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En pratique :Quelles sources sont attendues ?Comment ajouter mes sources ?Lesbactéries àGram positif sont mises en évidence par une technique decoloration appeléecoloration de Gram. Cette technique de coloration, qui permet de classifier les bactéries dans deux catégories générales, repose sur les caractéristiquesmembranaires et deparoi de la bactérie. Les bactéries à Gram positif apparaissent alors mauves aumicroscope. La coloration au Gram est un facteur déterminant dans lataxonomie (classification) bactérienne.
Après fixation desbactéries sur une lame (deux méthodes possibles, par fixation à l'éthanol à 90° ou par passage de la lame dans la flamme) :
Les bactéries Gram positif ont (sauf exception) une structureunimembranée qui s'organise en trois grandes parties (de l'extérieur vers l'intérieur) :
La couche depeptidoglycane des bactéries à Gram positif est très épaisse contrairement à celle des bactéries àGram négatif. Sa composition varie très légèrement en fonction du genre, voire de l’espèce, de la bactérie concernée. Elle est principalement formée de plusieurs couches de polymère deN-acétyl-glucosamine (NAG) et d'acide N-acétylmuramique (NAM) en série alternée. Le peptidoglycane des Gram positif est traversé latéralement par de grandes chaînes polymériques qui le relie à la membrane plasmique : les acides lipotéichoïques. D’autres chaînes, telles les acides téichoïques, sont contenues dans le peptidoglycane et assurent sa stabilité.
L'espace périplasmique, beaucoup plus étroit que chez lesGram négatif, est un espace de stockage d'enzymes, denutriments, deprotéines, d’ions... Il a beaucoup d'autres fonctions notamment dans certaines étapes de lasynthèse de protéine et dans lemétabolisme. Il se situe entre la couche depeptidoglycane et la membrane plasmique.
La membrane possède des protéines poreuses aboutissant dans l'espace périplasmique (synthèse de protéine). La membrane plasmique contient de nombreux autres complexes protéiques d'une importance vitale pour la bactérie (comme l'ATP synthase) qui ont des rôles prépondérants dans le métabolisme bactérien.
Les bactéries Gram positif sont pour la plupart des germes non exigeants, c'est-à-dire qu'ils se cultivent facilement dans les milieux de base. La plupart descoques sont des Gram positif mais de nombreuxbacilles sont aussi des Gram positif.
Malgré l'absence de paroi depeptidoglycane, lesmycoplasmes appartiennent au groupe des Gram+. Ce groupe bactérien sera par conséquent coloré comme lesGram-.
La discrimination entre les bactéries à Gram positif se fait par la recherche de lacatalase.
Sur une lame microscopique propre, déposer une goutte d'eau oxygénée (ouperoxyde d'hydrogène H2O2).Prélever sur un milieugélosé, la colonie à tester au moyen d'unepipette Pasteur stérile ou d'un ensemenceur métallique (attention le fer peut donner aussi une catalase positive) et déposer la colonie dans la goutte.
Si on observe un dégagement gazeux (dioxygène), on dit que le résultat est positif, la souche est catalase +.Si on n'observe aucun dégagement gazeux, on dit que le résultat est négatif, la souche est catalase -.
