EcoRI es unaenzima de restricción (número CAS80498-17-5 ,EC3.1.21.4) producida por elmicroorganismoEscherichia coli que posee unadiana de restricción en elADN de cadena doble dependiente de una secuencia metilada (al estar la hebra metilada, no hay corte),palindrómica y asimétrica, sobre la cual suactividad catalíticahidrolasa genera extremos cohesivos. Es sin duda la enzima más conocida dentro del mundo académico. La forma correcta de nombrarla es"Eco erre 1". En adición es la más utilizada en laboratorios de universidades para beneficiar al estudiante y que aprenda como manejar con enzimas de restricción. Esta enzima realiza un tipo de corte cohesivo (los extremos quedan de forma escalonada).
La diana de restricción puede representarse según este diagrama: