Glukoneogenese, uttale "glukoneogenˈese", "nydannelse av glukose", er enstoffskifteprosess derglukose blir dannet fra andre stoffer ennkarbohydrater.Denne prosessen er svært energikrevende og brukes derfor kun i "nødsituasjoner" som sult og faste eller under ekstrem fysisk aktivitet.
Vanligvis fremskaffes den glukosen som trengs, ved nedbryting av karbohydrater eller ved å hente glukosen fra kroppensglykogenlager viaglykogenolyse.
Hvis man har et kosthold med lavt innhold av karbohydrater (såkalt lavkarbokosthold) vil glukoneogenese være kroppens "vanlige" måte å fremskaffe den glukosen noen av kroppens organer er avhengig av (bl.a. hjernen). F.eks. masaier og inuitter som har et tradisjonelt kosthold, er mer eller mindre permanent iketose hele livet. Glukoneogenese er den eneste måten de kan skaffe seg den glukosen kroppen trenger.