FI74973C - FOERFARANDE FOER FRAMSTAELLNING AV TERAPEUTISKT AKTIVA 3 - / (1-METHYL-1-PYRROLIDINIUM) METHYL / -3-CEFEM-4-CARBOXYLATDERIVAT. - Google Patents

Description

Translated fromFinnish

7497374973

Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten 3-£"(l-metyyli-l-pyrrolidinium)metyyli7~3-kefeemi-4-karboksylaattijohdannai ten valmistamiseksi 5 Tämä keksintö koskee menetelmää uusien kefalosporiinj- johdannaisten valmistamiseksi, joilla on kaava (I)The present invention relates to a process for the preparation of novel cephalosporin derivatives of formula (I): The present invention relates to a process for the preparation of novel cephalosporin derivatives of formula (I).

0 S0 S

N-r C—C—NH-t-\ s too® CHj-—' jossa R on alempi alkyyli, alempi karboksialkyyli tai allyyli, ja niiden toksittomien farmaseuttisesti hyväksyt--15 tävien suolojen ja solvaattien valmistamiseksi. Näillä ke~ falosporiinijohdannaisilla on voimakas bakteerien vastain···? teho.N-r C — C — NH-t- \ s too® CH 2 - 'wherein R is lower alkyl, lower carboxyalkyl or allyl, and non-toxic pharmaceutically acceptable salts and solvates thereof. These cephalosporin derivatives have a potent bacterial antidote ···? power.

GB-patenttijulkaisussa 1 399 086 esitetyn yleisen kuvauksen piiriin kuuluu suuri joukko kefalosporiineja, 20 joilla on kaava R-C-CO-NH—I-S > \Ra <^Ny^pThe general description in GB 1,399,086 includes a large number of cephalosporins of the formula R-C-CO-NH-I-S> \ Ra <^ Ny ^ p

COOHCOOH

25 jossa R on vety tai orgaaninen ryhmä, Ra on eetterin muodostava yksiarvoinen orgaaninen ryhmä, joka on liittynyt hap-peen hiiliatomin välityksellä, B on >S tai >S—?0, ja P on orgaaninen ryhmä. 2-aminotiatsol-4-yyliryhmää ei kuitenkaa. 30 ole identifioitu R-substituenttina eikä siinä ole mainittu että P voi olla N-metyylipyrrolidiniummetyyli (tai mikään muu täysin tyydytetty typpipitoinen rengas, joka on liittynyt 3-metyyliryhmään typpiatominsa välityksellä ja jonka typpiatomissa on lisäsubstituentti). US-patentissa 3 971 35 ja siitä jakamalla erotetuissa US-patenteissa 4 024 133, 4 024 137, 4 064 346, 4 033 950, 4 079 178, 4 091 20° 4 092 477 ja 4 093 803 on samankaltaisia kuvauksia.Wherein R is hydrogen or an organic group, Ra is an ether-forming monovalent organic group attached via an oxygen carbon atom, B is> S or> S-O, and P is an organic group. However, there is no 2-aminothiazol-4-yl group. 30 is not identified as an R substituent and does not mention that P may be N-methylpyrrolidinium methyl (or any other fully saturated nitrogen-containing ring attached to the 3-methyl group via its nitrogen atom and having an additional substituent on the nitrogen atom). U.S. Patent 3,971,35 and U.S. Patents 4,024,133, 4,024,137, 4,064,346, 4,033,950, 4,079,178, 4,091-20 ° 4,092,477 and 4,093,803, which are separated therefrom, have similar descriptions.

2 74973 US-patenttijulkaisu 4 278 793 sisältää yleisen kuvauksen, joka sulkee piiriinsä hyvin suuren määrän kefalosporii-nijohdannaisia, joiden kaava on 0 ^4 5 II ! N--T— C-C-NH—|-r >U.S. Patent No. 2,74973 discloses a general description encompassing a very large number of cephalosporin derivatives of the formula 0-475 II! N - T - C-C-NH— | -r>

Rl-SÄsJR-SÄsJ

coor3 10 jossa R^, R2, R3 R^, X ja A sisältävät tämän hakemuksen patenttivaatimuksen 1 kaavan I mukaisten yhdisteiden vastaavien substituenttien yleisiä määritelmiä. Kuitenkaan erilaisten substituenttiryhmien määrittelyjen 20 sarakkeessa, 78-sivuisessa rakennekaavojen taulukossa ja 225 esimerkis-15 sä ei esiinny mainintaa, että A voisi olla N-metyylipyrro-lidiniummetyyli (tai jokin muu ätysin tyydytetty typpipitoinen heterosyklinen rengas), joka on liittynyt 3-metyyli-ryhmään typpiatominsa välityksellä ja jossa on lisäsubsti-tuentti typpiatomissa, GB-patenttijulkaisu 1 604 971 on 20 edellistä vastaava ja siinä on esitetty oleellisesti identtinen kuvaus. Julkaisu GB-patenttihakemus 2 028 305 A, joskaan se ei ilmeisesti muodollisesti ole edellisiin liittyvä, sisältää saman laajan yleisen kuvauksen, mutta esimerkkinä A:sta on annettu ainoastaan vety.wherein R 1, R 2, R 3, R 2, X and A contain the general definitions of the corresponding substituents of the compounds of formula I according to claim 1 of this application. However, in column 20 of the definitions of the various substituent groups, the 78-page table of structural formulas, and 225 in Example 15, there is no mention that A could be N-methylpyrrolidinium methyl (or another fully saturated nitrogen-containing heterocyclic ring) attached to its 3-methyl group. via its nitrogen atom and having an additional substituent on the nitrogen atom, GB Patent 1,604,971 is equivalent to the foregoing and provides a substantially identical description. GB Patent Application 2,028,305 A, although apparently not formally related to the foregoing, contains the same broad general description, but only hydrogen is given as an example of A.

25 DE-hakemusjulkaisussa 2 805 655 kuvataan 7-£2-(2- aminotiatsol-4-yyli)-2-(syn)metoksi-iminoasetamido7kefalo-sporiinihappojohdannaisia, joiden kaava on RXNH > S\ 30 .g.DE-A-2 805 655 describes 7- [2- (2-aminothiazol-4-yl) -2- (syn) methoxyiminoacetamido] cephalosporinic acid derivatives of the formula RXNH> S \ 30 .g.

N-^ C-CONH -j-/ 'ocHg <τ~Ν·ν^κ2N- ^ C-CONH -j- / 'ocHg <τ ~ Ν · ν ^ κ2

COORCOOR

1 o 35 jossa R NH on valinnaisesti suojattu aminoryhmä, R on halogeeni tai valinnaisesti substituoitu hydroksyyli-, tioli-tai aminoryhmä ja COOR on valinnaisesti esteröity karboksyy-Wherein R NH is an optionally protected amino group, R is halogen or an optionally substituted hydroxyl, thiol or amino group and COOR is an optionally esterified carboxyl group.

IIII

3 74973 2 liryhmä. Siinä esitetään myös, että R :n ollessa aminoryhmä se voi olla disubstituoitu ja substituentit yhdessä N-ato-min kanssa voivat muodostaa muun muassa pyrrolidiiniryhmän. Kuitenkaan siinä ei mainita N-metyylipyrrolidiniummetyyli- 5 ryhmää (tai mitään muuta kvaternääristä ammoniumryhmää) ei- 2 kä substituentti R voi olla liittyneenä 3-asemaan metylee-niryhmän välityksellä.3 74973 2 group. It also discloses that when R is an amino group it may be disubstituted and the substituents together with the N atom may form, inter alia, a pyrrolidine group. However, it does not mention the N-methylpyrrolidinium methyl group (or any other quaternary ammonium group) and the substituent R cannot be attached to the 3-position via a methylene group.

US-patentissa 4 278 671 kuvataan 7-£2-(2-aminotiatso] 1-4-yyli)-2-(syn)metoksi-iminoasetamido7-kefalosporiini-10 johdannaisia, joiden kaava on *·“Ό N C-CONH—-/ \U.S. Patent 4,278,671 describes 7 - [2- (2-aminothiazo] 1-4-yl) -2- (syn) methoxyiminoacetamido] 7-cephalosporin-10 derivatives of the formula * · “Ό N C-CONH— - / \

" I"I

15 \ cT~n^j^ch2r315 \ cT ~ n ^ j ^ ch2r3

och-3 Ioch-3 I

3 COOH3 COOH

jossa R2NH on valinnaisesti suojattu aminoryhmä ja R3 on vety tai "nukleofiilisen yhdisteen tähde". Termi "nukleo-20 tiilisen yhdisteen tähde" on määritelty laajasti ja sitten esitetään, että R^ "voi olla vaihtoehtoisesti kvaternääri-nen ammoniumryhmä". Kvaternäärisinä ammoniumryhminä esitetään pyridinium, eri tavoin substituoitu pyridinium, kino-linium, pikolinium ja lutidinium. Siinä ei mainita, että 25 kvaternäärinen ammoniumryhmä voi olla täysin tyydytetty typpipitoinen heterosyklinen rengassysteemi, joka on sitoutunut typpiatominsa välityksellä ja jossa on lisäsubstitv-*. 1 ti typpiatomissa.GB-patenttijulkaisu 1 581 854 on edellistä vastaava ja siinä esitetään oleellisesti identtinen kuvaus. 30 Muita saman patentinhaltijan patentteja, jotka eivät ole muodollisesti edellisiin liittyviä, mutta joissa on samankaltaisia kuvauksia, ovat mm. US-patentti 4 098 888 ja siitä jakamalla erotetut US-patentit 4 203 899, 4 205 180 ja 4 298 606, ja GB-patenttijulkaisu 1 536 281.wherein R 2 NH is an optionally protected amino group and R 3 is hydrogen or a "nucleophilic compound residue". The term "nucleo-20 brick compound residue" is broadly defined and it is then shown that R 1 "may alternatively be a quaternary ammonium group". Quaternary ammonium groups include pyridinium, variously substituted pyridinium, quinolinium, picolinium and lutidinium. It does not mention that the quaternary ammonium group may be a fully saturated nitrogen-containing heterocyclic ring system bonded via its nitrogen atom and having additional substituents. 1 ti on a nitrogen atom. GB patent publication 1,581,854 is similar to the previous one and presents a substantially identical description. 30 Other patents of the same patentee, which are not formally related to the above, but which have similar descriptions, e.g. U.S. Patent 4,098,888 and U.S. Patents 4,203,899, 4,205,180 and 4,298,606 separated therefrom, and GB Patent 1,536,281.

35 US-patentissa 4 168 309 kuvataan kefalosporiinijob^r.- naisia, joiden kaava on 4 74973 0 1 /Sv.U.S. Patent 4,168,309 describes cephalosporin women of the formula 4,74973 0 1 / Sv.

R_C_C_NH NR_C_C_NH N

5 (f N'v^;:'x:H2— N R1 N COO® \ A CHo \ r 0(CH2)m_<f"(CH2)nC00H 10 Rb jossa R on fenyyli, tienyyli tai furyyli; Ra ja Rb ovat toisistaan riippumatta vety, alkyyli, sykloalkyyli, fenyyli, naftyyli, tienyyli, furyyli, karboksi, alkoksikarbonyyli 15 tai syaani, tai Ra ja Rb yhdessä hiiliatomin kanssa, johon ne ovat sitoutuneina, muodostavat sykloalkylideeni- tai sykloalkenylideenirenkaan; m ja n ovat kumpikin 0 tai 1 siten,, että m:n ja n:n summa on 0 tai 1; ja R^·, yhdessä typpiatomin kanssa, johon se on liittynyt, on määritelty 20 laajasti, mutta ei voi olla muun muassa tyydytetty 5-jäse-ninen rengas. Sen esimerkissä 5 on esitetty esimerkkinä yhdiste, jonka kaava on \ —NH_ CF3COO® 0 II Γ \ C»3 /V-1 3Q O-^-COOH CH3 ch3 GB-patenttijulkaisu 1 591 439 on edellistä vastaava ja siinä esitetään oleellisesti identtinen kuvaus. Tässä patenttijulkaisussa ei mainita, että R-substituentti voi olla 2-35 aminotiatsol-4-yyliryhmä tai että iminosubstituentissa ei ole karboksyyliryhmää.5 (f N'v ^ ;: 'x: H2— N R1 N COO® \ A CHo \ r 0 (CH2) m_ <f "(CH2) nC00H 10 Rb where R is phenyl, thienyl or furyl; Ra and Rb are independently hydrogen, alkyl, cycloalkyl, phenyl, naphthyl, thienyl, furyl, carboxy, alkoxycarbonyl or cyano, or Ra and Rb together with the carbon atom to which they are attached form a cycloalkylidene or cycloalkenylidene ring, m and n are each 0 or 1 so that the sum of m and n is 0 or 1, and R 1, together with the nitrogen atom to which it is attached, is broadly defined, but cannot be, inter alia, a saturated 5-membered ring Example 5 thereof exemplifies a compound of the formula \ —NH_ CF3COO® 0 II Γ \ C »3 / V-1 3Q O - ^ - COOH CH3 ch3 GB Patent Specification 1,591,439 is similar to the foregoing and shows substantially identical This patent does not mention that the R substituent may be a 2-35 aminothiazol-4-yl group or that the imino substituent does not have a carboxyl group.

74973 Tämän keksinnön mukaisesti edellä määriteltyä kaavan I mukaisia 3-Ol-metyyli-l-pyrrolidinium)metyyH7~3-kefeemi- 4-karboksylaattijohdannaisia tai niiden toksittomia farmaseuttisesti hyväksyttäviä suoloja tai solvaatteja valmis-5 tetaan siten, etät yhdiste, jolla on kaava 0 H /S.According to the present invention, the 3-ol-methyl-1-pyrrolidinium) methyl-3-cephem-4-carboxylate derivatives of formula I as defined above, or non-toxic pharmaceutically acceptable salts or solvates thereof, are prepared in such a way that a compound of formula 0H / S.

N--- C-C-NH--/ NN --- C-C-NH - / N

Β2κ«ΛΒ/ \or2. oJ—ch2i XIVΒ2κ «ΛΒ / \ or2. oJ — ch2i XIV

10 COOB1 7 1 jossa R on alempi alkyyli, allyyli tai tavanomaisella karboksyylin suojaryhmällä suojattu alempi karboksialkyyli, 1 n B on tavanomainen karboksyylin suojaryhmä ja B on tavan-15 omainen aminon suojaryhmä, saatetaan reagoimaan N-metyyli-pyrrolidiinin kanssa yhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava 0 , c— ίί —NH —,-/ Svvi I® COOB1 /COOB1 7 1 wherein R is lower alkyl, allyl or lower carboxyalkyl protected by a conventional carboxyl protecting group, 1 n B is a conventional carboxyl protecting group and B is a conventional amino protecting group is reacted with N-methylpyrrolidine to give a compound of formula 0, c— ίί —NH -, - / Svvi I® COOB1 /

ch3 XVch3 XV

jossa R2', B1 ja B^ ovat edellä määritellyt, ja sen jälkeen 25 poistetaan tavalliseen tapaan kaikki suojaryhmät, ja haluttaessa muutetaan saatu yhdiste toksittomaksi farmaseuttisesti hyväksyttäväksi suolakseen tai solvaatikseen.wherein R 2 ', B 1 and B 2 are as defined above, and then all protecting groups are removed in the usual manner, and if desired, the resulting compound is converted into a non-toxic pharmaceutically acceptable salt or solvate.

Keksinnön mukaisessa menetelmässä lähtöaineena käytettävä kaavan XIV mukainen yhdiste voidaan valmistaa korvaa-30 maila helposti saatavilla olevan lähtö-kefalosporiinin 7-aseman substituentti halutulla 7-substituentilla. Sen jälkeen liitetään haluttu 3-substituentti. Edullinen kokonais-synteesi kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi on esitetty seuraavassa reaktiokaaviossa 1. Lyhenne "Tr" mer-35 kitsee trityyliryhmää (eli trifenyylimetyyliä), joka on edullinen aminon suojaryhmä. Lyhenne "Ph" merkitsee fer; 6 74973 ryhmää. Täten -CH(Ph)2 on bentshydryyliryhmä, joka on edullinen karboksyylin suojaryhmä. Reaktiokaavio 2 esittää kaa- van I mukaisen yhdisteen (Ie) valmistusta, jossa R·1· on vety 9 ja R on 2-karboksiprop-2-yyli.The compound of formula XIV used as a starting material in the process of the invention can be prepared by replacing the 30-position substituent of the readily available starting cephalosporin with the desired 7-substituent. The desired 3-substituent is then added. A preferred overall synthesis for the preparation of compounds of formula I is shown in the following Reaction Scheme 1. The abbreviation "Tr" denotes a trityl group (i.e., triphenylmethyl), which is a preferred amino protecting group. The abbreviation "Ph" means fer; 6,74973 groups. Thus, -CH (Ph) 2 is a benzhydryl group, which is a preferred carboxyl protecting group. Reaction Scheme 2 shows the preparation of a compound of formula (Ie) wherein R 1 is hydrogen 9 and R is 2-carboxyprop-2-yl.

7 749737 74973

Reaktiokaavio 1 jTp"!Reaction scheme 1 jTp "!

TrHN^\0X \ ΌΗ 2'TrHN ^ \ 0X \ ΌΗ 2 '

R XR X

Ä“T|i-COOC2H5 ΤγΗνΛ3^\η2· oh" 4/Ä “T | i-COOC2H5 ΤγΗνΛ3 ^ \ η2 · oh" 4 /

N-rr-C-COOHRr-N-C-COOH

// \\T! IV// \\ T! IV

TrHN^\sy ^2' H2N^_TrHN ^ \ sy ^ 2 'H2N ^ _

I VI V

)_N)_OF

<y \x^^ch2ci COOCH(Ph)2 8 74973 N τ C-CONH--f<y \ x ^^ ch2ci COOCH (Ph) 2 8 74973 N τ C-CONH - f

// VsU I// VsU I

\ 2. H\i^\CH2C1 b norz u I * COOCH(Ph)2\ 2. H \ i ^ \ CH2C1 b Norz u I * COOCH (Ph) 2

Nai \l· N-r-C-CONH--S ^ COOCH(Ph)2Nai \ l · N-r-C-CONH - S ^ COOCH (Ph) 2

1. h3c-NQ1. h3c-NQ

2. suojauksen poisto H' N-r-C- CONH-(- 9 749732. deprotection H 'N-r-C-CONH - (- 9 74973

Reaktiokaavio 2 N--r-C-XOOH H2NT \ | ? COOCH(Ph)_ H3CCCH3 iooc(ch3)3Reaction Scheme 2 N - r-C-XOOH H2NT \ ? COOCH (Ph) _ H3CCCH3 iooc (ch3) 3

Ula' v \l) disykloheksyylikarbodi- j 1) bis(trimetyyli- V lmldl <DCC) / di (BSA) \ 2) Ula + PC15 s.Ula 'v \ l) dicyclohexylcarbodi- 1) bis (trimethyl- V lmldl <DCC) / di (BSA) \ 2) Ula + PC15 s.

N-X~C-CONH--f > JT\IL Tj ]N-X ~ C-CONH - f> JT \ IL Tj]

TrHN'^Xg/ '\^/ch2c1 H3CCCH3 COOCH(Ph)2 COOC(CH3)3TrHN '^ Xg /' \ ^ / ch2c1 H3CCCH3 COOCH (Ph) 2 COOC (CH3) 3

Nai Ψ 10 74973 / Sv\ N-rC--CONH---f 1Nai Ψ 10 74973 / Sv \ N-rC - CONH --- f 1

// π I// π I

TrHN^S^ ^Nd <y N\j^^CH2ITrHN ^ S ^ ^ Nd <y N \ j ^^ CH2I

H3cicH3 COOCH(Ph)2 cooc(ch3)3 h3c-n^] Φ N-r-C-CONH--S' N _H3cicH3 COOCH (Ph) 2 cooc (ch3) 3 h3c-n ^] Φ N-r-C-CONH - S 'N _

//7T II Π P// 7T II Π P

TrHl^^S^ V ί/^Ί VIIa H3CCCH3 COOCH (Ph)2 COOC(CH3)3 \ CK3 suojauksen poisto Φ N--r-C-CONH--ηρ ^ h2h^s/ h3cCch3 COOW \ COOH CH3 il 7497 3TrH1 ^^ S ^ V ί / ^ Ί VIIa H3CCCH3 COOCH (Ph) 2 COOC (CH3) 3 \ CK3 deprotection Φ N - r-C-CONH - ηρ ^ h2h ^ s / h3cCch3 COOW \ COOH CH3 il 7497 3

Vaikkakin edellä esitetyt reaktiokaaviot esittävät ensisijaisia kaavan I mukaisten yhdisteiden monivaiheisia valmistusmenetelmiä, on täysin ymmärrettävää, että muitakir. lähtöaineita ja menetelmiä voidaan käyttää valmistettaessa 5 keksinnön mukaisessa menetelmässä käytettäviä lähtöaineita.Although the above reaction schemes show preferred multi-step methods for the preparation of compounds of formula I, it will be fully understood that other methods. the starting materials and methods can be used in the preparation of the starting materials used in the process of the invention.

Reaktio suoritetaan vedettömässä orgaanisessa liuot-timessa kuten metyleenikloridissa, kloroformissa, etyyli-eetterissä, heksaanissa, etyyliasetaatissa, tetrahydrofu-raanissa, asetonitriilissä ja näiden kaltaisessa liuotti-10 messa, tai sellaisten liuottimien seoksissa. Reaktio suoritetaan mukavasti lämpötilan ollessa noin -10°C - noin + 50°C; normaalisesta suosittelemille reaktion suorittamista huoneen lämpötilassa. Moolia kohden yhdistettä XIV tulisi käyttää ainakin yksi mooli N-metyylipyrrolidiinia; normaa-15 listi on edullista käyttää N-metyylipyrrolidiinia noin 50 - 100 %:n ylimäärä.The reaction is carried out in an anhydrous organic solvent such as methylene chloride, chloroform, ethyl ether, hexane, ethyl acetate, tetrahydrofuran, acetonitrile and the like, or mixtures of such solvents. The reaction is conveniently carried out at a temperature of about -10 ° C to about + 50 ° C; normal to carry out the reaction at room temperature. At least one mole of N-methylpyrrolidine should be used per mole of compound XIV; it is preferred to use an excess of about 50 to 100% of N-methylpyrrolidine.

Karboksyylin suojaryhmät, jotka soveltuvat käytettä-viksi B :nä ja ryhmässä R olevana ryhmänä edellä mainitussa reaktiossa, ovat alan asiantuntijain hyvin tuntemia 20 ja niitä ovat aralkyyliryhmät kuten bentsyyli, p-metoksi-bentsyyli, p-nitrobentsyyli ja difenyylimetyyli (bentshydr·· yyli); alkyyliryhmät kuten t-butyyli; halogeenialkyyliryh-mät kuten 2,2,2-trikloorietyyli, ja muut karboksyylin suojaryhmät, joita on selostettu kirjallisuudessa, esim. GB-25 patenttijulkaisussa 1 399 086. On suositeltavaa käyttää karboksyylin suojaryhmiä, jotka ovat helposti poistettavissa hapolla käsittelemällä. Erityisen edullisia karboksyylin suojaryhmiä ovat bentshydryyli- ja t-butyyliryhmät.Carboxyl protecting groups suitable for use as B and the group R in the above reaction are well known to those skilled in the art and include aralkyl groups such as benzyl, p-methoxybenzyl, p-nitrobenzyl and diphenylmethyl (benzhydroyl) ; alkyl groups such as t-butyl; haloalkyl groups such as 2,2,2-trichloroethyl, and other carboxyl protecting groups described in the literature, e.g., GB-25 1 1,399,086. It is preferred to use carboxyl protecting groups that are readily removed by acid treatment. Particularly preferred carboxyl protecting groups are benzhydryl and t-butyl groups.

Alalla hyvin tunnettuja ovat myös aminon suojaryhmät, 30 jotka soveltuvat käytettäväksi B2:na, ja niitä ovat tri-tyyliryhmä ja asyyliryhmät kuten klooriasetyyli. Edullisia ovat aminon suojaryhmät, jotka ovat helposti poistettavissa käsittelemällä hapolla, esimerkkinä trityyliryhmä.Also well known in the art are amino protecting groups suitable for use as B2, and include a triethyl group and acyl groups such as chloroacetyl. Preferred are amino protecting groups which are easily removed by treatment with an acid, for example a trityl group.

Kaavan I mukaisten yhdisteiden solvaatteja ovat mm.Solvates of the compounds of formula I include e.g.

35 hydraatit. Kaavan I mukaisten yhdisteiden piiriin kuuluvat myös yhdisteiden tautomeeriset muodot, esim. 2-aminotisi r «·'· 4-yyli-ryhmän 2-iminotiatsoli-4-yyli-muoto.35 hydrates. Also included within the scope of the compounds of formula I are tautomeric forms of the compounds, e.g. the 2-iminothiazol-4-yl form of the 2-aminothis-4-yl group.

12 74 97312 74 973

Kuten rakennekaavassa on esitetty, kaavan I raukaiset yhdisteet omaavat syn- eli Z-konfiguraation alkoksi-imino-(tai alkenyylioksi-imino)-ryhmään tai karboksisubstituoitu alkoksi-iminoryhmään nähden. Koska yhdisteet ovat geometri-5 siä isomeerejä, jonkin verran anti-isomeeriakin voi olla läsnä. Tämän keksinnön yhteydessä kaavan I mukaisilla yhdisteillä tarkoitetaan yhdisteitä, joissa on ainakin 90 % syn-isomeeria. Ensisijaisesti kaavan I mukaiset yhdisteet ovat syn-isomeereja, joiden joukossa ei ole oleellisin 10 määrin vastaavia anti-isomeereja.As shown in the structural formula, the capped compounds of formula I have the syn or Z configuration with respect to the alkoxyimino (or alkenyloxyimino) group or the carboxy-substituted alkoxyimino group. Because the compounds are geometric isomers, some anti-isomerism may be present. In the context of the present invention, the compounds of the formula I mean the compounds having at least 90% of the syn isomer. Preferably, the compounds of formula I are syn isomers, among which there are no substantially equivalent anti-isomers.

Kaavan I mukaisten yhdisteiden farmaseuttisesti hyväksyttäviä suoloja ovat epäorgaanisten emästen suolat kuten alkalimetallisuolat (esim. natrium- ja kaliumsuolat) ja maa-alkalimetallisuolat (esim. kalsiumsuolat), ammonium-15 suolat, orgaanisten emästen suolat (esim. suolat trietyyli-amiinin, prokaiinin, fenetyylibentsyyliamiinin, dibentsyyli-etyleenidiamiinin ja muiden orgaanisten emästen kanssa, joita on käytetty penisilliinin ja kefalosporiinin yhteydessä) , ja happoadditiosuolat (esim. suolat kloorivety-, bromi-20 vety-, muurahais-, typpi-, rikki-, metaanisulfoni-, fosfori-, etikka- tai trifluorietikkahapon) ja muiden happojen kanssa, joita on käytetty penisilliinin ja kefalosporiinin yhteydessä. Emässuoloja voidaan muodostaa kaavan I mukaisten yhdisteiden kummankin karboksyyliryhmän kanssa.Pharmaceutically acceptable salts of the compounds of formula I include salts with inorganic bases such as alkali metal salts (e.g. sodium and potassium salts) and alkaline earth metal salts (e.g. calcium salts), ammonium salts, salts with organic bases (e.g. salts with triethylamine, procainylamine, phenethylamine, phenethylamine). , with dibenzylethylenediamine and other organic bases used in conjunction with penicillin and cephalosporin), and acid addition salts (e.g., salts with hydrogen chloride, hydrogen bromine, hydrogen, ant, nitrogen, sulfur, methanesulfonic, phosphoric, acetic or trifluoroacetic acid) and other acids used with penicillin and cephalosporin. Base salts can be formed with both carboxyl groups of the compounds of formula I.

25 Kaavan I mukaisilla yhdisteillä on voimakas bakteerien vastainen vaikutus erilaisia gram-positiivisia ja gram-ne-gatiivisia bakteereita vastaan, ja ne ovat käyttökelpoisia hoidettaessa bakteeri-infektioita elävillä olennoilla, ihminen mukaan luettuna. Kaavan I mukaiset yhdisteet voidaan 30 formuloida parenteraalista käyttöä varten tavalliseen tapaan käyttämällä tunnettuja farmaseuttisia kantajia ja apuaineita, ja ne voivat olla annosyksikön muodossa tai moni-annoksisissa säiliöissä. Yhdistelmät voivat olla liuoksina, suspensioina tai emulsioina öljy- tai vesipitoisissa väli-35 aineissa, ja ne voivat sisältää tavallisia dispergointi-, suspendointi- tai stabilointiaineita. Yhdistelmät voivat 13 74973 myöskin olla kuivan jauheen muodossa, joka soveltuu seostettavaksi uudelleen ennen käyttöä esim. steriilin, kuumeita aiheuttamattoman veden kanssa. Kaavan I mukaiset yhdisteet voidaan formuloida myös peräpuikoiksi käyttämällä ta-5 vallisia peräpuikko-perusmassoja kuten kaakaovoita tai muita glyseridejä. Haluttaessa tämän keksinnön yhdisteitä voidaan antaa muiden antibioottien kuten penisilliinien tai muiden kefalosporiinien yhdistelmänä.The compounds of formula I have potent antibacterial activity against a variety of gram-positive and gram-negative bacteria and are useful in the treatment of bacterial infections in living organisms, including humans. The compounds of formula I may be formulated for parenteral use in a conventional manner using known pharmaceutical carriers and excipients, and may be presented in unit dosage form or in multi-dose containers. The combinations may be in the form of solutions, suspensions or emulsions in oily or aqueous media, and may contain conventional dispersing, suspending or stabilizing agents. The combinations may also be in the form of a dry powder suitable for reconstitution with e.g. sterile, antipyretic water before use. The compounds of formula I may also be formulated in suppositories using conventional suppository bases such as cocoa butter or other glycerides. If desired, the compounds of this invention may be administered in combination with other antibiotics such as penicillins or other cephalosporins.

Annosyksikkömuotoihin saatettuina yhdistelmät sisäl-10 tävät ensisijaisesti noin 50 - noin 1500 mg kaavan I mukaista aktiivista aineosaa. Täysikasvuisen ihmisen hoitoon tarkoitettu annos on ensisijaisesti välillä noin 500 - noin 5000 mg päivää kohden, riippuen antotiheydestä ja antoties-tä. Lihaksensisäisesti tai laskimonsisäisesti täysikasvui-15 selle ihmiselle annettaessa normaalisti riittävä annos on noin 750 - noin 3000 mg päivässä, jaettuina annoksina annettaessa, joskin eräiden yhdisteiden osalta suuremmat päivittäiset annokset voivat olla toivottavia Pseudomonas-infektioiden ollessa kyseessä.When presented in unit dosage form, the combinations preferably contain from about 50 to about 1500 mg of the active ingredient of formula I. The dose for the treatment of an adult human is preferably between about 500 and about 5000 mg per day, depending on the frequency and route of administration. When administered intramuscularly or intravenously to an adult human, a dose of about 750 to about 3000 mg per day will normally be sufficient, when administered in divided doses, although for some compounds, higher daily doses may be desirable in the case of Pseudomonas infections.

20 Tämän keksinnön yhdisteiden perusarvioinnin yhteydes sä yhdisteiden ja kahden vertailuyhdisteen (cefotaxime ja ceftazidime) minimiestokonsentraatiot (MIC-arvot) määritettiin kaksinkertaisella agar-sarjalaimennusmenetelmällä Mueller-Hinton-agarissa 32 koeorganismikantaa vastaan kuu-25 tena ryhmänä. Tässä kokeessa määritettyjen MIC-arvojen geometriset keskiarvot on esitetty taulukoissa 1 ja 4.In the baseline evaluation of the compounds of this invention, the minimum inhibitory concentrations (MIC values) of the compounds and the two reference compounds (cefotaxime and ceftazidime) were determined by a two-fold agar serial dilution method on Mueller-Hinton agar against 32 test organism strains as six groups. The geometric means of the MIC values determined in this experiment are shown in Tables 1 and 4.

30 -CONH-j-0 H2N^g/ \ /—N^^CH20CCH330 -CONH-j-O H2N4 g / N2-CH2ClCH3

0CH3 COOH0CH3 COOH

(Cetotaxime; vertailuyhdiste) 35 14 74973 / S'ss N —τ— C-C0NH--\ „ j—'«Αα, -ν/7Λ 5 η2λ5; Xo o Αί? 2 w i H3C-C-CH3(Cetotaxime; reference compound) 35 14 74973 / S'ss N —τ— C-C0NH - \ „j - '« Αα, -ν / 7Λ 5 η2λ5; Xo o Αί? 2 w i H3C-C-CH3

COOHCOOH

(Ceftazidime; vertailuyhdiste) N—▼— C CONH—j ^ ^(Ceftazidime; reference compound) N - ▼ - C CONH - j ^ ^

H,. v AA/OB,. v AA / O

ch3 (Koeyhdisteet) 15ch3 (Test compounds) 15

Voidaan havaita, että kaikki koeyhdisteet olivat aktiivisempia kuin cefotaxime koeorganismien (G-)-II- ja (G-)-III-ryhmiä vastaan, edullisimman yhdisteen Ia ollessa huomattavasti aktiivisemman. Kaikki koeyhdisteet olivat aktiivisem-20 pia kuin ceftazidime koeorganismien (G+)-Ia- ja (G+)-Ib- ryhmiä vastaan, edullisimman yhdisteen Ia ollessa huomattavasti aktiivisemman kuin ceftazidime kaikkia koeorganisrai-ryhmiä vastaan, lukuunottamatta ryhmää (G-)-III, joka oli jonkin verran alttiimpi ceftazidime’lie.It can be seen that all test compounds were more active than cefotaxime against the (G -) - II and (G -) - III groups of the test organisms, with the most preferred compound Ia being significantly more active. All test compounds were more active than ceftazidime against the (G +) - Ia and (G +) - Ib groups of test organisms, with the most preferred compound Ia being significantly more active than ceftazidime against all test organ groups except group (G -) - III, which was somewhat more susceptible to ceftazidime'lie.

25 Edullisimman yhdisteen Ia ja vertailuyhdisteiden (cefotaxime ja ceftazidime) absorptio määritettiin hiirissä sen jälkeen kun koeyhdistettä (liuotettuna 0,1-mol. fosfaattipuskuriin; pH 7) oli annettu yhtenä lihaksensisäisenä ruiskeena annoksena 20 mg/kg. Verinäytteitä koottiin silmä-30 kuoppa-laskimoista hepariinilla käsiteltyihin kapillaari-putkiin ja määritykset tehtiin Mueller-Hinton-väliaineessa käyttämällä Morganella Morganii A9695-kantaa koeorganismina. Veripitoisuudet eri aikavälein, puoli-aika-arvot (t^/2) 3a käyrän alapuoliset alueet (AUC) on esitetty taulukossa 2.The absorption of the most preferred compound Ia and the reference compounds (cefotaxime and ceftazidime) was determined in mice after administration of the test compound (dissolved in 0.1 M phosphate buffer; pH 7) as a single intramuscular injection at a dose of 20 mg / kg. Blood samples were collected from eye-30 well veins into heparinized capillary tubes and assays were performed in Mueller-Hinton medium using Morganella Morganii strain A9695 as a test organism. Blood concentrations at different time intervals, half-life values (t ^ / 2) The areas below curve 3a (AUC) are shown in Table 2.

35 Suoritettiin myös kokeita organismien vastustuskyvyn toteamiseksi edullisen kaavan Ia mukaisen yhdisteen, cefo- 15 74973 taxime'n ja ceftazidime'n suhteen. Näiden kolmen yhdisteen MIC-arvot 240 Enterobacteriaceae-kantaa vastaan määritettiin Mueller-Hinton-väliaineessa, ja MIC-arvon, joka oli sama tai suurempi kuin 8 ainakin yhden koeyhdisteen osalta, 5 katsottiin mieliavaltaisesti ilmaisevan vastustuskykyistä organismia. 140 kannasta 27:n todettiin olevan vastustuskykyinen ainakin yhden koeyhdisteen suhteen. Tulokset, jotka ilmaisevat kolmen organismin vastustuskyvyn yhdisteen Ia suhteen, 15 organismin vastustuskyvyn ceftazidime'n suh-10 teen ja 18 organismin vastustuskyvyn cefotaxime'n suhteen, on esitetty taulukossa 3.Experiments were also performed to determine the resistance of the organisms to the preferred compound of formula Ia, cefo-74973 taxime and ceftazidime. The MIC values of these three compounds against 240 Enterobacteriaceae strains were determined in Mueller-Hinton medium, and the MIC value equal to or greater than 8 for at least one test compound was considered arbitrarily to indicate a resistant organism. Of the 140 strains, 27 were found to be resistant to at least one test compound. The results showing the resistance of three organisms to compound Ia, the resistance of 15 organisms to ceftazidime and the resistance of 18 organisms to cefotaxime are shown in Table 3.

1616

Taulukko 1 7 4 9 7 3 H ^Table 1 7 4 9 7 3 H ^

H (NH (N

H ·—· 00 LO 00 —' 1 VO * *. » -—.H · - · 00 LO 00 - '1 VO * *. »-—.

-“.^(NinrHnCNJrH (ö (00}- “. ^ (NinrHnCNJrH (ö (00}

I i—I i—i fs -n ra SI i — I i — i fs -n ra S

-j a s j-j a s j

ϊ IMϊ IM

(tn g ro m t ι in ro o cn -tt r-ι lo § fc^^"··***·*··· 1—I (11 (C I O r-l rO CM ’T CM —· (0·(tn g ro m t ι in ro o cn -tt r-ι lo § fc ^^ "·· *** · * ··· 1 — I (11 (C I O r-l rO CM’ T CM - · (0 ·

t ώ -d Mt ώ -d M

1' ~ n § si * ä § ίο E Λ i S ·" H .— ro rn in r- 3 o, I vo <-l ro co rd ro - m ra P o·· '—' * «. * * * iH C · ra1 '~ n § si * ä § ίο E Λ i S · "H .— ro rn in r- 3 o, I vo <-l ro co rd ro - m ra P o ··' - '*«. * * * iH C · ra

p I O O r—I i—I O Ci i—| -Mp I O O r — I i — I O Ci i— | -M

t. o «St. o «S

(t · ra —' H <0 ·* —. rö 3 -n(t · ra - 'H <0 · * -. rö 3 -n

Ira a 3 . ~ ö M <0 4J C —. (0 h n r~ in o e ra ra ra ra C I x— oj oo m ro i-ι r~ ra 2 ra ja raIra a 3. ~ ö M <0 4J C -. (0 h n r ~ in o e ra ra ra ra C I x— oj oo m ro i-ι r ~ ra 2 ra ja ra

Qj ^inooroLDoo ,¾ +3 COQj ^ inooroLDoo, ¾ +3 CO

c L'—* - ** * ·· ·> ^ mc ra rac L '- * - ** * ·· ·> ^ mc ra ra

•dj O oooooo in ^ ra Ä O• dj O oooooo in ^ ra Ä O

-9 ra ro o ÖJ, „ m d <n ~ E Λ d Φ ^-9 ra ro o ÖJ, „m d <n ~ E Λ d Φ ^

£ H --· (UM -H M£ H - · (UM -H M

Φ I n M 3 -d r-ι c o—'-' 3 (d r-4 q p3 -—- „ + rH -H LO LO (N (0 Q — O ra CU ·.*.*.*.«. »ora v raΦ I n M 3 -d r-ι co —'- '3 (d r-4 q p3 -—- „+ rH -H LO LO (N (0 Q - O ra CU ·. *. *. *. «.» Ora v ra

0) —1 ro ro ro ro r\i (n · co ra ^ -P0) —1 ro ro ro ro r \ i (n · co ra ^ -P

5 _ ^ « 2 H | w 5 I5 _ ^ «2 H | w 5 I

Γ ra-PCN-^Tj-COOH M 0} 2 (N 4-J —' o g ν|πΗΗΗΗΐη '»") HiHÖMOMmΓ ra-PCN- ^ Tj-COOH M 0} 2 (N 4-J - 'o g ν | πΗΗΗΗΐη' »") HiHÖMOMm

*7^ *H ·Η r—I *H rH Q <D C* 7 ^ * H · Η r — I * H rH Q <D C

>, 5 .2 3 s I sä d Ci ’d C a U · tl · · Ä g ti Ά 1 I ! .........." « ra il il il μ κ -d ra Λ ra ja h h id P r\i oj cm (Ni (On h h h h h h >>, 5 .2 3 s I sä d Ci 'd C a U · tl · · Ä g ti Ά 1 I! .......... "« ra il il il μ κ -d ra Λ ra ja h h id P r \ i oj cm (Ni (On h h h h h h>

UI « « oi « J (rt III IIIUI «« oi «J (rt III III

I i2 ä i2 2 ö ö o i 3 i i i o 17 74973 li J_J . 00 CJ Ä (ti in σι v S -H (fl - * nI i2 ä i2 2 ö ö o i 3 i i i o 17 74973 li J_J. 00 CJ Ä (ti in σι v S -H (fl - * n

< E E m *3· >H<E E m * 3 ·> H

·= HH· = HH

i—i •8 t) c r» m p' HM -r-j l—| f—| f—| +j a O <T (M 00 <T\ * * *i — i • 8 t) c r »m p 'HM -r-j l— | f- | f- | + j a O <T (M 00 <T \ * * *

^ OH O^ OH O

o 1 1 * Μ rä o v£> ^ s VO V «.o 1 1 * Μ rä o v £> ^ s VO V «.

0 g 1 § M cm oo -h r" 0) *-T ·. h.0 g 1 § M cm oo -h r "0) * -T ·. H.

H Φ 00 (Ti 00 P :n m (o <t 'O C - 3 O o ro ro ^3·H Φ 00 (Ti 00 P: n m (o <t 'O C - 3 O o ro ro ^ 3 ·

3 C ro H H rH3 C ro H H rH

Ui c •H (oUi c • H (o

OO

•P 3 H -ro CX O) -h -P m ro »3· P -P ·, «.• P 3 H -ro CX O) -h -P m ro »3 · P -P ·,«.

Q) 3 0 (Tl O 00 £> 5 OJ I—I r—I i—\Q) 3 0 (Tl O 00 £> 5 OJ I — I r — I i— \

GG

ä t— oo m O *» ». vä t— oo m O * »». v

rH O Γ~ rPrH O Γ ~ rP

(N (N (N(N (N (N

I II I

SH 4 tSH 4 t

tr- S ^ Str- S ^ S

fl i ! 8 3 <u x H m m λ:fl i! 8 3 <u x H m m λ:

P (N <0 NP (N <0 N

Ui oi -g jjj (N iH ro i SJ j S & 2 .---- ----- τ~.Ui oi -g jjj (N iH ro i SJ j S & 2 .---- ----- τ ~.

18 7497318 74973

Taulukko 3Table 3

Vastustuskykyisyys (MIC = >8 ^ug/ml) yhden tai useamman koeyhdisteen suhteen 240 Enterobacteriacesae-kannan osalta Mueller-Hinton-väliaineessaResistance (MIC => 8 ug / ml) to one or more test compounds for 240 Enterobacteriacesae strains in Mueller-Hinton medium

Organismi Kantojen Geometrinen MIC-keskiarvo (^ug/ml)____ lukumäärä ¥ Cefo- ___Ia Ceftazidime t£0dj^Organism Geometric mean MIC of strains (^ ug / ml) ____ number ¥ Cefo- ___Ia Ceftazidime t £ 0dj ^

Escherichia coli 1 0f25 32 8Escherichia coli 1 0f25 32 8

Escherichia coli 1 4 0 , 5 8Escherichia coli 1 4 0, 5 8

Klebsiella pneumoniae 12 16 0,13Klebsiella pneumoniae 12 16 0.13

Enterobacter aerogenes 3 0^25 32 13Enterobacter aerogenes 3 0 ^ 25 32 13

Enterobacter aerogenes 14 g 32Enterobacter aerogenes 14 g 32

Enterobacter cloacae 1 0,13 4 8Enterobacter cloacae 1 0.13 4 8

Enterobacter cloacae 3 0^5 40 50Enterobacter cloacae 3 0 ^ 5 40 50

Enterobacter cloacae 3 1,6 >63 >63Enterobacter cloacae 3 1.6> 63> 63

Enterobacter cloacae 1 >32 >63 >63Enterobacter cloacae 1> 32> 63> 63

Eitrobacter freundii 2 0,35 45 32Eitrobacter freundii 2 0.35 45 32

Eitrobacter species 1 0,03 >63 32Eitrobacter species 1 0.03> 63 32

Proteus vulgaris 1 0, .06 8 8 (organella morganii 1 0,06 32 3^Proteus vulgaris 1 0, .06 8 8 (organella morganii 1 0.06 32 3 ^

SerratiaSerratia

- I- I

marcescens 11 1 16marcescens 11 1 16

Serratia marcescens 12 8 16 i 74973 19Serratia marcescens 12 8 16 and 74973 19

Taulukko 3 - jatk.Table 3 - cont.

Organismi fotojen [a^trlnan MIC-teskiarvo (/ig/ml)__ lukumäärä Cefo- _____Ia__Ceftazidime taximeNumber of microorganisms in the organism [a ^ trlnan MIC (μg / ml) __ Cefo- _____Ia__Ceftazidime taxime

Serratia marcescens 2 2.8 2 ^Serratia marcescens 2 2.8 2 ^

Serratia' marcescens 14 8 63Serratia 'marcescens 14 8 63

Serratia marcescens 18 16 8Serratia marcescens 18 16 8

Serratia marcescens 1 32 >63 *®3Serratia marcescens 1 32> 63 * ®3

Vastustuskykyisten kantojen kokonaisluku- 27 3 15 18 määrä----- 74973 20 N-- CONM--[^S \Integer number of resistant strains 27 3 15 18 ----- 74973 20 N-- CONM - [^ S \

vK \f /-VjAc.®»QvK \ f /-VjAc.® actingQ

_ H,C-C-CH, CO°^ / 5 J I 3 6i, COOH 3 (Koeyhdiste)_ H, C-C-CH, CO ° ^ / 5 J I 3 6i, COOH 3 (Test compound)

Geometrinen MIC-keskiarvo (mikrogrammaa/ml)Geometric mean MIC (micrograms / ml)

Yhdiste ,n Koeorganismit Yhdiste , .Test organisms.

___Ie_Qefotaxime a Ceftazidime ’_ (G+)-Ia (5 kantaa) 14 1,0 5,1 (G+) -Ib (5) 33 2,2 12 (G-)-Ia (5) 0,066 0,015 0,070 15 (G-)-Ib (6) 0,79 0,35 1,7 (G-)-II (5) 1,2 4,1 2,6 (G-)-III (6)__4^0_22__1^8__ (G+)-Ia : Penisilliini-herkkä S. aureus (5 kantaa) G+)-Ib : Penisilliini-kestävä S. aureus (5 kantaa) 20 (G-)-Ia : Cephalothin-herkkä E. coli (2 kantaa), Kl.___Ie_Qefotaxime a Ceftazidime '_ (G +) - Ia (5 strains) 14 1.0 5.1 (G +) -Ib (5) 33 2.2 12 (G -) - Ia (5) 0.066 0.015 0.070 15 (G- ) -Ib (6) 0.79 0.35 1.7 (G -) - II (5) 1.2 4.1 2.6 (G -) - III (6) __ 4 ^ 0_22__1 ^ 8__ (G +) -Ia: Penicillin-sensitive S. aureus (5 strains) G +) - Ib: Penicillin-resistant S. aureus (5 strains) 20 (G -) - Ia: Cephalothin-sensitive E. coli (2 strains), Kl.

pneumoniae (1 kanta) ja Pr. mirabilis (2 kantaa) (G-)-Ib : Cephalothin-kestävä E. coli (3 kantaa) japneumoniae (1 strain) and Pr. mirabilis (2 strains) (G -) - Ib: Cephalothin-resistant E. coli (3 strains) and

Kl. pneumoniae (3 kantaa) 25 (G-)-II : Pr. morgani (1 kanta), Ent. cloacae (2 kantaa) jaKl. pneumoniae (3 strains) 25 (G -) - II: Pr. morgani (1 strain), Ent. cloacae (2 strains) and

Ser. Marcescens (2 kantaa) (G-)-III : Ps. aeruginosa (6 kantaa) (a) Viiden kokeen keskiarvo 30 21 74973Ser. Marcescens (2 strains) (G -) - III: Ps. Aeruginosa (6 strains) (a) Average of five experiments 30 21 74973

Voidaan havaita, että yhdiste Ie oli aktiivisempi kuin cefotaxime koeorganismien (G-)-II-ryhmää vastaan ja huomattavasti aktiivisempi kuin cefotaxime koeorganismien (G-)-III-ryhmää (Ps. aeruginosa) vastaan. Se oli aktiivi-5 sempi kuin ceftazidime gram-negatiivisten koeorganismien kaikkia ryhmiä vastaan, lukuun ottamatta ryhmää (G-)-III vastaan (Ps. aeruginosa), joka oli jonkin verran alttiimpi ceftazidime 1 n suhteen.It can be seen that compound Ie was more active than cefotaxime against the (G -) - II group of test organisms and significantly more active than cefotaxime against the (G -) - III group of test organisms (Ps. Aeruginosa). It was more active than ceftazidime against all groups of gram-negative test organisms, except for group (G -) - III (Ps. Aeruginosa), which was somewhat more susceptible to ceftazidime 1 n.

Valmistus No. 1 10 N i C-COOCoHc /T iManufacture No. 1 10 N i C-COOCoHc / T i

TrHN"N c / \ 0 b OR"2 15 Etyyli-(Z)-2-metoksi-imino-(2-trityyliaminotiatsol- 4-yyli)-asetaatti (lila)TrHN "N c / O b OR" 2 Ethyl (Z) -2-methoxyimino- (2-tritylaminothiazol-4-yl) acetate (purple)

Seosta, jossa oli etyyli-(Z)-2-hydroksi-imino-2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)asetaattia (II) (5,00 g, 10,9 mmoolia) , Cl^Jja (2,04 ml, 32,8 mmoolia) ja I^CC^ta 20 (4,54 g, 32,8 mmoolia) kuivassa dimetyylisulfoksidissa (DMSO) (100 ml), sekoitettiin huoneen lämpötilassa yön ajan ja kaadettiin sitten veteen (250 ml). Muodostunut sakka koottiin talteen suodattamalla, pestiin vedellä ja kuivattiin, jolloin saatiin otsikon yhdistettä (5,15 g, 25 kvantitatiivinen saanto). Sp. 115°C (haj.).A mixture of ethyl (Z) -2-hydroxyimino-2- (2-tritylaminothiazol-4-yl) acetate (II) (5.00 g, 10.9 mmol), Cl 2 and (2.04 ml, 32.8 mmol) and I 2 CO 2 (4.54 g, 32.8 mmol) in dry dimethyl sulfoxide (DMSO) (100 mL), stirred at room temperature overnight and then poured into water (250 mL). The precipitate formed was collected by filtration, washed with water and dried to give the title compound (5.15 g, quantitative yield). Sp. 115 ° C (dec.).

NMR: &CDCI3 ppm 1,32 (3H, t), 3,98 (3H, s), 4,30 (2H, q), 6,42 (1H, s), 7,2 (1H, m), 7,25 (15H, s).NMR: δ CDCl 3 ppm 1.32 (3H, t), 3.98 (3H, s), 4.30 (2H, q), 6.42 (1H, s), 7.2 (1H, m), δ .25 (15H, s).

Yhdisteitä Illb, IIIc ja Illd valmistettiin edellä esitetyllä yleisellä menetelmällä, korvaamalla kuitenkin 30 metyylijodidi sopivalla jodidilla.Compounds IIIb, IIIc and IIId were prepared by the general procedure described above, but substituting the appropriate iodide for methyl iodide.

__ - LZ ____ __ 22 7 4 9 7 3 ~ Kirjallisuus ^__ - LZ ____ __ 22 7 4 9 7 3 ~ Literature ^

Yhdiste_IT__Saanto (%) Sp. (°C) Sp. (°C)_ lila metyyli 100 115°(haj.) noin 120° (haj.)Compound_IT__ Yield (%) Sp. (° C) M.p. (° C) - purple methyl 100 115 ° (dec.) About 120 ° (dec.)

Illb etyyli 67 97-98° * 5 IIIc isopropyyli 26 51-55° *IIIb ethyl 67 97-98 ° * 5 IIIc isopropyl 26 51-55 ° *

Illd allyyli * * * * Esteri hydrolysoitui eristämättä (1)Tetrahedron, 34, 2233 (1978)Illd allyl * * * * Ester hydrolyzed without isolation (1) Tetrahedron, 34, 2233 (1978)

Valmistus No. 2Manufacture No. 2

N--r-C-COOHN - r -C-COOH

1515

TrHN-^Vg/ \op2 (Z)-2-metoksi-imino-2-(2-trityyliaminotiatsol- 4-yyli)etikkahappo (IVa)TrHN-N, N-op2 (Z) -2-Methoxyimino-2- (2-tritylamino-thiazol-4-yl) -acetic acid (IVa)

Valmistuksessa No. 1 valmistettua etyyliesteriä 20 lila (6,00 g, 12,7 mmoolia), joka oli etanolissa (120 ml), käsiteltiin 2-norm. Na0H:n (12,7 ml) kanssa huoneen lämpötilassa yön ajan. Reaktioseoksen pH säädettiin arvoon 8 lisäämällä jauhettua kuivajäätä ja liuotin haihdutettiin pois vakuumissa. Jäännös liuotettiin veteen 25 (100 ml) ja liuos tehtiin happameksi 1-norm. HCl:lla pH-arvoon 2 ja sitten uutettiin etyyliasetaatilla (3 x 50 ml). Yhdistetyt uutteet pestiin kyllästetyllä NaCl:n vesiliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin kuiviin. Jäännös kiteytettiin etyyliasetaatti-heksaani-30 seoksesta, jolloin saatiin 5,56 g (saanto 98 %) otsikon tuotetta. Sp. 138-143°C (haj.).In the manufacture of No. 1 prepared ethyl ester 20 l (6.00 g, 12.7 mmol) in ethanol (120 mL) was treated with 2-norm. With NaOH (12.7 mL) at room temperature overnight. The pH of the reaction mixture was adjusted to 8 by the addition of ground dry ice and the solvent was evaporated off in vacuo. The residue was dissolved in water (100 ml) and the solution was acidified to 1-norm. HCl to pH 2 and then extracted with ethyl acetate (3 x 50 mL). The combined extracts were washed with saturated aqueous NaCl, dried and evaporated to dryness. The residue was crystallized from ethyl acetate-hexane-30 to give 5.56 g (yield 98%) of the title product. Sp. 138-143 ° C (dec.).

NMR: «£CDC13 ppm 3,89 (3H, s), 6,52 (1H, s), 7,2 (15H, s).NMR: δ CDCl 3 ppm 3.89 (3H, s), 6.52 (1H, s), 7.2 (15H, s).

Yhdisteitä IVb, IVc ja IVd valmistettiin edellä esitetyllä yleisellä menetelmällä.Compounds IVb, IVc and IVd were prepared by the general method described above.

35 23 7 4 9 7 335 23 7 4 9 7 3

Kirjallisuus ^ aLiterature ^ a

Yhdiste R Saanto (%) Sp. (°C, haj .) Sp. (°C, haj.) IVa metyyli 98 138-143 noin 140 5 IVb etyyyli 85 140-145 ei ilmoitettu IVc isopropyyli 85 166-169 noin 170Compound R Yield (%) M.p. (° C, dec.) M.p. (° C, dec.) IVa methyl 98 138-143 about 140 5 IVb ethyl 85 140-145 not reported IVc isopropyl 85 166-169 about 170

Illd allyyli 66 170-178 noin 170 (1) Tetrahedron, 34, 2233 (1978) 2o Valmistus No. 3Illd allyl 66 170-178 about 170 (1) Tetrahedron, 34, 2233 (1978) 2o Preparation no. 3

Bentshydryyli-3-hydroksimetyyli-7-fenyyliasetami- do-3-kefem-4-karboksylaattiBenzhydryl 3-hydroxymethyl-7-phenylacetamido-3-cephem-4-carboxylate

Sekoitettuun suspensioon, jossa oli fosfaattipuskuria (pH 7, 162,5 ml) ja vehnäleseitä (20 g, kuivia) 15 huoneen lämpötilassa, lisättiin yhtenä eränä 7-fenyyli- asetamidokefalosporaanihapon natriumsuolaa (5 g, 12,1 mmoolia). Reaktion edistymistä seurattiin HPLC:n avulla kunnes hydrolyysi oli päättynyt (5 tuntia). Suspensio suodatettiin vehnänleseiden poistamiseksi ja suodos 20 jäähdytettiin 5-10°C:seen uutosesteröintiä varten. Jääh dytettyyn liuokseen lisättiin metyleenikloridia (32 ml) ja sen jälkeen 0,5-molaarista difenyylidiatsometaanin metyleenikloridiliuosta (24 ml). pH säädettiin sitten arvoon 3,0 28 %:isella fosforihapolla. Tunnin kuluttua 25 reaktioseoksen lämpötilan annettiin kohota 20°C:seen. Li sättiin hitaasti heptaania (56 ml) ja muodostunut kiteinen otsikon tuote otettiin talteen suodattamalla. Otsikon tuotteen saanto oli 3,0 g (50 %).To a stirred suspension of phosphate buffer (pH 7, 162.5 mL) and wheat bran (20 g, dry) at room temperature was added sodium salt of 7-phenylacetamidocephalosporanic acid (5 g, 12.1 mmol) in one portion. The progress of the reaction was monitored by HPLC until the hydrolysis was complete (5 hours). The suspension was filtered to remove wheat bran and the filtrate was cooled to 5-10 ° C for extraction esterification. To the cooled solution was added methylene chloride (32 mL) followed by a 0.5 molar methylene chloride solution of diphenyldiazomethane (24 mL). The pH was then adjusted to 3.0 with 28% phosphoric acid. After 1 hour, the temperature of the reaction mixture was allowed to rise to 20 ° C. Li was slowly adjusted to heptane (56 mL) and the resulting crystalline title product was collected by filtration. The yield of the title product was 3.0 g (50%).

Valmistus No. 4 3 0 Be nts hydryy1i-7-amino-3-k1oor imetyyli-3-kefeemi- 4-karboksylaatti (V)Manufacture No. 4 3 0 Benz n-hydrogen-7-amino-3-chloromethyl-3-cephem-4-carboxylate (V)

Lietteeseen, jossa oli PCl^:a (8,3 g, 40 mmoolia) C^C^sssa (100 ml), lisättiin pyridiiniä (3,2 g, 40 mmoolia) ja seosta sekoitettiin 20 minuuttia 20°C:ssa. Seok-35 seen lisättiin yhtenä eränä bentshydryyli-3-hydroksi- metyyli-7-fenyyliasetamido-3-kefem-4-karboksylaattia, jota oli valmistettu valmistuksessa No. 3 (5,1 g, 10 irnnoo- 74973 24 lia), sekoittamalla -40°C:ssa. Seosta sekoitettiin -10°C:ssa 15 minuuttia ja sen annettiin olla paikoillaan -10° - -15°C:ssa 7 tuntia. Jäähdytettyyn liuokseen (-20°C) lisättiin propaani-1,3-diolia (10 ml) ja 5 seoksen annettiin olla paikoillaan -20°C:ssa 16 tuntia ja sitten huoneen lämpötilassa 20 minuuttia sekoittaen. Saatu liuos pestiin jäävedellä (2 x 20 ml) ja kyllästetyllä NaCl:n vesiliuoksella (10 ml), kuivattiin MgSO^zlla ja haihdutettiin kuiviin vakuumissa. Hartsimainen jään-10 nös (12 g) liuotettiin seokseen, jossa oli CHCl^ja ja n-heksaania (2:1), ja kromatografioitiin käyttämällä silikageelikolonnia (200 g) ja eluenttina samaa liuotinta. Otsikon yhdistettä sisältävät fraktiot haihdutettiin kuiviin vakuumissa ja jäännöstä trituroitiin n-hek-15 saanin kanssa, jolloin saatiin otsikon tuotetta (2,1 g, 51 %), joka suli >110°C:ssa (haj.).To a slurry of PCl 3 (8.3 g, 40 mmol) in CH 2 Cl 2 (100 mL) was added pyridine (3.2 g, 40 mmol) and the mixture was stirred for 20 minutes at 20 ° C. To the mixture was added benzhydryl 3-hydroxymethyl-7-phenylacetamido-3-cephem-4-carboxylate prepared in Preparation No. 35 in one portion. 3 (5.1 g, 10 mg-74973 24 lia), with stirring at -40 ° C. The mixture was stirred at -10 ° C for 15 minutes and allowed to stand at -10 ° to -15 ° C for 7 hours. To the cooled solution (-20 ° C) was added propane-1,3-diol (10 ml) and the mixture was allowed to stand at -20 ° C for 16 hours and then at room temperature for 20 minutes with stirring. The resulting solution was washed with ice water (2 x 20 mL) and saturated aqueous NaCl (10 mL), dried over MgSO 4 and evaporated to dryness in vacuo. Resinous ice-10 (12 g) was dissolved in a mixture of CHCl 3 and n-hexane (2: 1) and chromatographed on a silica gel column (200 g) using the same solvent as eluent. Fractions containing the title compound were evaporated to dryness in vacuo and the residue triturated with n-hex-15 to give the title product (2.1 g, 51%) melting at> 110 ° C (dec).

IR: 0KBr 3400, 2800, 1785, 1725 cm"1.IR: 0KBr 3400, 2800, 1785, 1725 cm -1.

iEt0H 265 nm (e}%> 160).iEtOH 265 nm (e}%> 160).

‘ 'Vnaks ± 20 NMR: ^°p^0_d6 + CDCl3 3,69 (2H, s), 4,43 (2H, s), 5,09 (1H, d, J = 4,5 Hz), 5,24 (1H, d, J = 4,5 Hz), 6,87 (1H, s), 7,3 (10, m).1 H NMR ± 20 NMR: δ ° p ^ 0_d6 + CDCl 3 3.69 (2H, s), 4.43 (2H, s), 5.09 (1H, d, J = 4.5 Hz), δ, 24 (1H, d, J = 4.5 Hz), 6.87 (1H, s), 7.3 (10, m).

Esimerkki 1 1-[(Z) -2-metoksi-imino-2- (2-aminotiatsol-4-yyli) -25 ase tamidq7 -3-^"( 1 -me tyyli- 1-pyrrolidinium) metyyli? - 3-kefeemi-4-karboksylaatti (Ia) A. Bentshydryyli-3-kloorimetyyli-7-/'(Z) -2-metok-si-imino-2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)-asetamido7“3-kefeemi-4-karboksylaatti (Via*) 30 Valmistuksessa no. 4 valmistettua bentshydryyli- 7-amino-3-kloorimetyyli-3-kefeemi-4-karboksylaattia (2,29 g, 5,52 mmoolia), joka oli CH^CNissa (57 ml), käsiteltiin bis(trimetyylisilyyli)asetamidin kanssa (BSA, 4,09 ml, 16,6 mmoolia) huoneen lämpötilassa 50 mi-35 nuuttia, jolloin saatiin kirkasta liuosta. Liuokseen 74973 25 lisättiin happokloridi-liuos, joka oli valmistettu (Z)-2-metoksi-imino-2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)-etikkahaposta (IVa) (2,04 g, 4,60 mmoolia) ja Pelasta (1,15 g, 5,52 mmoolia) metyleenikloridissa (20 ml). Se-5 osta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 30 minuuttia, kaadettiin kylmään veteen (200 ml) ja uutettiin etyyliasetaatilla (3 x 100 ml). Yhdistetyt uutteet pestiin NaCl:n vesiliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin kuiviin. Jäljelle jäänyt siirappi (4 g) kromatografioitiin 10 silikageelillä (150 g) kolonnissa eluoimalla peräkkäin tolueenin ja etyyliasetaatin seoksin 10:1 ja 3:1. Haluttua yhdistettä sisältävät fraktiot yhdistettiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 2,61 g (68 %) yhdistettä Via' amorfisena jauheena.Example 1 1 - [(Z) -2-Methoxyimino-2- (2-aminothiazol-4-yl) -25-acetamide] -3 - [(1-methyl-1-pyrrolidinium) methyl] -3- Cephem-4-carboxylate (Ia) A. Benzhydryl-3-chloromethyl-7 - [(Z) -2-methoxyimino-2- (2-tritylaminothiazol-4-yl) -acetamido] -3-cephem- 4-Carboxylate (Via *) The benzhydryl 7-amino-3-chloromethyl-3-cephem-4-carboxylate prepared in Preparation No. 4 (2.29 g, 5.52 mmol) in CH 2 Cl 2 (57 mL ) was treated with bis (trimethylsilyl) acetamide (BSA, 4.09 mL, 16.6 mmol) at room temperature for 50 mL to 35 minutes to give a clear solution. To the solution 74973 was added an acid chloride solution prepared from (Z) - 2-Methoxyimino-2- (2-tritylamino-thiazol-4-yl) -acetic acid (IVa) (2.04 g, 4.60 mmol) and Save (1.15 g, 5.52 mmol) in methylene chloride (20 mL The mixture was stirred at room temperature for 30 minutes, poured into cold water (200 ml) and extracted with ethyl acetate (3 x 100 ml). n with aqueous NaCl, dried and evaporated to dryness. The remaining syrup (4 g) was chromatographed on a silica gel (150 g) column eluting successively with mixtures of toluene and ethyl acetate 10: 1 and 3: 1. Fractions containing the desired compound were combined and evaporated to dryness to give 2.61 g (68%) of Via 'as an amorphous powder.

15 NMR: <?CDC13 3,50 (2H, s), 4,02 (3H, s), 4,33 (2H, s), 4,98 (1H, d), 5,87 (1H, q), 6,65 (1H, s), 6,90 (1H, s), 7,3 (25H, m).NMR: δ CDCl 3 3.50 (2H, s), 4.02 (3H, s), 4.33 (2H, s), 4.98 (1H, d), 5.87 (1H, q) , 6.65 (1H, s), 6.90 (1H, s), 7.3 (25H, m).

B. Bentshydryyli-3-jodimetyyli-7-/^(Z)-2-metoksi-imino-2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)-20 asetamido7“3-kefeemi-4-karboksylaatti (Vila1)B. Benzhydryl 3-iodomethyl-7- [(Z) -2-methoxyimino-2- (2-tritylaminothiazol-4-yl) -20-acetamido] -3-cephem-4-carboxylate (VIIa)

Seosta, jossa oli 3-kloorimetyyli-johdannaista (Via') (1,50 g, 1,79 mmoolia) ja NaJ:a (1,34 g, 8,93 mmoolia) metyylietyyliketonissa (30 ml), sekoitettiin huoneen lämpötilassa tunnin ajan. Liuottimen haihduttamisen jäl-25 keen jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin (100 ml) ja pestiin vedellä, ^2820^:n vesiliuoksella ja NaCl:n vesiliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin otsikon yhdistettä Vila' (1,47 g, 89 %) morfisena jauheena.A mixture of the 3-chloromethyl derivative (Via ') (1.50 g, 1.79 mmol) and Na 2 (1.34 g, 8.93 mmol) in methyl ethyl ketone (30 mL) was stirred at room temperature for 1 h. . After evaporation of the solvent, the residue was dissolved in ethyl acetate (100 ml) and washed with water, brine and aqueous NaCl, dried and evaporated to dryness to give the title compound VIIa '(1.47 g, 89%) as a morph. powder.

30 NMR: ^CDCl3 ppm 3,55 (2H, ABq) , 4,00 (3H, s), 4,25 (2H, s), 4,97 (1H, d), 5,80 (1H, q), 6,65 (1H, s), 6,90.NMR: δ CDCl 3 ppm 3.55 (2H, ABq), 4.00 (3H, s), 4.25 (2H, s), 4.97 (1H, d), 5.80 (1H, q) , 6.65 (1 H, s), 6.90.

26 74973 C. l-fd)-2-metoksi-imino-2-(2-aminotiatsol-4- yyli)asetamidoZ-S-^l-metyyli-l-pyrrolidinium)-metyyli7-3-kefeemi-4-karboksylaatti (la)26 74973 C. 1- (fd) -2-methoxyimino-2- (2-aminothiazol-4-yl) acetamido [-5- (1-methyl-1-pyrrolidinium) methyl] -3-cephem-4-carboxylate ( la)

Seosta, jossa oli yhdistettä Vila' (4,5 g, 4,83 5 mmoolia) ja N-metyylipyrrolidiinia (0,65 ml, 6,28 mmoo- lia) CH-^C^issa (45 ml), sekoitettiin huoneen lämpötilassa 20 minuuttia. Seokseen lisättiin eetteriä (300 ml) sakkautuneen kefalosporiinin kvaternäärisen suolan eristämiseksi, joka suola koottiin talteen suodattamalla ja 10 sitä käsiteltiin 90 % sisen trifluorietikkahapon (TFA) (40 ml) kanssa huoneen lämpötilassa tunnin ajan. Sitten seos haihdutettiin kuiviin vakuumissa 20°C:n alapuolella olevassa lämpötilassa. Jäännöstä trituroitiin eetterin kanssa, jolloin saatiin yhdisteen Ia TFA-suolaa 15 (2,40 g), joka liuotettiin metanoliin (5 ml) ja käsitel tiin 1-molaarisen natrium-2-etyyliheksoaatin (SEH) etyyliasetaatti-liuoksen (8 ml) kanssa huoneen lämpötilassa 30 minuutin ajan. Etyyliasetaatin (100 ml) lisäämisen jälkeen muodostunut sakka (1,94 g) koottiin talteen 20 suodattamalla. HPLC-analyysi osoitti raakatuotteen ole van puhtaudeltaan 7 %, Δ^-isomeerin ja Δ^-isomeerin suhteen ollessa 1:8. Tuotteen puhdistaminen HPLC:n avulla uusittiin kolme kertaa (Lichrosorb RP-18, 8 x 300 mm, eluoitu 5 %:isella CH^OH-.n vesiliuoksella tai 0,01-mol.A mixture of VIIa '(4.5 g, 4.83 5 mmol) and N-methylpyrrolidine (0.65 mL, 6.28 mmol) in CH 2 Cl 2 (45 mL) was stirred at room temperature. 20 minutes. Ether (300 ml) was added to the mixture to isolate the quaternary salt of precipitated cephalosporin, which salt was collected by filtration and treated with 90% trifluoroacetic acid (TFA) (40 ml) at room temperature for 1 hour. The mixture was then evaporated to dryness in vacuo at a temperature below 20 ° C. The residue was triturated with ether to give the TFA salt of compound Ia (2.40 g) which was dissolved in methanol (5 mL) and treated with 1 M sodium sodium 2-ethylhexoate (SEH) in ethyl acetate (8 mL) at room temperature. at room temperature for 30 minutes. The precipitate formed (1.94 g) formed after the addition of ethyl acetate (100 ml) was collected by filtration. HPLC analysis showed the crude product to be 7% pure with a 1: 8 ratio of Δ 2 -isomer to Δ 2 -isomer. Purification of the product by HPLC was repeated three times (Lichrosorb RP-18, 8 x 300 mm, eluted with 5% aqueous CH 2 OH or 0.01 mol.

25 ammoniumfosfaattipuskurilla (pH 7,2), jossa oli 5 % CH^OHjta), jolloin saatiin 35 mg (1,5 %) otsikon tuotetta värittömänä jauheena. Arvioitu puhtaus (HPLC:n avulla) 90 %. Sp. 150°C (haj.).With ammonium phosphate buffer (pH 7.2) containing 5% CH 2 OH to give 35 mg (1.5%) of the title product as a colorless powder. Estimated purity (by HPLC) 90%. Sp. 150 ° C (dec.).

IR: OKB5 cm"1 1770, 1660, 1620. maks 30 UV: fosfaattipuskuri, pH 7 235 (16200), 258 (15400).IR: OKB 5 cm -1 1770, 1660, 1620. max. 30 UV: phosphate buffer, pH 7 235 (16200), 258 (15400).

NMR: JJD2° ppm 2,31 (4H, m), 3,08 (3H, s), 3,63 (4H, m), 4,09 (3H, s), 5,43 (1H, d, J = 4,8 Hz), 5,93 (1H, d), 7,08 (1H, s) .NMR: J 2 D 2 ppm 2.31 (4H, m), 3.08 (3H, s), 3.63 (4H, m), 4.09 (3H, s), 5.43 (1H, d, J = 4.8 Hz), 5.93 (1H, d), 7.08 (1H, s).

35 7497335 74973

Esimerkki 2 Ί-ζ\Ζ)-2-metoksi-imino-2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-asetamidq/-3-^'(l-metyyli-l-pyrrolidinium)metyy-li7~3-kefeemi-4-karboksylaatti (Ia) 5 Sekoitettuun liuokseen, jossa oli 20,4 g (21,9 mmoo- lia) yhdistettä Vila' 150 ml:ssa kuivaa metyleeniklori-dia, lisättiin yhtenä eränä huoneen lämpötilassa 2,42 g (28,5 mmoolia) 1-metyylipyrrolidiinia. Seosta sekoitettiin 5 minuuttia ja kaadettiin 1000 ml:aan eetteriä sekoit-10 tamalla voimakkaasti sakan muodostamiseksi, joka suoda tettiin erilleen, pestiin eetterillä (5 x 30 ml) ja kuivattiin vakuumissa, jolloin saatiin 19,3 g kiinteätä tuotetta vaaleankeltaisena jauheena.Example 2 N - ((R) -2-Methoxyimino-2- (2-aminothiazol-4-yl) -acetamide] -3 - [(1-methyl-1-pyrrolidinium) methyl] -3-cephem -4-Carboxylate (Ia) To a stirred solution of 20.4 g (21.9 mmol) of Vila in 150 mL of dry methylene chloride was added 2.42 g (28.5 g) at room temperature in one portion. mmol) of 1-methylpyrrolidine. The mixture was stirred for 5 minutes and poured into 1000 ml of ether with vigorous stirring to form a precipitate which was filtered off, washed with ether (5 x 30 ml) and dried in vacuo to give 19.3 g of solid product as a pale yellow powder.

IR: ^ maks Cm_1 3400' 1780 <s)' 1740' 1675, 1530.IR: max Cm_1 3400 '1780 <s)' 1740 '1675, 1530.

15 TLC: liuotin: etanoli-CHCl^ (1:3), = 0,30 (Vila1:nTLC: solvent: ethanol-CHCl 3 (1: 3), = 0.30 (Vila1

Rf = 0,95) .Rf = 0.95).

Kiinteä aine liuotettiin 185 ml:aan trifluori-etikkahappo-vesi-seosta (99:1), sekoitettiin tunnin ajan huoneen lämpötilassa ja konsentroitiin noin 30 ml:ksi 20 10°C:n alapuolella olevassa lämpötilassa. Konsentraatti kaadettiin voimakkaasti sekoittaen 1000 ml:aan eetteriä sakan muodostamiseksi, joka suodatettiin erilleen, pestiin eetterillä (5 x 40 ml) ja kuivattiin vakuumissa, jolloin saatiin 10,6 g vaaleankeltaista jauhetta. Jauhe 25 liuotettiin 20 ml:aan metanolia ja liuos suodatettiin.The solid was dissolved in 185 mL of trifluoroacetic acid-water (99: 1), stirred for 1 h at room temperature, and concentrated to about 30 mL at a temperature below 10 ° C. The concentrate was poured with vigorous stirring into 1000 mL of ether to form a precipitate which was filtered off, washed with ether (5 x 40 mL) and dried in vacuo to give 10.6 g of a pale yellow powder. Powder 25 was dissolved in 20 ml of methanol and the solution was filtered.

Suodokseen lisättiin 45 ml 0,8-mol. SEH:n etyyliasetaat-tiliuosta. Muodostunut suspensio kaadettiin 400 ml:aan etyyliasetaattia ja suodatettiin, jolloin saatiin 8,08 g kiinteätä ainetta, joka oli otsikon yhdisteen ja vas-2 3 2 30 taavan Δ -isomeerin seosta (Δ /Δ = 1:8) kuten HPLC-analyysi osoitti (Lichrosorb RP-18, 10-15 % metanolia 0,01-mol. fosfaattipuskurissa, pH 7). Toisessa ajossa 28,9 grammasta (31,0 mmoolia) yhdistettä Vila1 3 2 saatiin 16,0 g raakatuotetta (Δ /Δ = 1:8). Eristä-35 mällä haluttu ^^-isomeeri yhdistetystä raakatuotteesta (24,08 g) käyttämällä preparatiivista HPLC:tä _ ._____ - ___ 74973 (System 500, Waters Associates, PrepPAK 500/C-^g, 5-10 % CHgOH) saatiin 769 mg yhdistettä la.To the filtrate was added 45 ml of 0.8 mol. SEH ethyl acetate solution. The resulting suspension was poured into 400 ml of ethyl acetate and filtered to give 8.08 g of a solid which was a mixture of the title compound and the corresponding Δ-isomer (Δ / Δ = 1: 8) as indicated by HPLC analysis. (Lichrosorb RP-18, 10-15% methanol in 0.01 M phosphate buffer, pH 7). In a second run, 16.9 g of crude product (Δ / Δ = 1: 8) was obtained from 28.9 grams (31.0 mmol) of Vila1 3 2. Isolation of the desired β-isomer from the combined crude product (24.08 g) using preparative HPLC (System 500, Waters Associates, PrepPAK 500 / C-g g, 5-10% CH 2 OH) gave 769 mg of compound la.

Esimerkki 3 7-^lZ)-2-metoksi-imino-2-(2-(2-aminotiatsol-4-5 yyli)ase t amidol-3-/”(1-me tyyli-1-pyrrolidinium) - metyyli7-3-kefeemi-4-karboksylaatti (la) Suoritettiin sarja kokeita liuottimen, liuottimen määrän ja reaktioajan vaikutuksen määrittämiseksi yhdis-teen Ia saantoon ja reaktiotuotteen Δ /£\ -suhteeseen.Example 3 7- (1Z) -2-Methoxyimino-2- (2- (2-aminothiazol-4-5-yl) acetamide-3 - [(1-methyl-1-pyrrolidinium) methyl] 3-Cephem-4-carboxylate (Ia) A series of experiments were performed to determine the effect of solvent, amount of solvent and reaction time on the yield of compound Ia and the Δ / £ ratio of the reaction product.

10 Yleismenetelmä oli seuraava:10 The general method was as follows:

Suspensioon, jossa oli 3-jodimetyyli-johdannaista Vila' (45 mg, 0,048 mmoolia) mainitun liuottimen mainitussa määrässä, lisättiin liuos, jossa oli N-metyyli-pyrrolidiinia (0,01 ml, 0,097 mmoolia) eetterissä (0,1 ml) 15 ja seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa mainitun ajan.To a suspension of the 3-iodomethyl derivative VIIa '(45 mg, 0.048 mmol) in said amount of said solvent was added a solution of N-methylpyrrolidine (0.01 mL, 0.097 mmol) in ether (0.1 mL). and the mixture was stirred at room temperature for said time.

Reaktioseos laimennettiin eetterillä (5 ml) ja muodostunut sakka koottiin talteen suodattamalla ja sekoitettiin 90 %:isen tetrafluorietikkahapon kanssa. Seosta sekoitettiin tunnin ajan ja haihdutettiin kuiviin va-20 kuumissa 20°C:n alapuolella olevassa lämpötilassa, joi- loin saatiin tuotetta. Tuotteen Δ /Δ -suhde määritettiin HPLC:n avulla (Lichrosorb RP-18; liikkuva faasi, 0,01-mol. ammoniumfosfaatti-puskuri (pH 7,2), jossa oli 15 % CH.,0H:a; retentioaika, 6,60 minuuttia, 2 J 3 2 25 Δ 5,56 minuuttia). Tuotteen saanto ja Δ /ΔΓ-isomeerien suhde kunkin kokeen osalta on ilmoitettu alla.The reaction mixture was diluted with ether (5 mL) and the resulting precipitate was collected by filtration and stirred with 90% tetrafluoroacetic acid. The mixture was stirred for 1 hour and evaporated to dryness at a temperature below 20 ° C to give the product. The Δ / Δ ratio of the product was determined by HPLC (Lichrosorb RP-18; mobile phase, 0.01 M ammonium phosphate buffer (pH 7.2) with 15% CH 2 O; retention time, 6 , 60 minutes, 2 J 3 2 25 Δ 5.56 minutes). Product yield and Δ / ΔΓ isomer ratio for each experiment are reported below.

74973 2974973 29

Vila':n (g) suhde Reaktio-Ratio of Vila '(g) to Reaction

Koe no. Liuotin liuottineen aika Saanto Suhde _(ml)_(min)_(%)_3/ 2 1 CH2C12 1:20 15 73 1/8 5 2 CH-Cl.,-eetteri ^ Z (1/10) 1:100 15 25 4/1 3 Etyyliasetaatti- 1:100 15 27 4/1 eetteri (1/10) 4 Etyyliasetaatti- eetteri (1/10) 1:100 60 64 2/1 10 5 eetteri 1:100 15 31 6/1 6 eetteri 1:100 60 62 3/1 7 eetteri 1:60 15 55 3,5/1 8 eetteri 1:60 60 82 1/1Koe no. Solvent to solvent time Yield Ratio _ (ml) _ (min) _ (%) _ 3/2 1 CH 2 Cl 2 1:20 15 73 1/8 5 2 CH-Cl., - ether ^ Z (1/10) 1: 100 15 25 4/1 3 Ethyl acetate 1: 100 15 27 4/1 ether (1/10) 4 Ethyl acetate ether (1/10) 1: 100 60 64 2/1 10 5 ether 1: 100 15 31 6/1 6 ether 1: 100 60 62 3/1 7 ether 1:60 15 55 3.5 / 1 8 ether 1:60 60 82 1/1

Esimerkki 4 15 7-^(Z) -2-etoksi-imino-2- (2-aminotiatsol-4-yyli)- asetamidq7**3-^’(l-metyyli-l-pyrrolidinium)me-tyyliJ-3-kefeemi-4-karboksylaatti (Ib) A. Bentshydryyli-3-kloorimetyyli-7-/’(Z) -2-etoksi-imino-2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)-20 asetamido7-3-kefeemi-4-karboksylaatti (VIb)Example 4 15 - [(Z) -2-Ethoxyimino-2- (2-aminothiazol-4-yl) -acetamide] -3- [1- (1-methyl-1-pyrrolidinium) methyl] -3- Cephem-4-carboxylate (Ib) A. Benzhydryl-3-chloromethyl-7 - [(Z) -2-ethoxyimino-2- (2-tritylaminothiazol-4-yl) -20-acetamido] -3-cephem-4 carboxylate (VIb)

Liuokseen, jossa oli (2)-2-etoksi-imino-2-(2-tri-tyyliaminotiatsol-4-yyli)-etikkahappoa (IVb) (1,095 g, 2,4 mmoolia) dikloorimetaanissa (20 ml), lisättiin fos-foripentakloridia (500 mg). Kun oli sekoitettu tunnin 25 ajan huoneen lämpötilassa, seos lisättiin yhtenä eränä jäillä jäähdytettyyn liuokseen, jossa oli yhdistettä V (1,083 g, 2,4 mmoolia) ja BSA:ta (1 ml) dikloorimetaanissa (20 ml). 0,5 tunnin sekoittamisen jälkeen reaktio-seos kaadettiin 10 %:iseen NaHC0^:n vesiliuokseen 30 (200 ml) ja uutettiin CHCl3:n kanssa (100 ml). Uute pes tiin vedellä, kuivattiin MgS0^:lla, ja haihdutettiin kuiviin vakuumissa.To a solution of (2) -2-ethoxyimino-2- (2-tritylamino-thiazol-4-yl) -acetic acid (IVb) (1.095 g, 2.4 mmol) in dichloromethane (20 mL) was added phosphorus. foripentachloride (500 mg). After stirring for 1 hour at room temperature, the mixture was added in one portion to an ice-cooled solution of Compound V (1.083 g, 2.4 mmol) and BSA (1 mL) in dichloromethane (20 mL). After stirring for 0.5 h, the reaction mixture was poured into 10% aqueous NaHCO 3 (200 mL) and extracted with CHCl 3 (100 mL). The extract was washed with water, dried over MgSO 4, and evaporated to dryness in vacuo.

Jäännös kromatografioitiin silikageeli-kolonnissa. Eluoitaessa CHCl3:lla saatiin yhdistettä VIb amorfise-35 na jauheena, 1,76 g (86 %).The residue was chromatographed on a silica gel column. Elution with CHCl 3 gave VIb as an amorphous powder, 1.76 g (86%).

74973 30 NMR:SCDC13 ppm 1,40 (3H, t, CH2CH3), 3,53 (2H, ABq, 2-CH2), 4,37 (2H, s, CH2C1), 4,60 (2H, -CH2CH3), 4,90 (1H, d, 6-H), 5,89 (1H, d, 7-H), 6,88 (1H, s, tiatsoli-H), 5 6,91 (1H, s, bentshydryyli-CH).74973 NMR: SCDCl 3 ppm 1.40 (3H, t, CH 2 CH 3), 3.53 (2H, ABq, 2-CH 2), 4.37 (2H, s, CH 2 Cl 2), 4.60 (2H, -CH 2 CH 3) , 4.90 (1H, d, 6-H), 5.89 (1H, d, 7-H), 6.88 (1H, s, thiazole-H), δ 6.91 (1H, s, benzhydryl) CH).

B. Difenyylimetyyli-7-^(Z)-2-etoksi-imino-2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)-asetamido7_3-jodime.tyyli-3-kefeemi-4-karboksylaat.ti (VIlb)B. Diphenylmethyl 7 - [(Z) -2-ethoxyimino-2- (2-tritylaminothiazol-4-yl) acetamido] -3-iodomethyl-3-cephem-4-carboxylate (VIb)

Seosta, jossa oli yhdistettä VIb (1,07 g, 1,25 10 mmoolia) ja NaJ:a (562 mg, 2,75 mmoolia) asetonis sa (20 ml), sekoitettiin tunnin ajan. Seos suodatettiin ja suodos kaadettiin veteen ja uutettiin etyyliasetaatilla. Orgaaninen kerros pestiin peräkkäin 5 Soisella Na2S203:n vesiliuoksella, vedellä ja kyllästetyllä 15 NaCl:n vesiliuoksella, kuivattiin MgS0^:lla ja haihdutet tiin kuiviin, jolloin saatiin 1,04 g (89 %) yhdistettä Vllb.A mixture of VIb (1.07 g, 1.25 mmol) and Na 2 (562 mg, 2.75 mmol) in acetone (20 mL) was stirred for 1 h. The mixture was filtered and the filtrate was poured into water and extracted with ethyl acetate. The organic layer was washed successively with 5 M aqueous Na 2 S 2 O 3, water and saturated aqueous NaCl, dried over MgSO 4 and evaporated to dryness to give 1.04 g (89%) of VIIIb.

NMR:SCDC13 ppm 3 f 55 (2H, q, 2-CH2), 4,27 (2H, s, CH-J), 5,02 (1H, d, 6-H), 5,87 (1H, d, 7-H), 20 6,68 (1H, s, tiatsoli-rengas H), 6,93 (1H, s, bentshydryyli-CH).NMR: SCDCl 3 ppm δ 55 (2H, q, 2-CH 2), 4.27 (2H, s, CH-J), 5.02 (1H, d, 6-H), 5.87 (1H, d , 7-H), 6.68 (1H, s, thiazole ring H), 6.93 (1H, s, benzhydryl-CH).

C. 7-^"(Z) -2-etoksi-imino-2- (2-aminotiatsol-4-yyli) -ase tamido/-3-/^( 1-me tyyli-1-pyrrol idinium) metyylit-3-ke f eemi-4-karboksy laa tti (Ib) 25 Seosta, jossa oli yhdistettä Vllb (333 mg, 0,35 mmoolia) ja N-metyylipyrrolidiinia (60 mg, 0,7 mmoolia) CH2Cl2:ssa (5 ml), sekoitettiin 0,5 tuntia huoneen lämpötilassa ja sitten haihdutettiin kuiviin vakuumissa. Jäännös pestiin eetterillä ja liuotettiin 90 %:iseen 30 tetrafluorietikkahapon vesiliuokseen. Seoksen oltua paikoillaan 0,5 tuntia huoneen lämpötilassa, se konsentroitiin vakuumissa. Konsentraattiin lisättiin eetteriä kvaternoituneen tuotteen eristämiseksi, joka koottiin talteen suodattamalla ja liuotettiin pieneen määrään me-35 tanolia. Liuos kromatografioitiin HP-2-kolonnissa (40 ml).C. 7 - ["(Z) -2-Ethoxyimino-2- (2-aminothiazol-4-yl) -acetamido] -3 - [(1-methyl-1-pyrrolidinium) methyl] -3 -chememi-4-carboxylate (Ib) A mixture of VIIb (333 mg, 0.35 mmol) and N-methylpyrrolidine (60 mg, 0.7 mmol) in CH 2 Cl 2 (5 mL), The mixture was washed with ether and dissolved in 90% aqueous tetrafluoroacetic acid, and after standing for 0.5 hours at room temperature, the mixture was concentrated in vacuo. by filtration and dissolved in a small amount of methanol 35. The solution was chromatographed on an HP-2 column (40 ml).

Eluoimalla 30 %:isella CH30H:n vesiliuoksella ja kylmä- 11 2 74973 31 kuivaamalla sen jälkeen, saatiin 0,062 g A -isomee- 3 2 3 rin ja A -isomeerin seosta (A :A = 5:1). Seos puhdistettiin HPLC:n avulla (Lichrosorob RP-18, 8 x 300 mm, 15 % metanolia) ja haluttu A -isomeeri (Ib) eristettiin 5 vaaleankeltaisena jauheena, 4,9 mg (2,7 %).Elution with 30% aqueous CH 3 OH and subsequent freeze-drying gave 0.062 g of a mixture of the A isomer and the A isomer (A: A = 5: 1). The mixture was purified by HPLC (Lichrosorob RP-18, 8 x 300 mm, 15% methanol) and the desired A-isomer (Ib) was isolated as a pale yellow powder, 4.9 mg (2.7%).

UV: ^aattipUSkUri' PH 7 nm (£) 235 (15000), 258 (14000).UV: buffer buffer pH 7 nm (ε) 235 (15,000), 258 (14,000).

NMR: ^°2° ppm 1,43 (3H, 5), 2,33 (4H, m), 3,10 (3H, s), 3,64 (4H, m), 4,36 (2H, q), 5,44 (1H, d), 5,95 (1H, d), 7,08 (1H, s).NMR:? 2 ° ppm 1.43 (3H, 5), 2.33 (4H, m), 3.10 (3H, s), 3.64 (4H, m), 4.36 (2H, q ), 5.44 (1H, d), 5.95 (1H, d), 7.08 (1H, s).

10 Esimerkki 5 l-ζ(Z)-2-(2-propoksi-imino)-2-(2-aminotiatsol-4-yyli)asetamidq7-3-^( 1-metyyli-1-pyrrolidinium)-metyyli7-3-kefeemi-4-karboksylaatti (Ie) A. Difenyylimetyyli-3-kloorimetyyli-7-^’(Z) -2-(2-15 propoksi-imino)-2-(2-trityyliaminotiatsol-4- yyli)asetamido7-3-kefeemi-4-karboksylaatti (Vie) Seosta, jossa oli (Z)-2-(2-propoksi-imino)-2-(2-trityyliamino-tiatsol-4-yyli)etikkahappoa (IVc) (707 mg, 1,5 mmoolia) ja fosforipentakloridia (344 mg, 1,65 mmoo-20 lia) dikloorimetaanissa (14 ml), sekoitettiin huoneen lämpötilassa tunnin ajan ja kaadettiin sitten liuokseen, jossa oli yhdistettä V (677 mg, 1,5 mmoolia) ja BSA:ta (1,1 ml, 4,5 mmoolia) dikloorimetaanissa (15 ml). Reak-tioseosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 30 minuut-25 tia, laimennettiin etyyliasetaatilla (200 ml), ja vedel lä (3 x 100 ml), kuivattiin natriumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 1,4 g (100 %) yhdistettä Vie.Example 5 1 - [(Z) -2- (2-propoxyimino) -2- (2-aminothiazol-4-yl) acetamide] -3- [1- (1-methyl-1-pyrrolidinium) methyl] -3- cephem-4-carboxylate (Ie) A. Diphenylmethyl-3-chloromethyl-7 '- (Z) -2- (2-15 propoxyimino) -2- (2-tritylaminothiazol-4-yl) acetamido-3- cephem-4-carboxylate (Ex) A mixture of (Z) -2- (2-propoxyimino) -2- (2-tritylamino-thiazol-4-yl) acetic acid (IVc) (707 mg, 1.5 mmol) and phosphorus pentachloride (344 mg, 1.65 mmol-20) in dichloromethane (14 mL) were stirred at room temperature for 1 h and then poured into a solution of Compound V (677 mg, 1.5 mmol) and BSA ( 1.1 mL, 4.5 mmol) in dichloromethane (15 mL). The reaction mixture was stirred at room temperature for 30 minutes, diluted with ethyl acetate (200 ml), and water (3 x 100 ml), dried over sodium sulfate and evaporated to dryness to give 1.4 g (100%) of compound Vie.

IR:ΐ maks cm_1 3360' 3020' 3060, 2960, 1785, 1725, 1680, 30 1520, 1500, 1450, 1375, 1300, 1250, 1160, 1090, 1060, 1010, 990, 840, 740, 700.IR: λ max cm-1 3360 '3020' 3060, 2960, 1785, 1725, 1680, 30 1520, 1500, 1450, 1375, 1300, 1250, 1160, 1090, 1060, 1010, 990, 840, 740, 700.

UV:^maks nm(fc} 240 i24600)' 260 (20700).UV:? Max nm (fc} 240 i24600) '260 (20700).

NMR: £CDC13 ppm 1,35 (6H, d, J = 6 Hz), 3,50 (2H, s), 4,35 (2H, s), 4,58 (1H, m, J = 6 Hz), 35 5,00 (1H, d, J = 4,5 Hz), 5,91 (1H, d-d, ______ -· ΊΓ77 ________ ______ 32 74973 J = 4,5 £ 9 Hz; d Ö20:n yhteydessä, J = 4,5 Hz), 6,68 (1H, s), 6,88 (1H, s), 7,25 (25H, s).NMR: δ CDCl 3 ppm 1.35 (6H, d, J = 6 Hz), 3.50 (2H, s), 4.35 (2H, s), 4.58 (1H, m, J = 6 Hz) .35 5.00 (1H, d, J = 4.5 Hz), 5.91 (1H, dd, ______ - · ΊΓ77 ________ ______ 32 74973 J = 4.5 £ 9 Hz; d for Ö20, J = 4.5 Hz), 6.68 (1H, s), 6.88 (1H, s), 7.25 (25H, s).

B. Difenyylimetyyli-3-jodimetyyli-7-£*(Z) -2- (2- 5 propoksi-imino)-2-(2-trityyliaminotiatsol-4- yyli)asetamido7~3-kefeemi-4-karboksylaatti (VIIc)B. Diphenylmethyl 3-iodomethyl-7 - [(Z) -2- (2-5 propoxyimino) -2- (2-tritylaminothiazol-4-yl) acetamido] -3-cephem-4-carboxylate (VIIc)

Seosta, jossa oli yhdistettä Vie (500 mg, 0,55 mmoolia) ja natriumjodidia (248 mg, 1,66 mmoolia) asetonissa (10 ml), sekoitettiin huoneen lämpötilassa 50 mi-10 nuuttia. Kuiviin haihduttamisen jälkeen jäännös liuotet tiin etyyliasetaattiin (15 ml), pestiin peräkkäin 10 %: isella natriumtiosulfaatin vesiliuoksella (10 ml), vedellä (10 ml) ja NaCl:n vesiliuoksella (10 ml), kuivattiin natriumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin, jol-15 loin saatiin 494 mg (90 %) otsikon yhdistettä (VIIc).A mixture of Vie (500 mg, 0.55 mmol) and sodium iodide (248 mg, 1.66 mmol) in acetone (10 mL) was stirred at room temperature for 50 min to 10 minutes. After evaporation to dryness, the residue was dissolved in ethyl acetate (15 ml), washed successively with 10% aqueous sodium thiosulphate solution (10 ml), water (10 ml) and aqueous NaCl solution (10 ml), dried over sodium sulphate and evaporated to dryness. 494 mg (90%) of the title compound (VIIc) were obtained.

IR:^maks Cm_1 3360' 3040, 3020, 2960, 1785, 1720, 1680, 1600, 1520, 1500, 1450, 1370, 1300, 1230, 1150, 1115, 1080, 990, 900, 840, 750, 700.IR: max Cm_1 3360 '3040, 3020, 2960, 1785, 1720, 1680, 1600, 1520, 1500, 1450, 1370, 1300, 1230, 1150, 1115, 1080, 990, 900, 840, 750, 700.

20 W: ^maks nm(£) 240 (2490°)' 260 (19400).20 W: max nm (ε) 240 (2490 °) '260 (19400).

NMR: ^υ^-*·3 ppm 1,30 (6H, d, J=6Hz) , 3,37 £ 3,70 (1H, kukin, d, J=16Hz), 4,22 (2H, s), 4,55 (1H, m, J=6Hz), 4,95 (1H, d, J=4,5Hz), 5,83 (1H, d-d, J=4,5 £ 9Hz; d D20:n yhteydessä), 25 6,66 (1H, s), 6,87 (1H, s), 7,25 (25H, s).NMR: ν max ν max δ ppm 1.30 (6H, d, J = 6Hz), 3.37 δ 3.70 (1H, each, d, J = 16Hz), 4.22 (2H, s) , 4.55 (1H, m, J = 6Hz), 4.95 (1H, d, J = 4.5Hz), 5.83 (1H, dd, J = 4.5 £ 9Hz; d for D 2 O) ), 6.66 (1H, s), 6.87 (1H, s), 7.25 (25H, s).

C. 7-£(Z)-2-(2-propoksi-imino)-2-(2-aminotiatsol- 4-yyli)asetamidq/-3-/Il-metyyli-1-pyrrolidinium)-metyyli7-3-kefeemi-4-karboksylaatti (Ie)C. 7- [(Z) -2- (2-Propoxyimino) -2- (2-aminothiazol-4-yl) acetamide] -3- (1H-methyl-1-pyrrolidinium) methyl] -3-cephem -4-carboxylate (Ie)

Seosta, jossa oli yhdistettä VIIc (545 mg, 0,55 30 mmoolia) ja 1-metyylipyrrolidiinia (70 mg, 0,82 mmoolia) dikloorimetaanissa (10 ml), sekoitettiin huoneen lämpötilassa 30 minuuttia ja laimennettiin eetterillä (100 ml). Muodostunut sakka koottiin talteen suodattamalla. Sakan liuosta 90 %:isessa tetrafluorietikkahapossa (4,5 ml) 35 sekoitettiin huoneen lämpötilassa 30 minuuttia ja haih dutettiin kuiviin vakuumissa. Jäännöstä trituroitiin 33 7 4 9 7 3 eetterin kanssa, jolloin saatiin 317 mg raakaa tuotetta, joka kromatografioitiin HP-20-kolonnissa (50 ml), eluoimalla vedellä (500 ml) ja 30 %:isella CH30H:lla (500 ml). 30 %:n CH^OHjn eluaatti konsentroitiin ja kyl-5 mäkuivattiin, jolloin saatiin 109 mg Δ2- ja A3-isomee- rien seosta (££/Δ3 = 6/1) , josta 100 mg puhdistettiin HPLC:n avulla (Lichrosorb RP-18, 15 % Me0H:a), jolloin saatiin 5 mg (3 %) haluttua otsikon yhdistettä Ie.A mixture of VIIc (545 mg, 0.55, 30 mmol) and 1-methylpyrrolidine (70 mg, 0.82 mmol) in dichloromethane (10 mL) was stirred at room temperature for 30 minutes and diluted with ether (100 mL). The precipitate formed was collected by filtration. A solution of the precipitate in 90% tetrafluoroacetic acid (4.5 ml) was stirred at room temperature for 30 minutes and evaporated to dryness in vacuo. The residue was triturated with 33 7 4 9 7 3 ether to give 317 mg of crude product which was chromatographed on an HP-20 column (50 mL) eluting with water (500 mL) and 30% CH 3 OH (500 mL). The eluate of 30% CH 2 OH was concentrated and lyophilized to give 109 mg of a mixture of Δ2 and A3 isomers (££ / Δ3 = 6/1), of which 100 mg was purified by HPLC (Lichrosorb RP -18, 15% MeOH) to give 5 mg (3%) of the desired title compound Ie.

UV: ^aks_PUSkUri 236 <15100>' 252 (14600).UV: ^ aks_PUSkUri 236 <15100> '252 (14600).

NMR:^D2° ppm 1,42 (6H, d, J=6Hz), 2,33 (4H, s), 3,10 (3H, s), 3,65 (4H, s), 3,83 4,23 (1H ku kin, d, J=17Hz), 5,45 (1H, d, J=4,5Hz), 5,95 (1H, d, J=4,5Hz), 7,05 (1H, s).NMR: δ D 2 ppm 1.42 (6H, d, J = 6Hz), 2.33 (4H, s), 3.10 (3H, s), 3.65 (4H, s), 3.83 δ , 23 (1H, quin, d, J = 17Hz), 5.45 (1H, d, J = 4.5Hz), 5.95 (1H, d, J = 4.5Hz), 7.05 (1H, p).

Esimerkki 6 15 l-f(Z)-2-allyylioksi-imino-2-(2-aminotiatsol-4- yyli) asetamidq7-3-/*(l-metyyli-l-pyrrolidinium) -metyyli7-3-kefeemi-4-karboksylaatti (Id) A. Bentshydryyli-7-^"'(Z) -2-allyylioksi-imino-2- (2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)asetamidq7-3-20 kloorimetyyli-3-kefeemi-4-karboksylaatti (VId)Example 6 1f (Z) -2-Allyloxyimino-2- (2-aminothiazol-4-yl) acetamide-3- [* (1-methyl-1-pyrrolidinium) methyl] -3-cephem-4-carboxylate (Id) A. Benzhydryl 7 - ["(Z) -2-allyloxyimino-2- (2-tritylaminothiazol-4-yl) acetamide] -3-20 chloromethyl-3-cephem-4-carboxylate (VId)

Suspensioon, jossa oli yhdistettä V (1,35 g, 3 mmoolia) metyleenikloridissa (20 ml), lisättiin BSA:ta (1,1 ml, 4,5 mmoolia), ja seosta sekoitettiin 30 minuuttia huoneen lämpötilassa kirkkaan liuoksen saamiseksi.To a suspension of Compound V (1.35 g, 3 mmol) in methylene chloride (20 mL) was added BSA (1.1 mL, 4.5 mmol), and the mixture was stirred at room temperature for 30 minutes to give a clear solution.

25 Seosta, jossa oli (Z)-2-allyylioksi-imino-2-(2-trityyli- aminotiatsol-4-yyli)-etikkahappoa (IVd) (1,40 g, 3,0 mmoolia) ja fosforipentakloridia (690 mg, 3,3 mmoolia) metyleenikloridissa (20 ml), sekoitettiin 15 minuuttia huoneen lämpötilassa ja kaadettiin sitten yhtenä eränä 30 trimetyylisilyloidun yhdisteen V liuokseen. Seosta se koitettiin 20 minuuttia huoneen lämpötilassa ja laimennettiin etyyliasetaatilla (200 ml), pestiin natriumvety-karbonaatin vesiliuoksella ja vedellä, kuivattiin ja haihdutettiin kuiviin vakuumissa. öljymäinen jäännös puh-35 distettiin kromatografioimalla silikageeli-kolonnissa _ - TT..A mixture of (Z) -2-allyloxyimino-2- (2-tritylaminothiazol-4-yl) -acetic acid (IVd) (1.40 g, 3.0 mmol) and phosphorus pentachloride (690 mg, 3.3 mmol) in methylene chloride (20 ml), stirred for 15 minutes at room temperature and then poured in one portion into a solution of trimethylsilylated compound V. The mixture was stirred for 20 minutes at room temperature and diluted with ethyl acetate (200 ml), washed with aqueous sodium hydrogen carbonate solution and water, dried and evaporated to dryness in vacuo. the oily residue was purified by chromatography on a silica gel column _-TT.

34 74973 (Wako-gel, C-200, 30 g)- Kolonni eluoitiin kloroformilla ja haluttua tuotetta sisältävät fraktiot yhdistettiin. Haihduttamalla kuiviin vakuumissa saatiin otsikon yhdistettä (Vld) amorfisena jauheena, saanto 2,32 g 5 (89 %). Sp. 100-115°C (haj.).34 74973 (Wako-gel, C-200, 30 g) - The column was eluted with chloroform and the fractions containing the desired product were combined. Evaporation to dryness in vacuo gave the title compound (Vld) as an amorphous powder, yield 2.32 g δ (89%). Sp. 100-115 ° C (dec.).

IR: ^maks Cm_1 3990' 1790' 1730' 1680' 1530' 1380' 1250, 1160, 1020.IR: max Cm_1 3990 '1790' 1730 '1680' 1530 '1380' 1250, 1160, 1020.

NMR: £CDCl3 ppm 3,50 (2H, 2-H), 4,32 (2H, s, 3-CH2), 4,6-6,1 (7H, m, CH2CH=CH2 ja 6,7-H), 10 6,70 (1H, s, tiatsoli-H), 6,90 (1H, s, Ph2CH), 7,1-7,6 (30H, m, fenyyli-protonit).NMR: δ CDCl 3 ppm 3.50 (2H, 2-H), 4.32 (2H, s, 3-CH 2), 4.6-6.1 (7H, m, CH 2 CH = CH 2 and 6,7-H ), 6.70 (1H, s, thiazole-H), 6.90 (1H, s, Ph 2 CH), 7.1-7.6 (30H, m, phenyl protons).

Analyysi, laskettu yhdisteelle C^H^qN^O^S^I . 1/3 CHCl-j! C, 64,05; H, 4,45; N, 7,73; S, 7,08; Cl, 7,82; 15 saatu: C, 64,13; 63,99; H, 4,61; 4,64; N, 7,50; 7,30; S, 6,85; 6,85; Cl, 7,55; 7,46.Analysis calculated for C 18 H 19 N 2 O 2 S 2 I 2. 1/3 CHCl-j! C, 64.05; H, 4.45; N, 7.73; S, 7.08; Cl, 7.82; Found: C, 64.13; 63.99; H, 4.61; 4.64; N, 7.50; 7.30; S, 6.85; 6.85; Cl, 7.55; 7.46.

B. Bentshydryyli-7-^“(Z) -2-allyylioksi-imino-2-(tri-tyyliaminotiatsol)-4-yyli)asetamido/-3-jodinne tyyli-3-kefeemi-4-karboksylaatti (VIId) 20 Seosta, jossa oli yhdistettä Vld (2,30 g, 2,65 mmoolia) ja natriumjodidia (2 g, 13,3 mmoolia) asetonissa (15 ml), sekoitettiin tunnin ajan huoneen lämpötilassa ja sitten haihdutettiin kuiviin vakuumissa. Liuos, jossa öljymäinen jäännös oli etyyliasetaatissa (200 ml), 25 pestiin 10 %:isella natriumtiosulfaatilla ja vedellä, haihdutettiin kuiviin vakuumissa, jolloin saatiin yhdistettä Vlld amorfisena jauheena, jota käytettiin enempää puhdistamatta seuraavassa vaiheessa. Saanto 2,52 g (99 %).B. Benzhydryl 7 - [((Z) -2-allyloxyimino-2- (triethylaminothiazol) -4-yl) acetamido] -3-iodinyl 3-cephem-4-carboxylate (VIId) 20 Mixture , Compound Vld (2.30 g, 2.65 mmol) and sodium iodide (2 g, 13.3 mmol) in acetone (15 ml) were stirred for 1 hour at room temperature and then evaporated to dryness in vacuo. A solution of the oily residue in ethyl acetate (200 ml) was washed with 10% sodium thiosulphate and water and evaporated to dryness in vacuo to give VIII as an amorphous powder which was used without further purification in the next step. Yield 2.52 g (99%).

C. 7-^"(Z) -2-allyylioksi-imino-2-(2-aminotiatsol- 30 4-yyli) asetamidq7-3-/‘(l-metyyli-l-pyrrolidinium) - metyy 1:^7-3-kefeemi-4-karboksylaatti (Id)C. 7 - [((Z) -2-Allyloxyimino-2- (2-aminothiazol-4-yl) acetamide] -3 - [(1-methyl-1-pyrrolidinium) methyl] 3-cephem-4-carboxylate (Id)

Seosta, jossa oli yhdistettä Vlld (478 mg, 0,5 mmoolia) ja N-metyylipyrrolidiinia (0,05 ml, 0,5 mmoolia) metyleenikloridissa (5 ml), sekoitettiin 20 minuut-35 tia huoneen lämpötilassa ja laimennettiin eetterillä 35 7 4 9 7 3 (50 ml) kvaternoidun tuotteen saostamiseksi (saanto 500 mg). Seoksen, jossa oli kvaternoitu tuote ja tetrafluo-rietikkahappoa (2 ml), annettiin olla paikoillaan huoneen lämpötilassa 1,5 tuntia ja laimennettiin eetteril-5 lä tuotteen raa'an TFA-suolan saostamiseksi (saanto 265 mg), joka kromatografioitiin HP-20 -kolonnissa (1,8 x 18 cm). Kolonni eluoitiin vedellä ja 30 %:isella meta-nolin vesiliuoksella. Metanoli-eluaatti haihdutettiin kuiviin vakuumissa ja jäännös kylmäkuivattiin, jolloin 10 saatiin amorfista jauhetta (saanto 124 mg), joka sisäl si haluttua tuotetta (17 %) ja vastaavaa Δ^-isomee-ria (83 %). Seos puhdistettiin RPLCrn avulla (Lichrosorb RP-18; 0,01-mol. NH4P04 (pH 7): CH30H = 85:15). Eluaat-ti tehtiin happameksi pH-arvoon 3 laimealla Helillä ja 15 kromatografioitiin HP-20 -kolonnissa (1,8 x 10 cm). Kolon ni eluoitiin vedellä ja sitten 30 %:isella metanolin vesiliuoksella. Metanoli-eluaatti haihdutettiin kuiviin vakuumissa ja jäännös kylmäkuivattiin, jolloin saatiin otsikon yhdistettä (Id) amorfisena jauheena (saanto 13 mg, 20 5,1 %). Sp. 155°C (haj.).A mixture of VIIId (478 mg, 0.5 mmol) and N-methylpyrrolidine (0.05 mL, 0.5 mmol) in methylene chloride (5 mL) was stirred for 20 min-35 h at room temperature and diluted with ether 35 7 4 9 7 3 (50 ml) to precipitate the quaternized product (yield 500 mg). A mixture of the quaternized product and tetrafluoroacetic acid (2 mL) was allowed to stand at room temperature for 1.5 hours and diluted with ether to precipitate the crude TFA salt of the product (yield 265 mg) which was chromatographed on HP-20. on a column (1.8 x 18 cm). The column was eluted with water and 30% aqueous methanol. The methanol eluate was evaporated to dryness in vacuo and the residue was freeze-dried to give an amorphous powder (yield 124 mg) containing the desired product (17%) and the corresponding Δ 2 -isomer (83%). The mixture was purified by RPLC (Lichrosorb RP-18; 0.01 mol NH 4 PO 4 (pH 7): CH 3 OH = 85:15). The eluate was acidified to pH 3 with dilute Helix and chromatographed on an HP-20 column (1.8 x 10 cm). The column was eluted with water and then with 30% aqueous methanol. The methanol eluate was evaporated to dryness in vacuo and the residue was freeze-dried to give the title compound (Id) as an amorphous powder (yield 13 mg, 5.1%). Sp. 155 ° C (dec.).

IR: cm-1 3600-2800, 1770, 1670, 1610, 1530, 1200.IR: cm-1 3600-2800, 1770, 1670, 1610, 1530, 1200.

UV: ^maks -puskurinm(£) 235 (16600), 253 (15600).UV: max buffer (E) 235 (16600), 253 (15600).

NMR: £D2^ ppm 2,1-2,5 (4H, m, pyrrolidiini-H), 3,10 25 (3H, s, Sch3), 3,4-3,8 (4H, m, pyrroli diini-H), 5,95 (1H, d, 4Hz, ”-H), 7,10 (1H, s, tiatsoli-H) .NMR: δ D 2 ppm 2.1-2.5 (4H, m, pyrrolidine-H), 3.10 (3H, s, Sch 3), 3.4-3.8 (4H, m, pyrrolidine- H), 5.95 (1H, d, 4Hz, -H), 7.10 (1H, s, thiazole-H).

Esimerkki 7 7-/2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-(Z)-2-(2-karboksi-30 prop-2-oksi-imino)asetamido7-3-/K 1-metyyli-l- pyrrolidinium)metyyli7-3-kefeemi-5-karboksylaat-ti (le) A. Bentshydryyli-3-kloorimetyyli-7-^‘(Z) -2- (2-t-butoksikarbonyyliprop-2-oksi-imino-2-(2-trityy-35 liaminotiatslo-4-yyli)asetamidq,/-3-kefeemi-4- karboksylaatti (Va) 74973 36Example 7 7- [2- (2-Aminothiazol-4-yl) - (Z) -2- (2-carboxy-30-prop-2-oxyimino) acetamido] -3- [N-methyl-1-pyrrolidinium ) methyl 7-3-cephem-5-carboxylate (1e) A. Benzhydryl-3-chloromethyl-7 '- (Z) -2- (2-t-butoxycarbonylprop-2-oximino-2- (2) -trityl-35-aminothiazlo-4-yl) acetamide, p-3-cephem-4-carboxylate (Va) 74973 36

Menetelmä 1Method 1

Seosta, jossa oli (Z)-2-(2-t-butoksikarbonyyli-prop-2-oksi-imino)-2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)-etikkahappoa (lila1) (1,94 g, 3,6 mmoolia), DDC:tä 5 (742 mg, 3,6 mmoolia) ja N-hydroksibentstriatsolia (486 mg, 3,6 mmoolia) tetrahydrofuraanissa (THF) (45 ml), sekoitettiin huoneen lämpötilassa 45 minuuttia, jonka kuluessa erottui disykloheksyyliureaa. Disykloheksyyli-urea poistettiin suodattamalla ja suodos sekoitettiin 10 yhdisteen V kanssa (1,5 g, 3,6 mmoolia). Seosta sekoi tettiin yön ajan huoneen lämpötilassa ja sitten haihdutettiin kuiviin vakuumissa. Jäljelle jäänyt öljy liuotettiin CHCl-jiiin (20 ml), pestiin kyllästetyllä NaHCO^in vesiliuoksella ja kyllästetyllä NaCl:n vesiliuoksella, 15 kuivattiin MgSO^slla ja haihdutettiin kuiviin. Jäännös (3,9 g) liuotettiin seokseen n-heksaanitCHCl^ (1:2) ja laskettiin silikageeli-kolonnin (40 g) läpi käyttämällä samaa liuotinseosta. Otsikon yhdistettä sisältävät fraktiot haihdutettiin kuiviin vakuumissa, jolloin saa-20 tiin 1,3 g (39 %) yhdistettä Va, joka suli >100°C:ssa (haj .).A mixture of (Z) -2- (2-t-butoxycarbonyl-prop-2-oxyimino) -2- (2-tritylaminothiazol-4-yl) -acetic acid (IIIa) (1.94 g, 3, 6 mmol), DDC 5 (742 mg, 3.6 mmol) and N-hydroxybenztriazole (486 mg, 3.6 mmol) in tetrahydrofuran (THF) (45 mL) were stirred at room temperature for 45 minutes during which time dicyclohexylurea separated. The dicyclohexylurea was removed by filtration and the filtrate was stirred with compound V (1.5 g, 3.6 mmol). The mixture was stirred overnight at room temperature and then evaporated to dryness in vacuo. The residual oil was dissolved in CHCl 3 (20 mL), washed with saturated aqueous NaHCO 3 and saturated aqueous NaCl, dried over MgSO 4 and evaporated to dryness. The residue (3.9 g) was dissolved in a mixture of n-hexanesCHCl 3 (1: 2) and passed through a silica gel column (40 g) using the same solvent mixture. Fractions containing the title compound were evaporated to dryness in vacuo to give 1.3 g (39%) of Va, melting at> 100 ° C (dec).

IR: ^ maks Cm_1 3990' 1790' 1715' 1690.IR:? Max Cm_1 3990 '1790' 1715 '1690.

UV: AEt?H nm 240 (E1* 280), 265 (E,* 190).UV: AEt? H nm 240 (E1 * 280), 265 (E, * 190).

maks 1 cm i cm 25 NMR: ^CDCls ppm 1,45 (9H, s), 1,63 ¢1,66 (6H, kumpikin s), 3,49 (2H, leveä s), 4,34 (2H, s), 4,96 (1H, d, J=4,5Hz), 5,90 (1H, d-d, d-d, J=4,5 $ 7,5), 6,66 (1H, s), 6,86 (1H, s), 7,0-7,5 (25H, m), 8,23 (1H, 30 d, J=7,5Hz).max 1 cm -1 cm 2 NMR: δ CDCl 3 ppm 1.45 (9H, s), 1.63 ¢ 1.66 (6H, each s), 3.49 (2H, broad s), 4.34 (2H, s), 4.96 (1H, d, J = 4.5 Hz), 5.90 (1H, dd, dd, J = 4.5, $ 7.5), 6.66 (1H, s), 6, 86 (1H, s), 7.0-7.5 (25H, m), 8.23 (1H, 30 d, J = 7.5 Hz).

Menetelmä 2Method 2

Liuosta, jossa oli yhdistettä V (1,86 g, 4,49 mmoolia) CH^CNissä (46,6 ml), käsiteltiin BSA:n kanssa (3,33 ml, 13,5 mmoolia) huoneen lämpötilassa 50 minuut-35 tia, jolloin saatiin kirkas liuos. Liuokseen lisättiin 74973 37 happokloridiliuosta, jota oli valmistettu yhdisteestä lila' (2,56 g, 4,49 mmoolia) ja PCl^ssta (1,12 g, 5,38 mmoolia) metyleenikloridissa (26 ml). Seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 30 minuuttia, kaadettiin kyl-5 mään veteen (100 ml) ja uutettiin etyyliasetaatil la (3 x 50 ml). Yhdistetyt uutteet pestiin NaClsn vesi-liuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin kuiviin. Jälel-le jäänyt siirappi (5 g) kromatografioitiin silikagee-li- (100 g) kolonnissa eluoimalla seoksella tolueeni-10 etyyliasetaatti (10:1). Haluttua yhdistettä sisältävät fraktiot yhdistettiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 2,84 g (65 %) yhdistettä Va.A solution of Compound V (1.86 g, 4.49 mmol) in CH 2 Cl 2 (46.6 mL) was treated with BSA (3.33 mL, 13.5 mmol) at room temperature for 50 minutes to 35 minutes. to give a clear solution. To the solution was added a solution of 74973 37 acid chloride prepared from lila '(2.56 g, 4.49 mmol) and PCl 2 (1.12 g, 5.38 mmol) in methylene chloride (26 mL). The mixture was stirred at room temperature for 30 minutes, poured into cold water (100 ml) and extracted with ethyl acetate (3 x 50 ml). The combined extracts were washed with aqueous NaCl, dried and evaporated to dryness. The remaining syrup (5 g) was chromatographed on a silica gel (100 g) column eluting with toluene-10 ethyl acetate (10: 1). Fractions containing the desired compound were combined and evaporated to dryness to give 2.84 g (65%) of Va.

B. Bentshydryyli-7-^(Z)-2-(2-t-butoksikarbonyyli-prop-l-oksi-imino)-2-(2-trityyliaminotiatsol-15 4-yyli)asetamido/-3-jodimetyyli-3-kefeemi-4- karboksylaatti (Via)B. Benzhydryl-7 - [(Z) -2- (2-t-butoxycarbonyl-prop-1-oximino) -2- (2-tritylaminothiazol-15-yl) acetamido] -3-iodomethyl-3- cephem-4-carboxylate (Via)

Seosta,jossa oli yhdistettä Va (500 mg, 0,53 mmoolia) ja NaJ:a (240 mg, 1,6 mmoolia) asetonissa (3 ml), sekoitettiin 2 tuntia huoneen lämpötilassa ja sitten haih-20 dutettiin kuiviin vakuumissa. Jäännökseen lisättiin CH2Cl2:a (20 ml) ja vettä (10 ml). Orgaaninen kerros pestiin 10 %:isella s/v natriumtiosulfaatilla (5 ml) ja NaCl:n vesiliuoksella (5 ml), kuivattiin MgS04:lla ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 540 mg (90 %) 25 yhdistettä Via amorfisena jauheena, joka suli 106°C:ssa (haj .) .A mixture of Va (500 mg, 0.53 mmol) and Na 2 (240 mg, 1.6 mmol) in acetone (3 mL) was stirred for 2 h at room temperature and then evaporated to dryness in vacuo. To the residue were added CH 2 Cl 2 (20 mL) and water (10 mL). The organic layer was washed with 10% w / v sodium thiosulfate (5 mL) and aqueous NaCl (5 mL), dried over MgSO 4 and evaporated to dryness to give 540 mg (90%) of Via as an amorphous powder, melting 106 ° C (dec.).

IR: ^ maks ct»”1 3350' 1790 / 1690 .IR: ^ max ct »” 1 3350 '1790/1690.

™ = “ 240 (Ei%cm 2701 ' 265 (El4om 190' · NMR* CDCI3 ppm 1,44 (9H, s), 1,65 (6H, s), 3,54 (1H, 30 " 4,27 (2H, s), 4,98 (1H, d, J=4,5Hz), 5,85 (1H, d-d, J=4,5 ^ 7,5Hz), 6,70 (1H, s), 6,90 (1H, s), 7,1-7,5 (25H, m).Δ = “240 (EI% cm 2701 '265 (El4om 190' · NMR * CDCl 3 ppm 1.44 (9H, s), 1.65 (6H, s), 3.54 (1H, 30" 4.27 ( 2H, s), 4.98 (1H, d, J = 4.5Hz), 5.85 (1H, dd, J = 4.5 ^ 7.5Hz), 6.70 (1H, s), 6, 90 (1 H, s), 7.1-7.5 (25 H, m).

__ - HZ ....... .... . ____ 38 74973 C. 1-(2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-(Z)-2-(2-karbok-siprop-2-oksi-imino)asetamidq7-3-^(1-metyyli-l-metyyli-l-pyrrolidinium)metyyli7-3-kefeemi-4-karboksylaatti (Ie) 5 Seoksen, jossa oli jodimetyyli-johdannaista__ - HZ ....... ..... ____ 38 74973 C. 1- (2- (2-aminothiazol-4-yl) - (Z) -2- (2-carboxypropyl-2-oximino) acetamide-3- (1-methyl-1 -methyl 1-pyrrolidinium) methyl-3-cephem-4-carboxylate (Ie) 5 A mixture of an iodomethyl derivative

Via (538 mg, 0,51 nunoolia) ja N-metyylipyrrolidii-nia (0,079 ml, 0,076 mmoolia) C^C^sssa (10,8 ml), annettiin olla paikoillaan huoneen lämpötilassa 30 minuuttia ja sitten laimennettiin eetterillä (80 ml).Via (538 mg, 0.51 nunol) and N-methylpyrrolidine (0.079 mL, 0.076 mmol) in CH 2 Cl 2 (10.8 mL) were allowed to stand at room temperature for 30 minutes and then diluted with ether (80 mL). .

10 Muodostunut sakka koottiin talteen suodattamalla ja pestiin eetterillä, jolloin saatiin 420 mg kvaternoi-tua tuotetta, josta suojaukset poistettiin 90 %:isella trifluorietikkahapolla (TFA) (4,2 ml) huoneen lämpötilassa tunnin kuluessa. Reaktioseos haihdutettiin sit-15 ten kuiviin. Jäännökseen lisättiin eetteriä, jolloin saatiin yhdisteen Ia raakaa TFA-suolaa (245 mg, kvanti-tatiivisesti), joka oli Δ - ja Δ -isomeerien seosta 1:4. Raaka tuote puhdistettiin HPLC:n avulla ^Lichrosorb RP-18, 4 x 300 mm, eluoimalla 0,01-mol. ammoniumfosfaat-20 ti-puskurilla (pH 7,0), jossa oli 10 % OH^OHia^. Halut tua tuotetta sisältävät fraktiot koottiin yhteen ja haihdutettiin pienitilavuiseksi. Konsentraatin pH säädettiin arvoon noin 2 lisäämällä 1-mol. HCl:a ja laskettiin HP-20 -kolonnin läpi (2 x 15 cm) epäorgaanisen suo-25 lan poistamiseksi. Kolonni pestiin H20:lla (1000 ml) ja eluoitiin 30 %:isella CH^OHilla. Eluaatti haihdutettiin kuiviin ja kylmäkuivattiin, jolloin saatiin 21 mg (10 %) otsikon tuotetta (Ie) värittömänä jauheena.The resulting precipitate was collected by filtration and washed with ether to give 420 mg of quaternized product deprotected with 90% trifluoroacetic acid (TFA) (4.2 mL) at room temperature over 1 hour. The reaction mixture was evaporated to dryness. Ether was added to the residue to give the crude TFA salt of Compound Ia (245 mg, quantitative) as a 1: 4 mixture of Δ and Δ isomers. The crude product was purified by HPLC Lichrosorb RP-18, 4 x 300 mm, eluting with 0.01 mol. ammonium phosphate-20 ti buffer (pH 7.0) with 10% OH 2 OH. The desired fractions containing the product were combined and evaporated to low volume. The pH of the concentrate was adjusted to about 2 by the addition of 1 mol. HCl and passed through an HP-20 column (2 x 15 cm) to remove inorganic salt. The column was washed with H 2 O (1000 mL) and eluted with 30% CH 2 OH. The eluate was evaporated to dryness and lyophilized to give 21 mg (10%) of the title product (Ie) as a colorless powder.

Sp. 160°C (haj.).Sp. 160 ° C (dec.).

30 IR: ^maks Cm_1 3400' 1775' 161°* UV: ^Jaatti-puskuri pH 7 nm(£) 237 (15700), 257 (155500) .IR:? Max Cm_1 3400 '1775' 161 ° * UV: ^ Jaate buffer pH 7 nm (E) 237 (15700), 257 (155500).

NMR: CP°2° ppm 1,65 (6H, s), 2,3 (4H, m), 3,09 (3H, s) 3,6 (4H, m), 4,0 (2H, m), 5,44 (1H, d, 35 J=4,8Hz), 5,94 (1H, d), 7,15 (1H, s).NMR: CP ° 2 ° ppm 1.65 (6H, s), 2.3 (4H, m), 3.09 (3H, s), 3.6 (4H, m), 4.0 (2H, m) , 5.44 (1H, d, 35 J = 4.8 Hz), 5.94 (1H, d), 7.15 (1H, s).

Claims (3)

Translated fromFinnish

39 7497 339 7497 31. Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten 3-£·(1-metyyli-1-pyrrolidinium)metyylf7-3-kefeemi-4-karboksylaat-5 tijohdannaisten valmistamiseksi, joilla on kaava 0 N—r— C— !: NH —i—Ss N Ji \ N J_j, φ /v · ^ ° xi'vO . CH-i 2. jossa R on alempi alkyyli, alempi karboksialkyyli tai allyyli, ja niiden toksittomien farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen ja solvaattien valmistamiseksi, t u n -15 n e t t u siitä, että yhdiste, jolla on kaava , ijH-ιχχ, β2™ S \or2, o >^ch2i COOB1 20 7 · ]ossa R* on alempi alkyyli, allyyli tai tavanomaisella karboksyylin suojaryhmällä suojattu alempi karboksialkyyli, B-1· on tavanomainen karboksyylin suojaryhmä ja B* on tavanomainen aminon suojaryhmä, saatetaan reagoimaan N-metyyli-25 pyrrolidiinin kanssa yhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava N—r— c— ΝΠ “| 1 30. o^?>0 OR2 COOB1 CH3 XV jossa R2 , B1 ja B2 ovat edellä määritellyt, ja sen jälkeen poistetaan tavalliseen tapaan kaikki suojaryhmät, ja halut-35 taessa muutetaan saatu yhdiste toksittomaksi farmaseuttisesti hyväksyttäväksi suolakseen tai solvaatikseen. ______ - λι_.. ___- _ . 40 7 4 9 7 3A process for the preparation of therapeutically active 3 - [(1-methyl-1-pyrrolidinium) methyl] -3-cephem-4-carboxylate-5 thio derivatives of the formula 0N-R-C-NH: NH-i-Ss N Ji \ n J_j, φ / v · ^ ° xi'vO. CH-i 2. wherein R is lower alkyl, lower carboxyalkyl or allyl, and for the preparation of non-toxic pharmaceutically acceptable salts and solvates thereof, characterized in that the compound of formula ijH-ιχχ, β2 ™ S \ or2, o > ^ ch2i COOB120 7 ·] in which R * is lower alkyl, allyl or lower carboxyalkyl protected by a conventional carboxyl protecting group, B-1 · is a conventional carboxyl protecting group and B * is a conventional amino protecting group, is reacted with N-methyl-pyrrolidine for the preparation of the formula N — r— c— ΝΠ “| 1 30. o2?> 0 OR2 COOB1 CH3 XV wherein R2, B1 and B2 are as defined above, and then all protecting groups are removed in the usual manner, and if desired, the resulting compound is converted into a non-toxic pharmaceutically acceptable salt or solvate. ______ - λι_ .. ___- _. 40 7 4 9 7 32. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä 1-[1-(2-aminotiatsol-4-yyli)-(Z)-2-(2-karboksiprop-2-oksi-imi-no) asetamido7-3-Ol“nietyyli-l-pyrrolidinium) metyyl£7-3-kefeemi-4-karboksylaatin tai sen toksittoman farmaseutti- 5 sesti hyväksyttävän suolan tai solvaatin valmistamiseksi, tunnettu siitä, että bentshydryyli-7-£7(Z)-2-(2-t-butoksikarbonyyliprop-2-oksi-imino)-2-(2-trityyliamino-tiatsol-4-yyli)asetamido7-3-jodimetyyli-3-kefeemi-4-karboksylaatti saatetaan reagoimaan N-metyylipyrrolidiinin 10 kanssa orgaanisessa liuottimessa, näin saadusta yhdisteestä poistetaan suojaryhmät ja haluttaessa muutetaan saatu yhdiste toksittomaksi farmaseuttisesti hyväksyttäväksi suo-lakseen tai solvaatikseen.Process according to claim 1 1- [1- (2-aminothiazol-4-yl) - (Z) -2- (2-carboxyprop-2-oximino) acetamido] -3-ol-ethyl-1-yl pyrrolidinium) methyl E3-3-cephem-4-carboxylate or a non-toxic pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof, characterized in that benzhydryl-7- (7) (Z) -2- (2-t-butoxycarbonylprop-2 -oxyimino) -2- (2-tritylamino-thiazol-4-yl) acetamido-3-iodomethyl-3-cephem-4-carboxylate is reacted with N-methylpyrrolidine 10 in an organic solvent, the compound thus obtained is deprotected and, if desired, modified the resulting compound is a non-toxic pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof.3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä yhdistei-15 den valmistamiseksi, joilla on kaava I 0 N \ 1 * C— —— NH — rSi XT 1 . ^ 20 °R Too® VO ch3 jossa R on metyyli, etyyli, isopropyyli tai allyyli, tai niiden toksittomien, farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen tai solvaattien valmistamiseksi, tunnettu siitä, 25 että bentshydryyli-7-Oz)-2-(metoksi-, etoksi-, 2-propoksi-tai allyyli)imino-2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)aset-amido7-3-jodimetyyli-3-kefeemi-4-karboksylaatti saatetaan reagoimaan jodisuolan kanssa, jolloin saadaan vastaava 3-jodimetyylijohdannainen, minkä jälkeen mainittu 3-jodimetyy-30 lijohdannainen saatetaan reagoimaan N-metyylipyrrolidiinin kanssa orgaanisessa liuottimessa tai orgaanisten liuottimien seoksessa, jolloin saadaan vastaava pyrrolidiniumjoh-dannainen ja lopuksi lohkaistaan mainitusta pyrrolidinium-johdannaisesta suojaryhmät, jolloin saadaan 1~C(Z)-2-metok-35 si-imino-2- (2-aminotiatsol-4-yyli) asetamid<a7-3-£l 1-metyyli-l-pyrrolidinium)metyyliJ-3-kefeemi-4-karboksylaatti, 7-Π" - 41 74973 2-etoksi-imino-2- (2-aminotiatsol-4-yyli) asetamido7-3-/7( 1-metyyli-l-pyrrolidinium)metyyli7-3-kefeemi-4-karboksylaat-ti, 7-/~(Z) -2- (2-propoksi-imino) -2- (2-aminotiatsol-4-yyli) -asetamido7~3-£l1-metyyli-l-pyrrolidinium) metyyli7-3-kefee-5 mi-4-karboksylaatti tai 7-£"(Z)-2-allyylioksi-imino-2-(2-aminotiatsol-4-yyli) asetamid<27-3-/"( 1-metyyli-l-pyrrolidi-nium)raetyyli7-3-kefeemi-4-karboksylaatti, ja haluttaessa muutetaan saatu yhdiste toksittomaksi, farmaseuttisesti hyväksyttäväksi suolaakseen tai solvaatikseen. Il ^ 74973A process for the preparation of compounds of the formula I 0 N \ 1 * C— —— NH - rSi XT 1 according to claim 1. ^ 20 ° R Too® VO ch3 wherein R is methyl, ethyl, isopropyl or allyl, or non-toxic pharmaceutically acceptable salts or solvates thereof, characterized in that benzhydryl-7-Oz) -2- (methoxy-, ethoxy- , 2-propoxy or allyl) imino-2- (2-tritylaminothiazol-4-yl) acetamido-3-iodomethyl-3-cephem-4-carboxylate is reacted with an iodine salt to give the corresponding 3-iodomethyl derivative, followed by said 3-iodomethyl-30-derivative is reacted with N-methylpyrrolidine in an organic solvent or mixture of organic solvents to give the corresponding pyrrolidinium derivative, and finally the protecting groups are cleaved from said pyrrolidinium derivative to give 1 -C (Z) -2-methoxy-35 -imino-2- (2-aminothiazol-4-yl) acetamide [3- [1- (1-methyl-1-pyrrolidinium) methyl] -3-cephem-4-carboxylate, 7-β "-4,74973 2-ethoxy -imino-2- (2-aminothiazol-4-yl) acetamido-3- [7- (1-methyl-1-pyrrolidinium) me Ethyl-3-cephem-4-carboxylate, 7- [(Z) -2- (2-propoxyimino) -2- (2-aminothiazol-4-yl) -acetamido] -3- (11-methyl) -1-pyrrolidinium) methyl-3-cefe-5-m-4-carboxylate or 7 - [(Z) -2-allyloxyimino-2- (2-aminothiazol-4-yl) acetamide] "(1-methyl-1-pyrrolidinium) methyl ethyl-3-cephem-4-carboxylate, and, if desired, converting the resulting compound into a non-toxic, pharmaceutically acceptable salt or solvate thereof. Il ^ 74973