| Aequorina, Renilla-luciferina 2-monooxigenasa | ||||
|---|---|---|---|---|
 Diagrama de la cinta de Aequorina con el grupo prostético coelenteracina en azul | ||||
| Estructuras disponibles | ||||
| PDB | ||||
| Identificadores | ||||
| Identificadores externos | ExPASy:NiceZime view KEGG:entrada en KEEG PRIAM:perfil PRIAM ExplorEnz:entrada en ExplorEnz MetaCyc:vía metabólica | |||
| Número EC | 1.13.12.5 | |||
| Número CAS | 346421-46-3 | |||
| Ortólogos | ||||
| Especies |
| |||
| PubMed (Búsqueda) |
| |||
| PMC (Búsqueda) |
| |||
LaAequorina (número EC 1.13.12.5) es unfotoproteína aislado demedusasluminiscentes como las especies del géneroAequorea (por ejemplo,Aequorea victoria) y una variedad de otros organismos marinos.[1] Fue aislado originalmente del celentérado porOsamu Shimomura.[2]
Aequorina se compone de dos unidades distintas, la apo-aequorinapoproteína, con un peso molecular aproximado de 22kDa, y lacoelenteracina que es unaluciferina que actúa degrupo prostético.
Los dos componentes estructurales de la aequorina, permiten funcionalidad. La proteína tiene tres centros de actividadMano EF que funcionan como sitios de unión de los iones Ca2+. Cuando Ca2+ocupa de esos sitios, la proteína sufre uncambio conformacional y se produce laoxidación de sugrupo prostético lacoelenteracina, en coelenteramida activada además deCO2. A medida que la activación de la coelenteramida disminuye al estado basal, se emite una luz azul (longitud de onda = 469 nm).
Dado que la luz emitida puede ser fácilmente detectada con unFotómetro, la aequorina se ha convertido en una herramienta útil en labiología molecular para la medición de Ca2+ intracelular. Las células cultivadas que expresan elgen para aequorina efectivamente pueden sintetizarla. Sin embargo, la expresión recombinante produce sólo la apoproteína, por lo tanto es necesario añadircoelenteracina en elmedio de cultivo de las células para obtener una proteína funcional y poder usar su emisión de luz azul para medir la concentración Ca2+. Coelenteracina es una molécula hidrófoba, y por lo tanto es fácilmente absorbida a través de lasparedes celulares de plantas y hongos, así como lamembrana plasmática deeucariotas superiores, haciendo a la aequorina adecuada como (reportero Ca2+) en las plantas, hongos y células demamíferos.[3][4]
La Aequorina tiene una serie de ventajas con respecto a otros indicadores de Ca2+: Tiene una baja tasa de escape de las células, carece de los fenómenos de compartimentación intracelular, y no interrumpe las funciones celulares o el desarrollo del embrión. Además, la luz emitida por la oxidación de coelenteracina no depende de una excitación óptica, por lo que los problemas de auto-fluorescencia se eliminan.[5] La principal limitación de la aequorina es que la coelenteracina utilizada como grupo prostético es consumida irreversiblemente para producir luz, por lo que la emisión continuada requiere un continuo suministro de coelenteracina al medio. Todo ello ha conducido a la evolución de otros sensores de calcio genéticamente codificados como el delcamaleón (sensorcalmodulina) basado en, desarrollado por Roger Tsien[6] y el sensor basado en la troponina, TN-XXL, desarrollado por Oliver Griesbeck.[7]
