Область техники, к которой относится изобретениеThe field of technology to which the invention belongs
Изобретение относится к новой, неизвестной ранее δ-кристаллической форме N-(2-{2диметиламиноэтил-метиламино} -4-метокси-5-{ [4-(1 -метилиндол-3 -ил)пиримидин-2ил]амино}фенил)проп-2-енамида мезилата (далее осимертинибамезилат; международное непатентованное название - осимертиниб), способу ее получения и применению в фармацевтических композициях, которые могут быть использованы для лечения онкологических заболеваний.The invention relates to a new, previously unknown δ-crystalline form of N-(2-{2dimethylaminoethyl-methylamino}-4-methoxy-5-{[4-(1-methylindol-3-yl)pyrimidin-2yl]amino}phenyl)prop -2-enamide mesylate (hereinafter referred to as osimertinibamesylate; international non-proprietary name - osimertinib), a method for its preparation and use in pharmaceutical compositions that can be used to treat oncological diseases.
Сведения о предшествующем уровне техникиBackground Art Information
Полиморфизм представляет собой способность одного и того же химического соединения существовать в разных кристаллических формах. Разные полиморфы характеризуются различным взаиморасположением атомов внутри элементарной ячейки, что оказывает влияние на многие физико-химические свойства вещества, такие как температура плавления, плотность, твердость, стабильность, растворимость, скорость растворения, гигроскопичность. Различают полиморфизм упаковки, коиформационный полиморфизм. Последний связан с тем, что молекулы вещества находятся в разных конформациях. Отдельным видом полиморфизма считается политипия, под которой понимают изменение в структуре путем небольшого смещения слоев, приводящего к увеличению периодичности в направлении перпендикулярном слоям. Под псевдополиморфизмом принято понимать изменение кристаллической структуры, вызванное образованием сольватов (гидратов).Polymorphism is the ability of the same chemical compound to exist in different crystalline forms. Different polymorphs are characterized by different mutual arrangement of atoms within the unit cell, which affects many physicochemical properties of a substance, such as melting point, density, hardness, stability, solubility, dissolution rate, and hygroscopicity. There are packing polymorphism and co-formational polymorphism. The latter is due to the fact that the molecules of the substance are in different conformations. A separate type of polymorphism is considered polytypy, which is understood as a change in the structure by a slight displacement of the layers, leading to an increase in the periodicity in the direction perpendicular to the layers. Pseudopolymorphism is commonly understood as a change in the crystal structure caused by the formation of solvates (hydrates).
Разные полиморфы лекарственных веществ не только отличаются физическими свойствами, но также могут демонстрировать различную фармакокиненику и фармакодинамику у человека и животных при пероральном введении. В редких случаях полиморфы лекарственного соединения могут вообще не проявлять терапевтической эффективности. Показательным примером такого случая является ритонавир [J. Bauer, et al. Ritonavir: An Extraordinary Example of Conformational Polymorphism. Pharm. Res., 2001, 18 (6), 859-866]. Иногда использование новых полиморфов позволяет усовершенствовать технологические свойства субстанций. Так, парацетамол в своей термодинамически стабильной кристаллической форме I был известен тем, что обладал плохой прессуемостью и сыпучестью, и требовал использования большого количества вспомогательных ингредиентов для придания ему подходящих механических свойств для производства таблетированного лекарственного препарата. Применение метастабильной кристаллической формы II позволило решить проблему плохой прессуемости и сыпучести без использования эксципиентов. При этом было показано, что трансформация формы II в форму I, происходящая в готовых таблетках в процессе их хранения, не сказывается на биодоступности лекарства [P.D. Martino et al. A new pure paracetamol for direct compression: The orthorhombic form. Int. J.Pharmaceutics, 1996, 128, 1-8, 859866].Different drug polymorphs not only differ in physical properties, but may also exhibit different pharmacokinetics and pharmacodynamics in humans and animals when administered orally. In rare cases, drug compound polymorphs may not exhibit therapeutic efficacy at all. An illustrative example of such a case is ritonavir [J. Bauer, et al. Ritonavir: An Extraordinary Example of Conformational Polymorphism. Pharm. Res., 2001, 18 (6), 859-866]. Sometimes the use of new polymorphs makes it possible to improve the technological properties of substances. Thus, paracetamol in its thermodynamically stable crystalline form I has been known to have poor compressibility and flowability and required the use of a large amount of auxiliary ingredients to give it suitable mechanical properties for the production of a tablet drug. The use of a metastable crystalline form II made it possible to solve the problem of poor compressibility and flowability without the use of excipients. It was shown that the transformation of form II into form I, which occurs in finished tablets during storage, does not affect the bioavailability of the drug [P.D. Martino et al. A new pure paracetamol for direct compression: The orthorhombic form. Int. J. Pharmaceutics, 1996, 128, 1-8, 859866].
Следует отметить, что обнаружение нового полиморфа с полезными свойствами для известного химического соединения далеко не всегда является итогом рутинной оптимизации условий кристаллизации путем последовательного перебора ряда условий, растворителей и т.д. либо с применением математически обоснованных методов оптимизации эксперимента, а представляет собой результат творческого труда исследователей, приводящего к неожиданным и неочевидным результатам. В противном случае, все возможные полиморфы устанавливались бы входе первичного полиморфного скрининга, который проводится на ранних этапах разработки лекарственного препарата. Выполнение данной задачи может считаться важным научным и техническим достижением.It should be noted that the discovery of a new polymorph with useful properties for a known chemical compound is by no means always the result of a routine optimization of crystallization conditions by sequential enumeration of a number of conditions, solvents, etc. or with the use of mathematically justified methods for optimizing the experiment, but is the result of the creative work of researchers, leading to unexpected and non-obvious results. Otherwise, all possible polymorphs would be identified during the primary polymorphic screening that occurs early in drug development. The accomplishment of this task can be considered an important scientific and technical achievement.
Известное противоопухолевое вещество осимертиниб является ингибитором тирозинкиназы. Это необратимый ингибитор тирозинкиназы рецептора эпидермального фактора роста (EGFR), эффективный при наличии сенсибилизирующих мутаций гена EGFR и мутации Т790М, связанной с развитием резистентности к ингибиторам киназы.The well-known antitumor agent osimertinib is a tyrosine kinase inhibitor. It is an irreversible inhibitor of epidermal growth factor receptor (EGFR) tyrosine kinase, effective in the presence of sensitizing mutations in the EGFR gene and the T790M mutation associated with the development of resistance to kinase inhibitors.
В исследованиях in vitro было продемонстрировано, что осимертиниб обладает высокой активностью и ингибирующим действием в отношении EGFR во всех клинически значимых клеточных линиях немелкоклеточного рака легкого (НМРЛ), несущих сенсибилизирующие мутации EGFR и мутацию резистентности Т790М. Это приводит к подавлению клеточного роста, при этом значительно меньшая активность наблюдается в отношении клеточных линий, имеющих дикий тип EGFR. In vivo пероральный прием осимертиниба сопровождается уменьшением размера опухоли как в ксенографтах НМРЛ с активирующими мутациями EGFR и мутацией Т790М, так и в моделях опухолей легкого у трансгенных мышей.In vitro studies have demonstrated that osimertinib has a high activity and inhibitory effect against EGFR in all clinically significant non-small cell lung cancer (NSCLC) cell lines carrying EGFR sensitizing mutations and the T790M resistance mutation. This leads to inhibition of cell growth, with much less activity observed against cell lines having wild-type EGFR. In vivo, oral administration of osimertinib is associated with a reduction in tumor size both in NSCLC xenografts with activating EGFR mutations and the T790M mutation and in transgenic mouse lung tumor models.
После приема внутрь, медиана времени достижения максимальной концентрации осимертиниба в плазме (min-max) tmax высоко вариабельно и составляет 6 (3-24) ч, а у некоторых больных максимальные концентрации достигались в течение первых 24 ч. Абсолютная биодоступность не определялась. Согласно данным клинического фармакокинетического исследования у пациентов, получавших препарат в дозе 80 мг, прием пищи не оказывает клинически значимого влияния на биодоступность осимертиниба. [Инструкция по медицинскому применению лекарственного препарата Тагриссо, таблетки, покрытые пленочной оболочкой ЛП-004491-180717, далее ИМП Тагриссо].After oral administration, the median time to reach the maximum plasma concentration of osimertinib (min-max) tmax is highly variable and is 6 (3-24) hours, and in some patients, maximum concentrations were reached within the first 24 hours. Absolute bioavailability was not determined. According to a clinical pharmacokinetic study in patients receiving the drug at a dose of 80 mg, food intake does not have a clinically significant effect on the bioavailability of osimertinib. [Instruction for medical use of the drug Tagrisso, film-coated tablets LP-004491-180717, hereinafter IMP Tagrisso].
Известно противоопухолевое средство из класса тирозинкиназ Тагриссо, выпускаемое в форме таблеток, покрытых пленочной оболочкой. Согласно ИМП Тагриссо препарат содержит следующие компоненты:Known antitumor agent from the class of tyrosine kinases Tagrisso, produced in the form of tablets, film-coated. According to IMP Tagrisso, the preparation contains the following components:
- 1 040996 осимертиниба мезилат;- 1 040996 osimertinib mesylate;
маннитол;mannitol;
целлюлоза микрокристаллическая;cellulose microcrystalline;
гипролоза с низкой степенью замещения;hyprolose with a low degree of substitution;
натрия стеарилфумарат.sodium stearyl fumarate.
Согласно ИМП Тагриссо применяется при местно-распространенном или метастатическом немелкоклеточном раке легкого с мутацией Т790М в гене рецептора эпидермального фактора роста (EGFR) у взрослых пациентов.According to the IMP, Tagrisso is used for locally advanced or metastatic non-small cell lung cancer with the T790M mutation in the epidermal growth factor receptor (EGFR) gene in adult patients.
Относительно хорошая растворимость осимертиниба мезилата в физиологических средах в сочетании с его низкой способностью проникать через биологические мембраны, позволяет отнести данное вещество к третьему классу согласно биофармацевтической классификации [D.L. Hughes. Patent Review of Manufacturing Routes to Oncology Drugs: Carfilzomib, Osimertinib, and Venetoclax. Org. Process Res. Dev., 2016, 20 (12), 2028-2042]. В евразийском патенте ЕА 029488 В (опубл. 30.04.2018, МПК: C07D 403/04; C07D 471/04; А61К 31/506; А61Р 35/00) раскрываются кристаллические формы осимертиниба основания и его мезилатной соли, а также способы их химического синтеза и биологические испытания полученных соединений. Структура соединений охарактеризована при помощи рентгенофазового анализа (табл. 1), дифференциальной сканирующей калориметрии. В патенте описаны две кристаллические формы мезилатной соли осимертиниба. Кристаллическая форма А осимертиниба мезилата на термограмме ДСК имеет эндотерму плавления с началом при 258,8°C и пиком при 262,0°C, тогда как кристаллическая форма В на термограмме ДСК имеет эндотерму плавления с началом при 245,0°C и пиком при 246,5°C.The relatively good solubility of osimertinib mesylate in physiological media, combined with its low ability to penetrate biological membranes, allows this substance to be classified in the third class according to the biopharmaceutical classification [D.L. Hughes. Patent Review of Manufacturing Routes to Oncology Drugs: Carfilzomib, Osimertinib, and Venetoclax. Org. Process Res. Dev., 2016, 20(12), 2028-2042]. Eurasian patent EA 029488 B (publ. 04/30/2018, IPC: C07D 403/04; C07D 471/04; A61K 31/506; A61P 35/00) discloses crystalline forms of osimertinib base and its mesylate salt, as well as methods for their chemical synthesis and biological testing of the obtained compounds. The structure of the compounds was characterized by X-ray phase analysis (Table 1) and differential scanning calorimetry. The patent describes two crystalline forms of the mesylate salt of osimertinib. Crystal form A of osimertinib mesylate on the DSC thermogram has a melting endotherm with an onset at 258.8°C and a peak at 262.0°C, while crystal form B on the DSC thermogram has a melting endotherm with an onset at 245.0°C and a peak at 246.5°C.
В патентной заявке Китая CN 106699736 А (опубл. 24.05.2017, МПК: А61К 31/506; А61Р 35/00; С07С 303/32; С07С 309/04 и C07D 403/04) описана кристаллическая форма γ осимертиниба мезилата, использование ее в фармацевтических композициях и применение для лечения опухолевых заболеваний. Для кристаллической формы у на термограмме ДСК наблюдается эндотермический пик при температуре 252,2°С. Кристалличность структуры подтверждена данными рентгенофазового анализа (см. табл. 6).Chinese patent application CN 106699736 A (publ. 05/24/2017, IPC: A61K 31/506; A61P 35/00; C07C 303/32; C07C 309/04 and C07D 403/04) describes the crystalline form of γ-osimertinib mesylate, the use of its in pharmaceutical compositions and use in the treatment of neoplastic diseases. For the crystalline form y, an endothermic peak is observed on the DSC thermogram at a temperature of 252.2°C. The crystallinity of the structure was confirmed by X-ray diffraction data (see Table 6).
Сущность изобретенияThe essence of the invention
Изобретение относится к новой, неизвестной ранее, δ-кристаллической форме N-(2-{2диметиламиноэтил-метиламино} -4-метокси-5- {[4-(1 -метилиндол-3 -ил)пиримидин-2ил]амино}фенил)проп-2-енамида мезилата (осимертиниба мезилата), способу ее получения и применения для лечения онкологических заболеваний.The invention relates to a new, previously unknown, δ-crystalline form of N-(2-{2dimethylaminoethyl-methylamino}-4-methoxy-5-{[4-(1-methylindol-3-yl)pyrimidin-2yl]amino}phenyl) prop-2-enamide mesylate (osimertinib mesylate), the method of its production and use for the treatment of oncological diseases.
N-(2- {2-диметиламиноэтил-метиламино}-4-метокси-5-{ [4-( 1 -метилиндол-3-ил)пиримидин-2ил]амино}фенил)проп-2-енамида мезилат характеризуется следующей структурной формулой:N-(2-{2-dimethylaminoethyl-methylamino}-4-methoxy-5-{[4-(1-methylindol-3-yl)pyrimidin-2yl]amino}phenyl)prop-2-enamide mesylate is characterized by the following structural formula :
Брутто-формулой: C29H37N7O5S.Gross formula: C29 H37 N7 O5 S.
Молекулярной массой: 595,72 (в виде осимертиниба мезилата).Molecular weight: 595.72 (as osimertinib mesylate).
Заявленная группа изобретений направлена на решение актуальной задачи расширения арсенала известных полиморфных форм осимертиниба мезилата, которые могут быть использованы для лечения онкологических заболеваний. Данная задача решается путем создания новой δ-кристаллической формы N-(2- {2-диметиламиноэтил-метиламино}-4-метокси-5-{ [4-( 1 -метилиндол-3 -ил)пиримидин-2ил]амино}фенил)проп-2-енамида мезилата.The claimed group of inventions is aimed at solving the urgent problem of expanding the arsenal of known polymorphic forms of osimertinib mesylate, which can be used to treat oncological diseases. This problem is solved by creating a new δ-crystalline form of N-(2-{2-dimethylaminoethyl-methylamino}-4-methoxy-5-{[4-(1-methylindol-3 -yl)pyrimidin-2yl]amino}phenyl) prop-2-enamide mesylate.
Техническим результатом заявленной группы изобретений является создание новой δкристаллической формы N-(2-{2-диметиламиноэтил-метиламино}-4-метокси-5-{[4-(1-метилиндол-3ил)пиримидин-2-ил]амино}фенил)проп-2-енамида мезилата, обладающей улучшенной биологической доступностью и терапевтической эффективностью, по сравнению с известной кристаллической формой В при лечении опухолевых заболеваний.The technical result of the claimed group of inventions is the creation of a new δ crystalline form of N-(2-{2-dimethylaminoethyl-methylamino}-4-methoxy-5-{[4-(1-methylindol-3yl)pyrimidin-2-yl]amino}phenyl) prop-2-enamide mesylate, which has improved bioavailability and therapeutic efficacy compared to the known crystalline form B in the treatment of neoplastic diseases.
Новая δ-кристаллическая форма осимертиниба мезилата по изобретению характеризуются набором основных максимумов в спектре порошковой рентгеновской дифракции: 16,32; 18,76; 33,04 ±0,2 град. угла 2Θ и набором дополнительных максимумов: 10,34; 17,14; 19,34; 19,70; 20,78; 22,74 ±0,2 град. угла 2θ. Для образца δ-кристаллического осимертиниба мезилата на термограмме дифференциальной сканирующей калориметрии при скорости нагрева 10 град./мин. наблюдаются следующие тепловые эффекты: 163,4°C (экзотермический), 243,5°C (плавление, эндотермический). При этом для исходной кристалличеThe new δ-crystal form of osimertinib mesylate according to the invention is characterized by a set of main peaks in the powder x-ray diffraction spectrum: 16.32; 18.76; 33.04 ±0.2 deg. angle 2Θ and a set of additional maxima: 10.34; 17.14; 19.34; 19.70; 20.78; 22.74 ±0.2 deg. angle 2θ. For a sample of δ-crystalline osimertinib mesylate on a differential scanning calorimetry thermogram at a heating rate of 10 deg/min. the following thermal effects are observed: 163.4°C (exothermic), 243.5°C (melting, endothermic). In this case, for the initial crystalline
- 2 040996 ской формы В методом ДСК была определена температура плавления 247,7°C, что согласуется с литературными данными для температуры плавления формы В, составляющей 245°C (начало плавления) [евразийский патент № 029488 В, фиг. 21].- 2 040996 form B, the melting point of 247.7°C was determined by DSC, which is consistent with the literature data for the melting point of form B, which is 245°C (the beginning of melting) [Eurasian patent No. 029488 B, fig. 21].
Поскольку координаты экстремума на кривой ДСК существенно зависят от конструкции прибора и условий проведения эксперимента, во всех случаях в качестве температуры фазового перехода принималась температура, соответствующая точке пересечения экстраполированной в область пика базовой линии графика с касательной к точке перегиба на левом плече кривой (Tonset).Since the coordinates of the extremum on the DSC curve significantly depend on the design of the device and the conditions of the experiment, in all cases, the phase transition temperature was taken to be the temperature corresponding to the point of intersection of the graph’s baseline extrapolated to the peak region with the tangent to the inflection point on the left shoulder of the curve (Tonset).
Для сравнения основных характеристик δ-кристаллической формы осимертиниба, таких как биодоступность, стабильность, гигроскопичность, в качестве объекта сравнения нами была выбрана полиморфная форма В, описанная в патенте ЕА 024421 В1. Различия кристаллических форм показаны в соот ветствующих примерах.To compare the main characteristics of the δ-crystal form of osimertinib, such as bioavailability, stability, hygroscopicity, we chose the polymorphic form B described in EA patent 024421 B1 as the object of comparison. Differences in crystal forms are shown in the corresponding examples.
Для δ-кристаллического осимертиниба мезилата по настоящему изобретению было обнаружено, что он остается фазово-стабильным в течение, как минимум, 12 месяцев хранения при температуре 25±2°C и относительной влажности 60±5 % (см. пример 7). Для готового лекарственного средства, содержащего кристаллическую форму δ осимертиниба мезилата по изобретению, была показана стабильность в течение 12 месяцев (см. пример 8).The δ-crystalline osimertinib mesylate of the present invention was found to remain phase stable for at least 12 months of storage at 25±2° C. and 60±5% relative humidity (see Example 7). The finished drug product containing the δ osimertinib mesylate crystalline form of the invention was shown to be stable for 12 months (see example 8).
Испытания на животных показывают, что δ-кристаллический осимертиниба мезилат по изобретению, характеризующийся указанными выше параметрами кристаллической решетки, а также термическими эффектами, наблюдаемыми в условиях ДСК, и полученный предложенными в настоящем изобретении способами, обладает улучшенной биологической доступностью и терапевтической эффективностью при лечении опухолевых заболеваний, чем известная кристаллическая форма В, полученная по примеру 4.Animal testing shows that the δ-crystalline osimertinib mesylate of the invention, having the above lattice parameters as well as the thermal effects observed under DSC conditions, and obtained by the methods of the present invention, has improved bioavailability and therapeutic efficacy in the treatment of neoplastic diseases. than the known crystalline form B obtained in example 4.
При изучении подходов к синтезу осимертиниба мезилата авторами был разработан способ, согласно которому осимертиниб образуется при взаимодействии N1-(2-(диметиламино)этил)-2-иод-5-метоксиN1-метил-N4-(4-(1-метил-1Н-индол-3-ил)пиримидин-2-ил)бензол-1,4-диамина и акриламида в присутствии подходящего стерически затрудненного основания и субстехиометрического количества тиофен-2карбоксилата меди(I) в среде диметилсульфоксида, с последующим превращением полученного продукта в кислотно-аддитивную соль с метансульфоновой кислотой. Предполагается, что тиофен-2карбоксилата меди(I) является катализатором реакции кросс-сочетания, позволяющей вводить акрилоиламидный фрагмент в бензольное кольцо.When studying approaches to the synthesis of osimertinib mesylate, the authors developed a method according to which osimertinib is formed by the interaction of N1 -(2-(dimethylamino)ethyl)-2-iodo-5-methoxyN1 -methyl-N4 -(4-(1- methyl-1H-indol-3-yl)pyrimidin-2-yl)benzene-1,4-diamine and acrylamide in the presence of a suitable sterically hindered base and a substoichiometric amount of copper(I) thiophene-2carboxylate in a dimethyl sulfoxide medium, followed by conversion of the resulting product into an acid addition salt with methanesulfonic acid. It is assumed that copper(I) thiophene-2carboxylate is a catalyst for the cross-coupling reaction, which makes it possible to introduce an acryloylamide moiety into the benzene ring.
В качестве подходящего стерически затрудненного основания могут быть использованы такие вещества, как трет-бутилат натрия, трет-амилат натрия или другие аналогичные вещества, известные специалистам в области органического синтеза. Предлагаемый авторами подход к синтезу осимертиниба мезилата расширяет арсенал известных способов синтеза этого соединения и позволяет обойтись без таких коррозионно-опасных реагентов, как акрилоилхлорид и β-пропионилхлорид, которые обычно применяются для введения акрилоильного фрагмента при синтезе данного вещества.As a suitable hindered base, substances such as sodium t-butoxide, sodium t-amylate or other similar substances known to those skilled in the art of organic synthesis can be used. The approach proposed by the authors to the synthesis of osimertinib mesylate expands the arsenal of known methods for the synthesis of this compound and makes it possible to dispense with such corrosive reagents as acryloyl chloride and β-propionyl chloride, which are usually used to introduce an acryloyl fragment in the synthesis of this substance.
В одном варианте осуществления способа получения δ-кристаллической формы осимертиниба мезилата указанную форму получают методом лиофильной сушки водного раствора осимертиниба мезилата, замороженного сначала при помощи сухого льда, а затем - жидкого азота. Лиофильную сушку проводят при температурах на конденсаторе от -50 до -56°C, на продукте от -196 до +30°C, и остаточном давлении в камере от 8-10-2 до 5-10-2 мм рт. ст. Учитывая невысокую растворимость осимертиниба мезилата в воде, данный метод сопряжен с необходимостью лиофилизовать большие объемы водного раствора.In one embodiment of the process for preparing the δ-crystal form of osimertinib mesylate, said form is prepared by freeze drying an aqueous solution of osimertinib mesylate frozen first with dry ice and then with liquid nitrogen. Freeze drying is carried out at temperatures on the condenser from -50 to -56°C, on the product from -196 to +30°C, and a residual pressure in the chamber from 8-10-2 to 5-10-2 mm Hg. Art. Given the low solubility of osimertinib mesylate in water, this method is associated with the need to lyophilize large volumes of the aqueous solution.
- 3 040996- 3 040996
В ходе дальнейших экспериментов с полученной вышеописанным способом δ-кристаллической формой осимертиниба мезилата авторами было неожиданно обнаружено, что добавление указанной формы при перекристаллизации осимеритиниба мезилата из этилового спирта приводит к кристаллизации очищенного осимертиниба мезилата в виде δ-модификации. Отличительной особенностью данного варианта способа получения является хорошая масштабируемость и возможность применения для крупномасштабного синтеза (см. примеры 3a, b).In the course of further experiments with the δ-crystal form of osimertinib mesylate obtained as described above, the authors unexpectedly found that the addition of this form during the recrystallization of osimeritinib mesylate from ethyl alcohol leads to crystallization of the purified osimertinib mesylate in the form of a δ-modification. A distinctive feature of this variant of the production method is good scalability and the possibility of using for large-scale synthesis (see examples 3a, b).
В дополнительном варианте осуществления изобретения основание осимертиниба получают реакцией кросс-сочетания №(2-(диметиламино)этил)-2-иод-5-метокси-М1-метил-Ы4-(4-(1-метил-1Н-индол-3ил)пиримидин-2-ил)бензол-1,4-диамина с акриламидом, протекающей в присутствии трет-бутилата натрия и субстехиометрического количества тиофенкарбоксилата меди(I) в среде диметилсульфоксида. Осиметриниба мезилат получают путем обработки основания осимертиниба метансульфокислотой в этаноле.In a further embodiment of the invention, osimertinib base is prepared by a cross-coupling reaction of N(2-(dimethylamino)ethyl)-2-iodo-5-methoxy-M1 -methyl-N4 -(4-(1-methyl-1H-indole- 3yl)pyrimidin-2-yl)benzene-1,4-diamine with acrylamide in the presence of sodium tert-butoxide and a substoichiometric amount of copper(I) thiophenecarboxylate in a dimethyl sulfoxide medium. Osimetrinib mesylate is prepared by treating the base of osimertinib with methanesulfonic acid in ethanol.
Перечень фигур, чертежей и иных материаловList of figures, drawings and other materials
Для пояснения сущности заявляемого технического решения к описанию приложены фиг. 1-7.To clarify the essence of the proposed technical solution, the description is accompanied by Fig. 1-7.
На фиг. 1 приведена термограмма дифференциальной сканирующей калориметрии кристаллического осимертиниба мезилата формы δ, полученного по примеру 2.In FIG. Figure 1 shows a differential scanning calorimetry thermogram of crystalline osimertinib mesylate form δ prepared in Example 2.
На фиг. 2 приведена термограмма дифференциальной сканирующей калориметрии известной кристаллической формы В осимертиниба мезилата.In FIG. 2 is a differential scanning calorimetry thermogram of a known crystalline form B of osimertinib mesylate.
На фиг. 3 приведена порошковая дифрактограмма кристаллического осимертиниба мезилата формы δ, полученного по примеру 2.In FIG. 3 shows a powder diffraction pattern of crystalline osimertinib mesylate Form δ prepared in Example 2.
На фиг. 4 приведена порошковая дифрактограмма кристаллической формы В осимертиниба мезилата, полученного по примеру 4.In FIG. 4 is a powder diffraction pattern of crystalline Form B of osimertinib mesylate prepared in Example 4.
На фиг. 5 приведен спектр 1Н ЯМР δ-кристаллического осимертиниба мезилата, полученного по примеру 1а, зарегистрированный на частоте 600 МГц в дейтерированном метаноле (CD3OD).In FIG. 5 shows the 1H NMR spectrum of δ-crystalline osimertinib mesylate prepared in Example 1a, recorded at 600 MHz in deuterated methanol (CD3OD).
На фиг. 6 приведен спектр13С ЯМР кристаллического осимертиниба мезилата, полученного по примеру 2, зарегистрированный на частоте 150 МГц в дейтерированном метаноле (CD3OD).In FIG. 6 shows the13 C NMR spectrum of crystalline osimertinib mesylate prepared in Example 2, recorded at 150 MHz in deuterated methanol (CD3OD).
На фиг. 7 приведен график сравнения терапевтической эффективности осимертиниба мезилата. Группа 1 - введение кристаллического осимертиниба мезилата по примеру 2, группа 2 - введение кристаллического осимертиниба мезилата по примеру 3a, группа 3 - введение известной кристаллической формы В осимертиниба мезилата по примеру 4, группа 4, контроль - введение раствора без активного ингредиента.In FIG. 7 is a graph comparing the therapeutic efficacy of osimertinib mesylate. Group 1 - administration of crystalline osimertinib mesylate according to example 2, group 2 - administration of crystalline osimertinib mesylate according to example 3a, group 3 - administration of known crystalline form B of osimertinib mesylate according to example 4, group 4, control - administration of solution without active ingredient.
Осуществление изобретенияImplementation of the invention
Физико-химический анализ δ-кристаллического осимертиниба мезилата был осуществлен методом ядерной магнитной спектроскопии 1Н ЯМР,13С ЯМР, ВЭЖХ, ГЖХ и рентгенофазовым анализом. Спектры 1Н и13С ЯМР были зарегистрированы в насыщенном растворе в дейтерированном метаноле (CD3OD) на ЯМР-спектрометре высокого разрешения Bruker AVANCE 600 на рабочих частотах 600 и 150 МГц соответственно.Physicochemical analysis of δ-crystalline osimertinib mesylate was carried out by nuclear magnetic spectroscopy 1H NMR,13 C NMR, HPLC, GLC and X-ray phase analysis. The 1H and13C NMR spectra were recorded in a saturated solution in deuterated methanol (CD3OD) on a Bruker AVANCE 600 high-resolution NMR spectrometer at operating frequencies of 600 and 150 MHz, respectively.
Рентгенофазовый анализ (РФА) проводили на рентгеновском дифрактометре Rigaku D/MAX-2500 (Rigaku, Япония) в излучении Cu-Κα (λ=1,54056 А). Содержание воды анализировалось на автоматическом титраторе C20D, MettlerToledo (Швейцария).X-ray phase analysis (XRF) was carried out on a Rigaku D/MAX-2500 X-ray diffractometer (Rigaku, Japan) in Cu-Κα radiation (λ=1.54056 A). The water content was analyzed on a C20D automatic titrator, MettlerToledo (Switzerland).
Термоаналитические исследования проводили на приборе NETZSCH DSC 204 F1. Измерительную систему калибровали согласно норме ISO 11357-1 по параметрам фазовых переходов стандартных веществ (С6Н12, Hg, бензойная кислота, Ga, KNO3, In, Sn, Bi, CsCl, чистота 99,99%). Систематическая ошибка температурной калибровки (определена по In) составляет 0,1°. Образцы тестировали в стандартных алюминиевых ячейках (V=56 мм3, d=6 мм), завальцованных крышкой с отверстием (отношение площади дна ячейки к площади отверстия составляло порядка 40) в потоке (40 мл/мин) азота (ВЧ) при скорости нагревания 10°/мин.Thermoanalytical studies were carried out on a NETZSCH DSC 204 F1 instrument. The measuring system was calibrated according to ISO 11357-1 in terms of the phase transition parameters of standard substances (C6 H12 , Hg, benzoic acid, Ga, KNO3 , In, Sn, Bi, CsCl, purity 99.99%). The systematic error of the temperature calibration (determined from In) is 0.1°. The samples were tested in standard aluminum cells (V=56 mm3 , d=6 mm) sealed with a lid with a hole (the ratio of the area of the bottom of the cell to the area of the hole was about 40) in a flow (40 ml/min) of nitrogen (HF) at a heating rate 10°/min.
Возможность осуществления заявленной группы изобретений иллюстрируется следующими примерами, но не ограничивается только ими.The possibility of implementing the claimed group of inventions is illustrated by the following examples, but is not limited to them.
Пример 1а. Синтез N-(2-{2-диметиламиноэтил-метиламино}-4-метокси-5-{[4-(1-метилиндол-3ил)пиримидин-2-ил]амино}фенил)проп-2-енамида мезилата.Example 1a. Synthesis of N-(2-{2-dimethylaminoethyl-methylamino}-4-methoxy-5-{[4-(1-methylindol-3yl)pyrimidin-2-yl]amino}phenyl)prop-2-enamide mesylate.
N4-(2-(диметиламино)этил)-2-метокси-N4-метил-N1-(4-( 1 -метил-1 Н-индол-3 -ил)пиримидин-2ил)бензол-1,4-диамин получили согласно способу, раскрытому в патенте Китая CN108658943, примере 1(3). В 50 мл хлористого метилена растворили 7,0 г N4-(2-(диметиламино)этил)-2-метокси-N4-метил-N1(4-(1-метил-1Н-индол-3-ил)пиримидин-2-ил)бензол-1,4-диамина, при перемешивании добавили 2,4 г кристаллического йода, 2,1 г иодата калия, 30 мл воды и 0,1 г N бензилтриэтиламмония хлорида (CAS: 56-37-1). Реакцию проводили в течение 12 ч при кипячении с обратным холодильником. Реакционную массу охлаждали до комнатной температуры и добавили 30,0 мл воды. Органический слой отделили и промывали водой 3x50,0 мл. Растворитель удаляли в вакууме на роторном испарителе и высушивали до постоянной массы. Получали 5,5 г N1-(2-(диметиламино)этил)-2-иод-5-метокси-N1-метил-N4-(4-(1-метил1Н-индол-3-ил)пиримидин-2-ил)бензол-1,4-диамина (выход 61%) в виде белых кристаллов.N4 - (2- (dimethylamino) ethyl) -2-methoxy-N4 -methyl-N1 - (4- ( 1 -methyl-1 H-indol-3 -yl) pyrimidin-2yl) benzene-1,4 α-diamine was prepared according to the method disclosed in Chinese Patent CN108658943, Example 1(3). In 50 ml of methylene chloride was dissolved 7.0 g of N4 - (2- (dimethylamino) ethyl) -2-methoxy-N4 -methyl-N1 (4- (1-methyl-1H-indol-3-yl) pyrimidine -2-yl)benzene-1,4-diamine, 2.4 g of crystalline iodine, 2.1 g of potassium iodate, 30 ml of water and 0.1 g of N benzyltriethylammonium chloride (CAS: 56-37-1) were added with stirring . The reaction was carried out for 12 h at reflux. The reaction mass was cooled to room temperature and 30.0 ml of water was added. The organic layer was separated and washed with water 3x50.0 ml. The solvent was removed in vacuo on a rotary evaporator and dried to constant weight. 5.5 g of N1 -(2-(dimethylamino)ethyl)-2-iodo-5-methoxy-N1 -methyl-N4 -(4-(1-methyl1H-indol-3-yl)pyrimidin-2 -yl)benzene-1,4-diamine (yield 61%) as white crystals.
Смешивали 5,0 г N1-(2-(диметиламино)этил)-2-иод-5-метокси-N1-метил-N4-(4-(1-метил-1Н-индол-35.0 g of N1 -(2-(dimethylamino)ethyl)-2-iodo-5-methoxy-N1 -methyl-N4 -(4-(1-methyl-1H-indole-3
- 4 040996 ил)пиримидин-2-ил)бензол-1,4-диамина, 0,64 г акриламида, 0,86 г трет-бутилата натрия и 0,85 г тиофен2-карбоксилата меди(Т) в 50 мл диметилсульфоксида. Смесь нагревали до 100°C и перемешивали при этой температуре в течение 6 ч. Реакционную массу охлаждали до комнатной температуры и смешивали со 100 мл насыщенного раствора хлористого аммония. Образовавшуюся смесь экстрагировали 200 мл этилацетата. Верхний (органический) слой отделяли, промывали водой 3x150 мл. Растворитель удаляли в вакууме до постоянной массы. Полученное основание осимертиниба растворяли в 100 мл 95%-го этанола при нагревании и прибавляли 0,86 г метансульфокислоты. Полученную смесь перемешивали в течение 20 мин. Растворитель удаляли в вакууме на роторном испарителе. Осадок промывали 3x100 мл очищенной водой на фильтре Шотта и высушивали в вакууме при температуре 40°C до постоянной массы. Получали 3,47 г осимертиниба мезилата (выход 65%). Структура полученного соединения была подтверждена при помощи 1Н ЯМР спектроскопии (фиг. 5).- 4 040996 yl)pyrimidin-2-yl)benzene-1,4-diamine, 0.64 g of acrylamide, 0.86 g of sodium tert-butoxide and 0.85 g of copper(T) thiophene 2-carboxylate in 50 ml of dimethyl sulfoxide. The mixture was heated to 100°C and stirred at this temperature for 6 hours. The reaction mass was cooled to room temperature and mixed with 100 ml of a saturated ammonium chloride solution. The resulting mixture was extracted with 200 ml of ethyl acetate. The upper (organic) layer was separated, washed with water 3x150 ml. The solvent was removed in vacuo to constant weight. The resulting osimertinib base was dissolved in 100 ml of 95% ethanol with heating, and 0.86 g of methanesulfonic acid was added. The resulting mixture was stirred for 20 minutes. The solvent was removed in vacuo on a rotary evaporator. The precipitate was washed with 3x100 ml of purified water on a Schott filter and dried in vacuum at 40°C to constant weight. 3.47 g of osimertinib mesylate was obtained (65% yield). The structure of the resulting compound was confirmed by 1H NMR spectroscopy (FIG. 5).
Пример 1b. Синтез К-(2-{2-диметиламиноэтил-метиламино}-4-метокси-5-{[4-(1-метилиндол-3ил)пиримидин-2-ил]амино}фенил)проп-2-енамида мезилата.Example 1b. Synthesis of N-(2-{2-dimethylaminoethyl-methylamino}-4-methoxy-5-{[4-(1-methylindol-3yl)pyrimidin-2-yl]amino}phenyl)prop-2-enamide mesylate.
Синтез проводят аналогично примеру 1а за исключением того, что вместо трет-бутилата натрия используют эквимолярное количество трет-амилата натрия. Выход осимертиниба мезилата составил 60%.The synthesis is carried out analogously to example 1a, except that instead of sodium tert-butoxide, an equimolar amount of sodium tert-amylate is used. The yield of osimertinib mesylate was 60%.
Пример 2. Получение δ-кристалличсского осимертиниба мезилата.Example 2 Preparation of δ-crystalline osimertinib mesylate.
100 мл водного 0,3%-ного раствора К-[2-[2-диметиламиноэтил(метил)амино]-4-метокси-5-[[4-(1метилиндол-3-ил)пиримидин-2-ил]амино]фенил]проп-2-енамида мезилата поместили в емкость из коррозионно-стойкой нержавеющей стали и погрузили в смесь сухого льда и ацетона (температура бани не ниже -78°C), охлаждая со скоростью 10±5 град./мин. После кристаллизации емкость охлаждали жидким азотом (температура -196°C). Полученный замороженный продукт на поддоне перенесли в сублимационную камеру и подвергли сублимационной сушке в течение примерно 22 ч при температурах на конденсаторе от -50 до -56°C, на продукте от -196 до +30°C и остаточном давлении в камере от 8-10’2 до 5-10’2 мм рт. ст. Получили 0,26 г (выход 87%) кристаллического осимертиниба мезилата в виде легкого мелкокристаллического порошка. Сохранность молекулярной структуры полученного соединения была подтверждена при помощи13С ЯМР спектроскопии (фиг. 6).100 ml aqueous 0.3% solution of K-[2-[2-dimethylaminoethyl(methyl)amino]-4-methoxy-5-[[4-(1methylindol-3-yl)pyrimidin-2-yl]amino] phenyl]prop-2-enamide mesylate was placed in a corrosion-resistant stainless steel container and immersed in a mixture of dry ice and acetone (bath temperature not lower than -78°C), cooling at a rate of 10 ± 5 deg./min. After crystallization, the container was cooled with liquid nitrogen (temperature -196°C). The resulting frozen product on a pallet was transferred to a freeze chamber and subjected to freeze drying for about 22 hours at temperatures on the condenser from -50 to -56°C, on the product from -196 to +30°C and a residual pressure in the chamber from 8-10 '2 to 5-10'2mmHg Art. 0.26 g (87% yield) of crystalline osimertinib mesylate was obtained as a light fine crystalline powder. The retention of the molecular structure of the resulting compound was confirmed by13 C NMR spectroscopy (FIG. 6).
Пример 3a. Получение δ-кристалличсского осимертиниба мезилата.Example 3a. Preparation of δ-crystalline osimertinib mesylate.
100,0 г сырьевого осимертиниба мезилата (полученного по примеру 1а) в 200 мл 95 %-го этилового спирта доводили до кипения при перемешивании. После полного растворения осадка, раствор охлаждали со скоростью приблизительно 1 град./мин. При достижении раствором температуры 35-40°C, в него вносили тремя равными порциями затравку δ-кристаллического осимертиниба мезилата, полученного по примеру 2. Охлаждение продолжали с той же скоростью до температуры 0±2°C и перемешивали в течение примерно 4 ч при этой температуре. Полученный осадок отфильтровывали на пористом фильтре Шотта (S3), промывали 3x100 мл охлажденным этиловым спиртом и высушивали под вакуумом при температуре 40±2°C до постоянной массы. Получали 94,6 г δ-кристаллического осимертиниба мезилата (выход 95%). Характерные сигналы на дифрактограмме полученного продукта совпадали с характерными сигналами на дифрактограмме вещества, полученного по примеру 2.100.0 g of raw osimertinib mesylate (obtained according to example 1a) in 200 ml of 95% ethanol was brought to a boil with stirring. After complete dissolution of the precipitate, the solution was cooled at a rate of approximately 1 deg/min. When the solution reached a temperature of 35-40°C, it was seeded in three equal portions with δ-crystalline osimertinib mesylate obtained in example 2. Cooling was continued at the same rate to a temperature of 0±2°C and stirred for about 4 h at this temperature. The resulting precipitate was filtered off on a porous Schott filter (S3), washed with 3x100 ml of chilled ethanol, and dried under vacuum at a temperature of 40±2°C to constant weight. 94.6 g of δ-crystalline osimertinib mesylate was obtained (95% yield). The characteristic signals on the diffraction pattern of the obtained product coincided with the characteristic signals on the diffraction pattern of the substance obtained in example 2.
Пример 3b. Получение δ-кристаллического осимертиниба мезилата (масштабирование).Example 3b. Preparation of δ-crystalline osimertinib mesylate (zoom).
δ-кристаллический осимертиниба мезилат получали по способу, описанному в примере 3a, с использованием 10-тикратного масштабирования всех использованных веществ. Получали 956,0 г δкристаллического осимертиниба мезилата (выход 96%). Дифрактограммы продукта совпадали с дифрактограммой для вещества, полученного по примеру 2.δ-crystalline osimertinib mesylate was obtained according to the method described in example 3a, using a 10-fold scaling of all substances used. 956.0 g of δcrystalline osimertinib mesylate were obtained (96% yield). The diffractograms of the product coincided with the diffraction pattern for the substance obtained in example 2.
Пример 4. Получение кристаллического осимертиниба мезилата формы В известным способом (патент EA 029488 В, пример 28А, процедура 1).Example 4 Preparation of crystalline osimertinib mesylate form B in a known manner (patent EA 029488 B, example 28A, procedure 1).
В круглодонной колбе смешивали 5,00 г И-[2-[2-диметиламиноэтил(метил)амино]-4-метокси-5-[[4(1-метилиндол-3-ил)пиримидин-2-ил]амино]фенил]проп-2-енамида, растворенного в смеси 35,00 мл этанола и 15,00 мл этилацетата, и 0,893 г метансульфоновой кислоты в 10,00 мл этилацетата. Полученную суспензию перемешивали в течение 1,5 ч при температуре 70°C. Выпавший осадок отфильтровывали на пористом фильтре Шотта (S3) и высушивали в вакууме при температуре 80°C до постоянной массы. Получали 4,8 г (93,5%) кристаллической формы В осимертиниба мезилата. Спектр порошковой рентгеновской дифракции полностью совпадал со спектром порошковой рентгеновской дифракции, приведенным в патенте ЕА 024421 В1 (фиг. 4).In a round bottom flask, 5.00 g of N-[2-[2-dimethylaminoethyl(methyl)amino]-4-methoxy-5-[[4(1-methylindol-3-yl)pyrimidin-2-yl]amino]phenyl ]prop-2-enamide dissolved in a mixture of 35.00 ml of ethanol and 15.00 ml of ethyl acetate and 0.893 g of methanesulfonic acid in 10.00 ml of ethyl acetate. The resulting suspension was stirred for 1.5 h at 70°C. The precipitate formed was filtered off on a porous Schott filter (S3) and dried in vacuum at 80°C to constant weight. 4.8 g (93.5%) of osimertinib mesylate crystalline form B was obtained. The spectrum of powder x-ray diffraction completely coincided with the spectrum of powder x-ray diffraction, given in patent EA 024421 B1 (Fig. 4).
Пример 5. Определение остаточных органических растворителей в субстанции кристаллического осимертиниба мезилата.Example 5 Determination of residual organic solvents in the substance of crystalline osimertinib mesylate.
Для образцов кристаллического осимертиниба мезилата по изобретению остаточные органические растворители определяют методом газовой хроматографии в соответствии с ГФ РФ (ОФС.1.1.0008.15 Остаточные органические растворители, ОФС.1.2.1.2.0004.15 Газовая хроматография, ОФС.1.2.1.2.0001.15 Хроматография) на газовом хроматографе с программированием температуры, снабженном пламенно-ионизационным детектором GC-2010 Plus, Shimadzu (Япония) и автоматическим устройством для анализа равновесной паровой фазы типа Headspace, AOC-5000 Plus, Shimadzu (Швейцария).For samples of crystalline osimertinib mesylate according to the invention, residual organic solvents are determined by gas chromatography in accordance with the SP RF (OFS.1.1.0008.15 Residual organic solvents, GPM.1.2.1.2.0004.15 Gas chromatography, GPM.1.2.1.2.0001.15 Chromatography) on gas a temperature-programmed chromatograph equipped with a flame ionization detector GC-2010 Plus, Shimadzu (Japan) and an automatic device for analyzing the equilibrium vapor phase of the Headspace type, AOC-5000 Plus, Shimadzu (Switzerland).
- 5 040996- 5 040996
Таблица 1. Данные об остаточных органических растворителях в субстанцииTable 1. Data on residual organic solvents in the substance
Хроматографические условия:Chromatographic Conditions:
капиллярная кварцевая колонка размером 60 м х 0,32 мм, с нанесенной неподвижной фазой макрогол 20000 с толщиной слоя 1 мкм (Stabilwax, кат. № 10657, Restek, США или аналогичная);60 m x 0.32 mm capillary quartz column coated with 1 µm macrogol 20000 stationary phase (Stabilwax, cat. no. 10657, Restek, USA or equivalent);
температура колонки - градиентный режим: 40°С (5 мин)^10°С/мин^15О°С (0 мин)^25°С/мин^200°С (6 мин);column temperature - gradient mode: 40°C (5 min)^10°C/min^150°C (0 min)^25°C/min^200°C (6 min);
температура инжектора - 200°C;injector temperature - 200°C;
детектор - пламенно-ионизационный (ПИД);detector - flame ionization (FID);
температура детектора - 230°C;detector temperature - 230°C;
скорость подачи воздуха для ПИД - 300 мл/мин*;air supply rate for FID - 300 ml/min*;
скорость подачи водорода для ПИД - 30 мл/мин*;hydrogen supply rate for FID - 30 ml/min*;
газ-носитель - гелий;carrier gas - helium;
линейная скорость газа-носителя - 30 см/с;linear velocity of the carrier gas - 30 cm/s;
деление потока - 1:10;flow division - 1:10;
обдув септы - 3 мл/мин;septum blowing - 3 ml/min;
время хроматографирования - 24,0 мин.chromatography time - 24.0 min.
Пример 6. Получение готового лекарственного средства в форме таблеток, покрытых пленочной оболочкой на основе кристаллического осимертиниба мезилата, 40 мг.Example 6. Obtaining a finished drug in the form of film-coated tablets based on crystalline osimertinib mesylate, 40 mg.
Отвешивают на весах и развешивают в индивидуальные маркированные пакеты:Weighed on scales and hung in individual labeled bags:
кристаллический осимертиниба мезилат по примерам 2, 3 a, 4 - 95,4 г (в пересчете на осимертиниб 80,0 г);crystalline osimertinib mesilate according to examples 2, 3 a, 4 - 95.4 g (in terms of osimertinib 80.0 g);
маннитол (Parteck M 200, производства Merck, Германия) - 294,0 г; микрокристаллическая целлюлоза (VIVAPUR 101, производства JRS PHARMA, Германия) - 75,0 г;mannitol (Parteck M 200, manufactured by Merck, Germany) - 294.0 g; microcrystalline cellulose (VIVAPUR 101, manufactured by JRS PHARMA, Germany) - 75.0 g;
гипролоза с низкой степенью замещения (Methogel K100 Premium LVCR Hydroxypropyl Methylcellulose, Dow Chemical Company, США) -25,0 г;hyprolose with a low degree of substitution (Methogel K100 Premium LVCR Hydroxypropyl Methylcellulose, Dow Chemical Company, USA) - 25.0 g;
натрия стеарилфумарат (PRUV ®, JRS PHARMA GmbH & Co, Финляндия) - 10,0 г.sodium stearyl fumarate (PRUV ®, JRS PHARMA GmbH & Co, Finland) - 10.0 g.
Оболочка таблетки: поливиниловый спирт - 10,0 г; титана диоксид - 5,96 г; макрогол 3350 - 5,06 г; тальк - 3,70 г; краситель железа оксид желтый, краситель железа оксид красный, краситель оксида железа черный.Tablet shell: polyvinyl alcohol - 10.0 g; titanium dioxide - 5.96 g; macrogol 3350 - 5.06 g; talc - 3.70 g; iron oxide yellow, iron oxide red, iron oxide black.
В смеситель загружают осимертиниба мезилат, маннитол, микрокристаллическую целлюлозу, гипролозу с низкой степенью замещения и перемешивают в течение 20 мин при скорости 20±1 об/мин. Затем добавляют натрия стеарилфумарат и перемешивают в течение 10 мин со скоростью 20±1 об/мин. Полученную смесь загружают в роликовый компактор, гранулируют, затем просеивают на ситах и перемешивают в течение 10 мин. В смеситель добавляют полученные сухие гранулы и натрия стеарилфумарат, перемешивают дополнительно. Полученную массу для таблетирования выгружают в сборник для таблет-массы. Процесс таблетирования осуществляют на роторном таблет-прессе с обеспыливателем.Osimertinib mesylate, mannitol, microcrystalline cellulose, low-substituted hyprolose are loaded into the mixer and mixed for 20 minutes at a speed of 20±1 rpm. Then add sodium stearyl fumarate and mix for 10 min at a speed of 20±1 rpm. The resulting mixture is loaded into a roller compactor, granulated, then sieved on sieves and mixed for 10 minutes. The obtained dry granules and sodium stearyl fumarate are added to the mixer, mixed additionally. The resulting mass for tableting is discharged into a collector for tablet-mass. The tableting process is carried out on a rotary tablet press with a deduster.
Готовят водную суспензию для покрытия таблеток оболочкой из компонентов - поливиниловый спирт, диоксид титана, макрогол, тальк, краситель оксид железа желтый, краситель оксид железа красный, краситель оксид железа черный. Покрытие таблеток-ядер пленочной оболочкой проводят в установке для тонкослойного покрытия. Процесс нанесения суспензии продолжают до тех пор, пока не будет достигнута требуемая средняя масса таблетки - 262 мг ±5%An aqueous suspension is prepared for coating tablets with a shell of components - polyvinyl alcohol, titanium dioxide, macrogol, talc, yellow iron oxide dye, red iron oxide dye, black iron oxide dye. Coating of tablet cores with a film coating is carried out in a thin-layer coating plant. The process of applying the suspension is continued until the required average tablet weight is reached - 262 mg ± 5%
Пример 7. Исследование фазовой стабильности образцов δ-кристаллического осимертиниба мезилата.Example 7 Study of the phase stability of samples of δ-crystalline osimertinib mesylate.
Стабильность образцов осимертиниба мезилата, полученных по примерам 2, 3a и 3b была подтверждена отсутствием смещения за пределами доверительного интервала ±0,2° или возникновения дополнительных пиков в спектре порошковой рентгеновской дифракции после 12 месяцев хранения при температуре 25±2°C и относительной влажности 60±5%.The stability of the samples of osimertinib mesylate obtained according to examples 2, 3a and 3b was confirmed by the absence of a shift outside the ±0.2° confidence interval or the appearance of additional peaks in the powder X-ray diffraction spectrum after 12 months of storage at a temperature of 25±2°C and a relative humidity of 60 ±5%.
- 6 040996- 6 040996
Пример 8. Испытания стабильности препарата, содержащего δ-кристаллический осимертиниба мезилат, 80 мг.Example 8 Stability testing of a preparation containing δ-crystalline osimertinib mesylate, 80 mg.
Ускоренные испытания стабильности препарата проводились в течение 12 месяцев при температуре 40±2°C и относительной влажности 75±5%. На основании результатов изучения стабильности подтвержден срок годности лекарственного препарата в течение, как минимум, 24 месяцев.Accelerated drug stability tests were carried out for 12 months at 40±2°C and 75±5% relative humidity. Based on the results of the stability study, the shelf life of the medicinal product is confirmed for at least 24 months.
Таблица 2. Данные о стабильности лекарственного препарата, содержащего 80 мг кристаллического осимертиниба мезилата по примеру 2Table 2. Stability data for a medicinal product containing 80 mg of crystalline osimertinib mesylate according to example 2
Таблица 3. Данные о стабильности лекарственного препарата, содержащего 80 мг кристаллического осимертиниба мезилата по примеру 3 aTable 3. Stability data for a medicinal product containing 80 mg of crystalline osimertinib mesylate according to example 3 a
Таблица 4. Данные о стабильности лекарственного препарата, содержащего 80 мг кристаллического осимертиниба мезилата по примеру 3bTable 4. Stability data for a medicinal product containing 80 mg of crystalline osimertinib mesylate according to example 3b
Пример 9. Исследование фармакокинетики кристаллического осимертиниба мезилата in vivo у крыс.Example 9 Pharmacokinetic study of crystalline osimertinib mesylate in vivo in rats.
Крысы-самцы Хан-Вистар весом 180-200 г содержались в стандартных лабораторных условиях при температуре 22±3°С и относительной влажности 45±5%. Животные имели свободный доступ к еде и воде. Крысы были разделены на 3 группы по 12 особей в каждой. Первая группа получала δкристаллический осимертиниба мезилат по примеру 2, вторая группа получала δ-кристаллический осимертиниба мезилат по примеру 3 a, третья группа - осимертиниба мезилат известной кристаллической формы В по примеру 4.Khan Wistar male rats weighing 180-200 g were kept under standard laboratory conditions at a temperature of 22±3°C and a relative humidity of 45±5%. The animals had free access to food and water. The rats were divided into 3 groups of 12 animals each. The first group received δ-crystalline osimertinib mesylate according to example 2, the second group received δ-crystalline osimertinib mesylate according to example 3a, the third group received osimertinib mesylate of known crystalline form B according to example 4.
- 7 040996- 7 040996
Образцы крови отбирались через катетер в яремной вене (200 мкл) через 0, 0,083 (только для внутривенного введения), 0,25; 0,5; 1; 2; 4; 8; 12; 24; 48; 72 и 96 ч после введения препарата и помещались в капилляры с гепарином. Плазма центрифугировалась при комнатной температуре, затем хранилась при температуре -80°C. Образцы плазмы анализировались при помощи ВЭЖХ для определения концентрации осимертиниба.Blood samples were taken through a catheter in the jugular vein (200 μl) through 0, 0.083 (only for intravenous administration), 0.25; 0.5; 1; 2; 4; 8; 12; 24; 48; 72 and 96 hours after the administration of the drug and placed in capillaries with heparin. Plasma was centrifuged at room temperature, then stored at -80°C. Plasma samples were analyzed by HPLC to determine the concentration of osimertinib.
Осимертиниба мезилат вводился однократно перорально через желудочно-кишечный зонд в дозировке 10 мг/кг в виде суспензии в 0,5% растворе гидроксипропилметилцеллюлозы. Для сравнения осимертиниба мезилат вводился внутривенно в дозировке 2 мг/кг в виде водного раствора с добавлением нитратного буфера. Для внутривенного введения были получены следующие фармакокинетические параметры: Tmax=0,0083 ч; AUC(0 >z ,= 1360 нмоль*ч/л.Osimertinib mesylate was administered once orally via a gastrointestinal tube at a dosage of 10 mg/kg as a suspension in a 0.5% solution of hydroxypropyl methylcellulose. For comparison, osimertinib mesylate was administered intravenously at a dose of 2 mg/kg as an aqueous solution with the addition of a nitrate buffer. For intravenous administration, the following pharmacokinetic parameters were obtained: Tmax =0.0083 h; AUC(0>z ,= 1360 nmol * h / l.
Таблица 5. Данные фармакокинетики кристаллического осимертиниба мезилата in vivo у крыс*Table 5. Pharmacokinetic data of crystalline osimertinib mesylate in vivo in rats*
Биодоступность = (~0х !θθ %’ где AUCx - площадь под кривой концентрация - время после перорального введения;Bioavailability = (~0x !θθ %' where AUCx is the area under the concentration-time curve after oral administration;
АиСв/в - площадь под кривой концентрация - время после внутривенного введения;АиСin / in - area under the curve concentration - time after intravenous administration;
Dx - дозировка препарата для перорального введения;Dx - dosage of the drug for oral administration;
Dв/в - дозировка препарата для внутривенного введения.Din / in - the dosage of the drug for intravenous administration.
* Различия можно считать статистически достоверными (р<0,05).* Differences can be considered statistically significant (p<0.05).
Пример 10. Исследование терапевтической эффективности кристаллического осимертиниба мезилата.Example 10 Therapeutic efficacy study of crystalline osimertinib mesylate.
Для исследования терапевтической эффективности кристаллического осимертиниба мезилата использовались иммунодефицитные голые мыши в возрасте 6 недель. Животным в левый бок подкожно вводилось 1х107 клеток немелкоклеточного рака легкого H2073-SVD в виде суспензии в 100 мкл Матригеля. Размер опухоли измерялся дважды в неделю с помощью штангенциркуля и рассчитывался по формуле (LxD2)/2, где L - самый большой диаметр опухоли (см), a D - самый короткий диаметр (см).Immunocompromised nude mice at 6 weeks of age were used to study the therapeutic efficacy of crystalline osimertinib mesylate. Animals in the left side were subcutaneously injected with 1x107 cells of non-small cell lung cancer H2073-SVD in the form of a suspension in 100 μl of Matrigel. Tumor size was measured twice a week with a caliper and calculated as (LxD2 )/2 where L is the largest tumor diameter (cm) and D is the shortest diameter (cm).
Мыши были разделены на 4 группы, по 12 особей в каждой. Первая группа получала лечение δкристаллическим осимертинибом мезилатом по примеру 2; вторая группа - δ-кристаллическим осимертинибом мезилатом по примеру 3a; третья -осимертинибом мезилатом известной кристаллической формы В по примеру 4; четвертая, контрольная группа, получала раствор без активного ингредиента. Лечение начинали, когда средний объем опухоли достигал 0,150 см3, и продолжали в течение 14 дней. Осимертиниба мезилат вводился перорально через желудочно-кишечный зонд в дозировке 25 мг/кг в виде суспензии в 0,5% водном растворе гидроксипропилметилцеллюлозы. Наибольшее подавление опухолевого роста наблюдалось в группах 1 и 2, гделечение проводилось δ-кристаллическим осимертинибом мезилатом по примерам 2 и 3a (см. фиг. 8). Потеря в массе животных во всех случаях составила не более 10%.The mice were divided into 4 groups, 12 animals in each. The first group received treatment with δcrystalline osimertinib mesylate as in Example 2; the second group - δ-crystalline osimertinib mesylate according to example 3a; the third is osimertinib mesylate known crystal form B according to example 4; the fourth, the control group, received a solution without the active ingredient. Treatment was started when the mean tumor volume reached 0.150 cm3 and continued for 14 days. Osimertinib mesylate was administered orally via a gastrointestinal tube at a dosage of 25 mg/kg as a suspension in a 0.5% aqueous solution of hydroxypropyl methylcellulose. The greatest suppression of tumor growth was observed in groups 1 and 2, where the treatment was carried out with δ-crystalline osimertinib mesylate according to examples 2 and 3a (see Fig. 8). The weight loss of animals in all cases was no more than 10%.
--
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA040996B1true EA040996B1 (en) | 2022-08-29 |
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AU2011213431B2 (en) | Polymorphs of dasatinib, preparation methods and pharmaceutical compositions thereof | |
| JP6211072B2 (en) | Multi-component crystals comprising dasatinib and a selected co-crystal former | |
| RU2686722C1 (en) | New crystals of uracil compound | |
| HK1220966A1 (en) | Solid forms of bendamustine hydrochloride | |
| CN101146801A (en) | Novel salts and polymorphs of DPP-IV inhibitors | |
| CN107531678B (en) | EGFR inhibitor and pharmaceutically acceptable salts and polymorphs thereof and uses thereof | |
| JP6717947B2 (en) | Crystals of quinazoline derivative and preparation method thereof | |
| CN112142679A (en) | Gefitinib and vanillic acid eutectic methanol solvate and preparation method thereof | |
| CN106458857A (en) | Crystalline free acid, hemicalcium salt and alfa-phenylethylamine salt of ahu-377 as well as preparation method therefor and application thereof | |
| KR20240000540A (en) | (S)-N-(3-(2-(((R)-1-hydroxypropan-2-yl)amino)-6-morpholinopyridin-4-yl)-4-methylphenyl)-3- Solid state forms of (2,2,2-trifluoroethyl)pyrrolidine-1-carboxamide and salts thereof | |
| EP4438613A1 (en) | Mono-p-toluenesulfonate of axl kinase inhibitor and crystal form thereof | |
| TW202014412A (en) | Solid forms of cerdulatinib | |
| EP3315493B1 (en) | Phenyl amino pyrimidine compound or polymorph of salt thereof | |
| CN111527089B (en) | Novel crystal form of Acaraburtinib and preparation method and application thereof | |
| EA040996B1 (en) | δ-CRYSTAL FORM OF OSIMERTINIB MESYLATE, METHOD FOR ITS OBTAINING (VERSIONS) AND APPLICATION FOR THE TREATMENT OF ONCOLOGICAL DISEASES | |
| TW202124373A (en) | Crystals of 1,3,5-triazine derivative or a solvate thereof, and processes for producing the same | |
| CN104045598B (en) | Thiourea compounds containing arylamine structure, and preparation method and application thereof | |
| CN110128359B (en) | Crystal of uric acid transporter 1 inhibitor and preparation method and application thereof | |
| EP4631937A1 (en) | Crystalline form or amorphous form of oxoisoindole-5-formamide compound or salt and solvate thereof | |
| RU2684278C1 (en) | Pyridilamine fumarate and its crystals | |
| US20240270733A1 (en) | Hydrate form of lazertinib mesylate, preparation method thereof and use thereof | |
| WO2019105359A1 (en) | Crystal form of acalabrutinib, preparation method therefor and application thereof | |
| EA047824B1 (en) | CRYSTALLINE FORM OF N-(4-BROMO-2-FLUOROPHENYL)-6-METHOXY-7-[(1-METHYL-4-PIPERIDINYL)METHOXY]-4-QUINAZOLINAMINE, METHOD FOR ITS PRODUCTION (VARIANTS) AND PHARMACEUTICAL COMPOSITION FOR THE TREATMENT OF ONCOLOGICAL DISEASES | |
| CN111825689B (en) | Crystal form of dihydropyrazolone compound and preparation method thereof | |
| TW202333694A (en) | Crystal form of fused ring derivative and preparation method and application thereof |