsenoside Rb1 at1 to 100 fg / ml clearly increased the density of MAP2, a marker of neurons, and CNPase, a marker of oligodendrocytes. That is,
It can be said that the survival of nerve cells and oligodendrocytes were promoted by ginsenoside Rb1 in low concentrations.
【図２３】図２３上段のＲＴ−ＰＣＲ実験結果は、１０
０ｆｇ／ｍｌのジンセノサイドＲｂ１処置によりオリゴ
デンドロサイトのＢｃｌ−ｘＬ ｍＲＮＡが増加するこ
とを示す、図面に代わる写真である。図２３下段のウエ
スタンブロット（イムノブロッティング）実験結果は、
１〜１００ｆｇ／ｍｌのジンセノサイドＲｂ１処置によ
りオリゴデンドロサイトのＢｃｌ−ｘＬ蛋白が増加する
ことを示す、図面に代わる写真である。FIG. 23 shows the results of the RT-PCR experiment at the top of FIG.
Indicatethat Bcl-x L mRNA in oligodendrocytes increased by ginsenoside Rb1 treatment 0fg / ml, which is a photograph instead of a drawing. The results of the Western blot (immunoblotting) experiment in the lower part of FIG.
FIG. 4 is a photograph instead of a drawing, showing that treatment of ginsenoside Rb1 at1 to 100 fg / ml increases Bcl-xL protein of oligodendrocytes.
【図２４】図２４のＲＴ−ＰＣＲ実験結果は、ジンセノ
サイドＲｂ１（６０μｇ／日）を静脈内投与により脳組
織におけるＢｃｌ−ｘＬ ｍＲＮＡ発現が上昇すること
を示す、図面に代わる写真である。FIG. 24 is a photograph instead of a drawing, showing that the result of RT-PCR experiment in FIG. 24 shows that Bcl-xL mRNA expression in brain tissue is increased by intravenous administration of ginsenoside Rb1 (60 μg / day).
【図２５】図２５の上段は、１〜１００ｆｇ／ｍｌの濃
度のジンセノサイドＲｂ１により心筋細胞のＢｃｌ−ｘ
Ｌ ｍＲＮＡ発現が上昇することを示す、図面に代わる
ＲＴ−ＰＣＲの写真である。図２５の中段は、１〜１０
４ｆｇ／ｍｌの濃度のジンセノサイドＲｂ１により心筋
細胞のＢｃｌ−ｘＬ蛋白発現が上昇することを示す、図
面に代わるイムノブロッティングの写真である。図２５
の下段は、イムノブロッティングの結果をデンシトメト
リーで定量化したグラフである。FIG. 25 shows the Bcl-x of cardiomyocytes by ginsenoside Rb1 at a concentration of1 to 100 fg / ml.
FIG. 2 is a photograph of RT-PCR instead of a drawing, showing thatL mRNA expression is increased. 25 is 1-10
4 shows thatBcl-x L protein expression in cardiomyocytes by ginsenoside Rb1 at a concentration of fg / ml increases, an immunoblotting photos in place of a drawing. FIG.
The lower part is a graph quantifying the results of immunoblotting by densitometry.
【図２６】図２６の上段は、１〜１０４ｆｇ／ｍｌの濃
度のジンセノサイドＲｂ１処置により心筋細胞の生存が
促進されるることを示す、図面に代わるα−アクチニン
のウエスタンブロッティングの写真である。図２６の下
段は、ウエスタンブロッティング（イムノブロッティン
グ）の結果をデンシトメトリーで定量化したグラフであ
る。例数がｎ＝３とやや少ないので、ジンセノサイドＲ
ｂ１ ０．０１ｆｇ／ｍｌの濃度では有意差が得られて
いないが、例数を増やせばジンセノサイドＲｂ１０．０
１ｆｇ／ｍｌの濃度でも有意な心筋細胞保護効果が検出
される可能性が高いと考えられる。Upper Figure 26 shows that the survival of cardiomyocytes Ruru promoted by ginsenoside Rb1 treatment concentration of 1 to 10 4 fg /ml, is a photograph of Western blotting of α- actinin replacing a drawing . The lower part of FIG. 26 is a graph quantifying the results of Western blotting (immunoblotting) by densitometry. Since the number of cases is rather small at n = 3, ginsenoside R
Although no significant difference was obtained at a concentration of b1 of 0.01 fg / ml, ginsenoside Rb1 0.0
It is considered that there is a high possibility that a significant cardiomyocyte protective effect is detected even at a concentration of 1 fg / ml.
【図２７】図２７は、ＭＣＡ永久閉塞後（すなわち脳梗
塞発症後）に生理食塩水を静脈内投与されたラット脳
（２例）のＴＴＣ染色結果を示す、図面に代わる写真で
ある。FIG. 27 is a photograph instead of a drawing, showing the results of TTC staining of rat brains (two cases) to which physiological saline was intravenously administered after MCA permanent occlusion (ie, after onset of cerebral infarction).
【図２８】図２８は、ＭＣＡ永久閉塞後（すなわち脳梗
塞発症後）にジヒドロジンセノサイドＲｂ１（約６μｇ
／日）を静脈内投与されたラット脳（２例）のＴＴＣ染
色結果を示す、図面に代わる写真である。FIG. 28 shows that dihydroginsenoside Rb1 (about 6 μg) was obtained after MCA permanent occlusion (ie, after onset of cerebral infarction).
2 is a photograph instead of a drawing, showing the results of TTC staining of rat brain (2 cases) administered intravenously (/ day).
【図２９】図２９は、ジヒドロジンセノサイドＲｂ１の
ＮＭＲのチャートを示す。Figure 29 shows a chart of dihydro ginsenosides Side Rb1 in NMR.
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 13/10 Ａ６１Ｐ 13/10 25/00 25/00 25/02 25/02 25/28 25/28 43/00 １０７ 43/00 １０７ Ｃ０７Ｊ 17/00 Ｃ０７Ｊ 17/00 Ｆターム(参考） 4C086 AA01 AA02 AA03 EA19 MA01 MA04 MA52 MA66 NA14 ZA02 ZA15 ZA20 ZA36 ZA81 ZA96 ZB22 4C088 AB18 AC11 BA10 CA06 MA52 MA66 NA14 ZA02 ZA15 ZA20 ZA36 ZA81 ZA96 ZB22 4C091 AA02 BB01 CC01 DD01 EE06 FF02 FF06 GG03 GG05 HH01 JJ03 KK01 LL02 LL03 LL06 LL09 MM01 NN01 PA02 PA07 PB05 QQ01 RR13──────────────────────────────────────────────────続 き Continued on the front page (51) Int.Cl.7 Identification code FI Theme coat ゛ (Reference) A61P 13/10 A61P 13/10 25/00 25/00 25/02 25/02 25/28 25/28 43 / 00 107 43/00 107 C07J 17/00 C07J 17/00 F term (reference) 4C086 AA01 AA02 AA03 EA19 MA01 MA04 MA52 MA66 NA14 ZA02 ZA15 ZA20 ZA36 ZA81 ZA96 ZB22 4C088 AB18 AC11 BA10 CA06 MA52 MA66 NA14 ZA02Z15 ZA96 ZB22 4C091 AA02 BB01 CC01 DD01 EE06 FF02 FF06 GG03 GG05 HH01 JJ03 KK01 LL02 LL03 LL06 LL09 MM01 NN01 PA02 PA07 PB05 QQ01 RR13
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