BR9914772A - Set of genetic elements, vector, host cell, set for the production of a nucleic acid sequence, method for in vivo or in vitro production of a nucleic acid sequence, cdna transcription, inhibitor nucleic acid molecule, mrna transcription, heteroduplex molecule and pharmaceutical composition - Google Patents

Abstract

Translated fromPortuguese

"CONJUNTO DE ELEMENTOS GENéTICOS, VETOR, CéLULAHOSPEDEIRA, CONJUNTO PARA A PRODUçãO DE UMASEQUêNCIA DE áCIDO NUCLéICO, MéTODO PARA APRODUçãO IN VIVO OU IN VITRO DE UMA SEQUêNCIA DEáCIDO NUCLéICO, TRANSCRIçãO DE CDNA, MOLéCULA DEáCIDO NUCLéICO INIBIDOR, TRANSCRIçãO DE MRNA,MOLéCULA HETERODUPLEX E COMPOSIçãOFARMACêUTICA". A presente invenção se refere a métodos ecomposições para a produção de cDNA de cordão único(ss-cDNA) com um sistema à base de vetores era célulaseucarióticas. O vetor contem todas as instruções de sinalização efunções enzimáticas para permitir à célula hospedeira produzir oss-cDNA codificando uma seq³ência de ácido nucléico desejada(uma "seq³ência de interesse"). Estão descritos os componentesincluídos no vetor para a sintetização do ss-cDNA in vivo. Osmesmos incluem (1) uma gene de transcriptase reversa; (2) umelemento genético o qual fornece o templato para a seq³ência deinteresse ssDNA desejada; e (3) um segundo elemento genéticolocalizado próximo ao elemento genético codificando a seq³ênciade interesse o qual fornece o local de ligação prímero para atranscrição reversa pela molécula de transcriptase reversa. O vetortambém contem promotor(es)/ reforçador(es) apropriados. Tambémé descrito aqui um método para a construção de uma vetorincluindo estes componentes."SET OF GENETIC ELEMENTS, VECTOR, PHONE CELLS, SET FOR THE PRODUCTION OF A NUCLEIC ACID HUMIDITY, METHOD FOR IN VIVO OR IN VITRO NUCLEIC ACID, KNOWLEDGE, KNOWLEDGE, KNOWLEDGE, KNOWLEDGE TRANSACTION, PHARMACEUTICAL COMPOSITION ". The present invention relates to methods and compositions for the production of single-stranded cDNA (ss-cDNA) with a cell-based eukaryotic vector system. The vector contains all signaling instructions and enzymatic functions to allow the host cell to produce oss-cDNA encoding a desired nucleic acid sequence (a "sequence of interest"). The components included in the vector for the synthesis of ss-cDNA in vivo are described. Osmesms include (1) a reverse transcriptase gene; (2) a genetic element which provides the template for the desired ssDNA interest sequence; and (3) a second genetic element located next to the genetic element encoding the sequence of interest which provides the primary binding site for reverse transcription by the reverse transcriptase molecule. The vector also contains appropriate promoter (s) / enhancer (s). Also described here is a method for constructing a vector including these components.